KR101750288B1 - 귤응애 방제용 조성물 및 그 방제 방법 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 귤응애(Panonychus citri McGregor) 방제용 조성물 및 그 방제 방법을 개시한다. 구체적으로 귤응애에 대한 살충 효과를 가지는 생선 가공 부산물의 광합성세균, 젖산균 및 효모의 배양액을 이용한 진딧물 방제용 조성물 및 그 방제 방법을 개시한다.

Description

귤응애 방제용 조성물 및 그 방제 방법{Composition for Controlling Citrus Mite and Method for Controlling Citrus Mite Using the Same}
본 발명은 귤응애 방제용 조성물 및 그 방제 방법에 관한 것이다.
귤응애(Panonychus citri McGregor)는 전 세계적으로 귤나무속(Citrus 속) 과수의 중요한 해충으로 알려져 있으며(McMurtry, 1985), 높은 번식력을 갖고 있어 우리나라에서도 가장 문제시되는 감귤 해충으로 지목되고 있다.
이러한 귤응애 방제제로서는 유기합성 농약이 광범위하게 사용되어 왔고 유기합성 농약의 사용이 식량 증산에 획기적인 역할을 하였으나, 유기합성 농약의 광범위한 사용은 약제 저항성 해충의 출연을 야기시켜 왔고, 잔류 독성, 환경오염, 인축독성 등을 부작용을 야기시켜 왔다.
이러한 부작용을 줄이고, 최근 들어 빠르게 증가하는 저농약 농산물에 대한 소비자의 수요를 충족시키고자 친환경 방제법에 대한 연구가 활발해지고 있다.
본 발명은 귤응애의 친환경 방제법으로서 생선 가공 부산물의 발효물 등을 이용한 방제법을 개시한다.
본 발명의 목적은 생선 가공 부산물의 발효물 등을 이용한 귤응애 방제용 조성물을 제공하는 데 있다.
본 발명의 다른 목적은 상기 귤응애 방제용 조성물을 이용한 귤응애 방제 방법을 제공하는 데 있다.
본 발명자들은 아래의 실시예 및 실험예에서 확인되는 바와 같이, 생선 가공 부산물에 젖산균, 광합성 세균 및 효모를 접종하여 얻은 발효물이 귤응애에 대해 방제 효과를 보임을 확인하였고, 또 그 발효물을 키토산과 혼합하여 사용할 경우 그 방제 효과가 상승함을 확인하였으며, 특히 상기 발효물의 제조를 위해 생선 가공 부산물에 접종되는 젖산균, 광합성 세균 및 효모 배양액이 콜라겐 또는 콜라겐과 가바가 첨가된 배지에서 배양하여 얻어진 것을 사용할 경우 귤응애 방제 효과가 또한 상승함을 확인하였다.
본 발명은 이러한 실험 결과에 기초하여 제공되는 것으로서, 일 측면에 있어서 본 발명은 생선 가공 부산물에, 아래의 (a) 내지 (c) 단계를 포함하는 방법에 의하여 얻어진 광합성세균, 젖산균 및 효모의 배양액을 접종하고 배양하여 얻어진 생선 가공 부산물의 발효물을 유효성분으로 포함하는 귤응애 방제용 조성물로 파악할 수 있다.
(a) 콜라겐 입자가 첨가된 광합성세균, 젖산균 및 효모를 배양하기 위한 배지를 조제하는 단계,
(b) 상기 조제된 배지를 멸균하는 단계, 및
(c) 상기 멸균된 배지에 광합성세균, 젖산균 및 효모의 배양액을 접종하여 배양하는 단계
본 명세서에서, "생선"은 바다에 사는 척추동물 중 어류의 사체(死體)를 의미한다. 아래의 실시예를 고려할 때 구체적으로는 고등어과 어류, 정어리과 어류, 옥돔과의 어류, 복어과의 어류, 넙치과 어류, 대구과의 어류 등을 포함하는 의미이다.
