CN105941828A - 混合菌种联合发酵生产复合饲料的方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种混合菌种联合发酵生产复合饲料的方法，该方法利用玉米麸皮为主要原料通过黑曲霉、木霉、枯草芽孢杆菌、酵母菌、乳酸菌分批培养，联合转化固态发酵生产微生物饲料，包括原料的预处理、霉菌发酵剂的复配、酵母复合发酵菌剂的混配、乳酸菌发酵剂的制作、分步固态发酵、干燥和粉碎等工艺步骤。本发明可以充分高效的利用玉米麸皮资源，提高其附加值。可使肠道中的有害菌落减少，有效发挥调理保健，提高饲料利用率，防病促长，减少抗生素等药物使用，提高畜禽产品品质的功效，减轻排泄物臭味，改善养殖环境，是一种喂养畜禽用质优价廉的绿色生物饲料。

Description

混合菌种联合发酵生产复合饲料的方法

技术领域

本发明涉及一种混合菌种联合发酵生产复合饲料的方法，属于生物饲料发酵生产技术领域。

背景技术

近年来，饲料资源制约逐渐成为中国饲料行业甚至畜牧生产发展的瓶颈。目前，中国饲料粮约占粮食总产量的35%，预计到2020和2030年，比重将分别达到45%和50%，但粮食预期年增量只有1%左右，饲料粮缺口在所难免，其中优质蛋白质饲料资源将更加紧张。因此，尝试利用新型饲料成分来代替日渐紧缺的常规饲料成分将会成为未来饲料发展的必然趋势。而其中粮食深加工所得的一些副产物将会是一个研究的方向。

玉米麸皮是玉米淀粉加工的主要副产物之一，大约占玉米总质量的12%，含有丰富的膳食纤维以及玉米黄素、甾醇等物质。但玉米麸皮并未得到充分利用而是绝大多数直接丢弃或是做一些简单的利用，产品的附加值都相对很低，进而导致产品成本增高，利润率下降，市场竞争力变弱，社会效益降低，如若可以更深层次的开发利用玉米的深加工副产物—玉米麸皮，就能极大的带动玉米加工企业的经济效益。国内外研究者为使这种农业副产物在食品工业和饲料工业中实现更大的价值而进行了大量研究。

目前，我国应用较多的多为抗生素饲料。抗生素饲料对预防动物疾病、对提高动物生产性能和经济效益具有巨大的推动作用，但同时也造成了严重的负面效应，比如病原微生物的抗药性、动物自身免疫力降低，药残引起的人体健康伤害以及排泄物污染环境等。随着生活水平的提高，人们对消费品质量越来越重视，畜产品的安全问题日益成为人们关注的焦点。目前欧盟已经禁止使用抗生素。而近年来，我国每年都有畜产品因药残超标而被退货或销毁，给国家及企业造成了巨大的经济损失。由此可见，开发高效、无残留、无公害的安全绿色的饲料是社会发展的要求和必然结果。

基于此，国家鼓励新饲料、新饲料添加剂的研制，具体的支持法律法规和产业政策包括《饲料和饲料添加剂管理条例》及其配套规章和《饲料工业“十二五”发展规划》。其中明确提出：未来生物技术与生物饲料在保障饲料安全与食品安全、促进饲料产业健康可持续发展的方向及产业布局模式等方面具有重要意义；是促进我国畜牧业健康持续发展的必要条件和物质基础；是我国今后饲料工业发展的长期战略。

发明内容

本发明的目的是提供一种通过多菌种联合分批固态发酵，可以充分高效的利用玉米麸皮资源，提高其附加值的混合菌种联合发酵生产复合饲料的方法。采用本方法生产的饲料可使肠道中的有害菌落减少，有效发挥调理保健，提高饲料利用率，防病促长，减少抗生素等药物使用，提高畜禽产品品质的功效，减轻排泄物臭味，改善养殖环境。

