CN105408467A - 细胞浓缩液的制造方法以及细胞悬浊液处理系统 - Google Patents

细胞浓缩液的制造方法以及细胞悬浊液处理系统 Download PDF

Info

Publication number
CN105408467A
CN105408467A CN201480041539.XA CN201480041539A CN105408467A CN 105408467 A CN105408467 A CN 105408467A CN 201480041539 A CN201480041539 A CN 201480041539A CN 105408467 A CN105408467 A CN 105408467A
Authority
CN
China
Prior art keywords
cell suspension
container
cell
stockpiling
loop
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201480041539.XA
Other languages
English (en)
Inventor
谷口修平
梅田伸好
坂下敬章
樱井宙
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Kaneka Corp
Original Assignee
Kaneka Corp
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Kaneka Corp filed Critical Kaneka Corp
Publication of CN105408467A publication Critical patent/CN105408467A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M41/00—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation
    • C12M41/46—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of cellular or enzymatic activity or functionality, e.g. cell viability
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61M—DEVICES FOR INTRODUCING MEDIA INTO, OR ONTO, THE BODY; DEVICES FOR TRANSDUCING BODY MEDIA OR FOR TAKING MEDIA FROM THE BODY; DEVICES FOR PRODUCING OR ENDING SLEEP OR STUPOR
    • A61M1/00—Suction or pumping devices for medical purposes; Devices for carrying-off, for treatment of, or for carrying-over, body-liquids; Drainage systems
    • A61M1/02—Blood transfusion apparatus
    • A61M1/0209—Multiple bag systems for separating or storing blood components
    • A61M1/0218—Multiple bag systems for separating or storing blood components with filters
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61M—DEVICES FOR INTRODUCING MEDIA INTO, OR ONTO, THE BODY; DEVICES FOR TRANSDUCING BODY MEDIA OR FOR TAKING MEDIA FROM THE BODY; DEVICES FOR PRODUCING OR ENDING SLEEP OR STUPOR
    • A61M1/00—Suction or pumping devices for medical purposes; Devices for carrying-off, for treatment of, or for carrying-over, body-liquids; Drainage systems
    • A61M1/02—Blood transfusion apparatus
    • A61M1/0281—Apparatus for treatment of blood or blood constituents prior to transfusion, e.g. washing, filtering or thawing
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61M—DEVICES FOR INTRODUCING MEDIA INTO, OR ONTO, THE BODY; DEVICES FOR TRANSDUCING BODY MEDIA OR FOR TAKING MEDIA FROM THE BODY; DEVICES FOR PRODUCING OR ENDING SLEEP OR STUPOR
    • A61M1/00—Suction or pumping devices for medical purposes; Devices for carrying-off, for treatment of, or for carrying-over, body-liquids; Drainage systems
    • A61M1/34—Filtering material out of the blood by passing it through a membrane, i.e. hemofiltration or diafiltration
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61M—DEVICES FOR INTRODUCING MEDIA INTO, OR ONTO, THE BODY; DEVICES FOR TRANSDUCING BODY MEDIA OR FOR TAKING MEDIA FROM THE BODY; DEVICES FOR PRODUCING OR ENDING SLEEP OR STUPOR
    • A61M1/00—Suction or pumping devices for medical purposes; Devices for carrying-off, for treatment of, or for carrying-over, body-liquids; Drainage systems
    • A61M1/34—Filtering material out of the blood by passing it through a membrane, i.e. hemofiltration or diafiltration
    • A61M1/3403—Regulation parameters
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61M—DEVICES FOR INTRODUCING MEDIA INTO, OR ONTO, THE BODY; DEVICES FOR TRANSDUCING BODY MEDIA OR FOR TAKING MEDIA FROM THE BODY; DEVICES FOR PRODUCING OR ENDING SLEEP OR STUPOR
    • A61M1/00—Suction or pumping devices for medical purposes; Devices for carrying-off, for treatment of, or for carrying-over, body-liquids; Drainage systems
    • A61M1/34—Filtering material out of the blood by passing it through a membrane, i.e. hemofiltration or diafiltration
    • A61M1/3403—Regulation parameters
    • A61M1/3406—Physical characteristics of the filtrate, e.g. urea
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61M—DEVICES FOR INTRODUCING MEDIA INTO, OR ONTO, THE BODY; DEVICES FOR TRANSDUCING BODY MEDIA OR FOR TAKING MEDIA FROM THE BODY; DEVICES FOR PRODUCING OR ENDING SLEEP OR STUPOR
    • A61M1/00—Suction or pumping devices for medical purposes; Devices for carrying-off, for treatment of, or for carrying-over, body-liquids; Drainage systems
    • A61M1/34—Filtering material out of the blood by passing it through a membrane, i.e. hemofiltration or diafiltration
    • A61M1/3496—Plasmapheresis; Leucopheresis; Lymphopheresis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61M—DEVICES FOR INTRODUCING MEDIA INTO, OR ONTO, THE BODY; DEVICES FOR TRANSDUCING BODY MEDIA OR FOR TAKING MEDIA FROM THE BODY; DEVICES FOR PRODUCING OR ENDING SLEEP OR STUPOR
    • A61M1/00—Suction or pumping devices for medical purposes; Devices for carrying-off, for treatment of, or for carrying-over, body-liquids; Drainage systems
    • A61M1/36—Other treatment of blood in a by-pass of the natural circulatory system, e.g. temperature adaptation, irradiation ; Extra-corporeal blood circuits
    • A61M1/3601—Extra-corporeal circuits in which the blood fluid passes more than once through the treatment unit
    • A61M1/3603—Extra-corporeal circuits in which the blood fluid passes more than once through the treatment unit in the same direction
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61M—DEVICES FOR INTRODUCING MEDIA INTO, OR ONTO, THE BODY; DEVICES FOR TRANSDUCING BODY MEDIA OR FOR TAKING MEDIA FROM THE BODY; DEVICES FOR PRODUCING OR ENDING SLEEP OR STUPOR
    • A61M1/00—Suction or pumping devices for medical purposes; Devices for carrying-off, for treatment of, or for carrying-over, body-liquids; Drainage systems
    • A61M1/36—Other treatment of blood in a by-pass of the natural circulatory system, e.g. temperature adaptation, irradiation ; Extra-corporeal blood circuits
    • A61M1/3621—Extra-corporeal blood circuits
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61M—DEVICES FOR INTRODUCING MEDIA INTO, OR ONTO, THE BODY; DEVICES FOR TRANSDUCING BODY MEDIA OR FOR TAKING MEDIA FROM THE BODY; DEVICES FOR PRODUCING OR ENDING SLEEP OR STUPOR
    • A61M1/00—Suction or pumping devices for medical purposes; Devices for carrying-off, for treatment of, or for carrying-over, body-liquids; Drainage systems
    • A61M1/36—Other treatment of blood in a by-pass of the natural circulatory system, e.g. temperature adaptation, irradiation ; Extra-corporeal blood circuits
    • A61M1/3621—Extra-corporeal blood circuits
    • A61M1/3643—Priming, rinsing before or after use
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61M—DEVICES FOR INTRODUCING MEDIA INTO, OR ONTO, THE BODY; DEVICES FOR TRANSDUCING BODY MEDIA OR FOR TAKING MEDIA FROM THE BODY; DEVICES FOR PRODUCING OR ENDING SLEEP OR STUPOR
    • A61M1/00—Suction or pumping devices for medical purposes; Devices for carrying-off, for treatment of, or for carrying-over, body-liquids; Drainage systems
    • A61M1/36—Other treatment of blood in a by-pass of the natural circulatory system, e.g. temperature adaptation, irradiation ; Extra-corporeal blood circuits
    • A61M1/3621—Extra-corporeal blood circuits
    • A61M1/3643—Priming, rinsing before or after use
    • A61M1/3644—Mode of operation
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61M—DEVICES FOR INTRODUCING MEDIA INTO, OR ONTO, THE BODY; DEVICES FOR TRANSDUCING BODY MEDIA OR FOR TAKING MEDIA FROM THE BODY; DEVICES FOR PRODUCING OR ENDING SLEEP OR STUPOR
    • A61M1/00—Suction or pumping devices for medical purposes; Devices for carrying-off, for treatment of, or for carrying-over, body-liquids; Drainage systems
    • A61M1/36—Other treatment of blood in a by-pass of the natural circulatory system, e.g. temperature adaptation, irradiation ; Extra-corporeal blood circuits
    • A61M1/3692—Washing or rinsing blood or blood constituents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M27/00—Means for mixing, agitating or circulating fluids in the vessel
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M33/00—Means for introduction, transport, positioning, extraction, harvesting, peeling or sampling of biological material in or from the apparatus
    • C12M33/04—Means for introduction, transport, positioning, extraction, harvesting, peeling or sampling of biological material in or from the apparatus by injection or suction, e.g. using pipettes, syringes, needles
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M41/00—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation
    • C12M41/44—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of volume or liquid level
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M41/00—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation
    • C12M41/48—Automatic or computerized control
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M47/00—Means for after-treatment of the produced biomass or of the fermentation or metabolic products, e.g. storage of biomass
    • C12M47/02—Separating microorganisms from the culture medium; Concentration of biomass
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61M—DEVICES FOR INTRODUCING MEDIA INTO, OR ONTO, THE BODY; DEVICES FOR TRANSDUCING BODY MEDIA OR FOR TAKING MEDIA FROM THE BODY; DEVICES FOR PRODUCING OR ENDING SLEEP OR STUPOR
    • A61M1/00—Suction or pumping devices for medical purposes; Devices for carrying-off, for treatment of, or for carrying-over, body-liquids; Drainage systems
    • A61M1/36—Other treatment of blood in a by-pass of the natural circulatory system, e.g. temperature adaptation, irradiation ; Extra-corporeal blood circuits
    • A61M1/3621—Extra-corporeal blood circuits
    • A61M1/3626—Gas bubble detectors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61M—DEVICES FOR INTRODUCING MEDIA INTO, OR ONTO, THE BODY; DEVICES FOR TRANSDUCING BODY MEDIA OR FOR TAKING MEDIA FROM THE BODY; DEVICES FOR PRODUCING OR ENDING SLEEP OR STUPOR
    • A61M2205/00—General characteristics of the apparatus
    • A61M2205/33—Controlling, regulating or measuring
    • A61M2205/3379—Masses, volumes, levels of fluids in reservoirs, flow rates
    • A61M2205/3389—Continuous level detection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61M—DEVICES FOR INTRODUCING MEDIA INTO, OR ONTO, THE BODY; DEVICES FOR TRANSDUCING BODY MEDIA OR FOR TAKING MEDIA FROM THE BODY; DEVICES FOR PRODUCING OR ENDING SLEEP OR STUPOR
    • A61M2205/00—General characteristics of the apparatus
    • A61M2205/33—Controlling, regulating or measuring
    • A61M2205/3379—Masses, volumes, levels of fluids in reservoirs, flow rates
    • A61M2205/3393—Masses, volumes, levels of fluids in reservoirs, flow rates by weighing the reservoir