또 본 명세서에서, "생선 가공 부산물"은 생선에서 어육을 채취한 후의 부산물로서 통상은 두부, 어피, 지느러미, 뼈, 난, 간 등의 내장 등을 포함하는 의미이다.
본 발명에 있어서, 상기 생선 가공 부산물에는 광합성세균, 젖산균 및 효모에 의한 발효의 효율을 높이기 위해서 당업계에 공지된 임의의 탄소원이 첨가될 수 있다. 그러한 탄소원으로서 통상은 올리고당, 유당, 포도당, 과당, 설탕, 이들의 혼합물 등이 사용될 것이다. 이러한 탄소원과은 의도한 발효 시간, 발효 정도 등을 고려하여 임의의 범위로 첨가될 수 있다. 통상 생선 가공 부산물의 분쇄물 100 중량부 기준 3 중량부 내지 30 중량부의 범위로 첨가될 것이다.
한편 광합성세균은 고등식물과 같이 빛 에너지를 이용하여 탄소 동화작용을 행하는 세균을 말한다. 이러한 광합성세균은 클로로비움속 세균(Chlorobium sp .), 크로마튬속 세균(Chromatium sp .), 로도스피릴륨속 세균(Rhodospirillum sp .), 로돕센도모나스속 세균(Rhodopsendomonas sp .), 로도박터속 세균(Rhodobacter sp .), 로돕슈도모나스속 세균(Rhodopseudomonas sp .) 등이 있다. 본 발명의 방법에 사용될 수 있는 광합성세균은 로돕슈도모나스속 세균(Rhodopseudomonas sp .)으로서 특히 로도슈도모나스 팔루스트리스(Rhodopseudomonas palustris)가 바람직하다.
젖산균이란 포도당 등 당류를 분해하여 젖산을 생성하는 미생물을 의미하는데, 본 명세서에서 젖산균은 락토바실루스속 젖산균(Lactobacillus sp .), 스트렙토코쿠스속 젖산균(Streptococcus sp .), 페디오코쿠스속 젖산균(Pediococcus sp .), 류코노스톡속 젖산균(Leuconostoc sp .) 및 비피도박테리움속 젖산균(Bifidobacterium sp .)을 포함하는 의미이며, 구체적으로는 락토바실루스 엑시도파일러스(Lactobacillus acidophilus), 락토바실루스 플란타룸(Lactobacillus plantarum), 락토바실루스 퍼멘텀(Lactobacillus fermentum), 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum), 비피도박테리움 비피덤(Bifidobacterium bifidum) 등을 포함하는 의미이다. 본 발명의 방법에는 이러한 젖산균 모두를 사용할 수 있다. 그러나 하시 <실시예>에서 락토바실루스 엑시도파일러스나 락토바실루스 플란타룸이 사용되었다는 점에서, 바람직하게는 락토바실러스속 젖산균을 사용하는 경우이며, 특히 락토바실루스 엑시도파일러스나 락토바실루스 플란타룸을 사용하는 경우이다.
또한 본 발명의 방법에 사용될 수 있는 효모도 사카로마이세스속 효모라면 어떠한 것이든 사용될 수 있다. 따라서 사카로마이세스 루시(Saccharomyces rouxii), 사카로마이세스 세레비시에(Saccharomyces cereviciae), 사카로마이세스 오비폴미스(Saccharomyces oviformis), 사카로마이세스 스테이네리(Saccharomyces steineri) 등이 모두 사용될 수 있다. 바람직하게는 하기 실시예에서 사용된 사카로마이세스 세레비시에를 사용하는 경우이다.
본 발명에 사용되는 젖산균, 효모 및 광합성세균은 생명공학 관련 회사에서 판매하는 것을 구입하여 사용하거나 국내외 미생물 기탁기관(생명공학연구원 유전자은행, 한국미생물보존센타, 한국농용미생물보존센터, ATCC(American Type Culture CollectionAsociacin))으로부터 분양받아 사용할 수 있다. 필요에 따라서 직접 균주를 분리하여 사용할 수도 있다.
