CN106045706A - 一种地衣芽孢杆菌液体制剂及其制备方法 - Google Patents

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李宁凯
杨文龙
韩志远
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Abstract

一种地衣芽孢杆菌液体制剂的制备方法,地衣芽孢杆菌液体制剂包括保藏于中国农业微生物菌种保藏中心保藏编号分别为ACCC11080、ACCC10613、ACCC11106的三种地衣芽孢杆菌其中的一种或两种或三种发酵液、柠檬酸、氨基酸、苯甲酸钠、硼砂,制备方法是:取其中一种或两种或三种地衣芽孢杆菌发酵液,芽孢率≧90%,芽孢数为≧50亿/ml,加热至55‑65℃、保持20min,降至40℃时放罐;添加辅料,每1000L发酵液添加辅料的重量为:柠檬酸0.5‑1kg、氨基酸40‑80kg、苯甲酸钠5kg、硼砂1‑2kg,搅拌溶解后减压浓缩至50%;有益效果是:产品存放6个月以上,芽孢数损失15%以下,解决了地衣芽孢杆菌液体制剂容易胀瓶,发臭、芽孢损失快的问题。

Description

一种地衣芽孢杆菌液体制剂及其制备方法
技术领域
本发明涉及一种地衣芽孢杆菌液体制剂的制备方法,属于微生物领域。
背景技术
农用地衣芽孢杆菌制剂因为具有提高肥效、促吸收、免深耕、提高作物产量、改善作物品质、促进根系生长等功效,越来越受到用户的欢迎。本发明所涉及的三种地衣芽孢杆菌为保藏于中国农业微生物菌种保藏中心的三种地衣芽孢杆菌,其中,每种地衣芽孢杆菌的保藏编号分别为ACCC11080、ACCC10613、ACCC11106。
本发明所涉及的地衣芽孢杆菌体制剂中代谢产物较为丰富,更有利于植物吸收,但液体制剂会使地衣芽孢复苏萌发,储存运输期间容易产生大量气体,出现胀瓶现象并发臭,导致芽孢数减少45%以上,芽孢损失快无法满足商业需求。
发明内容
本发明的目的就是为了克服现有技术的不足,提供一种易保存的地衣芽孢杆菌液体制剂及其制备方法。
为实现上述目的,本发明采用以下技术方案:
一种地衣芽孢杆菌液体制剂,包括保藏于中国农业微生物菌种保藏中心保藏编号分别为ACCC11080、ACCC10613、ACCC11106的三种地衣芽孢杆菌其中的一种或两种或三种发酵液和柠檬酸、氨基酸、苯甲酸钠、硼砂,其特征是:每500L地衣芽孢杆菌液体制剂含柠檬酸1-2kg、氨基酸80-160kg、苯甲酸钠5-10kg、硼砂2-4kg,地衣芽孢杆菌芽孢率≧90%,芽孢数≧90亿/ml。
一种地衣芽孢杆菌液体制剂的制备方法,地衣芽孢杆菌液体制剂包括保藏于中国农业微生物菌种保藏中心保藏编号分别为ACCC11080、ACCC10613、ACCC11106的三种地衣芽孢杆菌其中的一种或两种或三种发酵液和柠檬酸、氨基酸、苯甲酸钠、硼砂,制备方法是:取其中一种或两种或三种地衣芽孢杆菌发酵液,芽孢率为≧90%,芽孢数≧50亿/ml,加热至55-65℃、保持20min,降至40℃时放罐;添加辅料,搅拌溶解后减压浓缩至50%,得地衣芽孢杆菌制剂;其特征是:所述添加辅料的组分和含量为:每1000L发酵液添加辅料的重量为:柠檬酸0.5-1kg、氨基酸40-80kg、苯甲酸钠5kg、硼砂1-2kg。
本发明与现有技术相比的有益效果是:有效期达6个月以上,芽孢数损失15%以下,解决了地衣芽孢杆菌液体制剂储存运输期间容易胀瓶,发臭、芽孢损失快的问题。
具体实施方式
下面结合具体的实施方式对本发明的技术方案做进一步的描述。
发明所涉及的地衣芽孢杆菌发酵液指的是保藏于中国农业微生物菌种保藏中心保藏编号分别为ACCC11080、ACCC10613、ACCC11106的三种地衣芽孢杆菌其中的一种地衣芽孢杆菌发酵液、或两种或三种混合的地衣芽孢杆菌发酵液。
以一种ACCC11080地衣芽孢杆菌发酵液(以下简称“发酵液”)为例(两种或三种混合的地衣芽孢杆菌液体制剂制备方法相同),传统工艺制备发酵液工艺是:取新鲜传统工艺制备的ACCC11080地衣芽孢杆菌发酵液,芽孢率为95%,芽孢数为63亿/ml;每1000L发酵液减压浓缩至500L,得地衣芽孢杆菌液体制剂。
传统工艺制得发酵液放置1天后,有轻微产气现象,看出装液体制剂的瓶子有轻微胀瓶现象;放置5天后,明显看出装液体制剂的瓶子底部与瓶盖暴起。打开瓶子,发出明显酸、臭味,用显微镜观察,发现芽孢有40-50%转化成菌体;放置8天后,观察菌体有30%死亡,视野内芽孢明显减少,利用平板检测法检测芽孢数为72亿/ml;放置1个月后,利用平板检测法检测芽孢数仅为56亿/ml,芽孢数损失45%以上。
实施例1
本发明一种地衣芽孢杆菌液体制剂及其制备方法,取新鲜传统工艺制备的ACCC11080地衣芽孢杆菌发酵液,芽孢率为95%,芽孢数为63亿/ml;加热至60℃、保持20min,降至40℃时放罐;添加辅料,每1000L发酵液添加辅料的重量为:柠檬酸1kg、氨基酸80kg、苯甲酸钠5kg、硼砂2kg,搅拌溶解后减压浓缩至500L,得地衣芽孢杆菌液体制剂。检测芽孢数为102亿/ml。
将本实施例制得的液体制剂放置1天后,未发现装液瓶有胀瓶现象;常温放置1个月后,未发现有涨瓶现象,打开瓶盖,没有闻到刺鼻酸臭味,显微镜观察芽孢率在90%左右;常温放置3个月后,未发现有涨瓶现象,打开瓶盖,没有闻到刺鼻酸臭味,显微镜观察芽孢率在90%左右,视野内芽孢数没有明显变化,利用平板检测法检测活菌数为91亿/ml,芽孢数损失13.3%;常温放置6个月,未发现有涨瓶现象,打开瓶盖,没有闻到刺鼻酸臭味,显微镜观察芽孢率在90%左右,视野内芽孢数没有明显变化,利用平板检测法检测活菌数为88亿/ml,芽孢数损失13.8%。
实施例2
本发明一种地衣芽孢杆菌液体制剂及其制备方法,取新鲜传统工艺制备的ACCC11080地衣芽孢杆菌发酵液,芽孢率为94%,芽孢数为60亿/ml,加热至60℃、保持20min,降至40℃时放罐;添加辅料,每1000L发酵液添加辅料的重量为:柠檬酸0.8kg、氨基酸60kg、苯甲酸钠5kg、硼砂1.5kg,搅拌溶解后降压浓缩至500L,得地衣芽孢杆菌液体制剂。检测芽孢数为104亿/ml。
将本实施例制得的液体制剂放置1天后,未发现装液瓶有胀瓶现象;常温放置1个月后,未发现有涨瓶现象,打开瓶盖,没有闻到刺鼻酸臭味,显微镜观察芽孢率在90%左右视野内,芽孢数没有明显变化,利用平板检测法检测活菌数为96亿/ml,芽孢数损失7.7%;常温放置3个月后,未发现有涨瓶现象,打开瓶盖,没有闻到刺鼻酸臭味,显微镜观察视野内芽孢数没有明显变化,利用平板检测法检测活菌数为90亿/ml,芽孢数损失13.5%。常温放置6个月后,未发现有涨瓶现象,打开瓶盖,没有闻到刺鼻酸臭味,显微镜观察视野内芽孢数没有明显变化,利用平板检测法检测活菌数为88亿/ml,芽孢数损失15.4%。
实施例3
本发明一种地衣芽孢杆菌液体制剂及其制备方法,取新鲜传统工艺制备的ACCC11080地衣芽孢杆菌发酵液,芽孢率为96%,芽孢数为67亿/ml,加热至55℃、保持20min,降至40℃时放罐;添加辅料,每1000L发酵液添加辅料的重量为:柠檬酸0.5kg、氨基酸40kg、苯甲酸钠5kg、硼砂1kg,搅拌溶解后减压浓缩至500L,得地衣芽孢杆菌液体制剂。检测芽孢数为122亿/ml。
将本实施例制得的液体制剂放置1天后,未发现装液瓶有胀瓶现象;放置1个月后,未发现有涨瓶现象,打开瓶盖,没有闻到刺鼻臭味,显微镜观察芽孢率在90%左右,利用平板检测法检测活菌数为114亿/ml,芽孢数损失6.7%;放置3个月后,未发现有涨瓶现象,打开瓶盖,没有闻到刺鼻臭味,显微镜视野内芽孢数没有明显变化,利用平板检测法检测活菌数为108亿/ml,芽孢数损失11.5%。放置6个月后,未发现有涨瓶现象,打开瓶盖,没有闻到刺鼻臭味,显微镜视野内芽孢数没有明显变化,利用平板检测法检测活菌数为107亿/ml,芽孢数损失12.3%。
本发明产品存放达6个月以上,芽孢数损失15%以下,解决了地衣芽孢杆菌液体制剂容易胀瓶,发臭、芽孢损失快的问题,与传统工艺相比,芽孢稳定性显著改善,显著提高了地衣芽孢杆菌液体制剂的产品质量。

