CN105534898A

CN105534898A - 肉苁蓉苯乙醇苷纳米乳及其制备方法

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Publication number: CN105534898A
Application number: CN201511026729.7A
Authority: CN
Inventors: 杨建华; 胡君萍; 居博伟; 许欢欢; 吴姗姗
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2015-12-31
Filing date: 2015-12-31
Publication date: 2016-05-04

Abstract

本发明涉及一种肉苁蓉苯乙醇苷纳米乳及其制备方法，原料按重量份数计包括肉苁蓉提取物苯乙醇苷0.5份至20份、油相1份至15份、表面活性剂2份至10份、助表面活性剂1份至8份，防腐剂0.1份至1份，余量以去离子水补足。制备的纳米乳为水包油型，平均粒径为29.1nm，质地均匀、水溶性佳、澄清透明、无刺激性、稳定性良好；且制备工艺简单易行、制备高效快速，易于产业化。本发明以肉苁蓉苯乙醇苷为主要功效成分，首次制备具有抗色素沉着、美白、防晒、抗衰老、保湿补水功效的纳米乳制剂及化妆品。

Description

肉苁蓉苯乙醇苷纳米乳及其制备方法

技术领域

本发明属于医学和化妆品制剂技术领域，具体涉及一种肉苁蓉苯乙醇苷纳米乳及其制备方法。

背景技术

近年来纳米乳作为一种新型载体制剂，其在医药、化妆品制剂领域的应用前景受到人们的广泛关注。纳米乳以极微粒著称，包括水包油（O/W）和油包水（W/O）两类，它是由油相、水相、乳化剂和助乳化剂组成的乳滴粒径约为10-100nm之间的透明或半透明液体，其乳滴分散在另一种液体中形成胶体分散系统，具有一定的乳光，其乳滴大多为球形，且大小比较均匀，流动性良好，经加热、高压灭菌或离心分离也不会使之分层，属于热力学稳定系统。

纳米乳作为乳状液的一种特殊形式，和普通乳状液相比有下列优势：（1）粒径小：纳米乳液粒径在100nm以下，容易透过皮肤，比一般乳状液具有更好的扩散性和皮肤渗透性，产品使用效果显著提高。（2）促进吸收：对难溶性药物的增溶作用明显，可明显提高药物在制剂中的含量，增大药物的浓度梯度，使其透皮扩散速率增加，易于吸收。（3）热力学稳定性高：制备时操作简单，不分相、不沉淀，贮存时稳定性好。（4）透光性好，使得其感观品质大大提高。（5)）防腐性能提升：因为分散相液体比较小，能有效防止细菌的侵入，同时增加一些有效成分的溶解度。

肉苁蓉为传统名贵中药，药用部位为其干燥带鳞叶的肉质茎，具补肾阳、益精血、润肠通便、延缓衰老等功效。新疆肉苁蓉资源丰富，南北疆均有分布，为肉苁蓉药材的主要基源产地。肉苁蓉苯乙醇苷是从肉苁蓉中提取分离得到的一类化合物，是肉苁蓉属植物的主要有效部位。课题组前期研究表明肉苁蓉提取物苯乙醇总苷具有抗色素沉着、美白、防晒、抗衰老功效主要与以下因素有关：（1）发明专利申请201510576749.5中阐述了肉苁蓉属提取物苯乙醇总苷柔性纳米脂质体冻干粉及其制备方法，制备的冻干粉包封率较好、粒径较小、稳定性高，适宜后期制备纳米乳凝胶、脂质体凝胶等其他制剂。（2）发明专利200510126563.6中考察了肉苁蓉苯乙醇总苷提取物对皮肤黑素合成的主要限速酶—酪氨酸酶的活性调控作用，发现其具有明显的下调酪氨酸酶活性作用，可降低皮肤中黑色素颗粒含量（杨建华,等.华西药学杂志,2010,25(05):533-535)。（3）研究了肉苁蓉中主要的5种苯乙醇苷单体及纯化后的肉苁蓉苯乙醇总苷对原代培养的人皮黑色素细胞中黑素颗粒含量的影响，发现它们对皮肤黑素的合成均具有明显的抑制作用。（4）扫描了肉苁蓉苯乙醇苷紫外光谱图，发现其能有效吸收UVA区和UVB区的紫外辐照（杨建华,等.华西药学杂志,2011,26(3):271-273）。（5）考察了肉苁蓉苯乙醇苷抗氧化活性，结果显示它们均具有较强的清除自由基活性（杨建华,等.中药材,2009,7(32):1067-1069）。以上研究，为肉苁蓉提取物苯乙醇苷在化妆品、制剂方面的应用提供了参考依据。