본 발명에서 사용되는 콜라겐은 아래의 실험예에서 확인되듯이 그것이 배지에 첨가될 경우 귤응애에 대한 방제 효과를 높이는 작용을 한다. 본 발명자들은 이러한 콜라겐 첨가의 효과는 광합성세균, 젖산균 및 효모가 군집을 형성하는 데 매개체의 역할을 함으로써 결과적으로 광합성세균, 젖산균 및 효모 배양액의 특성을 변화시키기 때문인 것으로 보고 있다(즉 새로운 미생물 대사 물질이 배양액 중으로 유출되기 때문인 것으로 보고 있다).
콜라겐은 포유동물의 몸에서 연골(Cartilage), 힘줄(Tendeon) 등을 구성하는 단백질이며 또 세포 간 결합에 관여하는 단백질이다. 이러한 콜라겐은 광합성세균, 젖산균 및 효모를 배지에 접종하여 배양을 시킨 후에 배지에 첨가하여 사용하거나, 배지 조제 시에 첨가하여 사용할 수 있다. 배양시킨 후 첨가하는 경우 배양 시작 후 12시간 전후로 첨가하는 것이 바람직하다. 콜라겐의 첨가량은 배지 100 중량부 기준 0.3 중량부 내지 2.0 중량부의 범위로 첨가될 수 있다.
본 발명에 사용하기 위한 콜라겐은 분말 형태로 사용할 수 있으며, 또 콜라겐의 입자 크기(입도)는 배지에 균일하고 용이하게 혼합되도록 하기 위해서 작을수록 바람직할 수 있으며, 통상은 평균입도가 0.001㎛ 내지 0.0005mm의 범위의 콜라겐 분말을 사용하게 될 것이다.
본 발명에 있어서, 광합성세균, 젖산균 및/또는 효모를 배양하기 위한 배지는 위 미생물들의 배양에 적합한 에너지원, 탄소원, 질소원, 무기염류, 생장소(growth factor) 등을 포함하여 조제될 수 있다. 위 미생물들의 배양에 적합한 에너지원, 탄소원, 질소원, 무기염류, 생장소(growth factor) 등은 당업계에 공지되어 있는데, 구체적으로는 대한민국 특허출원 제19950031490호, 대한민국 특허출원 제1019910018012호, 대한민국 특허출원 제1019940001029호, 대한민국 특허출원 제019990050363호, 대한민국 특허출원 제1020060049936호, 문헌(김재범, 산업용 배지를 이용한 고핵산 효모의 고농도 세포 유가배양, 2001, 동의대 석사학위 논문) 등에 개시된 바를 참조할 수 있다. 이러한 배지는 우유, 감자, 혈액, 토마토 분쇄액, 쌀겨 분쇄물, 두유 등 천연물을 사용한 자연배지이거나, 영양 성분을 인위적으로 조성한 합성배지일 수 있으며, 고체배지이거나 액체배지일 수 있다. 바람직하게는 대량 배양을 위해서 그리고 경제적인 측면에서 천연배지를 사용하는 경우이며 또한 액체배지를 사용하는 경우이다.
한편 배양 조건의 경우 혐기적 조건이든 호기적 조건이든 무방하며, 암 배양 조건이든, 광 배양 조건이든 무방하며, 광합성세균, 젖산균 및 효모 모두 혐기적 조건과 호기적 조건 모두에서 배양이 가능하다. 광합성세균의 경우 암 배양 조건에서는 종속영양을 한다는 것이 당업계에 알려져 있다. 배양 온도의 경우 20℃ 내지 45℃ 범위 내에서 배양이 가능하며, 배지의 pH의 경우 4.0 내지 7.5 범위, 특히 6.0 내지 7.5의 범위로 조절되는 것이 바람직하다. 다만 젖산균의 증식 특성을 고려할 때 혐기적 조건이 바람직할 것이다.