本发明的方法包括如下步骤：

1）玉米麸皮的预处理：将玉米麸皮粉碎并至少过40目筛，或在粉碎过筛的前提下进行物理降解处理；

2）发酵底物的质量百分比组分为：经预处理的玉米麸皮70—80%、豆粕10%—15%、磷酸氢钙3—5%、食盐2—5%、氯化镁1—3%、亚硒酸钠0.3—0.5%、硫酸锌1—2%，对发酵底物进行分级固体发酵；在固体发酵中按质量百分比发酵底物为60%—70%、水为30%~40%，一级固体发酵是将木霉、黑曲霉制成的一级固体发酵剂按发酵底物质量的3%~5%接种，好氧培养28~35℃条件下发酵2~3天；二级固体发酵是将酿酒酵母、毕赤酵母、枯草芽孢杆菌制成的二级固体发酵剂按发酵底物质量的5%~10%接种，好氧培养25~28℃条件下发酵1~2天；三级固体发酵是将用乳酸菌制成的三级固体发酵剂按发酵底物质量的1% ~5%接种，35~38℃条件下发酵1~3天；

3）将发酵好的生物饲料干燥至水分含量为10at%~15at%，粉碎后即为微生物发酵复合饲料。

步骤1中所述的物理降解处理方式是高温常压处理法、超声波处理法、高温高压处理法、高压热水处理法、高能辐射处理法、微波处理法、冷冻处理法中的一种；

步骤2中所述的一级固体发酵剂是将所需的发酵菌株木霉、黑曲霉分别经过斜面培养、摇瓶培养和接曲培养后按体积比30—50:50—70混合制成的混合发酵菌剂；

步骤2中所述的二级固体发酵剂是将所需菌种酿酒酵母、毕赤酵母以及枯草芽孢杆菌分别经试管培养、摇瓶培养和种子罐培养后再将所培养的菌液分别接入液体培养基培养2天后，成为成熟液，随后按体积比：酿酒酵母20%—40%、毕赤酵母20%—40%、枯草芽孢杆菌30%—50%混合制成的混合发酵菌剂；

步骤2中所述的三级固体发酵剂是将所需的乳酸菌经过斜面培养、摇瓶培养和接曲培养后制成的发酵菌剂；

所述的乳酸菌能够被玉米乳杆菌、粪肠球菌或玉米乳杆菌和粪肠球菌的混合菌种中的一种部分或全部替代；

步骤1中所述的玉米麸皮能够被麦麸皮、玉米皮、玉米秸秆、羊草、柠条、沙柳中的一种或几种部分替代；

麦麸皮、玉米皮、玉米秸秆、羊草、柠条、沙柳中的一种或几种替代玉米麸皮的比例为30 at %~70 at %。

本发明的优点是：

（1）本发明用的是玉米淀粉加工后的副产物，对其进行二次加工，既为畜牧养殖业提供一种质优价廉的无抗生素的微生物饲料，又解决了当前玉米麸皮利用不充分的问题，提高其附加值；

（2）本发明所生产的产品属于微生物发酵饲料, 不仅能软化食物纤维硬度，增加适口性，从而较大的提高饲料利用率，减少损耗，而且饲料中含有大量的有益微生物，且杂菌含量极少，富含对动物生长发育有益的因子；

（3）本发明制得的微生物饲料益生菌剂中含有饲料酵母， 它含有丰富的蛋白质(30～40％左右)、B族维生素、氨基酸等物质,可广泛用作动物饲料的蛋白质补充物。它能促进动物的生长发育，缩短饲养期，增加肉量和蛋量，改良肉质和提高瘦肉率，改善皮毛的光泽度，并能增强幼禽畜的抗病能力；

