CN105663282A - 一种牡丹籽油脂肪乳剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种牡丹籽油脂肪乳剂及其制备方法。所述牡丹籽油脂肪乳剂由如下按重量百分数计算的组分组成：牡丹籽油组分1~30%；注射用油0~10%；乳化剂1~10%；增溶剂1~8%；抗氧剂0.01~0.03%；等渗调节剂0~2.5%；调味剂0~5%；防腐剂0~0.1%；余量为纯化水或注射用水；所述牡丹籽油组分为纯牡丹籽油或其与灵芝孢子油和/或薏苡仁油组成的混合物。所述牡丹籽油脂肪乳剂可以适用于危重病人急救或病人术后营养补充，其制备成注射剂能实现靶向给药，将牡丹籽油组分包裹在脂肪油中，能有效增加牡丹籽油组分的稳定性，并实现缓释作用。通过将牡丹籽油、灵芝孢子油及薏苡仁油按特定混合比例的选择，进一步提高了牡丹籽油的抗肿瘤效果。

Description

一种牡丹籽油脂肪乳剂及其制备方法

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体地，涉及一种牡丹籽油脂肪乳剂及其制备方法。

背景技术

牡丹籽油是从牡丹籽中提炼出来的一种疏水性金黄色透明油类物质。牡丹籽是毛莨科芍药属落叶灌木牡丹(PaeoniasuffruticosaAndr.)的种子。牡丹是一种多用型植物，在我国已有2000多年的应用历史，种植十分广泛。牡丹籽油目前在我国产量较大，是一种近来倍受关注的天然植物油资源。有关牡丹籽油化学成分及营养保健功能的研究目前正在深入，牡丹籽油的化学成分主要由脂肪酸组成：含有大量的不饱和脂肪酸(UFA)，其总量80%～92%之间，均明显高于有“液体黄金”之称的橄榄油、大豆油和花生油等常见植物油；特别值得关注的是，牡丹籽油中的UFA组成以α-亚麻酸为主，含量普遍在32%～67%，远远高于其他常见植物油。

现代研究表明牡丹籽油中的α-亚麻酸是一种ω-3系列多不饱和脂肪酸，被誉为“血液营养素”、“VF”和“植物脑黄金”，是一种人类身体健康不可缺少的多不饱和脂肪酸，是人类身体健康所必需营养物质。人体内不能自身合成α-亚麻酸，人体需要的α-亚麻酸必须通过饮食来获得。目前我国家庭食用油中所含α-亚麻酸相对较少。就算是被西方誉为“液体黄金”的橄榄油中α-亚麻酸含量也只有0.3%。从营养学角度看，以α-亚麻酸作为一种特别重要的脂肪酸，它的缺乏会对人体导致一系列严重后果。科学家经过长期的研究发现，人类大脑60%是由脂肪组成，这些脂肪中至少30%是ω-3脂肪酸(主要成份是α-亚麻酸)，ω-3脂肪酸的代谢物DHA和EPA与人体许多生命现象有关，对人体健康有重要作用。ω-3脂肪酸一旦缺乏，会导致身体多种疾病和身体机能的下降。实验发现：α-亚麻酸对高脂大鼠的血脂有明显的调节作用，可明显降低高脂大鼠血浆甘油三脂(TG)和总胆固醇(TC)水平。实验还发现，人体脂肪组织中α-亚麻酸增加1%，收缩压、舒张压和平均动脉压可下降666Pa；此外，α-亚麻酸有降血糖、预防心脑血管疾病、减少冠心病碎死风险、增强免疫力、抗炎、抗癌、保护视力、提高记忆力、抗氧化与延缓衰老、减肥、抑制结石形成等作用。因此，牡丹籽油的发现，从补充缺乏ω-3多不饱和脂肪酸的角度来说具有重大的意义。

牡丹籽油除含有大量的UFA外，尚含有一些甾醇类化合物(谷甾醇、岩藻甾醇等)、脂溶性维生素E和角鲨烯等。其中，植物甾醇是合成维生素D3等甾类药物的重要中间体，并具有预防冠心动脉粥样硬化、促进胆固醇降解代谢等药用和保健价值；维生素E和角鲨烯则是重要的天然抗氧化剂，具有提高体内超氧化物歧化酶(SOD)活性、增强机体免疫能力、抗衰老等多种生理功能。此外，牡丹籽油中还含有微量元素Ca、Na、Fe、K、Zn、Mg、Cu等元素，均有显著的生理功能，对于维持正常的新陈代谢和人体健康至关重要。由于牡丹籽油有较高的营养与保健功能：降血脂作用、抗氧化作用、保肝作用、降血糖、提高机体免疫力、防晒美白等功效。2011年3月，卫生部下达《卫生部关于批准牡丹籽油作为新资源食品的公告》(2011年第9号)，批准了牡丹籽油为新资源食品。