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Anesthesiology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Sustainable Development (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Computer Hardware Design (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Separation Using Semi-Permeable Membranes (AREA)

Abstract

一种细胞浓缩液的制造方法，使用细胞悬浊液处理系统，该细胞悬浊液处理系统具备：细胞悬浊液的存积容器，其具有溶液入口、循环出口以及循环入口；细胞悬浊液处理器，其在具有细胞悬浊液导入口、细胞悬浊液导出口以及滤液用出口的容器内填充有中空纤维分离膜，用于从细胞悬浊液过滤液体而进行浓缩；循环回路，其用于使细胞悬浊液一边在存积容器以及细胞悬浊液处理器之间循环一边进行浓缩；被浓缩后的细胞浓缩液的回收容器；回收路径，其用于将细胞浓缩液送至回收容器；注入路径，其用于向存积容器的溶液入口注入溶液；以及检测单元，其用于检测存积容器内或者循环回路的导入用连通管内的细胞浓缩液的液量，通过对存积容器内或者循环回路的导入用连通管内的细胞浓缩液的液量进行检测而使通液停止，从而能够减少细胞的损失地制造清洗除去了悬浊液中的不需要的成分的细胞悬浊液。

Description

细胞浓缩液的制造方法以及细胞悬浊液处理系统
技术领域
本发明涉及使用具有填充了中空纤维分离膜的细胞悬浊液处理器的细胞悬浊液处理系统来对细胞悬浊液进行浓缩的技术。
背景技术
在细胞医疗的领域中将用于治疗的细胞投药于患者的情况下，存在从生物体采取后马上投药于患者的情况，也存在暂时在生物体外培养后再次投药于患者的情况。一般，用于这些治疗的细胞通过适于治疗的悬浊液清洗，经过浓缩为适于投药的液量等细胞调制过程后，进行移植。清洗是指将悬浊有细胞的体液、培养基等置换为生理盐水、输液等。通过对细胞浓缩液进行反复进行稀释与浓缩的清洗处理，能够除去细胞浓缩液中的不需要的异物，从而能够在向人、动物的移植中适当地使用。
用于细胞医疗的细胞贵重，得到较多的细胞存在限制的情况占大多数，因此必须极力避免在细胞调制过程中损失细胞。另外，存在混入悬浊液中的成分对治疗带来负面影响的担忧，因此需要进行清洗，尽可能除去混入的成分。
根据以上内容，在细胞调制过程中，减少细胞的损失、极力减少不需要的成分混入细胞悬浊液来调制细胞是影响其后的治疗成果的重要课题。
作为细胞调制方法，公知有例如，使用了离心分离的浓缩、清洗操作。使用离心分离的方法为了细胞的浓缩清洗，通过使细胞悬浊液存积于封闭容器进行离心分离来使细胞沉淀。其后，在净化操作台等，打开容器除去悬浊液的上清液。此时，细胞向大气敞开，存在污染等的品质的劣化的可能性。因此，提出在封闭系统的离心操作(专利文献1)，从而担忧装置大型、成本增大。
另外，作为其他细胞调制方法，提出使用了旋转膜过滤器的细胞悬浊液的浓缩清洗方法(专利文献2)。根据该方法能够使装置紧凑简便，另外能够在封闭系统的回路无菌地操作细胞。但是，根据上述专利文献2，形成如下手段：为了自动地进行浓缩清洗工序，利用计重秤测定存积容器的重量并将重量变化反馈于工序的控制，从而自动地进行工序。然而，重量的变化中准确性、响应性存在担忧，从而工序切换是否正确地进行存在担忧，进而存在细胞悬浊液的浓缩、清洗未准确地进行，品质方面有缺陷的担忧。
与此相对地，提出使用过滤单元进行过滤、清洗的系统(专利文献3)。该系统是以将因手术等损失的患者血液再利用为目的系统。记载有在该系统中，边对存储于储藏槽的血液使用液面的液位传感器，边将存储于储藏槽的血液量保持在固定范围内。该方法中，通过气泡检测器对系统内的气泡进行检测来进行工序的控制。通过这样的气泡的检测进行控制，从而能够正确地迅速掌握回路内的液量，因此能够期待各工序的切换立即准确地进行。另一方面，上述的系统是以血液为对象的系统，血液处理中气泡的混入有害，因此未假设将检测气泡的系统用于作为细胞调制过程的目的不需要的成分的除去、为了减少投药的液量而进行浓缩的系统。另外，在以血液作为对象的浓缩系统中，如上述专利那样使用中空纤维，但在使用中空纤维膜的情况下，根据中空纤维的种类，存在气泡的混入对中空纤维的分离性能产生负面影响并对清洗效率产生影响的担忧。
专利文献1:日本特表2007－524396号公报
专利文献2:日本专利第4307714号公报
专利文献3:日本专利第3012689号公报
发明内容
本发明的目的在于解决使用了中空纤维分离膜的细胞浓缩液的制造中的上述课题，在于提供细胞的损失以及污染的担忧低、对细胞的损伤低、而且高精度地制造细胞浓缩液的方法。
另外，本发明的另一目的在于提供能够高效地制造上述那样的细胞浓缩液的细胞悬浊液处理系统。
本发明人们为了解决上述课题重复深入研究，结果发现，使用具备：与填充了中空纤维分离膜的细胞悬浊液处理器一起存积细胞的容器、检测该存积容器内或者将存积容器与细胞悬浊液处理器连通的管内的液量的设备、以及以使细胞悬浊液一边在存积容器与细胞悬浊液处理器之间循环一边可进行浓缩的方式连接的回路的细胞悬浊液处理系统，对上述存积容器内或者将上述存积容器与细胞悬浊液处理器连通的管内的液量进行检测，对基于上述循环的浓缩进行控制，由此细胞的污染的担忧低，对细胞的损伤低，细胞损失的担忧小，而且，发现能够高效率地制造细胞浓缩液，由此以至完成本发明。
即，本发明所提供的如以下那样。
(1)一种细胞浓缩液的制造方法，使用细胞悬浊液处理系统，该细胞悬浊液处理系统具备：
细胞悬浊液的存积容器，其具有溶液入口、循环出口以及循环入口；
细胞悬浊液处理器，其在具有细胞悬浊液导入口、细胞悬浊液导出口以及滤液用出口的容器内填充有中空纤维分离膜，用于从细胞悬浊液过滤液体而进行浓缩；
循环回路，其具有将上述存积容器的循环入口与上述细胞悬浊液处理器的细胞悬浊液导入口连通的导入用连通管、以及将上述细胞悬浊液处理器的细胞悬浊液导出口与上述存积容器的循环出口连通的导出用连通管，用于使细胞悬浊液一边在存积容器以及细胞悬浊液处理器之间循环一边进行浓缩；
被浓缩后的细胞浓缩液的回收容器；
回收路径，其用于将上述存积容器内、上述细胞悬浊液处理器内以及上述循环回路内的细胞浓缩液送至上述回收容器；
注入路径，其用于向上述存积容器的溶液入口注入溶液；以及
检测单元，其用于检测上述存积容器内或者循环回路的导入用连通管内的细胞浓缩液的液量，
在上述细胞浓缩液的制造方法中，
包括：
a)从上述溶液入口将细胞悬浊液供给到存积容器而进行存积的工序；
b)使存积容器内的细胞悬浊液经由循环回路的导入用连通管朝细胞悬浊液处理器流通，然后经由循环回路的导出用连通管向存积容器循环而将细胞悬浊液浓缩的工序；
c)通过对存积容器内或者循环回路的导入用连通管内的细胞浓缩液的液量进行检测，使上述b)工序停止的工序；以及
d)使上述存积容器内、上述细胞悬浊液处理器内以及循环回路内的细胞浓缩液经由回收路径送至回收容器而进行回收的工序。
(2)上述细胞浓缩液的制造方法中，在c)工序后，从上述存积容器的溶液入口将稀释液注入存积容器而将存积容器内的细胞浓缩液稀释之后，进一步反复b)工序以及c)工序。
(3)上述细胞浓缩液的制造方法中，在a)工序前，从溶液入口注入预充液(primingsolution；プライミング液)，进行预充。
(4)上述细胞浓缩液的制造方法中，并行实施a)工序和b)工序。
(5)上述细胞浓缩液的制造方法中，检测循环回路内的液量的检测单元是上述循环回路的导入用连通管所具备的气泡传感器。
(6)上述细胞浓缩液的制造方法中，检测存积容器内的液量的检测单元是在与存积容器平行且与存积容器下部连通的回路上所具备的一个以上的气泡传感器。
(7)上述细胞浓缩液的制造方法中，在与上述存积容器下部连通的回路具备腔室。
(8)上述细胞浓缩液的记载的制造方法中，在上述注入路径具备气泡传感器。
(9)一种细胞悬浊液处理系统，具备：
细胞悬浊液的存积容器，其具有溶液入口、循环出口以及循环入口；
细胞悬浊液处理器，其在具有细胞悬浊液导入口、细胞悬浊液导出口以及滤液用出口的容器内填充有中空纤维分离膜，用于从细胞悬浊液过滤液体而进行浓缩；
循环回路，其具有将上述存积容器的循环入口与上述细胞悬浊液处理器的细胞悬浊液导入口连通的导入用连通管、以及将上述细胞悬浊液处理器的细胞悬浊液导出口与上述存积容器的循环出口连通的导出用连通管，用于使细胞悬浊液一边在存积容器以及细胞悬浊液处理器之间循环一边进行浓缩；
回收容器，其回收被浓缩后的细胞浓缩液；
回收路径，其用于将上述存积容器内、上述细胞悬浊液处理器内以及上述循环回路内的细胞浓缩液送至上述回收容器；
注入路径，其用于向上述存积容器的溶液入口注入溶液；
检测单元，其用于检测上述存积容器内或者循环回路的导入用连通管内的细胞浓缩液的液量；以及
控制单元，其通过上述检测单元对细胞浓缩液浓缩至规定的液量进行检测，使细胞浓缩液从上述存积容器朝细胞悬浊液处理器的输送停止。
(10)上述细胞悬浊液处理系统中，检测循环回路内的液量的检测单元是上述循环回路的导入用连通管所具备的气泡传感器。
(11)上述细胞悬浊液处理系统中，检测存积容器内的液量的检测单元是在与存积容器平行且与存积容器下部连通的回路上所具备的气泡传感器。
