CN105994968B - 一种利用益生菌生产鱼粉的方法及制得的鱼粉 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及鱼粉技术领域，具体涉及一种利用益生菌生产鱼粉的方法及制得的鱼粉，该方法包括以下步骤：A、菌种制备：包括第一发酵菌液和第二发酵菌液的制备：将第一复合菌剂接种于第一液体培养基，培养后得第一发酵菌液；将由第二复合菌剂接种于第二液体培养基，培养后得第二发酵菌液；B、接种发酵：将鱼类原料粉碎后，加入第一发酵菌液，通入空气发酵后，加入第二发酵菌液，厌氧发酵后，干燥，制得鱼粉。本发明制得的鱼粉蛋白质消化率高，益生菌能抑制肠道中有害菌的繁殖，改善动物消化系统机能，增强免疫功能，降低发病率及死亡率；利用益生菌生产鱼粉的方法生产成本低，所需设备简单，易控制，生产过程中排出的臭气少，可减少对环境的污染。
Description
技术领域
本发明涉及鱼粉技术领域，具体涉及一种利用益生菌生产鱼粉的方法及制得的鱼粉。
背景技术
鱼粉是动物饲料中一种重要的优质蛋白源，富含维生素，矿物质和生长因子，在饲料等行业发挥着极为重要的作用。长期以来鱼粉成为水产饲料和畜禽类饲料中蛋白源、钙磷及能量物质的主要来源。但现有鱼粉的消化利用率相对较低，且在鱼粉生产过程中，常需要通过高温蒸煮等工艺，易感染杂菌，产生大量具有臭味的废气，对环境造成污染。因此，改善和提高鱼粉蛋白利用率和转化率，减少鱼粉生产过程中产生臭气对大气的危害具有十分重要的意义。
发明内容
本发明的目的是针对现有技术中的上述不足，提供一种利用益生菌生产鱼粉的方法，该方法可改善和提高鱼粉蛋白利用率和转化率，减少鱼粉生产过程中产生的污染物对环境的危害，制备的鱼粉营养丰富，易消化。
本发明的目的通过以下技术方案实现：
一种利用益生菌生产鱼粉的方法，包括以下步骤：
A、菌种制备：包括第一发酵菌液和第二发酵菌液的制备；
A1、将由枯草芽孢杆菌、啤酒酵母、放线菌和巴氏醋酸杆菌组合形成的第一复合菌剂接种于第一液体培养基，进行发酵培养，得到的混合液为第一发酵菌液；该混合液包括了液体培养基和发酵后的混合菌液；
A2、将由植物乳杆菌、沼泽红假单胞菌和啤酒酵母组合形成的第二复合益生菌剂接种于第二液体培养基，进行发酵培养，得到的混合液为第二发酵菌液；该混合液包括了液体培养基和发酵后的混合菌液；
B、接种发酵：将鱼类原料粉碎后，加入鱼类原料总重量15-20％的第一发酵菌液，在30-33℃温度下通入经过净化的空气，发酵22-24h后，加入鱼类原料总重量15-20％的第二发酵菌液，在30-33℃温度下厌氧发酵22-24h后，干燥，制得鱼粉。
本发明利用益生菌发酵鱼类原料生产鱼粉，通过将鱼类原料经过微生物发酵，制得的鱼粉，含有大量的益生菌，可以提高蛋白质的消化率；益生菌对发酵底物的降解作用以及在发酵过程产生的代谢产物，改善了鱼粉蛋白的品质；本发明中采用枯草芽孢杆菌、啤酒酵母、放线菌和巴氏醋酸杆菌组合的第一复合益生菌剂和由植物乳杆菌、沼泽红假单胞菌和啤酒酵母组合形成的第二复合益生菌剂与鱼粉分阶段混合发酵，分阶段发酵生产成本低，生产过程的排泄物少，可减少对环境的污染；第一发酵菌液可消耗氧气，创造缺氧的微环境，省去了连续充入氮气或惰性气体的环节，为第二发酵菌液的厌氧发酵创造了条件，各菌株协同作用，对底物利用率高，抑制有害微生物繁殖。
