CN105462793A - 一种保健药酒其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种保健药酒及其制备方法。该保健药酒由以下原料制备而成：西洋参10～30份、枸杞子10～35份、熟地黄15～40份、银杏叶15～45份、红花2.5～6.5份、甘草3.0～7.5份、菊花5.0～10份、异麦芽酮糖12.5～22.5份、白酒1700～2000份、纯化水600～800份。本发明采用保健酒的常用制作方法浸提法工艺制作，并通过壳聚糖进行絮凝沉淀处理和低温冷藏的方法，二者具有极好的协同处理效应，缩短生产周期，大大提高了药酒的澄清度，同时对药酒的稳定性无任何影响。本发明保健药酒具有滋补、强壮、调节等作用，经药理药效证明均具有增强免疫力和缓解体力疲劳的双重保健功能，能起到标本兼治的目的。

Description

一种保健药酒其制备方法

技术领域

本发明涉及一种保健食品，特别涉及一种具有增强免疫力和缓解体力疲劳的保健功能作用的保健药酒及其制备方法，属于保健食品领域。

背景技术

现代社会，人们饮食不善，工作压力大，心态差，体育锻炼少，免疫力弱的人口比例在不断上升，因此增强人们的免疫力对于现代社会的人是十分重要和必要的。现代免疫学认为，免疫是机体和进入机体的异种大分子抗原物质相互作用所引起的保持机体自身完整性和稳定性的反应。所以说，免疫反应也是机体同内外环境因素相互矛盾，相互斗争的结果，是机体整体反应的组成部分。从本质来讲，免疫是“自我识别”、“存己排异”和达到“自身稳定”的一种复杂的生理保护功能。所以，增强免疫力，主要是增强机体免疫防御、免疫自稳、免疫监视三方面的功能，从而促进机体免疫力的改善加强。

中医学认为人体的免疫系统与肾、脾、肺、肝脏的关系密切，因此采用益肺、健脾、补肝肾的方法来调节机体的免疫功能；而疲劳与肝、心、脾、肾、脑有关，故采用滋补肝肾、健脾益气、补心安神来缓解机体的疲劳状态。这两种功能都涉及多个器官，而且适宜人群广泛，需要长期服用，并且酒剂自古就选用中草药浸制，因此选用中草药组方来达到提高免疫力和缓解体力疲劳的保健功能。

保健酒系中医之秘典，以多种名贵中药材为原料精心配制。保健酒的历史源远流长，自古就是延缓衰老、滋阴补肾、提神益智人群的佳品，主要针对健康或亚健康的青壮年人群和中老年人群。

以上论述表明，需要提高免疫力和缓解体力疲劳的人群普遍存在且人数较多，而且在逐渐增加。酒剂防病保健，源远流长，药物渗入酒中制成具有保健作用的酒剂，是祖国传统医学与酒业的成功结合。酒剂有自身的特点，药借酒势，酒助药力，无处不到。酒剂的适应范围广，便于服用吸收迅速、见效快，可以很好地掌握剂量，而且较其它剂型的保健食品容易保存。我国成年消费者，本身也有饮酒的习惯，若以白酒为媒，制成保健酒，既能满足人们的饮酒嗜好，同样也能起到增强免疫力的作用。目前，市场已有多种滋补保健药酒，这些滋补保健药酒从配方的合理性以及配方的功效性上来讲，各种滋补保健药酒侧重的都是局部作用，或者是使用单一的中药药材，配方不合理以及功效性差；也有的滋补保健药酒使用非常多种的中药药材，但这些中药药材发挥功效时，过度地集中一个部位，对人体也不利；并且使用多种中药药材，经过简单的加工处理，得到的滋补保健药酒的安全性以及功效性都不高。因此，现有的滋补保健药酒存在配方不合理性，产品功效性、安全性不高的缺点。以西洋参、枸杞子、熟地黄、银杏叶、红花、甘草等组方，具有增强免疫力和缓解体力疲劳的原料组方制备成的药酒尚未见报道。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供一种保健药酒及其制备方法。

发明概述

本发明的保健药酒是根据中医药提高免疫力和抗疲劳的机理组方，选用安全有效，规定可用于保健食品的原料西洋参、枸杞子、熟地黄、银杏叶、红花、甘草等组方制备而成，其中西洋参补气生津；枸杞子和熟地黄补血滋阴；银杏叶和红花活血化瘀、通脉舒络；甘草补脾肺之气，有调和药性的作用。各原料合用，具有益气补血、滋补肝肾、健脾益气、养心安神之功效。全方气血同补、阴阳并调、最终达到增强机体免疫力及抗疲劳的目的。

本发明的技术方案如下：

一种保健药酒，由以下原料按质量份制成：

优选的：

一种保健药酒，由以下原料按质量份制成：

进一步优选的：

一种保健药酒，由以下原料按质量份制成：

或者，

一种保健药酒，由以下原料按质量份制成：

或者，

一种保健药酒，由以下原料按质量份制成：

本发明所述的白酒酒精度为60％～70％(V/V)。

本发明所使用的原料未特别说明的均为常规市购产品。

一种保健药酒的制备方法，包括如下步骤：

(1)称取配方量的西洋参、枸杞子、熟地黄、银杏叶、红花、甘草、菊花，均匀铺于浸提罐中，加8～9倍重量酒精度为60％～70％(V/V)的白酒于浸提罐中，密闭，浸泡12～14天；浸泡24小时之后，每天用泵循环1～2次酒液，循环时间为1～1.5小时；浸泡结束后放出酒液，得浸泡酒液，药渣再压榨，得压榨酒液，将两者合并，180目筛过滤，得混合浸泡酒液；