본 발명에 있어서, 배양 방법은 회분식 배양이든, 연속식 배양이든 무방하다.
멸균 방법도 당업계에 공지된 임의의 멸균 방법을 사용할 수 있다. 특히 본 발명의 실시예에서 사용한 고압 증기 멸균, 자외선을 이용한 멸균 방법 등이 적합하다.
본 발명에 있어서, 가바(GABA, Gamma-amino butyris acid)를 배지에 첨가하여 배양하는 것이 바람직하다.
가바는 포유류의 뇌속에 존재하는 아미노산으로서 글루타메이트 디카르복실라아제(Glutamate decarboxylase)에 의해 글루타메이트로부터 생성되는 신경전달물질을 말한다. 가바는 혈관의 운동을 활성화시켜 혈압을 저하시키고(Kayahara H. and Sgiura D., Food & Development., 36(6):4-6, 2001), 뇌기능 개선작용을 하여 정신안정 및 학습능력을 증가시킨다고 알려져 있다(Ishikawa K. and Saito S., Psychopharmacology, 56:127-131, 1978; Akaga T., Food & development, 36(6):7-9, 2001).
가바를 첨가하여 배양할 경우 귤응애에 대한 방제 효과가 더 상승하는데, 본 발명자들은 이를 가바가 광합성세균, 젖산균 및 효모 사이의 군집 형성에 따른 스트레스를 완화시켜 결과적으로 배양액의 특성을 변화시키기 때문인 것으로 보고 있다(즉 광합성세균, 젖산균 및 효모 사이의 군집은 자연적인 상태에서 형성되지 않는 인위적인 것이므로 군집 형성에 따른 스트레스가 미생물 상호 간에 작용하여 자연 상태(군집 상태가 아닌 독립된 상태)로 되돌아 가려는 경향을 상쇄하기 때문인 것으로 보고 있다).
가바의 첨가는 배지의 조제 시에 이루어지거나 배양 후에 이루어질 수 있다. 배양 후에 이루어질 경우 광합성세균, 젖산균 및 효모를 배지에 접종하여 배양을 시작시킨 후 96시간 전후로 첨가하는 것이 바람직하다. 가바의 첨가량은 배지 100 중량부 기준 0.1 중량부 내지 1.5 중량부의 범위로 첨가될 수 있다.
본 발명의 귤응애 방제용 조성물은 바람직하게는 키토산(chitosan) 분말을 추가로 포함할 수 있다. 아래의 실시예 및 실험예는 키토산 분말이 첨가될 경우 귤응애에 대한 방제 효과가 뚜렷이 상승함을 보여준다.
키토산은 오징어의 연골, 게나 새우, 가재 등 갑각류의 외피에 들어있는 키틴을 탈-아세틸화시켜 얻어지는 물질로서, 단량체인 글루코사민이 β-1,4로 결합된 천연 양이온성 다당류이다. 키토산의 공식명칭은 poly β-(1-4)-2-amino-2-deoxy-D-glucan이다.
키토산은 물이나 알콜에서는 불용성이고 산에서는 가용성이기 때문에, 기토산을 산성 용매에 가용시켜 사용할 필요가 있다. 그러한 산성 용매로서는 황산, 염산, 질산, 인산, 설파민산, 과염소산, 크롬산, 아황산, 아질산 등의 무기산과 포름산, 아세트산, 프로피온산, 옥살산, 그리콜산, 주석산, 구연산, 젖산, 뷰티르산, 팔미트산, 타타르산 등의 유기산이 사용될 수 있으며, 바람직하게는 약산성이고 완충 작용이 높은 유기산을 사용할 수 있다. 이러한 산성 용매는 물과 혼합되어 희석 산의 형태로 사용될 수도 있다.
본 발명의 생선 가공 부산물의 발효물은 발효 미생물에 젖산균이 포함되어 있어 산성을 띠므로 산성 용매를 사용하지 않고도 키토산 분말을 첨가하여 사용할 수 있으나, 키토산 분말의 가용성을 높이기 위하여 키토산을 상기 산성용매, 특히 유기산에 용해시켜 사용하는 것이 바람직할 수 있다.