本发明直接将第一发酵菌液和第二发酵菌液分别加入到鱼类原料中，分段混合进行固体发酵；在进行鱼类原料的发酵之前，不需将第一发酵菌液和第二发酵菌液中的益生菌菌体从发酵菌液中分离出来后再添加于鱼类原料中，可减少了工序，同时鱼类原料和发酵菌液中的营养物质为益生菌的生长提供了良好的发酵条件，制得的鱼粉消化率高。
进一步地，所述步骤A1中，第一复合益生菌剂各组分重量份分别为：枯草芽孢杆菌15-25份、啤酒酵母10-20份、放线菌6-12份和巴氏醋酸杆菌5-10份。
进一步地，所述步骤A2中，第二复合益生菌剂各组分重量份分别为：植物乳杆菌15-25份、沼泽红假单胞菌10-15份和啤酒酵母5-10份、。
啤酒酵母为兼性厌氧型微生物，可利用光合菌合成的氨基酸、糖类及其它有机物质产生发酵力，合成促进细胞分裂的活性化物质，对于促进其它有效微生物如植物乳杆菌、放线菌增殖所需要的基质提供重要的给养保障。
枯草芽孢杆菌枯草可合成α-淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶等酶类以及合成维生素B1、B2、B6、烟酸等多种B族维生素，消耗肠道中的游离氧，造成低氧环境，促进有益厌氧菌生长放线菌，并产生乳酸等有机酸类。
沼泽红假单胞菌菌体营养丰富，蛋白质含量高达65％，且富含多种生物活性物质，适应性强，菌群的代谢物质可以被植物直接吸收，还可以成为其它微生物繁殖的养分，可促进其他有益微生物的增殖。
巴氏醋酸杆菌为好氧菌，化能无机营养，氧化氢、还原CO2生成乙酸，也可营化能有机营养，放线菌次级代谢产物丰富，抑制病原微生物，与其他益生菌相配合，防止杂菌污染，提高底物转化率。
植物乳杆菌可摄取光合细菌、酵母菌产生的糖类形成乳酸，乳酸具有很强的杀菌能力，能有效抑制有害微生物的活动和有机物的急剧腐败分解，植物乳杆菌乳酸菌能够分解在常态下不易分解的木质素和纤维素，并使有机物发酵分解，植物乳杆菌活菌数比较高，其产出的酸性物质能降解重金属；在繁殖过程中能产出特有的乳酸杆菌素，乳酸杆菌素作为生物型的防腐剂，植物乳杆菌在可以产生乳酸及乙酸等酸味小分子物质，这些小分子物质赋予产品特有的酸香味、色泽和口感等感官特征的改善和多样化，提高鱼粉对动物的适口性在益生菌混和发酵中，菌株间互利共栖，协同作用，能提高产率和菌体浓度；多菌株的产酶、产酸和产营养物质能力、对基质的分解能力等要显著优于单菌发酵，并可获得单菌发酵无法获得的产物，生长速度快，对底物利用率高，可多级转化，发酵后的微生物群体稳定，不易感染其他有害杂菌，具有省工节能，简化工艺、使用设备简单和易控制等优点。
进一步地，所述的一种利用益生菌生产鱼粉的方法，还包括步骤C、将鱼粉干燥后，添加鱼粉总重量0.04-0.06％的抗氧化剂，所述抗氧化剂由以下重量份的组分组成：乙氧基喹啉70-80份、没食子酸丙酯10-15份和柠檬酸12-16份。
乙氧基喹啉添加于鱼粉，可防止其中的维生素A、D、E等及脂肪氧化变质，并有一定的防霉作用。与常用的抗氧化剂BHT及BHA相比，没食子酸丙酯使用安全性高，而且抗氧化性更强。鱼机体内不饱和脂肪酸含量高，在金属离子的作用下易发生氧化还原反应，柠檬酸可与金属离子螯合，消除金属离子的不利影响，提高鱼粉的抗氧化能力。
