CN105807037B - 血细胞分析仪、体液分析方法及其控制系统 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种血细胞分析仪,包括:流体设备,其具有吸移标本的标本吸移嘴,混合通过所述吸移嘴吸移的血液以外的体液和白细胞分类用试剂来制备测定试样;侧向散射光集光器,其获取通过向所述测定试样中的细胞照射光而获得的侧向散射光信息;荧光集光器,其获取通过向所述测定试样中的细胞照射光而获得的荧光信息;以及控制器,其根据获取的所述侧向散射光信息和所述荧光信息分类并计数单核白细胞、多核白细胞和白细胞以外的有核细胞。
Description
本申请是申请号为200810005239.2、申请日为2008年1月31日 、名称为“血细胞分析仪、体液分析方法及其控制系统”的由同一申请人提交的中国发明专利申请的分案申请。
技术领域:
本发明涉及一种作为试样不仅能测定血液、也能测定脑脊液(髓液)、胸水(胸膜液)和腹水等血液以外其他体液的血细胞分析仪、体液分析方法及其控制系统。
背景技术:
在临床检查领域,常用血细胞分析仪以采自身体的血液为被检试样进行分析,并将该分析结果作为诊治监视的参考之一。
同时,临床检查领域渴望能简便易行地测定脑脊液等血液以外的体液。通常体液中几乎不含细胞,但当患病或有关器官有肿瘤和损伤时,就会发现出血(血细胞)和异常细胞、细菌等细胞。
美国专利申请公开第2003/0215890号公报上记述了关于用血细胞分析仪测定体液中的细胞的技术。据此美国专利申请公开第2003/0215890号公报上记述,将含有醛、表面活性剂和环糊精的试剂成份与脑脊液(CSF)混合,制备测定试样,用ADVIA120细胞分析仪分析所制测定试样,根据此公报的图11A~图11G所示细胞图分类并计数脑脊液中的细胞。
然而,根据美国专利申请公开第2003/0215890号公报上公开的技术,实际上作为体液仅分析脑脊液(CSF),关于如腹水和胸水等体液没有进行分析。通常脑脊液中大多不含血细胞以外的粒子成份,而腹水和胸水等脑脊液以外的体液中,因患者疾病有时会含有中皮细胞、巨噬细胞和肿瘤细胞等。这样,当运用美国专利申请公开第2003/0215890号公报上公开的技术分析含有血细胞以外的粒子成份的体液时,就有可能造成比如在细胞图的某细胞区域出现血细胞以外的粒子成份,无法得出正确分析结果的问题。
发明内容:
本发明的范围只由后附权利要求书所规定,在任何程度上都不受这一节发明内容的陈述所限。
本发明第一侧面提供的测定血细胞的血细胞分析仪包括:测定模式设定单元,用于设定体液测定模式;测定开始指示单元,用于接受开始测定的指示;光学信息获取单元,光照测定试样,从该测定试样所含细胞中获取光学信息;分析单元,在上述体液测定模式设定后,当上述测定开始指示单元接到开始测定的指示时,根据由体液标本和白细胞测定用试剂制备的上述测定试样中获取的上述光学信息,将该测定试样所含细胞至少分类为白细胞和白细胞以外的有核细胞,对白细胞和白细胞以外的有核细胞计数。
所述分析单元将白细胞分为多核白细胞和单核白细胞,分别对多核白细胞和单核白细胞计数。
所述分析单元计算出多核白细胞在白细胞中所占比率或单核白细胞在白细胞中所占比率。
所述分析单元从白细胞数和白细胞以外的有核细胞数中求出全有核细胞数,再求出白细胞以外的有核细胞与全有核细胞之比。
所述分析单元将所述测定试样所含细胞进一步分出红细胞血影。
当未设定所述体液测定模式时,测定开始指示单元接受开始测定的指示后,分析单元根据从血液标本和白细胞测定用试剂制备的测定试样中获取的所述光学信息将所述测定试样所含白细胞分类为数个亚类,并计数。
还具备输出单元,用于输出显示所述分析单元的分析结果的显示画面。
所述光学信息选自细胞发出的散射光信息、细胞发出的荧光信息、细胞吸光的光吸收信息以及这些信息的组合。
所述体液标本选自包括脑脊液、胸水、腹水、心囊液、关节液、腹膜透析的透析液和腹腔内清洗液在内的液体。
所述有核细胞选自由巨噬细胞、中皮细胞、肿瘤细胞、红细胞血影及其组合构成的群体。
本发明第二侧面提供的血细胞分析仪包括:测定模式设定单元,用于设定体液测定模式;测定开始指示单元,用于接受开始测定的指示;标本吸移单元,用于吸移标本;测定试样制备单元,用标本吸移单元吸移的标本和白细胞测定用试剂制备测定试样;光学信息获取单元,光照测定试样,从该测定试样所含细胞中获取光学信息;分析单元,根据获取的上述光学信息,对上述测定试样所含细胞进行分类,并对分类的上述细胞计数。上述体液测定模式由上述测定模式设定单元设定后,当上述测定开始指示单元接到开始测定的指示时,上述测定试样制备单元便由上述标本吸移单元吸移的体液标本和上述白细胞测定用试剂制备上述测定试样,上述分析单元根据从上述测定试样获取的上述光学信息,将测定试样中所含的细胞分类为白细胞和白细胞以外的细胞,并对白细胞和白细胞以外的有核细胞计数。
