CN105636972A - 吡喃葡萄糖基取代的吲哚脲衍生物及其作为sglt抑制剂的用途 - Google Patents

吡喃葡萄糖基取代的吲哚脲衍生物及其作为sglt抑制剂的用途 Download PDF

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Abstract

本发明提供式I化合物或其药学上可接受的盐。

Description

吡喃葡萄糖基取代的吲哚脲衍生物及其作为SGLT抑制剂的用途
本发明涉及新的脲化合物、包含该化合物的药用组合物、使用该化合物治疗生理学疾病的方法以及该化合物合成中使用的中间体和方法。
本发明为治疗糖尿病和与高血糖症相关的其它疾病和病症的领域。糖尿病是特征在于血糖水平高的一组疾病。根据2011美国糖尿病情况说明书(2011NationalDiabetesFactSheet)(美国健康和人类服务部，疾病控制和预防中心)，它影响了大约2500万美国人，也是美国位居第七位的主要死亡原因。钠偶合的葡萄糖协同转运蛋白(SGLT’s)是已知负责碳水化合物(例如葡萄糖)吸收的转运蛋白之一。更具体地讲，SGLT1负责将葡萄糖转运通过小肠的刷状缘膜。SGLT1的抑制能够导致小肠中葡萄糖吸收的减少，从而为糖尿病的治疗提供了有用的途径。
美国专利申请公开号2008/0139484A1公开了含有1-(β-D-吡喃葡萄糖基)-3-取代的氮的杂环化合物，其具有SGLT1和/或SGLT2抑制活性，还公开了其用于预防或治疗与高血糖症相关的疾病，例如糖尿病。另外，美国专利号7,851,617公开了为SGLT抑制剂的吲哚衍生物，还公开了其用于治疗或预防糖尿病及相关疾病。
需要糖尿病的可替代的药物和疗法。本发明提供了某些新的SGLT1的抑制剂，其可以适用于治疗糖尿病。
因此，本发明提供了式I化合物或其药学上可接受的盐：
本发明还提供了在患者中治疗糖尿病的方法，该方法包括给予需要此类治疗的患者有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐。本发明还提供了在患者中治疗1型糖尿病的方法，该方法包括给予需要此类治疗的有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐。此外，本发明提供了在患者中治疗2型糖尿病的方法，该方法包括给予需要此类治疗的患者有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐。本发明还提供了在患者中治疗葡萄糖耐量异常(IGT)、空腹血糖异常(IFG)或代谢综合征的方法，该方法包括给予需要此类治疗的患者有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐。
此外，本发明提供了用于治疗的式I化合物或其药学上可接受的盐，特别是用于治疗糖尿病。另外，本发明提供了式I化合物或其药学上可接受的盐，用于治疗1型糖尿病。另外，本发明提供了式I化合物或其药学上可接受的盐，用于治疗2型糖尿病。本发明还提供了式I化合物或其药学上可接受的盐，用于治疗葡萄糖耐量异常(IGT)、空腹血糖异常(IFG)或代谢综合征。本发明还提供了式I化合物或其药学上可接受的盐在生产用于治疗糖尿病的药物中的用途。另外，本发明提供了式I化合物或其药学上可接受的盐在生产用于治疗1型糖尿病的药物中的用途。本发明还提供了式I化合物或其药学上可接受的盐在生产用于治疗2型糖尿病的药物中的用途。本发明还提供了式I化合物或其药学上可接受的盐在生产用于治疗IGT、IFG或代谢综合征的药物中的用途。
本发明还提供了药用组合物，其含有式I化合物或其药学上可接受的盐以及一或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。本发明还包括用于合成式I化合物的新的中间体和方法。
本文中使用的术语“治疗”包括抑制、减缓、终止或逆转现有症状或病症的进展或严重性。
本文中使用的术语“患者”是指哺乳动物，例如如小鼠、豚鼠、大鼠、狗或人。可以理解的是优选的患者是人类。
本文中使用的术语“有效量”是指本发明化合物或其药学上可接受的盐的数量或剂量，当单剂量或单剂量给予患者时，其能够为诊断或治疗患者提供需要的作用。
通过使用已知技术和通过观察类似情况下获得的结果，主治医师，如所属领域的技术人员，可以容易地确定有效量。在确定用于患者的有效量时，主治医生需要考虑多种因素，包括但不限于：哺乳动物的种类；其身材大小、年龄和一般健康状况；相关的特定疾病或病症；该疾病或病症的严重程度或损害程度；个体患者的反应；施用的特定化合物；给药方式；给药制剂的生物利用度特性；选择的剂量方案；共同使用的药物以及其它相关情况。
式I化合物通常在较宽的剂量范围内有效。例如，每日剂量通常在约0.01至约30mg/kg体重的范围内。在某些情况下，低于上述范围低限的剂量水平可能也是足够的，而在其它情况下，可以采用较高的剂量而不会引起任何有害的副作用，因此，上述剂量范围不应当以任何方式限定本发明的范围。
本发明化合物优选制成可以通过任何途径给药的药用组合物，所述途径使得化合物生物可利用。最优选此类组合物用于口服给药。此类药用组合物及其制备方法在本领域中是众所周知的。(参见，例如，雷明顿：药学科学与实践(Remington:TheScienceandPracticeofPharmacy)(D.B.Troy,Editor,第21版,Lippincott,Williams&Wilkins,2006)。
在本发明的另一方面中，本发明化合物可以与一或多种治疗药物组合给药，例如抗糖尿病药物。组合给药包括同时或顺序给药。此外，组合同时给药可以是单一组合剂量给药，或者是每种治疗药物的不同的剂量给药。抗糖尿病药物的示例包括：二甲双胍；DPPIV抑制剂，例如西他列汀或利拉利汀；磺酰脲类，如格列美脲；噻唑烷二酮类，如吡格列酮；基础胰岛素，如甘精胰岛素；速效胰岛素，如优泌乐(HUMALOG)或诺和锐(NOVOLOG)；GLP-1激动剂，如艾塞那肽或利拉鲁肽；SGLT2抑制剂，如达帕格列净或依帕列净；胰高血糖素受体拮抗剂，如LY2409021等。
式I化合物根据下列的制备、实施例和流程中所述方法制备。试剂和原料对于本领域技术人员而言可以轻松获得。除非另有规定，所有的取代基如前述定义。应当理解，这些流程、制备和实施例不应当以任何方式限定本发明的范围。
拆分的示例包括选择性结晶技术或手性色谱方法。(参见，例如J.Jacques等人,“对映体、外消旋体和拆分(Enantiomers,Racemates,andResolutions)”,JohnWileyandSons,Inc.,1981；和E.L.ElielandS.H.Wilen，“有机化合物的立体化学(StereochemistryofOrganicCompounds)”,Wiley-Interscience,1994)。本领域技术人员还应当理解，通过色谱、手性色谱法或选择性结晶对式I的各个非对映异构体或几何异构体或者制备式I的中间体的各个非对映异构体或几何异构体的分离可以在合成的任何适当的阶段进行。
本文中使用的“δ”是指由四甲基硅烷向低场移动的百万分之几；“mins”是指分钟；“hrs”是指小时；“THF”是指四氢呋喃；“EtOAc”是指乙酸乙酯；“MeOH”是指甲醇或甲基醇；“EtOH”是指乙醇或乙基醇；“TFA”是指三氟乙酸；“DPPA”是指二苯基磷酰基叠氮化物；“HATU”是指O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’四甲基鎓六氟磷酸盐；“CDI”是指1,1'-羰基二咪唑；“DDQ”是指2,3-二氯代-5,6-二氰基-1,4-苯并醌；“Xphos”是指2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基联苯；“MTBE”是指甲基叔-丁基醚；“HPLC”是指高效液相色谱；“Ac”是指下列结构的乙酰基取代基：
并且术语“BOC”是指叔-丁基氧基羰基保护基团。
药学上可接受的盐和制备它们的常规方法在本领域中众所周知。参见，例如，Gould,P.L.,“碱性药物的盐的选择(Saltselectionforbasicdrugs),”InternationalJournalofPharmaceutics,33:201－217(1986)；Bastin等人“药用新化学实体的盐的选择和优化方法(SaltSelectionandOptimizationProceduresforPharmaceuticalNewChemicalEntities),”OrganicProcessResearchandDevelopment,4:427－435(2000)；和S.M.Berge等人,“药用盐(PharmaceuticalSalts),”JournalofPharmaceuticalSciences,第66卷，第1期,1977年1月。合成领域的技术人员应当理解，作为胺的式I化合物为有机碱，它们通过本领域技术人员熟知的技术和条件易于转化为并分离为药学上可接受的盐。
流程I
制备1
4-甲基吲哚啉.
