CN110041378B

CN110041378B - 一种苯并噁唑酮糖苷及其制备工艺与应用

Info

Publication number: CN110041378B
Application number: CN201910443772.5A
Authority: CN
Inventors: 沈阳; 周寅飞; 李浩天
Original assignee: Yangzhou Polytechnic Institute
Current assignee: Yangzhou Polytechnic Institute
Priority date: 2019-05-25
Filing date: 2019-05-25
Publication date: 2021-04-09
Anticipated expiration: 2039-05-25
Also published as: CN110041378A

Abstract

本发明涉及一种苯并噁唑酮糖苷及其制备工艺与应用，所述制备工艺包括如下步骤：

Description

一种苯并噁唑酮糖苷及其制备工艺与应用

技术领域

本发明属于药物合成领域，具体涉及一种苯并噁唑酮糖苷及其制备工艺与应用。

背景技术

随着人们生活质量、饮食条件的不断提高，2型糖尿病成为影响人类健康的主要疾病之一，其是由多种发病机制共同作用导致的，其中针对钠-葡萄糖协同转运蛋白2(SGLT2)的抑制剂，成为近年的研究热点。SGLT2抑制剂主要作用与肾脏近曲小管的SGLT2受体，与受体结合后，抑制肾小管内葡萄糖重吸收，增加肾脏尿糖排泄从而达到降糖效果。Dapagliflozin是报道的第一个C-芳基糖苷类SGLT2抑制剂，具有很强的SGLT2抑制活性(IC₅₀约为1.1nmol/L)，先后在欧洲、美国、中国上市用于治疗2型糖尿病。本发明提供一种N-苷——苯并噁唑酮糖苷其具有很强的体外抑制SGLT2活性。

发明内容

本发明提供一种式I结构的苯并噁唑酮糖苷或其药学上可接受的盐，其特征在于I结构如下：

本发明的另一实施方案提供上述式I结构的苯并噁唑酮糖苷的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)化合物1与羰基二咪唑反应得到化合物2；

(2)化合物2与化合物3反应得到化合物4；

(3)化合物4脱除乙酰基保护基得到式I结构的苯并噁唑酮糖苷。

本发明的另一实施方案提供一种式I结构的苯并噁唑酮糖苷的制备方法，其特征在于具体包括实施例1-3中记载的步骤。

本发明的另一实施方案提供一种中间体，其特征在于所述中间体具有化合物4所示的结构：

本发明的另一实施方案提供上述式I结构的苯并噁唑酮糖苷或其药学上可接受的盐在制备SGLT2抑制剂中的应用。

本发明的另一实施方案提供一种药物组合物，其特征在于所述药物组合物以上述式I结构的苯并噁唑酮糖苷或其药学上可接受的盐作为有效成分。该药物组合物还可包括其他SGLT2抑制剂或对2型糖尿病具有预防和/或治疗作用的药物。该药物组合物还可包括药学上可接受的辅料。其剂型可以为固体制剂或液体制剂。

具体实施方式

为了便于对本发明的进一步理解，下面提供的实施例对其做了更详细的说明。但是这些实施例仅供更好的理解发明而并非用来限定本发明的范围或实施原则，本发明的实施方式不限于以下内容。

实施例1

将化合物1(2mmol)溶于THF(5mL)中，加入羰基二咪唑(2.5mmol)，室温下搅拌反应4小时后，将反应液倒入冰水中搅拌5min后过滤，滤饼用水、乙醇洗涤，真空干燥得微红色固体(346mg，收率约88.6％)，即化合物2，其结构确证数据：¹H NMR(CDCl₃,400MHz),δ:11.40(br s,1H,NH),7.14(s,1H,Ph-H),6.78(s,1H,Ph-H),3.78(s,3H,OCH₃ ),3.76(s,3H,OCH₃ ).¹³C NMR(CDCl₃,100MHz),δ:155.1,142.9,140.5,124.9,99.2,98.8,56.8,56.1.ESI-MS(m/z)196.06[M+H]⁺.

实施例2

将化合物2(1mmol)、BSA(1.0mmol，N,O-双(三甲基硅基)乙酰胺)溶于乙腈中，氮气保护下，加入

MS(分子筛)加热回流反应1小时后，冷却至室温，加入TMSOTf(2.0mmol，三氟甲磺酸三甲基硅酯)和化合物3(1.0mmol，全乙酰化葡萄糖α/β)，室温下反应12小时后，过滤除去分子筛，滤液用二氯甲烷萃取，依次用饱和碳酸氢钠、氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩后，经硅胶柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝1/15-1/8)得化合物4(359mg，收率约为68.3％，β构型)，另外得到少量α构型产物。化合物4的结构确证数据：¹H NMR(CDCl₃,400MHz),δ:7.15(s,1H,Ph-H),6.80(s,1H,Ph-H),5.83(t,1H,J＝9.4Hz,H-3′),5.31(t,1H,J＝9.4Hz,H-2′),5.22(d,1H,J＝9.4Hz,H-1′),5.20(t,1H,J＝9.4Hz,H-4′),4.22-4.20(m,2H,H-6′),3.86-3.84(m,1H,H-5′),3.80(s,3H,OCH₃ ),3.77(s,3H,OCH₃ ),2.09,2.06,2.04,2.01(s×4,12H,-OAc×4).ESI-MS(m/z)526.16[M+H]⁺.

