CN105561402A - 一种内镜用黏膜下注入材料的配方及制备工艺 - Google Patents
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Abstract
本发明属高分子材料与医疗器械领域,具体涉及一种内镜用黏膜下注入的透明质酸钠溶液的配方及其制备工艺。本发明的透明质酸钠溶液的配方由透明质酸钠、氯化钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、亚甲蓝和注射用水组成。本发明的透明质酸钠溶液制备工艺:①在配料罐内先搅拌溶解氯化钠,再加入透明质酸钠,升温至40℃,搅拌;再依次加入磷酸氢二钠和磷酸二氢钠,继续搅拌;②测料液pH值;调料液体的pH值达到7.0~8.0;③加亚甲蓝,搅拌,补水,定容;④微孔滤膜过滤;⑤灌封于安瓿或玻璃瓶内,121℃蒸汽灭菌15分钟,即得。本发明的透明质酸钠溶液,用于内镜黏膜下剥离术(ESD),注入消化道黏膜下,可充分隆起病变,形成黏膜下液垫,使得黏膜下层与肌层有效分离,便于电切操作的同时,还可减少出血及穿孔等并发症的发生。
Description
技术领域
本发明属高分子材料与医疗器械领域,具体涉及一种内镜用黏膜下注入的透明质酸钠溶液的配方及其制备工艺。
背景技术
目前,内镜黏膜下剥离术(endoscopicsubmucosaldiss-ection,ESD)是一项广为接受的切除早期消化道肿瘤的标准微创治疗技术。使用有效的黏膜下注入材料,可充分隆起病变,形成黏膜下液垫,使得黏膜下层与肌层有效分离,便于手术操作的同时还可减少出血及穿孔等并发症的发生。故黏膜下注入材料作为确保ESD安全性的决定性因素已成为内镜黏膜下剥离术(ESD)的重点。
基于目前的文献报道,常用的内镜用黏膜下注入材料有:0.9%生理盐水、3.75%生理盐水、10%葡萄糖溶液、20%葡萄糖溶液、50%葡萄糖溶液、10%甘油、5%果糖、透明质酸钠、1/1000肾上腺素、美蓝、靛胭脂等,在目前的文献报道中,只是在讨论或综述部分,提到过ESD中有用透明质酸钠的,但未见内镜用黏膜下注入透明质酸钠的应用方面的单独报道,也未见黏膜下注入透明质酸钠溶液的配方及其制备方面的报道。
透明质酸钠是由(1-β-4)D葡糖醛酸(1-β-3)N-乙酰基-D氨基葡糖的双糖重复单位组成的粘多糖,其重均分子量从40万到200万不等,不同的重均分子量的透明质酸钠用于不同的领域,如重均分子量Mw应不小于400000的用于滴眼剂;重均分子量介于Mw600000~1500000的用于骨科注射;重均分子量介于Mw1000000~2000000的用于眼科注射。但未见用内镜用黏膜下注入透明质酸钠的应为多少重均分子量的报道。
由于存在不同重均分子量的透明质酸钠,所以,不能将透明质酸钠直接用于黏膜下注入,因此,也影响了透明质酸钠在内镜黏膜下剥离术中的应用。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足与缺陷,提供一种透明质酸钠溶液的配方及其制备方法,按此配方制备的透明质酸钠溶液,可直接作为ESD中内镜用黏膜下注入的材料。
