CN105830923A - 一种黄樟油素型樟树组培芽的生根方法 - Google Patents
一种黄樟油素型樟树组培芽的生根方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN105830923A CN105830923A CN201610222360.5A CN201610222360A CN105830923A CN 105830923 A CN105830923 A CN 105830923A CN 201610222360 A CN201610222360 A CN 201610222360A CN 105830923 A CN105830923 A CN 105830923A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- bud
- safrole
- root
- cinnamomi camphorae
- lignum cinnamomi
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 17
- 241000723346 Cinnamomum camphora Species 0.000 title abstract description 6
- DSSYKIVIOFKYAU-XCBNKYQSSA-N (R)-camphor Chemical compound C1C[C@@]2(C)C(=O)C[C@@H]1C2(C)C DSSYKIVIOFKYAU-XCBNKYQSSA-N 0.000 title abstract description 5
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 claims abstract description 46
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 claims abstract description 16
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 claims abstract description 16
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 claims abstract description 16
- 239000008174 sterile solution Substances 0.000 claims abstract description 11
- ZMQAAUBTXCXRIC-UHFFFAOYSA-N safrole Chemical compound C=CCC1=CC=C2OCOC2=C1 ZMQAAUBTXCXRIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 62
- 238000005286 illumination Methods 0.000 claims description 24
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 18
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 12
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N Niacin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- FGIUAXJPYTZDNR-UHFFFAOYSA-N potassium nitrate Chemical compound [K+].[O-][N+]([O-])=O FGIUAXJPYTZDNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 claims description 8
- SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N Hexa-Ac-myo-Inositol Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C1OC(C)=O SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 7
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 claims description 7
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 claims description 7
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 7
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims description 6
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 claims description 6
- 239000007836 KH2PO4 Substances 0.000 claims description 6