本发明将抗氧化剂和没食子酸丙酯相配合，并添加柠檬酸作为增效剂，组成复合型抗氧化剂，其抗氧化效果优于一般的单一抗氧化剂，使用安全性高。在鱼粉的粉碎过程中再次加入复合抗氧化剂，可更好地起到减少鱼粉特别是其脂质氧化的作用，延长鱼粉的保质期，同时有助于复合抗氧化剂与鱼粉混合均匀。
进一步地，所述步骤A1中，第一液体培养基的制备方法包括如下步骤：取蛋白胨10-15g用500mL水溶化，分别加入牛肉膏10-14g、酵母浸膏10-14g、麦芽浸膏2-4g、葡萄糖6-8g、柠檬酸钠0.5-1.5g、磷酸二氢钾0.5-1.5g、氯化钙0.1-0.2、硫酸镁0.3-0.5g，硫酸锰0.2-0.3g，将上述原料混合均匀后加水至1L，待所有原料充分溶解后调pH值至6.5-7.0，于115-122℃温度下、0.15-0.25MPa压力下灭菌20-30min，冷却至20-30℃，得到的培养基为第一液体培养基。
进一步地，所述步骤A1中，第一复合益生菌剂培养的条件为：发酵温度为28-32℃，摇床转速为140-200r/min，通入空气进行发酵，测定第一发酵菌液中枯草芽孢杆菌的浓度为5×108-1×109/mL时，停止发酵。
进一步地，所述步骤A2中，第二液体培养基的制备方法包括如下步骤：取蛋白胨12-16g用500mL水溶解，分别加入牛肉膏11-15g、酵母浸膏11-15g、麦芽浸膏4-8g、葡萄糖6-8g、乙酸钠2-4g、柠檬酸铵0.5-1.5g、磷酸二氢钾0.3-1.0g、磷酸氢二钠0.3-1.0和硫酸镁0.3-0.5g将上述原料混合均匀后加水至1L，待所有原料充分溶解后调pH值至6.5-7.0，于115-122℃温度下、0.15-0.25MPa压力下进行灭菌20-30min，冷却至20-30℃，得到的培养基为第二液体培养基。
进一步地，所述步骤A2中，第二复合益生菌剂培养的条件为：发酵温度为30-33℃，摇床转速为80-120r/min，密闭发酵，测定第二发酵菌液中植物乳杆菌的浓度为5×106-1×107/mL时，停止发酵。
进一步地，所述步骤B中，鱼类原料粉碎后，还添加有占鱼类原料总重量1-1.5％的黄腐酸。黄腐酸添加于鱼粉中，可增加肌体免疫力，调整肠胃功能，抗肿瘤，具有止血、消炎及活血化淤作用，可使养殖动物食欲增加，加快体重增长，提高家禽类的产蛋率，减少病害的发生。
本发明还提供一种鱼粉，利用上述益生菌生产鱼粉的方法制得，鱼粉营养丰富，利用率高，可促进养殖动物的生长发育。
本发明的有益效果：本发明利用益生菌发酵鱼类原料生产鱼粉，鱼粉中含有大量的益生菌，可以提高蛋白质的消化率；发酵过程产生的代谢产物以及对发酵底物的降解作用，改善了鱼粉蛋白的品质；本发明中采用枯草芽孢杆菌、啤酒酵母、沼泽红假单胞菌、放线菌和巴氏醋酸杆菌枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌组合的第一复合益生菌剂和将由植物乳杆菌和啤酒酵母组合形成的第二复合益生菌剂分阶段混合发酵鱼粉，生产成本低，设备简单，易控制，生产过程中排出的臭气少，可减少对环境的污染；第一复合益生菌剂可消耗氧气，创造缺氧的微环境，省去了连续充入氮气或惰性气体的环节，为第二复合益生菌剂的厌氧发酵创造了条件，各菌株协同作用，互利共栖协同作用，对底物利用率高，发酵后的微生物群体稳定、可抑制有害微生物繁殖。