(2)将壳聚糖进行粉碎，过30～40目筛，称取壳聚糖适量，用沸水配成0.3g/L的壳聚糖胶体溶液；

(3)进行絮凝小试预实验，取出100ml混合浸泡酒液，室温搅拌均匀；以90转/min的转速继续搅拌，用0.3g/L浓度的壳聚糖胶体溶液进行滴加，观察絮凝物的分离效果，当固液分离，液体澄清时，停止滴加壳聚糖胶体溶液并停止搅拌，测定此时的壳聚糖胶体溶液的加入量，计算得出壳聚糖胶体溶液加入量与混合浸泡酒液量的比值；

(4)步骤(1)混合浸泡酒液在室温搅拌条件下，将步骤(2)的0.3g/L的壳聚糖胶体溶液滴加入到酒液中，以15～30转/min的转速继续搅拌，测定壳聚糖胶体溶液的使用量，当壳聚糖胶体溶液加入量与混合浸泡酒液量的比值与步骤(3)絮凝小试预实验中比值一致时，停止滴加并停止搅拌；观察酒液是否出现明显清浊分层，如出现分层，静置18～24h；如未出现分层，继续滴加壳聚糖胶体溶液，直至出现分层，静置18～24h；然后分出上层清液，压滤下层物料，将上层清液与滤液混合即为分离后的澄清混合浸泡酒液；

(5)取配方量的异麦芽酮糖加入步骤(4)制备的澄清混合浸泡酒液中，然后再加入纯化水、酒精度为60％～70％(V/V)的白酒，循环搅拌3小时，使充分混合均匀，测其酒精度，勾兑至酒精度为35±1％(V/V)，并调至配方量得勾兑酒液；

(6)将勾兑酒液-10～4℃冷藏24小时，冷藏完毕后，用板框过滤器过滤，得总配制酒液；

(7)酒瓶、瓶塞依次用饮用水、纯净水洗净，酒瓶再105℃流通蒸汽灭菌40～60分钟，备用；瓶塞用75％(V/V)食用乙醇浸泡20～30分钟，备用；

(8)将上述总配制酒液灌装，压盖密封包装即得。

根据本发明优选的，一种保健药酒制备方法，包括如下步骤：

(1)称取配方量的西洋参、枸杞子、熟地黄、银杏叶、红花、甘草、菊花，均匀铺于浸提罐中，加8倍重量酒精度为60％(V/V)的白酒于浸提罐中，密闭，浸泡12天；浸泡24小时之后，每天用泵循环1次酒液，循环时间为1小时；浸泡结束后放出酒液，得浸泡酒液，药渣再压榨，得压榨酒液，将两者合并，180目筛过滤，得混合浸泡酒液；

(2)将壳聚糖进行粉碎，过30目筛，称取壳聚糖适量，用沸水配成0.3g/L的壳聚糖胶体溶液；

(3)进行絮凝小试预实验，取出100ml混合浸泡酒液，室温搅拌均匀；以90转/min的转速继续搅拌，用0.3g/L浓度的壳聚糖胶体溶液进行滴加，观察絮凝物的分离效果，当固液分离，液体澄清时，停止滴加壳聚糖胶体溶液并停止搅拌，测定此时的壳聚糖胶体溶液的加入量，计算得出壳聚糖胶体溶液加入量与混合浸泡酒液量的比值；

(4)步骤(1)混合浸泡酒液在室温搅拌条件下，将步骤(2)的0.3g/L的壳聚糖胶体溶液滴加入到酒液中，以15转/min的转速继续搅拌，测定壳聚糖胶体溶液的使用量，当壳聚糖胶体溶液加入量与混合浸泡酒液量的比值与步骤(3)絮凝小试预实验中比值一致时，停止滴加并停止搅拌；观察酒液是否出现明显清浊分层，如出现分层，静置18h；如未出现分层，继续滴加壳聚糖胶体溶液，直至出现分层，静置18h；然后分出上层清液，压滤下层物料，将上层清液与滤液混合即为分离后的澄清混合浸泡酒液；

(5)取配方量的异麦芽酮糖加入步骤(4)制备的澄清混合浸泡酒液中，然后再加入纯化水、酒精度为60％(V/V)的白酒，循环搅拌3小时，使充分混合均匀，测其酒精度，勾兑至酒精度为35±1％(V/V)，并调至配方量得勾兑酒液；

(6)将勾兑酒液-10℃冷藏24小时，冷藏完毕后，用板框过滤器过滤，得总配制酒液；

(7)酒瓶、瓶塞依次用饮用水、纯净水洗净，酒瓶再105℃流通蒸汽灭菌40分钟，备用；瓶塞用75％(V/V)食用乙醇浸泡20分钟，备用；

(8)将上述总配制酒液灌装，压盖密封包装即得。

本发明所述的室温系指10～30℃。

下面结合实验例对本发明做进一步的说明，但不限于此。

实验例1：基酒实验研究

一般保健酒的制备方法可分为浸提法、酿制法、配制法。浸提法是较常见的一种方法，是用基酒将中药材原料中的有效成分最大限度地提取出来。其选用的基酒一般选用白酒或米酒居多，影响浸提效果的因素较多，其中有基酒用量、基酒浓度、浸泡次数、浸泡时间等诸多条件。