본 발명에 사용될 수 있는 키토산은 그 분자량에 특별한 제한이 없으며 평균분자량이 0.01 kDA 내지 3,000 kDA 범위의 키토산이 모두 사용될 수 있다. 키토산의 분자량의 조절은 키틴나아제에 의해 가능하다. 키틴나아제는 키토산 내에 있는 탈아세틸화되지 않은 부위에 작용하여 이를 분해시킴으로써 키토산을 저분자량화 하게 된다.
이러한 키토산은 생선 가공 부산물 100 중량부 기준 1 내지 10 중량부로 사용될 수 있다.
본 발명의 귤응애 방제용 조성물은 전술한 바의 생선 가공 부산물의 발효물만을 포함하거나 키토산 분말을 추가로 포함하여 제조될 수 있으며, 유제, 액제, 현탁제, 수화제, 유동제, 분제, 과립제, 정제, 유제, 에어졸, 훈증제 등으로 제형화될 수 있다.
본 발명의 귤응애 방제용 조성물은 해충 방제제에 통상 사용되는 담체를 추가로 포함하여 제조될 수 있는데, 그러한 담체로서는 고체 담체, 액체 담체, 가스상 담체, 계면활성제, 분산제 등을 들 수 있는데, 고체 담체로서는 탈크, 벤토나이트, 클레이, 카올린, 규조토, 질석, 탄산 칼슘 등이 예시될 수 있고, 액체 담체로서는 메탄올, n-헥산올, 에틸렌글리콜, 아세톤, 메틸에틸케톤, 시클로헥산온, n-헥
산, 케로신, 등유, 톨루엔, 크실렌, 메틸나프탈렌, 디에틸에테르, 디옥산, 테트라히드로퓨란, 에틸아세테이트, 아세토니트릴, 이소부티로니트릴, 디메틸포름아미드, 디메틸아세트아미드, 대두유, 면실유, 디메틸술폭시드, 물 등이 예시될 수 있으며, 가스상 담체로서는 LPG, 공기, 질소, 이산화탄소, 디메틸에테르 등이 예시될 수 있다.
유화, 분산, 전착 등을 위한 계면활성제 또는 분산제로는 알킬술폰산에스테르류, 알킬(아릴)술폰산염류, 폴리옥시알킬렌알킬(아릴)에테르류, 다가 알콜에스테르류, 리그닌술폰산염 등이 예시될 수 있다. 또 필요에 따라서는 카르복시메틸셀룰로오스, 아라비아검, 폴리에틸렌글리콜, 스테아린산 칼슘 등이 제제의 성상을 개선하는 위한 보조제로 사용될 수도 있다.
상기의 담체, 계면활성제, 분산제, 보조제 등은 제형의 성상, 해충 방제의 목적, 적용되는 대상 해충 등에 따라 각각 단독으로 또는 조합해서 본 발명의 귤응애 방제제 조성물에 포함될 수 있다.
한편 본 발명의 귤응애 방제용 조성물에서 유효성분인 생선 가공 부산물의 발효물을 그 조성물 전체 중량을 기준으로 그것의 제형, 방제 방법 등에 따라 0.1 내지 99.9 중량%의 범위 내에서 임의의 양으로 포함할 수 있다.
다른 측면에 있어서, 본 발명은 전술한 바의 귤응애 방제용 조성물을 이용한 귤응애의 방제 방법에 관한 것이다.
본 발명의 귤응애 방제 방법은 전술한 바의 귤응애 방제용 조성물을 귤응애과 접촉시키는 단계를 포함하여 이루어진다.
상기 접촉시키는 단계는 귤응애 방제용 조성물을 귤응애이 서식하는 식물에 직접 살포·도포하여 이루어지거나 식물의 서식 환경인 토양에 살포, 주입 또는 혼합하여 이루어질 있다. 바람직하게는 귤응애이 서식하는 식물에 직접 살포·도포하여 이루어지는 경우이다.