方法A
于室温下，将4-甲基-1H-吲哚(500g；1.0equiv；3.811moles)和乙酸(2000mL)加至20L烧瓶中。将溶液冷却至0℃(内部温度)，然后分五等份加入氰基硼氢化钠(359.2g；1.5equiv；5.71moles)，同时使得反应混合物温热不高于10℃。当添加完成后，于室温下搅拌反应混合物2小时。将反应混合物冷却至0℃，加入冰(5Kg)。非常缓慢地加入预冷的(5℃)氢氧化钠溶液(4M)，使得反应混合物pH为14。反应混合物用乙酸乙酯萃取(2×10L)。合并有机层，用水(1×10L)和盐水(1×10L)洗涤。经无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，获得目标化合物(460g,90％的收率)：质谱(m/z):134(M+1)。
方法B
将三氟乙酸(7.62moles；576.42mL)添加至2000mL的三颈烧瓶中，该烧瓶配备温度计、磁力搅拌器、氮气导管和滴液漏斗。将烧瓶置于冰/水浴中，将混合物冷却至13℃(内部温度)。3分钟内加入4-甲基-1H-吲哚(762.33mmoles；94.25mL；100.00g)，使得反应混合物的温度不超过25℃。添加完成后，将混合物搅拌约1分钟，使得反应混合物的温度达到20℃，然后自冰浴上移除烧瓶，于20℃搅拌10分钟。41分钟内向反应物中滴加三乙基硅烷(876.68mmoles；140.47mL；101.94g)，使得温度升高至25℃，然后根据需要采用冷水浴将温度保持在25℃－30℃。当添加完成时，将反应混合物搅拌80分钟。将反应混合物冷却至10℃，然后在搅拌下倒入冰(1000g)、5M盐酸(800ml)和MTBE(2000ml)的混合物中。注意：非常重要的是必须骤冷到两相系统中以避免杂质的形成。分离水相，有机部分用盐酸萃取(400ml；2M)，然后再用盐酸萃取(2×200ml；2M)。合并水萃取液，在冰水中冷却。加入50％w/w的NaOH使得pH>10，保持温度低于30℃。水混合物用MTBE萃取(先1000ml,然后200ml)。合并有机萃取液，经无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，获得目标化合物(73g；68％的收率)：质谱(m/z):134(M+1)。
方法C
于室温下，将4-甲基-1H-吲哚(114.35mmoles；15.00g)的四氢呋喃(75.00mL)溶液在搅拌下添加至对-甲苯磺酸单水合物(137.22mmoles；23.63g)的水(75.00mL)溶液中。在二氧化碳环境中加入5％铂炭(JohnsonMattheyType103；1.50g)。将混合物置于氢气环境中(4.2bar)，于室温下振摇过夜。将反应混合物用氢氧化钠(2M水溶液；148.65mmoles；74.33mL)稀释，与MTBE(150.00mL)一起搅拌。通过硅藻土过滤混合物，用MTBE(50mL)洗涤滤垫。分离滤液，水相用MTBE(100mL)萃取。合并有机部分，经无水硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩，获得目标化合物(14.80g；97.17％的收率)：质谱(m/z):134(M+1)。
制备2
[(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-三乙酰氧基-6-(4-甲基吲哚啉-1-基)四氢吡喃-2-基]甲基乙酸酯
方法A
流程I,步骤A：将D-葡萄糖(180.2mmol)用水(25mL)润湿，然后加入4-甲基吲哚啉(180.2mmoles)的乙醇(200mL)溶液。向混合物中充入氮气，在氮气环境中加热至回流过夜。然后冷却至室温并减压浓缩。向获得的残留物中加入二氯甲烷(200mL)、N,N-二甲基氨基吡啶(9.0mmol)和吡啶(2.5mol)。在冰浴中冷却混合物，然后30分钟内滴加乙酸酐(1.1mol)。减压浓缩混合物，残留物用乙酸乙酯稀释(500mL)，混合物用柠檬酸(饱和的水溶液；50mL)的水(500mL)溶液洗涤。用盐水(500mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。加入乙醇(500mL)，于50℃混合10分钟。将混合物冷却至室温，然后加至冰/水中。过滤获得的混合物并减压干燥，获得目标化合物(32g；38.32％的收率)：质谱(m/z):464.2(M+1)。
方法B
流程I,步骤A：向20L三颈烧瓶中加入4-甲基吲哚啉(1000g；7.51moles)的乙醇:水(8000ml:1000ml)溶液和D-葡萄糖(1480g；8.25moles)。将混合物于80℃加热6小时。减压浓缩混合物，将残留物溶于吡啶:二氯甲烷(8000ml:8000ml)。加入二甲基氨基吡啶(91.79g；0.75moles)，将混合物冷却至10℃(内部温度)。滴加乙酸酐(9000ml)。当加入完成时，将反应混合物于45℃搅拌1小时，然后于室温下搅拌过夜。减压浓缩混合物。向残留物中加入乙酸乙酯(20L)和水(10L)。分离有机层，水层用乙酸乙酯萃取(2×10L)。合并有机层，用饱和的柠檬酸(5Kg)水溶液洗涤。有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。将残留物在乙醇中结晶，获得目标化合物(3205.5g；92.11％的收率)：质谱(m/z):464.2(M+1)。
方法C
流程I,步骤A:将D-葡萄糖(517.30mmoles；93.20g)用水(66mL)润湿，然后加入4-甲基吲哚啉,(65.62g；492.67mmoles)的乙醇(394mL)溶液。向混合物中充入氮气，在氮气环境中加热至回流过夜。然后冷却至室温，减压浓缩。向获得的残留物中加入二氯甲烷(394mL)、三乙胺(2.82moles；393.72mL)和N,N-二甲基-4-吡啶胺(24.63mmoles；3.01g)。在冰浴中冷却混合物，然后在30分钟内滴加乙酸酐(3.94moles；372.57mL)。减压浓缩混合物，残留物用乙酸乙酯稀释(984mL)，混合物用柠檬酸(饱和的水溶液；50mL)的水(200mL)溶液洗涤。分层，水相用乙酸乙酯萃取(600mL，然后300mL)。合并有机部分，用盐水(600mL)洗涤，减压浓缩。加入乙醇(656mL)，于50℃混合10分钟。将混合物冷却至室温，然后加至冰/水中。过滤获得的混合物并减压干燥，获得目标化合物(112.2g；49.14％的收率)：质谱(m/z):464.2(M+1)。
制备3
[(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-三乙酰氧基-6-(4-甲基吲哚-1-基)四氢吡喃-2-基]甲基乙酸酯
方法A
流程I,步骤B：将[(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-三乙酰氧基-6-(4-甲基吲哚啉-1-基)四氢吡喃-2-基]甲基乙酸酯(60.4mmol)添加至500mL烧瓶中。加入1,4-二氧六环(250mL)，将溶液冷却至10℃。一次性加入DDQ(63.4mmol)。将混合物温热至室温并搅拌2小时。过滤反应混合物，固体用1,4-二氧六环(3×50mL)洗涤。减压浓缩滤液，通过硅胶(200g)短柱过滤，采用10％EtOAc/二氯甲烷(300mL)洗涤。用饱和的碳酸氢钠溶液(2×200mL)洗涤，然后用水(200mL)洗涤。经无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，获得目标化合物(27.5g；98.6％的收率)：质谱(m/z):462.5(M+1)。