1、基酒用量的实验

按照处方量称取各种药材，加入浓度为60％(V/V)的白酒浸泡，浸泡一次，时间为12天，药材与基酒用量比例设为1:5、1:6、1:7、1:8、1:9进行考察。浸泡结束放出酒液，药渣再压榨，合并酒液，得混合浸泡液。测定混合浸泡液中总皂苷的总量，以考察基酒的用量。见表1；

表1基酒用量的考察

结论：从以上试验数据可以看出，当原料：基酒的用量为1:8、1:9时混合浸泡液中总皂苷的含量基本达到峰值，变化已不明显，故选原料：基酒用量比例为1:8～1:9之间较为合理、实际。

2、基酒浓度的实验

中药饮片浸泡时所用基酒的浓度对可溶性成分的浸出有一定的影响，酒度过低不利于醇溶性成分的溶出，过高一些蛋白质成分容易凝结变性，不利于可溶性成分的浸出。实际生产前，分别取处方量的原料，加入浓度为40％、50％、60％、70％、80％(V/V)的白酒，以黄酮过低含量为考察指标，最终确定所用基酒浓度：具体试验结果如下：见表2；

表2基酒浓度的考察实验

结论：从以上试验数据可以看出，基酒的浓度为60％、70％(V/V)时，溶液中黄酮含量基本达到峰值，浓度为80％(V/V)时黄酮的含量不升而降，最终确定基酒的浓度为60％～70％(V/V)。

3、浸泡次数的实验

浸泡的次数直接影响到产品的质量及生产成品，当次数少时，药材中的药效成分提取不完全，造成资源浪费；次数太多，单位容积内有效成分的含量没有太大变化，只会增加生产成本，造成资源浪费，因此生产前进行了提取次数的考察，称取处方量的原料，以总黄酮的含量为考察指标，具体考察结果如下：见表3；

表3浸泡次数的考察实验

结论：从以上试验数据可以看出，浸泡1次、2次和3次时浸泡液中总黄酮的量没有太大变化，因此，在生产时确定提取的次数为1～2次。

4、浸泡时间的实验

分别称取处方量的原料，加入浓度为60％(V/V)的基酒浸泡，基酒用量为8倍量，浸泡一次，分别于浸泡第8、10、12、14、16天，搅匀抽取适量浸泡液，测定混合浸泡液中指标成分总皂苷的含量，以考察浸泡时间：见表4；

表4浸泡时间的考察实验

结论：从以上试验数据可以看出，当浸泡天数为12天、14天时，混合浸泡液中总皂苷的含量基本达到峰值，变化已不明显，故选择浸泡时间为12天～14天之间时间较为合理、实际。

实验例2：药酒浑浊沉淀处理的最佳方法的制定实验

保健药酒处方主要由西洋参、枸杞子、熟地黄、银杏叶、红花、甘草等组方组成。具有增强免疫力和缓解体力疲劳等。该酒剂属于中药复方制剂，成分复杂，酒浸提液中往往含有大量的树脂状胶体物、鞣质、淀粉、蛋白质等无活性杂质成分。它的澄明度主要取决于浸提液的澄清度，传统通常采用静置沉淀法，取上清液制备，但生产周期较长，总成本高且澄清效果不理想，质量不稳定。本发明改用壳聚糖澄清剂来澄清酒浸提液，可使酒提液迅速澄清，再经压滤,低温放置，而达到精制目的。

1、仪器与试剂

1.1仪器：离心沉淀器、气相色谱仪

1.2药品：药酒浸提液由实施例1方法制备；壳聚糖澄清剂用食品级原料。

2、方法与结果

2.1壳聚糖澄清剂的配制：称取壳聚糖0.3g，用沸水配成0.3g/L的壳聚糖胶体溶液1000ml。

2.2不同体积壳聚糖澄清剂的澄清效果试验：取实施例1保健药酒初提取药液约20L，分6组，每组5份，每份500ml，在均匀搅拌下，分别加入0.3g/L的壳聚糖胶体溶液0ml(对照组)、5ml、10ml、15ml、20ml和25ml，摇匀，置分液漏斗中，室温下静置24h，观察沉淀，分离出上清液，2000r/min离心5min，倒出上清液，测量体积记录，分离沉淀至烧杯，置100℃恒温烤箱烘干30min，取出冷却至室温，称量沉淀重量。取离心后的上清液，作相关检测；其他样品，密闭，置室温下观察有无沉淀产生(时间为30d、60d、半年、一年)，整个操作尽量避免微生物污染。

2.4质量检测：分别对以上样品进行理化鉴定，以及药酒中乙醇、甲醇含量测定，微生物检验。

2.5结果：加入壳聚糖澄清剂后可使保健药酒澄清，且随壳聚糖澄清剂用量的增加，上清液的颜色逐渐变浅，离心沉淀量逐渐增加，但其主要的理化检测指标变化不十分明显。与未加用壳聚糖澄清剂相比，没有发生显著变化。

2.6不同浓度的壳聚糖对保健药酒的各项影响指标实验

壳聚糖澄清剂的配制：称取壳聚糖适量，用沸水分别配成0.1、0.2、0.3、0.4、0.5g/L不同浓度的壳聚糖胶体溶液。

方法：取实施例1保健药酒初提取药液约3L，分6组，每组500ml，分为对照组、1、2、3、4、5组。1～5组每组分别加入上述不同浓度的壳聚糖胶体溶液，对照组不加，摇匀，置分液漏斗中，室温下静置24h，观察沉淀，分离出上清液，15～30r/min离心5min，倒出上清液，分离沉淀至烧杯，置100℃恒温烤箱烘干30min，取出冷却至室温，称量沉淀重量。

