CN105412154B - 一种鲜地龙提取物的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种鲜地龙提取物的制备方法，所述方法，步骤如下：步骤1，将鲜地龙投入破骨机打碎，再将经破骨机打碎的鲜地龙投入骨泥磨打浆；步骤2，将打浆后的鲜地龙加入碱溶液，搅拌后静置；步骤3，步骤2静置后的提取液过滤或离心，得到清液；步骤4，清液浓缩，加入含醇的有机溶液，使药液的含醇量到40‑80％(v/v)，搅拌后静置；步骤5，过滤或离心，得到沉淀物，干燥后即得；其中所述的含醇有机溶液，选自甲醇，乙醇，丙二醇，正丙醇，异丙醇，正丁醇，叔丁醇，或者它们的混合物或它们和丙酮的混合物。

Description

一种鲜地龙提取物的制备方法

技术领域：

本发明涉及一种中药提取物的制备，特别涉及一种鲜地龙提取物的制备方法。

背景技术：

蚯蚓俗称曲蟮，中药称地龙，地龙性寒味咸。功能：清热、平肝、止喘、通络。主治高热狂燥，惊风抽搐，风热头痛，目赤、半身不遂等。

近年来发现，蚯蚓含蚓激酶，对心血管疾病有较好的治疗效果。蚯蚓酶不仅能激活纤维蛋白溶解酶而溶解血栓，更可直接溶解纤维蛋白。临床治疗血栓病有效率达80％以上，蚯蚓酶还有降低血液粘度，抑制血小板凝集、抗凝血，促进血流通畅等作用，对中风后遗症、动脉硬化、高血压和高血粘度症等有治疗作用。蚓激酶已被开发成药，服用方便、安全，不会像链激酶，脲激酶等药易引起高纤溶酶血症导致大出血。抗癌研究证明，地龙对食管癌有抑制作用，与化疗药物连用对肺癌的近期疗效优于单纯化疗。

蚯蚓富含蛋白质，脂肪和碳水化合物，粗蛋白含量高达72％，并含有人体所需的氨基酸、维生素和微量元素。不仅能作动物性饲料及生产药品和化妆品，而且可以供人食用。蚯蚓粪是一种很好的生物肥，含有丰富的氮、磷、钾、腐殖质、有机质及镁、硼、镍、锰等作物所需的微量元素，是水果、花卉、蔬菜和苗圃的廉价高效肥料。蚯蚓被广泛用于制药、轻化工业和养殖等，因此需求量大增，人工养殖受到重视，养殖蚯蚓，可利用有机废料(如：禽畜粪便、垃圾、植物槁柑、糖渣、食用苗渣、酒糟等)成本低，方法简单，促进了资源的循环利用。

地龙作药，由来已久。早在汉代即已正式载入《神农本草经》，到了明代，其医药用途相当广泛，李时珍在《本草纲目》中记载了地龙可治疗多种病症。

地龙的功效：清热、息风、平喘、通络、利尿。现代药理研究也证明，地龙确有解热、镇静、抗惊厥、平喘、降压等多种药理作用，如可以治疗高热惊劂；治疗哮喘及哮喘性支气管炎，治疗高血压病。地龙有降压作用，对原发性高血压有效，治疗躁狂型的精神病，治疗风湿性关节炎和中风后遗症。

蚯蚓的成分比较复杂.各种蚯蚓均含蚯蚓解热碱(Lumbrifebrine)、蚯蚓素(Lumbritin)、蚯蚓毒素(Terrestro-lumbrolysin).广地龙含6-羟基嘌呤(Hypoxanthine)、琥珀酸(Succinic acid)及L(+)谷氨酸等.蚯蚓亦含黄嘌呤(Xanthine)、腺嘌呤(Adenine)、鸟嘌呤(Guanine)、胆碱(Choline)、胍(Guanidine).尚含多种氨基酸,如丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、赖氨酸等.蚯蚓(Lumbricus spencer)的脂类部分中含硬脂酸、棕榈酸、高度不饱和脂肪酸、磷脂、胆甾醇等.蚯蚓(Lumbricus terrestris)的黄细胞组织(Chlorogogen tissue)中含碳水化合物、脂类、蛋白质及色素；所含碱性氨基酸有组氨酸、精氨酸、赖氨酸；其黄色素可能是核黄素(Riboflavine)或其相似物质.