（4）本发明制得的微生物饲料益生菌剂中含有枯草芽孢杆菌，能合成维生素B1、B2、B6、烟酸等多种B族维生素，提高动物体内干扰素和巨噬细胞的活性；枯草芽孢杆菌迅速消耗环境中的游离氧，造成肠道低氧，促进有益厌氧菌生长，并产生乳酸等有机酸类，降低肠道pH值，间接抑制其它致病菌生长；刺激动物免疫器官的生长发育，激活T、B淋巴细胞，提高免疫球蛋白和抗体水平，增强细胞免疫和体液免疫功能，提高群体免疫力；

（5）本发明制得的微生物饲料益生菌剂中含有玉米乳杆菌，其具有有一定的免疫调节作用、对致病菌有抑制作用、维持肠道内菌群平衡、促进营养物质吸收、缓解乳糖不耐症、抑制肿瘤细胞的形成等作用。

（6）本发明采用的工艺是多菌种混合发酵，多种微生物协同作用能优势互补，相辅相成能起到单一菌株起不到的作用。具有如下特点：a、多菌共生酶系互补；b、节约能源，简化工艺设备，生化反应更加完善；c、通过不同代谢能力的组合，能够完成单个菌种难以完成的复杂代谢作用；d、酶促作用生成的营养物立即被能利用其的微生物所吸收，在维持降解物浓度的同时，消除了酶合成作用受到的降解物的抑制作用；e、通过微生物间的互惠共生和偏利共生关系，可将发酵培养成集营养、免疫、抗感染、易吸收等特点为一体的目的产品。

附图说明

图1是本发明的工艺流程图。

具体实施方式

实施例 1

1、玉米麸皮的预处理：将玉米麸皮机械粉碎并过40目筛，随后利用高温高压法对其进行预处理。

2、有益发酵菌剂的制备：将所需的发酵菌株木霉、黑曲霉分别经过斜面培养、摇瓶培养和接曲培养后按体积比30：70的比例混合制成一级固体发酵剂；将所需菌种酿酒酵母、毕赤酵母以及枯草芽孢杆菌分别经试管培养、摇瓶培养和种子罐培养后再按5%~10%的接种量将所培养的菌液分别接入液体培养基培养2天后，成为成熟液，随后按体积比，酿酒酵母：毕赤酵母：枯草芽孢杆菌=20：20：60配制成二级固态发酵剂；将所需的乳酸菌经过斜面培养、摇瓶培养和接曲培养后制成三级固体发酵剂。

3、配料：按以下重量称取混合原料；玉米麸皮75kg、 豆粕8kg、磷酸氢钙1.5kg、食盐1.6kg、氯化镁1.2kg、硫酸锌0.8kg、亚硒酸钠0.25kg、水30kg，置于配料容器中混合。

4、消毒：将发酵物料移入消毒罐，用高温蒸汽于121℃灭菌20min。

5、接种、发酵培养：待消毒后的发酵物料冷却至30℃时移入发酵池，将一级固态固体发酵剂按3g接种于发酵物料，混合均匀在28~35℃条件下发酵，通风培养2~3天。随后将配制的二级固态发酵剂5g接入发酵池混合均匀于25~28℃条件下发酵培养1~2天。最后再将配制的三级固态发酵剂2g接种于发酵物料，混合均匀后在35~38℃条件下发酵1~3天。

6、灭活、干燥、粉碎：发酵结束后将发酵产物进行菌体灭活、脱水干燥至水分为10 at%~15 at %，粉碎后即为微生物发酵饲料。

实施例 2

1、玉米麸皮的预处理：将玉米麸皮机械粉碎并过40目筛，随后利用超声波法对其进行预处理。

2、有益发酵菌剂的制备：将所需的发酵菌株木霉、黑曲霉分别经过斜面培养、摇瓶培养、接曲培养后按体积比40：60的比例混合制成一级固体发酵剂；将所需菌种酿酒酵母、毕赤酵母以及枯草芽孢杆菌分别经试管培养、摇瓶培养和种子罐培养后再按5%~10%的接种量将所培养的菌液分别接入液体培养基培养2天后，成为成熟液，随后按体积比，酿酒酵母：毕赤酵母：枯草芽孢杆菌=20：30：50配制成二级固态发酵剂；将所需的乳酸菌经过斜面培养、摇瓶培养和接曲培养后制成三级固体发酵剂。