灵芝孢子是灵芝成熟时期不断从菌盖下释放的孢子；灵芝孢子油是从灵芝孢子中提取出来的一种疏水性油类物质，主含脂肪酸、甾醇、萜类、维生素类等。薏苡仁为禾本科植物CoixlacrymajoibL.var.mayuen(Roman.)Stapf的干燥成熟种仁。薏苡仁油是从薏苡仁中提取出来的一种疏水性油类物质，主含脂肪酸、薏苡酯。灵芝孢子油与薏苡仁油目前研究开发较多，也比较成熟，在提高免疫力、抗肿瘤方面在植物油中有较大优势；目前市场应用的牡丹籽油主要以液体形式的食用调和油提供，如中国专利CN201410080184.7公开了“一种含牡丹籽油的调和油及其制备方法”，尽管牡丹籽油与其它植物油的组合专利较多，但至今还未见牡丹籽油与灵芝孢子油及薏苡仁油组合的复合牡丹籽油；更未见关于复合牡丹籽油自乳化体系组合物及其制备方法的报道。

发明内容

本发明旨在克服上述现有技术的缺陷，提供一种牡丹籽油脂肪乳剂。该牡丹籽油脂肪乳剂可以制备成注射剂或口服液剂型，具有生物利用度高，吸收好等优点。

本发明的另一目的在于提供所述复合牡丹籽油脂肪乳剂的制备方法。

本发明通过以下技术方案实现上述发明目的。

一种牡丹籽油脂肪乳剂，所述牡丹籽油脂肪乳剂由如下按重量百分数计算的组分组成：

牡丹籽油组分1~30%

注射用油0~10%

乳化剂1~10%

增溶剂1~8%

抗氧剂0.01~0.03%

等渗调节剂0~2.5%

调味剂0~5%

防腐剂0~0.1%

余量为纯化水或注射用水；

所述牡丹籽油组分为纯牡丹籽油或其与灵芝孢子油和/或薏苡仁油组成的混合物。

所述牡丹籽油脂肪乳剂可以制成注射液剂型或口服液剂型，当所述牡丹籽油脂肪乳剂为注射液剂型时，由如下按重量百分数计算的组分组成：

牡丹籽油组分2~10%

注射用油2~5%

乳化剂3~5%

增溶剂5%

抗氧剂0.01%

等渗调节剂2.2%

余量为注射用水。

当所述牡丹籽油脂肪乳剂为口服液剂型时，由如下按重量百分数计算的组分组成：

牡丹籽油组分8~10%

乳化剂3~5%

增溶剂3~5%

抗氧剂0.02%

调味剂0.02%

防腐剂0.05%

余量为纯化水。

所述牡丹籽油脂肪乳剂为纯牡丹籽油或其与灵芝孢子油和/或薏苡仁油组成的混合物，牡丹籽油主要含ω-3不饱和脂肪酸；薏苡仁油主要含ω-6不饱和脂肪酸，灵芝孢子油主要含ω-9不饱和脂肪酸，膳食中ω-3与ω-6、ω-9不饱和脂肪酸的合理比值受到研究人员的重视。

优选地，所述牡丹籽油组分中各组分满足如下重量比关系：

牡丹籽油:灵芝孢子油=1:0.5～1.5或牡丹籽油:薏苡仁油=1:0.5～2.5或牡丹籽油:灵芝孢子油:薏苡仁油=1:0.5～1.5:0.5～2.5。

更优选地，所述牡丹籽油:灵芝孢子油:薏苡仁油=1:1:1。

优选地，所述注射用油选自大豆油、茶油、麻油、中长链脂肪酸酯、橄榄油中的一种或几种混合物。

优选地，所述乳化剂为大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂和/或合成磷脂。

优选地，所述增溶剂为聚乙二醇、羟丙基β-环糊精、聚维酮；所述抗氧剂为维生素E；所述等渗调节剂为注射用甘油；调味剂选用甜菊糖苷、阿斯巴甜、葡萄糖、果糖；防腐剂选用山梨酸钾。

