CN105461639A - 一种高纯度马西替坦的精制方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种高纯度马西替坦的精制方法，是在避光条件下，将马西替坦粗品用新沸过的溶剂加热溶解，加入活性炭脱色5-15min，趁热压滤，滤液避光降温至45-55℃搅拌析晶1-2h，再降温至20-30℃搅拌析晶1-2h，过滤，干燥，得马西替坦纯品。本方法具有操作简捷、收率高、产品纯等优点，收率85％以上，马西替坦纯品纯度在99.9％以上(HPLC检测)。

Description

一种高纯度马西替坦的精制方法

一、技术领域

本发明涉及一种化学药物的纯化方法，具体地说是一种内皮素受体拮抗剂马西替坦的精制方法。

二、背景技术

马西替坦(Macitentan)是一种双向内皮素受体拮抗剂，由瑞士爱可泰隆制药公司(ActelionPharmaceuticalsInc.)开发。2013年10月18日获美国FDA批准，商品名为Opsumit，用于治疗肺动脉高压(PAH)，以延缓疾病进展。其化学名为N-[5-(4-溴苯基)-6-[2-[(5-溴-2-嘧啶基)氧]乙氧基]-4-嘧啶基]-N'-丙基磺酰胺，化学结构式如下式(I)：

马西替坦所含的杂质与其结构及合成工艺密切相关，其分子结构按下图式，可分成四个关键片段：5-(4-溴苯基)-4,6-二取代嘧啶(片段1)、N-丙基磺酰胺基(片段2)、二乙氧基(片段3)和5-溴-2-取代嘧啶(片段4)。

根据组成片段构建相应的合成原料，依次为5-(4-溴苯基)-4,6-二氯嘧啶(式(IV))、N-丙基磺酰胺(或钾/钠盐)(式(V))、乙二醇和5-溴-2-氯嘧啶(式(VI))，目前通用的合成方法为：式(IV)与式(V)缩合制得N-[5-(4-溴苯基)-6-氯代-4-嘧啶基]-N'-丙基磺酰胺(式(III))，式(III)再与丙二醇缩合制得N-[5-(4-溴苯基)-6-(2-羟基乙氧基)-4-嘧啶基]-N'-丙基磺酰胺(式(II))，最后式(II)与5-溴-2-氯嘧啶(式(VI))缩合得马西替坦。具体制备方法文献报道的基本类似(如：MartinH.Bollietall.JournalofMedicinalChemistry.Pages7849-7861.)。

由于5-(4-溴苯基)-4,6-二氯嘧啶(式(IV))及乙二醇分子中均有两个活性等同的反应位点(氯原子、羟基)，反应过程中会产生双缩合杂质：杂质A、杂质B、杂质C及杂质D；式(III)、式(IV)及式(VI)分子中活性氯原子水解产生杂质E、杂质F及杂质G；马西替坦、式(II)及式(III)分子中不稳定的磺酰胺结构水解产生杂质H、杂质I及杂质J；马西替坦芳醚结构水解产生杂质E及杂质K；马西替坦氧化降解产生杂质I及杂质J。

马西替坦降解杂质与N-丙基磺酰胺侧基及二乙氧醚键稳定性有关，尤其是N-丙基磺酰胺侧基，实验证明其在高温、光照、酸、碱、氧化条件下均不稳定，易降解成杂质J；在实际制备过程中往往两个侧基同时发生降解，产生降解杂质N。马西替坦结晶物在加热溶解过程中均会引起杂质J、杂质N、杂质K的增加，并且杂质J在常用有机溶剂中溶解性差，结晶清除较难。

文献(MartinH.Bollietall.JournalofMedicinalChemistry.Pages7849-7861.)采用甲醇精制，实验证明该方法能有效清除马西替坦工艺杂质，但不能有效清除降解杂质J，并且会引起杂质L及杂质M的增加，经甲醇重结晶后杂质J、杂质L及杂质M会进一步增加，产品纯度提高有限。

专利CN201410778483.8采用甲醇常温打浆精制，实验证明该方法不会引起杂质L及杂质M的增加，但不能清除杂质J，除杂不彻底，不适合工业生产。

现有精制方法不能有效清除降解杂质J，加热精制后氧化杂质L、杂质M的增加不可避免，不能有效提高产品纯度。

三、发明内容

本发明旨在提供一种高纯度马西替坦的精制方法，以有效提高马西替坦纯度，并且方法简单，易于生产。

本发明高纯度马西替坦的精制方法，包括如下步骤：

避光条件下，将马西替坦粗品用新沸过的溶剂加热溶解，加入活性炭脱色5-15min，趁热压滤，滤液避光降温至45-55℃搅拌析晶1-2h，再缓慢降温至20-30℃搅拌析晶1-2h，过滤，干燥，得马西替坦纯品，收率大于85％，纯度大于99.9％(HPLC检测)。