当未设定所述体液测定模式时,测定开始指示单元接受开始测定的指示后,所述测定试样制备单元用所述标本吸移单元吸移的血液标本和所述白细胞测定用试剂制备测定试样,所述分析单元根据从所述测定试样中获取的所述光学信息将所述测定试样所含白细胞分类为数个亚类,并计数。
本发明第三侧面提供的体液分析方法包括:(a)步骤:设定测定模式,以便设定体液测定模式;(b)步骤:体液测定模式设定后,接受开始测定的指示;(c)步骤:接受上述开始测定的指示后,用光照射由体液标本和白细胞测定用试剂制备的测定试样,从该测定试样所含细胞中获取光学信息;(d)步骤:根据获取的上述光学信息,将上述测定试样所含细胞至少分类为白细胞和白细胞以外有核细胞,并对白细胞和白细胞以外有核细胞计数。
所述体液分析方法还包括e步骤:接受所述开始测定的指示后,吸移所述体液标本,并由吸移的所述体液标本和所述白细胞测定用试剂制备所述测定试样。
所述(d)步骤包括将白细胞分类为多核白细胞和单核白细胞、并对多核白细胞和单核白细胞分别计数的步骤。
所述(d)步骤包括求白细胞中的多核白细胞比率或白细胞中单核白细胞比率的步骤。
本发明第四侧面提供一种体液分析仪的控制系统,包括:一种测定模式设定控制系统,设定测定模式,以便设定体液测定模式;一种测定指示接受控制系统,体液测定模式设定后,接受开始测定的指示;一种光学信息获取控制系统,接受上述开始测定的指示后,用光照射由体液标本和白细胞测定用试剂制备的测定试样,从该测定试样所含细胞中获取光学信息;及一种细胞分类和计数控制系统,根据获取的上述光学信息,将上述测定试样所含细胞至少分类为白细胞和白细胞以外的有核细胞,并对白细胞和白细胞以外的有核细胞计数。
所述细胞分类和计数控制系统可将白细胞分类为多核白细胞和单核白细胞、并对多核白细胞和单核白细胞分别计数。
所述细胞分类和计数控制系统可计算白细胞中的多核白细胞比率或白细胞中单核白细胞比率。
所述细胞分类和计数控制系统可从所述测定试样所含细胞进一步分出红细胞血影。
附图说明:
图1为本发明一实施方式的血细胞分析仪的外观图。
图2为分析仪测定装置的框图。
图3为流体设备的框图。
图4为白细胞检测器的光学系统显示图。
图5为RBC/PLT检测器的显示图。
图6为HGB检测器的显示图。
图7为标本测定处理的流程图。
图8为用于设定测定模式的显示画面的附图。
图9为前序列处理的流程图。
图10为测定由体液制备的DIFF用测定试样的散点图的模式图。
图11为实施方式的血细胞分析仪测定结果与对照法的测定结果的对比图。
图12为测定由血液制备的DIFF用测定试样的散点图的模式图。
图13为血液测定模式的测定结果的显示画面。
图14为体液测定模式的测定结果的显示画面。
图15为体液测定模式的测定结果的显示画面。
图16为体液测定模式的测定结果的显示画面。
图17为在体液测定模式下所显示的开始空白检测的确认画面。
具体实施方式:
以下根据附图说明本发明的具体实施方式。
图1所示为血细胞分析仪1。此血细胞分析仪1作为用于血液检查的多项全自动血细胞分析仪,可以对标本容器(采血管)里的血液标本进行测定,获取表示标本中所含血细胞特征的特征信息,并对该特征信息进行分析处理。此血细胞分析仪1还可以分析体液。在本实施方式的血细胞分析仪,分析对象体液指血液以外的存在于体腔内的体腔液。具体地说指脑脊液(髓液、CSF:脑室和蛛网膜下隙的积液)、胸水(胸膜液、PE:胸腔积液)、腹水(腹腔积液)、心囊液(心腔积液)、关节液(滑液:关节、滑液囊和腱鞘内的液体)等。腹膜透析(CAPD)的透析液和腹腔内清洗液等也可作为体液的一种进行分析。通常这些液体中几乎没有细胞,但当患病或相关器官有肿瘤和受损伤时,就可能含有血细胞、异常细胞和细菌等细胞。比如脑脊液,从分析结果上可作出如下临床推断。比如,如果红细胞增加,则可能是蛛网膜下出血,若中性细胞增加,则可疑为髓膜炎,如果嗜酸性细胞增加,则可怀疑患感染性疾病(寄生虫和真菌),如果单核细胞增加,则可怀疑为结核性髓膜炎和病毒性髓膜炎,若其他细胞增加,则可怀疑为肿瘤向髓膜转移。至于腹水和胸水等,若除血细胞外还含有中皮细胞、巨噬细胞和肿瘤细胞等有核细胞,就可以作为怀疑癌等疾病的指标,通过分析这种血细胞以外的有核细胞,可获得这些指标。
血细胞分析仪1由可测定作为试样的血液和体液的测定装置2和对测定装置2输出的测定结果进行处理、取得分析结果的数据处理装置3构成。数据处理装置3包括控制器301、显示器302和输入设备303。在图1中,测定装置2与数据处理装置3各作为一个装置而存在,也可合二为一作为一个装置。
图2为血细胞分析仪1的测定装置2的框图。如图2所示,测定装置2包括血细胞检测部分4、对检测部分4的输出信号(模拟信号)进行处理的模拟信号处理器5、微机6、显示·操作部分7和测定血液和体液的装置机械部分8。装置机械部分8包含如下流体设备81。
