CN105837706A - 一种甲壳素的提取方法及甲壳素制品 - Google Patents

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Abstract

本发明属于药物领域，公开了一种甲壳素的提取方法，提取步骤如下：先将新鲜的虾壳清洗干净后，加入浓度为20％的柠檬酸溶液，室温下超声反应30分钟，反应结束后过滤，将虾壳用水洗至中性；加入2.5mol/L氢氧化钠溶液，软皂，持续搅拌6小时，停止搅拌，放置18小时，将壳捞出，再用2.5mol/L氢氧化钠溶液，浸泡24小时，将两次浸泡后的壳捞出，纱布过滤，水洗至中性，稍沥干，加入1mol/L的盐酸溶液，搅拌反应30分钟，再将壳捞出，用1mol/L的盐酸液搅拌反应30分钟，纱布过滤，大量水洗至中性，挤去水分，晒干即得甲壳素，并公开以甲壳素做成复方，还公开了其在制备具有抗急性肾衰药物中的应用。

Description

一种甲壳素的提取方法及甲壳素制品
技术领域
本发明涉及药物制剂技术领域，具体涉及一种甲壳素的提取方法及甲壳素制品。
背景技术
急性肾功能衰竭(Acute Renal Failure，ARF)是由多种原因引起的临床综合征，可见于临床各科病人，发病率高且往往带来严重后果，其特点为短期内(数小时至数天)神功能急剧下降，临床表现为急性少尿(尿量<400mLPd)或无尿(尿量<100mLPd)，体内氮质代谢产物排出产生障碍，迅速出现氮质血症，水及电解质、酸碱平衡紊乱，并引起全身各系统相应功能失调。引起急性肾衰的主要因素是肾血流量的急剧减少，以及由于肾组织缺血引起的氧化应激和细胞损伤，最终导致肾脏组织结构的破坏和功能的恶化。目前临床上尚无公认的治疗急性肾衰有效的药物，仅能通过纠正水电解质平衡，纠正酸中毒等对症治疗措施改善症状，后期还需要通过血液透析维持机体机能。在改善肾脏血流灌注障碍和减轻肾组织损伤方面有明显疗效的临床药物少见。
发明内容
发明目的：为了解决上述问题，本发明的目的在于提供一种甲壳素的提取方法及甲壳素制品。
技术方案：本发明的目的是通过如下的方案实现的：
一种甲壳素的提取方法，提取步骤如下：先将新鲜的虾壳清洗干净后，加入浓度为20％的柠檬酸溶液，室温下超声反应30分钟，反应结束后过滤，将虾壳用水洗至中性；加入2.5mol/L氢氧化钠溶液，软皂，持续搅拌6小时，停止搅拌，放置18小时，将壳捞出，再用2.5mol/L氢氧化钠溶液，浸泡24小时，将两次浸泡后的壳捞出，纱布过滤，水洗至中性，稍沥干，加入1mol/L的盐酸溶液，搅拌反应30分钟，再将壳捞出，用1mol/L的盐酸液搅拌反应30分钟，纱布过滤，大量水洗至中性，挤去水分，晒干即得甲壳素。
所述甲壳素的提取方法，柠檬酸溶液用量为虾壳重量的10倍，氢氧化钠溶液为虾壳重量的20倍，软皂为虾壳重量的3倍。
一种甲壳素制品，它所含的活性成分由下列重量份原料配比制备而成：甲壳素2份、水田七30份、叶下珠35份、大人血七40份、华东木蓝28份、蜈蚣七40份，甲壳素为上述方法制备而得。
所述甲壳素制品，制备方法步骤为：取上述除甲壳素外其他药材合并，加水煎煮两次，合并煎液，浓缩至65℃时相对密度为1.10-1.20，加入乙醇，搅拌，使含醇量按体积百分比计算达65-85％，静置，过滤，滤液减压浓缩至65℃时相对密度为1.20-1.30并回收乙醇，将浓缩液喷雾干燥，所得颗粒粉碎成干浸膏粉，加入甲壳素和辅料，制成所需制剂。
所述甲壳素制品，制备方法中煎煮条件为：第一次加水量为药材重量的8-12倍量，煎煮1-2h，第二次加水量为药材重量的6-10倍量，煎煮1-2h。
所述甲壳素制品，制备方法中喷雾干燥条件为：进风温度为90-110℃，出风温度为60-90℃，物料温度为60-90℃，雾化压力为0.2-0.5兆帕，喷雾速度为1-10ml/s。
所述甲壳素制品在制备抗急性肾衰药物中的应用。
