CN105770990B - 一种人造皮肤支架材料的制备方法 - Google Patents

一种人造皮肤支架材料的制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种人造皮肤支架材料的制备方法,其以羧甲基壳聚糖与海藻酸钠或氧化海藻酸钠,按质量比1:2的混合物为溶质,蒸馏水或林格氏液等为溶剂,在专用成型模具中,通过形成垂直方向的温度梯度冷冻成型,即得内部成蜂窝状多孔结构;且从下表面至上表面,各孔孔径分别从大到小成梯度渐变,其中,上表面的孔径为5‑70μm,下表面的孔径为50‑200μm,每相邻两孔彼此贯通的、具有皮肤仿生结构的多孔材料。本发明制备工艺简单、易控,制造成本低,所制得的产品质量好、品质稳定,具有皮肤仿真结构、具有良好的吸水性、生物可降解性、生物相容性以及抗菌、抗病毒和抗凝血功能性。

Description

一种人造皮肤支架材料的制备方法
技术领域
本发明涉及一种医用多孔材料的制备方法,尤其涉及一种人造皮肤支架材料的制备方法。
背景技术
生物材料的选择决定了所构建的多孔支架材料生物相容性的优劣。海藻酸钠是从海藻植物里提取的天然材料,是美国食品药品管理局(FDA)批准用于组织工程等医学领域的天然生物材料之一。
海藻酸钠这种多糖具有与皮肤真皮基质成分:氨基聚糖类似的结构,生物相容性良好,皮肤成纤维细胞、肝细胞、软骨细胞和成骨细胞等均易在海藻酸盐多孔材料中成活并形成细胞外基质,同时海藻酸钠还具备良好的成膜性、凝胶性、吸湿性、阻隔细菌等特性,因此应用广泛。
组织工程皮肤支架能够为皮肤细胞的体外培养提供合适环境,以解决糖尿病足溃疡、烧伤等问题造成的皮肤缺损问题。临床常用或研究的皮肤组织工程支架多以均一孔径的支架为主,如武汉纺织大学朱平在2012年硕士毕业论文“海藻酸盐多孔材料的制备与性能研究”中研究了浓度为2%的海藻酸盐溶液在-20℃低温冰箱中预冻,纵截面形成100-500μm均匀孔隙的多孔材料。由于低温冰箱中温度的传导沿预冻模型轴向,因此沿此方向多孔材料孔径有差异,但纵截面孔径大小相同,青岛大学郝晓丽2010年在其博士毕业论文“海藻酸钙冻干膜及海藻酸钙基互穿网络膜材料的制备与性能研究”中研究了浓度为2%的海藻酸盐溶液在-5℃低温冰箱预冻,纵截面孔隙均匀,孔径为100-300μm,虽然材料制备简单,但是由于孔径单一,不适合全层皮肤的培养,使用于临床时容易造成瘢痕。有研究表明,具有皮肤仿生结构的梯度渐变组织工程支架更利于皮肤的再生,针对皮肤仿生结构的皮肤组织工程支架,研究报道多为采用双层或多层复合的方法或其他方法制备,该方法较为耗时如Harley及Oh等人研究使用旋转/离心技术结合冷冻干燥技术构建径向具有梯度孔结构的多孔支架,支架的孔径大小可以通过旋转速度来调节,但此技术一般只适用于制备血管用管状支架材料,对于构建其他支架材料不适用(Harley,B.A.,Hastings,A.Z.,Yannas,I.V.&Sannino,A.Fabricating tubular scaffolds with a radial pore size gradient by aspinning technique.Biomaterials 27,866-874,doi:10.1016/j.biomaterials.2005.07.012(2006);Oh,S.H.,Park,I.K.,Kim,J.M.