具体实施方式
结合以下实施例对本发明作进一步描述。
实施例1
本实施例中，利用益生菌生产鱼粉的方法，包括以下步骤：
A、菌种制备：包括第一发酵菌液和第二发酵菌液的制备；
A1、将由枯草芽孢杆菌、啤酒酵母、放线菌和巴氏醋酸杆菌组合形成的第一复合菌剂接种于第一液体培养基，进行发酵培养，得到的混合液为第一发酵菌液；
A2、将由植物乳杆菌、沼泽红假单胞菌和啤酒酵母组合形成的第二复合菌剂接种于第二液体培养基，进行发酵培养，得到的混合液为第二发酵菌液；
B、接种发酵：将鱼类原料粉碎后，加入鱼类原料总重量18％的第一发酵菌液，在30-33℃温度下通入经过净化的空气发酵23h后，加入鱼类原料总重量18％的第二发酵菌液，在30-33℃温度下厌氧发酵23h后，干燥，制得鱼粉。
进一步地，所述步骤A1中，第一复合益生菌剂各组分重量份分别为：枯草芽孢杆菌20份、啤酒酵母15份、放线菌8份和巴氏醋酸杆菌8份。
进一步地，所述步骤A2中，第二复合益生菌剂各组分重量份分别为：植物乳杆菌20份、啤酒酵母8份和沼泽红假单胞菌12份。
进一步地，所述的一种利用益生菌生产鱼粉的方法，还包括步骤C、将鱼粉干燥后，添加鱼粉总重量0.05％的抗氧化剂，所述抗氧化剂由以下重量份的组分组成：乙氧基喹啉75份、没食子酸丙酯12份和柠檬酸14份。
进一步地，所述步骤A1中，第一液体培养基的制备方法包括如下步骤：取蛋白胨12g用500mL水溶化，分别加入牛肉膏12g、酵母浸膏12g、麦芽浸膏3g、葡萄糖7g、柠檬酸钠1g、磷酸二氢钾1g、氯化钙0.15、硫酸镁0.4g，硫酸锰0.25g，将上述原料混合均匀后加水至1L，待所有原料充分溶解后调pH值至6.8，于121℃温度下、0.2MPa压力下灭菌25min，冷却至25℃，得到的培养基为第一液体培养基。
进一步地，所述步骤A1中，第一复合益生菌剂培养的条件为：发酵温度为30℃，摇床转速为180r/min，通入空气进行发酵，测定第一发酵菌液中枯草芽孢杆菌的浓度为5×108-1×109/mL时，停止发酵。
进一步地，所述步骤A2中，第二液体培养基的制备方法包括如下步骤：取蛋白胨14g用500mL水溶解，分别加入牛肉膏13g、酵母浸膏13g、麦芽浸膏6g、葡萄糖7g、乙酸钠3g、柠檬酸铵1g、磷酸二氢钾0.6g、磷酸氢二钠0.6和硫酸镁0.4g，将上述原料混合均匀后加水至1L，待所有原料充分溶解后调pH值至6.8，于121℃温度下、0.2MPa压力下进行灭菌25min，冷却至25℃，得到的培养基为第二液体培养基。
进一步地，所述步骤A2中，第二复合益生菌剂培养的条件为：发酵温度为30℃，摇床转速为100r/min，密闭发酵，测定第二发酵菌液中植物乳杆菌的浓度为5×106-1×107/mL时，停止发酵。
进一步地，所述步骤B中，鱼类原料粉碎后，还添加有占鱼类原料总重量1.2％的黄腐酸。
实施例2
本实施例中，利用益生菌生产鱼粉的方法，包括以下步骤：
A、菌种制备：包括第一发酵菌液和第二发酵菌液的制备；