表5加入不同浓度的壳聚糖胶体溶液后样品溶液的各项指标的变化

与对照组比较，^＊P＜0.05。

采用GC检测，乙醇含量都符合标准(38％～42％)，但随着壳聚糖胶体溶液量的增加，乙醇含量也有所降低。经检测各批次样品中甲醇含量(甲醇含量标准＜0.05％)都符合标准也无明显差异。结果见表6。

表6加入不同浓度的壳聚糖胶体溶液后样品溶液检测结果

在不同时间段观察样品的底部，发现对照品在30d内，仍有少量沉淀产生，而壳聚糖加入0.1g/L的在60d内观察有微量的沉淀，其他各组一年内，任保持澄清透明。结果见表7。

表7加入不同浓度的壳聚糖胶体溶液后样品溶液不同时间观察结果

3、结论

保健药酒最初生产采用冷浸静置的方法，其在生产过程最大的缺点是生产周期长，需静止一个月以上，不适合大批量生产。成品药酒放置一定时间后，会有少量沉淀产生，从而影响了其外观质量。因此，生产中迫切需要寻找一种能够快速去除杂质，缩短生产周期，而又不影响产品质量的澄清剂。

絮凝澄清法是在中药提取液或中药提取浓缩液中，加人一种澄清剂以吸附架桥和电中和方式除去溶液中粗粒子，以达到分离纯化的一种方法。甲壳素是自然界生物(甲壳类的蟹、虾、昆虫的外壳等)所含的氨基多糖，经稀酸处理后得到的物质。脱乙酰甲壳素即壳聚糖可生物合成，也可生物分解，不会造成二次污染。它是利用天然胶体保护作用使制剂澄清并较多地保留药液中的成分。从实验结果可以看出：①随着壳聚糖澄清剂添加量的增加，药液中的沉淀量明显增多，药液颜色也逐渐由深变浅。从而起到除杂作用。②随着壳聚糖澄清剂添加量的增加，药液中的指标成分的理化检测结果无明显变化，乙醇含量虽壳聚糖澄清剂添加量的增加也逐渐下降。但在控制范围内。从一年时间的外观观察结果表明，我们可见采用添加壳聚糖0.2g/L以上的浓度，即可满足需要。此法从计算生产成本角度几乎可以忽略，但可以大大地缩短生产周期，提高生产效率，提升产品的质量。

在生产中我们将以上实验结果(浓度分别0.2g/L、0.3g/L)进行放大，壳聚糖在这两个浓度下，对药酒中的主要成份没有明显的吸附作用，同时综合考虑到了生产设备，技术条件，生产成本等各项因素。最终确定了生产过程中所使用的壳聚糖浓度为0.3g/L。

本发明所制备的保健药酒质量标准如下、但不限以下所述保健药酒质量标准。

保健药酒质量标准

【感官要求】见表8；

表8感官要求

【理化指标】见表9；

表9理化指标

【微生物限度】应符合中国药典2010版2部有关规定

【标志性成分含量测定】

总皂苷：根据《保健食品检验与评价技术规范》(2003)中总皂苷的测定方法测定。

总黄酮：根据《保健食品检验与评价技术规范》(2003)中总黄酮的测定方法测定。

实验例3：保健药酒的急性经口毒性实验

1、材料和方法

1.1样品：由山东司邦得制药有限公司制备保健药酒，规格：500mL/瓶，实施例1方法制备。人口服用量推荐为每人(成人)每日一次，每次100mL，成人体重按60kg计算，折合剂量为1.67mL/kg。空白产品20倍浓缩液(不含乙醇，以下称“浓缩液样品”)和含60％浓度乙醇的酒供实验用。置4℃冰箱保存。

1.2实验动物及环境：SPF级健康昆明种小鼠和SD种大鼠，由广东省医学实验动物中心繁殖，实验动物生产许可证号：SCXK(粤)2014-0002，实验动物质量合格证号：0072967(小鼠)、0073187(雄性大鼠)、0073188(雌性大鼠)。实验动物使用许可证号：SYXK(桂)2014-0003。实验动物室温度：22～25℃，相对湿度：55～70％。

1.3实验方法：采用最大给药量试验法，选体重18～22g的昆明种小鼠20只，雌、雄性各半。试验前动物禁食16小时，不限饮水。用纯水将60％(V/V)浓度乙醇的酒基对倍稀释成30％(V/V)乙醇浓度。称取50.0g浓缩液样品，加30％(V/V)乙醇浓度的酒基50mL，再加纯水至100mL，混匀、配成50mg/mL浓度溶液，试验液的乙醇终浓度为15％(V/V)，然后给动物灌胃2次(中途间隔6h)，每次灌胃量为0.4mL/20g，合计剂量为20000mg/kg。灌胃后观察、记录动物的中毒表现。每周称重一次；观察两周时间，试验结束解剖动物进行大体观察。按毒性分级标准评价受试动物的急性毒性；见表10；

表10小鼠的急性毒性试验结果

2、结论

表10可见，以最大给药量(剂量为20000mg/kg)的浓缩液样品给予小鼠灌胃后，动物生长良好，未见体重受到影响。受试小鼠均未见有中毒症状，观察14天无动物死亡。试验结束解剖动物、大体观察，肝、肾、脾、心、肺、胃、肠等主要器官均未见明显异常改变，根据《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)中急性毒性分级标准，该样品的急性经口毒性属无毒级。