具体的,本发明的透明质酸钠溶液,主要成分为透明质酸钠,其在配方中的重量百分比含量介于0.1wt%~1.0wt%,优选0.4wt%。辅料成分:等渗调节剂包括氯化钠、葡萄糖和氯化钾等,优选氯化钠,其在配方中的重量百分比含量介于0.4wt%~0.9wt%,优选0.42wt%~0.48wt%wt%;缓冲剂和pH调节剂优选磷酸氢二钠和磷酸二氢钠,其中,磷酸氢二钠在配方中的重量百分比含量介于0.08wt%~0.10wt,磷酸二氢钠在配方中的重量百分比含量介于0.016wt%~0.020wt;着色指示剂选亚甲蓝和靛胭脂,优选亚甲蓝,其在配方中的重量百分比含量介于0.001wt%~0.0005wt%;注射用水,应符合中国药典标准要求。
本发明的透明质酸钠溶液所用的透明质酸钠,其重均分子量介于Mw500000~1200000。
本发明的透明质酸钠溶液,在室温下为无色透明略带粘稠的液体。
本发明的透明质酸钠溶液,为经121℃蒸汽灭菌15分钟的无菌液体。
本发明的透明质酸钠溶液,其pH值应介于6.0~9.0,优选7.0~8.0。
本发明的透明质酸钠溶液,渗透压摩尔浓度应介于280~320mOsmol/kg,为等渗溶液
更具体的,本发明的透明质酸钠溶液,其配方及制备方法如下:
配方:
制备工艺
(1)按配方设计规定的配比称取透明质酸钠原料、辅料,备用;
(2)在配料罐内加入规定量的注射用水,加入配方量的氯化钠,搅拌,使其溶解;加入透明质酸钠,将配料罐内温度升至40℃,继续搅拌30分钟;再依次加入配方量80%的磷酸氢二钠(无水)和磷酸二氢钠(无水),继续搅拌10分钟;
(3)取配料罐内液体,测pH值;如果液体的pH值未达到7.0~8.0,用剩余的磷酸氢二钠(无水)和磷酸二氢钠(无水)调液体的pH值达到7.0~8.0;
(4)加配方量的亚甲蓝,搅拌5分钟,补加注射用水至全量,定容;
(5)将液体经0.45μm微孔滤膜过滤;
(6)测液体pH值和澄明度,合格后灌封于安瓿或玻璃瓶内,121℃蒸汽灭菌15分钟,即得。
依上述工艺制备的透明质酸钠溶液,经按中国药典2015年版四部通则0102注射液项下内容检验,澄清度、可见异物、不溶性微粒、重金属、无菌、细菌内毒素等,均符合规定。证明了所述制备方法工艺设计合理,可有效的控制产品质量,使透明质酸钠溶液大批量工业化生产成为可能。
与现有技术相比,本发明的透明质酸钠溶液的有益效果如下:
本发明的透明质酸钠溶液,选择了特定重均分子量的透明质酸钠原料,制备的溶液具有良好的流动性和可注射性。
本发明的透明质酸钠溶液,采用终产品湿热灭菌达到无菌,可放心使用:单剂量包装,一次性使用,避免了二次污染。
不同于单独使用透明质酸钠,本发明的透明质酸钠溶液,为与血浆渗透压相等的等渗溶液,在被注入到消化道黏膜下后,黏膜中的细胞既不肿胀,也不皱缩,维持其原来形状不变,不会影响注入后隆起的黏膜的性状。
不同于单独使用透明质酸钠,本发明的透明质酸钠溶液的pH值为7.0~8.0,与人体血液中的pH值基本一致,在被注入到消化道黏膜下后,不会影响人体的正常代谢活动。
不同于单独使用透明质酸钠,本发明的透明质酸钠溶液中添加了着色指示剂,使溶液注入到消化道黏膜下后,手术操作人员可直接观察着色后的隆起的黏膜,一方面可掌握和调整注入的溶液量,另一方面,可准确的辨别病灶,给予切除。
具体实施方式
下面通过具体实施例进一步描述本发明,但不限于这些实施例。
实施例1
配方:
制备过程:
取注射用水适量,注入带搅拌器的反应容器中,开启搅拌,缓缓加入氯化钠,升温至30℃左右,搅拌至全部溶解;加入透明质酸钠,升温至40℃左右,搅拌20分钟;加入磷酸氢二钠(无水)和磷酸二氢钠(无水),搅拌10分钟;取料液,测pH值;加入适量磷酸氢二钠(无水)和磷酸二氢钠(无水),调pH值达到7.5左右,加亚甲蓝,搅拌5分钟,补加注射用水至全量,定容。保温20分钟。将液体经0.45μm微孔滤膜过滤至灌装液储备罐。取液体测pH值、检查澄明度、可见异物、不溶性微粒等。检验合格后,灌封于安瓿或玻璃瓶内,121℃蒸汽灭菌15分钟,即得。该批试验样品批号为20151001。