实施例3

取化合物4(200mg)溶于甲醇(6mL)中，加入甲醇钠，调pH至9.0-10.0，室温下搅拌反应5小时后，加入阳离子交换树脂搅拌至pH7.0，过滤，滤液浓缩即得式I化合物(129mg，收率约为94.8％)。式I化合物的结构确证数据：¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz),δ:7.18(s,1H,Ph-H),6.83(s,1H,Ph-H),5.45(d,1H,J＝5.0Hz,2′-OH),5.18(d,1H,J＝4.1Hz,3′-OH),5.12(d,1H,J＝5.3Hz,4′-OH),5.09(d,1H,J＝9.2Hz,H-1′),4.61(t,1H,J＝5.3Hz,6′-OH),3.82(s,3H,OCH₃ ),3.79-3.77(m,1H,H-2′),3.76(s,3H,OCH₃ ),3.74-3.72(m,1H,H-6′),3.49-3.47(m,1H,H-6′),3.40-3.38(m,1H,H-5′),3.35-3.33(m,1H,H-3′),3.28-3.26(m,1H,H-4′).ESI-MS(m/z)358.11[M+H]⁺.

实施例4体外生物活性评价

采用能稳定表达hSGLT2蛋白的CHO细胞为载体和[¹⁴C]-AMG为底物评价本发明式I化合物的体外抑制SGLT2的活性。

将式I化合物用二甲基亚砜(DMSO)溶解,起始浓度为200μmol/L，4倍等比稀释，10个浓度梯度，待用。在96孔板上依次加入5μL/孔化合物溶液和45μL/孔含2.5μCi/mL[¹⁴C]-AMG的缓冲液(包含有120mmol/L NaCl、4.7mmol/L KCl、1.2mmol/L MgCl₂、2.2mmol/LCaCl₂、10mmol/L HEPES、1mmol/L Tris，pH7.4)，得到不同浓度的式I化合物-[¹⁴C]-AMG缓冲液，待用。采用体积分数为10％胎牛血清的RPMI1640培养基，待CHO细胞长到80％满的时候，加入胰酶-EDTA溶液，待细胞脱壁后吹成单细胞悬液，调整细胞密度为3×10⁸个/L，按100μL/孔的量接种到96孔的细胞培养板中，并在37℃、体积分数为5％CO₂培养箱中培养12h。用150μL/孔的KRH-Na⁺裂解液洗细胞一次，吸干，加入50μL/孔对应浓度的式I化合物，振荡混合后，培养箱中培养1h，而后立即在每个孔中加入150μL/孔冰冷的洗涤缓冲液[包含有120mmol/L NaCl，4.7mmol/L KCl，1.2mmol/L MgCl₂，2.2mmol/L CaCl₂，10mmol/L HEPES，0.5mmol/L phlorizin(pH＝7.4，含1mmol/L Tris)]以终止吸收试验，清洗3次。加入50μL/孔的Lysis缓冲液(100mmol/L NaOH)，600r/min振荡5min,加入150μL/孔的闪烁液Microsint40到所有孔中，600r/min振荡5min，置于MicroBeta Trilux仪器上测定放射活性，平行测定3次，求取均值，采用x±s表示，用SPSS19.0软件计算式I化合物抑制SGLT2的IC₅₀。

结果显示，式I化合物的IC₅₀值为1.56±0.11μmol/L。

Claims

1.一种式I结构的苯并噁唑酮糖苷或其药学上可接受的盐，其特征在于式I结构如下：

2.权利要求1所述的式I结构的苯并噁唑酮糖苷的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)化合物1与羰基二咪唑反应得到化合物2；

(2)化合物2与化合物3反应得到化合物4；

3.一种中间体，其特征在于所述中间体具有化合物4所示的结构：

4.权利要求1所述的式I结构的苯并噁唑酮糖苷或其药学上可接受的盐在制备SGLT2抑制剂中的应用。

5.一种药物组合物，其特征在于所述药物组合物以权利要求1所述的式I结构的苯并噁唑酮糖苷或其药学上可接受的盐作为有效成分。

6.权利要求5所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物还包括其他SGLT2抑制剂。

7.权利要求5-6任一项所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物还包括药学上可接受的辅料。