实验例4：保健药酒的Ames实验

1、材料和方法

1.1样品：与实验例3相同

1.2实验动物及环境：与实验例3相同

1.3实验方法：采用经鉴定符合要求的鼠伤寒沙门氏菌组氨酸缺陷型TA97a、TA98、TA100、TA102四种菌株进行实验。以多氯联苯诱导的大鼠肝微粒体酶(S_-9)作为体外代谢活化系统。采用平板掺入法，在保温的顶层培养基中一次加入0.1mL试验菌株增菌液、0.1mL受试物溶液和0.5mLS_-9混合液(当需要代谢活化时)，混匀后倒入底层培养基平板上。5个试验剂量分别为5000、1000、200、40、8μg/皿，同时设自发回变对照、溶剂对照和阳性突变剂对照。自发回变对照除不加样品外，其余条件与样品组相同。溶剂对照用纯水替代样品，其余条件与样品组相同。在无菌操作条件下，用灭菌纯水将浓缩液样品分别配成50、10、2、0.4、0.08mg/mL5个浓度，经过滤器(0.22μm孔径滤膜)过滤除菌后作为受试溶液。每个剂量组的各种菌株均做3个平行皿。在37℃下培养48小时，计数每皿的菌落数。整套试验在相同条件下重复做两次。如果受试物的回变菌落数增加超过自发回变菌落数的2倍以上，并具有剂量-反应关系者，即为诱变实验阳性。见表11；

表11Ames实验结果(第一次)

注：1、以上结果(菌落数)均为3个平皿的均值±标准差。

2、阳性对照：TA97a+S9、TA98+S9、TA100+S9采用2-氨基芴(剂量为10g/皿)；TA98-S9采用柔毛霉素(剂量为6g/皿)；TA97a-S9、TA102-S9采用敌克松(剂量为50g/皿)；TA100-S9采用叠氮钠(剂量为1.5g/皿)；TA102+S9采用1,8-二羟基蒽醌(剂量为50g/皿)。见表12；

表12Ames试验结果(第二次)

注：以上结果(菌落数)均为3个平皿的均值±标准差。

3、结论：从表11、表12可见，对TA97a、TA98、TA100、TA102四种试验菌株，无论是否加入，样品各剂量组的回变菌落数均未超过自发回变菌落数的2倍，亦无剂量-反应关系，表明该受试物诱变试验结果为阴性。

实验例5：保健药酒对小鼠增强免疫力功能实验

1、材料与方法

1.1材料：实施例1方法制备，为淡棕黄色的澄清液体，每瓶500ml；香菇多糖(10mg/片)由武汉标达药业有限公司生产；市场有售。

1.2剂量设置：小、中、大剂量组按每公斤体重分别给8.4、16.7和33.4ml/kg，相当于人体临床一日平均用量的5、10、20倍。

1.3观察指标与处理方法

1.3.1对正常小鼠免疫器官重量的影响健康昆明种小鼠(由广东省医学实验动物中心提供，40只，体重16～22g，雌雄各半，随机分为5组，正常对照组、香菇多糖组和保健药酒小、中、大剂量组，每组各8只。保健药酒小、中、大剂量组给药剂量每公斤体重分别相当于8.4、16.7、33.4ml/kg，香菇多糖组每公斤体重10.0mg，给药体积为0.2ml/10g，对照组给予等容量双蒸水，每日经口灌胃1次，连续10d。末次给药后1h断颈椎处死，摘取胸腺和脾脏，称重，计算胸腺指数和脾指数(g/kg)。

1.3.2对PHA刺激小鼠淋巴细胞转化的影响

取同种小鼠共50只，雌雄各半，随机分为5组，正常对照组、香菇多糖组、保健药酒小、中、大剂量组各10只。保健药酒小、中、大剂量组一次经口灌胃剂量每公斤体重分别相当于8.4、16.7、33.4ml/kg，香菇多糖组每公斤体重10.0mg，给药体积为0.2ml/10g，对照组给予等容量双蒸水，每日1次，连续10日。各组小鼠在给药最后3d每日给予经肌肉注射PHA10mg/kg1次，连续3d，并于末次给药后2h剪小鼠尾巴，取血推片，瑞氏染色，油镜下计数100个淋巴细胞，计算淋巴细胞转化率(％)。

1.4统计学处理结果用表示，经多组间ANOVA方差分析。

2、结果

2.1对正常小鼠免疫器官重量的影响

不同剂量的保健药酒能不同程度地增加脾脏指数，以中剂量组作用明显(P＜0.05)，对胸腺指数仅有轻度增加效应(P＞0.05)。阳性对照组香菇多糖能明显增加脾脏指数，对胸腺指数无影响。提示保健药酒对免疫器官有一定的增重效应(见表13)。

表13保健药酒对正常小鼠免疫器官重量的影响

与正常对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01

2.2对PHA刺激小鼠淋巴细胞转化的影响与正常对照相比，香菇多糖组淋巴细胞转化率显著增加(P＜0.05)。保健药酒不同剂量组的淋巴细胞转化率有不同程度的增加，有较好的量效关系，尤以大剂量组作用明显(P＜0.01)。提示保健药酒能增加细胞免疫功能(见表14)。

表14保健药酒对正常小鼠淋巴细胞转化功能的影响

与正常对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01。

3、结论

胸腺和脾脏是人体最重要的中枢和外周免疫器官之一。胸腺指数和脾脏指数能反应二者的发育和功能状况，间接反应了机体的免疫水平。淋巴细胞转化率可直接反应细胞免疫功能状态。因此。检测胸腺指数、脾脏指数和淋巴细胞转化率。可以了解药物对机体免疫功能特别是细胞免疫的影响。