方法B
流程I,步骤B：将[(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-三乙酰氧基-6-(4-甲基吲哚啉-1-基)四氢吡喃-2-基]甲基乙酸酯(4200g；9.08moles)添加至20L烧瓶中。加入1,4二氧六环(42000mL)，将溶液冷却至10℃。以五等份加入DDQ(2057g；9.08moles)，将温度保持于10℃。添加完成后，将混合物温热至室温并搅拌2小时。过滤反应混合物，固体用1,4-二氧六环洗涤(3次)。减压浓缩滤液，残留物通过柱色谱纯化，采用0％－20％的乙酸乙酯己烷洗脱。将采用2500g的[(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-三乙酰氧基-6-(4-甲基吲哚啉-1-基)四氢吡喃-2-基]甲基乙酸酯作为原料根据类似方法制备的不同批次的物料纯组分合并，减压浓缩。将残留物溶于乙酸乙酯(50L)，用饱和的碳酸氢钠溶液(2×20L)洗涤，然后用水洗涤(1×10L)。经无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，在乙醇(10L)中结晶，获得目标化合物(4.632Kg；69％的收率)：质谱(m/z):462.5(M+1)。
方法C
流程I,步骤B：将[(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-三乙酰氧基-6-(4-甲基吲哚啉-1-基)四氢吡喃-2-基]甲基乙酸酯(112.2g；242.08mmoles)于室温下溶于1,4-二氧六环(1.68L)。在冰/水浴中冷却混合物，然后分次加入4,5-二氯-3,6-二氧代-环己-1,4-二烯-1,2-二甲腈(244.50mmoles；55.50g)，保持反应混合物的温度低于15℃。当添加完成后，将混合物搅拌5分钟，然后移除冰浴，再搅拌5分钟。过滤混合物，将固体用1,4-二氧六环(561.00mL)洗涤。减压浓缩滤液，然后向残留物中加入乙醇(561.00mL)，于40℃搅拌20分钟。在冰水浴中冷却混合物15mins，过滤，将获得的固体用冷乙醇(100mL)洗涤。减压干燥固体，获得目标化合物(82.5g；73.9％的收率)：质谱(m/z):462.0(M+1)。
制备4
[(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-三乙酰氧基-6-[3-(4-羟基苯甲酰基)-4-甲基-吲哚-1-基]四氢吡喃-2-基]甲基乙酸酯
流程I,步骤C：向搅拌并充入氮气的0.5L圆底烧瓶中按顺序加入：[(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-三乙酰氧基-6-(4-甲基吲哚-1-基)四氢吡喃-2-基]甲基乙酸酯(29.5mmol)、二氯甲烷(100mL)和4-溴苯甲酰氯(30.9mmol)。在冰浴中冷却混合物，加入三氯化铝(88.4mmol)。冷却搅拌1.5小时后，将反应混合物倒入冰上，用水(100mL)和氯仿(100mL)稀释。分离有机相，水相用氯仿(100mL)洗涤。合并有机部分，用浓碳酸氢钠溶液(200mL)和盐水(200mL)洗涤。经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过硅胶快速色谱纯化(330g)，采用5–25％的EtOAc/氯仿洗脱，获得目标化合物(7.9g；46.09％的收率)：质谱(m/z):582.4(M+1),580.4(M-H)。
制备5
[(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-三乙酰氧基-6-[3-[4-(3-苄基氧基丙氧基)苯甲酰基]-4-甲基-吲哚-1-基]四氢吡喃-2-基]甲基乙酸酯
流程I,步骤D：向搅拌并充入氮气的0.5L圆底烧瓶中按顺序加入：[(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-三乙酰氧基-6-[3-(4-羟基苯甲酰基)-4-甲基-吲哚-1-基]四氢吡喃-2-基]甲基乙酸酯(13.58mmol)、乙腈(250mL)和碳酸钾(67.92mmol)。于室温下，向该搅拌的溶液中加入3-溴丙氧基甲基苯(27.2mmol)，于60℃、氮气环境下加热16小时。用EtOAc(200mL)稀释，过滤。浓缩滤液，通过快速色谱纯化(330g硅胶)，采用2－40％的EtOAc/氯仿洗脱。浓缩含有产物的组分，获得目标化合物(9.0g.90.79％)：质谱(m/z):730.4(M+H)。
制备6
(2R,3R,4S,5S,6R)-2-[3-[[4-(3-苄基氧基丙氧基)苯基]-羟基-甲基]-4-甲基-吲哚-1-基]-6-(羟基甲基)四氢吡喃-3,4,5-三醇
流程I,步骤E：向搅拌并充入氮气的0.5L圆底烧瓶中加入[(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-三乙酰氧基-6-[3-[4-(3-苄基氧基丙氧基)苯甲酰基]-4-甲基-吲哚-1-基]四氢吡喃-2-基]甲基乙酸酯(12.33mmol)、THF(50mL)和乙醇(100mL)。加入四氢硼酸钠(37.0mmol)，于室温下搅拌6小时。通过滴加5NHCl酸化，然后用水(200mL)和二氯甲烷(200mL)稀释。分离有机部分，用盐水(200mL)洗涤。经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，获得目标化合物，为非对映异构体混合物，纯度足够，无需进一步纯化可以直接用于下一步骤(7.2g粗品)。质谱(m/z):546.4(M+1-18)。
制备7
[(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-三乙酰氧基-6-[3-[[4-(3-苄基氧基丙氧基)苯基]甲基]-4-甲基-吲哚-1-基]四氢吡喃-2-基]甲基乙酸酯
流程I,步骤F：在氮气环境下，向0.5L圆底烧瓶中加入(2R,3R,4S,5S,6R)-2-[3-[[4-(3-苄基氧基丙氧基)苯基]-羟基-甲基]-4-甲基-吲哚-1-基]-6-(羟基甲基)四氢吡喃-3,4,5-三醇(7.2g，粗品)，然后加入乙腈(50mL)，再加入二氯甲烷(100mL)。将混合物冷却至0℃。加入三乙基硅烷(63.87mmol)，随后滴加三氟化硼醚合物(51.10mmol)。当加入完成时将反应混合物在冰浴中搅拌5分钟，然后滴加碳酸氢钠溶液(20mL)。用水(200mL)和EtOAc(500mL)稀释。分层，有机相用盐水洗涤(200mL)，减压浓缩。加入吡啶(50mL)、二氯甲烷(50mL)和N,N-二甲基氨基吡啶(0.41mmol)。在冰浴中冷却，加入乙酸酐(127.74mmol)。温热至室温并搅拌16小时。减压浓缩，然后加入EtOAc(500mL)。用柠檬酸溶液(200mL)洗涤，随后用水(200mL)和盐水(200mL)洗涤。经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过快速色谱纯化(330g硅胶)，采用5-5–20％的EtOAc/二氯甲烷洗脱，获得目标化合物(7.5g,82.03％)：质谱(m/z):716.3(M+1)。
