CN105878335A

CN105878335A - 一种单味中草药物颗粒的质量控制及配制方法

Info

Publication number: CN105878335A
Application number: CN201410541678.0A
Authority: CN
Inventors: 关泽明; 张涛; 陈继慈
Original assignee: Guangdong Grand Pharmaceutical Co ltd
Current assignee: Guangdong Grand Pharmaceutical Co ltd
Priority date: 2014-10-14
Filing date: 2014-10-14
Publication date: 2016-08-24

Abstract

本发明涉及一种单味中草药物颗粒的质量控制及配制方法，主要包括以下步骤：取铁扫帚6300g，加水煎煮二次，第一次2小时，第二次1.5小时，滤过，合并滤液，浓缩成相对密度约为1.30(60℃)的稠膏；加乙醇使上述稠膏的含醇量达60％，静置，滤过，取滤液回收乙醇，浓缩成的干膏，粉碎，过筛；加入滑石粉至总量为950g，混匀，用水泛丸，用滑石粉与三氧化二铁的混合物共50g包衣，其中的滑石粉与三氧化二铁重量相等，干燥，打光，制成1000g。本发明有益效果为：具有收敛止泻、制备简便、成本较低、药效稳定等优点；有助于治疗收敛止泻、腹泻、消化不良、急性胃肠炎等病症。

Description

一种单味中草药物颗粒的质量控制及配制方法

技术领域

本发明涉及一种药物颗粒的配制方法，尤其涉及一种单味中草药物颗粒的质量控制及配制方法。

背景技术

铁扫帚为豆科胡枝子属植物截叶铁扫帚Lespedeza cuneata(Dum-Cours.)G.Don，茎呈圆柱形，茎、枝质硬脆，易折断，断面有髓；气微，味甘，微苦；顶部分枝、表面红棕色或暗红色、具明显细纵纹或浅沟，嫩枝上段被白色贴毛，老枝少毛；叶多脱落，残留小叶柄或叶痕；叶三出复互生，少数两个聚生，密集；叶柄上着三片小叶，条状楔形，先端平截，中央有小尖刺；该药物清热利湿、消食除积、祛痰止咳，可用于小儿疳积、消化不良、胃肠炎、细菌性痢疾、胃痛、黄疸型肝炎、肾炎水肿、口腔炎、咳嗽、支气管炎等。目前对于中药制剂，缺乏有助于缓解及治愈腹泻、消化不良、急性胃肠炎等方面的药物颗粒，同时，其它同类药物的制备质量又存在着一定的差异，这些因素都会导致在应对″收敛止泻″这一症状时显得不够有效。

本案涉及中草药物″铁扫帚″，其有效部位是其疗效的物质基础，建立克泻敏颗粒质量控制标准，符合现代中药制剂质量控制体系，是保障人类用药安全有效的重要依据。因此，需要结合铁扫帚这一药物进行配制方法的创新。

发明内容

针对以上缺陷，本发明提供一种收敛止泻、制备简便、成本较低、药效稳定的单味中草药物颗粒的质量控制及配制方法，从而用于消化不良、急性胃肠炎等。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种单味中草药物颗粒的质量控制及配制方法，主要包括以下步骤：

(1)取铁扫帚6300g，加水煎煮二次，第一次2小时，第二次1.5小时，滤过，合并滤液，浓缩成相对密度约为1.30(60℃)的稠膏；

(2)加乙醇使上述稠膏的含醇量达60％，静置，滤过，取滤液回收乙醇，浓缩成的干膏，粉碎，过筛；

(3)加入滑石粉至总量为950g，混匀，用水泛丸，用滑石粉与三氧化二铁的混合物共50g包衣，其中的滑石粉与三氧化二铁重量相等，干燥，打光，制成1000g。

鉴别方式：采用薄层色谱法鉴定，包括以下步骤：

(1)供试品溶液制备取本品1.5g，研细，加乙醇25ml，超声处理(功率240W，频率33kHz)30分钟，滤过，滤液水浴蒸干，残渣加热水15ml使溶解，滤过，滤液用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次15ml，合并正丁醇，用正丁醇饱和的水15ml洗涤1次，分取正丁醇液，水浴蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，即得；

(2)对照药材溶液的制备取铁扫帚对照药材2g，研细，加乙醚30ml，超声处理(功率240W，频率33kHz)20分钟，弃去乙醚液，残渣挥干，加乙醇25ml，超声处理(功率240W，频率33kHz)30分钟，滤过，滤液水浴蒸干，残渣加热水15ml使溶解，滤过，滤液用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次15ml，合并正丁醇提取液，再加正丁醇饱和的水15ml洗涤1次，分取正丁醇液，水浴蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，即得；