3、配料：按以下重量称取混合原料；玉米麸皮80kg、 豆粕13kg、磷酸氢钙1.8kg、食盐2.0kg、氯化镁1.5kg、硫酸锌1.0kg、亚硒酸钠0.3kg、水32kg，置于配料容器中混合。

4、消毒：将发酵物料移入消毒罐，用高温蒸汽于121℃灭菌20min。

5、接种、发酵培养：待消毒后的发酵物料冷却至30℃时移入发酵池，将一级固态固体发酵剂按7g接种于发酵物料，混合均匀在28~35℃条件下发酵，通风培养2~3天。随后将配制的二级固态发酵剂6g接入发酵池混合均匀于25~28℃条件下发酵培养1~2天。最后再将配制的三级固态发酵剂3.2g接种于发酵物料，混合均匀后在35~38℃条件下发酵1~3天。

6、灭活、干燥、粉碎：发酵结束后将发酵产物进行菌体灭活、脱水干燥至水分为10 at %~15 at %，粉碎后即为微生物发酵饲料。

实施例 3

1、玉米麸皮的预处理：将玉米麸皮机械粉碎并过40目筛，随后利用高温常压法对其进行预处理。

2、有益发酵菌剂的制备：将所需的发酵菌株木霉、黑曲霉分别经过斜面培养、摇瓶培养和接曲培养后按体积比50：50的比例混合制成一级固体发酵剂；将所需菌种酿酒酵母、毕赤酵母以及枯草芽孢杆菌分别经试管培养、摇瓶培养和种子罐培养后再按5%~10%的接种量将所培养的菌液分别接入液体培养基培养2天后，成为成熟液，随后按体积比，酿酒酵母：毕赤酵母：枯草芽孢杆菌=30：20：50配制成二级固态发酵剂；将所需的玉米乳杆菌经过斜面培养、摇瓶培养和接曲培养后制成三级固体发酵剂。

3、配料：按以下重量称取混合原料；玉米麸皮90kg、豆粕18kg、磷酸氢钙1.8kg、食盐2.6kg、氯化镁1.2kg、硫酸锌1.2kg、亚硒酸钠0.5kg、水45kg，置于配料容器中混合。

4、消毒：将发酵物料移入消毒罐，用高温蒸汽于121℃灭菌20min。

5、接种、发酵培养：待消毒后的发酵物料冷却至30℃时移入发酵池，将一级固态固体发酵剂按5g接种于发酵物料，混合均匀在28~35℃条件下发酵，通风培养2~3天。随后将配制的二级固态发酵剂7g接入发酵池混合均匀于25~28℃条件下发酵培养1~2天。最后再将配制的三级固态发酵剂2.5g接种于发酵物料，混合均匀后在35~38℃条件下发酵1~3天。

6、灭活、干燥、粉碎：发酵结束后将发酵产物进行菌体灭活、脱水干燥至水分为10 at %~15 at %，粉碎后即为微生物发酵饲料。

实施例 4

1、玉米麸皮的预处理：将玉米麸皮机械粉碎并过40目筛，随后利用高压蒸汽法对其进行预处理。

2、有益发酵菌剂的制备：将所需的发酵菌株木霉、黑曲霉分别经过斜面培养、摇瓶培养和接曲培养后按体积比60：40的比例混合制成一级固体发酵剂；将所需菌种酿酒酵母、毕赤酵母以及枯草芽孢杆菌分别经试管培养、摇瓶培养和种子罐培养后再按5%~10%的接种量将所培养的菌液分别接入液体培养基培养2天后，成为成熟液，随后按体积比，酿酒酵母：毕赤酵母：枯草芽孢杆菌=30：30：40配制成二级固态发酵剂；将所需的玉米乳杆菌经过斜面培养、摇瓶培养和接曲培养后制成三级固体发酵剂。