甲壳质(C8H13O5N)n，又称甲壳素、几丁质，英文名Chitin。1811年法国学者布拉克诺(Braconno)发现，1823年由欧吉尔(Odier)从甲壳动物外壳中提取。淡米黄色至白色，溶于浓盐酸/磷酸/硫酸/乙酸,不溶于碱及其它有机溶剂,也不溶于水。甲壳质的脱乙酰基衍生物(Chitosan derivatives)壳聚糖(chitosan)不溶于水，可溶于部分稀酸。甲壳素具有抗癌抑制癌、瘤细胞转移，提高人体免疫力及护肝解毒作用。尤其适用于糖尿病、肝肾病、高血压、肥胖等症，有利于预防癌细胞病变和辅助放化疗治疗肿瘤疾病。济南海得贝海洋生物工程有限公司生产。
水田七为蒟蒻薯科植物裂果薯的块茎，拉丁学名SchizocapsaplantagineaHanceTaccaplantaginea，清热解毒，散瘀消肿，理气止痛，截疟。用于咽喉肿痛，急性胃肠炎，泌尿道感染，牙痛，慢性胃炎，胃、十二指肠溃疡，风湿性关节炎，月经不调，疟疾，跌打损伤；外用治疮疡肿毒，外伤出血。
叶下珠，学名：Phyllanthus urinaria L.)，一年生草本植物，高数寸至尺许。茎带紫红色，有纵棱。叶互生，作复瓦状排列，形成二行，很似羽状复叶，叶片矩圆形，长二、三分，全绿，先端尖或钝，基部圆形，几无叶柄。夏秋沿茎叶下面开白色小花，无花柄。花后结扁圆形小果，形如小珠，排列于假复叶下面。清热利尿，明目，消积。用于肾炎水肿，泌尿系感染、结石，肠炎，痢疾，小二疳积，眼角膜炎，黄疸型肝炎；外用治青竹蛇咬伤
大人血七为罂粟科金罂粟属植物人血草Stylophorum lasiocarpum(Oliv.)Fedde，以全草入药。秋季采集，晒干。苦、涩，平。活血调经，散淤止痛。用于月经不调，跌打损伤。
华东木蓝为豆科木蓝属植物华东木蓝Indigofera fortunei Craib，以根和叶入药。春秋采，洗净切碎，晒干。清热解毒，消肿止痛。流行性乙型脑炎，咽喉肿痛，肺炎，蛇咬伤。本发明采用全草入药。
蜈蚣七为兰科杓兰属植物大花杓兰Cypripedium macranthum Swartz，以根、根状茎和花入药。秋季采挖，洗净晒干。利尿消肿，活血祛瘀，祛风镇痛。用于全身浮肿，下肢水肿，小便不利，白带，风湿腰腿痛，跌打损伤。本发明以根入药。其余为药典品种。
有益效果：本发明中水田七、叶下珠清热解毒，散瘀消肿，理气止痛为君药，大人血七、华东木蓝、蜈蚣七活血调经，散淤止痛为臣药，甲壳素为佐使药，诸药相合，用于治疗急性肾衰。
具体实施方式
以下通过实施例形式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明，但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例，凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
实施例1：取新鲜的虾壳10kg清洗干净后，加入浓度为20％的柠檬酸溶液，室温下超声反应30分钟，反应结束后过滤，将虾壳用水洗至中性；加入2.5mol/L氢氧化钠溶液，软皂，持续搅拌6小时，停止搅拌，放置18小时，将壳捞出，再用2.5mol/L氢氧化钠溶液，浸泡24小时，将两次浸泡后的壳捞出，纱布过滤，水洗至中性，稍沥干，加入1mol/L的盐酸溶液，搅拌反应30分钟，再将壳捞出，用1mol/L的盐酸液搅拌反应30分钟，纱布过滤，大量水洗至中性，挤去水分，晒干即得甲壳素。所述甲壳素的提取方法，柠檬酸溶液用量为虾壳重量的10倍，氢氧化钠溶液为虾壳重量的20倍，软皂为虾壳重量的3倍。
