CN105641000A - 一种含灰树花提取物的抗肿瘤组合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明申请提供一种含有灰树花提取物的抗肿瘤转移、增强免疫力的中药组合物及其制备方法。所述组合物由以下重量份的组分制得:灰树花提取物:120-130份,富硒酵母:0.8-1.2份。上述抗肿瘤组合物的制备方法,其中,所述灰树花提取物采用超声波提取和微波干燥工艺;富硒酵母则在培养酵母的过程中加入硒元素,使无机硒结合成有机态的硒,通过离心法分离出酵母,用水反复冲洗后经浓缩和喷雾干燥即得到淡黄色的富硒酵母粉。研究结果提示所述抗肿瘤组合物有抑制乳腺癌细胞血管生成和侵袭能力及增强免疫力的生物学作用。
Description
技术领域
本发明申请涉及一种组合物,尤其是一种具有含灰树花提取物的增强免疫、抗肿瘤转移的中药组合物及其生产制备方法,属于医药保健品技术领域。
背景技术
癌症(Cancer),亦称恶性肿瘤,为由控制细胞生长增殖机制失常而引起的疾病。癌细胞除了生长失控外,还会局部侵入周遭正常组织甚至经由体内循环系统或淋巴系统转移到身体其他部分。随着工业的发展,人体在环境污染、化学污染(化学毒素)、电离辐射、自由基毒素、微生物(细菌、真菌、病毒等)及其代谢毒素、遗传特性、内分泌失衡、免疫功能紊乱等各种致癌物质、致癌因素的作用下导致身体正常细胞发生癌变,癌症已经成为威胁人类健康的主要杀手。
硒是人体必需的微量元素之一,是谷胱甘肽过氧化物酶不可缺少的组成部分,该酶具有保护生物膜不受脂质过氧物的影响,不受自由基损害的作用。近几年的流行病学研究表明,癌症病人的血硒水平低,且低硒的程度往往与病情严重程度有关。许多动物实验也直接证实,硒具有防癌抗癌、抗衰老等奇特功效。缺硒还与冠心病、动脉硬化剂高血压等血管系统疾病密切相关。因此,如何保证人体摄入充足的硒,无疑是科学界面临的一个重要课题。
天然食品中的硒含量普遍较低,果蔬的含硒量一般小于0.01×10,谷物、海洋动物、肉类(特别是内脏)的含硒量稍高些(大于0.1×10),仅靠天然食物中的硒并不能满足人体的正常需要,而亚硒酸钠之类的无机硒毒性较高不能用于食品中,由于硒的来源很不稳定,植物性食品中硒含量为土壤条件所左右,而动物性食品特别是鱼体中富含硒,然而多与水银结合的形式存在,不能为人所利用,因而开发含硒食品是很有意义的。研究表明通过微生物合成法富集硒元素是一种开发硒食品安全有效的途径。
食用菌具有较强的富硒能力,目前,正广泛开展富硒类保健食品和药品的研究工作。灰树花是近几年开发出来的一种珍稀食药用菌,其子实体、菌丝体和发酵液中含有丰富的多糖、蛋白质和萜烯类生理活性物质,在抗癌防癌、抑制艾滋病毒、防治高血压和肥胖症以及增强机体免疫力等方面有着独特的疗效。灰树花提取物富含丰富的灰树花多糖,由葡聚糖、葡萄糖、岩藻糖、木糖、甘露糖、丰乳糖及少量蛋白质的异聚糖复合物组成。灰树花其主要活性成份是灰树花蛋白多糖,多糖组份中以葡聚糖为主,以具有β-(1→6)分支的β-(1→3)葡聚糖为基本结构,含少量的木糖和甘露糖。研究结果表明,灰树花多糖主要通过增强细胞免疫功能而发挥其抗肿瘤作用。倘若通过菌丝细胞内物质代谢转化,将无机硒结合到这类大分子活性物质上,成为有机硒多糖和硒蛋白,则更有利于其抗肿瘤、抗艾滋病毒等功能的发挥。
酵母是人类利用最广的微生物,其蛋白质含量高达50%以上,还含有丰富的B族维生素和多种矿物质,被称为优质营养之源。富硒酵母就是在培养酵母的过程中加入硒元素,酵母生长时吸收利用了硒,使硒与酵母体内的蛋白质和多糖有机结合转化为生物硒,从而消除了化学硒(如亚硒酸钠)对人体的毒副反应和肠胃刺激,使硒能够更高效、更安全地被人体吸收利用。