&Lee,J.H.In vitroand in vivo characteristics of PCL scaffolds with pore size gradientfabricated by a centrifugation method.Biomaterials28,1664-1671,doi:10.1016/j.biomaterials.2006.11.024(2007)),Wu、Zhang和Mao等人使用不同致孔剂结合冷冻干燥技术形成梯度孔或双层支架结构,通过调节致孔剂大小来控制孔径分布,但是致孔剂较难完全去除干净,残留致孔剂对材料后期使用不利(Wu,H.et al.Fabrication of chitosan-g-polycaprolactone copolymer scaffolds with gradient porousmicrostructures.Materials Letters62,2733-2736,doi:10.1016/j.matlet.2008.01.029(2008);Zhang,Q.,Lu,H.,Kawazoe,N.&Chen,G.Preparation ofcollagen porous scaffolds with a gradient pore size structure using iceparticulates.Materials Letters107,280-283,doi:10.1016/j.matlet.2013.05.070(2013);Mao,J.S.,Zhao,L.G.,Yin,Y.J.&Yao,K.D.Structure and properties ofbilayer chitosan-gelatin scaffolds.Biomaterials 24,1067-1074,doi:Pii S0142-9612(02)00442-8),Mao等人将试样置于单向导热的环境中,制备了双层支架材料,由于预冻温度单一,形成的支架孔径不可调控,且未形成梯度孔结构,TanyaJ.Levingstone等使用层层自组装的方法构建三层梯度仿生软骨支架,每层支架均通过冷冻干燥制备,制备一次软骨支架需要三次冷冻干燥过程,费时费力(Levingstone,T.J.,Matsiko,A.,Dickson,G.R.,O'Brien,F.J.&Gleeson,J.P.A biomimetic multi-layered collagen-basedscaffold for osteochondral repair.Acta Biomaterialia 10,1996-2004,doi:10.1016/j.actbio.2014.01.005(2014))。
完整皮肤具有表皮和真皮结构,而真、表皮细胞生长所需要的孔径大小不同。有研究表明,20μm更适合表皮细胞的生长,80μm更适合真皮成纤细胞的生长。并且,表皮细胞和真皮成纤细胞联合培养时细胞间的相互作用可更快促进伤口愈合,促进新皮的再生,并能避免瘢痕的形成。而具有梯度孔结构的皮肤工程支架可同时容纳表皮细胞和真皮成纤细胞,比单层皮肤组织工程支架更具优越性。
发明内容
本发明的目的是,提供一种上述的人造皮肤支架材料的制备方法,其工艺简单、易控、制造成本低,产品质量稳定。
本发明为实现上述目的所采用的技术方案是,一种人造皮肤支架材料的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
第一步,原料制备
按质量比1︰2,将羧甲基壳聚糖与海藻酸钠或氧化海藻酸钠均匀混合,备用;
按溶质与溶剂的质量比为1-20︰100,将上述羧甲基壳聚糖与海藻酸钠或氧化海藻酸钠的混合物溶于去离子水、蒸馏水、生理盐水、注射用水或林格氏液中,搅拌至完全溶解,得到海藻酸钠-羧甲基壳聚糖溶液或氧化海藻酸钠-羧甲基壳聚糖溶液;
上述羧甲基壳聚糖的相对分子质量≥10万,取代度≥80%;海藻酸钠或氧化海藻酸钠的相对分子质量均≥10万;
第二步,在专用模具内冷冻成型
将海藻酸钠-羧甲基壳聚糖溶液或氧化海藻酸钠-羧甲基壳聚糖溶液倾倒入专用模具中,控制液深为0.5-5mm,在温度20-50℃的环境中静置0.5-1h,以使其充分交联;然后,置于真空脱泡机内,在真空度为1000Pa下脱泡0.5-1h;