所述牡丹籽油脂肪乳剂的制备方法，包括如下步骤：

S1.取注射用油、将牡丹籽油组分于50~100℃混合，温度至50~80℃时，加入部分乳化剂，混合形成油相；

S2.将注射用水、余下乳化剂、等渗调节剂与增溶剂混合后搅拌，使乳化剂完全溶解，形成水相；

S3.在搅拌条件下，将油相加入水相中，然后调节pH至6.5~7.0，再加注射用水至100％，得乳白色初乳；

S4.将制得的初乳移入高压匀质机，匀化；匀化后脂肪乳剂进行灌封、灭菌，即得所述牡丹籽油脂肪乳剂的注射液剂型。

所述牡丹籽油脂肪乳剂的制备方法，包括如下步骤：

S1.取牡丹籽油组分加热，温度至50~80℃时，加入部分乳化剂，混合形成油相；

S2.将纯化水、余下乳化剂、增溶剂、调味剂、防腐剂混合后搅拌，使乳化剂完全溶解为水相，形成水相；

S3.在搅拌条件下，将油相加入水相中，然后调节pH至6.5~7.0，再加纯化水水至100％，得乳白色初乳；

S4.将制得的初乳移入高压匀质机，匀化；匀化后脂肪乳剂进行灌封、灭菌，即得所述牡丹籽油脂肪乳剂的口服液剂型。

上述制备方法中，所述牡丹籽油脂肪乳剂中的乳剂粒径控制在0.05~1μm。

本发明所述牡丹籽油脂肪乳剂中，优选具有如下粒径分布：10±0.5%的乳剂粒径<100nm，50±1%的乳剂粒径<350nm，98±2%的乳剂粒径<600nm。具有上述粒径分布的牡丹籽油脂肪乳剂，具有更好的稳定性，同时能更好地被人体吸收。

与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

本发明公开一种牡丹籽油脂肪乳剂，其可以适用于危重病人急救或病人术后营养补充，其制备成注射剂能实现靶向给药，将牡丹籽油组分包裹在脂肪油中，能有效增加牡丹籽油组分的稳定性，并实现缓释作用。通过将牡丹籽油、灵芝孢子油及薏苡仁油按特定混合比例的选择，进一步提高了牡丹籽油的抗肿瘤效果。

牡丹籽油组分既是药效成分，又是油相辅料，相对增加了乳化系统药物的比例，减少了乳化剂的用量，本发明的制备工艺简单，可用常规的生产设备和工艺制备，适合于具GMP生产注射剂的药厂大规模地投入批量生产。

具体实施方式

以下结合具体实施例对本发明进行阐述，然而本发明的保护范围并非仅仅局限于以下实施例，实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想。凡在本专利的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明要求的保护范围之内。

实施例1

成分组成如表1所示：

称取牡丹籽油80g投入到容器中；加入注射用大豆油20g，将该容器置于水浴中，加热至80℃，搅拌至均匀，投入卵磷脂25g、维生素E100mg搅拌至磷脂溶解形成均匀混和相。将注射用水800ml置于另一容器中，加入聚维酮40g、甘油25g及卵磷脂25g于80℃搅拌溶解形成水相；将含有牡丹籽油、大豆油和卵磷脂的混和液在80℃、机械搅拌下与含有甘油、聚维酮(PVP)和卵磷脂的水相混和，并用1％的氢氧化钠调节pH值至6.5～7.0；再加注射用水至1000ml，并在80℃下继续机械搅拌1个小时制成初乳，将制得的初乳经高速分散机分散，移入高压均质机，匀化到乳滴粒径小于lμm为止；再将初乳乳液经微孔滤膜过滤，灌装，通氮、压盖；用旋转高压灭菌器进行100℃，FO为20的条件下灭菌。灭菌完毕后，逐渐冷却。在室温下贮存。即制成2.0g/l00ml的牡丹籽油脂肪乳静脉注射液制剂。

稳定性测定方法系采取新鲜制备的脂肪乳，置于具塞离心管中，4000rpm离心15min后，未发现分层，也未见药物沉淀析出。室温阴凉处贮存一年，乳剂外观、粒径、Zeta电位等理化性质以及含量均未发生明显变化，表明乳剂稳定。

检查结果：脂肪乳静脉注射液pH值：6.7，乳粒的大小及范围：乳剂平均粒径<1μm，11%的乳剂粒径<100nm，52%的乳剂粒径<350nm，99%的乳剂粒径<600nm。

实施例2

成分组成如表2所示：

表2牡丹籽油脂肪乳注射剂成分组成

称取牡丹籽油60g投入到容器中；加入注射用大豆油25g、中链脂肪酸酯25g，投入到容器中，将该容器置于水浴中，加热至90℃左右，搅拌至均匀，降温至70℃，投入卵磷脂6g、维生素E200mg搅拌至磷脂溶解形成均匀混和相．将注射用水800ml置于另一容器中，聚乙二醇50g、甘油22g及卵磷脂6g于70℃搅拌溶解形成水相：将含有牡丹籽油、大豆油和卵磷脂的混和液在70℃、机械搅拌下与含有甘油、聚乙二醇和卵磷脂的水相混和，并用1％的氢氧化钠调节pH值至6.5～7.0；再加注射用水至1000ml，并在70℃下继续机械搅拌1个小时制成初乳。将制得的初乳经高速分散机分散，移入高压均质机，匀化到乳滴粒径检查合格为止；再将初乳乳液经微孔滤膜过滤，灌装，通氮、熔封；用旋转高压灭菌器进行100℃，F0为20的条件下灭菌。灭菌完毕后，冲热水逐渐冷却。在室温下贮存。即制成5.0g/100ml的牡丹籽油脂肪乳静脉注射液制剂。