- 229910004619 Na2MoO4 Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims description 6
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims description 6
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims description 6
- KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N boric acid Chemical compound OB(O)O KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- LLSDKQJKOVVTOJ-UHFFFAOYSA-L calcium chloride dihydrate Chemical compound O.O.[Cl-].[Cl-].[Ca+2] LLSDKQJKOVVTOJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 6
- ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L copper(II) sulfate Chemical compound [Cu+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 6
- 229910000366 copper(II) sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 229910000359 iron(II) sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 6
- SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L manganese(II) sulfate Chemical compound [Mn+2].[O-]S([O-])(=O)=O SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 6
- 229910000357 manganese(II) sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 235000001968 nicotinic acid Nutrition 0.000 claims description 6
- 229960003512 nicotinic acid Drugs 0.000 claims description 6
- 239000011664 nicotinic acid Substances 0.000 claims description 6
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 6
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 6
- 229960004172 pyridoxine hydrochloride Drugs 0.000 claims description 6
- 235000019171 pyridoxine hydrochloride Nutrition 0.000 claims description 6
- 239000011764 pyridoxine hydrochloride Substances 0.000 claims description 6
- ZUFQODAHGAHPFQ-UHFFFAOYSA-N pyridoxine hydrochloride Chemical compound Cl.CC1=NC=C(CO)C(CO)=C1O ZUFQODAHGAHPFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000011684 sodium molybdate Substances 0.000 claims description 6
- TVXXNOYZHKPKGW-UHFFFAOYSA-N sodium molybdate (anhydrous) Chemical compound [Na+].[Na+].[O-][Mo]([O-])(=O)=O TVXXNOYZHKPKGW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims description 6
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims description 6
- GDSOZVZXVXTJMI-SNAWJCMRSA-N (e)-1-methylbut-1-ene-1,2,4-tricarboxylic acid Chemical compound OC(=O)C(/C)=C(C(O)=O)\CCC(O)=O GDSOZVZXVXTJMI-SNAWJCMRSA-N 0.000 claims 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 abstract description 7
- 238000002791 soaking Methods 0.000 abstract description 5