流程II
制备8
[(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-三乙酰氧基-6-[3-[[4-(3-羟基丙氧基)苯基]甲基]-4-甲基-吲哚-1-基]四氢吡喃-2-基]甲基乙酸酯
流程II,步骤A：向0.5L圆底烧瓶中加入[(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-三乙酰氧基-6-[3-[[4-(3-苄基氧基丙氧基)苯基]甲基]-4-甲基-吲哚-1-基]四氢吡喃-2-基]甲基乙酸酯(10.34mmol)和乙酸乙酯(80mL)。向该溶液中加入用乙酸乙酯(20mL)预润湿的5％Pd/C。在搅拌下，将混合物用氢(3×)排空，在氢气环境下搅拌16小时。通过硅藻土过滤，用乙酸乙酯(100mL)洗涤。减压浓缩滤液，获得纯度足够的目标化合物，直接用于下一步骤(6.5g)：质谱(m/z):626.4(M+1)。
制备9
[(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-三乙酰氧基-6-[4-甲基-3-[[4-(3-甲基磺酰基氧基丙氧基)苯基]甲基]吲哚-1-基]四氢吡喃-2-基]甲基乙酸酯
流程II,步骤B：向0.5L圆底烧瓶中加入[(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-三乙酰氧基-6-[3-[[4-(3-羟基丙氧基)苯基]甲基]-4-甲基-吲哚-1-基]四氢吡喃-2-基]甲基乙酸酯(6.5g,crude)、二氯甲烷(100mL)和三乙胺(25.97mmol)。在冰浴中冷却，10分钟内滴加甲磺酰氯(12.47mmol)。温热至室温并搅拌1小时。用二氯甲烷(100mL)稀释，用水(200mL)和盐水(200mL)洗涤。有机部分经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，获得纯度足够的目标化合物，直接用于下一步骤(7.2g)：质谱(m/z):704.4(M+1)。
制备10a
1-[2-(4,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)-2-氧代-乙基]-3-异丁基-脲
向圆底烧瓶中加入4,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-甲酸叔-丁基酯盐酸盐(1.38mmol)、2-(异丁基氨基甲酰基氨基)乙酸(1.15mmol)、二甲基甲酰胺(3.8mL)、三乙胺(1.72mmol)和HATU(1.26mmol)。室温下搅拌16小时，然后用水(50mL)和乙酸乙酯(50mL)稀释。有机相用浓氯化铵(50mL)和盐水(50mL)洗涤。有机部分经硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。中间体通过快速色谱纯化(40g硅胶短柱)，采用0－10％的甲醇乙酸乙酯洗脱，得到9-[2-(异丁基氨基甲酰基氨基)乙酰基]-4,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-甲酸叔-丁基酯(0.38g,0.93mmol):MS(m/z):411.2(M+H)。
向9-[2-(异丁基氨基甲酰基氨基)乙酰基]-4,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-甲酸叔-丁基酯(0.38g,0.93mmol)的1,4-二氧六环(1.75mL)溶液中加入4MHCl的1,4-二氧六环溶液(8.77mmol)。将反应物于室温下搅拌5小时，然后减压浓缩。将残留物溶于甲醇并上样于SCX(离子交换)柱纯化。用甲醇冲洗上样柱(3×25mL)，然后用2N氨甲醇溶液冲洗。合并并浓缩氨冲洗液，获得目标化合物(0.25g,0.81mmol):MS(m/z):311.0(M+H)。
制备10b
可供选择的1-[2-(4,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)-2-氧代-乙基]-3-异丁基-脲制备方法
2-(异丁基氨基甲酰基氨基)乙酸苄基酯的制备
将3-甲基丁酸(106.36g)、甲苯(800ml)和三乙胺(126.46g)加入三颈烧瓶(R1)中。将R1加热至90℃。缓慢加入DPPA(289.3g)的甲苯(400ml)溶液(小心：N2释放)。将R1于90℃搅拌30－60mins，然后冷却至20－30℃。向另外的烧瓶(R2)中加入2-氨基乙酸苄基酯盐酸盐(200g)、三乙胺(150.54g)和甲苯(1000ml)，于20－30℃搅拌1－2小时。于20－30℃，通过滴加漏斗将R1混合物缓慢滴加至R2中并搅拌1－2小时。在剧烈搅拌下，将反应混合物缓慢加至水(2000ml)中。分离有机部分，水相用EtOAc萃取(2×1000ml)。合并有机层，用1N盐酸(1000ml)洗涤，然后用7％NaHCO3aq(1000ml)洗涤，然后用水(1000ml)洗涤，再用15％盐水(1000ml)洗涤。减压浓缩。将残留物用庚烷(1000ml)浆化，然后过滤固体。在低于40℃减压干燥滤饼，获得2-(异丁基氨基甲酰基氨基)乙酸苄基酯(218g；测定为98.1％；81.5％的收率)。
2-(异丁基氨基甲酰基氨基)乙酸的制备
将2-(异丁基氨基甲酰基氨基)乙酸苄基酯(200g；98.1％的含量)、无水Pd/C(20g；10％w/w)和异丙醇(2000ml)添加至高压釜中。真空脱气，充入氮气三次。于60℃、50－60psi氢气环境中搅拌4小时。将混合物冷却至20－30℃，通过硅藻土过滤，于45－50℃减压浓缩滤液至1－2Vol。加入乙腈(1000ml)，于45－50℃减压浓缩至2－3Vol。将混合物冷却至5－10℃，过滤。于45－50℃减压干燥滤饼，获得2-(异丁基氨基甲酰基氨基)乙酸(112g；测定为95.2；82.5％的收率)。
最终目标化合物的制备
向圆底烧瓶中加入4,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-甲酸叔-丁基酯盐酸盐(1.38mmol)、2-(异丁基氨基甲酰基氨基)乙酸(1.15mmol)、二甲基甲酰胺(3.8mL)、三乙胺(1.72mmol)和HATU(1.26mmol)。于室温下搅拌16小时，然后用水(50mL)和乙酸乙酯(50mL)稀释。有机相用浓氯化铵(50mL)和盐水(50mL)洗涤。有机部分经硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。中间体通过快速色谱纯化(40g硅胶短柱)，采用0–10％的甲醇乙酸乙酯洗脱，得到9-[2-(异丁基氨基甲酰基氨基)乙酰基]-4,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-甲酸叔-丁基酯(0.38g,0.93mmol):MS(m/z):411.2(M+H)。