(12)上述细胞悬浊液处理系统中，在与上述存积容器下部连通的回路具备腔室。
(13)上述细胞悬浊液处理系统中，在上述注入路径具备气泡传感器。
(14)上述细胞悬浊液处理系统中，上述溶液入口、循环出口以及循环入口全部位于存积容器的下部。
(15)上述细胞悬浊液处理系统中，在存积容器上部附近具备通气口，使存积容器内成为大气敞开系统。
本发明中，使用具备：与填充了中空纤维分离膜的细胞悬浊液处理器一起存积细胞的容器、将上述存积容器与上述细胞悬浊液处理器连接的回路、以及对上述存积容器内或者将存积容器与细胞悬浊液处理器连通的管内的液量进行检测的设备的细胞悬浊液处理系统，通过上述检测单元对细胞浓缩液浓缩至规定的液量的情况进行检测，使从上述存积容器朝细胞悬浊液处理器的细胞浓缩液的输送停止，由此能够在无菌的封闭系统高精度地制造对细胞的损伤低、细胞损失以及污染的担忧小的细胞浓缩液。因此，被浓缩了的细胞能够用于细胞治疗用。并且，在上述细胞悬浊液处理系统对预先处理条件进行编程而进行了细胞浓缩液制造的自动化的情况下，也能够高效地生产细胞浓缩液。
另外，细胞浓缩液的制造方法中，在细胞浓缩结束后，将稀释液注入存积容器而稀释了存积容器内的细胞浓缩液后，进一步反复进行b)浓缩工序以及c)浓缩停止工序，从而除去细胞浓缩液中的不需要的成分，能够得到纯度更高的细胞浓缩液。
另外，在细胞浓缩液的制造方法中，在a)存积工序前，从溶液入口注入预充液，进行预充，从而能够作业性良好地进行细胞浓缩。
另外，在细胞浓缩液的制造方法中，并行实施a)存积工序与b)浓缩工序，从而能够缩短处理时间。
另外，检测上述细胞悬浊液处理系统的循环回路内的液量的检测单元是上述循环回路的导入用连通管所具备的气泡传感器，从而与检测存积容器内的液量的情况相比，能够进一步浓缩细胞悬浊液，因此能够减少被浓缩的悬浊液量，能够降低悬浊液中的不需要的成分的量。
另外，检测上述存积容器内的液量的检测单元是在与存积容器平行且与存积容器下部连通的回路上所具备的一个以上的气泡传感器，从而与如检测存积容器的液面的情况那样需要检测范围大的气泡传感器相比，检测回路内的液面检测范围小，而能够通过更紧凑的气泡传感器来应对。
另外，在与上述存积容器下部连通的回路具备腔室，从而即使在回路错误地有气泡浸入，也能够减少通过气泡传感器检测出的故障的产生。
另外，在上述注入路径具备气泡传感器，从而即使预先不知道作为对象的细胞悬浊液的处理量，也由于细胞悬浊液消失而上述气泡传感器检测出进入注入路径的气泡，因此能够不用每次处理均设定泵的驱动时间地处理对象的液体全部量。
另外，上述溶液入口、循环出口以及循环入口全部位于存积容器的下部，从而通过溶液入口供给到上述存积容器的细胞悬浊液、用于稀释的溶液与在存积容器、循环回路内循环的液体高效地混合·搅拌，从而能够高效地进行浓缩以及稀释。
另外，在存积容器上部附近具备一个以上通气口，存积容器内成为大气敞开系统，从而在为了排除存积容器内的液体而使容器减压时，能够预防存积容器被压坏。
附图说明
图1是表示本发明的细胞悬浊液处理系统A的一实施方式的说明图。
图2是表示本发明的另一细胞悬浊液处理系统A’的实施方式的说明图。
图3是表示本发明的又一细胞悬浊液处理系统A”的实施方式的说明图。
图4是表示用于比较例的细胞悬浊液处理系统B的说明图。
具体实施方式
本发明的细胞浓缩液的制造方法使用细胞悬浊液处理系统，该细胞悬浊液处理系统具备：
细胞悬浊液的存积容器，其具有溶液入口、循环出口以及循环入口；
细胞悬浊液处理器，其在具有细胞悬浊液导入口、细胞悬浊液导出口以及滤液用出口的容器内填充有中空纤维分离膜，用于从细胞悬浊液过滤液体而进行浓缩；
循环回路，其具有将上述存积容器的循环入口与上述细胞悬浊液处理器的细胞悬浊液导入口连通的导入用连通管、以及将上述细胞悬浊液处理器的细胞悬浊液导出口与上述存积容器的循环出口连通的导出用连通管，用于使细胞悬浊液一边在存积容器以及细胞悬浊液处理器之间循环一边进行浓缩；
被浓缩后的细胞浓缩液的回收容器；
回收路径，其用于将上述存积容器内、上述细胞悬浊液处理器内以及上述循环回路内的细胞浓缩液送至上述回收容器；
注入路径，其用于向上述存积容器的溶液入口注入溶液；以及
检测单元，其用于检测上述存积容器内或者循环回路的导入用连通管内的细胞浓缩液的液量。
首先，对细胞悬浊液处理系统进行说明。
(存积容器)
细胞悬浊液处理系统所使用的存积容器是存积用于处理的细胞悬浊液，如后述那样将使细胞悬浊液在细胞悬浊液处理器通过而得到的细胞浓缩液循环并存积的容器。存积容器具有溶液入口、循环出口以及循环入口。
溶液入口是指用于将细胞悬浊液供给存积容器内的口。循环入口是指用于从存积容器向细胞悬浊液处理器进行通液的口，循环出口是指用于使由细胞悬浊液处理器浓缩后的细胞浓缩液在存积容器通过的口。
这些口优选设置于存积容器的下部。通过在下部设置这些口的全部，能够利用通过溶液入口而供给的细胞悬浊液、用于稀释的溶液与在存积容器、循环回路内循环的液体高效地搅拌来高效地进行浓缩以及稀释。
此外，作为溶液入口、循环出口、循环入口的数量分别为一个即可，但也可以根据需要增加为多个。例如，上述溶液入口不只是作为细胞悬浊液用的口，也能够作为稀释液、预充液用的口而使用，但也可以除了细胞悬浊液用的口之外，还设置稀释液、预充液用的入口。
另外，也可以设置与上述的三种口目的不同的口。例如可举出，用于使细胞浓缩液向回收容器通过的回收用口。通过将存积容器的回收用口与回收容器直接连接，能够迅速回收存积容器内的细胞浓缩液。
上述存积容器的材质只要不对细胞悬浊液或者细胞浓缩液中的细胞给予影响即可，但从操作性好的观点考虑，优选挠性的塑料。
另外，将存积容器的内表面进行雾面加工是从能够减少从存积容器内排出悬浊液时的残留液的方面等出发具有优点。
存积容器的容积能够不作特别限制。但是，若过大则用于稀释的稀释液量需要较多，因此优选1000mL以下。
另外，存积容器的形状、各口的构造、材质等根据处理的细胞悬浊液的种类、容积而适当地决定即可，没有特别限定。
另外，也可以在存积容器的上部具备通气口。通过具备该通气口成为能够进行存积容器内的气体与大气的交换的大气敞开系统，具有在例如排出存积容器内的液体时预防存积容器内减压而将存积容器压坏的优点。也可以在该通气口设置空气过滤器，能够防止不需要的成分从外部混入存积容器内。
(细胞悬浊液处理器)
细胞悬浊液处理器是用于从细胞悬浊液过滤液体而进行浓缩的装置，以能够从上述存积容器使细胞悬浊液通过的方式连接。
细胞悬浊液处理器在具有细胞悬浊液导入口、细胞悬浊液导出口以及滤液用出口的容器内填充有中空纤维分离膜。
上述细胞悬浊液导入口是用于将细胞悬浊液从上述存积容器导入细胞悬浊液处理器内的入口，与存积容器的循环入口连接。
上述细胞悬浊液导出口是用于将浓缩处理后的细胞悬浊液(细胞浓缩液)取出的出口。本发明中，通过使该细胞悬浊液导出口与上述存积容器的循环出口连接，能够在存积容器与细胞悬浊液处理器之间使细胞悬浊液循环而进行浓缩。
上述滤液用出口是用于将从细胞悬浊液过滤后的液体取出的出口。
用于细胞悬浊液处理器的中空纤维分离膜优选将几十～几千根左右的中空纤维捆束而得的物质填充于筒状的容器内。本发明中，中空纤维分离膜的配置可以成为直线状、挠曲状、螺旋状，只要在细胞悬浊液入口与细胞悬浊液出口之间保持中空纤维分离膜的两端，则不特别限定形状。
用于细胞悬浊液处理器的中空纤维分离膜从材料的安全性、稳定性等方面考虑能够使用合成高分子材料。其中，优选能够使用聚砜系、聚烯烃系或者纤维素系的高分子材料。另外，中空纤维分离膜的孔径只要不使细胞向外侧漏出即可，另外，为了能够高效地过滤不需要的成分最好优选大的孔径。具体而言，能够优选使用平均孔径为0.01μm以上且1.0μm以下的物质。另外，中空纤维的内径优选使用400μm以上且1000μm以下。
若从上述细胞悬浊液导入口供给的细胞悬浊液在中空纤维分离膜的内侧通过，则液体在中空纤维分离膜的外侧被过滤，而制作细胞浓缩液。
作为细胞悬浊液处理器的构造，例如可举出，在筒状容器填充有中空纤维分离膜，通过粘合剂等将中空纤维端部与筒状容器端部紧贴，并为了使细胞悬浊液能够在端部开口的中空纤维膜流入以及流出，而在筒状容器的端部具备有作为细胞悬浊液导入口、细胞悬浊液导出口的集流部分。在上述筒状容器具备一个以上滤液用出口即可，成为从中空纤维的内侧过滤的滤液从滤液用出口排出的构造。细胞悬浊液处理器需要为将中空纤维分离膜填充于封闭的容器之中的构造，但若具备细胞悬浊液导入口以及细胞悬浊液导出口从滤液用出口被构成中空纤维分离膜的壁材隔开的构造，则能够采用各种构造。例如，能够以用于血液透析等的透析器作为类似的构造而例示。
在细胞悬浊液处理器的滤液用出口设置有用于供通过中空纤维分离膜过滤的滤液流出的回路。优选滤液用的回路与废液容器最好连结，从而能够减少滤液向外部泄漏的担忧。
从上述滤液用出口取出的滤液能够在废液容器等通液而回收。废液容器只要是没有废液的泄漏的容器则没有特别限制。
可以在细胞悬浊液处理器的滤液用出口与废液容器之间设置有用于对滤液进行输送的泵，也可以不设置。例如，在将上述滤液用出口与废液容器连接的路径具备泵，从而能够以固定流量将过滤液排出，因此能够使处理时间固定，能够控制细胞悬浊液处理器的过滤效率。即，通过使泵驱动来促进滤液从细胞悬浊液处理器的排出，作为结果，能够促进细胞悬浊液处理器的浓缩处理。
另外，在使浓缩至规定的浓度的细胞浓缩液在回收容器通过而回收时，通过将上述泵停止，能够迅速回收。