3、配料：按以下重量称取混合原料；玉米麸皮50kg、豆粕10kg、磷酸氢钙1.2kg、食盐1.5kg、氯化镁1.2kg、硫酸锌0.9kg、亚硒酸钠0.3kg、水20kg，置于配料容器中混合。

4、消毒：将发酵物料移入消毒罐，用高温蒸汽于121℃灭菌20min。

5、接种、发酵培养：待消毒后的发酵物料冷却至30℃时移入发酵池，将一级固态固体发酵剂按5g接种于发酵物料，混合均匀在28~35℃条件下发酵，通风培养2~3天。随后将配制的二级固态发酵剂8g接入发酵池混合均匀于25~28℃条件下发酵培养1~2天。最后再将配制的三级固态发酵剂4.6g接种于发酵物料，混合均匀后在35~38℃条件下发酵1~3天。

6、灭活、干燥、粉碎：发酵结束后将发酵产物进行菌体灭活、脱水干燥至水分为10 at %~15 at %，粉碎后即为微生物发酵饲料。

实施例 5

1、玉米麸皮的预处理：将玉米麸皮机械粉碎并过40目筛，随后利用高温高压法对其进行预处理。

2、有益发酵菌剂的制备：将所需的发酵菌株木霉、黑曲霉分别经过斜面培养、摇瓶培养和接曲培养后按体积比30：70的比例混合制成一级固体发酵剂；将所需菌种酿酒酵母、毕赤酵母以及枯草芽孢杆菌分别经试管培养、摇瓶培养和种子罐培养后再按5%~10%的接种量将所培养的菌液分别接入液体培养基培养2天后，成为成熟液，随后按体积比，酿酒酵母：毕赤酵母：枯草芽孢杆菌=40：40：20配制成二级固态发酵剂；将所需的玉米乳杆菌经过斜面培养、摇瓶培养、接曲培养后制成三级固体发酵剂。

3、配料：按以下重量称取混合原料；玉米麸皮65kg、豆粕14kg、磷酸氢钙1.6kg、食盐2.1kg、氯化镁1.4kg、硫酸锌1.2kg、亚硒酸钠0.45kg、水26kg，置于配料容器中混合。

4、消毒：将发酵物料移入消毒罐，用高温蒸汽于121℃灭菌20min。

5、接种、发酵培养：待消毒后的发酵物料冷却至30℃时移入发酵池，将一级固态固体发酵剂按5g接种于发酵物料，混合均匀在28~35℃条件下发酵，通风培养2~3天。随后将配制的二级固态发酵剂7g接入发酵池混合均匀于25~28℃条件下发酵培养1~2天。最后再将配制的三级固态发酵剂5g接种于发酵物料，混合均匀后在35~38℃条件下发酵1~3天。

6、灭活、干燥、粉碎：发酵结束后将发酵产物进行菌体灭活、脱水干燥至水分为10 at %~15 at %，粉碎后即为微生物发酵饲料。

上述实施例中的各菌种培养所用的培养基说明如下：

枯草芽孢杆菌的培养基配方为：1L蒸馏水+15g葡萄糖+15g蛋白胨+5g氯化钠+1g牛肉浸取物+5mg硫酸镁，如果为固体培养基在此基础上加15—20g琼脂。简称为LB培养基。

酿酒酵母和毕赤酵母培养基配方为：1L蒸馏水+10g酵母提取粉+20g蛋白胨+20g葡萄糖，如果为固体培养基在此基础上加15—20g琼脂。简称为YPD培养基。

乳酸菌、粪肠球菌或玉米乳杆菌培养基配方为：1L蒸馏水+10g蛋白胨+10g牛肉膏+5g酵母提取粉+2g磷酸氢二钾+2g柠檬酸三铵+5g乙酸钠+20g葡萄糖+0.5g硫酸镁+0.25g硫酸锰+1mL吐温—80。调节pH为6.2—6.4。固体培养基在此基础上加15—20g琼脂。简称为MRS培养基。