전술한 바와 같이, 본 발명에 따르면 생선 가공 부산물의 발효물 등을 이용한 친환경적인 귤응애 방제용 조성물과 그 조성물을 이용한 귤응애 방제 방법을 제공할 수 있다.
이하 본 발명을 실시예 및 실험예를 참조하여 설명한다. 그러나 본 발명의 범위가 이러한 실시예 및 실험예에 한정되는 것은 아니다.
< 실시예 > 귤응애 방제 조성물의 제조
<실시예 1> 귤응애 방제 조성물의 제조예 1
생선 가공 부산물(어육을 채취한 후의 부산물로서, 두부, 뼈, 어피, 지르러미, 내장, 일부 어육 등을 포함하고 있음; 고등어 가공 부산물, 정어리 가공 부산물, 옥돔 가공 부산물, 넙치 가공 부산물 및 명태 가공 부산물의 혼합물임)을 건조한 후 분쇄기로 분쇄하고, 그 분쇄물 10kg에 1.5배 중량의 물을 넣은 후 여기에 당밀 2kg을 첨가하여 혼합하였다. 이 혼합물에 종 배양한 젖산균, 효모 및 광합성 세균의 혼합 미생물 배양액을 5%(w/w) 되게 접종한 후 38℃에서 2주간 배양하여 액상의 발효물을 얻었다. 이 발효물을 그대로 귤응애 방제 조성물로 하여 아래의 실험에 사용하였다.
상기에서 생선 가공 부산물에 접종되는 젖산균, 효모 및 광합성 세균의 혼합 미생물 종 배양액은, 배지(물 95ℓ, 게 껍질 분쇄물 0.05kg, 다시마 분말 0.07kg, 생선 내장즙(생선 내장의 내용물을 제거하고 그 생선 내장을 열탕하여(물과 생선 내장의 중량비 2:1임) 얻은 것임) 0.1kg, 유박 분쇄물 0.02kg, 쌀겨 분쇄물 0.02kg, 당밀 3.24ℓ, 우유 1.5ℓ 및 콜라겐 분말 0.5kg의 혼합물임)에 젖산균(Lactobacillus plantarum), 효모(Saccaromyces cerevisiae) 및 광합성세균(Rhodopseudomonas palustris)를 각각 2%(v/v)가 되게 접종하고 배양 온도 30℃, pH 6.5 조건에서 16일 이상 배양하여 얻은 것이다.
<실시예 2> 귤응애 방제 조성물의 제조예 2
상기 <실시예 1>과 동일한 공정과 동일한 공정 조건으로 귤응애 방제 조성물을 제조하되, 생선 가공 부산물에 접종되는 젖산균, 효모 및 광합성 세균의 혼합 미생물 종 배양액은 젖산균을 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum) 대신에 락토바실러스 액시도필러스(Lactobacillus acidophilus)을 사용하여 얻은 것을 사용하였다.
<실시예 3> 귤응애 방제 조성물의 제조예 3
상기 <실시예 1>과 동일한 공정과 동일한 공정 조건으로 귤응애 방제 조성물을 제조하되, 생선 가공 부산물에 접종되는 젖산균, 효모 및 광합성 세균의 혼합 미생물 종 배양액은 배양을 시작한 후 4일이 지났을 때 가바(GABA, Gamma Amino Butyric Acid)를 0.3kg 첨가하고 배양하여 얻은 것을 사용하였다.
<실시예 4> 귤응애 방제 조성물의 제조예 4
상기 <실시예 2>와 동일한 공정과 동일한 공정 조건으로 귤응애 방제 조성물을 제조하되(즉 생선 가공 부산물에 접종되는 젖산균, 효모 및 광합성 세균의 혼합 미생물 종 배양액은 젖산균으로서 락토바실러스 액시도필러스(Lactobacillus acidophilus)을 사용하여 얻어진 것을 사용함), 생선 가공 부산물에 접종되는 젖산균, 효모 및 광합성 세균의 혼합 미생물 종 배양액은 배양을 시작한 후 4일이 지났을 때 가바(GABA, Gamma Amino Butyric Acid)를 0.3kg 첨가하고 배양하여 얻은 것을 사용하였다.