地龙提取液在体外有很好的抗凝作用，能使血液的凝血时间，凝血酶时间、凝血酶原时间均显著延长，并呈明显量效关系；能降低血液黏度，抑制血栓形成.其抗凝机制是，其对凝血酶-纤维蛋白原反应有直接的抑制作用.地龙尚有促纤溶作用，能使已形成的血栓溶解。

地龙的提取方法公开在以下中国专利中，

现有鲜地龙提取物的制备方法不多，现有技术得到的鲜地龙提取物，有效成分含量低，药材浪费严重，其提取方法有待改善。

本发明人经过研究，通过加入特殊溶剂，得到一种新的鲜地龙提取物及其制备方法，从而完成了本发明。

发明内容：

本发明目的在于提供一种鲜地龙提取物的制备方法。

本发明所述方法，步骤如下：

步骤1，将鲜地龙投入破骨机打碎，再将经破骨机打碎的鲜地龙投入骨泥磨打浆；

步骤2，将打浆后的鲜地龙加入碱溶液，搅拌后静置；

步骤3，步骤2静置后的提取液过滤或离心，得到清液；

步骤4，清液浓缩，加入含醇的有机溶液，使药液的含醇量到40-80％(v/v)，搅拌后静置；

步骤5，过滤或离心，得到沉淀物，干燥后即得；

其中所述的含醇有机溶液，选自甲醇，乙醇，丙二醇，正丙醇，异丙醇，正丁醇，叔丁醇，或者它们的混合物或它们和丙酮的混合物。

本发明优选的制备方法，步骤如下：

步骤1，将鲜地龙投入破骨机打碎，再将经破骨机打碎的鲜地龙投入骨泥磨打浆；

步骤2，将打浆后的鲜地龙加入氢氧化钠溶液，搅拌后静置；

步骤3，步骤2静置后的提取液过滤或离心，得到清液；

步骤4，清液浓缩，加入乙醇和丙酮的混合溶液，使药液的含醇量为50-60％(v/v)，搅拌后静置；

步骤5，过滤或离心，得到沉淀物，干燥后即得本发明的鲜地龙提取物。

其中所述乙醇和丙酮的混合溶液，选自体积比为乙醇:丙酮＝1-20:1的混合溶液，优选乙醇：丙酮＝5-15:1，最优选的为乙醇：丙酮＝10:1。

本发明最优选的制备方法，步骤如下：

步骤1，将鲜地龙投入破骨机打碎，再将经破骨机打碎的鲜地龙投入骨泥磨打浆；

步骤2，将打浆后的鲜地龙加入5倍重量的5％(w/w)的氢氧化钠溶液，搅拌后静置；

步骤3，步骤2静置后的提取液过滤或离心，得到清液；

步骤4，清液浓缩到相对密度1.02～1.06(25℃)，加入乙醇：丙酮＝10:1(v/v)的混合溶液使药液的含醇量为55％(v/v)，搅拌后静置；

步骤5，过滤或离心，得到沉淀物，干燥后即得本发明的鲜地龙提取物。

本发明中所述粉碎，打浆，过滤，离心，浓缩，干燥等属于现有技术，可以采用现有技术中的任何一种可以实施这些方法的装置进行操作。

本发明和现有技术相比优点如下：

其中，现有技术是200610112471.7文献中的方法。

从以上表格可以看出，本发明的方法在多项指标上优于现有技术。

本发明针对现有技术的改进之处在于，使用乙醇：丙酮＝10:1作为沉淀溶剂，意外的发现，其沉淀物收率远高于单独使用乙醇，或单独使用丙酮作为沉淀溶剂，也比其他比例的溶剂乙醇：丙酮或乙醇和其他醇类溶剂的混合物来得更加优越，经过测定，每毫克含纤溶酶活性20000单位，高于现有技术的15000单位。

本发明所述乙醇可以使用100％的纯乙醇，也可以使用95％(v/v)的乙醇，优选使用100％的乙醇。

比较实验如下，

本发明的鲜地龙提取物可以用于以下用途：作为药物或保健品的活性成分，也可以进一步纯化得到蚓激酶或其他形式的药物活性物质，进一步加工成更高纯度的药物活性成分，如使用层析法进行纯化，可以得到每毫克含纤溶酶活性10万单位以上的纯品，另外，本发明特别适合制备成口服液，本发明意外的发现使用本发明技术得到的提取物，溶解迅速，口感不苦，适合制备成溶栓口服液，以利于患者使用。