向9-[2-(异丁基氨基甲酰基氨基)乙酰基]-4,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-甲酸叔-丁基酯(0.38g,0.93mmol)的1,4-二氧六环(1.75mL)溶液中加入4MHCl的1,4-二氧六环溶液(8.77mmol)。将反应物于室温下搅拌5小时，然后减压浓缩。将残留物溶于甲醇并上样于SCX(离子交换)柱纯化。用甲醇冲洗上样柱(3×25mL)，然后用2N氨甲醇溶液冲洗柱。合并并浓缩氨冲洗液，获得最终的目标化合物1-[2-(4,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)-2-氧代-乙基]-3-异丁基-脲(0.25g,0.81mmol):MS(m/z):311.0(M+H)。
制备10c
1-[2-(4,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)-2-氧代-乙基]-3-异丁基-脲的可供选择的制备方法
4,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4,9-二甲酸O4-苄基O9-叔-丁基酯的制备
向20L温控反应器中加入4,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-甲酸叔-丁基酯盐酸盐(2.06moles；600.00g)，随后加入二氯甲烷(6.00L)，然后加入三乙胺(4.33moles；604mL)。将反应物的外套设置为0℃。当反应混合物的温度达到5℃时，约20分钟内加入氯代甲酸苄基酯(2.10moles；311mL)，保持内部温度低于20℃。当添加完成后，将外套温热至室温，将混合物搅拌过夜。将反应混合物倒入水(4L)中，分离混合物。减压浓缩有机部分，获得目标化合物(838g；推定95.65％的纯度，100％的收率，为了下一步反应计算的目的)。质谱(m/z):411.2(M+23)。
4,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-甲酸苄基酯盐酸盐的制备
向外套设定为0℃的20L温控反应器中加入4,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4,9-二甲酸O4-苄基O9-叔-丁基酯(2.06moles；838.00g；95.65％的纯度)的1,4-二氧六环溶液(19.63moles；1.68L)。当溶液的温度达到5℃时，加入盐酸(4M的1,4-二氧六环溶液；10.32moles；2.58L)，加入的速度应当使得温度不超过20℃。当添加完成后，将溶液温热至室温，搅拌过夜。减压浓缩反应混合物，获得稠浆液。加入MTBE(3.35L)，将混合物于40℃振摇30分钟。将混合物冷却至室温，过滤沉淀。用MTBE(838mL)洗涤沉淀物。将沉淀物在滤器上干燥，然后转移至真空箱中进一步干燥，获得目标化合物(638g；95％的收率)。质谱(m/z):289[M(游离碱)+1]。
9-[2-(异丁基氨基甲酰基氨基)乙酰基]-4,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-甲酸苄基酯的制备
向2-(异丁基氨基甲酰基氨基)乙酸(667.05mmoles；116.20g)的二氯甲烷(1.16L)溶液中分次加入1,1'-羰基二咪唑(700.40mmoles；113.57g)。将混合物于室温下搅拌1小时。将该混合物标记为A。在另外的容器中加入4,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-甲酸苄基酯盐酸盐(700.40mmoles；413.68g)、二氯甲烷(581mL)和三乙胺(1.33moles；186mL)。搅拌该混合物。将该混合物标记为B。2分钟内将混合物A倒入混合物B中。将获得的混合物于室温下搅拌。3小时后，加入水(1000mL)。分离有机相并减压浓缩。加入乙酸乙酯(581.00mL)，将混合物于40℃振摇20分钟，然后冷却至室温，然后在冰浴中冷却20分钟。过滤沉淀物，在真空箱中进一步干燥，获得目标化合物(137.1g；46.23％的收率)。质谱(m/z):445.2(M+1)。将滤液静置，形成沉淀。过滤该沉淀，在真空箱中进一步干燥，获得目标化合物。(9.30g；3.14％的收率)。
最终目标化合物的制备
将9-[2-(异丁基氨基甲酰基氨基)乙酰基]-2,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-2-甲酸苄基酯(239.78mmoles；106.60g)悬浮于乙醇(852.80mL)和环己烯(1.20moles；121.90mL)中，加入5％钯炭(24g；55.4％的水分含量)。将混合物加热至回流并搅拌45mins。将混合物冷却至室温，通过硅藻土垫过滤，固体用乙醇洗涤，减压浓缩，获得最终目标化合物1-[2-(4,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)-2-氧代-乙基]-3-异丁基-脲(79.2g；94％的纯度；100％的收率)。质谱(m/z):311.2(M+1)。
实施例1a
1-异丁基-3-[2-[4-[3-[4-[[4-甲基-1-[(2R,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-三羟基-6-(羟基甲基)四氢吡喃-2-基]吲哚-3-基]甲基]苯氧基]丙基]-4,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基]-2-氧代-乙基]脲
流程II,步骤C：向0.25L圆底烧瓶中加入[(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-三乙酰氧基-6-[4-甲基-3-[[4-(3-甲基磺酰基氧基丙氧基)苯基]甲基]吲哚-1-基]四氢吡喃-2-基]甲基乙酸酯(7.2g,粗品)、1-[2-(4,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)-2-氧代-乙基]-3-异丁基-脲(12.28mmol)、乙腈(100mL)和二异丙基乙基胺(40.92mmol)。于80℃加热16小时，然后减压浓缩。加入甲醇(50mL)和甲醇钠(20.46mmol,30％的MeOH溶液)，于室温下搅拌1小时。通过加入小块的干冰骤冷。减压浓缩。通过反相快速色谱纯化(400gC18柱)，采用三份5–80％的水(0.1％甲酸)的乙腈(0.1％甲酸)溶液洗脱。减压浓缩得到目标化合物，为甲酸盐，含有少量杂质。将该盐溶于7N氨的甲醇溶液(20mL)，然后浓缩形成游离碱。将游离碱通过快速色谱纯化(330g硅胶短柱)，采用5％的7N氨甲醇/二氯甲烷洗脱。减压浓缩产物组分，得到目标化合物(1.75g,22.81％):MS(m/z):746.6(M+H)。H1NMR(400.31MHz,CD3OD):δ7.28(d,J＝8.4Hz,1H),7.03(d,J＝8.4Hz,2H),7.02(s,1H),6.97(t,J＝8.8Hz,1H),6.69(d,J＝7.2Hz,1H),5.37(d,J＝9.2Hz,1H),4.15(s,2H),3.95(t,J＝6.0Hz,2H),3.91(d,J＝1.6Hz,2H),3.87–3.80(m,2H),3.65(dd,J＝11.6,5.6Hz,1H),3.57–3.38(m,5H),3.31(bm,2H),2.90(d,J＝6.8Hz,2H),2.46–2.13(m,8H),1.88(pentet,J＝6.8Hz,2H),1.68(septet,J＝6.8Hz,1H),1.61–1.28(m,8H),0.86(d,J＝6.8,6H)。