实施例2：取新鲜的虾壳20kg清洗干净后，加入浓度为20％的柠檬酸溶液，室温下超声反应30分钟，反应结束后过滤，将虾壳用水洗至中性；加入2.5mol/L氢氧化钠溶液，软皂，持续搅拌6小时，停止搅拌，放置18小时，将壳捞出，再用2.5mol/L氢氧化钠溶液，浸泡24小时，将两次浸泡后的壳捞出，纱布过滤，水洗至中性，稍沥干，加入1mol/L的盐酸溶液，搅拌反应30分钟，再将壳捞出，用1mol/L的盐酸液搅拌反应30分钟，纱布过滤，大量水洗至中性，挤去水分，晒干即得甲壳素。所述甲壳素的提取方法，柠檬酸溶液用量为虾壳重量的10倍，氢氧化钠溶液为虾壳重量的20倍，软皂为虾壳重量的3倍。
实施例3：取新鲜的虾壳30kg清洗干净后，加入浓度为20％的柠檬酸溶液，室温下超声反应30分钟，反应结束后过滤，将虾壳用水洗至中性；加入2.5mol/L氢氧化钠溶液，软皂，持续搅拌6小时，停止搅拌，放置18小时，将壳捞出，再用2.5mol/L氢氧化钠溶液，浸泡24小时，将两次浸泡后的壳捞出，纱布过滤，水洗至中性，稍沥干，加入1mol/L的盐酸溶液，搅拌反应30分钟，再将壳捞出，用1mol/L的盐酸液搅拌反应30分钟，纱布过滤，大量水洗至中性，挤去水分，晒干即得甲壳素。所述甲壳素的提取方法，柠檬酸溶液用量为虾壳重量的10倍，氢氧化钠溶液为虾壳重量的20倍，软皂为虾壳重量的3倍。
实施例4：取水田七30g、叶下珠35g、大人血七40g、华东木蓝28g、蜈蚣七40g药材混合，加水煎煮两次，第一次加水为药材重量的8倍量，煎煮1.5h，第二次加水为药材重量的6倍量，煎煮1h，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.10(65℃)，加适量乙醇使含醇量(体积分数)达65％，搅拌，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度1.10(65℃)的浸膏，经喷雾干燥(条件为进风温度为100℃，出风温度为80℃，物料温度为70℃，雾化压力为0.2兆帕，喷雾速度为5ml/s。)，粉碎成干浸膏粉，再加入上述实施例1制备的甲壳素2g、糊精50g，用适量80％乙醇润湿，制软材，过14目筛制粒，70℃干燥，60目整粒，得颗粒剂。
实施例5：取水田七30g、叶下珠35g、大人血七40g、华东木蓝28g、蜈蚣七40g药材混合，加水煎煮两次，第次加水为药材重量的10倍量，煎煮2h，第二次加水为药材重量的8倍量，煎煮1h，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.15(65℃)，加适量乙醇使含醇量(体积分数)达75％，搅拌，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度1.25(65℃)的浸膏，经喷雾干燥(条件为进风温度为120℃，出风温度为90℃，物料温度为80℃，雾化压力为0.3兆帕，喷雾速度为7.5/s。)，粉碎成干浸膏粉，再加入上述实施例1制备的甲壳素2g、淀粉50g，混合均匀，用适量80％乙醇润湿，制软材，过30目筛制粒，于70～80℃干燥，用60目筛整粒，压片，包糖衣，分装，外包装，送检合格，得成品。
实施例6：取水田七30g、叶下珠35g、大人血七40g、华东木蓝28g、蜈蚣七40g药材混合，加水煎煮两次，第一次加水为药材重量的10倍量，煎煮1.5h，第二次加水为药材重量的8倍量，煎煮1.5h，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.15(65℃)，加适量乙醇使含醇量(体积分数)达75％，搅拌，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度1.25(65℃)的浸膏，经喷雾干燥(条件为进风温度为120℃，出风温度为90℃，物料温度为90℃，雾化压力为0.4兆帕，喷雾速度为7.5/s。)，粉碎成干浸膏粉，过6号筛，加入上述实施例1制备的甲壳素2g，再装入1号胶囊即可得成品。
实施例7：本发明对急性肾衰大鼠的治疗作用
试验药品：按照上述实施例1的方法制备试验药品。