另外，被回收的滤液可以保持原样废弃，也可以通过实施杀菌处理等再处理，作为细胞培养液的稀释液再利用。
另外，在细胞悬浊液处理器除了设置上述细胞悬浊液导入口、细胞悬浊液导出口以及滤液用出口之外，还可以设置用于将细胞悬浊液处理器内的细胞浓缩液送至回收容器的细胞浓缩液回收口。该细胞浓缩液回收口与回收容器连接即可。
(循环回路)
循环回路是具有连通上述存积容器的循环入口与上述细胞悬浊液处理器的细胞悬浊液导入口的导入用连通管、以及连通上述细胞悬浊液处理器的细胞悬浊液导出口与上述存积容器的循环出口的导出用连通管的回路。
本发明中，使细胞悬浊液一边通过该循环回路在存积容器以及细胞悬浊液处理器之间循环一边进行浓缩，从而能够制成细胞浓缩液。
作为构成循环回路的管，能够优选使用一般的塑料制的管。从安全性、耐久性方面考虑能够优选使用氯乙烯。
此外，从容易在上述循环回路进行细胞悬浊液或者细胞浓缩液的循环的控制的观点考虑，优选设置有泵。泵的个数没有特别限定，从容易控制的观点考虑，有一个即可。泵的位置设置于导入用连通管或者导出用连通管的任一个即可，若设置于导入用连通管，则能够向细胞悬浊液处理器的细胞悬浊液导入口导入压力高的溶液，能够高效地将液体分离，从而优选。
本发明中，可以在上述循环回路上的任一处设置分支部。构成为在该分支部通过配管与回收容器连结，从而能够将从该分支部直至回收容器的路径作为最终的回收路径，将处于存积容器内、细胞悬浊液处理器内以及循环回路内的细胞浓缩液迅速回收至回收容器。分支部优选设置于尽量靠近循环出口的位置，这样能够减少回收的工序中残存于从分支部直至出口的循环回路内的残留液量，因此优选。
(回收容器)
回收容器是用于将浓缩至规定的浓度的细胞浓缩液回收的容器。
回收容器是挠性的塑料容器即可。另外，若在其内表面实施雾面加工，则具有能够减少回收了细胞浓缩液后的残留液的优点。另外，回收容器也可以具备能够供针、注射器等连接的连接口。通过成为这样的结构，能够在将回收于回收容器的细胞浓缩液转移到其他容器的情况下等适当地使用。作为回收容器的形状没有特别限定。例如，若容量大则供被回收的细胞接触的容器的内表面积变大，有时附着的细胞残留于容器内而导致细胞的损失，因此优选容器内侧的容量小的形状。
(回收路径)
回收路径是用于将上述存积容器内、上述细胞悬浊液处理器内以及上述循环回路内的细胞浓缩液至上述回收容器的路径。作为构成回收路径的管，能够使用一般的塑料制的管，其中，从安全性、耐久性的方面考虑能够优选使用氯乙烯制的管。
作为上述回收路径，可举出以下三种方式。
1)在上述循环回路上设置分支部的情况下，连结该分支部与回收容器的路径成为回收路径。
2)在连接了上述存积容器的回收口与回收容器的情况下，该连接的路径成为回收路径。
3)在连接了细胞悬浊液处理器的细胞浓缩液回收口与回收容器的情况下，该连接的路径成为回收路径。
回收路径为上述任一种方式即可，也能够将两种以上并用。
(注入路径)
注入路径是用于向上述存积容器的溶液入口注入溶液的路径。作为构成注入路径的管，能够使用一般的塑料制的管，其中，从安全性、耐久性的方面考虑能够优选使用氯乙烯制的管。
此外，本发明所言的溶液，除了细胞悬浊液，还包括用于将浓缩细胞悬浊液而得的细胞浓缩液再次稀释的稀释液、用于在浓缩处理前对细胞悬浊液处理系统整体进行预充的预充液。
用于本发明的稀释液可举出生理盐水、输液、蒸馏水、缓冲液、培养基、血浆、包括无机盐、糖类、血清、蛋白质的液体等，特别是从安全性的观点考虑优选能够使用生理盐水、输液。另外，预充液也可举出生理盐水、输液、蒸馏水、缓冲液、培养基、血浆、包括无机盐、糖类、血清、蛋白质的液体等，特别是从安全性的观点考虑能够优选使用生理盐水、输液。本发明中稀释液以及预充液可以使用相同的溶液，也可以使用不同的溶液。在使用不同的溶液的情况下，能够从处于与存积容器的溶液入口连接的回路上的分支部分分离，设置连结于各连接部的回路。
另外，与上述存积容器的溶液入口连接的注入路径的另一个端部成为细胞培养袋用、稀释液袋用或者预充液袋用的连接部。
细胞培养袋连接部只要是能够与用于细胞培养的袋连接的形状，能够无特别限制地使用瓶针、鲁尔公接头、鲁尔母接头、锁连接等。
稀释液袋连接部或者预充液袋连接部只要是能够与存积稀释液或者预充液的袋连接的形状，能够无特别限制地使用瓶针、鲁尔公接头、鲁尔母接头、锁连接等。
另外，优选在上述注入路径设置有用于对液体进行输送的泵。通过泵能够稳定地向存积容器输送液体。另外，设置泵的位置处于将连接于细胞培养袋连接部、稀释液袋连接部以及预充液袋连接部的回路的合流位置与溶液入口连结的回路上，这样能够减少送液所需要的泵的个数，从而优选。
(检测单元)
检测单元是用于对上述存积容器内或者循环回路的导入用连通管内的细胞浓缩液的液量进行检测的单元。
作为检测上述存积容器内的液量的单元，可举出使用直接检测存积容器内的存积液的液面的气泡传感器。
另外，作为其他实施方式，也可以例如以在上下方向与存积容器平行的方式设置管，成为在下方将存积容器与管连通的回路，以管内的液面与存积容器内的液面相等的方式进行调整，在该管设置气泡传感器。若存在该单元，则能够通过气泡传感器来检测管内的液面来作为存积容器内的液面。
另外，也可以在与存积容器平行地设置的上述管的下方设置腔室。特别是通过设置内径比管大的腔室，能够期待减少向平行设置的管误浸入气泡而被检测出的故障的产生。
作为检测上述导入用连通管内的细胞浓缩液的液量的手段，可举出在与存积容器的循环入口连通的导入用连通管具备气泡传感器。若为该方式，则与检测上述存积容器内的液量的手段相比，能够进一步浓缩细胞悬浊液，因此能够减少被浓缩的悬浊液(细胞浓缩液)的量，从而具有能够降低悬浊液中的不需要的成分的量之类的优点。
另外，作为设置于上述导入用连通管的气泡传感器的位置，没有特别限定，通过设置于接近存积容器的位置，能够将连接存积容器与气泡传感器的回路的长度缩短。
另外，本发明的细胞悬浊液处理系统中，也可以在与存积容器的溶液入口连接的注入路径设置气泡传感器。在利用该气泡传感器检测出气泡的情况下能够停止细胞悬浊液、稀释液、预充液等溶液朝存积容器的存积。例如，具有即使不知道作为对象的细胞悬浊液的处理量，通过将上述气泡传感器设置于注入路径，也能够不用每次处理都设置泵的驱动时间而处理对象的液体全部量的优点。另外，也能够成为从泵的驱动时间开始加入固定量的溶液的工序。例如，在需要仅处理细胞悬浊液的一部分的情况下，通过设定泵的驱动时间能够进行处理。该气泡传感器能够设置于注入路径的任意位置，但在减少向注入路径内的残留液量的点上，设置于尽量靠近存积容器的位置是有利的。
另外，也可以在上述存积容器的上部设置其他的气泡传感器。通过设置该气泡传感器，能够辨别存积容器内的上部附近的溶液的有无。即，在供给了超过存积容器的容量的液体的情况下，上述传感器进行检测，能够作为警报向使用者通知。
用于本发明的细胞悬浊液处理系统的泵、气泡传感器使用一般使用的部件。另外，也能够在回路的所希望的位置设置夹具来进行流路的切换。作为这些泵、气泡传感器以及夹具，没有特别限定，例如也能够使用用于透析装置等的部件。
细胞悬浊液处理系统中，通过上述检测单元检测出细胞浓缩液浓缩至规定的液量，通过使细胞浓缩液从上述存积容器朝细胞悬浊液处理器的输送停止的控制单元，使浓缩结束。
在如本发明那样使用细胞悬浊液处理器进行细胞悬浊液的浓缩的情况下，若空气朝细胞悬浊液处理器进入则不只是浓缩能力降低，还存在回收细胞时在细胞悬浊液处理器内附着细胞等，使细胞的损失大幅度增加的问题。作为判断浓缩工序的结束时刻的手段，可以考虑预先确定朝细胞悬浊液处理器的送液量、从细胞悬浊液处理器废弃的废液量的方法。然而，实际上即使对细胞悬浊液处理系统的回路、路径上所设置的泵的送液量等进行调整，根据细胞悬浊液的浓度、细胞的大小、细胞的种类等，在细胞悬浊液处理器的浓缩的程度也不固定，从而有时进行浓缩直至还有空气进入细胞悬浊液处理器内为止，因此进行浓缩的期间需要监视细胞悬浊液处理器的状态，造成自动化困难的状况。
与此相对地，本发明中，使用上述检测单元判断细胞悬浊液的浓缩工序的结束，从而无论细胞悬浊液的状态等如何，均能够不会使空气进入细胞悬浊液处理器内地高精度地得到充分浓缩的细胞浓缩液。
以下，基于图例示出细胞悬浊液处理系统的例子。
图1是本发明所使用的细胞悬浊液处理系统A的一实施方式，示出具有用于检测循环回路的导入用连通管内的细胞浓缩液的液量的检测单元的系统的回路图。
图1的细胞悬浊液处理系统A具有前端进行了分支的注入路径27。分支的各个端部成为细胞培养袋连接部1以及稀释液袋连接部2。在比细胞培养袋连接部1以及稀释液袋连接部2更靠存积容器3侧的注入路径27分别设置有夹具22、21，通过开闭夹具22、21能够进行从细胞培养袋连接部1或者稀释液袋连接部2朝存积容器3供给的溶液的切换。
另外，在比分支部分更靠存积容器3侧的注入路径27设置有泵12，通过调整其驱动速度能够调整上述溶液朝存积容器3的供给量。
在比上述泵12更靠存积容器3侧的注入路径27设置有气泡传感器10。若供给的溶液消失而气泡传感器10检测出进入了注入路径27的空气，则通过停止泵12能够在最佳的时机停止上述溶液朝存积容器3的供给。另外，通过将上述泵12与气泡传感器10电连接，能够自动地调整溶液的供给。
注入路径27的另一端与处于存积容器3的下部的溶液入口15连接。