A1、将由枯草芽孢杆菌、啤酒酵母、放线菌和巴氏醋酸杆菌组合形成的第一复合菌剂接种于第一液体培养基，进行发酵培养，得到的混合液为第一发酵菌液；
A2、将由植物乳杆菌、沼泽红假单胞菌和啤酒酵母组合形成的第二复合菌剂接种于第二液体培养基，进行发酵培养，得到的混合液为第二发酵菌液；
B、接种发酵：将鱼类原料粉碎后，加入鱼类原料总重量20％的第一发酵菌液，在33℃温度下通入经过净化的空气发酵24h后，加入鱼类原料总重量15％的第二发酵菌液，在30-33℃温度下厌氧发酵22h后，干燥，制得鱼粉。
进一步地，所述步骤A1中，第一复合益生菌剂各组分重量份分别为：枯草芽孢杆菌15份、啤酒酵母10份、放线菌6份和巴氏醋酸杆菌10份。
进一步地，所述步骤A2中，第二复合益生菌剂各组分重量份分别为：植物乳杆菌25份、啤酒酵母5份和沼泽红假单胞菌10份。
进一步地，所述的一种利用益生菌生产鱼粉的方法，还包括步骤C、将鱼粉干燥后，添加鱼粉总重量0.04％的抗氧化剂，所述抗氧化剂由以下重量份的组分组成：乙氧基喹啉70份、没食子酸丙酯15份和柠檬酸16份。
进一步地，所述步骤A1中，第一液体培养基的制备方法包括如下步骤：取蛋白胨15g用500mL水溶化，分别加入牛肉膏10g、酵母浸膏14g、麦芽浸膏4g、葡萄糖6g、柠檬酸钠0.5g、磷酸二氢钾1.5g、氯化钙0.1g、硫酸镁0.3g，硫酸锰0.3g，将上述原料混合均匀后加水至1L，待所有原料充分溶解后调pH值至6.5，于122℃温度下、0.25MPa压力下灭菌20min，冷却至30℃，得到的培养基为第一液体培养基。
进一步地，所述步骤A1中，第一复合益生菌剂培养的条件为：发酵温度为28℃，摇床转速为200r/min，通入空气进行发酵，测定第一发酵菌液中枯草芽孢杆菌的浓度为5×108-1×109/mL时，停止发酵。
进一步地，所述步骤A2中，第二液体培养基的制备方法包括如下步骤：取蛋白胨16g用500mL水溶解，分别加入牛肉膏11g、酵母浸膏15g、麦芽浸膏4g、葡萄糖6g、乙酸钠2g、柠檬酸铵0.5g、磷酸二氢钾0.3g、磷酸氢二钠1.0和硫酸镁0.5g，补充水至1L，充分混合后调pH值至6.5，于122℃温度下、0.25MPa压力下进行灭菌20min，冷却至30℃，得到的培养基为第二液体培养基。
进一步地，所述步骤A2中，第二复合益生菌剂培养的条件为：发酵温度为30℃，摇床转速为80r/min，密闭发酵，测定第二发酵菌液中植物乳杆菌的浓度为5×106-1×107/mL时，停止发酵。
进一步地，所述步骤B中，鱼类原料粉碎后，还添加有占鱼类原料总重量1％％的黄腐酸。
实施例3
本实施例中，利用益生菌生产鱼粉的方法，包括以下步骤：
A、菌种制备：包括第一发酵菌液和第二发酵菌液的制备；
A1、将由枯草芽孢杆菌、啤酒酵母、放线菌和巴氏醋酸杆菌组合形成的第一复合菌剂接种于第一液体培养基，进行发酵培养，得到的混合液为第一发酵菌液；
A2、将由植物乳杆菌、沼泽红假单胞菌和啤酒酵母组合形成的第二复合菌剂接种于第二液体培养基，进行发酵培养，得到的混合液为第二发酵菌液；
B、接种发酵：将鱼类原料粉碎后，加入鱼类原料总重量15％的第一发酵菌液，在33℃温度下通入经过净化的空气发酵22h后，加入鱼类原料总重量20％的第二发酵菌液，在33℃温度下厌氧发酵22后，干燥，制得鱼粉。