稳定性测定方法系采取新鲜制备的脂肪乳，置于具塞离心管中，4000rpm离心15min后，未发现分层，也未见药物沉淀析出。室温阴凉处贮存一年，乳剂外观、粒径、Zeta电位等理化性质以及含量均未发生明显变化，表明乳剂稳定。

检查结果：脂肪乳静脉注射液pH值：6.5，乳粒的大小及范围：乳剂平均粒径<1μm，10%的乳剂粒径<100nm，50%的乳剂粒径<350nm，98%的乳剂粒径<600nm。

实施例3

成分组成如表3所示：

表3牡丹籽油脂肪乳口服液成分组成

称取牡丹籽油100g投入到容器中；将该容器置于水浴中，加热至70℃左右，投入卵磷脂10g、维生素El00mg搅拌至磷脂溶解形成均匀混和相．将纯化水800ml置于另一容器中，羟丙基β-环糊精30g、卵磷脂5g、甜菊糖苷200mg、山梨酸钾500mg于60℃搅拌溶解形成水相：将含有牡丹籽油、卵磷脂的油相混和液在60℃、机械搅拌下与含有甘油、羟丙基β-环糊精、甜菊糖苷、山梨酸钾和卵磷脂的水相混和，并用1％的氢氧化钠调节pH值至6.5～7.0；再加纯化水至1000ml，并在60℃下继续机械搅拌1个小时制成初乳。将制得的初乳经高速分散机分散，移入高压均质机，匀化到乳滴粒径检查合格为止；再将初乳乳液经微孔滤膜过滤，灌装，通氮、熔封；用旋转高压灭菌器进行100℃，F0为20的条件下灭菌。灭菌完毕后，冲热水逐渐冷却。在室温下贮存。即制成10.0g/100ml的牡丹籽油脂肪乳口服液制剂。

稳定性测定方法系采取新鲜制备的脂肪乳，置于具塞离心管中，4000rpm离心15min后，未发现分层，也未见药物沉淀析出。室温阴凉处贮存一年，乳剂外观、粒径、Zeta电位等理化性质以及含量均未发生明显变化，表明乳剂稳定。

检查结果：脂肪乳口服液pH值：7.0，乳粒的大小及范围：乳剂平均粒径<1μm，9.5%的乳剂粒径<100nm，49%的乳剂粒径<350nm，98%的乳剂粒径<600nm。

实施例4

成分组成如表4所示：

表4牡丹籽油脂肪乳口服液成分组成

称取牡丹籽油120g投入到容器中，将该容器置于水浴中，加热至60℃左右，投入25g卵磷脂、维生素E2OOmg搅拌至磷脂溶解形成均匀混和相。将纯水700ml置于另一容器中，加羟丙基β-环糊精40g、葡萄糖20g、山梨酸钾500mg及卵磷脂15g于60℃搅拌溶解形成水相。将含有牡丹籽油和卵磷脂的油相混和液在60℃机械搅拌下与上述水相混和，并用1％的氢氧化钠调节pH值至6.5～7.0；再加纯化水至1000ml，并在60℃下继续机械搅拌1个小时制成初乳。将制得的初乳经高速分散机分散，移入高压均质机，匀化到乳滴粒径检查合格为止；再将初乳乳液经微孔滤膜过滤，灌装，通氮、熔封；用旋转高压灭菌器进行100℃，F0为20的条件下灭菌。灭菌完毕后，冲热水逐渐冷却。在室温下贮存。即制成12g/100ml的牡丹籽油脂肪乳口服液制剂。

稳定性测定方法系采取新鲜制备的脂肪乳，置于具塞离心管中，4000rpm离心15min后，未发现分层，也未见药物沉淀析出。室温阴凉处贮存一年，乳剂外观、粒径、Zeta电位等理化性质以及含量均未发生明显变化，表明乳剂稳定。

检查结果：脂肪乳口服液pH值：6.8，乳粒的大小及范围：乳剂平均粒径<1μm，9.5%的乳剂粒径<100nm，50%的乳剂粒径<350nm，97%的乳剂粒径<600nm。