<실시예 5> 귤응애 방제 조성물의 제조예 5
상기 <실시예 1>에서 얻어진 생선 가공 부산물의 발효액과 키토산 용액을 1:6(키토산 용액 : 액상의 발효물)의 중량비로 혼합하여 응애 방제 조성물을 제조하였다.
상기 키토산 용액은 키토산(분자량 0.5 kDa 내지 30 kDa)을 15배 중량의 구연산에 용해시켜 얻은 것이다.
<실시예 6> 귤응애 방제 조성물의 제조예 6
상기 <실시예 2>에서 얻어진 생선 가공 부산물의 발효액과 키토산 용액을 1:6(키토산 용액 : 액상의 발효물)의 중량비로 혼합하여 응애 방제 조성물을 제조하였다.
<실시예 7> 귤응애 방제 조성물의 제조예 7
상기 <실시예 3>에서 얻어진 생선 가공 부산물의 발효액과 키토산 용액을 1:6(키토산 용액 : 액상의 발효물)의 중량비로 혼합하여 응애 방제 조성물을 제조하였다.
<실시예 8> 응애 방제 조성물의 제조예 8
상기 <실시예 4>에서 얻어진 생선 가공 부산물의 발효액과 키토산 용액을 1:6(키토산 용액 : 액상의 발효물)의 중량비로 혼합하여 응애 방제 조성물을 제조하였다.
< 실험예 > 귤응애에 대한 방제 효과 실험
<실험예 1> 귤응애에 대한 방제 효과 실험예 1
귤응애에 대한 방제 효과 실험은 3.0 ×3.0 cm의 크기로 세절한 감귤 잎에 귤응애 20 마리를 부드러운 붓으로 접종하고 상기 실시예의 각 방제 조성물을 분무 살포한 후 3일 후에 방제율을 아래의 식에 따라 계산하였다. 모든 실험은 3회 실시하였다.
비교예의 응애 방제제는 상기 <실시예 1>과 동일하게 생선 가공 부산물의 발효액을 이용하되, 생선 가공 부산물에 접종되는 광합성세균, 젖산균 및 효모의 종 배양액은 콜라겐이 첨가되지 아니한 배지를 이용하여 얻어진 것(비교예 1)과 상기 <실시예 5 내지 8>에서 사용된 키토산 용액을 사용하였다(비교예 2).
방제율(%) = (무처리구 생충수 - 처리구 생충수)/무처리구 생충수 × 100
결과를 아래의 [표 1]에 나타내었다.
방제율(%)
구분 방제율(%)
실시예 1 28.7±4.9
실시예 2 34.8±7.3
실시예 3 46.8±5.8
실시예 4 51.2±6.2
실시예 5 74.8±4.2
실시예 6 71.7±4.8
실시예 7 89.5±2.8
실시예 8 94.7±5.7
비교예 1 14.7±6.2
비교예 2 36.8±8.2
상기 [표 1]의 결과는 생선 가공 부산물의 발효액은 그것이 콜라겐이 첨가된 배지에서 얻어진 배양액을 접종하여 얻어진 경우(<실시예 1> 및 <실시예 2>)가 그렇지 않은 경우(<비교예 1>)에 비하여 귤응애 방제 활성이 뚜렷하게 높음을 보여준다. 특히 콜라겐 이외에 가바가 첨가되어 얻어진 배양액을 접종한 경우(<실시예 3> 및 <실시예 4>) 콜라겐만이 첨가된 배지에서 얻어진 배양액을 접종한 경우(<실시예 1> 및 <실시예 2>)보다 귤응애 방제 활성이 높았으며, 키토산을 함께 사용한 경우(<실시예 5> 내지 <실시예 8>) 귤응애 방제 활성이 뚜렷하게 상승하였다.