本发明首次将肉苁蓉苯乙醇苷制成纳米乳，提高了肉苁蓉提取物苯乙醇苷的溶解度，促进了其透皮吸收，同时延长了肉苁蓉提取物苯乙醇苷的作用时间，并且根据本发明所述的肉苁蓉乙醇苷纳米乳具有粒径小、稳定性好、制备工艺简单易行等特点，为后期开发以肉苁蓉提取物苯乙醇苷为主要功效成分的化妆品、制剂等相关产品提供技术支撑。

发明内容

本发明提供了一种肉苁蓉苯乙醇苷纳米乳及其制备方法，首次公开了将肉苁蓉提取物苯乙醇苷制成纳米乳，本发明所述的肉苁蓉提取物苯乙醇苷纳米乳具有粒径较小、稳定性好、制备工艺简单易行等特点。

本发明的技术方案是通过以下措施来实现的：肉苁蓉提取物苯乙醇苷0.5份至20份、油相1份至15份、表面活性剂2份至10份、助表面活性剂1份至8份，防腐剂0.1份至1份，余量以去离子水补足。

本发明制备方法为：将处方量的表面活性剂、助表面活性剂混合均匀，再加入处方量的油相，在一定的温度和搅拌速度下搅拌均匀后制成空白纳米乳，将肉苁蓉苯乙醇苷溶于空白纳米乳中，溶解完全，将处方量的水相缓慢滴加，同时以一定的温度和速度搅拌，滴加完全后再保持转速搅拌一定的时间，即得载药纳米乳。

下面是对上述发明技术方案的进一步优化或/和改进：

上述油相为肉豆蔻酸异丙酯、油酸乙酯、液体石蜡、维生素E油、霍霍巴油、三醋酸甘油酯、乙酸乙酯、杏仁油、小麦胚芽油、蓖麻油、橄榄油、大豆油、花生油、棕榈油、椰子油、山茶油、红花油、玉米油、芝麻油、棕榈酸异丙酯、白矿油、鳄梨油、挥发性硅油、鲸蜡烷的一种或一种以上。

上述表面活性剂为Tween-80、Tween-60、Tween-20、氢化蓖麻油聚氧乙烯醚（RH-40）、聚氧乙烯蓖麻油（CremophorEL）、Span-80、月桂酸聚氧乙烯醚、异硬脂酸的一种或一种以上。

上述助表面活性剂为无水乙醇、乙二醇、1,2-丙二醇、丙三醇、PEG200、PEG400、PEG600、丙二醇、异丙醇、正丁醇中的一种或一种以上。

上述防腐剂为维生素C、维生素E、羟苯乙酯、尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、尼泊金丙酯、双咪唑烷基脲、氯甲酚、山梨酸、山梨酸钾、三氯叔丁醇、亚硫酸盐、半胱胺酸、二叔丁基羟基甲苯的一种或一种以上。

目前制备纳米乳的方法主要有高压均质机匀浆法、超声乳化法、滴定法、剪切搅拌法。剪切搅拌法可以很好地控制粒径，而且在处方组成上选择范围较广。高压均质机匀浆法在工业生产中应用最为广泛，超声乳化法在降低粒径方面非常有效，通常采用探头超声仪，但该方法只适合制备少量样品，而且在使用过程中探头发热会产生铁屑进入药液，所以应该注意探头质量对产品的影响。另外，纳米乳的分散度还受超声频率和超声时间的影响，聚合单体的疏水性越强，所需超声时间越长。而滴定法由于其操作简单易行，制备过程中耗能低无污染，应用前景越来越广泛。