进一步地，所述步骤A1中，第一复合益生菌剂各组分重量份分别为：枯草芽孢杆菌25份、啤酒酵母20份、放线菌12份和巴氏醋酸杆菌5份。
进一步地，所述步骤A2中，第二复合益生菌剂各组分重量份分别为：植物乳杆菌15份、啤酒酵母10份和沼泽红假单胞菌15份。
进一步地，所述的一种利用益生菌生产鱼粉的方法，还包括步骤C、将鱼粉干燥后，添加鱼粉总重量0.06％的抗氧化剂，所述抗氧化剂由以下重量份的组分组成：乙氧基喹啉80份、没食子酸丙酯10份和柠檬酸12份。
进一步地，所述步骤A1中，第一液体培养基的制备方法包括如下步骤：取蛋白胨10g用500mL水溶化，分别加入牛肉膏14g、酵母浸膏10g、麦芽浸膏4g、葡萄糖8g、柠檬酸钠1.5g、磷酸二氢钾0.5g、氯化钙0.2、硫酸镁0.3g，硫酸锰0.3g，将上述原料混合均匀后加水至1L，待所有原料充分溶解后调pH值至7.0，于115℃温度下、0.15MPa压力下灭菌30min，冷却至20℃，得到的培养基为第一液体培养基。
进一步地，所述步骤A1中，第一复合益生菌剂培养的条件为：发酵温度为32℃，摇床转速为140r/min，通入空气进行发酵，测定第一发酵菌液中枯草芽孢杆菌的浓度为5×108-1×109/mL时，停止发酵。
进一步地，所述步骤A2中，第二液体培养基的制备方法包括如下步骤：取蛋白胨12g用500mL水溶解，分别加入牛肉膏15g、酵母浸膏11g、麦芽浸膏8g、葡萄糖8g、乙酸钠4g、柠檬酸铵1.5g、磷酸二氢钾1.0g、磷酸氢二钠0.3g和硫酸镁0.5g，将上述原料混合均匀后加水至1L，待所有原料充分溶解后调pH值至7.0，于115℃温度下、0.15MPa压力下进行灭菌30min，冷却至20℃，得到的培养基为第二液体培养基。
进一步地，所述步骤A2中，第二复合益生菌剂培养的条件为：发酵温度为33℃，摇床转速为120r/min，密闭发酵，测定第二发酵菌液中植物乳杆菌的浓度为5×106-1×107/mL时，停止发酵。
进一步地，所述步骤B中，鱼类原料粉碎后，还添加有占鱼类原料总重量1％-1.5％的黄腐酸。
实施例4
利用益生菌生产鱼粉的方法，包括以下步骤：
A、菌种制备：包括第一发酵菌液和第二发酵菌液的制备；
A1、将由枯草芽孢杆菌、啤酒酵母、放线菌和巴氏醋酸杆菌组合形成的第一复合菌剂接种于第一液体培养基，进行发酵培养，得到的混合液为第一发酵菌液；
A2、将由植物乳杆菌、沼泽红假单胞菌和啤酒酵母组合形成的第二复合菌剂接种于第二液体培养基，进行发酵培养，得到的混合液为第二发酵菌液；
B、接种发酵：将鱼类原料粉碎后，加入鱼类原料总重量16％的第一发酵菌液，在30-33℃温度下通入经过净化的空气发酵23h后，加入鱼类原料总重量16％的第二发酵菌液，在31℃温度下厌氧发酵24h后，干燥，制得鱼粉。
进一步地，所述步骤A1中，第一复合益生菌剂各组分重量份分别为：枯草芽孢杆菌24份、啤酒酵母16份、放线菌10份和巴氏醋酸杆菌6份。
进一步地，所述步骤A2中，第二复合益生菌剂各组分重量份分别为：植物乳杆菌22份、啤酒酵母7份和沼泽红假单胞菌13份。
进一步地，所述的一种利用益生菌生产鱼粉的方法，还包括步骤C、将鱼粉干燥后，添加鱼粉总重量0.05％的抗氧化剂，所述抗氧化剂由以下重量份的组分组成：乙氧基喹啉75份、没食子酸丙酯12份和柠檬酸12份。