- 239000002304 perfume Substances 0.000 abstract description 4
- 239000010672 sassafras oil Substances 0.000 abstract description 4
- 238000010276 construction Methods 0.000 abstract description 3
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 abstract description 3
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 abstract description 2
- 238000009395 breeding Methods 0.000 abstract 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000012883 rooting culture medium Substances 0.000 abstract 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 5
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 5
- 229960000411 camphor oil Drugs 0.000 description 4
- 239000010624 camphor oil Substances 0.000 description 4
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 4
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 3
- 230000035584 blastogenesis Effects 0.000 description 3
- SATCULPHIDQDRE-UHFFFAOYSA-N piperonal Chemical compound O=CC1=CC=C2OCOC2=C1 SATCULPHIDQDRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FIPWRIJSWJWJAI-UHFFFAOYSA-N Butyl carbitol 6-propylpiperonyl ether Chemical compound C1=C(CCC)C(COCCOCCOCCCC)=CC2=C1OCO2 FIPWRIJSWJWJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 229960005235 piperonyl butoxide Drugs 0.000 description 2
- 235000013599 spices Nutrition 0.000 description 2
- MWOOGOJBHIARFG-UHFFFAOYSA-N vanillin Chemical compound COC1=CC(C=O)=CC=C1O MWOOGOJBHIARFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FGQOOHJZONJGDT-UHFFFAOYSA-N vanillin Natural products COC1=CC(O)=CC(C=O)=C1 FGQOOHJZONJGDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000012141 vanillin Nutrition 0.000 description 2
- TZJLGGWGVLADDN-UHFFFAOYSA-N 4-(3,4-Methylenedioxyphenyl)-2-butanone Chemical compound CC(=O)CCC1=CC=C2OCOC2=C1 TZJLGGWGVLADDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000123847 Cinnamomum parthenoxylon Species 0.000 description 1
- 241000218195 Lauraceae Species 0.000 description 1
- 235000004263 Ocotea pretiosa Nutrition 0.000 description 1
- -1 PB) Chemical compound 0.000 description 1
- 241000205625 Sassafras Species 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L iron(2+) sulfate (anhydrous) Chemical compound [Fe+2].[O-]S([O-])(=O)=O BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 239000012450 pharmaceutical intermediate Substances 0.000 description 1