本发明制得的纳米乳质地均匀，粒径在10-100nm范围内，细腻光滑、清澈透明、水溶性佳、无刺激性、稳定性良好。且制备工艺简单易行、条件温和、制备时间短、设备要求低，制备高效快速，易于产业化。加上外观为淡黄色，晶莹剔透、且微带乳光、胶而不粘、浓而不稠、油而不腻。

本发明的肉苁蓉苯乙醇苷纳米乳与现有技术相比，具有以下优点：

1.本发明中包含了肉苁蓉提取物苯乙醇苷，纯天然、安全、无副作用。

2.热力学稳定性高：在表面活性剂和助表面活性剂的共同作用下自然形成热力学稳定的分散体系，贮存时不分相、不沉淀，稳定性得到极大提高。

3.使用更加方便，可以根据其功能和用途生产成喷雾剂、涂抹剂及其他产品。

4.透皮功效良好，纳米乳乳滴粒径在10-100nm之间，可以透过表皮进入皮肤深层组织发挥功效，提高了药物的生物利用度。

5.传统的乳液化妆品由于需要使用多种原料，其油相和水相成分复杂，工艺流程繁琐，生产周期较长，而本产品配制成分精简、制备工艺简单、实际操作容易、制备高效快速、设备要求低、能耗少，既可节约能源和成本，又不污染环境，适合规模化生产。

附图说明

图1是本发明制备的肉苁蓉苯乙醇苷纳米乳透射电镜图。

具体实施方式

以下所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明做任何形式上的限制。故凡未脱离本发明技术方案的内容，依据本发明的技术实质对以下实施例所做的任何简单修改，等同变化与改型，均仍属于本发明权利要求保护的范围内。本发明请求保护的技术内容，已经全部记载在权利要求书中。

实施例1油相的选择

油相对于纳米乳来说，其作用在于油相分子与界面膜分子保持适当的联系，从而提高药物在油相中的溶解度、增大纳米乳形成区域，而且还应对人体皮肤无毒无刺激，促进药物的透皮吸收。本实验选择3种化妆品常用的油相：肉豆蔻酸异丙酯（IPM）、油酸（Oleioacid）、薄荷油（MentheOil）分别测定药物在油相中的溶解度，不仅在纳米乳中作为油相，还具有促进皮肤渗透的作用。

将过量的肉苁蓉总苷分别加入盛有2mL的各种油中，60℃水浴中涡旋搅拌以利于溶解，然后在37℃恒温水浴振荡仪中避光振摇48h，12000r·min，离心20min，取上清液，用甲醇稀释到适宜的倍数，紫外测定。结果可以看出，在IPM有较大的溶解度，而在油酸、薄荷油中的溶解度较小（见表1）。因此选择肉豆蔻酸异丙酯作为油相。

表1肉苁蓉苯乙醇总苷在不同油相中的溶解度

油相名称	溶解度（mg/L）
		肉豆蔻酸异丙酯	1.5
油酸	0.7
		薄荷油	0.25

实施例2表面活性剂与助表面活性剂的选择

由于纳米乳的形成需要使用大量的表面活性剂，安全性和刺激性问题不容忽视。因此，在选择表面活性剂的种类时，应尽量选择无毒、无刺激性、有良好生物相容性、形成的纳米乳区域大、对药物的溶解性能好，此外还需要具有较好的稳定性。

制备O/W型纳米乳的乳化剂的HLB值为8～18。采用吐温80（HLB15.0）和聚氧乙烯蓖麻油（CremophorEL）（HLB12～14）分别作为乳化剂，以常用的助乳化剂无水乙醇、1，2-丙二醇、甘油、PEG-400作为助表面活性剂，乳化剂与助乳化剂按照质量比为3：1混合作为混合乳化剂，IPM为油相，混合表面活性与IPM按照9:1、8:2、7:3、6:4、5:5、4:6、3:7、2:8、9:1（w/w）混匀，于室温下滴加水，以系统在由澄清变混浊、由混浊变澄清的临界点为判断标准，筛选合适的表面活性剂（注：“+”表示可以形成透明纳米乳；“一”表示浑浊，不能形成纳米乳)。结果表明：当IPM为油相，两种不同的表面活性剂与不同的助表面活性剂都能形成纳米乳体系，当表面活性剂为Tween-80时，所形成纳米乳黏度比较大，且放置一段时间会变浑浊，而EL所成的纳米乳澄清透明，且稳定性好。因此选择聚氧乙烯蓖麻油为表面活性剂，四种助表面活性剂都能与IPM和EL形成澄清透明的纳米乳（见表2）。