上述专用模具为一带上盖的平底容器,其周边壁面材质为绝热材料,底板材质为银或铜;
在专用模具内部底面上,均匀设置有若干数量、竖直朝上的导热针,所述导热针的长度≥5mm;所述导热针布置的疏密程度与仿生皮肤内毛孔分布的疏密程度一致;
之后,扣紧上盖并将专用模具置于平板式换热器换热表面上进行冷冻,直至冻结成型,得到固态多孔结构形式的海藻酸钠-羧甲基壳聚糖或氧化海藻酸钠-羧甲基壳聚糖;
上述平板式换热器的冷却媒质为液氮;
上述冷冻过程是按如下方法控制的:平板式换热器换热表面温度采用阶梯升温方式,以-75℃为起始温度、-15℃为终点温度,在起始温度下保温45min,之后每升温5℃保温一次,每次保温时间为30-45min;
或者,平板式换热器换热表面温度采用阶梯降温方式,以-15℃为起始温度、-75℃为终点温度,在起始温度下保温45min,之后每降温5℃保温一次,每次保温时间为30-45min;
第三步,真空干燥
将所得固态多孔材料从专用模具中取出,蒸馏水洗净并放入真空干燥机中,真空干燥至绝干,即得成品。
上述技术方案直接带来的技术效果是,制备工艺简单、易控,既有利于产品质量的稳定,有利于制造成本的降低。
所制得的海藻酸盐三维梯度人体皮肤仿真结构多孔材料具有皮肤仿生结构,其内部成蜂窝状,包括若干数量的孔,每相邻两孔彼此贯通;并且,从下表面至上表面,各孔孔径分别从大到小成梯度渐变,其中,上表面的孔径为5-70μm,下表面的孔径为50-200μm。这种梯度孔结构的海藻酸钠多孔材料,其适于用作皮肤工程支架,可同时容纳表皮细胞和真皮成纤细胞,比单层皮肤组织工程支架更具优越性。
并且,由于多孔材料的主要化学成分为海藻酸盐和羧甲基壳聚糖(杂质成分主要包括生理盐水、注射用水或林格氏液经水分蒸发后的固相残留物)。因而具有良好的生物相容性、可降解性和良好的吸水性能。
更为重要的是,海藻酸钠/氧化海藻酸钠这种多糖具有与皮肤真皮基质成分:氨基聚糖类似的结构,由于其生物相容性良好,皮肤成纤维细胞、肝细胞、软骨细胞和成骨细胞等均易在海藻酸盐多孔材料中成活并形成细胞外基质,同时海藻酸钠还具备良好的成膜性、凝胶性、吸湿性、阻隔细菌等特性,特别适于用作人体皮肤工程支架。
上述技术方案中,在海藻酸钠/氧化海藻酸钠中混入羧甲基壳聚糖,其中的羧甲基壳聚糖有两方面的用途:
其一是,羧甲基壳聚糖是一种两性聚电解质,具有良好的生物相容性,在体内的生物降解以酶解为主,以羧甲基壳聚糖作为海藻酸盐的化学交联剂,以使海藻酸盐多个线型分子相互键合交联成网状结构,可使材料的降解性能得到明显改善;
其二是,羧甲基壳聚糖具有抗感染、抗凝血、抗病毒等功能。羧甲基壳聚糖成分的加入,使得最终制备出的多孔材料具有良好的抗感染、抗凝血和抗病毒等功能性。
上述技术方案中,盛装有海藻酸钠-羧甲基壳聚糖或氧化海藻酸钠-羧甲基壳聚糖溶液的专用模具叠放在平板式换热器的换热表面上,进行热交换(制冷)。此时,在竖直方向上的不同标高位置处,在海藻酸钠-羧甲基壳聚糖或氧化海藻酸钠-羧甲基壳聚糖溶液内部必然存在一定的温差或被冻结过程的先后顺序,且这种温差或被冻结过程的先后顺序必然导致最终冻结成型的海藻酸钠-羧甲基壳聚糖或氧化海藻酸钠-羧甲基壳聚糖多孔材料从下表面至上表面,各孔孔径分别从大到小成梯度渐变。
概括而言,上述技术方案的关键点就在于:采用定向冷冻干燥法,通过控制模具内水平温度场的均匀性和纵向温度的渐变,以使所制得的海藻酸盐三维梯度人体皮肤仿真结构多孔材料具有皮肤仿生结构,其内部成蜂窝状,包括若干数量的孔,每相邻两孔彼此贯通;并且,从下表面至上表面,各孔孔径分别从大到小成梯度渐变,其中,上表面的孔径为5-70μm,下表面的孔径为50-200μm。
优选为,上述平板式换热器换热表面温度由计算机控制,平板式换热器的换热表面的降温速率为-5℃/min~-10℃/min、平板式换热器的换热表面的升温速率为+5℃/min~+10℃/min。