- 229940081310 piperonal Drugs 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 230000002787 reinforcement Effects 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000012090 tissue culture technique Methods 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002023 wood Substances 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
- A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
- A01H4/008—Methods for regeneration to complete plants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
- A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
- A01H4/001—Culture apparatus for tissue culture
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Botany (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Cultivation Of Plants (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明公开了一种黄樟油素型樟树组培芽的生根方法，选取经常规组培中壮芽培养35‑40d的黄樟油素型樟树继代芽，剪切继代芽丛中生长健壮、高度≥2cm的单芽，插入抗坏血酸无菌溶液中浸泡进行预处理，再将预处理后的单芽垂直插入生根培养基中，并在特定的光温环境中进行生根培养，最后搬至自然环境条件下的育苗棚中炼苗，得到黄樟油素型樟树苗木。本发明通过对组培芽的预处理，降低切口处的黄樟油含量，缩短生根周期，生根率高，根系多，质量好，组培生根苗移栽成活率高，可实现组培产业化育苗，为天然香料人工无性系林的建设提供优质种苗，具有较好的经济效益、社会效益和生态效益。
Description
技术领域
本发明属于植物繁殖技术领域，涉及樟树组织培养技术，尤其是涉及一种黄樟油素型樟树组培芽的生根方法。
背景技术
黄樟油素型樟树是樟科樟树属樟树类的一种化学型樟树（Cinnamomum camphora(L.)Presl）又名香樟，国家Ⅱ级保护植物，主要分布于江西、湖南、广东、福建、海南、广西、四川、台湾等地，越南、韩国及日本也有分布。生长于丘陵及低山地带。是一种集材用、油用、香精香料、药用、风景园林等于一体的多用途优良树种。黄樟油素具有树木特有的香气，是一种极为有用的天然香，是合成洋茉莉醛( Heliotropine) 、胡椒基丁醚( Piperonylbutoxide，PB) 、胡椒基丙酮( Ducinylrecryst) 、香兰素( Vanillin) 等产品的理想原料，也是重要制药中间体，广泛用于轻化、香料、医药等工业生产中。随着社会经济的水平提高，生活质量的提升，人们回归大自然意识的加强，以天然黄樟油素为原料合成的绿色原生态产品价格一路盘升，市场发展前景看好。传统的黄樟油素从树根、树干中提取, 大量伐树，挖根提油。这种“杀鸡取卵，挖根取料”的方法，一方面破坏了生态环境，另一方面使资源不断匮乏，不符合国家对自然资源特续利用的要求。开发留主干，砍伐樟树枝叶提取黄樟树油素的方法，既可避免掠夺式利用黄樟树油素原料资源，又有利于林地水土保持，培育樟树珍贵大径材，资源最大化的利用，天然香料人工无性系林的建设，优质种苗的提供显得尤为重要。
发明内容
本发明的目的是针对现有材油两用黄樟油型樟树组织继代芽生根困难，生根率低，始根时间长，发根数少，根系容易发黑等问题,提供一种生根快、效果好的黄樟油素型樟树组培芽的生根方法。
为了实现上述发明目的，本发明的技术方案如下：
一种黄樟油素型樟树组培芽的生根方法，其特征在于：选取经常规组培中壮芽培养35-40d的黄樟油素型樟树继代芽，剪切继代芽丛中生长健壮、高度≥2cm的单芽，插入抗坏血酸无菌溶液中浸泡进行预处理，再将预处理后的单芽垂直插入生根培养基中，并在特定的光温环境中进行生根培养，最后搬至自然环境条件下的育苗棚中炼苗，得到黄樟油素型樟树苗木；具体操作步骤如下：
（1）取材：选取经常规组培中壮芽培养35-40d的黄樟油素型樟树继代芽，消毒瓶子外表后，在超净工作台上的无菌空间内，选取继代芽丛中生长健壮、高度≥2cm的单芽，于节下1-2mm处剪切，清除基部叶片和叶柄，备用；
（2）预处理：将步骤（1）得到的单芽插入抗坏血酸（VC）50mg/L无菌溶液中浸泡1.5-2h；
（3）生根培养：将经过步骤（2）预处理的单芽垂直插入生根培养基中；在特定的光温环境中进行生根培养；
（4）炼苗：经步骤（3）生根培养后的单芽长出根系后，搬至自然环境条件下的育苗棚中炼苗，得到黄樟油素型樟树苗木。
以上所述的生根培养基的配方为：改良ER + NAA 2-3mg/L + ABT1 0.5-1mg/L +抗坏血酸（ VC）30mg/L + 蔗糖 15g/L + 琼脂粉 5.8g/L。
以上将配制好的生根培养基用1N盐酸和氢氧化钠调至pH值为6.0-6.5，分装至250ml的广口玻璃瓶内，每瓶分装30ml的生根培养基，使用前，在1.1帕压/121℃下高压灭菌20min。