发明内容
本发明申请即是针对上述问题,提供一种含有灰树花提取物的抗肿瘤转移、增强免疫力的中药组合物及其制备方法。
具体来说,本发明申请提供一种含有灰树花提取物抗肿瘤组合物,所述组合物由以下重量份的组分制得:
灰树花提取物:120-130份,富硒酵母:0.8-1.2份。
进一步的,所述富硒酵母中,硒的含量为:2.0-3.0mg硒/g酵母。
更进一步的,所述富硒酵母中,硒的含量为:2.1mg硒/g酵母。
进一步的,所述灰树花提取物包括灰树花多糖。
更进一步的,所述灰树花多糖包括葡聚糖、葡萄糖、岩藻糖、木糖、甘露糖和丰乳糖。
本发明申请的另一个目的是提供上述抗肿瘤组合物的制备方法,其中,所述灰树花提取物采用超声波提取工艺;富硒酵母则在培养酵母的过程中加入硒元素,使无机硒结合成有机态的硒,通过离心法分离出酵母,用水反复冲洗后经浓缩和喷雾干燥即得到淡黄色的富硒酵母粉。
进一步的,所述灰树花提取物的超声波提取方法,包括如下的步骤:
生产流程包括:原料粉碎→投料→超声波水提→膜过滤→醇沉→微波干燥→包装→检验
1、粉碎:原料用粉碎机粉碎至10-30目备用;
2、投料:将粉碎物投入提取管道内;
3、超声波水提:原料加8--10倍纯化水进行超声波连续逆流提取,超声波频率为2-3万赫兹,提取温度为50-60℃,获取含水量85-90%的提取液。
4、浓缩:经超滤膜(截留分子量为十万以上)过滤,去掉小于十万分子量的物质和水,获取含水量30-40%的浓缩物。
5、醇沉:浓缩物边搅拌边加入4倍量食用酒精,静置24h,去上清液;离心甩干获取含酒精量5-10%的浸膏。
5.微波干燥:浸膏装入微波料盘,抽真空干燥,温度40℃--50℃,时间60-80分钟,干燥物含水率≤6%;
6.包装:干燥物80目粉碎过筛,包装;
7.检验:检验各项指标,全部合格进库;
8.本工艺约为1∶25提取比例。
所述富硒酵母粉通过以下方法获得:
1、在实验室选育合适的啤酒酵母菌种,以麦芽汁为培养基在酵母生长的特定环境下培养,在几个不同的阶段加入硒,找出酵母与硒的最佳结合条件,既利于提高结合硒量,又利于酵母的生长,同时选取不同的硒化合物进行试验,选择最佳材料;
2、以糖蜜加适量硒化合物为培养基,杀菌后接入酵母菌种,流加氮、磷等营养盐进行发酵培养,在温度30℃,pH4.5~5.0的条件下通风培养24~48小时,使无机硒结合成有机态的硒,通过离心法分离出酵母,用水反复冲洗后经浓缩和喷雾干燥即得到淡黄色的富硒酵母粉,硒含量可达1000×10以上,通常为500×10左右,其蛋白质≥44%,水份≤8.5%,富含18种氨基酸,维生素B为33.2×10。
进一步的,所述的抗肿瘤组合物,其外包覆有胶囊壳,胶囊壳是用食用级药用的明胶经过精处理与辅助材料制造而成的用于盛装固体粉末、颗粒的卵状空心外壳。胶囊壳具有良好的生物利用度,能迅速、可靠和安全地溶解,胶囊壳空心胶囊由药用明胶加辅料精制而成。
本发明申请所述的抗肿瘤组合物,加工制备过程简单实用,得到的组合物经试验证明具有增强免疫力、抗肿瘤的效果。
具体实施方式
以下结合具体实施方式,对本发明申请所述的抗肿瘤组合物及其制备方法进行非限制性地描述,目的是便于公众更好理解所述技术方案。
实施例一
所述抗肿瘤组合物由以下重量份的组分制得:
灰树花提取物:129份,富硒酵母:1份。
所述富硒酵母中,硒的含量为:2.1mg硒/g酵母。
实施例二
所述抗肿瘤组合物由以下重量份的组分制得:
灰树花提取物:120份,富硒酵母:0.8份。
所述富硒酵母中,硒的含量为:2.0mg硒/g酵母。
实施例三
所述抗肿瘤组合物由以下重量份的组分制得:
灰树花提取物:130份,富硒酵母:1.2份。
所述富硒酵母中,硒的含量为:3.0mg硒/g酵母。
实施例四
所述灰树花提取物的超声波制备方法,包括如下的步骤:
生产流程包括:原料粉碎→投料→超声波水提→膜过滤→醇沉→微波干燥→包装→检验
1、粉碎:原料用粉碎机粉碎至20目备用;
2、投料:将粉碎物投入提取管道内;
3、超声波水提:原料加10倍纯化水进行超声波连续逆流提取,超声波频率为3万赫兹,提取温度为55℃,获取含水量85-90%的提取液。
4、浓缩:经超滤膜(截留分子量为十万以上)过滤,去掉小于十万分子量的物质和水,获取含水量30-40%的浓缩物。
5、醇沉:浓缩物边搅拌边加入4倍量食用酒精,静置24h,去上清液;离心甩干获取含酒精量5-10%的浸膏。
5.微波干燥:浸膏装入微波料盘,抽真空干燥,温度50℃,时间60-80分钟,干燥物含水率≤6%;
6.包装:干燥物80目粉碎过筛,包装;
7.检验:检验各项指标,全部合格进库;
8.本工艺约为1∶25提取比例。
实施例五
所述富硒酵母粉通过以下方法获得:
1、在实验室选育合适的啤酒酵母菌种,以麦芽汁为培养基在酵母生长的特定环境下培养,在几个不同的阶段加入硒,找出酵母与硒的最佳结合条件,既利于提高结合硒量,又利于酵母的生长,同时选取不同的硒化合物进行试验,选择最佳材料;
2、以糖蜜加适量硒化合物为培养基,杀菌后接入酵母菌种,流加氮、磷等营养盐进行发酵培养,在温度30℃,pH4.5~5.0的条件下通风培养24~48小时,使无机硒结合成有机态的硒,通过离心法分离出酵母,用水反复冲洗后经浓缩和喷雾干燥即得到淡黄色的富硒酵母粉,硒含量可达1000×10以上,通常为500×10左右,其蛋白质≥44%,水份≤8.5%,富含18种氨基酸,维生素B为33.2×10。
实施例六
所述抗肿瘤组合物的动物实验研究
采用4周龄雌性裸鼠24只,右前肢背部皮下移植人高恶度乳腺癌细胞株制作荷瘤动物模型。将受试药物所述抗肿瘤组合物分低、中、高剂量组,即10mg/kg/天(0.4mg/只/天)、20mg/kg/天(0.8mg/只/天)和40mg/kg/天(1.6mg/只/天)。另设阴性对照组水(200ul/只/天)。每组设6只裸鼠。各组均于肿瘤接种起即第0天灌胃给药,每天2次。同天,各实验鼠右后背皮下移植2×106个人源高恶度乳腺癌细胞,继续灌胃给药每天2次,再连续给药28天(4周),具体根据肿瘤生长情况而定。荷瘤NOD/SCID小鼠给药期间每2-3天测量动物体重和移植肿瘤生长体积。于末次给药后处死各组荷瘤鼠,完整剥离瘤组织,用1/10000分析天平称重,各实验组实体肿瘤数码相机照相,并测量各实验组肿瘤重量和计算各组实体肿瘤平均重量。Western检测各组EGFR蛋白表达情况,q-PCR检测EGFR及VEGF和MMPs的mRNA水平变化。
实验结果:受试药物所述抗肿瘤组合物用三蒸水按浓度溶解,溶解后药液呈棕色混悬状溶液;体外实验结果显示所述抗肿瘤组合物可抑制人源高恶性乳腺癌细胞的EGFR蛋白水平的表达,且有剂量依赖性。药物可抑制人源高恶性乳腺癌细胞血管生成因子EGFR、VEGF的RNA水平表达。而增强血管生成抑制因子TSP-1的RNA表达水平,而对金属基质蛋白酶的表达无显著抑制作用;体内实验结果显示所述抗肿瘤组合物有一定程度抑制人源高恶性乳腺癌细胞生长作用,显著抑制其所至肿瘤EGFR蛋白水平的表达,但对其RNA水平的抑制不显著,可显著抑制血管生成因子VEGFA和VEGFCRNA水平的表达,对金属基质蛋白酶的表达也可见一定程度抑制。