该优选技术方案直接带来的技术效果是,可以更好地保证三维梯度孔的成形质量。
进一步优选,上述所述氧化海藻酸钠是按如下方法制备得到的:
(1)、将海藻酸钠放入单口烧瓶,加入去离子水,搅拌至充分溶解,制成海藻酸钠水溶液,并滴加盐酸调节pH=4;
(2)、使用锡箔纸包裹单口烧瓶,并向溶液中加入适量高碘酸钠,在25℃下磁力搅拌,避光反应3-5h;
(3)、然后,加入乙二醇终止氧化反应0.5-1h;
再加入适量氯化钠,待充分沉淀后,取沉淀物依次用乙醇、去离子水沉淀洗涤纯化,即得。
该优选技术方案直接带来的技术效果是,采用上述方法现场制取的氧化海藻酸钠,有利于使海藻酸钠部分糖醛酸单元的羟基转变成醛基,从而获得良好的降解性能和反应活性。
进一步优选,上述导热针为锥形针,按细端在上、粗端在下方式布置。
该优选技术方案直接带来的技术效果是,“导热针为锥形针,按细端在上、粗端在下方式布置”这一技术特征,与所需获得的“从下表面至上表面,各孔孔径分别从大到小成梯度渐变”这种结构形式的孔的形状相对应,这将更进一步地,尽快产品制备过程的冷冻成型速度和冷冻成型质量,更便于最终产品质量控制与质量稳定。
进一步优选,上述专用模具为组合式结构,包括底座与管筒,底座与管筒承插连接,成过盈配合。
该优选技术方案直接带来的技术效果是,便于冷冻成型后的多孔材料的简单、快速脱模,并可降低脱模过程中可能因外力的施加,所造成的对多孔材料的冲击和损伤。
综上所述,本发明相对于现有技术,具有制备工艺简单、易控,所制备出的多孔材料产品具有“从下表面至上表面,各孔孔径分别从大到小成梯度渐变”这种具有三维梯度孔结构形式;并且产品质量稳定、制造成本较低等有益效果。
具体实施方式
下面结合实施例,对本发明进行详细说明。
说明:
一、以下各实施例的原料来源如下:
羧甲基壳聚糖:相对分子质量≥10万,取代度≥80%;为市售产品;
海藻酸钠:相对分子质量均≥10万;市售产品或从天然海藻植物里提取;
氧化海藻酸钠(相对分子质量均≥10万):是按如下方法制备得到的:
(1)、将海藻酸钠放入单口烧瓶,加入去离子水,搅拌至充分溶解,制成海藻酸钠水溶液,并滴加盐酸调节pH=4;
(2)、使用锡箔纸包裹单口烧瓶,并向溶液中加入适量高碘酸钠,在25℃下磁力搅拌,避光反应3-5h;
(3)、然后,加入乙二醇终止氧化反应0.5-1h;
再加入适量氯化钠,待充分沉淀后,取沉淀物依次用乙醇、去离子水沉淀洗涤纯化,即得。
二、产品质量和性能参数指标检测与检验:
1、孔径的测量方法:使用手术刀,沿纵向剖切,置于电镜下,分别选择放大倍数30倍、50倍进行观测。
2、孔隙率的测量方法:液体位移法。
实施例1
按质量比1︰2,将羧甲基壳聚糖与海藻酸钠均匀混合,备用;
按溶质与溶剂的质量比为1︰100,将上述羧甲基壳聚糖与海藻酸钠的混合物溶于去离子水中,搅拌至完全溶解,制得海藻酸钠-羧甲基壳聚糖溶液;
将海藻酸钠-羧甲基壳聚糖溶液倒入专用模具中,海藻酸钠-羧甲基壳聚糖溶液液面至模具底板高度为3mm,在30℃的环境中静置0.5h,以使其充分交联;然后,置于真空脱泡机内,在真空度为1000Pa下脱泡0.5-1h;
之后,扣紧上盖并将专用模具置于平板式换热器换热表面上进行冷冻,直至冻结成型,得到固态多孔结构形式的海藻酸钠-羧甲基壳聚糖或氧化海藻酸钠-羧甲基壳聚糖;
冷冻过程是按如下方法控制的:平板式换热器换热表面温度采用阶梯升温方式,以-75℃为起始温度、-15℃为终点温度,在起始温度下保温45min,之后每升温5℃保温一次,每次保温时间为30-45min;
之后,将经过冷冻成型的样品,入真空冷冻干燥机冻干,即得产品。
经检验:
所得产品的空隙率为85%;从下表面至上表面,各孔孔径分别从大到小成梯度渐变,其中,小孔孔径为18μm,大孔孔径为96μm。
实施例2