香菇多糖是公认的免疫增强剂，能够提高机体的体液免疫和细胞免疫功能。本实验中，我们采用香菇多糖作为阳性对照，结果发现，不同剂量的保健药酒能增加动物脾脏指数，并能增强正常小鼠淋巴细胞转化功能，与香菇多糖组无显著差异(P＞0.05)，说明保健药酒具有增强免疫机能的作用，这从一个方面可以证明保健药酒具有增强免疫力和缓解体力疲劳的作用机制。

本发明的有益效果如下：

本发明的保健酒具有益气补血、滋补肝肾、活血化瘀、解郁安神的功效。遵循中医整体观念的治疗原则，具有调节人体免疫功能和缓解体力疲劳的双重功能。该产品生产工艺简单，服用方便，具有广阔的市场前景，有很好的社会效益及经济效益。

本发明保健药酒具有的特点和优势：

①本品为纯植物中草药西洋参、枸杞子、熟地黄、银杏叶、红花、甘草等组方，具有滋补、强壮、调节等作用，经药理药效证明均具有增强免疫力和缓解体力疲劳的双重保健功能，能起到标本兼治的目的。而且中药毒副作用小或无，与西药相比没有化学残渣，适合适宜人群长期服用的特点。

②本品为中草药组方，原料资源广泛，并且其功能与安全性已得到临床的广泛证实。

③本品采用保健酒的常用制作方法浸提法工艺制作，方法成熟、稳定，工艺符合食品卫生的相关要求。

④本发明通过壳聚糖进行絮凝沉淀处理，因每批药材质量不一样，其中所含的蛋白质等其他杂质也不一样，通过絮凝小试预实验优选出壳聚糖胶体溶液加入量，再加上低温冷藏方法；使壳聚糖絮凝处理法和低温冷藏法二者具有极好的协同处理效应，缩短生产周期，大大提高了药酒的澄清度，同时对药酒的稳定性无任何影响。

⑤本品剂型为酒剂，既满足了爱好饮酒人群的饮酒嗜好，同时也起到了增强免疫力和抗疲劳的保健功能，使用效果好，口感佳，服用方便，市场空间广阔。

具体实施方式

以下结合具体实施例，对本发明做进一步说明。应理解，以下实施例仅用于说明本发明，而非用于限定本发明的范围。

实施例中原辅料说明：

实施例中所涉及的装置和设备均为液体制剂生产通用设备，市场可购。说明如下:

不锈钢提取釜(型号2000L)山东新华医疗器械公司有售；万能高效粉碎机(型号30B)新华医疗设备有限公司有售；板框压滤机(型号BQ1/320-25)上海大张过滤设备有限公司有售。

实施例1：一种保健药酒的制备方法

1、一种保健药酒，由以下原料按质量份制成：

2、制备方法如下：

(1)称取配方量的西洋参、枸杞子、熟地黄、银杏叶、红花、甘草、菊花，均匀铺于浸提罐中，加8倍重量酒精度为60％(V/V)的白酒于浸提罐中，密闭，浸泡12天；浸泡24小时之后，每天用泵循环1次酒液，循环时间为1小时；浸泡结束后放出酒液，得浸泡酒液，药渣再压榨，得压榨酒液，将两者合并，180目筛过滤，得混合浸泡酒液；

(2)将壳聚糖进行粉碎，过30目筛，称取壳聚糖适量，用沸水配成0.3g/L的壳聚糖胶体溶液；

(3)进行絮凝小试预实验，取出100ml混合浸泡酒液，室温搅拌均匀；以90转/min的转速继续搅拌，用0.3g/L浓度的壳聚糖胶体溶液进行滴加，观察絮凝物的分离效果，当固液分离，液体澄清时，停止滴加壳聚糖胶体溶液并停止搅拌，测定此时的壳聚糖胶体溶液的加入量，计算得出壳聚糖胶体溶液加入量与混合浸泡酒液量的比值；

(4)步骤(1)混合浸泡酒液在室温搅拌条件下，将步骤(2)的0.3g/L的壳聚糖胶体溶液滴加入到酒液中，以15转/min的转速继续搅拌，测定壳聚糖胶体溶液的使用量，当壳聚糖胶体溶液加入量与混合浸泡酒液量的比值与步骤(3)絮凝小试预实验中比值一致时，停止滴加并停止搅拌；观察酒液是否出现明显清浊分层，如出现分层，静置18h；如未出现分层，继续滴加壳聚糖胶体溶液，直至出现分层，静置18h；然后分出上层清液，压滤下层物料，将上层清液与滤液混合即为分离后的澄清混合浸泡酒液；

(5)取配方量的异麦芽酮糖加入步骤(4)制备的澄清混合浸泡酒液中，然后再加入纯化水、酒精度为60％(V/V)的白酒，循环搅拌3小时，使充分混合均匀，测其酒精度，勾兑至酒精度为35±1％(V/V)，并调至配方量得勾兑酒液；

(6)将勾兑酒液-10℃冷藏24小时，冷藏完毕后，用板框过滤器过滤，得总配制酒液；

(7)酒瓶、瓶塞依次用饮用水、纯净水洗净，酒瓶再105℃流通蒸汽灭菌40分钟，备用；瓶塞用75％(V/V)食用乙醇浸泡20分钟，备用；

(8)将上述总配制酒液灌装，压盖密封包装即得。

实施例2：一种保健药酒的制备方法

1、一种保健药酒，由以下原料按质量份制成：

2、制备方法如下：

(1)称取配方量的西洋参、枸杞子、熟地黄、银杏叶、红花、甘草、菊花，均匀铺于浸提罐中，加8倍重量酒精度为60％(V/V)的白酒于浸提罐中，密闭，浸泡13天；浸泡24小时之后，每天用泵循环1次酒液，循环时间为1小时；浸泡结束后放出酒液，得浸泡酒液，药渣再压榨，得压榨酒液，将两者合并，180目筛过滤，得混合浸泡酒液；