在存积容器3的下部除了上述溶液入口15之外，还配置有循环出口16、循环入口17，在存积容器3的上部以使存积容器3的内部成为大气压的方式具备空气过滤器8。另外，在从存积容器3直至空气过滤器8的路径以能够检测出供给了存积容器3的容积以上的溶液的方式设置有气泡传感器9。该气泡传感器9与上述泵12电连接，从而能够自动地停止溶液的供给。
上述循环入口17经由导入用连通管28而与细胞悬浊液处理器6上部的细胞悬浊液导入口18连接。在导入用连通管28设置有气泡传感器11，在比该气泡传感器11更靠细胞悬浊液处理器6侧的位置设置有泵13。通过驱动泵13，能够将存积容器3内的溶液朝细胞悬浊液处理器6供给。而且，在从存积容器3朝细胞悬浊液处理器6供给的溶液消失的情况下，若气泡传感器11检测出进入了导入用连通管28的空气，则能够停止泵13能够在最佳的时机停止溶液的供给而不会使空气进入细胞悬浊液处理器6内。另外，通过将上述泵13与气泡传感器11电连接，能够自动地调整溶液的供给。
在上述细胞悬浊液处理器6内填充有中空纤维分离膜(未图示)。从上述细胞悬浊液导入口18供给的细胞悬浊液在通过上述中空纤维分离膜时将液体分离。被分离的液体从设置于细胞悬浊液处理器6的上部侧面的滤液用出口20排出。
上述滤液用出口20经由配管与废液容器4连接，在该配管设置有促进滤液的排出与在上述中空纤维分离膜的浓缩的泵14。
处于细胞悬浊液处理器6下部的细胞悬浊液导出口19经由导出用连通管29与上述循环出口16连接。另外，在导出用连通管29设置有夹具23，通过开闭夹具23能够调整通过细胞悬浊液处理器6浓缩了的细胞浓缩液向存积容器3的循环。
另外，上述导入用连通管28与导出用连通管29成为在存积容器3以及细胞悬浊液处理器6之间使细胞悬浊液、细胞浓缩液循环的循环回路30。
在比上述夹具23更靠细胞悬浊液处理器6侧的导出用连通管29设置有分支部，该分支部与回收容器5经由回收路径31连接。在回收路径31设置有夹具24。该夹具24在如上述那样进行使用了循环回路30的循环·浓缩的期间关闭。而且，在回收细胞浓缩液的情况下，通过打开夹具24能够朝回收容器5供给细胞浓缩液。
另外，图2是本发明所使用的细胞悬浊液处理系统A’的另一实施方式，并示出具有用于检测存积容器内的细胞浓缩液的液量的检测单元的系统的回路图。
图2所示的细胞悬浊液处理系统A’中，注入路径27除了细胞培养袋连接部1、稀释液袋连接部2之外还具有预充液袋连接部26。预充液袋连接部26成为在比稀释液袋连接部2更靠存积容器3侧的注入路径27设置的分支部的另一端。在预充液袋连接部26与上述分支部之间设置有夹具25，通过开闭该夹具25能够调整预充液朝存积容器3的供给。
另外，在比设置于注入路径27的气泡传感器10更靠存积容器3侧的位置设置有其他分支部，通过设置使该分支部与存积容器3的上部连通的回路32，从而，在溶液装满存积容器3内的情况下，通过注入路径27而存积容器3内的液面与回路32内的溶液的液面成为平行。而且，在回路32的所希望的高度设置气泡传感器9a，从而与在存积容器3直接设置气泡传感器的情况下需要检测范围大的气泡传感器相比，检测回路32内的液面的范围小，而通过紧凑的气泡传感器也能够检测存积容器3内的溶液的液面。
另外，本发明中，进行浓缩时，通过设置于导入用连通管28的泵13使细胞悬浊液等在上述存积容器3与细胞悬浊液处理器6之间循环，但若回路32与导入用连通管28连结，则存在由于泵13的脉动的影响而通过回路32上的气泡传感器9a也难以进行正确的液面的测定的趋势。
与此相对地，如上述那样在作为与导入用连通管28不同的其他路径的注入路径27连接回路32，从而也具有能够将回路32的液面作为存积容器3内的液体的液面而正确地测定的优点。
构成回路32的管能够使用细口径的部件，从而能够抑制液面的摇晃，但口径没有特别限定。
另外，也可以在上述回路32的比上述气泡传感器9a更高的位置设置腔室7。通过设置该腔室7具有比回路32单独的情况下更能够抑制液面的摇晃的优点。
在上述回路32的比存积容器3的上部更高的位置设置分支部，在比该分支部更高的位置与图1同样地设置空气过滤器8即可。另外，也可以在分支部与空气过滤器8之间设置另一气泡传感器9b。通过成为这样的结构在供给了超过存积容器3的容积的细胞悬浊液的情况下气泡传感器9b工作使泵12停止，从而能够抑制细胞悬浊液从空气过滤器8泄漏。气泡传感器9b与泵12电连接从而能够进行自动的处理。
图2所示的细胞悬浊液处理系统A’的其他结构与图1相同因此省略说明。
另外，作为回收路径31，也可以是图3所示的细胞悬浊液处理系统A”那样的方式。
即，也可以在存积容器3设置回收口33，成为连接了该回收口33与回收容器5的回收路径31’。在该路径设置夹具34即可。
另外，也可以在细胞悬浊液处理器6设置细胞浓缩液回收口35，连接该细胞浓缩液回收口35与回收容器5而作为回收路径31”。在该路径设置夹具36即可。
(细胞浓缩液的制造方法)
本发明的细胞浓缩液的制造方法使用具有上述那样的结构的细胞悬浊液处理系统，该方法的特征在于，包括：
a)从上述溶液入口将细胞悬浊液供给到存积容器而进行存积的工序；
b)使存积容器内的细胞悬浊液经由循环回路的导入用连通管朝细胞悬浊液处理器流通，然后经由循环回路的导出用连通管向存积容器循环而将细胞悬浊液浓缩的工序；
c)通过对存积容器内或者循环回路的导入用连通管内的细胞浓缩液的液量进行检测，使上述b)工序停止的工序；以及
d)使上述存积容器内、上述细胞悬浊液处理器内以及循环回路内的细胞浓缩液经由回收路径送至回收容器而进行回收的工序。
以下对使用图1所示的细胞悬浊液处理系统制造细胞浓缩液的具体例进行说明。此外，制造前各夹具预先关闭。
a)工序(存积工序)
首先，将细胞培养袋连接部1与细胞培养袋连接，将稀释液袋连接部2与稀释液袋连接。然后确认打开夹具22，并夹具21关闭，从细胞培养袋连接部1驱动泵12而以规定的流速使细胞悬浊液存积于存积容器3。存积的液量若没有超过存积容器的容量则能够无特别限制地存积。另外，作为流速优选50mL/分～300mL/分的范围。
b)工序(浓缩工序)
接下来，打开夹具23，使用泵13在存积容器3与细胞悬浊液处理器6之间通过循环回路30而使细胞悬浊液循环，并且从细胞悬浊液使用中空纤维膜来过滤培养基等的液体成分，进行浓缩。此时循环的方向为从存积容器3的循环入口17向细胞悬浊液处理器6的细胞悬浊液导入口18流入的方向。浓缩细胞悬浊液的方法可以使用在细胞悬浊液在中空纤维分离膜的内侧流动时利用了在内侧流动的液体的压力的过滤、和使用了泵14的过滤中的任一个。
上述存积工序与浓缩工序可以反复进行直至连结于细胞培养袋连接部1的细胞悬浊液袋内的液量成为规定量，也可以使存积工序与浓缩工序同时并行。另外，也可以利用泵12的驱动时间等处理细胞悬浊液袋内的细胞悬浊液直至固定量，也可以在将细胞悬浊液全部输送后使用气泡传感器10对流入注入路径27的气泡进行检测从而控制基于泵12的送液。
c)工序(浓缩停止工序)
在进行细胞悬浊液的浓缩直至通过设置于导入用连通管28的气泡传感器11检测出气泡后，停止泵13、14而停止浓缩。图1所示的细胞悬浊液处理系统A中，如上述那样，能够实施直至不再向存积容器3内存积细胞浓缩液的精度高的浓缩。
d)工序(回收工序)
然后，关闭夹具23，打开夹具24，使泵13驱动，从而能够将处于上述存积容器3内、上述细胞悬浊液处理器6内以及循环回路30内的充分被浓缩了的细胞悬浊液经由回收路径31而回收于回收容器5。
另外，本发明中，也可以在上述a)工序前进行预充。该情况下，打开夹具21，关闭夹具22，从稀释液袋连接部2将生理盐水作为预充液向存积容器3存积。驱动泵12而以规定的流速存积于存积容器3。存积的液量没有特别限定，只要存积循环回路30以及细胞悬浊液处理器6被生理盐水浸渍的液量即可。流速优选50mL/分～300mL/分的范围。
接下来，确认打开夹具23，并关闭夹具24，对设置于将存积容器3与细胞悬浊液处理器6连结的循环回路30的导入用连通管28的泵13、以及设置在与过滤用出口20连接的路径上的泵14进行驱动，从而进行循环回路30内以及细胞悬浊液处理器6内的预充。通过泵13以规定的流速在循环回路30内装满预充液后，驱动泵14而在中空纤维分离膜的外侧过滤预充液，用预充液装满细胞悬浊液处理器内6。此时，循环方向为正方向、反方向均可，能够无特别限制地循环。若泵14比泵13的流速低则能够无特别限制地设定。此外，在泵14的流速比泵13的流速更高的情况下，存在成为没有在循环回路30内装满液体的状态的担忧，从而不优选。泵13的流速优选在50mL/分～500mL/分的范围进行调整。
通过预先进行上述那样的预充，能够作业效率高地进行细胞浓缩。
另外，本发明中，也可以在上述c)工序中停止了细胞悬浊液的浓缩后，打开夹具21，关闭夹具22，通过泵12将稀释液送至存积容器3内，从而稀释存积容器3内的细胞悬浊液(稀释工序)。在该稀释工序中稀释了细胞悬浊液内的不需要的成分后，再次在b)工序进行浓缩，接下来在c)工序停止浓缩，由此通过中空纤维膜过滤并除去细胞悬浊液内的不需要的成分，从而能够制造进一步除去了不需要的成分的细胞浓缩液。此外，该稀释工序也可以根据需要反复进行两次以上。
另外，气泡在c)工序后的导入用连通管28中进入到气泡传感器11的位置，因此使泵13朝反方向驱动而使细胞浓缩液的液面预先返回至存积容器3下部的循环入口17附近或者存积容器3内，从而再次进行b)工序的情况下也能够使气泡不进入细胞悬浊液处理器6。
另外，在进行上述预充与稀释时预充液与稀释液不同的情况下，将预充液所进入的袋与稀释液所进入的袋交替即可。