除原料为氧化海藻酸钠、冷冻过程控制方法为:平板式换热器换热表面温度采用阶梯降温方式,以-15℃为起始温度、-75℃为终点温度,在起始温度下保温45min,之后每降温5℃保温一次,每次保温时间为30-45min之外;
其余,均同实施例1。
经检验:
所得产品的空隙率为86%;从下表面至上表面,各孔孔径分别从大到小成梯度渐变,其中,小孔孔径为13μm,大孔孔径为112μm。
实施例3
除海藻酸钠-羧甲基壳聚糖溶液液面至模具底板高度为0.5mm;在温度20℃的环境中静置1h,以使其充分交联;冷冻过程控制方法为:平板式换热器换热表面温度采用阶梯降温方式,以-15℃为起始温度、-75℃为终点温度,在起始温度下保温45min,之后每降温5℃保温一次,每次保温时间为30-45min之外;
其余,均同实施例1。
经检验:
所得产品的空隙率为80%;从下表面至上表面,各孔孔径分别从大到小成梯度渐变,其中,小孔孔径为8μm,大孔孔径为145μm。
实施例4
除氧化海藻酸钠-羧甲基壳聚糖溶液液面至模具底板高度为5mm、在温度50℃的环境中静置1h,以使其充分交联之外;
其余,均同实施例2。
经检验:
所得产品的空隙率为87%;从下表面至上表面,各孔孔径分别从大到小成梯度渐变,其中,小孔孔径为21μm,大孔孔径为137μm。
实施例5
除使用生理盐水替代去离子水之外;其余,均同实施例1。
经检验:
所得产品的空隙率为85%;从下表面至上表面,各孔孔径分别从大到小成梯度渐变,其中,小孔孔径为15μm,大孔孔径为105μm。
实施例6
除使用注射用水替代去离子水之外;其余,均同实施例1。
经检验:
所得产品的空隙率为83%;从下表面至上表面,各孔孔径分别从大到小成梯度渐变,其中,小孔孔径为20μm,大孔孔径为120μm。
实施例7
除使用林格氏液替代去离子水之外;其余,均同实施例1。
经检验:
所得产品的空隙率为82%;从下表面至上表面,各孔孔径分别从大到小成梯度渐变,其中,小孔孔径为5μm,大孔孔径为145μm。
实施例8
除海藻酸钠-羧甲基壳聚糖是按溶质与溶剂的质量比为1︰5,将羧甲基壳聚糖与海藻酸钠的混合物溶于去离子水中之外,其余,均同实施例1。
经检验:
所得产品的空隙率为85%;从下表面至上表面,各孔孔径分别从大到小成梯度渐变,其中,小孔孔径为58μm,大孔孔径为182μm。
实施例9
除海藻酸钠-羧甲基壳聚糖是按溶质与溶剂的质量比为1︰10,将羧甲基壳聚糖与海藻酸钠的混合物溶于去离子水中之外,其余,均同实施例1。
经检验:
所得产品的空隙率为87%;从下表面至上表面,各孔孔径分别从大到小成梯度渐变,其中,小孔孔径为65μm,大孔孔径为185μm。
实施例10
除氧化海藻酸钠-羧甲基壳聚糖是按溶质与溶剂的质量比为1︰10,将羧甲基壳聚糖与氧化海藻酸钠的混合物溶于去离子水中之外,其余,均同实施例2。
经检验:
所得产品的空隙率为86%;从下表面至上表面,各孔孔径分别从大到小成梯度渐变,其中,小孔孔径为62μm,大孔孔径为190μm。
实施例11
除冷冻成型过程中,平板式换热器的换热表面的升温速率为+5-10℃/min;当平板式换热器的换热表面的温度为-75℃时,将专用模具置于平板式换热器换热表面上,当平板式换热器的换热表面的温度为-15℃时,将专用模具从平板式换热器换热表面上移走;
氧化海藻酸钠-羧甲基壳聚糖是按溶质与溶剂的质量比为1︰5,将羧甲基壳聚糖与氧化海藻酸钠的混合物溶于去离子水中之外;
其余,均同实施例2。
经检验:
所得产品的空隙率为84%;从下表面至上表面,各孔孔径分别从大到小成梯度渐变,其中,小孔孔径为9μm,大孔孔径为50μm。
说明:
1、平板式换热器换热表面温度由计算机控制,平板式换热器的换热表面的降温速率为-5℃/min~-10℃/min、平板式换热器的换热表面的升温速率为+5℃/min~+10℃/min。
2、专用模具为一带上盖的平底容器,其周边壁面材质为绝热材料,底板材质为银或铜;