木霉和黑曲霉的培养基配方为：1L蒸馏水+马铃薯（去皮）200g+葡萄糖20g,固体培养基在此基础上加15—20g琼脂。简称为PDA培养基。

以上培养基配方均是较为常见的培养基。

本发明主要使用的玉米淀粉加工后的副产物—玉米麸皮。而玉米麸皮所含有的营养物质丰富但并未得到充分利用，所以本发明利用玉米麸皮为原料生产微生物饲料既可以缓解饲料粮紧缺、减少人畜争粮的问题，又可以充分利用利用玉米麸皮资源从而提高其附加值；本发明所生产的饲料中并未添加任何抗生素成分，而是通过多种微生物来维持肠道内微生态的平衡，具有防病，增强体重等多种功能且无污染、无残留、不产生抗药性，不会给人畜健康带来危害，是一种绿色安全的饲料；从原料的预处理方式来看，本发明所采用的预处理方式均为物理预处理的方法。利用这些物理预处理手段不仅有助于玉米麸皮中木质纤维素的降解，同时对于畜禽不会造成伤害；本发明所使用的菌种均为农业部批准使用的菌株，不会对畜禽的安全造成危害；本发明采用的是固态发酵方式，其具有培养基含水少，废水废渣少，对环境污染小，能耗低，功能设备简易，后处理方便，产物浓度高等特点；本发明利用的是多菌种分批固态发酵，包括原料的预处理在内每一步的目标都很明确：（1）预处理的目的在于初步降解玉米麸皮中的纤维素和半纤维素；（2）第一步发酵的目的在于进一步降解玉米麸皮中的纤维素和半纤维素，使其充分转化为有用物质；（3）第二步发酵的目的主要是要提高最终发酵产物即饲料中的蛋白含量；（4）第三步发酵的目的是添加的玉米乳杆菌能够抑制畜禽肠道内的病原菌，同时能促进肠道绒毛生长，增加其长度，有利于肠道对营养的吸收；本发明在发酵过程中可以产生乳酸、乙酸、丙酸等有机酸，这些酸无论是在体内还是在体外都可抑制大肠杆菌等革兰氏阴性菌的生长，增强动物体的免疫抗病能力；本发明可针对畜禽种类的不同以及动物的不同生长阶段调整配方从而满足其生长所需的营养物质需求；本发明采用的工艺是多菌种混合发酵，多种微生物协同作用能优势互补，相辅相成能起到单一菌株起不到的作用；本发明所生产的产品属于微生物发酵饲料, 不仅能软化食物纤维硬度，增加适口性，从而较大的提高饲料利用率，减少损耗，而且饲料中含有大量的有益微生物，且杂菌含量极少，富含对动物生长发育有益的因子；本发明通过对发酵原料玉米麸皮进行物理预处理并在发酵的过程中产生的纤维素酶对玉米麸皮中的木质纤维素降解效果明显。结果显示经过物理预处理和菌种发酵后对玉米麸皮中的纤维素的降解率可达到达到50—65%，半纤维素的降解率达到20—40%；本发明主要考查了高温常压、超声波、高温高压的物理预处理方法对玉米麸皮进行预处理。结果发现相比较于未采用预处理而直接进行菌体发酵后纤维素和半纤维素的降解率分别提高约5—10%和3—5%。而物理预处理之所以能够提高纤维素和半纤维素降解率的原因在于预处理能够使玉米麸皮中的无定形区无序物质的脱除，增大玉米麸皮的孔隙率和内表面积，有利于后续过程中菌的作用；通过对本发明所得产品的成分进行检测，测得其主要成分以及百分含量如下：蛋白质含量>25 at%，水分<10 at%，脂肪<3 at%，灰分<2 at%，粗纤维<12 at%；通过与其它专利相比，很多发明中多用各种酶并结合部分菌株进行混合发酵，而本发明并没用应用任何的酶类，众所周知部分酶的成本较高，所以相对而言本发明在这方面节约了成本。