另外，上述a)工序的存积工序与b)工序的浓缩工序也可以并行实施。通过这样将a)工序与b)工序并行实施，具有能够缩短处理时间的优点。
另外，以下记载制造使用了图2所示的细胞浓缩处理系统A’的情况下的细胞浓缩液的具体例。
a)工序的存积工序能够与使用了图1所示的细胞浓缩处理系统A的情况同样地处理。但是，图2所示的细胞浓缩处理系统A’中，在a)工序前进行预充的情况下，首先，在预充液袋连接部26连接预充液袋并打开夹具21、25，将预充液存积于存积容器3即可。其后，在稀释液袋连接部2安装稀释液袋即可。
b)接着工序的浓缩工序，浓缩充分进行，通过设置于回路32的气泡传感器9a检测处于存积容器3内的细胞浓缩液的量，从而停止泵13、14而停止浓缩(c)工序)。
其后，也可以进一步在存积容器3追加细胞悬浊液，也可以如上述那样，进行基于稀释液的稀释工序。此时，再次进行b)工序、c)工序即可。
接下来，与使用了图1所示的细胞浓缩处理系统A的情况同样地进行d)工序的回收工序。
如以上那样，通过使用细胞悬浊液处理系统，能够降低细胞的损失以及污染的担忧，降低对细胞的损伤，而且能够高精度地制造细胞浓缩液。
作为通过本发明能够进行浓缩处理的细胞，例如可例示出，诱导多能干细胞(iPS细胞)、胚胎干细胞(ES细胞)、间充质干细胞、脂肪来源间充质细胞、脂肪基质干细胞、多能成体干细胞、骨髓基质细胞、造血干细胞等具有多分化能的成体干细胞、T细胞、B细胞、杀伤性T细胞(细胞毒性T细胞)、NK细胞、NKT细胞、调节性T细胞等淋巴样细胞、巨噬细胞、单核细胞、树突状细胞、粒细胞、红血球、血小板等、神经细胞、肌细胞、成纤维细胞、肝细胞、心肌细胞等体细胞、或者、进行了基因的导入、分化等处理的细胞。其中能够优选对粒细胞、T细胞、B细胞、杀伤性T细胞(细胞毒性T细胞)、NK细胞、NKT细胞、调节性T细胞、巨噬细胞、树突状细胞等免疫细胞使用。另外，也例示癌细胞、白血病细胞等各种的疾病所相关的细胞。
另外，作为本发明所使用的细胞悬浊液，只要是包含上述细胞的悬浊液没有特别限定，例如可例示，对脂肪、皮肤、血管、角膜、口腔、肾脏、肝脏、胰脏、心脏、神经、肌肉、前列腺、肠、羊膜、胎盘、脐带等生物体组织进行了酶处理、粉碎处理、提取处理、分解处理、超声波处理等后的悬浊液、对血液、骨髓液进行密度梯度离心处理、过滤处理、酶处理、分解处理、超声波处理等前处理而调制的细胞悬浊液等。或者，可例示，在生物体外使用培养液例如DMEM、α－MEM、MEM、IMEM、RPMI－1640、细胞因子、抗体、肽等刺激因素等来培养上述所例示的细胞后的细胞悬浊液。
实施例
以下，使用实施例对本发明进行说明。
(实施例1)
使用图1所示的细胞悬浊液处理系统A进行了细胞悬浊液的浓缩处理。
此外，夹具21、22、23、24均为关闭的状态。
另外，使用的细胞悬浊液使用将jurkat细胞在10％FBS的RPMI－1640培养基中培养而得的悬浊液。
将细胞悬浊液进入的袋与细胞培养袋连接部1连接，将生理盐水袋与稀释液袋连接部2连接。确认打开夹具21，并关闭夹具22，将泵12设定为300mL/分的流速并使其驱动60秒，将生理盐水存积于存积容器3。
接下来，确认打开夹具23，并关闭夹具24，将泵13设定为450mL/分，将泵14设定为150mL/分而使它们驱动，进行循环回路30内以及细胞悬浊液处理器6内的预充。此时，泵13的驱动方向成为在细胞悬浊液处理器6内使预充液从上向下流动的方向。若气泡传感器11检测出气泡则停止泵13以及泵14。
此外，为了不使气泡进入细胞悬浊液处理器6，因此使泵13向反方向驱动而使生理盐水的液面返回存积容器3下部的循环入口17附近。
然后打开夹具22，关闭夹具21，从细胞培养袋连接部1将泵12设定为300mL/分的流速使其驱动60秒，将细胞悬浊液存积于存积容器3(a)工序)。
接下来，以使泵12为200mL/分、泵13为450mL/分、泵14为200mL/分的方式设定各自的流速，使细胞悬浊液一边在循环回路30内循环一边进行浓缩。循环回路30内的通液方向成为从存积容器3的循环入口17向细胞悬浊液处理器6的细胞悬浊液导入口18流动的方向(b)工序)。
气泡传感器10检测出气泡后停止泵12。接下来，使泵13以及泵14驱动，对存积容器3内的细胞悬浊液进行浓缩，气泡传感器11检测出气泡后停止泵13以及泵14(c)工序)。
此外，为了不使气泡进入细胞悬浊液处理器6，因此使泵13向反方向驱动而使细胞悬浊液的液面返回存积容器3下部的循环入口17附近。
接下来，打开夹具21，关闭夹具22，使泵12以200mL/分、泵13以450mL/分分别驱动120秒，在存积容器3内追加生理盐水，在存积容器3内稀释了细胞悬浊液。接着，以使泵13为450mL/分、泵14为200mL/分的方式设定各自的流速，再次进行了细胞悬浊液的过滤·浓缩。此外，在气泡传感器11检测出了气泡后，停止泵13以及泵14。
最后，打开夹具24，关闭夹具23，以成为细胞悬浊液从存积容器3的循环入口17向细胞悬浊液处理器6的细胞悬浊液导入口18流动的方向的方式以100mL/分的流速使泵13驱动60秒，使处于存积容器3内、细胞悬浊液处理器6内以及循环回路30内的细胞悬浊液从回收路径31回收至回收容器5(d)工序)。
被回收的细胞悬浊液是细胞悬浊液中的不需要的成分减少至目标浓度的细胞浓缩液，在预充、浓缩(b)、以及浓缩停止(c)工序中，空气未向上述细胞悬浊液处理器6内侵入，因此能够不损失细胞地进行了高精度的浓缩。
将处理后的细胞生存率除以处理前的细胞生存率所得的细胞生存比率为99％以上，未见细胞的损伤。此外，细胞生存率由公知的方法测定。
(比较例1以及比较例2)
图4关于使用记载了概略情况的细胞悬浊液处理系统B而实施的细胞悬浊液的处理进行说明。图4所示的细胞悬浊液处理系统B除了未在循环回路30的导入用连通管28设置气泡传感器11以外，具有与图1所示的细胞悬浊液处理系统A相同的结构。
另外，比较例1与比较例2中，使用在与实施例1相同的条件下制成的细胞悬浊液，细胞培养袋使用了不同的袋。
将细胞悬浊液进入的袋与细胞培养袋连接部1连接，将生理盐水袋与稀释液袋连接部2连接。打开夹具21，关闭夹具22，使泵12设定为300mL/分的流速，并使其驱动60秒而将生理盐水存积于存积容器3。
接下来，确认打开夹具23，关闭夹具24，将泵13设定为450mL/分，将泵14设定为150mL/分的流速，进行了循环回路30内以及细胞悬浊液处理器6内的预充。此时，泵13的驱动方向成为在细胞悬浊液处理器6内使预充液从上向下流动的方向。使泵13、14驱动100秒后，停止泵13、14。
接下来打开夹具22，关闭夹具21，从细胞培养袋连接部1将泵12设定为300mL/分的流速，并使其驱动60秒而将细胞悬浊液存积于存积容器3(a)工序)。
接下来，以使泵12为200mL/分、泵13为450mL/分、泵14为200mL/分的方式设定流速而使它们驱动，使细胞悬浊液一边在存积容器3与细胞悬浊液处理器6之间通过循环回路30循环一边进行浓缩。循环回路30内的通液方向成为从存积容器3的循环入口17向细胞悬浊液处理器6的细胞悬浊液导入口18流动的方向(b)工序)。
气泡传感器10检测出了气泡后停止泵12。接下来，使泵13以及泵14驱动，对存积容器3内的细胞悬浊液进行浓缩，使泵14驱动70秒后，停止泵13以及泵14(c)工序)。此外，泵14的70秒这样的驱动时间是考虑泵12、13、14的流速而预料能够进行理想的浓缩的时间。
接下来，打开夹具21，关闭夹具22，以使泵12为200mL/分、泵13为450mL/分的方式对流速进行调整，并使它们驱动120秒，在存积容器3内追加生理盐水，从而稀释了存积容器3内的细胞悬浊液。接着，以使泵13为450mL/分、泵14为200mL/分的方式设定流速，进行了细胞悬浊液的过滤。使泵12驱动120秒后，停止。
最后，打开夹具24，关闭夹具23，以100mL/分使泵13向细胞悬浊液从存积容器3的循环入口17向细胞悬浊液处理器6的细胞悬浊液导入口18流动的方向驱动60秒，将处于细胞悬浊液处理器6内以及循环回路30内的细胞悬浊液从回收路径31回收至回收容器5(d)工序)。
其结果，比较例1中，在作为b)工序的浓缩工序中，在停止了人泵13以及泵14时，原因不明，但通过泵14在处理时间内过滤的量比设定的流量大，因此成为在循环回路30内未充分充满液体的状态，造成使回收的细胞悬浊液中的细胞损失的结果。
另外，通过相同的处理方法进行的比较例2中，原因不明，但与比较例1相反通过泵14过滤的液体量减少，因此移至通过生理盐水稀释的工序前的存积容器3内的液量变多，无法使细胞浓缩液内的不需要成分的量降低至目标浓度。
附图标记的说明
1...细胞培养袋连接部；2...稀释液袋连接部；3...存积容器；4...废液容器；5...回收容器；6...细胞悬浊液处理器；7...腔室；8...空气过滤器；9...气泡传感器；10...气泡传感器；11...气泡传感器；12～14...泵；15...溶液入口；16...循环出口；17...循环入口；18...细胞悬浊液导入口；19...细胞悬浊液导出口；20...滤液用出口；21～25、34、36...夹具；26...预充液袋连接部；27...注入路径；28...导入用连通管；29...导出用连通管；30...循环回路；31...回收路径；32...回路；33...回收口；35...细胞浓缩液回收口；A、A’、A”...细胞悬浊液处理系统；B...比较例1、2所使用的细胞悬浊液处理系统。