图3为流体设备81的结构框图。如图3所示,流体设备81包含标本吸移嘴18、数个试剂容器11、采样阀12和反应仓13~17。标本吸移嘴18从标本容器吸移标本,将该标本送往采样阀12。采样阀12将导入的标本分成一定量的若干等分。此分割数因测定模式(各个测定模式)而有所不同,测定红细胞数、白细胞数、血小板数和血红蛋白浓度的CBC模式标本分为三等分。在上述CBC测定模式之上再加白细胞五分类的CBC+DIFF模式,则标本分为四等分。在CBC+DIFF测定项目上再加测定网织红细胞的CBC+DIFF+RET模式,分为五等分。同样,CBC+DIFF模式的测定项目上再加有核红细胞测定项目的CBC+DIFF+NRBC模式也是标本分为五等分。在CBC+DIFF模式+RET测定项目上再加测定有核红细胞的CBC+DIFF+RET+NRBC模式,则分为六等分。以上测定模式全是测定血液的血液测定模式。最后,在测定体液的体液测定模式中,标本分为二等分。
试剂(稀释液)从试剂容器11导入此采样阀12,所分割的标本等分与试剂一起输送到反应仓13~17和后述HGB检测器43。反应仓13由无图示的定量泵提供采样阀12抽取的一定量的标本(等分)、一定量稀释液和一定量的染色液,这些标本和试剂经混合,制备出白细胞四分类(DIFF)用的测定试样。
作为稀释液,可适当使用希森美康株式会社提供的试剂“白细胞溶血素STROMATOLYSER-4DL”。此试剂含有表面活性剂,可以溶解红细胞。染色液同样可适当使用希森美康株式会社提供的试剂“白细胞四分类液STROMATOLYSER-4DS”。此染色液含有乙二醇、低醇、聚甲炔,在上述稀释液溶血后,血细胞成份被染色,最终制作出50倍稀释试样。
如果选择体液测定模式的话,则以与此白细胞四分类用测定试样同一标本量、同样试剂和同一试剂量的条件制备白细胞分类用测定试样。但是,如后所述,体液测定模式的白细胞分类白细胞不是四类,而是二类。
反应仓14由无图示的定量泵提供采样阀12采集的一定量标本、一定量稀释溶血剂和一定量染色液,将这些标本和试剂混合,制作有核红细胞(NRBC)测定用测定试样。
反应仓15由无图示的定量泵提供采样阀12采集的一定量标本、一定量稀释溶血剂和一定量染色液,将这些标本和试剂混合,制作网织红细胞(RET)测定用测定试样。
反应仓16由无图示的定量泵提供采样阀12采集的一定量标本和一定量稀释溶血剂,将这些标本和试剂混合,制作白细胞和嗜碱性细胞(WBC/BASO)测定用测定试样。
反应仓17由无图示的定量泵提供采样阀12采集的一定量标本、一定量稀释液,将这些标本和试剂混合,制作红细胞/血小板(RET/PLT)测定用测定试样。
另外,采样阀12采集的一定量标本、一定量稀释溶血剂还供应后述HGB检测器43。
检测部分4有检测白细胞的白细胞检测器41。此白细胞检测器41也用于有核红细胞和网织红细胞的检测。检测部分4除白细胞检测器41外,还有测定红细胞数和血小板数的RBC/PLT检测器42和测定血液中血色素量的HGB检测器43。
上述白细胞检测器41主要由光学检测器构成,具体而言,由运用流式细胞术的检测器构成。在此,所谓细胞术即测定细胞和其他生物学粒子的物理性质和化学性质,所谓流式细胞术指:让这些粒子从细流中通过、进行测定的方法。图4所示为白细胞检测器41的光学系统。在该图中,从激光发光二极管401射出的光束通过准直镜402照射到流经鞘流池403内的血细胞。此白细胞检测器41检测鞘流池403内的血细胞在激光照射下所发出的前向散射光强度、侧向散射光强度和侧向荧光强度,以此作为血细胞特征参数。
在此,光的散射是由于血细胞这种粒子在光线的行进方向上成为障碍物,光因此改变其行进方向所产生的现象。检测这种散射光可以获得有关粒子大小和成份的粒子特征信息。前向散射光是指粒子发出的与所照射光线的行进方向基本相同的散射光。从前向散射光可以获得有关粒子(血细胞)大小的特征信息。侧向散射光是粒子发出的与所照射光线略呈垂直方向的散射光。从侧向散射光可以获得有关粒子内部的特征信息。当激光照射到血细胞粒子上时,侧向散射光强度取决于细胞内部的复杂性(核的形状、大小、密度和颗粒的数量)。因此,利用侧向散射光强度的这一特性可以分类(鉴别)血细胞,并测定血细胞数量。另外,已述本实施方式采取了使用前向散射光和侧向散射光作为散射光的结构,但不限于此,只要是能够获得分析所需要的反映粒子特征的散射光信号,散射光对于光源透过鞘流池照射的光的光轴的角度不限。
光照诸如经染色的血细胞那种荧光物质,则发出比所照光波波长更长的光。荧光强度是染色越好越强,测定此荧光强度就可获得有关血细胞染色程度的特征信息。因此,根据(侧向)荧光强度的差,可以对白细胞进行分类等测定。
如图4所示,流经鞘流池403的血细胞(白细胞和有核红细胞)发出的前向散射光通过聚光镜404和针孔405被发光二极管(前向散射光集光器)406接受。侧向散射光通过聚光镜407、分色镜408、光学膜409和针孔410被光电倍增管(侧向散射光集光器)411接受。侧向荧光通过聚光镜407和分色镜408被光电倍增管(侧向荧光集光器)412接受。从各集光器406、411和412输出的所受光信号分别通过由放大器51、52、53等构成的模拟信号处理器5进行放大和波形处理等模拟信号处理后,输送到微机6。
下面,就RBC/PLT检测器42的结构进行说明。图5为RBC/PLT检测器42的简要结构模式图。RBC/PLT检测器42可运用鞘流DC检测法测定红细胞数和血小板数。RBC/PLT检测器42有如图5所示鞘流池42a。此鞘流池42a设有向上开口的加样口42b,试样可以从反应仓17加入此加样口42b。鞘流池42a还有向上逐渐变细的锥状样仓42c,上述加样口42b就配置在此样仓42c的内部中央。样仓42c上端设有孔42d,此孔42d正好与加样口42b中心相对。供样器提供的测定试样从加样口42b的前端向上运送,与此同时,前鞘液供应到样仓42c,前鞘液向上流动流向孔42d。在此,测定试样在前鞘液的包围下流动,锥状样仓42c使测定试样流变细,测定试样中的血细胞逐个通过孔42d。孔42d设电极,此电极间供有直流电流。检测当测定试样流过孔42d时孔42d的直流电阻的变化,将此电信号输出到控制器25。上述直流电阻在血细胞通过孔42d时会增大,因此,这一电信号反映血细胞通过孔42d的信息,通过对这一电信号进行信号处理,对红细胞和血小板计数。
孔42d的上方设有向上下延伸的回收管42e。此回收管42e配置于通过孔42d与样仓42c相连的样仓42f内。回收管42e下端与样仓42f内壁分离。样仓42f有后鞘液提供,此后鞘液沿样仓42f的回收管42e的外侧区域向下流动。从回收管42e外侧流过的后鞘液到达样仓42f下端后,通过回收管42e下端和样仓42f的内壁之间,流向回收管42e内部。因此可以防止通过孔42d的血细胞回流,从而防止血细胞的误检。
下面就HGB检测器43的结构进行说明。HGB检测器43可通过SLS血红蛋白法测定血色素量(HGB)。图6为HGB检测器43结构的斜视图。HGB检测器43有装稀释试样的样池43a、向样池43a发光的发光二极管43b和接收透过样池43a的透射光的集光元件43c。采样阀12定量的血液按一定稀释率被稀释液和一定溶血剂稀释,制备稀释试样。此溶血剂具有将血液中的血红蛋白转换为SLS-血红蛋白的性质。这种稀释试样供向样池43a,存放于样池43a。在此状态下,使发光二极管43b发光,透射光由隔样池43a与发光二极管43b相对配置的集光元件43c接收。发光二极管43b所发波长光易于被SLS-血红蛋白吸收,且样池43a由透光性高的塑料材料制成,因此,集光元件43c接收的是发光二极管43b发射光仅被稀释试样吸收后的透射光。集光元件43c将与集光量(吸光度)相应的电信号输往微机6,微机6将此吸光度与预先测定的仅稀释液的吸光度比较,算出血红蛋白值。
微机6具有将模拟信号处理器5提供的模拟信号转换为数字信号的A/D转换器61。A/D转换器61的输出值输送到微机6的演算器62,在演算器62进行演算,对集光信号进行一定的处理。演算器62根据检测部分4的输出值制作分布数据(二维散点图(未分类)和一维直方图)。
微机6包括由控制用处理器和控制用处理器运行用存储器构成的控制器63和由分析用处理器和分析用处理器运行用的存储器构成的数据分析单元64。控制器63用于控制由自动供应采血管的供样器(图示省略)、制样和测定用的流体系统等组成的仪器机械部分8和其他部分。数据分析单元64用于对各分布数据进行筛查等分析处理。分析结果通过接口65输送到外部的数据处理装置3,进行显示数据画面和存储数据等处理。
微机6有与显示·操作部分7连接的接口66和与装置机械部分8连接的接口67。演算器62、控制器63和接口66、67通过总线68连接,控制器63和数据分析单元64通过总线69连接。显示·操作部分7上包括操作人员下达开始测定指示的开始开关和显示仪器状态、各种设定值以及分析结果、接受操作人员输入的触摸屏式液晶显示器。
下面就本实施方式的血细胞分析仪1的运行进行说明。图7为本实施方式的标本分析仪运行的流程图。用户(操作人员)接通血细胞分析仪1的电源(步骤S1),启动血细胞分析仪1。此血细胞分析仪1启动时先进行自检(步骤S2)。在自检中,不仅测试微机6、检查血细胞分析仪1的各运行机械部分的运行情况,还进行测定不含标本的空白试样的空白检测。然后,微机6对测定模式进行初始设定(步骤S3)。此初始设定值为CBC+DIFF模式。具体而言,在步骤S3的处理中,设定测定血液的参数(运行条件)、如所用反应仓和测定时间设定等。如此,本实施方式的标本分析仪以血液测定模式为初始运行模式。据此,血细胞分析仪1处于可接受开始测定的待机状态。微机6在液晶显示器上显示通知待机状态的画面(步骤S4)。
在此待机状态下,操作人员可通过操作显示·操作部分7切换测定模式。图8为设定测定模式的输入画面模式图。此画面中有标本号120、标本放入模式种类121、分项检测(测定模式)种类122和标本种类123各个显示画面。标本放入模式设有三种模式:操作人员手动将标本容器插入标本吸移嘴18进行标本吸移的手动模式;操作人员事先将标本与试剂混合制备测定试样、用标本吸移嘴18吸移该测定试样的微量血预稀释模式;由自动运送标本容器的运送装置提供标本的封闭模式。作为标本种类,设有普通血液标本常规(Normal)、HPC(造血祖细胞)标本(HPC)和体液(Body Fluid)。操作人员可分别指定标本放入模式、测定模式和标本种类。操作人员如果指定血液测定模式,则将标本种类指定为常规(Normal),再指定任意标本放入模式和测定模式。如果指定体液测定模式,则操作人员分别在放入模式中指定“手动模式”,在分项检测中指定“CBC+DIFF”、“CBC+DIFF+RET”、“CBC+DIFF+NRBC”和“CBC+DIFF+NRBC+RET”中之一,在标本种类中指定体液(Body Fluid)。在步骤S4中,操作人员如此指定所希望的测定模式。操作人员如果不改变初始设定的测定模式而进行血液测定的话(在步骤S5选择N),则按开始开关下达开始测定指示。微机6接收开始测定指示(步骤S6),从标本吸移嘴吸移血液标本(步骤S7)。
血液标本吸移后,如上所述标本被导入采样阀12,根据测定模式的分项检测种类调制测定所需要的试样(步骤S14)。然后实施测定试样的测定运行(步骤S16)。比如,分项检测种类设定为“7”时,制备HGB、WBC/BASO、DIFF、RET、NRBC、RBC/PLT用的各种测定试样。然后由白细胞检测器41对WBC/BASO、DIFF、RET、NRBC用测定试样进行测定,由RBC/PLT检测器42对RBC/PLT用测定试样进行测定,由HGB检测器43对HGB用测定试样进行测定。此时,白细胞检测器41仅设置有一个,因此,NRBC、WBC/BASO、DIFF、RET各测定试样按NRBC、WBC/BASO、DIFF、RET的顺序依次导入白细胞检测器41,逐项测定。在这一测定运行中,演算器62绘制粒子分布图(散点图、直方图)。在此,就根据DIFF测定所得光学信息绘制散点图的过程进行说明。演算器62以在DIFF测定中由白细胞检测器41输出的集光信号中的侧向散射光和侧向荧光信号为特征参数,绘制二维散点图(粒子分布图)。此散点图(以下称DIFF散点图)是以侧向散射光强度为X轴、以侧向荧光强度为Y轴绘制的,一般出现“红细胞血影粒子群”、“淋巴粒子群”、“单核粒子群”、“嗜中性+嗜碱性粒子群”和“嗜酸性粒子群”。这些粒子群由数据分析单元64通过处理DIFF散点图来识别。
然后,根据测定所得粒子分布图进行分析处理(步骤S18)。在此分析处理中,微机6的数据分析单元64对白细胞检测器41测定DIFF测定试样时演算器62绘制的DIFF散点图分类为:图12所示四个白细胞群(淋巴细胞群、单核细胞群、嗜中性+嗜碱性细胞群和嗜酸性细胞群)和红细胞血影群。在本实施方式的分析处理中,从散点图上划分的各粒子与各群的重心位置之间的距离可以得到各粒子对各群的归属度。根据这些归属度各粒子被分为各群。这种粒子分类方法在专利公开平成5-149863号公报上有详细记载。在WBC/BASO测定所得散点图上,分类为嗜碱性细胞群、嗜碱性细胞以外白细胞群和红细胞血影群。再根据DIFF散点图分析处理对白细胞四分类和计数的结果(参照图12)和WBC/BASO散点图分析处理对白细胞二分类和计数的结果,对血液标本所含白细胞进行五分类。具体而言,数据分析单元64从DIFF散点图分析处理所得“嗜中性细胞+嗜碱性细胞的血细胞数”减去WBC/BASO散点图分析处理所得“嗜碱性细胞的血细胞数”,即可分别得出嗜中性细胞的血细胞数和嗜碱性细胞的血细胞数。据此,白细胞被五分类(淋巴细胞、单核细胞、嗜中性细胞、嗜碱性细胞和嗜酸性细胞),获得各项的血细胞数。此外,在RBC/PLT测定中,检测根据检测器42测得的特征信息绘制的一维直方图的曲线谷值,对红细胞和血小板分类。如此取得的分析结果输出到数据处理装置3的显示器302上(步骤S20)。
另一方面,微机6如果在步骤S5如上所述接收到指定测定模式为体液测定模式的输入时,设定进行体液测定的参数(运行条件)如所用反应仓、测定时间设定等(步骤S8)。在本实施方式中,测定时间如后所述为血液测定时的三倍。
测定模式由其他测定模式(在此为血液测定模式)切换为体液测定模式时(步骤S9),测定装置2开始前序列处理(步骤S10)。此前序列处理是为体液测定做准备。体液测定模式下测定的是血细胞成份浓度低的标本,因此,从血液测定模式(在图8中显示为“1:常规”)切换设定为体液测定模式时要进行前序列处理,以确保本底不会影响到体液测定结果。
前序列处理包括空白检测。在此前序列处理中的空白检测判断标准比血细胞测定模式中所进行的空白检测(比如开电源后和自动清洗后进行的)的判断标准更严格,设定的值为数分之一以下。此外,设定由体液测定模式切换为血液测定模式时,因为本底影响(残留物的影响)一般不波及血液测定结果,故此项前序列处理不进行。在体液测定模式中反复测定体液标本时,因为通常不会受到本底的影响,所以也不进行前序列处理。但是,体液标本也有的含有大量粒子,因此,当体液标本分析结果超出一定值时,界面上会出现“测定结果太高,有可能影响下次标本测定,将进行空白检测。请按“确认”。”等信息,通知操作人员有可能影响下面的标本分析结果。操作人员按“确认”按钮,即可进行空白检测。此时,界面上设有“中止”按钮,操作人员只要按“中止”按钮,也可以不进行空白检测,移至待机界面。如果未进行空白检测,则最好对测定结果标注可信度低的符号。这样做可以仅限定于必要的时候追加空白检测,以防止时间和试剂类的浪费。
图9为测定模式从血液测定模式切换为体液测定模式时实施的前序列处理步骤的流程图。血细胞分析仪1通过在测定装置2测定空白试样来实施空白检测(步骤S31),微机6将测定结果与一定容许值比较,判断测定结果是否低于容许值(步骤S32)。当测定结果低于容许值时,微机6结束前序列运行,恢复处理。当测定值大于容许值时,微机6判断是否进行了规定次数(比如三次)空白检测(步骤S33),如果空白检测次数未达到规定次数,则返回步骤S31,在上述规定次数内再次实施空白检测。如果在规定次数内空白检测测定结果仍未低于容许值,则在显示·操作部分7上显示空白测定结果和包括“确认”按钮、“空白检测”按钮、“自动清洗”按钮在内的画面(步骤S34)。如果操作人员按“确认”按钮(步骤S35),则微机6结束前序列运行,恢复处理。如果按“空白检测”按钮(步骤S36),则微机6将处理返回到步骤S31再次进行空白检测。如果按“自动清洗”按钮(步骤S37),则微机6实施用专用清洗液自动清洗后(步骤S38),将处理返回到步骤S31,再次进行空白检测。
上述前序列处理结束后,血细胞分析仪1返回待机状态(步骤S11)。操作人员开始体液测定时,与血液标本的手动测定时一样,将测定装置2的标本吸移嘴18插入标本容器中的体液标本,按开始开关。微机6接到开始测定指示后(步骤S12)开始吸移体液标本(步骤S13)。
体液标本吸移后,与血液标本一样体液标本被导入采样阀91。由反应仓13制备RBC/PLT测定试样(步骤S15)。然后,由白细胞检测器41测定DIFF测定试样,由RBC/PLT检测器42测定RBC/PLT测定试样(步骤S17)。在体液测定模式的状态下,在白细胞检测器41测定的仅为DIFF测定试样,因此,即使测定时间比血液测定模式的测定时间更长,也可能比血液测定时更短时间内完成测定。如此,通过将体液测定的测定时间延长得比血液测定的测定时间长,可以提高粒子浓度低的体液标本的分析精度。测定时间越长,计数的粒子数就会越多,测定精度就会提高。但是,测定时间过长,标本处理能力会下降,同时将测定试样输送到白细胞检测器41的注射泵的能力有限,因此以2~6倍为妥。在本实施方式中,将体液测定模式时的测定时间设定为血液测定模式时的3倍。
另一方面,RBC/PLT测定试样在任何测定模式下都是导入电阻式检测器41,在一定流束条件下进行测定。然后根据测定所得特征信息进行分析处理(步骤S19),分析结果输出到数据处理装置3的显示器302(步骤S21)。在血液测定模式下的分析处理中,分析DIFF散点图等,算出五种白细胞亚类(中性细胞:NEUT、淋巴细胞:LYMPH、单核细胞:MONO、嗜酸细胞:EO、嗜碱细胞:BASO)的信息(数量和比率),但在体液测定模式下的分析处理中,因为有时血细胞数很少或受到破损,因此,以部分统合的形式分类为二种亚类(单核细胞:MN、多核细胞:PMN)。淋巴细胞和单核细胞属于单核细胞,嗜中性细胞、嗜酸性细胞和嗜碱性细胞属于多核细胞。这种分类算法与在血液测定模式下的分析处理中所说明的算法相同,故省略说明。
接着,对在步骤S19取得的分析结果和容许值(所定阀值)进行比较(步骤S22)。此容许值与步骤S10的前序列处理中的空白检测中使用的容许值为同一值。当分析结果大于容许值时(步骤S22中选“是”),则在步骤S23中显示图17所示开始空白检测的确认界面151。此确认界面151上显示有:显示“测定结果太高,有可能影响下面的标本测定。将进行空白检测。请按“确认”。”信息的信息显示处152、确认按钮153和取消按钮154。接下来,判断用户输入的是确认按钮153还是取消按钮154(步骤S24),如果输入的是确认按钮(在步骤S24中选“确认”),则实施空白检测(步骤S25)。当在步骤S19取得的分析结果小于容许值时(在步骤S22选“否”)或输入的是取消按钮时(在步骤S24中选“取消”),则不进行空白检测,返回步骤S5的处理。
在体液试样中有时会存在血细胞以外的异常粒子(巨噬细胞和中皮细胞、肿瘤细胞等)。脑脊液中存在这些异常粒子的情况很少见,但其他体液胸水和腹水中比较常见。因此,不管体液种类如何,要精确地对体液中的血细胞进行分类和计数,就要排除这些异常粒子的影响。因此,本发明基于异常粒子出现在本血细胞分析仪的DIFF散点图上侧这一新认识,使仪器能够更精确地测定作为目标的体液试样中的白细胞。这一点在前述的传统技术中是没有考虑的。
图10为本实施方式血细胞分析仪1在体液测定模式下测定、分析由体液和白细胞测定用试剂制备的DIFF测定试样所获得的散点图的模式图。散点图的纵轴表示侧向荧光强度(越靠上,荧光强度越强),横轴表示侧向散射光强度(越靠右,散射光强度越强)。散点图的荧光强度弱的区域LF分布有溶血产生的红细胞血影Gc,荧光强度强的区域HF分布有中皮细胞等异常粒子,中间区域MF分布有单核白细胞Mc、多核白细胞Pc。因此,在散点图的分析中,以分布于除区域LF和HF以外的区域MF的粒子成份为白细胞进行分析,分类为上述二类,并计数。另外,单核白细胞Mc中包含淋巴细胞和单核细胞,多核白细胞Pc中包含中性细胞、嗜酸性细胞和嗜碱性细胞。
如此分析体液中的白细胞时,也有时体液中所含血细胞数很少或受损,因此作为临床上有意义的信息,将白细胞分类为单核白细胞和多核白细胞进行计数。
另外,体液中有时存在血细胞以外的异常粒子(巨噬细胞和中皮细胞、肿瘤细胞等)。脑脊液中存在这些异常粒子的情况很少见,但其他体液胸水和腹水中比较常见。在图10的散点图中,这种白细胞以外的有核细胞分布于区域HF。在本实施方式中,可以将白细胞以外的有核细胞与白细胞区分,因此,即使体液中含有这种白细胞以外的有核细胞也能够求出正确的白细胞数。通过对出现在区域HF的细胞进行计数,可以提供异常细胞出现的程度。在本实施方式中,根据区分各区域的阀值将各细胞划分为区域LF、MF和HF,也可以人工改变这一阀值。
图11是为显示上述散点图分析法的适当性,而比较采用本实施方式的血细胞分析仪1所得分析结果与采用对照法所得计数结果的附图。被检试样为胸水,图中的“本法”表示本实施方式的血细胞分析仪1计算出的白细胞数(WBC)和其他异常粒子数(Others),“Ref”表示对照法(细胞计数池直接计数法(Fuchs-Rosenthal板)和site spin法)计算出的结果。例1、2、3都为分析有异常粒子大量出现的胸水的结果,可以看出,本实施方式的血细胞分析仪1所得分析结果与对照法之间具有相关关系。
图13为作为由血液制备的上述DIFF用测定试样的分析结果显示在数据处理装置3显示器302上的画面100。画面100的上部有显示标本号101的标本号显示区,其旁边设有显示患者属性的属性显示区。属性显示区具体地说显示标本号、患者ID、患者姓名、出生年月日、性别、病房、主治医生、测定年月日、测定时间及备注等。属性显示区下部设有显示测定结果的测定结果显示区。测定结果显示区由数页构成,这些页可以通过选择数个标签102来显示画面。标签针对主页面、图表画面和其他项目备有数个。图12为图表标签选择时的显示画面。测定结果显示区的左半部分设有显示测定结果的测定值的测定值显示区103和显示图表的图表显示区104,右半部分设有显示测定结果的分布图的分布图显示区105。测定值显示区显示WBC、RBC、…、NEUT#、…BASO#、NEUT%、…、BASO%等项目、数据和单位,图表显示区104显示关于WBC、PLT、RBC或RET的可作为临床检查上有用信息的标本异常和疾病怀疑的标记结果。
分布图显示区105显示六个分布图。左上部的散点图为DIFF用散点图。右上部为WBC/BASO用、左中部为幼稚细胞(IMI)用,右中部为RET用的各散点图。左下部为RBC用直方图,右下部为PLT用直方图。
图14为作为由体液制备的上述DIFF用测定试样的测定结果显示在数据处理装置3显示器302上的画面110。画面110的上部有显示标本号的标本号显示区111,其旁边设有患者属性显示区。标本号显示区111的左边显示有表示以体液测定模式进行测定的“F”。据此可以明确了解到,此分析结果是体液测定结果。测定结果显示区由可用标签112选择的数页构成。在本例中,选择了“体液测定(体液)”的标签。
在测定值显示区113上,与血液测定模式的测定结果不同的体液用测定项目名WBC—BF(WBC数)、RBC—BF(RBC数)、MN#(单核细胞数(淋巴细胞+单细胞))、PMN#(多核细胞数(中性细胞+嗜碱性细胞+嗜酸细胞))、MN%(白细胞中的单核细胞比率)、PMN%(白细胞中的多核细胞比率)和测定值、单位分别对应显示。在体液测定也与血液测定同样设有图表显示区114。分布图显示区显示有二个分布图115,上部分散点图为DIFF用散点图。下部分为RBC用直方图。
图15为在图14画面110中在标签112中选择了“检索BF(Research(BF))标签的例示。此画面除显示检索参数显示区116外,还显示与画面110同样的项目。检索参数显示区116中显示如图10所示存在于区域HF的粒子数“HF-BF#”、区域HF内的粒子数与存在于包括区域HF和区域MF在内的区域的粒子数之比“HF-BF%”、 存在于包括区域HF和区域MF在内的区域的粒子数“TC-BF#”。另,“HF-BF%”是HF-BF与TC-BF之比。
图16为显示在数据处理装置3显示器302上的存储标本一览显示画面140。130是患者属性显示区。其上方设有通过标签选择显示测定结果的测定结果显示区。测定结果显示区最左侧列131用于显示测定结果的验证工作未做或已做。V表示已验证。其右列132用于显示测定模式。“F”表示体液测定模式的测定结果。如果虽然是在体液测定模式下需要空白检测的高值标本,但未进行空白检测的话,为了将其表示出来,可以将F反转标记。
以上就本发明的血细胞分析仪的结构和功能,以预先装入血细胞分析仪为例进行了说明,但也可以通过控制系统来实现该功能,将该控制系统装入传统的血细胞分析仪,让传统的血细胞分析仪发挥本发明的功能。
在本实施方式所述结构中,血液测定模式下对白细胞分类与体液测定模式下对白细胞分类各自制备测定试样时的标本量、试剂种类和试剂量都一样。可不限于此,也可以让制备体液测定模式下分类白细胞用测定试样的标本量和试剂量分别多于制备血液测定模式下分类白细胞用测定试样的标本量和试剂量。由于体液测定模式下对白细胞分类测定时间比血液测定模式长,测定所需的测定试样量也多,因此,这样做可以分别在血液测定模式下的白细胞分类和体液测定模式下的白细胞分类制备适量的测定试样。
在本实施方式中,就用散射光和荧光在体液测定模式下对白细胞分类的结构进行了阐述,但不限于此,也可以用比如散射光和吸收光在体液测定模式下对白细胞分类。吸收光的测定可以将染色白细胞的染色剂与其他试剂一起混入标本,制备测定试样,将该测定试样提供给流动池,使之在流动池内形成试样流,光照该试样流,通过光电二极管等集光元件接收试样流发出的光。白细胞通过流动池中时,光被白细胞吸收,其吸收程度可以作为集光元件的集光量加以捕捉。关于这种吸收光的测定,美国专利第5122453号及美国专利第5138181号公报上有发表。也可测定电阻取代散射光,通过电阻值和吸收光来对白细胞进行分类。
Claims (8)
1.一种血细胞分析仪,包括:
流体设备,其具有吸移标本的标本吸移嘴,所述流体设备混合通过所述吸移嘴吸移的血液以外的体液和白细胞分类用试剂来制备测定试样;
侧向散射光集光器,其获取通过向所述测定试样中的细胞照射光而获得的侧向散射光信息;
荧光集光器,其获取通过向所述测定试样中的细胞照射光而获得的荧光信息;
控制器,其根据获取的所述侧向散射光信息和所述荧光信息分类并计数单核白细胞、多核白细胞和白细胞以外的有核细胞;以及
显示器,其中,
所述控制器在所述显示器显示以所述侧向散射光的强度和所述荧光的强度为轴的散点图;
所述散点图包括荧光强度较小的第一区域、荧光强度较大的第二区域、以及荧光强度在所述第一区域和所述第二区域之间的第三区域;
所述第二区域中分布有所述白细胞以外的有核细胞;
所述第三区域中分布有所述单核白细胞以及所述多核白细胞。
2.根据权利要求1所述的血细胞分析仪,其特征在于:
所述体液是指存在于体腔内的体腔液。
3.根据权利要求1所述的血细胞分析仪,其特征在于:
所述体液是脑脊液、胸水、腹水、心囊液或关节液。
4.根据权利要求1所述的血细胞分析仪,其特征在于:
所述白细胞分类用试剂包含使红细胞溶解的表面活性剂。
5.根据权利要求1所述的血细胞分析仪,其特征在于:
所述白细胞分类用试剂包含聚甲炔类色素。
6.根据权利要求1所述的血细胞分析仪,其特征在于:
所述控制器计数除去所述荧光的强度较小的红细胞血影后的粒子的数目。
7.根据权利要求6所述的血细胞分析仪,其特征在于:
所述控制器计算出所述白细胞以外的有核细胞的数目相对于除去了所述荧光的强度较小的红细胞血影后的粒子的数目的比率。
8.根据权利要求1所述的血细胞分析仪,其特征在于:
所述流体设备将所述体液分成第1等分和第2等分,制备测定试样;
所述控制器通过鞘流DC检测法测定用所述第1等分制备的第1测定试样,并计数所述体液中的红细胞数目;
所述控制器通过流式细胞术测定用所述第2等分制备的第2测定试样,将所述标本中的白细胞分类为单核白细胞和多核白细胞并进行计数。
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