以上所述的改良ER培养基的配方为：NH4NO3 1200mg/L + KNO3 1900mg/L +CaCl2.2H2O 440mg/L + MgSO4..7H2O 370mg/L + KH2PO4 340mg/L + H3BO3 0.63mg/L +MnSO4..4H2O 22.3mg/L + ZnSO4.4H2O 8.64H2Omg/L + Na2MoO4.H2O 0.025mg/L +CuSO4..5H2O 0.0025mg/L + CoCl2.6H2O 0.0025mg/L + FeSO4 27.8mg/L + NaEDTA37.3mg/L + 肌醇 50mg/L + 烟酸 0.5mg/L + 盐酸吡哆醇 0.5mg/L + 甘氨酸 2mg/L+。
以上步骤（2）中单芽插入抗坏血酸（VC）无菌溶液的深度为芽茎下端基部0.4-0.5cm处。
以上步骤（3）所述的特定光温条件先为20-22℃，光照强度2000-3000lux，光照15-16h/d,培养5-7d；然后在28-30℃，光照强度4000-6000lux，光照12-14h/d，培养10-12d形成根点；继续培养18-20d，86%以上的单芽长出根系，3-5条/株。
相对于现有技术，本发明具有的优点和积极效果如下：
1、本发明筛选出一个适宜黄樟油素型樟树组培芽生根技术方法，将组培继代壮芽丛转瓶时将高≥2cm的单芽剪下经过处理后插入生根培养基中形成再生植株，芽苗壮健，活力旺盛，生根率及移栽成活率显著提高；同时可以将剩余小芽接入增殖扩繁，再转入壮苗培养基中，进行生根，从而有效的完成组培苗快繁的培养过程。
2、本发明对ER基本培养基进行了改良，同时重点调整了与黄樟油素型樟树出芽壮芽相关锌微量元素和有机成分肌醇，使得培养基更科学，更有针对性，更易促使黄樟油素型樟树继代芽生根，效果显著。
3、本发明的在特定的光温条件下生根培养，适应黄樟油素型樟树组培苗的生长特性，促进苗木的生长。
4、本发明通过对组培芽的预处理，降低切口处的黄樟油含量，缩短生根周期，生根率高，根系多，质量好，组培生根苗移栽成活率高，可实现组培产业化育苗，为天然香料人工无性系林的建设提供优质种苗，具有较好的经济效益、社会效益和生态效益。
附图说明
图1为本发明取用的黄樟油素型樟树继代芽。
图2为本发明黄樟油素型樟树继代芽生根培养情况。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步说明。
实施例1：
选取经常规组培中壮芽培养35d的黄樟油素型樟树继代芽，消毒瓶子外表后，在超净工作台上的无菌空间内，选取继代芽丛中生长健壮、高度≥2cm的单芽，于节下1-2mm处剪切，清除基部叶片和叶柄。然后将单芽的芽茎下端基部0.4-0.5cm处插入抗坏血酸（VC）50mg/L无菌溶液中浸泡1.5h，进行生根预处理。
将经过预处理的单芽垂直插入生根培养基中。所述的生根培养基的配方为：改良ER + NAA 2-3mg/L + ABT1 0.5-1mg/L + 抗坏血酸（ VC）30mg/L + 蔗糖 15g/L + 琼脂粉5.8g/L。其中，改良ER培养基的配方为：NH4NO3 1200mg/L + KNO3 1900mg/L + CaCl2.2H2O440mg/L + MgSO4..7H2O 370mg/L + KH2PO4 340mg/L + H3BO3 0.63mg/L + MnSO4..4H2O22.3mg/L + ZnSO4.4H2O 8.64H2Omg/L + Na2MoO4.H2O 0.025mg/L + CuSO4..5H2O0.0025mg/L + CoCl2.6H2O 0.0025mg/L + FeSO4 27.8mg/L + NaEDTA 37.3mg/L + 肌醇50mg/L + 烟酸 0.5mg/L + 盐酸吡哆醇 0.5mg/L + 甘氨酸 2mg/L。将配制好的生根培养基用1N盐酸和氢氧化钠调至pH值为6.0-6.5，分装至250ml的广口玻璃瓶内，每瓶分装30ml的生根培养基，使用前，在1.1帕压/121℃下高压灭菌20min。
将插好的生根瓶苗置于特定的光温条件下培养：初始条件为20℃，光照强度2000-3000lux，光照16h/d，培养5d；然后在28℃，光照强度5000-6000lux，光照14h/d，培养10d形成根点；继续培养18d，86%的单芽长出根系，3-5条/株。
待生根培养后的单芽长出根系后，搬至自然环境条件下的育苗棚中炼苗，得到黄樟油素型樟树苗木。
实施例2：
选取经常规组培中壮芽培养36d的黄樟油素型樟树继代芽，消毒瓶子外表后，在超净工作台上的无菌空间内，选取继代芽丛中生长健壮、高度≥2cm的单芽，于节下1-2mm处剪切，清除基部叶片和叶柄。然后将单芽的芽茎下端基部0.4-0.5cm处插入抗坏血酸（VC）50mg/L无菌溶液中浸泡1.5h，进行生根预处理。
将经过预处理的单芽垂直插入生根培养基中。所述的生根培养基的配方为：改良ER + NAA 2-3mg/L + ABT1 0.5-1mg/L + 抗坏血酸（ VC）30mg/L + 蔗糖 15g/L + 琼脂粉5.8g/L。其中，改良ER培养基的配方为：NH4NO3 1200mg/L + KNO3 1900mg/L + CaCl2.2H2O440mg/L + MgSO4..7H2O 370mg/L + KH2PO4 340mg/L + H3BO3 0.63mg/L + MnSO4..4H2O22.3mg/L + ZnSO4.4H2O 8.64H2Omg/L + Na2MoO4.H2O 0.025mg/L + CuSO4..5H2O0.0025mg/L + CoCl2.6H2O 0.0025mg/L + FeSO4 27.8mg/L + NaEDTA 37.3mg/L + 肌醇50mg/L + 烟酸 0.5mg/L + 盐酸吡哆醇 0.5mg/L + 甘氨酸 2mg/L。将配制好的生根培养基用1N盐酸和氢氧化钠调至pH值为6.0-6.5，分装至250ml的广口玻璃瓶内，每瓶分装30ml的生根培养基，使用前，在1.1帕压/121℃下高压灭菌20min。