Claims (2)

1.一种地衣芽孢杆菌液体制剂,包括保藏于中国农业微生物菌种保藏中心保藏编号分别为ACCC11080、ACCC10613、ACCC11106的三种地衣芽孢杆菌其中的一种或两种或三种发酵液和柠檬酸、氨基酸、苯甲酸钠、硼砂,其特征是:每500L地衣芽孢杆菌液体制剂含柠檬酸1-2kg、氨基酸80-160kg、苯甲酸钠5-10kg、硼砂2-4kg,地衣芽孢杆菌芽孢率≧90%,芽孢数≧90亿/ml。
2.一种地衣芽孢杆菌液体制剂的制备方法,地衣芽孢杆菌液体制剂包括保藏于中国农业微生物菌种保藏中心保藏编号分别为ACCC11080、ACCC10613、ACCC11106的三种地衣芽孢杆菌其中的一种或两种或三种发酵液和柠檬酸、氨基酸、苯甲酸钠、硼砂,制备方法是:取其中一种或两种或三种地衣芽孢杆菌发酵液,芽孢率为≧90%,芽孢数≧50亿/ml,加热至55-65℃、保持20min,降至40℃时放罐;添加辅料,搅拌溶解后减压浓缩至50%,得地衣芽孢杆菌制剂;其特征是:所述添加辅料的组分和含量为:每1000L发酵液添加辅料的重量为:柠檬酸0.5-1kg、氨基酸40-80kg、苯甲酸钠5kg、硼砂1-2kg。
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