流程III
制备11
[(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-三乙酰氧基-6-[3-(4-苄基氧基苯甲酰基)-4-甲基-吲哚-1-基]四氢吡喃-2-基]甲基乙酸酯
流程III,步骤A：向20L温控反应器中加入：二氯甲烷(7.00L)、[(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-三乙酰氧基-6-(4-甲基吲哚-1-基)四氢吡喃-2-基]甲基乙酸酯(1.52moles；700.00g)和4-苄基氧基苯甲酰氯(1.67moles；411.63g)。将反应器外套温度设定为-30℃，将反应器内容物冷却，30分钟内加入四氯化锡(1.97moles；513.74g)，保持内部温度在-5至-10℃之间。当加入完成时，将混合物于约-9℃搅拌20分钟。将冷的反应混合物倒入20L碎冰中。分离有机层，水层用二氯甲烷萃取。合并有机萃取液，减压浓缩至约2L。加入7LMTBE，用盐酸(1M；2×8L)洗涤，然后用水洗涤(8L)，然后用碳酸氢钠(饱和的水溶液)洗涤，再用盐水洗涤。经硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩，获得目标化合物，其含有～17％w/w的MTBE(1377g；推定74％的纯度和100％的收率，用于计算下一步反应)。质谱(m/z):672.2(M+1)。
制备12
[(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-三乙酰氧基-6-[3-[(4-苄基氧基苯基)-羟基-甲基]-4-甲基-吲哚-1-基]四氢吡喃-2-基]甲基乙酸酯
流程III,步骤B：向搅拌的温控反应器中加入氯化铈(III)七水合物(4.55moles；1.12kg)的乙醇(4.96L)溶液，搅拌获得溶液。加入[(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-三乙酰氧基-6-[3-(4-苄基氧基苯甲酰基)-4-甲基-吲哚-1-基]四氢吡喃-2-基]甲基乙酸酯(1.52moles；1.38kg)和四氢呋喃(7.57L)。将混合物冷却至+2℃，3小时内分次加入四氢硼酸钠(4.55moles；172.18g)，加入过程中保持内部温度在0至+5℃之间。当添加完成后，将混合物于5℃搅拌1小时。加入另一份四氢硼酸钠(687.24mmoles；26.00g)，将混合物搅拌30分钟。加入另一份四氢硼酸钠(0.45equiv；687.24mmoles；26.00g)，将混合物搅拌过夜。将混合物倒入MTBE(5L)和水(10L)中。在搅拌下缓慢加入盐酸(2N)直到混合物对pH试纸显微酸性。分离有机层，用盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩，获得纯度可接受的目标化合物，可以直接用于下一步骤(1547g；推定66％的纯度和100％的收率，用于计算下一步骤)。质谱(m/z):656.4(M+1-18)。
制备13
[(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-三乙酰氧基-6-[3-[(4-苄基氧基苯基)甲基]-4-甲基-吲哚-1-基]四氢吡喃-2-基]甲基乙酸酯的制备
流程III,步骤C：将[(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-三乙酰氧基-6-[3-[(4-苄基氧基苯基)-羟基-甲基]-4-甲基-吲哚-1-基]四氢吡喃-2-基]甲基乙酸酯(1.52moles；1.55kg)的乙腈(6.19L)和二氯甲烷(6.19L)混合物在盐水/冰浴中冷却，直到内部温度为-5℃，然后在2分钟内加入三乙基硅烷(3.79moles；607mL)。滴加三氟化硼醚合物(3.79moles；479mL)，保持内部温度低于+5℃。将混合物在冰浴中搅拌30mins。小心地加入NaHCO3(饱和的水溶液；5L)和水(4L)的混合物。分离有机相，用水洗涤，然后用盐水洗涤，再经硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩，获得目标化合物和失去一或多个乙酰基的化合物的混合物。将残留物溶于二氯甲烷(1.86L)，加入乙酸酐(7.58moles；716mL)和N,N-二甲基-4-吡啶胺(75.78mmoles；9.26g)。将混合物温热至40℃，轻柔振摇以帮助溶解，然后将混合物于室温下搅拌1小时。减压浓缩混合物，将残留物在MTBE(6L)中浆化过夜。过滤收集固体，于60℃减压真空干燥，获得目标化合物(692.8g；70％的收率)。质谱(m/z):658.3(M+1)和680.2(M+23)。
制备14
[(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-三乙酰氧基-6-[3-[(4-羟基苯基)甲基]-4-甲基-吲哚-1-基]四氢吡喃-2-基]甲基乙酸酯
流程III,步骤D：向[(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-三乙酰氧基-6-[3-[(4-苄基氧基苯基)甲基]-4-甲基-吲哚-1-基]四氢吡喃-2-基]甲基乙酸酯(1.00equiv；1.05moles；692.80g)、甲醇(85.59moles；3.46L；2.74kg)和四氢呋喃(42.57moles；3.46L；3.07kg)的混合物中加入甲酸铵(5.27moles；332.10g)。向反应容器中充入氮气，加入5％钯炭(69.30g；JohnsonMattheytype87L,57.8％的水分含量)在异丙醇中的浆液。将混合物于38－42℃加热15mins(观察到适度的起泡)。移除热浴，将反应混合物搅拌15分钟，同时冷却。通过硅藻土过滤混合物，减压浓缩滤液。将残留物在乙酸乙酯(7.5L)和水(1L)之间分配。分离有机层，用盐水洗涤，经硫酸镁干燥。过滤并减压浓缩，获得目标化合物(594g；99％的收率)质谱(m/z):568.2(M+1)和590.2(M+23)。
制备15
[(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-三乙酰氧基-6-[3-[[4-(3-氯代丙氧基)苯基]甲基]-4-甲基-吲哚-1-基]四氢吡喃-2-基]甲基乙酸酯
流程III,步骤E：向[(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-三乙酰氧基-6-[3-[(4-羟基苯基)甲基]-4-甲基-吲哚-1-基]四氢吡喃-2-基]甲基乙酸酯(150.64mmoles；85.50g)和乙腈(855.00mL)的混合物中加入1-溴-3-氯代-丙烷(180.76mmoles；17.88mL)和碳酸钾(301.27mmoles；41.64g)。将混合物置于氮气环境下，将混合物于温和回流下加热2天。加入另一份1-溴-3-氯代-丙烷(45.19mmoles；4.47mL)，继续加热混合物过夜。减压浓缩混合物，将残留物在乙酸乙酯和水之间分配。分离有机层，用盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩，获得足够纯度的目标化合物，可以直接用于下一步骤(124.4g；推定78％的纯度和100％的收率，用于计算下一步反应)。质谱(m/z):644.2/646.2(M+1)。