进一步地，所述步骤A1中，第一液体培养基的制备方法包括如下步骤：取蛋白胨13g用500mL水溶化，分别加入牛肉膏12g、酵母浸膏12g、麦芽浸膏3g、葡萄糖7g、柠檬酸钠1.2g、磷酸二氢钾1.2g、氯化钙0.2、硫酸镁0.35g，硫酸锰0.2g，补充水至1L，充分溶解后调pH值至6.7，于121℃温度下、0.18MPa压力下灭菌20min，冷却至25℃，得到的培养基为第一液体培养基。
进一步地，所述步骤A1中，第一复合益生菌剂培养的条件为：发酵温度为30℃，摇床转速为160r/min，通入空气进行发酵，测定第一发酵菌液中枯草芽孢杆菌的浓度为5×108-1×109/mL时，停止发酵。
进一步地，所述步骤A2中，第二液体培养基的制备方法包括如下步骤：取蛋白胨15g用500mL水溶解，分别加入牛肉膏12g、酵母浸膏12g、麦芽浸膏5g、葡萄糖7g、乙酸钠2g、柠檬酸铵1.2g、磷酸二氢钾0.6g、磷酸氢二钠0.50和硫酸镁0.4g，补充水至1L，充分混合后调pH值至6.7，于121℃温度下、0.18MPa压力下进行灭菌20min，冷却至25℃，得到的培养基为第二液体培养基。
进一步地，所述步骤A2中，第二复合益生菌剂培养的条件为：发酵温度为31℃，摇床转速为90r/min，密闭发酵，测定第二发酵菌液中植物乳杆菌的浓度为5×106-1×107/mL时，停止发酵。
进一步地，所述步骤B中，鱼类原料粉碎后，还添加有占鱼类原料总重量1.4％的黄腐酸。
以本发明制备的鱼粉在鸡用饲料的添加量为5-8％作为实验组，以未添加本发明鱼粉的饲料作为对照组，对鸡进行投喂，投喂期为2个月,其养殖条件按常规方法。结果表明，实验组相对于对照组，肉鸡增重率提高17.6％，鸡产蛋率提高14.2％，鸡的孵化率提高19.3％，健雏率提高16.6％，发病率减少。
以本发明制备的鱼粉在龟用饲料的添加量为15-20％作为实验组，以未添加本发明鱼粉的饲料作为对照组，对中华草龟进行投喂，投喂期为3个月，其养殖条件按常规方法。。结果表明，实验组相对于对照组，中华草龟增重率提高11.7％，成活率提高27.6％。
本发明制备的鱼粉蛋白质消化率高达94％以上，减少了添加鱼粉的饲料在大肠中的异常发酵，微生物的代谢产物如消化酶，可提高饲料的消化率，从而降低或消除营养性腹泻；益生菌能抑制肠道中有害菌的繁殖，保持肠道健康的微生态环境，改善动物消化系统机能，增强养殖动物免疫功能，预防病害，增进健康，降低发病率及死亡率；本发明利用益生菌生产鱼粉的方法生产成本低，所需设备简单，易控制，与传统高温蒸煮鱼粉的方法相比，生产过程中排出的臭气少，可减少对环境的污染。
最后应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细地说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
Claims (5)
1.一种利用益生菌生产鱼粉的方法，其特征在于：包括以下步骤：
A、菌种制备：包括第一发酵菌液和第二发酵菌液的制备；