在专用模具内部底面上,均匀设置有若干数量、竖直朝上的导热针,所述导热针的长度≥5mm;所述导热针布置的疏密程度与仿生皮肤内毛孔分布的疏密程度一致。
3、平板式换热器的冷却媒质为液氮。

Claims (5)

1.一种人造皮肤支架材料的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
第一步,原料制备
按质量比1︰2,将羧甲基壳聚糖与海藻酸钠或氧化海藻酸钠均匀混合,备用;
按溶质与溶剂的质量比为1-20︰100,将上述羧甲基壳聚糖与海藻酸钠或氧化海藻酸钠的混合物溶于去离子水、蒸馏水、生理盐水、注射用水或林格氏液中,搅拌至完全溶解,得到海藻酸钠-羧甲基壳聚糖溶液或氧化海藻酸钠-羧甲基壳聚糖溶液;
上述羧甲基壳聚糖的相对分子质量≥10万,取代度≥80%;海藻酸钠或氧化海藻酸钠的相对分子质量均≥10万;
第二步,在专用模具内冷冻成型
将海藻酸钠-羧甲基壳聚糖溶液或氧化海藻酸钠-羧甲基壳聚糖溶液倾倒入专用模具中,控制液深为0.5-5mm,在温度20-50℃的环境中静置0.5-1h,以使其充分交联;然后,置于真空脱泡机内,在真空度为1000Pa下脱泡0.5-1h;
上述专用模具为一带上盖的平底容器,其周边壁面材质为绝热材料,底板材质为银或铜;
在专用模具内部底面上,均匀设置有若干数量、竖直朝上的导热针,所述导热针的长度≥5mm,所述导热针为锥形针,按细端在上、粗端在下方式布置;所述导热针布置的疏密程度与仿生皮肤内毛孔分布的疏密程度一致;
之后,扣紧上盖并将专用模具置于平板式换热器换热表面上进行冷冻,直至冻结成型,得到固态多孔结构形式的海藻酸钠-羧甲基壳聚糖或氧化海藻酸钠-羧甲基壳聚糖;
上述平板式换热器的冷却媒质为液氮;
上述冷冻过程是按如下方法控制的:平板式换热器换热表面温度采用阶梯升温方式,以-75℃为起始温度、-15℃为终点温度,在起始温度下保温45min,之后每升温5℃保温一次,每次保温时间为30-45min;
或者,平板式换热器换热表面温度采用阶梯降温方式,以-15℃为起始温度、-75℃为终点温度,在起始温度下保温45min,之后每降温5℃保温一次,每次保温时间为30-45min;
第三步,真空干燥
将所得固态多孔材料从专用模具中取出,蒸馏水洗净并放入真空干燥机中,真空干燥至绝干,即得成品。
2.根据权利要求1所述的人造皮肤支架材料的制备方法,其特征在于,所述平板式换热器换热表面温度由计算机控制,平板式换热器的换热表面的降温速率为-5℃/min~-10℃/min、平板式换热器的换热表面的升温速率为+5℃/min~+10℃/min。
3.根据权利要求1所述的人造皮肤支架材料的制备方法,其特征在于,所述氧化海藻酸钠是按如下方法制备得到的:
(1)、将海藻酸钠放入单口烧瓶,加入去离子水,搅拌至充分溶解,制成海藻酸钠水溶液,并滴加盐酸调节pH=4;
(2)、使用锡箔纸包裹单口烧瓶,并向溶液中加入适量高碘酸钠,在25℃下磁力搅拌,避光反应3-5h;
(3)、然后,加入乙二醇终止氧化反应0.5-1h;
再加入适量氯化钠,待充分沉淀后,取沉淀物依次用乙醇、去离子水沉淀洗涤纯化,即得。
4.根据权利要求1-3任一所述的人造皮肤支架材料的制备方法,其特征在于,所述专用模具为组合式结构,包括底座与管筒,底座与管筒承插连接,成过盈配合。
5.根据权利要求1-3任一所述的人造皮肤支架材料的制备方法,其特征在于,所制得的海藻酸盐三维梯度人体皮肤仿真结构多孔材料具有皮肤仿生结构,其内部成蜂窝状,包括若干数量的孔,每相邻两孔彼此贯通;并且,从下表面至上表面,各孔孔径分别从大到小成梯度渐变,其中,上表面的孔径为5-70μm,下表面的孔径为50-200μm。
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