实施例5

成分组成如表5所示：

表5复合牡丹籽油脂肪乳注射剂成分组成

按重量组成比取牡丹籽油20g加入配料容器中，在20～40℃的条件下，加入灵芝孢子油20g和薏苡仁油20g，慢速搅拌20～30分钟，过滤后得到复合牡丹籽油。

将复合牡丹籽油60g投入到容器中；加入注射用大豆油40g、中长链脂肪酸酯30g，置于水浴中，加热至60℃左右，搅拌至均匀，然后加入25g卵磷脂、维生素E100mg搅拌至磷脂溶解形成均匀油相混和相。将注射用水800ml置于另一容器中，加入聚维酮30g、甘油25g、及卵磷脂25g于80℃搅拌溶解形成水相。将含有复合牡丹籽油、大豆油和卵磷脂的油相混和液在60℃机械搅拌下与上述水相混和，并用1％的氢氧化钠调节pH值至6.5～7.0，再加注射用水至1000ml，并在60℃下继续机械搅拌1个小时制成初乳。

将制得的初乳经高速分散机分散，移入高压均质机，匀化到乳滴粒径检查合格为止；再将初乳乳液经微孔滤膜过滤，灌装，通氮、熔封；用旋转高压灭菌器进行100℃，F0为20的条件下灭菌。灭菌完毕后，冲热水逐渐冷却。在室温下贮存。即制成6g/100ml的复合牡丹籽油脂肪乳静脉注射液制剂。

稳定性测定方法系采取新鲜制备的脂肪乳，置于具塞离心管中，4000rpm离心15min后，未发现分层，也未见药物沉淀析出。室温阴凉处贮存一年，乳剂外观、粒径、Zeta电位等理化性质以及含量均未发生明显变化，表明乳剂稳定。

检查结果：脂肪乳pH值：6.8，乳粒的大小及范围：乳剂平均粒径<1μm，10%的乳剂粒径<10nm，50%的乳剂粒径<350nm，98%的乳剂粒径<600nm。

实施例6

成分组成如表6所示：

表6复合牡丹籽油脂肪乳注射剂成分组成

按重量组成比取牡丹籽油40g加入配料容器中，在20～40℃的条件下，加入灵芝孢子油40g，慢速搅拌20～30分钟，过滤后得到复合牡丹籽油。

称取复合牡丹籽油80g投入到容器中；加入注射用大豆油25g、中链脂肪酸酯25g，将该容器置于水浴中，加热至90℃左右，搅拌至均匀，降温至70℃，投入卵磷脂25g、维生素ElOOmg搅拌至磷脂溶解形成均匀油混和相。将注射用水800ml置于另一容器中，聚乙二醇50g、甘油22g及卵磷脂6g于70℃搅拌溶解形成水相：将含复合有牡丹籽油、大豆油和卵磷脂的油相混和液在70℃、机械搅拌下与含有甘油、聚乙二醇和卵磷脂的水相混和，并用1％的氢氧化钠调节pH值至6.5～7.0；再加注射用水至1000ml，并在70℃下继续机械搅拌1个小时制成初乳。将制得的初乳经高速分散机分散，移入高压均质机，匀化到乳滴粒径检查合格为止；再将初乳乳液经微孔滤膜过滤，灌装，通氮、熔封；用旋转高压灭菌器进行100℃，F0为20的条件下灭菌。灭菌完毕后，冲热水逐渐冷却。在室温下贮存。即制成8.0g/100ml的复合牡丹籽油脂肪乳静脉注射液制剂。

稳定性测定方法系采取新鲜制备的脂肪乳，置于具塞离心管中，4000rpm离心15min后，未发现分层，也未见药物沉淀析出。室温阴凉处贮存一年，乳剂外观、粒径、Zeta电位等理化性质以及含量均未发生明显变化，表明乳剂稳定。

检查结果：脂肪乳静脉注射液pH值：6.5，乳粒的大小及范围：乳剂平均粒径<1μm，10.5%的乳剂粒径<100nm，51%的乳剂粒径<350nm，98%的乳剂粒径<600nm。

实施例7

成分组成如表7所示：

表7复合牡丹籽油脂肪乳注射剂成分组成

按重量组成比取牡丹籽油45g加入配料容器中，在20～40℃的条件下，加入薏苡仁油45g，慢速搅拌20～30分钟，过滤后得到复合牡丹籽油。

称取复合牡丹籽油90g投入到容器中，将该容器置于水浴中，加热至70℃左右，投入注射用大豆油20g、卵磷脂30g、维生素E200mg搅拌至磷脂溶解形成均匀油相混和相．将注射用水750ml置于另一容器中，加入聚乙二醇60g、甘油22g及卵磷脂10g于70℃搅拌溶解形成均匀水相：将含有复合牡丹籽油、大豆油和卵磷脂的油相混和液在70℃、机械搅拌下与含有甘油、聚乙二醇和卵磷脂的水相混和，并用1％的氢氧化钠调节pH值至6.5～7.0；再加注射用水至1000ml，并在70℃下继续机械搅拌1个小时制成初乳。将制得的初乳经高速分散机分散，移入高压均质机，匀化到乳滴粒径检查合格为止；再将初乳乳液经微孔滤膜过滤，灌装，通氮、熔封；用旋转高压灭菌器进行100℃，F0为20的条件下灭菌。灭菌完毕后，冲热水逐渐冷却。在室温下贮存。即制成9.0g/100ml的复合牡丹籽油脂肪乳静脉注射液制剂。