(3)吸取上述供试品、对照药材溶液各1μl，分别以点于同一聚酰胺薄层板上，以正丁醇-乙醇-冰醋酸(8∶4∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3％三氯化铝乙醇溶液，挥干或热风吹干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的荧光斑点。

含量测定：包括以下条件和步骤。

色谱条件与系统适应性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，0.5冰醋酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为256nm。理论板数按槲皮苷峰计算应不低于4000。

(1)对照品溶液的制备：精密称定槲皮苷对照品0.01g，置20ml量瓶中，加甲醇溶解至刻度，精密量取2.5ml，置于50ml量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，即得对照品溶液(约25μg/ml)；

(2)供试品溶液的制备：取同一批样品，研细，取2.5g，精密称定，置50ml锥形瓶中，加甲醇25ml，称定重量，超声处理(300W，45kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，挥去部分甲醇后，定量转移置5ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，过滤，取续滤液，即得；

(3)测定：分别精密吸取对照品溶液10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；

规定本品每袋含铁扫帚以槲皮苷(C₂₁H₂₀O₁₁)计不得少于1.0mg。

所述药物颗粒还适用于片剂、丸剂、胶囊剂。

此外，上述用于克泻敏颗粒，应符合颗粒剂项下有关各项规定。(中国药典2010年版一部附录IL)。

制得的颗粒每袋15g，密封贮藏。使用时为开水冲服，一次1～2袋，一日3次。

本发明所述的单味中草药物颗粒的质量控制及配制方法的有益效果为：具有收敛止泻、制备简便、成本较低、药效稳定等优点；有助于治疗收敛止泻、腹泻、消化不良、急性胃肠炎等病症。

具体实施方式

本发明实施例所述的单味中草药物颗粒的质量控制及配制方法，以1000g为例，主要包括以下步骤：

为本领域技术人员提供其可操作性，以下分析仅用于说明本发明，其不以任何方式限制本发明的范围，下述实验方法为常规方法，所用原辅材料均为国家规定的原辅材料产品。

(一)薄层色谱鉴定

试剂与试药

1.试样：克泻敏颗粒，共8批，批号分别为090801、090802、090803、100301、100302、100401、100402、100501，均由广东永康药业有限公司提供。

2.供试品溶液的制备：取本品1.5g，研细，加乙醇25ml，超声处理(功率240W，频率33kHz)30分钟，滤过，滤液水浴蒸干，残渣加热水15ml使溶解，滤过，滤液用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次15ml，合并正丁醇，用正丁醇饱和的水15ml洗涤1次，分取正丁醇液，水浴蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。

3.对照药材溶液的制备：取铁扫帚对照药材2g，研细，加乙醚30ml，超声处理(功率240W，频率33kHz)20分钟，弃去乙醚液，残渣挥干，加乙醇25ml，超声处理(功率240W，频率33kHz)30分钟，滤过，滤液水浴蒸干，残渣加热水15ml使溶解，滤过，滤液用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次15ml，合并正丁醇提取液，再加正丁醇饱和的水15ml洗涤1次，分取正丁醇液，水浴蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，制成对照药材溶液。

4.阴性对照溶液的制备：取相当于供试品的量，按供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。

5.薄层板：聚酰胺薄层板。

6.实验环境：温度28℃，相对湿度65％

7.点样、展开、检视：吸取上述供试品、对照药材溶液和阴性对照溶液各1μl，分别以点状点于同一聚酰胺薄层板上，以正丁醇-乙醇-冰醋酸(8∶4∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3％三氯化铝乙醇溶液，挥干或热风吹干，置紫外光灯(365nm)下检视。

色谱中，在与铁扫帚对照药材相应的位置上，显相同的荧光斑点，阴性无干扰。

8.方法的选择：

(1)薄层板：比较了硅胶G板与聚酰胺薄层板，发现后者分离效果好。(2)展开剂：比较以下二种展开剂

醋酸乙酯-乙醇-水-冰醋酸(8∶2∶1∶1)

正丁醇-乙醇-冰醋酸(8∶4∶1)

结果：正丁醇-乙醇-冰醋酸(8∶4∶1)为展开剂的效果佳。

(3)点样量考察

克泻敏颗粒按供试品溶液制备方法制备，分别点样2μl和1μl。结果显示2μl点样量过大，斑点拖尾严重，分离度不佳，故选择点样量为1μl。

(4)不同点样方式的比较

分别用点状和带状点板，比较两者的效果，结果显示两种点样方式均可。

9.方法学验证

(1)专属性本品属意味中草药制剂，阴性对照无干扰

(2)耐用性的考察

1)不同批号的聚酰胺薄层板的比较：结果显示无明显差异。

2)不同温度的比较：取点样后的薄层板，分别在8℃与28℃下展开，显色，紫外光(365nm)下检视，结果表明：在8℃与28℃下试验，对鉴别无明显的影响。

3)不同湿度的比较：分别考察在低湿(32％)和高湿(72％)下展开效果，结果表明在相对湿度下32％和72％下试验，对鉴别无明显的影响。

(二)含量测定方法

采用HPLC法测定克泻敏颗粒中槲皮苷的含量。

1.试验材料

(1)仪器：Waters高效液相色谱仪，色谱柱：Hibar C18(5μm.250×4.6mm)。天平：PrecisaXT200A电子天平、SartoriusCP224S电子天平、SartoriusCP225D电子天平。VOS-201SD真空干燥箱。