表2表面活性剂与助表面活性剂形成的不同纳米乳

实施例3体外透皮优选纳米乳载药量

取健康雄性小白鼠（20g左右），用剪刀仔细去除腹部皮肤上的毛，断颈处死，剥离腹部皮肤。将剥离下来的皮肤平铺于玻璃板上，角质层向下，用单背刀片小心剔除皮下脂肪和粘连物，然后用生理盐水反复冲洗干净，剪成适当的大小，并检查皮肤的完整性。每次实验前，检查鼠皮的完整性，不得有任何破损。

将皮肤固定在扩散池的上、下两室之间，角质层朝上，接受液为生理盐水（接受池体积为5mL），供给池加入待测纳米乳1ml，用保鲜膜覆盖池口。将装置置于（37±0.01）℃恒温水浴中，开动搅拌（200r/min），同时计时，分别于1、2、4、6、8、10、12、24h取样3mL，同时补加相同温度等体积新鲜接受液。取出的样品检测药物的含量，根据下面公式求累积渗透量。以Qn对时间t作图，并对曲线中的直线部分线求直线斜率dQn/dt，即稳态渗透率Js（μg·cm^-2·h^-1）（见表3）。

Qn：第n小时苯乙醇苷的累积渗透量

V₀：接收池体积（ML）

V:取样体积

Cn：第n小时接收池中苯乙醇苷的浓度

S：透皮面积

表3不同载药量纳米乳的体外经皮渗透试验统计结果

实施例4纳米乳的粒径分布及形态

1.形态的观察

用透射电镜观察所得纳米乳的微观形态，可见纳米乳呈圆形均一的球体（见图1）。

2.粒径的测定

取按最佳处方制备的纳米乳3ml，纳米乳外观澄清透明、可见明显乳光、具有一定的流动性，粒径分布在10～100nm之间，呈正态分布。

实施例5

肉苁蓉苯乙醇苷0.5份，肉豆蔻酸异丙酯1份，聚氧乙烯蓖麻油5份，1,2-丙二醇4份，羟苯乙酯0.1份，余量以去离子水补足。将聚氧乙烯蓖麻油、1,2-丙二醇混合均匀，再加入肉豆蔻酸异丙酯、羟苯乙酯，在一定的温度和搅拌速度下搅拌均匀后制成空白纳米乳，将肉苁蓉苯乙醇苷溶于空白纳米乳中，溶解完全，将去离子水缓慢滴加，同时以一定的温度和速度搅拌，滴加完全后再保持转速搅拌一定的时间，即得载药纳米乳。

实施例6

肉苁蓉苯乙醇苷5份，肉豆蔻酸异丙酯8份，聚氧乙烯蓖麻油8份，1,2-丙二醇6份，羟苯乙酯0.5份，余量以去离子水补足。将聚氧乙烯蓖麻油、1,2-丙二醇混合均匀，再加入肉豆蔻酸异丙酯、羟苯乙酯，在一定的温度和搅拌速度下搅拌均匀后制成空白纳米乳，将肉苁蓉苯乙醇苷溶于空白纳米乳中，溶解完全，将去离子水缓慢滴加，同时以一定的温度和速度搅拌，滴加完全后再保持转速搅拌一定的时间，即得载药纳米乳。

实施例7

肉苁蓉苯乙醇苷10份，肉豆蔻酸异丙酯6份，聚氧乙烯蓖麻油6份，1,2-丙二醇5份，羟苯乙酯0.2份，余量以去离子水补足。将聚氧乙烯蓖麻油、1,2-丙二醇混合均匀，再加入肉豆蔻酸异丙酯、羟苯乙酯，在一定的温度和搅拌速度下搅拌均匀后制成空白纳米乳，将肉苁蓉苯乙醇苷溶于空白纳米乳中，溶解完全，将去离子水缓慢滴加，同时以一定的温度和速度搅拌，滴加完全后再保持转速搅拌一定的时间，即得载药纳米乳。