将插好的生根瓶苗置于特定的光温条件下培养：初始条件为22℃，光照强度2000-3000lux，光照15h/d，培养6d；然后在28℃，光照强度5000-6000lux，光照12h/d，培养10d形成根点；继续培养18d，88.5%的单芽长出根系，3-5条/株。
待生根培养后的单芽长出根系后，搬至自然环境条件下的育苗棚中炼苗，得到黄樟油素型樟树苗木。
实施例3：
选取经常规组培中壮芽培养38d的黄樟油素型樟树继代芽，消毒瓶子外表后，在超净工作台上的无菌空间内，选取继代芽丛中生长健壮、高度≥2cm的单芽，于节下1-2mm处剪切，清除基部叶片和叶柄。然后将单芽的芽茎下端基部0.4-0.5cm处插入抗坏血酸（VC）50mg/L无菌溶液中浸泡2h，进行生根预处理。
将经过预处理的单芽垂直插入生根培养基中。所述的生根培养基的配方为：改良ER + NAA 2-3mg/L + ABT1 0.5-1mg/L + 抗坏血酸（ VC）30mg/L + 蔗糖 15g/L + 琼脂粉5.8g/L。其中，改良ER培养基的配方为：NH4NO3 1200mg/L + KNO3 1900mg/L + CaCl2.2H2O440mg/L + MgSO4..7H2O 370mg/L + KH2PO4 340mg/L + H3BO3 0.63mg/L + MnSO4..4H2O22.3mg/L + ZnSO4.4H2O 8.64H2Omg/L + Na2MoO4.H2O 0.025mg/L + CuSO4..5H2O0.0025mg/L + CoCl2.6H2O 0.0025mg/L + FeSO4 27.8mg/L + NaEDTA 37.3mg/L + 肌醇50mg/L + 烟酸 0.5mg/L + 盐酸吡哆醇 0.5mg/L + 甘氨酸 2mg/L。将配制好的生根培养基用1N盐酸和氢氧化钠调至pH值为6.0-6.5，分装至250ml的广口玻璃瓶内，每瓶分装30ml的生根培养基，使用前，在1.1帕压/121℃下高压灭菌20min。
将插好的生根瓶苗置于特定的光温条件下培养：初始条件为22℃，光照强度2000-3000lux，光照16h/d，培养7d；然后在29℃，光照强度4000-5000lux，光照13h/d，培养11d形成根点；继续培养19d，87.5%的单芽长出根系，3-5条/株。
待生根培养后的单芽长出根系后，搬至自然环境条件下的育苗棚中炼苗，得到黄樟油素型樟树苗木。
实施例4：
选取经常规组培中壮芽培养40d的黄樟油素型樟树继代芽，消毒瓶子外表后，在超净工作台上的无菌空间内，选取继代芽丛中生长健壮、高度≥2cm的单芽，于节下1-2mm处剪切，清除基部叶片和叶柄。然后将单芽的芽茎下端基部0.4-0.5cm处插入抗坏血酸（VC）50mg/L无菌溶液中浸泡2h，进行生根预处理。
将经过预处理的单芽垂直插入生根培养基中。所述的生根培养基的配方为：改良ER + NAA 2-3mg/L + ABT1 0.5-1mg/L + 抗坏血酸（ VC）30mg/L + 蔗糖 15g/L + 琼脂粉5.8g/L。其中，改良ER培养基的配方为：NH4NO3 1200mg/L + KNO3 1900mg/L + CaCl2.2H2O440mg/L + MgSO4..7H2O 370mg/L + KH2PO4 340mg/L + H3BO3 0.63mg/L + MnSO4..4H2O22.3mg/L + ZnSO4.4H2O 8.64H2Omg/L + Na2MoO4.H2O 0.025mg/L + CuSO4..5H2O0.0025mg/L + CoCl2.6H2O 0.0025mg/L + FeSO4 27.8mg/L + NaEDTA 37.3mg/L + 肌醇50mg/L + 烟酸 0.5mg/L + 盐酸吡哆醇 0.5mg/L + 甘氨酸 2mg/L。将配制好的生根培养基用1N盐酸和氢氧化钠调至pH值为6.0-6.5，分装至250ml的广口玻璃瓶内，每瓶分装30ml的生根培养基，使用前，在1.1帕压/121℃下高压灭菌20min。
将插好的生根瓶苗置于特定的光温条件下培养：初始条件为21℃，光照强度2000-3000lux，光照16h/d，培养5d；然后在30℃，光照强度4000-5000lux，光照12h/d，培养12d形成根点；继续培养20d，88%的单芽长出根系，3-5条/株。
待生根培养后的单芽长出根系后，搬至自然环境条件下的育苗棚中炼苗，得到黄樟油素型樟树苗木。
Claims (6)
1.一种黄樟油素型樟树组培芽的生根方法，其特征在于：选取经常规组培中壮芽培养35-40d的黄樟油素型樟树继代芽，剪切继代芽丛中生长健壮、高度≥2cm的单芽，插入抗坏血酸无菌溶液中浸泡进行预处理，再将预处理后的单芽垂直插入生根培养基中，并在特定的光温环境中进行生根培养，最后搬至自然环境条件下的育苗棚中炼苗，得到黄樟油素型樟树苗木；具体操作步骤如下：
（1）取材：选取经常规组培中壮芽培养35-40d的黄樟油素型樟树继代芽，消毒瓶子外表后，在超净工作台上的无菌空间内，选取继代芽丛中生长健壮、高度≥2cm的单芽，于节下1-2mm处剪切，清除基部叶片和叶柄，备用；
（2）预处理：将步骤（1）得到的单芽插入抗坏血酸（VC）50mg/L无菌溶液中浸泡1.5-2h；