(2)试剂：HPLC用乙晴为色谱纯：HPLC用水为超纯水；其他试剂为分析纯。

(3)试验样品克泻敏颗粒(批号：090801、090802、090803、100301、100302、100401、100402、100501，均由广东永康药业有限公司提供)；克泻敏颗粒阴性对照(广东永康药业有限公司提供)；槲皮苷(批号11538-200403，中国药品生物制品检定所)。

2.方法学验证

(1)准确度试验(加样回收)

对照品溶液的制备：精密称定槲皮苷对照品0.00988g，置20ml量瓶中，加甲醇溶解至刻度，即得贮备液；精密量取贮备液2ml置200ml中，加甲醇稀释至刻度，作为对照品溶液(即：4.94μg/ml)。

加样回收溶液的制备：取已知含量的克泻敏颗粒(批号100402槲皮苷含量为0.1008mg/g)6份，每份取1.25g，精密称定，置50ml锥形瓶中，精密加入槲皮苷对照品溶液25ml。按供试品溶液制备方法制备，测定。回收率见表1。从下表可知，平均回收率为103.7，RSD为1.0％，说明本方法的准确度高。

表1 加样回收试验结果

(2)精密度试验

1)重复性试验

对照品溶液的制备：精密吸取准确度试验项下的贮备液2.5ml，置于50ml量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，即得对照品溶液(即24.7μg/ml)。

供试品溶液的制备：取同一批样品(批号100402)，混匀，取6份，每份2.5g，精密称定，置50ml锥形瓶中，加甲醇25ml，称定重量，超声处理(300W，45kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，挥去部分甲醇后，定量转移置5ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，过滤，取续滤液，即得。测定结果见表2。

表2 重复性试验结果

由表2可知：本法重复性良好。

2)中间精密度试验

分别取两批样品(100401，100501)，2位试验者分别依法制备供试品溶液，照含量测定项下方法操作，测定槲皮苷的含量，结果见表3。

表3 槲皮苷中间精密度试验结果(n＝8)

表3结果表明，该方法中间精密度良好。

3.专属性

对照品溶液的制备：同重复性试验。

供试品溶液的制备：同重复性试验。

阴性对照溶液制备：取阴性样品2.5g，同供试品溶液制备方法制成阴性对照溶液。

分别吸取对照品溶液、供试品溶液及阴性对照溶液各10μl，注入液相色谱仪，按含量测定方法测定。

结果：槲皮苷对照品保留时间为44.026分钟，峰面积为663579，供试品(批号100302)中槲皮苷保留时间为44.055分钟，峰面积为582732，阴性样品在相应保留时间处无色谱峰，无干扰，符合要求。

4.线性关系

精密吸取准确度试验项下的贮备液3ml，置于100ml量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，即得对照品溶液(即14.82μg/ml)。

分别取上述对照品溶液2、6、10、15、25μl，注入液相色谱仪中，所得线性关系数据(见表4)。以对照品浓度(ng)为横坐标(X)，峰面积为纵坐标(Y)

绘图得直线，回归方程如下：y＝2499.0x+13934.4，R＝1.0000，说明槲皮苷在29.64ng～370.5ng范围内呈良好的线性关系。见表4线性回归试验结果。

表4 线性回归试验结果

5.耐用性考察

(1)不同提取时间的选择

取本品4份，每份约2.5g，分别精密称定，置50ml锥形瓶中，加入甲醇25ml，称定重量，分别超声处理(300W，45kHz)20、30、45、60分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，挥去部分甲醇后，定量转移置5ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

结果见表5。

表5 不同提取时间考察结果

由表5可知，4种不同超声时间的提取效果相当，供试品溶液的制备方法用超声时间30分钟作为提取方法。

(2)不同提取溶液体积的选择

取本品每份约2.5g，分别精密称定，置50ml锥形瓶中，分别精密加入甲醇15、25、50ml，称定重量，分别超声处理(300W，45kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，挥去部分甲醇后，定量转移置5ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。结果见表6。