稳定性测定方法系采取新鲜制备的脂肪乳，置于具塞离心管中，4000rpm离心15min后，未发现分层，也未见药物沉淀析出。室温阴凉处贮存一年，乳剂外观、粒径、Zeta电位等理化性质以及含量均未发生明显变化，表明乳剂稳定。

检查结果：脂肪乳静脉注射液pH值：7.0，乳粒的大小及范围：乳剂平均粒径<1μm，10%的乳剂粒径<100nm，51%的乳剂粒径<350nm，99%的乳剂粒径<600nm。

实施例8

成分组成如表8所示：

表8复合牡丹籽油脂肪乳口服液成分组成

按重量组成比取牡丹籽油40g加入配料容器中，在20～40℃的条件下，加入灵芝孢子油30g和薏苡仁油30g，慢速搅拌20～30分钟，过滤后得到复合牡丹籽油。

称取复合牡丹籽油100g投入到容器中，将该容器置于水浴中，加热至60℃左右，投入25g卵磷脂、维生素El00mg搅拌至磷脂溶解形成均匀油相混和相。将纯水800ml置于另一容器中，加羟丙基β-环糊精45g、甜菊糖苷200mg、山梨酸钾500mg及卵磷脂15g于60℃搅拌溶解形成均匀水相。将含有复合牡丹籽油和卵磷脂的油相混和液在60℃机械搅拌下与上述水相混和，并用1％的氢氧化钠调节pH值至6.5～7.0；再加纯化水至1000ml，并在60℃下继续机械搅拌1个小时制成初乳。将制得的初乳经高速分散机分散，移入高压均质机，匀化到乳滴粒径检查合格为止；再将初乳乳液经微孔滤膜过滤，灌装，通氮、熔封；用旋转高压灭菌器进行100℃，F0为20的条件下灭菌。灭菌完毕后，冲热水逐渐冷却。在室温下贮存。即制成10g/100ml的复合牡丹籽油脂肪乳口服液制剂。

稳定性测定方法系采取新鲜制备的脂肪乳，置于具塞离心管中，4000rpm离心15min后，未发现分层，也未见药物沉淀析出。室温阴凉处贮存一年，乳剂外观、粒径、Zeta电位等理化性质以及含量均未发生明显变化，表明乳剂稳定。

检查结果：脂肪乳口服液pH值：6.9，乳粒的大小及范围：乳剂平均粒径<1μm，10%的乳剂粒径<100nm，49%的乳剂粒径<350nm，99%的乳剂粒径<600nm。

实施例9

成分组成如表9所示：

表9复合牡丹籽油脂肪乳口服液成分组成

按重量组成比取牡丹籽油50g加入配料容器中，在20～40℃的条件下，加入薏苡仁油50g，慢速搅拌20～30分钟，过滤后得到复合牡丹籽油。

称取复合牡丹籽油100g投入到容器中；将该容器置于水浴中，加热至70℃左右，投入卵磷脂20g、维生素El00mg搅拌至磷脂溶解形成均匀的油相混和相。将纯化水800ml置于另一容器中，羟丙基β-环糊精40g、卵磷脂15g、葡萄糖20g、山梨酸钾500mg于60℃搅拌溶解形成均匀水相：将含有复合牡丹籽油、卵磷脂的油相混和液在60℃、机械搅拌下与含有羟丙基β-环糊精、甜菊糖苷、葡萄糖和卵磷脂的水相混和，并用1％的氢氧化钠调节pH值至6.5～7.0；再加纯化水至1000ml，并在60℃下继续机械搅拌1个小时制成初乳。将制得的初乳经高速分散机分散，移入高压均质机，匀化到乳滴粒径检查合格为止；再将初乳乳液经微孔滤膜过滤，灌装，通氮、熔封；用旋转高压灭菌器进行100℃，F0为20的条件下灭菌。灭菌完毕后，冲热水逐渐冷却。在室温下贮存。即制成10.0g/100ml的复合牡丹籽油脂肪乳口服液制剂。

稳定性测定方法系采取新鲜制备的脂肪乳，置于具塞离心管中，4000rpm离心15min后，未发现分层，也未见药物沉淀析出。室温阴凉处贮存一年，乳剂外观、粒径、Zeta电位等理化性质以及含量均未发生明显变化，表明乳剂稳定。