制备16
[(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-三乙酰氧基-6-[3-[[4-[3-[9-[2-(异丁基氨基甲酰基氨基)乙酰基]-4,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基]丙氧基]苯基]甲基]-4-甲基-吲哚-1-基]四氢吡喃-2-基]甲基乙酸酯
步骤III,步骤F：向搅拌的[(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-三乙酰氧基-6-[3-[[4-(3-氯代丙氧基)苯基]甲基]-4-甲基-吲哚-1-基]四氢吡喃-2-基]甲基乙酸酯(143.38mmoles；118.40g)的乙腈(829mL)溶液中加入1-[2-(3,8-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-2-氧代-乙基]-3-异丁基-脲(143.38mmoles；47.35g)、碳酸钾(286.75mmoles；39.63g)和碘化钾(143.38mmoles；23.80g)。将混合物在氮气环境中回流加热过夜。将反应混合物冷却至室温，加入乙酸酐(1.43moles；135.53mL)和N,N-二甲基-4-吡啶胺(14.34mmoles；1.75g)。将混合物搅拌1小时。减压浓缩混合物，将残留物在水和EtOAc之间分配。分离有机层，用盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩。将残留物与采用[(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-三乙酰氧基-6-[3-[[4-(3-氯代丙氧基)苯基]甲基]-4-甲基-吲哚-1-基]四氢吡喃-2-基]甲基乙酸酯(6.2mmol)作为原料根据类似方法制备另一批产物合并。通过快速硅胶柱色谱纯化(1.5kg)，采用99:1的EtOAc:三乙胺(1cv)、EtOAc(3cv's)和190:10:1的EtOAc:MeOH:三乙胺(5cv's)洗脱，获得目标化合物(68.2g；49％的收率)。质谱(m/z):918.6(M+1)。
实施例1b
1-异丁基-3-[2-[4-[3-[4-[[4-甲基-1-[(2R,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-三羟基-6-(羟基甲基)四氢吡喃-2-基]吲哚-3-基]甲基]苯氧基]丙基]-4,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基]-2-氧代-乙基]脲的可供选择的制备方法
流程III,步骤G：将[(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-三乙酰氧基-6-[3-[[4-[3-[9-[2-(异丁基氨基甲酰基氨基)乙酰基]-4,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基]丙氧基]苯基]甲基]-4-甲基-吲哚-1-基]四氢吡喃-2-基]甲基乙酸酯(74.28mmoles；68.20g)和甲醇(341.00mL)的混合物在冰浴中冷却。加入甲醇钠(111.43mmoles；6.02g)。将混合物搅拌10分钟。将混合物倒入水(3.5L)中，然后过滤混合物。将固体用水洗涤，在烧结物(sinter)上干燥，在真空箱中于60℃进一步干燥，获得目标化合物(49.8g,89％的收率)。质谱(m/z):750.6(M+1)。
钠依赖性葡萄糖转运蛋白1(SGLT1)和SGLT2试验
编码人类SGLT1(slc5a1,NM_000343)和小鼠SGLT1(slc5a1,NM_019810.4)的cDNA分别购自Openbiosystems,Invitrogen和Openbiosystems。将cDNA克隆到用于哺乳动物表达的pcDNA3.1+中，采用标准哺乳动物转染流程稳定地转染到中国仓鼠卵巢(CHO)-K1细胞中。根据对新霉素(Geneticin,Invitrogen)的抗性和在14C-α-甲基-D-吡喃葡萄糖苷(14C-AMG)摄取试验中的活性(参见下面)，选择每个过度表达细胞系的表达SGLT的亚克隆。稳定表达SGLT的细胞采用标准细胞培养技术维持。
根据下面所述方法，测定SGLT在上述细胞系中对钠-依赖性14C-AMG摄取的活性。将含有30,000个细胞的100μL培养介质接种到96-孔Biocoat聚-D-赖氨酸板(BectonDickson)的每个孔中，于37培养过夜。将培养介质吸出，细胞采用200μL反应缓冲液(140mMNaCl,2mMKCl,1mMCaCl2,MgCl2和14mMN-2-氢乙基哌嗪-N’-2-乙磺酸(Hepes),pH7.5)洗涤二次。过量的缓冲液用纸巾擦干。向每个孔中加入35μL反应缓冲液。将含有不同浓度的试验化合物或者不含化合物作为对照的5μL的10％二甲基亚砜(DMSO)的反应缓冲液分配到每个孔中。通过加入10μL的14C-AMG的反应缓冲液使得终浓度为4μM启动反应。将板于37℃温育125分钟。通过抽取反应缓冲液终止反应，然后用200μL冰冷的反应缓冲液洗涤三次。采用手动抽取以保证完全除去反应缓冲液。向每个孔中加入10μL的0.1NNaOH，然后加入100μL的Supermix闪烁混合液(PerkinElmer)。混合后，在MicroBeta(PerkinElmer)中对板中的闪烁信号进行计数。采用ActivityBase(IDBusinessSolution)将10-剂量曲线拟合为经验的四参数模型以确定半数-最大抑制的抑制浓度(IC50)。
对本文中的实施例1化合物基本上如上所述进行测试，显示对人类SGLT1的IC50为35.2±14.1nM(n＝5)，对小鼠SGLT1的IC50为14.9±10.4nM(n＝5)。这些数据表明实施例1化合物能够在体外抑制人类和小鼠的SGLT1。
在口服糖耐量试验(OGTT)中的降糖作用
通过加入载体1％羟乙基纤维素、0.25％80w/消泡剂0.05％配制试验化合物，预称重试验化合物使其配制为1mg/ml的溶液。将混合物用探针超声处理约1分钟。加入搅拌棒，将获得的悬浮液在给药过程中不断搅拌。
采用单独饲养的C57Bl/6小鼠的两个不同组在OGTTs过程中证明降糖作用。第一组小鼠在化合物给药后接受OGTT18小时，第二组在化合物给药后接受8小时。将第一组动物称重，体重用于确定研究组(n＝5)，体重范围(workingrange)为26－30g。分组后，将小鼠口服管饲10ml/kg的试验化合物制剂或载体，30秒间隔。然后将小鼠分为二组，随后将18和8小时OGTT的小鼠禁食过夜，使其在试验日的下午晚些时候不能接触食物。第二天早上，将8小时OGTT小鼠称重，取血(通过剪尾)用于测定葡萄糖。测定研究组(n＝5)的空腹血糖值，工作范围为80－100mg/dl。分组后，将小鼠口服管饲化合物，30秒间隔。然后这些小鼠在给予化合物后接受OGTT8小时。
在每个化合物治疗开始后的8和18小时，抽取基线血样用于测定葡萄糖(自第一个动物开始)。然后立即以3g/kg给予动物口服剂量50％的葡萄糖()。通过尾静脉以精确的30秒间隔抽取血样用于测定葡萄糖，以便于给予葡萄糖后20、40和60分钟对每个动物收集血液。