表6 不同提取溶剂体积考察结果

(3)测定波长的选择

取槲皮苷对照品的流动相溶液，以流动相为空白，在200-400nm范围内扫描，结果在256nm波长处有最大吸收，所以确定检测波长为256nm。

(4)流动相的选择

槲皮苷在HPLC分离中稍有拖尾。为改善峰形，参考文献，分别考察了甲醇-0.2％冰醋酸溶液、乙腈-0.2％冰醋酸溶液、乙腈-0.5％冰醋酸溶液，最终选定乙腈-0.5％冰醋酸溶液作为流动相。考察了等度和梯度洗脱，因为样品中色谱峰较多，最终采用梯度洗脱方式分离样品中的槲皮苷，分离度良好。

(5)稳定性考察

取同一份供试品溶液(批号：100302)，分别在0、4、8、12、18、24小时，注入高效液相色谱仪，纪录峰面积，结果表明被测溶液在24小时内稳定，见表7。

表7 稳定性试验结果

(6)稳定性考察

取同一份供试品溶液(批号：100402)，照含量测定项下方法操作，采用3根不同规格的色谱柱测定克泻敏颗粒中槲皮苷的含量，结果见表8。

色谱柱：(1)Hibar C18(5μm，4.6mm×250mm)

(2)Phenomenex(5μm，4.6mm×250mm)

(3)SHISEIDO(5μm，4.6mm×250mm)

表8 不同色谱柱考察结果

(三)采用实施例2确定的方法，取收集到的8批样品，依拟定的方法测定，结果见表9。

表9 含量测定结果

(四)药材的含量测定

取生产所用铁扫帚药材留样(批号：090701)，用于厂家提供的090801等八批克泻敏颗粒的制备，依法测定槲皮苷含量，计算槲皮苷含量的转移率，结果见表10。

表10 药材中槲皮苷含量的转移率

(五)限度的确定

由于铁扫帚质量标准中无槲皮苷的控制，故无法依据转移率计算成品的限度。根据所测的8比样品结果，其平均含量为1.5mg/袋，考虑到产业化及药材来源因素影响，拟以均值的70％定为限度，即每袋含铁扫帚以槲皮苷(C₂₁H₂₀O₁₁)计，不得少于1.0mg。

丸剂中槲皮苷转移率仅为颗粒剂中槲皮苷转移率的约50％，故前者的槲皮苷限度值按铁扫帚投料量折算为后者的50％。这可能是由于两种剂型的制法不一致造成的。上述质量控制方法不仅适用于颗粒剂，同时适用于丸剂。丸剂所用的原料药量与上述颗粒剂所含原料药量相同。

以上对本发明具体实施方式的描述并不限制本发明，本领域技术人员可以根据本发明作出各种改变或变形，只要不脱离本发明的精神，均应属于本发明所附权利要求的范围。

Claims

1.一种单味中草药物颗粒的质量控制及配制方法，其特征在于，主要由以下步骤组成：

2.根据权利要求1所述的单味中草药物颗粒的质量控制及配制方法，其特征在于，药物颗粒采用薄层色谱法鉴定，包括以下步骤：

(1)供试品溶液制备：取本品1.5g，研细，加乙醇25ml，超声处理30分钟，滤过，滤液水浴蒸干，残渣加热水15ml使溶解，滤过，滤液用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次15ml，合并正丁醇，用正丁醇饱和的水15ml洗涤1次，分取正丁醇液，水浴蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，即得；

(2)对照药材溶液的制备取铁扫帚对照药材2g，研细，加乙醚30ml，超声处理20分钟，弃去乙醚液，残渣挥干，加乙醇25ml，超声处理30分钟，滤过，滤液水浴蒸干，残渣加热水15ml使溶解，滤过，滤液用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次15ml，合并正丁醇提取液，再加正丁醇饱和的水15ml洗涤1次，分取正丁醇液，水浴蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，即得；

(3)吸取上述供试品、对照药材溶液各1μl，分别以点于同一聚酰胺薄层板上，以正丁醇-乙醇-冰醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3％三氯化铝乙醇溶液，挥干或热风吹干，置紫外光灯下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的荧光斑点。

3.根据权利要求1所述的单味中草药物颗粒的质量控制及配制方法，其特征在于，药物颗粒含量的测定，包括以下条件和步骤：

(1)对照品溶液的制备：精密称定槲皮苷对照品0.01g，置20ml量瓶中，加甲醇溶解至刻度，精密量取2.5ml，置于50ml量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，即得对照品溶液；

(2)供试品溶液的制备：取同一批样品，研细，取2.5g，精密称定，置50ml锥形瓶中，加甲醇25ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，挥去部分甲醇后，定量转移置5ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，过滤，取续滤液，即得；

(3)测定：分别精密吸取对照品溶液10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

4.根据权利要求1所述的单味中草药物颗粒的质量控制及配制方法，其特征在于，所述药物颗粒还适用于片剂、丸剂、胶囊剂。