(2)将壳聚糖进行粉碎，过35目筛，称取壳聚糖适量，用沸水配成0.3g/L的壳聚糖胶体溶液；

(3)进行絮凝小试预实验，取出100ml混合浸泡酒液，室温搅拌均匀；以90转/min的转速继续搅拌，用0.3g/L浓度的壳聚糖胶体溶液进行滴加，观察絮凝物的分离效果，当固液分离，液体澄清时，停止滴加壳聚糖胶体溶液并停止搅拌，测定此时的壳聚糖胶体溶液的加入量，计算得出壳聚糖胶体溶液加入量与混合浸泡酒液量的比值；

(4)步骤(1)混合浸泡酒液在室温搅拌条件下，将步骤(2)的0.3g/L的壳聚糖胶体溶液滴加入到酒液中，以20转/min的转速继续搅拌，测定壳聚糖胶体溶液的使用量，当壳聚糖胶体溶液加入量与混合浸泡酒液量的比值与步骤(3)絮凝小试预实验中比值一致时，停止滴加并停止搅拌；观察酒液是否出现明显清浊分层，如出现分层，静置20h；如未出现分层，继续滴加壳聚糖胶体溶液，直至出现分层，静置20h；然后分出上层清液，压滤下层物料，将上层清液与滤液混合即为分离后的澄清混合浸泡酒液；

(5)取配方量的异麦芽酮糖加入步骤(4)制备的混合浸泡酒液中，然后再加入纯化水、酒精度为60％(V/V)的白酒，循环搅拌3小时，使充分混合均匀，测其酒精度，勾兑至酒精度为35±1％(V/V)，并调至配方量得勾兑酒液；

(6)将勾兑酒液0℃冷藏24小时，冷藏完毕后，用板框过滤器过滤，得总配制酒液；

(7)酒瓶、瓶塞依次用饮用水、纯净水洗净，酒瓶再105℃流通蒸汽灭菌50分钟，备用；瓶塞用75％(V/V)食用乙醇浸泡25分钟，备用；

(8)将上述总配制酒液灌装，压盖密封包装即得。

实施例3：一种保健药酒的制备方法

1、一种保健药酒，由以下原料按质量份制成：

2、制备方法如下：

(1)称取配方量的西洋参、枸杞子、熟地黄、银杏叶、红花、甘草、菊花，均匀铺于浸提罐中，加9倍重量酒精度为70％(V/V)的白酒于浸提罐中，密闭，浸泡12天；浸泡24小时之后，每天用泵循环2次酒液，循环时间为1.5小时；浸泡结束后放出酒液，得浸泡酒液，药渣再压榨，得压榨酒液，将两者合并，180目筛过滤，得混合浸泡酒液；

(2)将壳聚糖进行粉碎，过40目筛，称取壳聚糖适量，用沸水配成0.3g/L的壳聚糖胶体溶液；

(3)进行絮凝小试预实验，取出100ml混合浸泡酒液，室温搅拌均匀；以90转/min的转速继续搅拌，用0.3g/L浓度的壳聚糖胶体溶液进行滴加，观察絮凝物的分离效果，当固液分离，液体澄清时，停止滴加壳聚糖胶体溶液并停止搅拌，测定此时的壳聚糖胶体溶液的加入量，计算得出壳聚糖胶体溶液加入量与混合浸泡酒液量的比值；

(4)步骤(1)混合浸泡酒液在室温搅拌条件下，将步骤(2)的0.3g/L的壳聚糖胶体溶液滴加入到酒液中，以25转/min的转速继续搅拌，测定壳聚糖胶体溶液的使用量，当壳聚糖胶体溶液加入量与混合浸泡酒液量的比值与步骤(3)絮凝小试预实验中比值一致时，停止滴加并停止搅拌；观察酒液是否出现明显清浊分层，如出现分层，静置24h；如未出现分层，继续滴加壳聚糖胶体溶液，直至出现分层，静置24h；然后分出上层清液，压滤下层物料，将上层清液与滤液混合即为分离后的澄清混合浸泡酒液；

(5)取配方量的异麦芽酮糖加入步骤(4)制备的混合浸泡酒液中，然后再加入纯化水、酒精度为70％(V/V)的白酒，循环搅拌3小时，使充分混合均匀，测其酒精度，勾兑至酒精度为35±1％(V/V)，并调至配方量得勾兑酒液；

(6)将勾兑酒液4℃冷藏24小时，冷藏完毕后，用板框过滤器过滤，得总配制酒液；

(7)酒瓶、瓶塞依次用饮用水、纯净水洗净，酒瓶再105℃流通蒸汽灭菌60分钟，备用；瓶塞用75％(V/V)食用乙醇浸泡30分钟，备用；

(8)将上述总配制酒液灌装，压盖密封包装即得。

Claims (8)