检查结果：脂肪乳口服液pH值：6.7，乳粒的大小及范围：乳剂平均粒径<1μm，10%的乳剂粒径<100nm，50%的乳剂粒径<350nm，98%的乳剂粒径<600nm。

实施例10

成分组成如表10所示：

表10复合牡丹籽油脂肪乳口服液成分组成

按重量组成比取牡丹籽油50g加入配料容器中，在20～40℃的条件下，加入灵芝孢子油50g，慢速搅拌20～30分钟，过滤后得到复合牡丹籽油。

称取复合牡丹籽油100g投入到容器中，将该容器置于水浴中，加热至80℃左右，投入25g卵磷脂、维生素E2OOmg搅拌至磷脂溶解形成均匀的油相混和相。将纯水800ml置于另一容器中，加羟丙基β-环糊精50g、果糖20g、山梨酸钾500mg及卵磷脂10g于80℃搅拌溶解形成水相。将含有牡丹籽油和卵磷脂的油相混和液在80℃机械搅拌下与上述水相混和，并用1％的氢氧化钠调节pH值至6.5～7.0；再加纯化水至1000ml，并在60℃下继续机械搅拌1个小时制成初乳。将制得的初乳经高速分散机分散，移入高压均质机，匀化到乳滴粒径检查合格为止；再将初乳乳液经微孔滤膜过滤，灌装，通氮、熔封；用旋转高压灭菌器进行100℃，F0为20的条件下灭菌。灭菌完毕后，冲热水逐渐冷却。在室温下贮存。即制成10g/100ml的复合牡丹籽油脂肪乳口服液制剂。。

稳定性测定方法系采取新鲜制备的脂肪乳，置于具塞离心管中，4000rpm离心15min后，未发现分层，也未见药物沉淀析出。室温阴凉处贮存一年，乳剂外观、粒径、Zeta电位等理化性质以及含量均未发生明显变化，表明乳剂稳定。

检查结果：脂肪乳口服液pH值：6.9，乳粒的大小及范围：乳剂平均粒径<1μm，10%的乳剂粒径<100nm，50%的乳剂粒径<350nm，97%的乳剂粒径<600nm。

实施例11药效学研究

牡丹籽油脂肪乳注射剂抑瘤率实验

1.S180腹水瘤模型小鼠制作

在无菌条件下取生长良好的S180腹水瘤，用生理盐水稀释，制成1.O×10⁶个/mL瘤细胞悬液，接种于90只小鼠腹腔内，每只分别为0.2mL。

2.实验动物及分组

雄性封闭群昆明种小鼠90只，体重18~22g，制成EAC模型鼠，随机分成A、B、C组，每组30只分别为A：生理盐水对照组；B：牡丹籽油脂肪乳注射剂（实施例2制备）治疗组；C：复合牡丹籽油脂肪乳注射剂（实施例5制备）治疗组。

3.实验方法

3.1A组生理盐水对照组：每只小鼠尾静脉注射O.9％生理盐水0.3m1，每天注射一次，连续注射10天。

3.2B牡丹籽油脂肪乳注射剂治疗组：每只小鼠尾静脉注射牡丹籽油脂肪乳注射液0.3m1，每天注射一次，连续注射10天。

3.3C组复合牡丹籽油脂肪乳注射剂治疗组：每只小鼠尾静脉注射复合牡丹籽油脂肪乳注射液0.3m1，每天注射一次，连续射10天。

3.4动物饲养与处置

在给药周期内小鼠饲喂常备饲料，正常饮水。10天后断锥处死小鼠，分离出腹水瘤体，去掉表皮组织精确称重，并计算抑瘤率。

3.5抑瘤率计算

抑瘤率=(A-B)／A×100％

(A为生理盐水对照组的平均瘤重，B为治疗组的平均瘤重)

比较牡丹籽油脂肪乳注射液治疗组和复合牡丹籽油脂肪乳注射液治疗组的抑瘤率是否存在显著性差异。

4实验结果

连续注射10天后，生理盐水对照组平均瘤重为3.2克，牡丹籽油脂肪乳注射液治疗组平均瘤重为2.4克，抑制率为25.00％；复合牡丹籽油脂肪乳注射液治疗组平均瘤重为1.3克，抑制率为59.38％。牡丹籽油脂肪乳注射液治疗组和复合牡丹籽油脂肪乳注射液治疗组的抑瘤率存在显著性差异(P<0.01)。复合牡丹籽油脂肪乳注射液抑瘤率约是牡丹籽油脂肪乳注射液的2.4倍。

5结论与分析

5.1牡丹籽油脂肪乳注射液治疗组与对照组比较，抑瘤率有显著差异，说明牡丹籽油脂肪乳注射液对肿瘤有一定的抑制作用。由于牡丹籽油被乳化，以纳米形式存在于脂肪乳的乳滴内，活性及药效均有所提高。