A1、将由枯草芽孢杆菌、啤酒酵母、放线菌和巴氏醋酸杆菌组合形成的第一复合益生菌剂接种于第一液体培养基，进行发酵培养，得到的混合液为第一发酵菌液；第一复合益生菌剂各组分重量份分别为：枯草芽孢杆菌15-25份、啤酒酵母10-20份、放线菌6-12份和巴氏醋酸杆菌5-10份；第一复合益生菌剂培养的条件为：发酵温度为28-32℃，摇床转速为140-200r/min，通入空气进行发酵，测定第一发酵菌液中枯草芽孢杆菌的浓度为5×108-1×109/mL时，停止发酵；
A2、将由植物乳杆菌、沼泽红假单胞菌和啤酒酵母组合形成的第二复合益生菌剂接种于第二液体培养基，进行发酵培养，得到的混合液为第二发酵菌液；第二复合益生菌剂各组分重量份分别为：植物乳杆菌15-25份、沼泽红假单胞菌10-15份和啤酒酵母5-10份；第二复合益生菌剂培养条件为：发酵温度为30-33℃，摇床转速为80-120r/min，密闭发酵，测定第二发酵菌液中植物乳杆菌的浓度为5×106-1×107/mL时，停止发酵；
B、接种发酵：将鱼类原料粉碎后，加入鱼类原料总重量15-20％的第一发酵菌液，在30-33℃温度下通入经过净化的空气，发酵22-24h后，加入鱼类原料总重量15-20％的第二发酵菌液，在30-33℃温度下厌氧发酵22-24h后，干燥，制得鱼粉；
步骤B之后还包括步骤C、将鱼粉干燥后，添加鱼粉总重量0.04-0.06％的抗氧化剂，所述抗氧化剂由以下重量份的组分组成：乙氧基喹啉70-80份、没食子酸丙酯10-15份和柠檬酸12-16份。
2.根据权利要求1所述的一种利用益生菌生产鱼粉的方法，其特征在于：所述步骤A1中，第一液体培养基的制备方法包括如下步骤：取蛋白胨10-15g用500mL水溶化，分别加入牛肉膏10-14g、酵母浸膏10-14g、麦芽浸膏2-4g、葡萄糖6-8g、柠檬酸钠0.5-1.5g、磷酸二氢钾0.5-1.5g、氯化钙0.1-0.2、硫酸镁0.3-0.5g，硫酸锰0.2-0.3g，将上述原料混合均匀后加水至1L，待所有原料充分溶解后调pH值至6.5-7.0，于115-122℃温度下、0.15-0.25MPa压力下灭菌20-30min，冷却至20-30℃，得到的培养基为第一液体培养基。
3.根据权利要求1所述的一种利用益生菌生产鱼粉的方法，其特征在于：所述步骤A2中，第二液体培养基的制备方法包括如下步骤：取蛋白胨12-16g用500mL水溶解，分别加入牛肉膏11-15g、酵母浸膏11-15g、麦芽浸膏4-8g、葡萄糖6-8g、乙酸钠2-4g、柠檬酸铵0.5-1.5g、磷酸二氢钾0.3-1.0g、磷酸氢二钠0.3-1.0和硫酸镁0.3-0.5g，将上述原料混合均匀后加水至1L，待所有原料充分溶解后调pH值至6.5-7.0，于115-122℃温度下、0.15-0.25MPa压力下进行灭菌20-30min，冷却至20-30℃，得到的培养基为第二液体培养基。
4.根据权利要求1所述的一种利用益生菌生产鱼粉的方法，其特征在于：所述步骤B中，鱼类原料粉碎后，在加入第一发酵菌液之前，还添加有占鱼类原料总重量1％-1.5％的黄腐酸。
5.一种鱼粉，其特征在于：由权利要求1-4任一项所述的一种利用益生菌生产鱼粉的方法制得。
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