1.一种保健药酒，其特征在于，由以下原料按质量份制成：

2.如权利要求1所述的保健药酒，其特征在于，由以下原料按质量份制成：

3.如权利要求2所述的保健药酒，其特征在于，由以下原料按质量份制成：

4.如权利要求2所述的保健药酒，其特征在于，由以下原料按质量份制成：

5.如权利要求2所述的保健药酒，其特征在于，由以下原料按质量份制成：

6.如权利要求1-5任一所述的保健药酒，其特征在于，所述的白酒酒精度为60％～70％(V/V)。

7.如权利要求1-5任一所述的保健药酒的制备方法，包括如下步骤：

(1)称取配方量的西洋参、枸杞子、熟地黄、银杏叶、红花、甘草、菊花，均匀铺于浸提罐中，加8～9倍重量酒精度为60％～70％(V/V)的白酒于浸提罐中，密闭，浸泡12～14天；浸泡24小时之后，每天用泵循环1～2次酒液，循环时间为1～1.5小时；浸泡结束后放出酒液，得浸泡酒液，药渣再压榨，得压榨酒液，将两者合并，180目筛过滤，得混合浸泡酒液；

(2)将壳聚糖进行粉碎，过30～40目筛，称取壳聚糖适量，用沸水配成0.3g/L的壳聚糖胶体溶液；

(3)进行絮凝小试预实验，取出100ml混合浸泡酒液，室温搅拌均匀；以90转/min的转速继续搅拌，用0.3g/L浓度的壳聚糖胶体溶液进行滴加，观察絮凝物的分离效果，当固液分离，液体澄清时，停止滴加壳聚糖胶体溶液并停止搅拌，测定此时的壳聚糖胶体溶液的加入量，计算得出壳聚糖胶体溶液加入量与混合浸泡酒液量的比值；

(4)步骤(1)混合浸泡酒液在室温搅拌条件下，将步骤(2)的0.3g/L的壳聚糖胶体溶液滴加入到酒液中，以15～30转/min的转速继续搅拌，测定壳聚糖胶体溶液的使用量，当壳聚糖胶体溶液加入量与混合浸泡酒液量的比值与步骤(3)絮凝小试预实验中比值一致时，停止滴加并停止搅拌；观察酒液是否出现明显清浊分层，如出现分层，静置18～24h；如未出现分层，继续滴加壳聚糖胶体溶液，直至出现分层，静置18～24h；然后分出上层清液，压滤下层物料，将上层清液与滤液混合即为分离后的澄清混合浸泡酒液；

(5)取配方量的异麦芽酮糖加入步骤(4)制备的澄清混合浸泡酒液中，然后再加入纯化水、酒精度为60％～70％(V/V)的白酒，循环搅拌3小时，使充分混合均匀，测其酒精度，勾兑至酒精度为35±1％(V/V)，并调至配方量得勾兑酒液；

(6)将勾兑酒液-10～4℃冷藏24小时，冷藏完毕后，用板框过滤器过滤，得总配制酒液；

(7)酒瓶、瓶塞依次用饮用水、纯净水洗净，酒瓶再105℃流通蒸汽灭菌40～60分钟，备用；瓶塞用75％(V/V)食用乙醇浸泡20～30分钟，备用；

(8)将上述总配制酒液灌装，压盖密封包装即得。

8.如权利要求7所述的保健药酒的制备方法，包括如下步骤：

(1)称取配方量的西洋参、枸杞子、熟地黄、银杏叶、红花、甘草、菊花，均匀铺于浸提罐中，加8倍重量酒精度为60％(V/V)的白酒于浸提罐中，密闭，浸泡12天；浸泡24小时之后，每天用泵循环1次酒液，循环时间为1小时；浸泡结束后放出酒液，得浸泡酒液，药渣再压榨，得压榨酒液，将两者合并，180目筛过滤，得混合浸泡酒液；

(2)将壳聚糖进行粉碎，过30目筛，称取壳聚糖适量，用沸水配成0.3g/L的壳聚糖胶体溶液；

(3)进行絮凝小试预实验，取出100ml混合浸泡酒液，室温搅拌均匀；以90转/min的转速继续搅拌，用0.3g/L浓度的壳聚糖胶体溶液进行滴加，观察絮凝物的分离效果，当固液分离，液体澄清时，停止滴加壳聚糖胶体溶液并停止搅拌，测定此时的壳聚糖胶体溶液的加入量，计算得出壳聚糖胶体溶液加入量与混合浸泡酒液量的比值；

(4)步骤(1)混合浸泡酒液在室温搅拌条件下，将步骤(2)的0.3g/L的壳聚糖胶体溶液滴加入到酒液中，以15转/min的转速继续搅拌，测定壳聚糖胶体溶液的使用量，当壳聚糖胶体溶液加入量与混合浸泡酒液量的比值与步骤(3)絮凝小试预实验中比值一致时，停止滴加并停止搅拌；观察酒液是否出现明显清浊分层，如出现分层，静置18h；如未出现分层，继续滴加壳聚糖胶体溶液，直至出现分层，静置18h；然后分出上层清液，压滤下层物料，将上层清液与滤液混合即为分离后的澄清混合浸泡酒液；

(5)取配方量的异麦芽酮糖加入步骤(4)制备的澄清混合浸泡酒液中，然后再加入纯化水、酒精度为60％(V/V)的白酒，循环搅拌3小时，使充分混合均匀，测其酒精度，勾兑至酒精度为35±1％(V/V)，并调至配方量得勾兑酒液；

(6)将勾兑酒液-10℃冷藏24小时，冷藏完毕后，用板框过滤器过滤，得总配制酒液；

(7)酒瓶、瓶塞依次用饮用水、纯净水洗净，酒瓶再105℃流通蒸汽灭菌40分钟，备用；瓶塞用75％(V/V)食用乙醇浸泡20分钟，备用；

(8)将上述总配制酒液灌装，压盖密封包装即得。