Claims (15)

1.一种细胞浓缩液的制造方法，使用细胞悬浊液处理系统，该细胞悬浊液处理系统具备：
细胞悬浊液的存积容器，其具有溶液入口、循环出口以及循环入口；
细胞悬浊液处理器，其在具有细胞悬浊液导入口、细胞悬浊液导出口以及滤液用出口的容器内填充有中空纤维分离膜，用于从细胞悬浊液过滤液体而进行浓缩；
循环回路，其具有将所述存积容器的循环入口与所述细胞悬浊液处理器的细胞悬浊液导入口连通的导入用连通管、以及将所述细胞悬浊液处理器的细胞悬浊液导出口与所述存积容器的循环出口连通的导出用连通管，用于使细胞悬浊液一边在存积容器以及细胞悬浊液处理器之间循环一边进行浓缩；
被浓缩后的细胞浓缩液的回收容器；
回收路径，其用于将所述存积容器内、所述细胞悬浊液处理器内以及所述循环回路内的细胞浓缩液送至所述回收容器；
注入路径，其用于向所述存积容器的溶液入口注入溶液；以及
检测单元，其用于检测所述存积容器内或者循环回路的导入用连通管内的细胞浓缩液的液量，
所述细胞浓缩液的制造方法的特征在于，
包括：
a)从所述溶液入口将细胞悬浊液供给到存积容器而进行存积的工序；
b)使存积容器内的细胞悬浊液经由循环回路的导入用连通管朝细胞悬浊液处理器流通，然后经由循环回路的导出用连通管向存积容器循环而将细胞悬浊液浓缩的工序；
c)通过对存积容器内或者循环回路的导入用连通管内的细胞浓缩液的液量进行检测，使所述b)工序停止的工序；以及
d)使所述存积容器内、所述细胞悬浊液处理器内以及循环回路内的细胞浓缩液经由回收路径送至回收容器而进行回收的工序。
2.根据权利要求1所述的制造方法，其特征在于，
在c)工序后，从所述存积容器的溶液入口将稀释液注入存积容器而将存积容器内的细胞浓缩液稀释之后，进一步反复b)工序以及c)工序。
3.根据权利要求1或2所述的制造方法，其特征在于，
在a)工序前，从溶液入口注入预充液，进行预充。
4.根据权利要求1～3中任一项所述的制造方法，其特征在于，
并行实施a)工序和b)工序。
5.根据权利要求1～4中任一项所述的制造方法，其特征在于，
检测循环回路内的液量的检测单元是所述循环回路的导入用连通管所具备的气泡传感器。
6.根据权利要求1～4中任一项所述的制造方法，其特征在于，
检测存积容器内的液量的检测单元是在与存积容器平行且与存积容器下部连通的回路上所具备的一个以上的气泡传感器。
7.根据权利要求6所述的制造方法，其特征在于，
在与所述存积容器下部连通的回路具备腔室。
8.根据权利要求1～7中任一项所述的制造方法，其特征在于，
在所述注入路径具备气泡传感器。
9.一种细胞悬浊液处理系统，其特征在于，具备：
细胞悬浊液的存积容器，其具有溶液入口、循环出口以及循环入口；
细胞悬浊液处理器，其在具有细胞悬浊液导入口、细胞悬浊液导出口以及滤液用出口的容器内填充有中空纤维分离膜，用于从细胞悬浊液过滤液体而进行浓缩；
循环回路，其具有将所述存积容器的循环入口与所述细胞悬浊液处理器的细胞悬浊液导入口连通的导入用连通管、以及将所述细胞悬浊液处理器的细胞悬浊液导出口与所述存积容器的循环出口连通的导出用连通管，用于使细胞悬浊液一边在存积容器以及细胞悬浊液处理器之间循环一边进行浓缩；
回收容器，其回收被浓缩后的细胞浓缩液；
回收路径，其用于将所述存积容器内、所述细胞悬浊液处理器内以及所述循环回路内的细胞浓缩液送至所述回收容器；
注入路径，其用于向所述存积容器的溶液入口注入溶液；
检测单元，其用于检测所述存积容器内或者循环回路的导入用连通管内的细胞浓缩液的液量；以及
控制单元，其通过所述检测单元对细胞浓缩液浓缩至规定的液量进行检测，使细胞浓缩液从所述存积容器朝细胞悬浊液处理器的输送停止。
10.根据权利要求9所述的细胞悬浊液处理系统，其特征在于，
检测循环回路内的液量的检测单元是所述循环回路的导入用连通管所具备的气泡传感器。
11.根据权利要求9所述的细胞悬浊液处理系统，其特征在于，
检测存积容器内的液量的检测单元是在与存积容器平行且与存积容器下部连通的回路上所具备的气泡传感器。
12.根据权利要求11所述的细胞悬浊液处理系统，其特征在于，
在与所述存积容器下部连通的回路具备腔室。
13.根据权利要求9～12中任一项所述的细胞悬浊液处理系统，其特征在于，
在所述注入路径具备气泡传感器。
14.根据权利要求9～13中任一项所述的细胞悬浊液处理系统，其特征在于，
所述溶液入口、循环出口以及循环入口全部位于存积容器的下部。
15.根据权利要求9～14中任一项所述的细胞悬浊液处理系统，其特征在于，
在存积容器上部附近具备通气口，使存积容器内成为大气敞开系统。
CN201480041539.XA 2013-07-23 2014-07-16 细胞浓缩液的制造方法以及细胞悬浊液处理系统 Pending CN105408467A (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2013-152755 2013-07-23
JP2013152755 2013-07-23
PCT/JP2014/068936 WO2015012174A1 (ja) 2013-07-23 2014-07-16 細胞濃縮液の製造方法および細胞懸濁液処理システム