表2.在OGTT中的降糖作用
如表2中所示，当一次性口服给予正常血糖C57Bl/6小鼠50％的葡萄糖()时，给药后8或18小时，使得血糖波动降低。实施例1也证实，在OGTTs期间，曲线下基线调整的血糖面积(AUC)降低。此外，实施例1显示OGTTs期间血糖的平均最大浓度(Cmax)降低，而血糖达到最大浓度的平均时间(Tmax)增加。

Claims (10)

1.下式化合物或其药学上可接受的盐：
2.权利要求1的化合物，该化合物为：
3.在患者中治疗糖尿病的方法，该方法包括给予需要此类治疗的患者有效量的权利要求1或权利要求2的化合物或其药学上可接受的盐。
4.在患者中治疗1型糖尿病的方法，该方法包括给予需要此类治疗的患者有效量的权利要求1或权利要求2的化合物或其药学上可接受的盐。
5.在患者中治疗2型糖尿病的方法，该方法包括给予需要此类治疗的患者有效量的权利要求1或权利要求2的化合物或其药学上可接受的盐。
6.权利要求1或权利要求2的化合物或其盐，用于治疗。
7.权利要求1或权利要求2的化合物或其盐，用于治疗糖尿病。
8.权利要求7的化合物或其盐，其中所述糖尿病为1型糖尿病。
9.权利要求7的化合物或其盐，其中所述糖尿病为2型糖尿病。
10.药用组合物，该药用组合物包含权利要求1或权利要求2的化合物或其盐以及一或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2019154388A1 (zh) * 2018-02-08 2019-08-15 亚宝药业集团股份有限公司 吡喃糖取代杂环化合物的盐及其制备方法和用途
WO2024055932A1 (zh) * 2022-09-13 2024-03-21 亚宝药业集团股份有限公司 氮杂环化合物、其药物组合物和用于预防和/或治疗疾病的用途

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1688596A (zh) * 2002-08-08 2005-10-26 橘生药品工业株式会社 吡唑衍生物、含该衍生物的医药组合物、其医药用途及用于制备的中间体
CN1688597A (zh) * 2002-08-23 2005-10-26 橘生药品工业株式会社 吡唑衍生物、含该衍生物的医药组合物、其医药用途及用于制备的中间体
US20080139484A1 (en) * 2004-09-29 2008-06-12 Kissei Pharmaceutical Co., Ltd. 1(Beta-D-Glycopyranosyl)-3-Substituted Nitrogenous Heterocyclic Compound, Medicinal Composition Containing the Same, and Medicinal Use Thereof
CN101501053A (zh) * 2006-07-27 2009-08-05 田边三菱制药株式会社 1-(-d-吡喃葡萄糖基)-3-(4-环丙基苯基甲基)-4-卤代吲哚衍生物及其作为sglt抑制剂的用途

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7750145B2 (en) 2004-11-18 2010-07-06 Kissei Pharmaceutical Co., Ltd. 1-substituted-3-β-D-glucopyranosylated nitrogenous hetero-cyclic compounds and medicines containing the same
UA113086C2 (xx) 2012-05-10 2016-12-12 Піразольні сполуки як інгібітори sglt1
TW201425326A (zh) * 2012-10-05 2014-07-01 Lilly Co Eli 新穎脲化合物

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1688596A (zh) * 2002-08-08 2005-10-26 橘生药品工业株式会社 吡唑衍生物、含该衍生物的医药组合物、其医药用途及用于制备的中间体
CN1688597A (zh) * 2002-08-23 2005-10-26 橘生药品工业株式会社 吡唑衍生物、含该衍生物的医药组合物、其医药用途及用于制备的中间体
US20080139484A1 (en) * 2004-09-29 2008-06-12 Kissei Pharmaceutical Co., Ltd. 1(Beta-D-Glycopyranosyl)-3-Substituted Nitrogenous Heterocyclic Compound, Medicinal Composition Containing the Same, and Medicinal Use Thereof
CN101501053A (zh) * 2006-07-27 2009-08-05 田边三菱制药株式会社 1-(-d-吡喃葡萄糖基)-3-(4-环丙基苯基甲基)-4-卤代吲哚衍生物及其作为sglt抑制剂的用途

Cited By (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2019154388A1 (zh) * 2018-02-08 2019-08-15 亚宝药业集团股份有限公司 吡喃糖取代杂环化合物的盐及其制备方法和用途
CN110128493A (zh) * 2018-02-08 2019-08-16 亚宝药业集团股份有限公司 吡喃糖取代杂环化合物的盐及其制备方法和用途
TWI711454B (zh) * 2018-02-08 2020-12-01 大陸商亞寶藥業集團股份有限公司 吡喃糖取代雜環化合物的鹽及其製備方法和用途
CN110128493B (zh) * 2018-02-08 2021-01-12 亚宝药业集团股份有限公司 吡喃糖取代杂环化合物的盐及其制备方法和用途
JP2021512851A (ja) * 2018-02-08 2021-05-20 亜宝薬業集団股▲フン▼有限公司Ｙａｂａｏ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｇｒｏｕｐ Ｃｏ．，Ｌｔｄ． ピラノース置換複素環式化合物の塩、その調製方法および用途
US11155571B2 (en) 2018-02-08 2021-10-26 Yabao Pharmaceutical Group Co., Ltd. Salt of pyranose-substituted heterocyclic compound, preparation method therefor and use thereof
JP7359769B2 (ja) 2018-02-08 2023-10-11 亜宝薬業集団股▲フン▼有限公司 ピラノース置換複素環式化合物の塩、その調製方法および用途
WO2024055932A1 (zh) * 2022-09-13 2024-03-21 亚宝药业集团股份有限公司 氮杂环化合物、其药物组合物和用于预防和/或治疗疾病的用途

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