Claims (8)

1.一种混合菌种联合发酵生产复合饲料的方法，其特征是：包括如下步骤：

1）玉米麸皮的预处理：将玉米麸皮粉碎并至少过40目筛，或在粉碎过筛的前提下进行物理降解处理；

2）发酵底物的质量百分比组分为：经预处理的玉米麸皮70—80%、豆粕10%—15%、磷酸氢钙3—5%、食盐2—5%、氯化镁1—3%、亚硒酸钠0.3—0.5%、硫酸锌1—2%，对发酵底物进行分级固体发酵；在固体发酵中按质量百分比发酵底物为60%—70%、水为30%~40%，一级固体发酵是将木霉、黑曲霉制成的一级固体发酵剂按发酵底物质量的3%~5%接种，好氧培养28~35℃条件下发酵2~3天；二级固体发酵是将酿酒酵母、毕赤酵母、枯草芽孢杆菌制成的二级固体发酵剂按发酵底物质量的5%~10%接种，好氧培养25~28℃条件下发酵1~2天；三级固体发酵是将用乳酸菌制成的三级固体发酵剂按发酵底物质量的1% ~5%接种，35~38℃条件下发酵1~3天；

3）将发酵好的生物饲料干燥至水分含量为10at%~15at%，粉碎后即为微生物发酵复合饲料。

2.根据权利要求1所述的混合菌种联合发酵生产复合饲料的方法，其特征是：步骤1中所述的物理降解处理方式是高温常压处理法、超声波处理法、高温高压处理法、高压热水处理法、高能辐射处理法、微波处理法、冷冻处理法中的一种。

3.根据权利要求1所述的混合菌种联合发酵生产复合饲料的方法，其特征是：步骤2中所述的一级固体发酵剂是将所需的发酵菌株木霉、黑曲霉分别经过斜面培养、摇瓶培养和接曲培养后按体积比30—50:50—70混合制成的混合发酵菌剂。

4.根据权利要求1所述的混合菌种联合发酵生产复合饲料的方法，其特征是：步骤2中所述的二级固体发酵剂是将所需菌种酿酒酵母、毕赤酵母以及枯草芽孢杆菌分别经试管培养、摇瓶培养和种子罐培养后再将所培养的菌液分别接入液体培养基培养2天后，成为成熟液，随后按体积比：酿酒酵母20%—40%、毕赤酵母20%—40%、枯草芽孢杆菌30%—50%混合制成的混合发酵菌剂。

5.根据权利要求1所述的混合菌种联合发酵生产复合饲料的方法，其特征是：步骤2中所述的三级固体发酵剂是将所需的乳酸菌经过斜面培养、摇瓶培养和接曲培养后制成的发酵菌剂。

6.根据权利要求1或6所述的混合菌种联合发酵生产复合饲料的方法，其特征是：所述的乳酸菌能够被玉米乳杆菌、粪肠球菌或玉米乳杆菌和粪肠球菌的混合菌种中的一种部分或全部替代。

7.根据权利要求1所述的混合菌种联合发酵生产复合饲料的方法，其特征是：步骤1中所述的玉米麸皮能够被麦麸皮、玉米皮、玉米秸秆、羊草、柠条、沙柳中的一种或几种部分替代。

8.根据权利要求8所述的混合菌种联合发酵生产复合饲料的方法，其特征是：麦麸皮、玉米皮、玉米秸秆、羊草、柠条、沙柳中的一种或几种替代玉米麸皮的比例为30 at %~70 at %。