所述马西替坦粗品包括通用的工业化方法合成的马西替坦及采用本发明方法精制所得结晶母液回收的马西替坦。

所述溶剂选自乙酸乙酯、甲醇、正己烷中的一种或两种。

所述溶剂优选为乙酸乙酯，或者为乙酸乙酯和甲醇混合溶剂，或者为乙酸乙酯和正己烷混合溶剂。乙酸乙酯和甲醇混合溶剂中乙酸乙酯和甲醇的体积比为1∶0.2-0.4，优选为1∶0.2；乙酸乙酯和正己烷混合溶剂中乙酸乙酯和正己烷的体积比为1∶1.5-2，优选为1∶1.5。

马西替坦粗品与所述溶剂的投料比为1g∶5-25ml。

所述加热溶解的温度为60-80℃。

所述活性炭与马西替坦粗品的投料比为马西替坦粗品：活性炭＝1g∶0.01g。

所述干燥为35-45℃下减压干燥4-8h。

活性炭若为使用过的首先需进行脱附处理，脱附条件为60-80℃下减压干燥6-12h。

发明人在对马西替坦粗品精制工艺条件进行筛选过程中，发现马西替坦在溶液状态下对热、光均不稳定性，主要降解生成杂质J，并且易氧化生成杂质L、杂质M。马西替坦溶液在高温60-80℃条件下，隔氧、避光能减缓其降解，而在室温10-30℃环境下，隔氧、避光对其稳定性影响不大。说明马西替坦溶液在高温条件下，氧和光会加速其降解。进一步研究发现马西替坦溶液在高温光照隔氧条件下主要促进杂质J的生成，在高温光照不隔氧条件下杂质J、杂质L及杂质M均会增长，而在高温避光隔氧及避光不隔氧条件下仅杂质J缓慢增长，说明光是加速其降解主要因素。因此，本发明方法包含避光操作，并对精制溶剂及试剂进行适度脱氧处理过程。

另外，发明人通过试验发现0-30℃析晶，收率差异不明显，并且20℃以下析晶及20-60℃内快速降温析晶，杂质J、杂质B、杂质L及杂质M析出均增加，除杂效果较差。经比较20-60℃内缓慢降温搅拌析晶与静置析晶，结果搅拌析晶产品纯度明显高于静置析晶，进一步研究结果表明不同搅拌速度对产品纯度影响不明显，活性炭对杂质J、杂质A及杂质B吸附作用明显。因此，本发明方法包含活性炭脱色，20-60℃内分段降温析晶过程。

发明人在全面总结马西替坦工艺杂质谱和降解杂质谱基础上，通过工艺合成，富集、分离提纯了杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E、杂质F、杂质G、杂质H、杂质I、杂质J、杂质K、杂质L、杂质M及杂质N，建立了全面的杂质高效液相(HPLC)分析方法，并用该方法跟踪精制过程中杂质残留。所用高效液相分析方法如下：

色谱柱：反向硅胶C18；

流动相：A：乙腈-水-甲酸(49∶51∶0.1)；

B：乙腈-水-甲酸(85∶15∶0.1)

所述的比例为体积比。

梯度洗脱，程序如下：

时间(分钟)	流动相A(％)	流动相B(％)
			0	100	0
10	100	0
			35	0	100
40	0	100
			42	100	0
50	100	0

检测波长：260nm

稀释剂：碳酸氢铵缓冲液(取碳酸氢铵1.58g，加水1000ml使溶解，用氨水调节pH值至9.0)-乙腈(20∶80)

样品浓度：1mg/ml

流速：1.0ml/min

进样量：20μl

本发明能有效清除杂质J，杂质L、杂质M及其他单个杂质的含量均可控制在0.1％以下(HPLC检测)。该方法具有操作简便、收率高、产品纯、节约成本等优点，总收率85％以上，马西替坦精制品纯度在99.9％以上。

与现有的技术相比，本发明的有益效果是：改变马西替坦结晶环境，避光操作，并对溶剂、试剂采取适度脱氧保护措施，从源头控制降解杂质的产生；本发明能有效清除杂质J及其他已知杂质，其他未知单个杂质的含量均在0.1％以下(HPLC检测)，精制后马西替坦纯度大于99.9％。结果见表1，图2。

由表1中可见，采用本发明方法精制后的纯品中杂质J较精制前降低明显，杂质M小于0.1％，其他已知杂质均未检出，纯度明显好于文献(MartinH.Bollietall.JournalofMedicinalChemistry.Pages7849-7861.)甲醇精制法及专利CN201410778483.8甲醇打浆法。