方法：采用肌肉注射甘油致急性肾功能衰竭大鼠动物模型。选用180～220g健康雄性SD大鼠60只，随机分为5组：假手术组(肌肉注射生理盐水)；模型组(肌肉注射甘油)；本发明Ⅰ组(3g生药量/Kg))；本发明Ⅱ组(6g生药量/Kg))；本发明Ⅲ组(12g生药量/Kg))，各组大鼠在甘油造模后立即尾静脉注射生理盐水或口服本发明，12和24小时后再给药一次。
观察指标：60只大鼠末次给予本发明或生理盐水后放入代谢笼收集24小时尿，留尿后6小时用4％水合氯醛腹腔注射麻醉，采用激光多普勒血流仪测定造模后及治疗后双侧肾脏血流量，取平均值作为单只动物肾血流量；取血制备血清，测定血BUN和Cre；取肾脏，制备10％肾皮质匀浆，测定肾皮质匀浆MDA、GSH、NO(均按试剂盒说明书操作)。
实验结果：表1本发明对急性肾衰小鼠肾血流量的影响
*P<0.05与急性肾衰模型组对比
实施例2：本发明对急性肾衰小鼠肾功能具保护作用
1、试验药品：按照上述实施例1的方法制备试验药品。
2、方法：模型组大鼠较假手术组大鼠24小时尿量显著减少，分别为5.65±0.97ml和14.78±4.80ml；中、高剂量本发明组24小时尿量显著高于模型组(P<0.05)，三个药物治疗组的尿量具有剂量依赖性，分别为低剂量组6.26±2.75ml，中剂量组8.49±1.72ml，高剂量组9.23±1.47ml。说明本发明能改善急性肾衰大鼠的少尿症状。急性肾衰大鼠静脉注射生理盐水24小时后，血清BUN为28.44±1.78mmol/L，Cre为175.97±16.96umol/L，明显高于假手术组，说明模型组动物肾功能损害严重。中、高剂量本发明能剂量依赖性地改善急性肾衰大鼠的肾功能(P<0.05)。
结论：本发明能够改善急性肾衰时的无尿或少尿症状，保护肾脏的功能，可以用来制备抗急性肾衰药物。

Claims (7)

1.一种甲壳素的提取方法，其特征在于，提取步骤如下：先将新鲜的虾壳清洗干净后，加入浓度为20％的柠檬酸溶液，室温下超声反应30分钟，反应结束后过滤，将虾壳用水洗至中性；加入2.5mol/L氢氧化钠溶液，软皂，持续搅拌6小时，停止搅拌，放置18小时，将壳捞出，再用2.5mol/L氢氧化钠溶液，浸泡24小时，将两次浸泡后的壳捞出，纱布过滤，水洗至中性，稍沥干，加入1mol/L的盐酸溶液，搅拌反应30分钟，再将壳捞出，用1mol/L的盐酸液搅拌反应30分钟，纱布过滤，大量水洗至中性，挤去水分，晒干即得甲壳素。
2.如权利要求1所述甲壳素的提取方法，其特征在于，柠檬酸溶液用量为虾壳重量的10倍，氢氧化钠溶液为虾壳重量的20倍，软皂为虾壳重量的3倍。
3.一种甲壳素制品，其特征在于，它所含的活性成分由下列重量份原料配比制备而成：甲壳素2份、水田七30份、叶下珠35份、大人血七40份、华东木蓝28份、蜈蚣七40份，甲壳素为上述权利要求1的方法制备而得。
4.如权利要求3所述甲壳素制品，其特征在于，制备方法步骤为：取上述除甲壳素外其他药材合并，加水煎煮两次，合并煎液，浓缩至65℃时相对密度为1.10-1.20，加入乙醇，搅拌，使含醇量按体积百分比计算达65-85％，静置，过滤，滤液减压浓缩至65℃时相对密度为1.20-1.30并回收乙醇，将浓缩液喷雾干燥，所得颗粒粉碎成干浸膏粉，加入甲壳素和辅料，制成所需制剂。
5.如权利要求4所述甲壳素制品，其特征在于，制备方法中煎煮条件为：第一次加水量为药材重量的8-12倍量，煎煮1-2h，第二次加水量为药材重量的6-10倍量，煎煮1-2h。
6.如权利要求4所述甲壳素制品，其特征在于，制备方法中喷雾干燥条件为：进风温度为90-110℃，出风温度为60-90℃，物料温度为60-90℃，雾化压力为0.2-0.5兆帕，喷雾速度为1-10ml/s。
7.如权利要求3所述甲壳素制品在抗急性肾衰药物中的应用。
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