5.2复合牡丹籽油脂肪乳注射液治疗组与牡丹籽油脂肪乳注射液治疗组比较，抑瘤率又有非常显著差异，说明复合牡丹籽油脂肪乳注射液对肿瘤有较好的抑制作用。由于复合牡丹籽油中含有具有传统抗肿瘤作用的灵芝孢子油、薏苡仁油，以复合物的形式级合，其活性及药效被成倍的提高。

另外，牡丹籽油脂肪乳注射液治疗组及复合牡丹籽油脂肪乳注射液治疗组10天后平均体重较对照组平均体重增加12~20％，进一步表明，脂肪乳剂同时具备营养剂的作用，提高了肿瘤小鼠的生存质量。

Claims (10)

1.一种牡丹籽油脂肪乳剂，其特征在于，所述牡丹籽油脂肪乳剂由如下按重量百分数计算的组分组成：

牡丹籽油组分1~30%

注射用油0~10%

乳化剂1~10%

增溶剂1~8%

抗氧剂0.01~0.03%

等渗调节剂0~2.5%

调味剂0~5%

防腐剂0~0.1%

余量为纯化水或注射用水；

所述牡丹籽油组分为纯牡丹籽油或其与灵芝孢子油和/或薏苡仁油组成的混合物。

2.根据权利要求1所述牡丹籽油脂肪乳剂，其特征在于，所述牡丹籽油脂肪乳剂为注射液剂型，由如下按重量百分数计算的组分组成：

牡丹籽油组分2~10%

注射用油2~5%

乳化剂3~5%

增溶剂5%

抗氧剂0.01%

等渗调节剂2.2%

余量为注射用水。

3.根据权利要求1所述牡丹籽油脂肪乳剂，其特征在于，所述牡丹籽油脂肪乳剂为口服液剂型，由如下按重量百分数计算的组分组成：

牡丹籽油组分8~10%

乳化剂3~5%

增溶剂3~5%

抗氧剂0.02%

调味剂0.02%

防腐剂0.05%

余量为纯化水。

4.根据权利要求1所述牡丹籽油脂肪乳剂，其特征在于，所述牡丹籽油组分中各组分满足如下重量比关系：

牡丹籽油:灵芝孢子油=1:0.5～1.5或牡丹籽油:薏苡仁油=1:0.5～2.5或牡丹籽油:灵芝孢子油:薏苡仁油=1:0.5～1.5:0.5～2.5。

5.根据权利要求1所述牡丹籽油脂肪乳剂，其特征在于，所述注射用油选自大豆油、茶油、麻油、中长链脂肪酸酯、橄榄油中的一种或几种混合物。

6.根据权利要求1所述牡丹籽油脂肪乳剂，其特征在于，所述乳化剂为大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂和/或合成磷脂。

7.根据权利要求1所述牡丹籽油脂肪乳剂，其特征在于，所述增溶剂为聚乙二醇、羟丙基β-环糊精、聚维酮；所述抗氧剂为维生素E；所述等渗调节剂为注射用甘油；调味剂选用甜菊糖苷、阿斯巴甜、葡萄糖、果糖；防腐剂选用山梨酸钾。

8.权利要求2所述牡丹籽油脂肪乳剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1.取注射用油、将牡丹籽油组分于50~100℃混合，温度至50~80℃时，加入部分乳化剂，混合形成油相；

S2.将注射用水、余下乳化剂、等渗调节剂与增溶剂混合后搅拌，使乳化剂完全溶解，形成水相；

S3.在搅拌条件下，将油相加入水相中，然后调节pH至6.5~7.0，再加注射用水至100％，得乳白色初乳；

S4.将制得的初乳移入高压匀质机，匀化；匀化后脂肪乳剂进行灌封、灭菌，即得所述牡丹籽油脂肪乳剂的注射液剂型。

9.权利要求3所述牡丹籽油脂肪乳剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1.取牡丹籽油组分加热，温度至50~80℃时，加入部分乳化剂，混合形成油相；

S2.将纯化水、余下乳化剂、增溶剂、调味剂、防腐剂混合后搅拌，使乳化剂完全溶解为水相，形成水相；

S3.在搅拌条件下，将油相加入水相中，然后调节pH至6.5~7.0，再加纯化水水至100％，得乳白色初乳；

S4.将制得的初乳移入高压匀质机，匀化；匀化后脂肪乳剂进行灌封、灭菌，即得所述牡丹籽油脂肪乳剂的口服液剂型。

10.权利要求8或9所述的制备方法，其特征在于，所述牡丹籽油脂肪乳剂中的乳剂粒径控制在0.05~1μm。