实施例2
配方:
制备过程:
取注射用水适量,注入带搅拌器的反应容器中,开启搅拌,缓缓加入氯化钠,升温至30℃左右,搅拌至全部溶解;加入透明质酸钠,升温至40℃左右,搅拌20分钟;加入磷酸氢二钠(无水)和磷酸二氢钠(无水),搅拌10分钟;取料液,测pH值;加入适量磷酸氢二钠(无水)和磷酸二氢钠(无水),调pH值达到7.5左右,加亚甲蓝,搅拌5分钟,补加注射用水至全量,定容。保温20分钟。将液体经0.45μm微孔滤膜过滤至灌装液储备罐。取液体测pH值、检查澄明度、可见异物、不溶性微粒等。检验合格后,灌封于安瓿或玻璃瓶内,121℃蒸汽灭菌15分钟,即得。该批试验样品批号为20151002。
实施例3
配方:
制备过程:
取注射用水适量,注入带搅拌器的反应容器中,开启搅拌,缓缓加入氯化钠,升温至30℃左右,搅拌至全部溶解;加入透明质酸钠,升温至40℃左右,搅拌20分钟;加入磷酸氢二钠(无水)和磷酸二氢钠(无水),搅拌10分钟;取料液,测pH值;加入适量磷酸氢二钠(无水)和磷酸二氢钠(无水),调pH值达到7.5左右,加亚甲蓝,搅拌5分钟,补加注射用水至全量,定容。保温20分钟。将液体经0.45μm微孔滤膜过滤至灌装液储备罐。取液体测pH值、检查澄明度、可见异物、不溶性微粒等。检验合格后,灌封于安瓿或玻璃瓶内,121℃蒸汽灭菌15分钟,即得。该批试验样品批号为20151003。
以下试验例进一步的证明了本发明的有益效果
透明质酸钠溶液在内镜黏膜下剥离术(ESD)的应用效果试验
目的:通过对中试放大试验制备的不同浓度的透明质酸钠溶液,在动物体内内镜黏膜下剥离术(ESD)的应用,筛选可供临床使用的透明质酸钠溶液。
1.材料与仪器
1.1试验材料
透明质酸钠溶液
来源:自制
批号:201510012015100220151003
生理氯化钠溶液
来源:自制
1.2受试动物
新西兰大白兔,雌雄各半,体重2.5kg±0.2kg。
来源:重庆市中药研究院实验动物研究所提供
重庆市中药研究院实验动物生产许可证:SCXK(渝)20120003号
西南大学药学院实验动物使用许可证:SYXK(渝)2009-0002
1.3试验仪器
实验动物称量用电子秤
电子天平感量0.01g
游标卡尺
一次性注射器
压力计组件
1.4试验条件
实验大白兔雌雄分笼,全价颗粒饲料喂养,自由饮水,室温22℃~26℃,实验室相对湿度:55~70%。
2.方法
2.1透明质酸钠溶液的制备
在具备中试放大试验设备的实验室,按拟定的透明质酸钠溶液的制备工艺,制备质量浓度为0.2wt%(批号:20151001)、0.4wt%(批号:20151002)和0.8wt%(批号:20151003)的透明质酸钠溶液,常温下保存,备用。
2.2实验动物分组
20只新西兰大白兔随机分为4组(n=10),分别为低浓度、中浓度、高浓度实验组和生理氯化钠溶液对照组。
每次实验每组随机取1只同时进行以下实验,重复进行5次。禁食24h后称重,以5%水合氯醛(0.7ml/100g)行腹腔内注射麻醉,取仰卧位,固定四肢于无菌实验台上;切开腹部暴露并切下胃组织,然后用虹膜剪沿胃大弯剪开胃组织,打开胃壁暴露胃黏膜并去除残留物;再在胃窦或胃体处分别将胃黏膜组织剪成约10cm×10cm大小,固定在软木板上。