表1马西替坦粗品不同方法精制前后杂质比较

本发明具有操作简单，生产成本低，成品纯度及收率高的特点，可用于马西替坦粗品精加工的工业化生产。

四、附图说明

图1-4是马西替坦粗品、甲醇精制纯品、甲醇打浆纯品和本发明制得的纯品HPLC图谱。图中数据为保留时间(min)。其中：

图1是粗品图谱。

图2是甲醇精制纯品图谱。

图3是甲醇打浆纯品图谱。

图4是本发明制得的纯品图谱。

五、具体实施方式

下面对本发明的技术方案进行说明，以便于本技术领域的技术人员理解。

实施例1

将100ml乙酸乙酯于76-80℃加热回流煮沸30min，避光条件下，投入马西替坦粗品20g，于76-80℃搅拌溶解，加入0.2g活性炭，搅拌脱色10min，趁热压滤，滤液避光降温至45-50℃，搅拌析晶1.5h，再缓慢降温至25-30℃搅拌析晶1h，过滤，35-45℃减压干燥8h，得马西替坦纯品18.4g，收率92.0％，纯度99.94％。

实施例2

将75ml甲醇和375ml乙酸乙酯混合，于68-75℃加热回流1h，避光条件下，投入马西替坦粗品20g，于60-70℃搅拌溶解，加入0.2g活性炭，搅拌脱色15min，趁热压滤，滤液避光降温至50-55℃，搅拌析晶2h，再缓慢降温至20-25℃搅拌析晶1.5h，过滤，35-45℃减压干燥6h，得马西替坦纯品17.8g，收率89.0％，纯度99.97％。

实施例3

将200ml乙酸乙酯和300ml正己烷混合，于70-80℃加热回流1h，避光条件下，投入马西替坦粗品20g，于70-80℃搅拌溶解，加入0.2g活性炭，搅拌脱色5min，趁热压滤，滤液避光降温至45-50℃，搅拌析晶1.5h，再缓慢降温至20-25℃搅拌析晶1h，过滤，35-45℃减压干燥4h，得马西替坦纯品17.3g，收率86.5％，纯度99.98％。

实施例4

将325ml乙酸乙酯于76-80℃加热回流煮沸30min，避光条件下，投入马西替坦粗品65g，于76-80℃搅拌溶解，加入0.65g活性炭，搅拌脱色15min，趁热压滤，滤液避光降温至45-50℃，搅拌析晶2h，再缓慢降温至25-30℃搅拌析晶2h，过滤，35-45℃减压干燥6h，得马西替坦纯品59.5g，收率91.5％，纯度99.95％。

实施例5

将240ml甲醇和1200ml乙酸乙酯混合，于68-75℃加热回流1h，避光条件下，投入马西替坦粗品20g，于60-70℃搅拌溶解，加入0.65g活性炭，搅拌脱色10min，趁热压滤，滤液避光降温至45-50℃，搅拌析晶1h，再缓慢降温至25-30℃搅拌析晶2h，过滤，35-45℃减压干燥6h，得马西替坦纯品57.8g，收率88.9％，纯度99.96％。

实施例6

将2.7乙酸乙酯和4L正己烷混合，于70-80℃加热回流1h，避光条件下，投入马西替坦粗品270g，于70-80℃搅拌溶解，加入2.7g活性炭，搅拌脱色5min，趁热压滤，滤液避光降温至45-50℃，搅拌析晶1.5h，再缓慢降温至20-25℃搅拌析晶1h，过滤，35-45℃减压干燥6h，得马西替坦纯品235.5g，收率87.2％，纯度99.98％。

Claims (9)

1.一种高纯度马西替坦的精制方法，其特征在于包括如下步骤：

避光条件下，将马西替坦粗品用新沸过的溶剂加热溶解，加入活性炭脱色5-15min，趁热压滤，滤液避光降温至45-55℃搅拌析晶1-2h，再降温至20-30℃搅拌析晶1-2h，过滤，干燥，得马西替坦纯品。

2.根据权利要求1所述的精制方法，其特征在于：

所述溶剂选自乙酸乙酯、甲醇、正己烷中的一种或两种。

3.根据权利要求2所述的精制方法，其特征在于：

所述溶剂为乙酸乙酯，或者为乙酸乙酯和甲醇混合溶剂，或者为乙酸乙酯和正己烷混合溶剂。

4.根据权利要求3所述的精制方法，其特征在于：

乙酸乙酯和甲醇混合溶剂中乙酸乙酯和甲醇的体积比为1∶0.2-0.4；乙酸乙酯和正己烷混合溶剂中乙酸乙酯和正己烷的体积比为1∶1.5-2。

5.根据权利要求4所述的精制方法，其特征在于：

乙酸乙酯和甲醇混合溶剂中乙酸乙酯和甲醇的体积比为1∶0.2；乙酸乙酯和正己烷混合溶剂中乙酸乙酯和正己烷的体积比为1∶1.5。

6.根据权利要求1所述的精制方法，其特征在于：

马西替坦粗品与所述溶剂的投料比为1g∶5-25ml。

7.根据权利要求1所述的精制方法，其特征在于：

所述加热溶解的温度为60-80℃。

8.根据权利要求1所述的精制方法，其特征在于：

所述活性炭与马西替坦粗品的投料比为马西替坦粗品：活性炭＝1g∶0.01g。

9.根据权利要求1所述的精制方法，其特征在于：

所述干燥为35-45℃下减压干燥4-8h。