（3）生根培养：将经过步骤（2）预处理的单芽垂直插入生根培养基中；在特定的光温环境中进行生根培养；
（4）炼苗：经步骤（3）生根培养后的单芽长出根系后，搬至自然环境条件下的育苗棚中炼苗，得到黄樟油素型樟树苗木。
2.根据权利要求1所述的一种黄樟油素型樟树组培芽的生根方法，其特征在于：所述的生根培养基的配方为：改良ER + NAA 2-3mg/L + ABT1 0.5-1mg/L + 抗坏血酸（ VC）30mg/L+ 蔗糖 15g/L + 琼脂粉 5.8g/L。
3.根据权利要求1或2任一所述的一种黄樟油素型樟树组培芽的生根方法，其特征在于：将配制好的生根培养基用1N盐酸和氢氧化钠调至pH值为6.0-6.5，分装至250ml的广口玻璃瓶内，每瓶分装30ml的生根培养基，使用前，在1.1帕压/121℃下高压灭菌20min。
4.根据权利要求1所述的一种黄樟油素型樟树组培芽的生根方法，其特征在于：所述的改良ER培养基的配方为：NH4NO3 1200mg/L + KNO3 1900mg/L + CaCl2.2H2O 440mg/L +MgSO4..7H2O 370mg/L + KH2PO4 340mg/L + H3BO3 0.63mg/L + MnSO4..4H2O 22.3mg/L +ZnSO4.4H2O 8.64H2Omg/L + Na2MoO4.H2O 0.025mg/L + CuSO4..5H2O 0.0025mg/L +CoCl2.6H2O 0.0025mg/L + FeSO4 27.8mg/L + NaEDTA 37.3mg/L + 肌醇 50mg/L + 烟酸0.5mg/L + 盐酸吡哆醇 0.5mg/L + 甘氨酸 2mg/L+。
5.根据权利要求1所述的一种黄樟油素型樟树组培芽的生根方法，其特征在于：步骤（2）中单芽插入抗坏血酸（VC）无菌溶液的深度为芽茎下端基部0.4-0.5cm处。
6.根据权利要求1所述的一种黄樟油素型樟树组培芽的生根方法，其特征在于：步骤（3）所述的特定光温条件先为20-22℃，光照强度2000-3000lux，光照15-16h/d,培养5-7d；然后在28-30℃，光照强度4000-6000lux，光照12-14h/d，培养10-12d形成根点；继续培养18-20d，86%以上的单芽长出根系，3-5条/株。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610222360.5A CN105830923B (zh) | 2016-04-12 | 2016-04-12 | 一种黄樟油素型樟树组培芽的生根方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610222360.5A CN105830923B (zh) | 2016-04-12 | 2016-04-12 | 一种黄樟油素型樟树组培芽的生根方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN105830923A true CN105830923A (zh) | 2016-08-10 |
| CN105830923B CN105830923B (zh) | 2018-04-17 |
Family
ID=56597986
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201610222360.5A Expired - Fee Related CN105830923B (zh) | 2016-04-12 | 2016-04-12 | 一种黄樟油素型樟树组培芽的生根方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN105830923B (zh) |
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106172018A (zh) * | 2016-10-17 | 2016-12-07 | 柳州玲通科技有限责任公司 | 一种美叶柯组培苗生根诱导方法 |
| CN106359103A (zh) * | 2016-10-17 | 2017-02-01 | 柳州玲通科技有限责任公司 | 一种万宁柯组培苗生根诱导方法 |
| CN106386497A (zh) * | 2016-10-17 | 2017-02-15 | 柳州玲通科技有限责任公司 | 一种红心柯组培苗生根诱导方法 |
| CN106386506A (zh) * | 2016-11-23 | 2017-02-15 | 广西壮族自治区林业科学研究院 | 一种桉叶油素型油樟芽器官组培芽繁殖方法 |
| CN106550874A (zh) * | 2016-11-23 | 2017-04-05 | 广西壮族自治区林业科学研究院 | 一种桉叶油素型油樟树组培芽的生根方法 |
| CN106613949A (zh) * | 2016-10-17 | 2017-05-10 | 柳州玲通科技有限责任公司 | 一种栓皮栎组培苗生根诱导方法 |
| CN106942059A (zh) * | 2017-03-27 | 2017-07-14 | 河池乐康生态农业科技有限公司 | 一种香樟的组织培养方法 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103858763A (zh) * | 2014-03-19 | 2014-06-18 | 广西壮族自治区林业科学研究院 | 一种大岩桐组培繁殖和块茎保存及其再繁殖的方法 |