结论:所述抗肿瘤组合物对本实验室建立的高恶变乳腺癌细胞的癌基因EGFR表达起抑制作用,同时抑制血管生成因子VEGFA、VEGFC的基因表达,促进血管生成抑制因子TSP-1的基因表达。研究结果提示所述抗肿瘤组合物有抑制乳腺癌细胞血管生成和侵袭能力的生物学作用。
Claims (9)
1.一种含有灰树花提取物抗肿瘤组合物,其特征在于:所述组合物由以下重量份的组分制得:
灰树花提取物:120-130份,富硒酵母:0.8-1.2份。
2.根据权利要求1所述的含有灰树花提取物抗肿瘤组合物,其特征在于:所述富硒酵母中,硒的含量为:2.0-3.0mg硒/g酵母。
3.根据权利要求2所述的含有灰树花提取物抗肿瘤组合物,其特征在于:所述富硒酵母中,硒的含量为:2.1mg硒/g酵母。
4.根据权利要求1-3任一项所述的含有灰树花提取物抗肿瘤组合物,其特征在于:所述灰树花提取物包括灰树花多糖。
5.根据权利要求4所述的含有灰树花提取物抗肿瘤组合物,其特征在于:所述灰树花多糖包括葡聚糖、葡萄糖、岩藻糖、木糖、甘露糖和丰乳糖。
6.权利要求1-5所述含有灰树花提取物抗肿瘤组合物的制备方法,其特征在于:所述灰树花提取物采用超声波提取和微波干燥工艺;富硒酵母则在培养酵母的过程中加入硒元素,使无机硒结合成有机态的硒,通过离心法分离出酵母,用水反复冲洗后经浓缩和喷雾干燥即得到淡黄色的富硒酵母粉。
7.根据权利要求6所述的含有灰树花提取物抗肿瘤组合物的制备方法,
其特征在于:所述灰树花提取物的制备方法,包括如下的步骤:
生产流程包括:原料粉碎→投料→超声波水提→膜过滤→醇沉→微波干燥→包装→检验
1)粉碎:原料用粉碎机粉碎至10-30目备用;
2)投料:将粉碎物投入提取管道内;
3)超声波水提:原料加8--10倍纯化水进行超声波连续逆流提取,超声波频率为2-3万赫兹,提取温度为50-60℃,获取含水量85-90%的提取液。
4)浓缩:经超滤膜(截留分子量为十万以上)过滤,去掉小于十万分子量的物质和水,获取含水量30-40%的浓缩物。
5)醇沉:浓缩物边搅拌边加入4倍量食用酒精,静置24h,去上清液;离心甩干获取含酒精量5-10%的浸膏。
6)微波干燥:浸膏装入微波料盘,抽真空干燥,温度40℃--50℃,时间60-80分钟,干燥物含水率≤6%;
7)包装:干燥物80目粉碎过筛,包装;
8)检验:检验各项指标,全部合格进库;
9)本工艺为1∶25提取比例。
8.根据权利要求6所述的含有灰树花提取物抗肿瘤组合物的制备方法,其特征在于:所述富硒酵母粉通过以下方法获得:
1)在实验室选育合适的啤酒酵母菌种,以麦芽汁为培养基在酵母生长的特定环境下培养,在几个不同的阶段加入硒,找出酵母与硒的最佳结合条件,既利于提高结合硒量,又利于酵母的生长,同时选取不同的硒化合物进行试验,选择最佳材料;
2)以糖蜜加适量硒化合物为培养基,杀菌后接入酵母菌种,流加氮、磷等营养盐进行发酵培养,在温度30℃,pH4.5~5.0的条件下通风培养24~48小时,使无机硒结合成有机态的硒,通过离心法分离出酵母,用水反复冲洗后经浓缩和喷雾干燥即得到淡黄色的富硒酵母粉,硒含量可达1000x10以上,通常为500x10左右,其蛋白质≥44%,水份≤8.5%,富含18种氨基酸,维生素B为33.2x10。
9.权利要求1-5所述的含有灰树花提取物抗肿瘤组合物,其特征在于:所述的抗肿瘤组合物,其外包覆有胶囊壳,胶囊壳是用食用级药用的明胶经过精处理与辅助材料制造而成的用于盛装固体粉末、颗粒的卵状空心外壳。胶囊壳具有良好的生物利用度,能迅速、可靠和安全地溶解,胶囊壳空心胶囊由药用明胶加辅料精制而成。
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