2.3黏膜隆起高度变化的观察
用游标卡尺分别测量各个原始胃壁厚度并记录。用5ml注射器分别抽取不同质量浓度的透明质酸钠溶液(0.2wt%、0.4wt%、0.8wt%)和生理氯化钠溶液4ml,注射器针尖以近似45°角斜向插入胃黏膜组织,感觉有落空感后注射。注射完毕后,于注射后0、5、10、30min观察各个黏膜隆起情况并用游标卡尺分别测量黏膜隆起高度并拍照。利用公式(黏膜增加的厚度=注射后各时间段黏膜高度一注射前胃壁厚度)记录数据。
2.4注射压力测量
将注射针连接注射器/压力表组件,安装自动打气手柄。用注射器分别抽取不同质量浓度的透明质酸钠溶液(0.2wt%、0.4wt%、0.8wt%)和生理氯化钠溶液4ml,向胃黏膜组织分别注射,2分钟内注射完毕,观察并记录压力表读数。
2.5统计学方法
采用SPSS19.0统计学软件进行数据处理,实验结果均采用均数±标准差表示。
3结果
不同质量浓度的透明质酸钠溶液(0.2wt%、0.4wt%、0.8wt%)和生理氯化钠溶液黏膜下注射后黏膜隆起的形态及高度见表1:
表1黏膜隆起高度变化
试验结果表明:在粘膜下注入不同质量浓度的透明质酸钠溶液,0.2wt%的透明质酸钠溶液与0.4wt%和0.8wt%的透明质酸钠溶液,维持黏膜高度有显著差异(p<0.05)。0.4wt%和0.8wt%的透明质酸钠溶液,在5个时间点上的黏膜隆起高度和维持黏膜高度基本一致,与生理氯化钠溶液比较,在5个时间点上,均有显著差异(p<0.05)。透明质酸钠作为黏膜下注射液在维持黏膜隆起高度和持续时间上明显优于生理氯化钠。
Claims (5)
1.一种内镜用黏膜下注入材料,即透明质酸钠溶液,其特征在于其配方的组成含有以下成分:透明质酸钠、氯化钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、亚甲蓝和注射用水。
2.按照权利要求1所述的透明质酸钠溶液,其特征在于所述配方中的透明质酸钠在配方中的重量百分比含量介于0.1wt%~1.0wt%,优选0.4wt%。
3.按照权利要求1所述的透明质酸钠溶液,其特征在于所述配方中的透明质酸钠,其重均分子量为Mw500000~1200000。
4.按照权利要求1所述的透明质酸钠溶液,其特征在于所述配方中的氯化钠在配方中的重量百分比含量介于0.4wt%~0.9wt%,优选0.42wt%~0.48wt%wt%;磷酸氢二钠在配方中的重量百分比含量介于0.08wt%~0.10wt,磷酸二氢钠在配方中的重量百分比含量介于0.016wt%~0.020wt;亚甲蓝在配方中的重量百分比含量介于0.001wt%~0.0005wt%;注射用水,应符合中国药典标准要求。
5.一种制备权利要求1所述透明质酸钠溶液的制备工艺,其特征在于:①在配料罐内注入规定量的注射用水,加入配方量的氯化钠,搅拌,使其溶解;加入透明质酸钠,将配料罐内温度升至40℃,继续搅拌30分钟;再依次加入配方量80%的磷酸氢二钠(无水)和磷酸二氢钠(无水),继续搅拌10分钟;②取配料罐内液体,测pH值;如果液体的pH值未达到7.0~8.0,用剩余的磷酸氢二钠(无水)和磷酸二氢钠(无水)调液体的pH值达到7.0~8.0;③加配方量的亚甲蓝,搅拌5分钟,补加注射用水至全量,定容;④将液体经0.45μm微孔滤膜过滤;⑤灌封于安瓿或玻璃瓶内,121℃蒸汽灭菌15分钟。
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