<실험예 2> 감귤 응애에 대한 방제 효과 실험예 2
감귤 응애에 방제 효과에 대한 현장 실험을 제주 서귀포 소재 노지 감귤 농장의 10년생 전후의 온주 밀감 조생종을 대상으로 실시하였다.
감귤 응애 발생 밀도가 엽당 2~4 마리일 때 감귤 나무 2주를 하나의 처리구로 하고, 약제 처리 전과 약제 처리 10일 경과 후에 임의의 30개 잎을 수거하여 육안으로 응애 성충수를 계수하여 아래의 식에 따라 생충율과 방제율을 계산하였다. 약제는 나무의 잎 전체에 충분히 묻도록 살포하였다.
실시예의 응애 방제제는 상기 <실시예 5> 내지 <실시예 8>에 얻어진 생선 가공 부산물의 발효물과 키토산 용액을 혼합한 것을 사용하였고, 비교예의 응애 방제제는 상기 <실시예 5> 내지 <실시예 8>에서 사용된 키토산 용액을 사용하였다(비교예 2).
생충율(%) = 시험 종료 후 생충수/시험 전 생충수 × 100
방제율(%) = (무처리구의 생충율 - 처리구의 생충율)/무처리구의 생충율 × 100
결과를 아래의 [표 2]에 나타내었다.
생충율(%)과 방제율(%)
구분 생충율(%) 방제율(%)
무처리구 196 -
실시예 1 86 56.12
실시예 2 92 53.06
실시예 3 52 73.47
실시예 4 48 75.51
비교예 2 118 39.7
상기 [표 2]의 결과에 있어서도 생선 가공 부산물의 발효물과 키토산 용액의 혼합물인 <실시예 5> 내지 <실시예 8>의 약제의 방제율이 키토산 용액인 비교예 약제의 방제율보다 현격히 높음을 보여준다.

Claims (7)

  1. 생선 가공 부산물에, 아래의 (a) 내지 (c) 단계를 포함하는 방법에 의하여 얻어진 광합성세균, 젖산균 및 효모의 배양액을 접종하고 배양하여 얻어진 생선 가공 부산물의 발효물과 키토산 분말을 유효성분으로 포함하되,
    (a) 콜라겐 입자가 첨가된 광합성세균, 젖산균 및 효모를 배양하기 위한 배지를 조제하는 단계,
    (b) 상기 조제된 배지를 멸균하는 단계, 및
    (c) 상기 멸균된 배지에 광합성세균, 젖산균 및 효모의 배양액을 접종하여 배양하는 단계,
    상기 광합성세균은 로도슈도모나스 팔루스트리스(Rhodopseudomonas palustris)이고,
    상기 젖산균은 락토바실루스 엑시도파일러스 또는 락토바실루스 플란타룸이고,
    상기 효모는 사카로마이세스 세레비시에(Saccharomyces cereviciae)이며,
    가바(GABA, Gamma Amino Butyric Acid)가 상기 (a) 단계의 배지에 첨가되거나 상기 (c) 단계의 배양 과정 중에 첨가되는 것을 특징으로 하는
    귤응애 방제용 조성물.
  2. 삭제
  3. 삭제
  4. 삭제
  5. 제1항에 있어서,
    상기 키토산 분말은 산성 용매에 용해된 형태인 것을 특징으로 하는 귤응애 방제용 조성물.
  6. 제1항에 있어서,
    상기 키토산 분말은 상기 생선 가공 부산물 100 중량부 기준 1 중량부 내지 10 중량부로 포함되는 것을 특징으로 하는 귤응애 방제용 조성물.
  7. 제1항, 제5항 및 제6항 중 어느 한 항 기재의 귤응애 방제용 조성물을 귤응애와 접촉시키는 단계를 포함하는 귤응애 방제 방법.
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