-
2016
- 2016-04-12 CN CN201610222360.5A patent/CN105830923B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103858763A (zh) * | 2014-03-19 | 2014-06-18 | 广西壮族自治区林业科学研究院 | 一种大岩桐组培繁殖和块茎保存及其再繁殖的方法 |
Non-Patent Citations (6)
| Title |
|---|
| 周云峰: "植物生长激素对香樟移植成活率影响研究", 《盐城工学院学报(自然科学版)》 * |
| 宫彦章等: "IBA+NAA、国光生根剂对香樟根系的影响", 《广东林业科技》 * |
| 欧景华: "香樟组织培养快繁技术研究", 《内蒙古林业调查设计》 * |
| 蒋家权等: "ABT生根粉在香樟育苗中的应用", 《南方农业》 * |
| 蔡玲等: "影响香樟单芽组培苗生根的4个因素效应评选试验", 《西部林业科学》 * |
| 蔡玲等: "马尖相思离体培养再生植株的研究", 《广西林业科学》 * |
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106172018A (zh) * | 2016-10-17 | 2016-12-07 | 柳州玲通科技有限责任公司 | 一种美叶柯组培苗生根诱导方法 |
| CN106359103A (zh) * | 2016-10-17 | 2017-02-01 | 柳州玲通科技有限责任公司 | 一种万宁柯组培苗生根诱导方法 |
| CN106386497A (zh) * | 2016-10-17 | 2017-02-15 | 柳州玲通科技有限责任公司 | 一种红心柯组培苗生根诱导方法 |
| CN106613949A (zh) * | 2016-10-17 | 2017-05-10 | 柳州玲通科技有限责任公司 | 一种栓皮栎组培苗生根诱导方法 |
| CN106386506A (zh) * | 2016-11-23 | 2017-02-15 | 广西壮族自治区林业科学研究院 | 一种桉叶油素型油樟芽器官组培芽繁殖方法 |
| CN106550874A (zh) * | 2016-11-23 | 2017-04-05 | 广西壮族自治区林业科学研究院 | 一种桉叶油素型油樟树组培芽的生根方法 |
| CN106942059A (zh) * | 2017-03-27 | 2017-07-14 | 河池乐康生态农业科技有限公司 | 一种香樟的组织培养方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN105830923B (zh) | 2018-04-17 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN105830923A (zh) | 一种黄樟油素型樟树组培芽的生根方法 | |
| CN105660136A (zh) | 一种天麻的栽培方法 | |
| CN105830924B (zh) | 一种黄樟油素型樟树嫩枝组培繁殖方法 | |
| CN105165512B (zh) | 台湾桤木控偏冠四季扦插快繁方法 | |
| CN109006475A (zh) | 一种猕猴桃微嫁接方法以及猕猴桃育苗方法 | |
| CN103348920B (zh) | 一种奇楠沉香优质种苗快速繁殖方法 | |
| CN103947437B (zh) | 红豆杉非试管快繁方法 | |
| CN102668980B (zh) | 一种山胡椒的组织培养方法 | |
| CN107135950A (zh) | 一种快速获得黑果枸杞再生苗的培育方法 | |
| CN104920077A (zh) | 一种高成活率的荔枝树嫁接方法 | |
| CN104221714A (zh) | 一种林下仿野生栽培灵芝的方法 | |
| CN102550240A (zh) | 顶果木嫩枝扦插繁育方法 | |
| CN108401902B (zh) | 一种大麻茎尖组织培养快速繁殖方法 | |
| CN103355149B (zh) | 一种闽楠育苗专用基质及其生产工艺 | |
| CN103430853A (zh) | 一种槲蕨的快速繁殖方法 | |
| CN102870683A (zh) | 马来沉香的微体扩繁方法 | |
| CN104663195A (zh) | 红豆树扦插育苗的方法 | |
| CN103583360A (zh) | 一种定向诱导提高六道木苗木耐盐性的方法 | |
| CN103416177A (zh) | 一种苦丁茶的扦插繁殖方法 | |
| CN102511393B (zh) | 东亚砂藓配子体再生体系的建立方法 | |
| CN105230483A (zh) | 华南紫萁离体再生体系建立的方法 | |
| CN106857148A (zh) | 一种二次激素处理促进培忠杉扦插生根成苗的方法 | |
| CN103583371B (zh) | 山杨良种银×山1333的组织培养方法 | |
| CN103070026A (zh) | 快速培育树状观果冬青的方法 | |
| CN106342635A (zh) | 橡皮树种植的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20180417 |
|
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |