CN105777768A - 一种同时或分别检测细胞溶酶体内硫化氢和次氯酸的荧光探针及其制备方法和应用 - Google Patents

一种同时或分别检测细胞溶酶体内硫化氢和次氯酸的荧光探针及其制备方法和应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种同时或分别检测细胞溶酶体内硫化氢和次氯酸的荧光探针及其制备方法和应用。属于分析化学领域。本发明的探针分子式为C44H43N9O7，其结构式如式（Ⅰ）所示：。本发明实现了单一探针对多种靶标分子(H2S、HClO和H2S/HClO)的同时或分别检测，对不同靶标分子可以产生不同的信号响应；本发明探针对H2S和HClO具有选择的专一性，抗其他分子干扰能力强。本发明可以应用于水环境和细胞水平内的H2S和HClO的检测，是一种简单，快速，灵敏的H2S和HClO分子特异性检测试剂，在生物分子检测领域具有广阔的应用前景。

Description

一种同时或分别检测细胞溶酶体内硫化氢和次氯酸的荧光探针及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及一种同时或分别检测溶酶体内硫化氢和次氯酸的荧光探针及其制备方法和应用，属于分析化学技术领域。
背景技术
硫化氢(H2S)在调节人的生理机能方面起着极其重要的作用，硫化氢可参与血红蛋白改变，参与体内亚硝基类化合物的还原，调节体内多种酶的功能等。硫化氢已被证明与众多疾病有着紧密关系，例如调节正常肝脏以及肝硬病变化肝脏中的微血管循环;硫化氢还具有高效的调节心肌收缩力，舒张血管，平稳双向的调节血压。硫化氢能够有效清除过氧化氢、超氧阴离子、次氯酸、过氧亚硝基等;实验表明硫化氧能够有效地降低AP诱导的神经细胞毒性。硫化氢与FPG表现为负比例关系，升高二型糖尿病病人硫化氢浓度也许有助于降血糖。所以对生物体内硫化氢的检测意义极其重要。
次氯酸，化学式为HClO，是一种不稳定的弱酸，在纯净的水中通入氯气即可形成次氯酸。在水溶液中次氯酸可部分电离生成次氯酸根和氧离子，日常生活中次氯酸(一般是其钠盐)被广泛用作漂白剂、除臭剂和消毒剂。在生物细胞(如嗜中性白细胞)中，次氯酸由次氯酸和氯离子在髓过氧化物酶(MPO)的催化作用下产生。作为一种重要的活性氧物种，次氯酸在维持细胞内的氧化还原平衡状态起着非常重要的作用，但是一旦细胞中次氯酸的浓度发生异常，就会引起包括风湿性关节炎、心血管疾病和癌症在内的多种疾病，检测生物体系中次氯酸的浓度已成为一个重要的课题。
然而目前缺少对硫化氢和次氯酸同时检测的荧光探针，特别是还没文献报道过对溶酶体内的硫化氢和次氯酸进行同时或分别检测的荧光探针，针对目前的需求，我们设计合成了一种能够通过或分别对溶酶体内的硫化氢和次氯酸进行同时分别检测的荧光探针，从而解决对溶酶体内的氧化-还原环境进行研究的检测工具。
发明内容
针对目前缺少对溶酶体内的硫化氢和次氯酸进行同时或分别检测的研究工具，本发明通过分子设计，合成出一种具有良好选择性以及可以通过或分别检测溶酶体内硫化氢和次氯酸的荧光探针。
本发明还提供了上述荧光探针的制备方法和应用。
本发明采用以下技术方案：
一种同时或分别检测细胞溶酶体内硫化氢和次氯酸的荧光探针，其特征在于，探针的分子式为C44H43N9O7，其结构式如式（Ⅰ）所示：
。
一种同时或分别检测细胞溶酶体内硫化氢和次氯酸的荧光探针的制备方法，其特征在于，它包括以下步骤：
1）将化合物FP-1与水合肼在乙醇中，氮气保护，加热回流反应，反应完全后分离提纯得到化合物FP-2；所述化合物FP-1结构式如下：
；所述化合物FP-2结构式如下：
；
2）将所得化合物FP-2溶于DMF中，依次加入1-羟基苯并三唑和碳化二亚胺，室温下反应30min后加入化合物FP-3，在氮气保护下，室温下反应，反应完全后分离提纯得到化合物FP-4；所述化合物FP-3结构式如下：
；所述化合物FP-4的结构式如下：
；
3）将所得化合物FP-4溶于三氯甲烷中，冰水浴条件下搅拌，加入三乙胺，然后将溴乙酰溴溶于少量三氯甲烷中，并将其缓慢滴加，滴加完毕后，室温反应8小时，反应完全后，分离提纯可得到化合物FP-5；所述化合物FP-5的结构式如下：
；
4）将所得化合物FP-5溶于DMF中，在冰水浴下加入碳酸钾和吗啉，微量碘化钾，在室温下反应4h，反应完全后分离提纯得到化合物FP-6；所述化合物FP-6的结构式如下：
；
5）将所得化合物FP-6溶于DMF中，加入NaN3，氮气保护，100℃加热反应过夜，反应完全后，分离提纯即得到目标探针化合物Lyso-HS-HA。
所述步骤1）中加热回流反应时间为1小时；所述分离提纯方法为：硅胶柱色谱分离，洗脱剂配比为二氯甲烷：甲醇=10:1。
所述步骤2）中室温反应时间为4小时；所述分离提纯方法为：乙酸乙酯萃取2次，水洗3-4次，无水硫酸钠干燥，硅胶柱色谱分离，洗脱剂配比为二氯甲烷：甲醇=20:1。
所述步骤3）中分离提纯方法为：硅胶柱色谱分离，洗脱剂配比为二氯甲烷：甲醇=20:1。
所述步骤4）中分离提纯方法为：乙酸乙酯萃取2次，水洗3-4次，无水硫酸钠干燥，硅胶柱色谱分离，洗脱剂配比为二氯甲烷：甲醇=30:1。
所述步骤5）中分离提纯方法为：乙酸乙酯萃取2次，水洗3-4次，无水硫酸钠干燥，硅胶柱色谱分离，洗脱剂配比为二氯甲烷：甲醇=30:1。
上述荧光探针的合成路线如下式：
本发明Lyso-HS-HA探针的用途：该荧光探针可以应用于水环境和生物细胞溶酶体体系中H2S、HClO和H2S/HClO的同时或分别传感检测；所述的传感检测包含荧光检测，目视定性检测，细胞成像检测。
本发明的优点在于：
（1）实现了单一探针对多种靶标分子(H2S、HClO和H2S/HClO)的同时或分别检测，此外，对不同靶标分子可以产生不同的信号的响应；
（2）本发明对H2S和HClO具有选择的专一性，抗其他分子干扰能力强。
（3）此探针可以应用于检测细胞内溶酶体中的H2S和HClO，其中对硫化氢可以在荧光显微镜下的蓝通道进行成像，而对次氯酸可以在显微镜下的红通道进行成像，有良好的信号的分辨率，减少了信号直接的干扰。通过与商业化溶酶体绿染料进行比较，发现此荧光探针对溶酶体内H2S成像和溶酶体内的HClO成像的重合率高，这两个通道与溶酶体绿的共定位系数分别为蓝通道0.89，红通道0.86，说明此探针可以作为细胞内溶酶体内对H2S和HClO进行检测的荧光探针。
（4）此探针在水溶液中可以对H2S和HClO具有明显的颜色变化，在用手提紫外灯进行照射的条件下，探针对水溶液中的H2S可以呈现出蓝光，而对水溶液中的HClO呈现出红光，可进行实时定性的目视比色法检测。故而，本发明是一种简单，快速，灵敏的H2S和HClO分子特异性检测试剂，在生物分子检测领域具有广阔的应用前景。
附图说明
图1是实施例1中探针Lyso-HS-HA的1HNMR图谱；
图2是探针Lyso-HS-HA对H2S和HClO分别或同时加入荧光谱图的变化情况；
图3是探针Lyso-HS-HA对不同离子和分子的选择性荧光谱图；
图4是探针Lyso-HS-HA以380nm为激发波长对不同离子和分子的选择性柱状图数据，其中1、空白;2、Br-;3、Cl-;4、F-;5.I-;6、Cys；7、GHS;8、Hcy；9、H2O2;10、HSO3 -;11、S2O3 2-;12、SO3 2-13、SO4 2-;14、NO；15、NO3 -;16、Na2S；
图5是探针Lyso-HS-HA以550nm为激发波长对不同离子和分子的选择性柱状图数据，其中1、空白;2、Ag+;3、Au3+;4、Cu2+;5.Hg2+;6、Mg2+;7、HS-；8、N2H4;9、NO;10、NO2 -；11、NO3 -；12、H2O2;13、OH-；14、过氧叔丁醇;15、过氧叔丁醚;16、HClO；
图6是探针Lyso-HS-HA溶液在加入H2S，HClO和同时加入H2S/HClO前后溶液颜色的变化；
图7是探针Lyso-HS-HA溶液在加入H2S，HClO和同时加入H2S/HClO前后溶液用365nm手提紫外灯照射荧光颜色的变化；
图8是探针Lyso-HS-HA应用于细胞中对外源性H2S和HClO进行荧光成像图，a）只有荧光探针Lyso-HS-HA(5μM)的荧光成像明场图；b)只有荧光探针Mito-HN蓝通道成像图；c)只有荧光探针Mito-HN红通道成像图；d)明场与两个通道荧光成像图重叠图；e）荧光探针Lyso-HS-HA(5μM)并加入硫化钠(20μM)荧光成像明场图；f)对e蓝通道成像图；g)对e红通道成像图；h)明场与两个通道荧光成像图重叠图；i）荧光探针Lyso-HS-HA(5μM)并加入次氯酸钠(20μM)荧光成像明场图；j)对i蓝通道成像图；k)对i红通道成像图；l)明场与两个通道荧光成像图重叠图；m）荧光探针Lyso-HS-HA(5μM)并加入硫化钠(20μM)和次氯酸钠(30μM)荧光成像明场图；n)对m蓝通道成像图；o)对m红通道成像图；p)明场与两个通道荧光成像图重叠图；
图9是探针Lyso-HS-HA检测溶酶体内硫化氢成像图与商业化细胞溶酶体绿的共定位成像图，a)探针浓度为5μM与线粒体红加入到HeLa细胞中培养30min后加入20μM的硫化钠标准溶液明场图，b)探针分子对H2S的荧光蓝通道成像图；c)荧光红通道成像图；d)溶酶体绿对细胞内溶酶体体的荧光成像图，e)蓝通道与绿通道叠加图，f)蓝通道与绿通道叠加箭头部分荧光强度比较，g)蓝通道与绿通道叠加强度散点图；
图10是探针Lyso-HS-HA检测溶酶体内次氯酸成像图与商业化细胞溶酶体绿的共定位成像图，a)探针浓度为5μM与线粒体红加入到HeLa细胞中培养30min后加入20μM的次氯酸钠明场图，b)蓝通道成像；c)探针分子对HClO的荧光红通道成像图；d)溶酶体绿对细胞内溶酶体体的荧光成像图，e)绿通道与红通道叠加图，f)绿通道与红通道叠加箭头部分荧光强度比较，g)绿通道与红通道叠加强度散点图。
具体实施方式
下面结合实施例和附图对本发明做进一步说明，但本发明不受下述实施例的限制，实施例中化合物的号码对应上述方案中化合物的号码。
实施例1
探针Lyso-HS-HA的合成：
（1）化合物FP-2的合成
化合物FP-1（1.5g，3.2mmol,1eq）溶于25mL乙醇中，加入5mL80%的水合肼，氮气保护，加热回流反应1小时，用TCL板检测反应，反应完全后，减压旋干溶剂后得粗产品，并用硅胶柱进行分离，硅胶颗粒大小为200-300目，洗脱剂配比为二氯甲烷/甲醇=10:1，得产品FP-2，产量为82%。
（2）化合物FP-4的合成
化合物FP-2（140mg，0.52mmol,1eq）溶于3mLDMF中，室温搅拌，依次加入1-羟基苯并三唑（HOBt）（70.2mg，0.52mmol,1eq），碳化二亚胺（EDCI）（100mg，0.52mmol,1eq），反应半小时，然后加入化合物FP-3（245mg，0.52mmol,1eq），氮气保护，室温反应4小时，用TCL板检测反应，反应完全后，乙酸乙酯萃取2次，水洗3-4次，无水硫酸钠干燥，减压旋干溶剂后得粗产品，并用硅胶柱进行分离，硅胶颗粒大小为200-300目，洗脱剂配比为二氯甲烷/甲醇=20:1，得产品FP-4，产量为60%。
（3）化合物FP-5的合成
化合物FP-4（220mg，0.306mmol,1eq）溶于2mL三氯甲烷中，冰水浴条件下搅拌，加入三乙胺（8.5mg，0.712mmol,2eq），然后将溴乙酰溴（12.63mg，0.459mmol,1.5eq）溶于1mL三氯甲烷中，并将其缓慢滴加，滴加完毕后，室温反应8小时。用TCL板检测反应，反应完全后，减压旋干溶剂后得粗产品，并用硅胶柱进行分离，硅胶颗粒大小为200-300目，洗脱剂配比为二氯甲烷/甲醇=20:1，得产品FP-5，产量为76%。
（4）化合物FP-6的合成
化合物FP-5（120mg，0.143mmol,1eq）溶于3mLDMF中，冰水浴条件下搅拌，加入碳酸钾（50mg，0.36mmol,2.5eq），吗啉（18.7mg，0.215mmol,1.5eq），微量的碘化钾，然后室温反应4小时。用TCL板检测反应，反应完全后，乙酸乙酯萃取2次，水洗3-4次，无水硫酸钠干燥，减压旋干溶剂后得粗产品，并用硅胶柱进行分离，硅胶颗粒大小为200-300目，洗脱剂配比为二氯甲烷/甲醇=30:1，得产品PF-6，产量为81%。
（5）化合物Lyso-HS-HA的合成
化合物FP-6(50mg，0.06mmol,1eq)溶于3mLDMF中，然后加入叠氮化钠（11.7mg，0.18mmol,3eq），氮气保护，100℃加热反应过夜，用TCL板检测反应，反应完全后，乙酸乙酯萃取2次，水洗3-4次，无水硫酸钠干燥，减压旋干溶剂后得粗产品，并用硅胶柱进行分离，硅胶颗粒大小为200-300目，洗脱剂配比为二氯甲烷/甲醇=30:1，产量为73%。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.42(s,1H),8.23(s,1H),7.83(dd,J=18.3,7.4Hz,2H),7.67–7.51(m,2H),7.25(s,1H),7.19(d,J=7.9Hz,1H),7.06(d,J=6.4Hz,1H),6.65(d,J=7.2Hz,2H),6.56(d,J=8.7Hz,1H),6.46(d,J=8.7Hz,1H),6.41–6.24(m,2H),3.73(s,2H),3.53(s,2H),3.32(dd,J=23.9,17.5Hz,10H),3.19(s,2H),2.84(q,J=14.3Hz,2H),2.12(s,4H),1.08(t,J=6.5Hz,6H)。
实施例2
荧光探针Lyso-HS-HA随着H2S、HClO的同时或分别加入荧光谱图的变化
取实施例1制备的Lyso-HS-HA荧光探针溶于N,N-二甲基甲酰胺（DMF）中，制成1mmol/L储备液。从储备液中取出30μL加入到5mL的离心管当中，用50%DMF与PBS缓冲液2mL(0.1mol/L，pH=7.4)进行稀释，然后加入不同当量（0-10eq）的H2S标准溶液，用50%DMF与PBS缓冲液至3mL，用380nm进行激发，测量其荧光谱图的变化(如图2a所示)。探针溶液随着硫化钠(H2S供体)的逐渐加入，450nm的荧光峰逐渐增强。同样的方法可以测试探针对HClO响应的荧光光谱如图2b所示，用550nm的光进行激发，探针溶液随着次氯酸的逐渐加入，580nm的荧光峰逐渐增强。此外，当探针对次氯酸响应后，向探针溶液中加入H2S，利用380nm的光进行激发，探针仍然可以对硫化氢进行光谱响应(如图2c所示)。同样的道理，当探针对硫化氢响应完全后，加入次氯酸，利用380nm的光进行激发，探针在580nm的峰也是逐渐升高的(如图2d所示)。因此，此荧光探针可以对硫化氢和次氯酸同时或分别响应，产生不同的响应信号。
实施例3
化合物Lyso-HS-HA荧光探针的两个反应位点对不同分子或离子的选择性
从实施例2中荧光探针储备液中取出30μL分别加入到16个5mL的离心管当中，用2mLPBS进行稀释后，再分别向14个离心管中加入10当量的竞争分子标准溶液，其中一个什么离子也不加，作为空白样品，另一个加入10当量的硫化氢或次氯酸标准溶液，15min后检测溶液的荧光发射光谱变化，其中检测硫化氢位点的选择性实验是用380nm作为激发光进行谱图测试，而检测次氯酸位点的选择性实验是用550nm的作为激发光进行谱图测试，其结果如图3所示，选择性柱状图如图4和图5所示。由测试结果可以发现，其他阴离子、还原性化合物(如Cys，GSH和Hcy)对化合物450nm的荧光峰几乎没有影响，而加入硫化钠后450nm处的荧光峰明显增强，说明化合物Lyso-HS-HA在还原性物质方面对硫化氢具有良好的选择专一性。对氧化性物质方面，化合物Lyso-HS-HA对金属阳离子和氧化性物质进行了选择性测试，发现金属阳离子或其他氧化性物质(如H2O2，过氧叔丁醇和过氧叔丁醚等)对化合物580nm处的荧光峰几乎没有影响，而加入次氯酸后580nm处的荧光峰明显增强，说明化合物Lyso-HS-HA在氧化性物质方面对次氯酸具有良好的选择专一性。
实施例4
化合物Lyso-HS-HA荧光探针对硫化氢和次氯酸的可视化检测
从实施例2中荧光探针储备液中取出1ml分别加入到四个5mL小玻璃瓶中，第一个瓶为空白样，什么都不加，第二个瓶加入10摩尔当量的硫化钠标准溶液，第三瓶加入10当量的次氯酸标准溶液，第四个瓶同时加入10当量的硫化钠和次氯酸溶液，由实验结果发现溶液发生明显的颜色变化，空白溶液是无色的，加入硫化钠的溶液呈现黄色，加入次氯酸的溶液呈现深红色，而同时加入硫化钠和次氯酸的溶液呈现浅红色（图6）。伴随着紫外灯照射，肉眼可以观测到溶液所发射的荧光也有了明显的改变，空白溶液几乎没有荧光发出，而加入硫化钠的溶液呈现蓝色，加入次氯酸的溶液呈现红色，而同时加入硫化钠和次氯酸的溶液呈现紫色（图7），说明Lyso-HS-HA是一种具有对硫化氢和次氯酸进行可视化区分，是一种具有生色传感功能的荧光探针。
实施例5
化合物Lyso-HS-HA荧光探针在细胞内对H2S和HClO进行荧光成像
我们将本发明所得到的荧光探针Lyso-HS-HA应用到HeLa细胞中对H2S和HClO进行荧光成像应用。具体操作步骤如下：将5μMLyso-HS-HA荧光探针的DMSO溶液加入到四个育有HeLa细胞的培养皿中，并对培养皿进行编号。在一号培养皿中什么都不加，二号培养皿中加入20μM硫化钠。在二氧化碳培养箱中培养30min后，用共聚焦显微镜进行成像。三号培养皿加入20μM次氯酸钠在二氧化碳培养箱中培养30min后，用共聚焦显微镜进行成像，第四个培养皿加入20μM硫化钠培养30min后再加入30μM次氯酸钠在二氧化碳培养箱中培养30min然后用共聚焦显微镜进行成像，首先对一号培养皿进行成像。分别用405nm和561nm的激光进行激发，用蓝色通道（425nm-475nm）和红色通道（570nm-620nm）对细胞进行荧光成像，结果如图8所示。实验结果表明在只有探针存在的培养皿的细胞中，两个通道都观察不到荧光在细胞内发出。而加入硫化钠的培养皿的细胞中，可以在蓝通道观察到荧光发出；在加入次氯酸钠的培养内的细胞中，可以在红通道检测到荧光发出；而在加入硫化钠和次氯酸钠的培养内的细胞中可以在蓝通道和红通道都可以检测到荧光信号的发出。说明Lyso-HS-HA荧光探针可以对细胞外源性的硫化氢和次氯酸进行多信号组合的荧光成像。
实施例6
化合物Lyso-HS-HA荧光探针在细胞内对H2S和HClO成像并与商业溶酶体体染料共定位比较
我们将本发明所得到的荧光探针Lyso-HS-HA应用到HeLa细胞中与商业化的溶酶体染料进行共定位实验，说明本探针可以定位到溶酶体中，并对溶酶体内H2S和HClO进行荧光成像应用（图9和图10）。具体操作步骤如下：将5μMLyso-HS-HA探针DMSO溶液和商业化溶酶体染料-溶酶体绿10nM加入到育有HeLa细胞的两个培养皿中，在二氧化碳培养箱中培养30min后，向第一个培养皿中加入20μM的硫化钠溶液后，在二氧化碳培养箱中培养20min后用共聚焦显微镜进行成像，此时用（Ex=405nm）进行激发可以通过蓝色通道对细胞进行成像，此为Lyso-HS-HA探针与H2S响应后发射的光，用光（Ex=488nm）进行激发可以通过绿色通道对细胞进行成像，此为商业化染料溶酶体绿对细胞内的溶酶体进行的荧光成像，用软件进行处理可以得出两种染料的共定位系数为0.89。同样的方式可以测定Lyso-HS-HA对次氯酸进行红通道成像与溶酶体绿共定位的共定位系数为0.86。

Claims (8)

1.一种同时或分别检测细胞溶酶体内硫化氢和次氯酸的荧光探针，其特征在于，探针的分子式为C44H43N9O7，其结构式如式（Ⅰ）所示：
。
2.一种权利要求1所述的荧光探针的制备方法，其特征在于，它包括以下步骤：
1）将化合物FP-1与水合肼在乙醇中，氮气保护，加热回流反应，反应完全后分离提纯得到化合物FP-2；所述化合物FP-1结构式如下：
；所述化合物FP-2结构式如下：
；
2）将所得化合物FP-2溶于DMF中，依次加入1-羟基苯并三唑和碳化二亚胺，室温下反应30min后加入化合物FP-3，在氮气保护下，室温下反应，反应完全后分离提纯得到化合物FP-4；所述化合物FP-3结构式如下：
；所述化合物FP-4的结构式如下：
；
3）将所得化合物FP-4溶于三氯甲烷中，冰水浴条件下搅拌，加入三乙胺，然后将溴乙酰溴溶于少量三氯甲烷中，并将其缓慢滴加，滴加完毕后，室温反应8小时，反应完全后，分离提纯可得到化合物FP-5；所述化合物FP-5的结构式如下：
；
4）将所得化合物FP-5溶于DMF中，在冰水浴下加入碳酸钾和吗啉，微量碘化钾，在室温下反应4h，反应完全后分离提纯得到化合物FP-6；所述化合物FP-6的结构式如下：
；
5）将所得化合物FP-6溶于DMF中，加入NaN3，氮气保护，100℃加热反应过夜，反应完全后，分离提纯即得到目标探针化合物Lyso-HS-HA。
3.根据权利要求2所述的荧光探针的制备方法，其特征在于，所述步骤1）中加热回流反应时间为1小时；所述分离提纯方法为：硅胶柱色谱分离，洗脱剂配比为二氯甲烷：甲醇=10:1。
4.根据权利要求2所述的荧光探针的制备方法，其特征在于，所述步骤2）中室温反应时间为4小时；所述分离提纯方法为：乙酸乙酯萃取2次，水洗3-4次，无水硫酸钠干燥，硅胶柱色谱分离，洗脱剂配比为二氯甲烷：甲醇=20:1。
5.根据权利要求2所述的荧光探针的制备方法，其特征在于，所述步骤3）中分离提纯方法为：硅胶柱色谱分离，洗脱剂配比为二氯甲烷：甲醇=20:1。
6.根据权利要求2所述的荧光探针的制备方法，其特征在于，所述步骤4）中分离提纯方法为：乙酸乙酯萃取2次，水洗3-4次，无水硫酸钠干燥，硅胶柱色谱分离，洗脱剂配比为二氯甲烷：甲醇=30:1。
7.根据权利要求2所述的荧光探针的制备方法，其特征在于，所述步骤5）中分离提纯方法为：乙酸乙酯萃取2次，水洗3-4次，无水硫酸钠干燥，硅胶柱色谱分离，洗脱剂配比为二氯甲烷：甲醇=30:1。
8.一种权利要求1所述的同时或分别检测细胞溶酶体内硫化氢和次氯酸的荧光探针的应用，其特征在于，所述荧光探针可以应用于水环境中和细胞溶酶体中H2S、HClO和H2S/HClO的同时或分别传感检测；所述的传感检测包含荧光检测，目视定性检测，细胞成像检测。
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