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN105408467A true CN105408467A (zh) 2016-03-16

Family

ID=52393217

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201480041539.XA Pending CN105408467A (zh) 2013-07-23 2014-07-16 细胞浓缩液的制造方法以及细胞悬浊液处理系统

Country Status (5)

Country Link
US (2) US10113144B2 (zh)
EP (1) EP3026107B1 (zh)
JP (1) JP6384166B2 (zh)
CN (1) CN105408467A (zh)
WO (1) WO2015012174A1 (zh)

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105925475A (zh) * 2016-06-16 2016-09-07 芜湖中科医凌生命科技有限公司 一种全自动浓缩处理仪
CN108441407A (zh) * 2018-04-02 2018-08-24 天晴干细胞股份有限公司 一种细胞自动纯化冻存装置
CN110636872A (zh) * 2017-05-19 2019-12-31 国立大学法人德岛大学 原液处理装置以及原液处理装置的操作方法
TWI741033B (zh) * 2016-09-27 2021-10-01 米満吉和 用以無菌處理懸濁液之器具、細胞製備用套組及細胞之製備方法
WO2022036738A1 (zh) * 2020-08-19 2022-02-24 上海心光生物医药有限责任公司 流体处理方法及流体处理装置
CN115970491A (zh) * 2021-10-14 2023-04-18 厦门大学 超滤系统
US12011691B2 (en) 2020-08-19 2024-06-18 Shanghai Xinguang Bio-Pharmaceutical Ltd. Fluid treatment method, cycle treatment device and system

Families Citing this family (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP3305886A4 (en) * 2015-05-25 2019-01-23 Nipro Corporation CULTURE DEVICE
WO2016190312A1 (ja) * 2015-05-25 2016-12-01 ニプロ株式会社 培養装置
EP3305887B1 (en) * 2015-05-25 2021-04-07 Nipro Corporation Concentrating device and method for concentrating cell suspension
JP6457338B2 (ja) * 2015-05-28 2019-01-23 株式会社日立製作所 液体還流容器、細胞濃縮装置及び細胞濃縮システム
CA2988321A1 (en) * 2015-06-04 2016-12-08 Fondazione Irccs Ca' Granda - Ospedale Maggiore Policlinico System of multiple bags and method for the preparation of hemocomponents
JP6930068B2 (ja) * 2016-03-30 2021-09-01 東洋紡株式会社 中空糸モジュールを用いる細胞培養方法
EP3299049B1 (en) * 2016-09-21 2022-11-02 Fenwal, Inc. System for maintaining patient fluid balance during an extracorporeal therapeutic cell treatment
EP3565614A1 (en) * 2017-01-08 2019-11-13 Cesca Therapeutics Inc. Devices and methods for bio-processing cellular samples
WO2019059279A1 (ja) * 2017-09-20 2019-03-28 株式会社カネカ 細胞懸濁液を調製するためのデバイス、システム及び方法
AU2018398377B2 (en) 2017-12-28 2024-09-26 I-Sep System and method for treating haemorrhagic fluid for autotransfusion
EP3793737A4 (en) * 2018-05-13 2022-02-09 GPB Scientific, Inc. COMBINED CLEANING AND CONCENTRATION BY DETERMINISTIC LATERAL DISPLACEMENT WITH A RECIRCULATION PRODUCT
US11445723B2 (en) * 2018-10-02 2022-09-20 The Doshisha Method and container for preserving corneal endothelial cells
CN113748199A (zh) 2019-03-26 2021-12-03 株式会社美加细胞 细胞悬浮液处理装置
CA3222490A1 (en) * 2021-06-16 2022-12-22 Aldona J. Spiegel Closed-loop adipose transplant systems and kits, controllers, and methods related thereto
JP7524841B2 (ja) 2021-06-24 2024-07-30 横河電機株式会社 細胞培養プロセスに使用するための溶液処理デバイス

Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5055198A (en) * 1990-03-07 1991-10-08 Shettigar U Ramakrishna Autologous blood recovery membrane system and method
CN2601095Y (zh) * 2003-02-25 2004-01-28 中国人民解放军军事医学科学院野战输血研究所 血细胞透析洗涤机
CN1604798A (zh) * 2001-12-18 2005-04-06 株式会社Jms 自动血液透析装置及使用该装置的起动方法
CN101242864A (zh) * 2005-07-08 2008-08-13 泰尔茂株式会社 血液成分采集回路以及血液成分采集装置
WO2010057318A1 (en) * 2008-11-24 2010-05-27 Early Warning Inc. Devices and methods for providing concentrated biomolecule condensates to biosensing devices
JP2012120456A (ja) * 2010-12-06 2012-06-28 Kaneka Corp プライミング時の気泡の除去を簡便にする部材を備えた細胞溶液処理器具およびその使用方法
CN102639167A (zh) * 2009-12-11 2012-08-15 通用电气公司 用于处理复杂生物材料的一次性流体路径系统和方法
JP2012210187A (ja) * 2011-03-31 2012-11-01 Kaneka Corp 細胞懸濁液の濃縮方法
WO2013061859A1 (ja) * 2011-10-24 2013-05-02 株式会社カネカ 細胞濃縮液の製造方法

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4964976A (en) * 1989-04-04 1990-10-23 Lysaght Michael J Optimized filter and method
US6251295B1 (en) 1998-01-08 2001-06-26 Nexell Therapeutics Inc. Method for recirculation washing of blood cells
US6302860B1 (en) * 1999-02-17 2001-10-16 Medtronic, Inc. Venous filter for assisted venous return
US7204958B2 (en) * 2003-01-14 2007-04-17 Medtronic, Inc. Extracorporeal blood circuit air removal system and method
US7201870B2 (en) * 2003-01-14 2007-04-10 Medtronic, Inc. Active air removal system operating modes of an extracorporeal blood circuit
US7335334B2 (en) * 2003-01-14 2008-02-26 Medtronic, Inc. Active air removal from an extracorporeal blood circuit
JP2007524396A (ja) 2003-06-25 2007-08-30 サイトリ セラピューティクス インコーポレイテッド 組織から再生細胞を分離して濃縮するためのシステム及び方法
WO2008125893A1 (en) * 2007-04-12 2008-10-23 Gambro Lundia Ab Method and apparatus for priming an extracorporeal blood circuit.

Patent Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5055198A (en) * 1990-03-07 1991-10-08 Shettigar U Ramakrishna Autologous blood recovery membrane system and method
CN1604798A (zh) * 2001-12-18 2005-04-06 株式会社Jms 自动血液透析装置及使用该装置的起动方法
CN2601095Y (zh) * 2003-02-25 2004-01-28 中国人民解放军军事医学科学院野战输血研究所 血细胞透析洗涤机
CN101242864A (zh) * 2005-07-08 2008-08-13 泰尔茂株式会社 血液成分采集回路以及血液成分采集装置
WO2010057318A1 (en) * 2008-11-24 2010-05-27 Early Warning Inc. Devices and methods for providing concentrated biomolecule condensates to biosensing devices
CN102639167A (zh) * 2009-12-11 2012-08-15 通用电气公司 用于处理复杂生物材料的一次性流体路径系统和方法
JP2012120456A (ja) * 2010-12-06 2012-06-28 Kaneka Corp プライミング時の気泡の除去を簡便にする部材を備えた細胞溶液処理器具およびその使用方法
JP2012210187A (ja) * 2011-03-31 2012-11-01 Kaneka Corp 細胞懸濁液の濃縮方法
WO2013061859A1 (ja) * 2011-10-24 2013-05-02 株式会社カネカ 細胞濃縮液の製造方法

Cited By (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105925475A (zh) * 2016-06-16 2016-09-07 芜湖中科医凌生命科技有限公司 一种全自动浓缩处理仪
CN105925475B (zh) * 2016-06-16 2018-02-09 芜湖中科医凌生命科技有限公司 一种全自动浓缩处理仪
TWI741033B (zh) * 2016-09-27 2021-10-01 米満吉和 用以無菌處理懸濁液之器具、細胞製備用套組及細胞之製備方法
CN110636872A (zh) * 2017-05-19 2019-12-31 国立大学法人德岛大学 原液处理装置以及原液处理装置的操作方法
CN108441407A (zh) * 2018-04-02 2018-08-24 天晴干细胞股份有限公司 一种细胞自动纯化冻存装置
WO2022036738A1 (zh) * 2020-08-19 2022-02-24 上海心光生物医药有限责任公司 流体处理方法及流体处理装置
CN115697430A (zh) * 2020-08-19 2023-02-03 上海心光生物医药有限责任公司 流体处理方法及流体处理装置
CN115697430B (zh) * 2020-08-19 2023-10-03 上海心光生物医药有限责任公司 流体处理方法及流体处理装置
US12011691B2 (en) 2020-08-19 2024-06-18 Shanghai Xinguang Bio-Pharmaceutical Ltd. Fluid treatment method, cycle treatment device and system
CN115970491A (zh) * 2021-10-14 2023-04-18 厦门大学 超滤系统

Also Published As

Publication number Publication date
US10533151B2 (en) 2020-01-14
US20190024037A1 (en) 2019-01-24
JP2015042167A (ja) 2015-03-05
WO2015012174A1 (ja) 2015-01-29
US10113144B2 (en) 2018-10-30
EP3026107A1 (en) 2016-06-01
EP3026107A4 (en) 2017-03-15
US20160168529A1 (en) 2016-06-16
JP6384166B2 (ja) 2018-09-05
EP3026107B1 (en) 2020-04-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN105408467A (zh) 细胞浓缩液的制造方法以及细胞悬浊液处理系统
US8439889B2 (en) Blood bag system and blood treating method
JP5865258B2 (ja) 複合生体物質を処理するための使い捨て型流体経路システムおよび方法
JP5723026B2 (ja) 血小板を収集し、かつ血漿の返血を予測するためのシステムおよび方法
JP6457338B2 (ja) 液体還流容器、細胞濃縮装置及び細胞濃縮システム
US20080171951A1 (en) Integrated System for Collecting, Processing and Transplanting Cell Subsets, Including Adult Stem Cells, for Regenerative Medicine
US10022487B2 (en) Single collection bag blood collection system, method and apparatus
US9603356B2 (en) Method for producing cell concentrate
US10006842B2 (en) Method for producing cell concentrate
WO2016067946A1 (ja) 中空糸膜モジュールのプライミング方法
CN116144500A (zh) 具有恒流泵/管道系统的固定床生物反应器
JPH03284263A (ja) 血漿および濃厚赤血球採取用器具
JP2015012837A (ja) 細胞濃縮液の製造方法
JP6285649B2 (ja) 細胞濃縮液の製造方法
JP2019092393A (ja) 細胞懸濁液調製用容器および細胞懸濁液の調製方法
US10940248B2 (en) Systems and methods for recovering white blood cells from a leukoreduction filter
JP6189352B2 (ja) 血小板を収集し、かつ血漿の返血を予測するためのシステムおよび方法
WO2024173262A1 (en) Modular biological cell processing system
CN111939599A (zh) 富血小板血浆的制备方法及装置

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20160316

RJ01 Rejection of invention patent application after publication