CN1056410C - 一种蝴蝶兰组织培养基组合物 - Google Patents

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一种蝴蝶兰组织培养基组合物，所述的培养基组合物配方为(mg/l)：
Ca3(PO4)2200 KNO3525
KH2PO4250 MgSO4·7H2O250
(NH4)2SO4500 Fe2(C4H4O8)·2H2O28
MnSO4.4H2O75
pH＝5.4-5.6蔗糖 20克
所述的培养基组合物在使用时还可另加细胞分裂素BA3(6-苄氨基嘌呤)3mg，肌醇100mg，维生素B1、B6和烟酸各0.5mg，活性炭0.15%，香蕉1%(相对于培养基的体积，即100ml培养基中加0.15克活性炭，1克香蕉)。

Description

一种蝴蝶兰组织培养基组合物
本发明涉及一种蝴蝶兰组织培养基组合物，涉及生物学、植物生理学、植物栽培学和植物遗传学等。
据报道1949年ROTOR成功地在试管中培养出花梗苗，但由于蝴蝶兰繁殖难度较大，至今还没有象建兰属、卡德兰属、石解属等一些兰花那样建立起完整的无性繁殖体系。我国台湾省林金其、林瑞林等对蝴蝶兰的组织培养作了认真的研究。1989年广东王怀宇作了蝴蝶兰的快速繁殖的初步报道，目前关于蝴蝶兰原球茎状体的培养方面尚未见有详细的报道。
尽管蝴蝶兰不定芽组织培养即花梗苗培养已获成功，但繁殖系数低、成本高、远远不能满足工业生产的需要，不能更快地使兰花进入百姓家。
本发明的目的在于提供一种蝴蝶兰组织培养基组合物。
本发明的目的是这样实现的：培养基配方为(mg/L)：Ca3(PO4)2      200      KNO3                 525KH2PO4          250      MgSO4.7H2O          250(NH4)2SO4      500      Fe2(C4H4O6).2H2O 28MnSO4.4H2O      75PH＝5.4-5.6                 蔗糖                   20克
上述组分按上述配比，混匀即可，在实际使用时还可另加细胞分裂素BA3(6-苄氨基嘌呤)3mg，肌醇100mg，维生素B1、B6和烟酸各0.5mg，活性炭0.15％，香蕉1％(相对于培养基的体积，即100ml培养基中加0.15克活性炭，1克香蕉)。
蝴蝶兰茎尖培养时，用本发明培养基组合物外加BA3+0.15％活性炭+1％香蕉。用常规方法消毒，在双筒解剖镜下切取1-2mm的茎尖，可获极少量(约4％)蝴蝶兰原球茎状体。偏大的茎尖外植体经长时期培养后长成两小叶及嫩茎，然后用利刀切成1-2mm小块，仍置于上述培养基上，促使其继续分化从材料中获得了约30％的原球茎状体。此举的成功，在蝴蝶兰原球茎状体培养中获得了突破性进展，为大量繁殖蝴蝶兰苗提供了物质条件。
图1是蝴蝶兰早期原球茎状体的细胞分化图。
图2是蝴蝶兰原球茎状体图，其中I是早期原球茎状体；II是原球茎状体；III、IV是出叶，V、VI是小苗。
由于采用了本发明的培养基组合物使得蝴蝶兰原球茎状体的培育成功，缩短了与国外洋兰繁殖技术的差距，总结出一套非原产地繁殖蝴蝶兰的技术养护措施。大幅度降低了成本，提高了经济效益。一旦原球茎状体培育成功可向社会出售蝴蝶兰切花，蝴蝶兰苗木以及蝴蝶兰原球茎，可获得很好的经济效益。
下面的实施例是对本发明的进一步说明，而不是限制本发明的范围。
实施例：
(1)蝴蝶兰茎尖(含其他营养体)培养基组合物配方如下：(mg/L)Ca3(PO4)2      200     KNO3                 525KN2PO4          250     MgSO4.7H2O          250(NH4)2SO4      500     Fe2(C4H4O6).2H2O 28MnSO4.4H2O      75      蔗糖                  20克PH＝5.4-5.6
使用时还可另加细胞分裂素BA3(6-苄氨基嘌呤)3mg，肌醇100mg，维生素B1、B6和烟酸各0.5mg，活性炭0.15％，香蕉1％(相对于培养基的体积，即100ml培养基中加0.15克活性炭，1克香蕉)。
(2)茎尖培养：剪取蝴蝶兰茎尖后用自来水冲洗15～20分钟，再用洗涤剂清洗，用75％酒精消毒0.5分钟，无菌水冲洗2次，再用0.1％汞消毒5分钟，用无菌水清洗5～6次。然后，用无菌滤纸吸除表面多余水分，在超净工作台上，将材料置于消过毒的培养皿内，在解剖镜下切取1～2mm的茎尖，平放在本发明培养基上，温度26℃，光强1200LX，每天光照16小时培养。从培养开始45天后茎尖材料细胞开始分化，出现了早期原球茎状体(见附图1)。
或者茎尖以外的营养体即两小叶和嫩茎作为繁殖材料，将其切成1～2mm小块，再采用相同方法进行培养诱导成原球茎状体。茎尖以外的营养体诱导出原球茎状体需经68天时间。不论是茎尖或茎尖外的营养体一旦诱导成原球茎状体，培养在低浓度即1升中有1ppm细胞分裂素(BA1)的培养基内或继续延长培养时间，经60天左右的培养可诱发出两小叶和嫩茎，然后再经45天左右时间的培养大部分可长成有2～3片叶的带根蝴蝶兰小苗。其培养条件与上述相同。
实施本发明必须具有一个接种、培养室，要严格灭菌，控制光照、温度、湿度条件，同时还需备有显微镜，解剖镜等条件。在蝴蝶兰苗木养护管理上冬季温室供暖设备增湿不能低于10℃，夏季湿度保持60～80％，并要注意通风，要控制光照造成一外散射光的环境，夏末秋初适当增加光照强度有利蝴蝶兰花芽分化。同时，必须备有素质高、事业性强的操作管理人员。

Claims (2)

1.一种蝴蝶兰组织培养基组合物，其特征在于：所述的培养基组合物配方为每升培养中含有：
Ca3(PO4)2   200毫克   KNO3                 525毫克
KH2PO4       250毫克   MgSO4.7H2O          250毫克
(NH4)2SO4   500毫克   Fe2(C4H4O6).2H2O  28毫克
MnSO4.4H2O    75毫克
PH＝5.4-5.6          蔗糖                  20克
2.根据权利要求1所述的培养基组合物，其特征在于所述的培养基组合物在使用时每升培养基组合物中还可另加细胞分裂素6-苄氨基嘌呤3毫克，肌醇100毫克，维生素B1、B6和烟酸各0.5毫克，活性炭1.5克，香蕉10克。
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