具体实施方式：

以下通过实施例进一步说明本发明，但不作为对本发明的限制。

实施例1

步骤1，将鲜地龙10kg投入破骨机打碎，再将经破骨机打碎的鲜地龙投入骨泥磨打浆；

步骤2，将打浆后的鲜地龙加入5倍重量的5％(w/w)的氢氧化钠溶液，搅拌后静置；

步骤3，步骤1静置的提取液过滤或离心，得到清液；

步骤4，清液浓缩为相对密度在1.02～1.06(25℃)的清膏，加入浓度100％(v/v)的乙醇和丙酮的混合溶液(其中乙醇和丙酮体积比为10:1)使药液的含醇量为55％(v/v)，搅拌后静置，待沉淀析出；

步骤5，过滤或离心，去除上清液，得到沉淀物，沉淀物干燥后即得本发明的鲜地龙提取物500g。

实施例2

步骤1，将鲜地龙10kg投入破骨机打碎，再将经破骨机打碎的鲜地龙投入骨泥磨打浆；

步骤2，将打浆后的鲜地龙加入5倍重量的5％(w/w)的氢氧化钠溶液，搅拌后静置；

步骤3，步骤1静置的提取液过滤或离心，得到清液；

步骤4，清液浓缩为相对密度在1.02～1.06(25℃)的清膏，加入浓度95％(v/v)的乙醇和丙酮的混合溶液(其中乙醇和丙酮体积比为5:1)使药液的含醇量为40％(v/v)，搅拌后静置，待沉淀析出；

步骤5，过滤或离心，去除上清液，得到沉淀物，沉淀物干燥后即得本发明的鲜地龙提取物450g。

实施例3

步骤1，将鲜地龙10kg投入破骨机打碎，再将经破骨机打碎的鲜地龙投入骨泥磨打浆；

步骤2，将打浆后的鲜地龙加入5倍重量的5％(w/w)的氢氧化钠溶液，搅拌后静置；

步骤3，步骤1静置的提取液过滤或离心，得到清液；

步骤4，清液浓缩为相对密度在1.02～1.06(25℃)的清膏，加入浓度95％(v/v)的乙醇和丙酮的混合溶液(其中乙醇和丙酮体积比为15:1)使药液的含醇量为80％(v/v)，搅拌后静置，待沉淀析出；

步骤5，过滤或离心，去除上清液，得到沉淀物，沉淀物干燥后即得本发明的鲜地龙提取物450g。

经过检测，本发明的鲜地龙提取物，具有以下特征

水份	少于12％。
		含量测定	每毫克含纤溶酶活性20000单位

实施例4

胶囊剂的制备

取实施例1得到的药物活性物质，经过常规的制剂制备方法，制备成胶囊剂。

实施例5

片剂的制备

取实施例1得到的药物活性物质，经过常规的制剂制备方法，制备成片剂。

实施例6

丸剂的制备

取实施例1得到的药物活性物质，经过常规的制剂制备方法，制备成丸剂。

实施例7

颗粒剂的制备

取实施例1得到的药物活性物质，经过常规的制剂制备方法，制备成颗粒剂。

实施例8

口服液的制备

取实施例1得到的药物活性物质，经过常规的制剂制备方法，制备成口服液剂。

实施例9

滴丸剂的制备

取实施例1得到的药物活性物质，经过常规的制剂制备方法，制备成滴丸剂。

Claims (2)

1.一种鲜地龙提取物的制备方法，其特征在于，所述方法，步骤如下：

步骤1，将鲜地龙投入破骨机打碎，再将经破骨机打碎的鲜地龙投入骨泥磨打浆；

步骤2，将打浆后的鲜地龙加入氢氧化钠溶液，搅拌后静置；

步骤3，步骤2静置后的提取液过滤或离心，得到清液；

步骤4，清液浓缩，加入乙醇和丙酮的混合溶液，使药液的含醇量为50-60%（v/v），搅拌后静置；

步骤5，过滤或离心，得到沉淀物，干燥后即得；

其中所述乙醇和丙酮的混合溶液为乙醇：丙酮=10:1（v/v）的混合溶液。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤如下：

步骤1，将鲜地龙投入破骨机打碎，再将经破骨机打碎的鲜地龙投入骨泥磨打浆；

步骤2，将打浆后的鲜地龙加入5倍重量的5%（w/w）的氢氧化钠溶液，搅拌后静置；

步骤3，步骤2静置后的提取液过滤或离心，得到清液；

步骤4，清液浓缩到25℃相对密度1.02～1.06，加入乙醇：丙酮=10:1（v/v）的混合溶液使药液的含醇量为55%（v/v），搅拌后静置；

步骤5，过滤或离心，得到沉淀物，干燥后即得。