实施例8

肉苁蓉苯乙醇苷15份，肉豆蔻酸异丙酯10份，聚氧乙烯蓖麻油9份，1,2-丙二醇7份，羟苯乙酯0.3份，余量以去离子水补足。将聚氧乙烯蓖麻油、1,2-丙二醇混合均匀，再加入肉豆蔻酸异丙酯、羟苯乙酯，在一定的温度和搅拌速度下搅拌均匀后制成空白纳米乳，将肉苁蓉苯乙醇苷溶于空白纳米乳中，溶解完全，将去离子水缓慢滴加，同时以一定的温度和速度搅拌，滴加完全后再保持转速搅拌一定的时间，即得载药纳米乳。

实施例9

肉苁蓉苯乙醇苷20份，肉豆蔻酸异丙酯15份，聚氧乙烯蓖麻油10份，1,2-丙二醇8份，羟苯乙酯1份，余量以去离子水补足。将聚氧乙烯蓖麻油、1,2-丙二醇混合均匀，再加入肉豆蔻酸异丙酯、羟苯乙酯，在一定的温度和搅拌速度下搅拌均匀后制成空白纳米乳，将肉苁蓉苯乙醇苷溶于空白纳米乳中，溶解完全，将去离子水缓慢滴加，同时以一定的温度和速度搅拌，滴加完全后再保持转速搅拌一定的时间，即得载药纳米乳。

Claims

1.一种肉苁蓉苯乙醇苷纳米乳及其制备方法，其特征在于原料按重量份数计包括肉苁蓉提取物苯乙醇苷0.5份至20份、油相1份至15份、表面活性剂2份至10份、助表面活性剂1份至8份，防腐剂0.1份至1份，余量以去离子水补足。

2.根据权利要求1所述的一种肉苁蓉苯乙醇苷纳米乳及其制备方法，其特征在于：制备方法主要为高压均质机匀浆法、超声乳化法、滴定法、剪切搅拌法的一种或一种以上。

3.根据权利要求1所述的一种肉苁蓉苯乙醇苷纳米乳及其制备方法，其特征在于：首次将肉苁蓉苯乙醇苷作为主要功效成分制备一种纳米乳。

4.根据权利要求1所述的一种肉苁蓉苯乙醇苷纳米乳及其制备方法，其特征在于：其中所述的肉苁蓉苯乙醇苷是从肉苁蓉属植物中提取分离得到的一类化学成分；肉苁蓉属植物为荒漠肉苁蓉、管花肉苁蓉和盐生肉苁蓉中的任意一种。

5.根据权利要求1所述的一种肉苁蓉苯乙醇苷纳米乳及其制备方法，其特征在于：其中所述的油相为肉豆蔻酸异丙酯、油酸乙酯、液体石蜡、维生素E油、霍霍巴油、三醋酸甘油酯、乙酸乙酯、杏仁油、小麦胚芽油、蓖麻油、橄榄油、大豆油、花生油、棕榈油、椰子油、山茶油、红花油、玉米油、芝麻油、棕榈酸异丙酯、白矿油、鳄梨油、挥发性硅油、鲸蜡烷的一种或一种以上，表面活性剂为Tween-80、Tween-60、Tween-20、氢化蓖麻油聚氧乙烯醚(RH-40)、聚氧乙烯蓖麻油(CremophorEL)、Span-80、月桂酸聚氧乙烯醚、异硬脂酸的一种或一种以上，助表面活性剂为无水乙醇、乙二醇、1,2-丙二醇、丙三醇、PEG200、PEG400、PEG600、丙二醇、异丙醇、正丁醇中的一种或一种以上，防腐剂为维生素C、维生素E、羟苯乙酯、尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、尼泊金丙酯、双咪唑烷基脲、氯甲酚、山梨酸、山梨酸钾、三氯叔丁醇、亚硫酸盐、半胱胺酸、二叔丁基羟基甲苯的一种或一种以上。