CN105384846A - 一种汽爆联合生物酶制备海藻酸及海藻酸钠的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种汽爆联合生物酶制备海藻酸及海藻酸钠的方法,以海带和马尾藻等为原材料,制备海藻酸及海藻酸钠的方法。该方法与常规方法相比,具有产率高,节约能耗,化学试剂用量少等优点,适合于工业化大生产。

Description

一种汽爆联合生物酶制备海藻酸及海藻酸钠的方法
技术领域
本发明属于中药现代化领域,涉及一种汽爆联合生物酶制备海藻酸及海藻酸钠的方法。
背景技术
海藻酸,其分子式为(C6H7O6)n,相对分子量在32000~200000左右,是从褐藻类的海带或马尾藻中提取的一种多糖碳水化合物,是由1,4-聚-β-D-甘露糖醛酸和α-L-古洛糖醛酸组成的一种线型聚合物,其衍生物包括海藻酸钠、海藻酸钙、海藻酸锌、海藻酸铁、海藻酸钾、海藻酸镁、海藻酸铵等。其中海藻酸钠因其良好的生物降解性和生物相容性,被广泛应用于化学、生物、医药、食品等领域。
目前,世界范围内海藻酸钠制备方法可分为四种:酸凝酸化法、钙凝酸化法、钙凝离子交换法、酶解提取法。前三种方法为纯化学方法,在提取过程中由于较高浓度的碳酸钠消化,导致生产出的海藻酸钠黏度较高,产率一般在20%左右,并且大量的酸碱化学药品对环境的污染较大。而酶作为一种特殊的以蛋白质形式存在的生物催化剂,在啤酒、果汁果酒、纺织、饲料、皮革、酒精等行业得到了广泛的应用,并以其特异、高效、绿色环保等特点而备受青睐。我们考虑到海藻酸主要存在于海带及马尾藻的细胞壁中,而细胞壁的主要成分为纤维素、半纤维素及木质素;同时在提取过程中,还要受到其它大分子物质,如果胶、蛋白质等的干扰,赵岩、吴鹏发明了一种用于海带前处理的复合生物酶配方及使用方法(201010292123.9),该发明既能显著降低高海藻酸钠的粘度,又能降低化学药品的用量,但对于海藻酸钠收率的提高幅度有限。
但由于细胞壁中的木质素和半纤维素以共价键的方式相结合,果胶以镶嵌的形式将木质素、半纤维素和纤维素胶合,纤维素分子被包埋其中,形成一层天然屏障。无论是化学方法、物理方法,还是生物酶制剂等单一方法作用于细胞壁,都无法完全打开木质素的天然屏障,只能通过降解果胶,打开一小部分通道,使生物酶制剂与纤维素等大分子接触。这就造成我们的发明(201010292123.9)应用于海藻酸钠的提取工艺中,需要耗时6h的酶处理,产率才能提高1倍左右。
汽爆技术是将渗进植物组织内部被压缩的气体短时间突发性释放完毕,目的是用较少的能量将原料按要求分解。汽爆机将容器内的全部原料在毫秒级时间范围内,以炸散的形式悬在大气空间。由于其作用时间短,能量密度高而且集中,气体分子可以渗透到纤维素与木质素等大分子之间,充分地在大分子水平上将物料分解。因此,汽爆过程可以将植物细胞壁果胶镶嵌的木质素、半纤维素和纤维素的共聚体打散为木质素、果胶、半纤维素和纤维素的分散体,结合生物酶技术彻底攻破植物细胞壁的天然屏障系统。
陈洪章等人发明海带组分分离生物量全利用制备多种产品的方法(201010120859.8),该发明将汽爆技术引入海带组分分离中,其主要是通过蒸汽汽爆加碳酸钠消化来生产海藻酸钠、膳食纤维、碘、色素等产品,与传统技术相比节水、节能。但一方面,与传统技术相比,单纯引入汽爆技术,仅能使植物大部分细胞壁果胶镶嵌的木质素、半纤维素和纤维素的共聚体打散为木质素、果胶、半纤维素和纤维素的分散体,这些大分子聚合物依然存在,仍需要高浓度的碳酸钠溶液长时间消化,在这些大分子物质降解的过程中,海藻酸势必也会随着降解,碳酸钠的浓度越高、消化时间越长,海藻酸降解的越多,得到的海藻酸、海藻酸钠分子量越低,黏度大大降低,产品质量越差;另一方面,蒸汽汽爆过程中,由于汽爆介质为超过100℃的水蒸气,长时间的高温势必会破坏海带中的有效物质,降低产品质量。
本发明正是考虑到空气汽爆联用复合酶技术能够解决以上诸多问题。一方面汽爆技术可以破坏细胞壁木质素天然屏障系统,将海带或马尾藻细胞壁中的果胶镶嵌的木质素、半纤维素和纤维素的共聚体打散为木质素、果胶、半纤维素和纤维素的分散体;另一方面,由于选用空气作为汽爆介质,仅以空气加压产生汽爆,所以不会出现高温破坏海带的有效物质海藻酸。继而联用复合生物酶将木质素、果胶、半纤维素、蛋白质和纤维素等降解为小分子。从而最大限度的降低海藻酸及海藻酸钠制备过程中其它大分子物质对海藻酸提取的干扰,降低整个工艺的能耗,降低化学试剂的用量,进一步提高海藻酸及其衍生物(海藻酸钠等)的产品产率及产品质量。
发明内容
基于此,有必要提供一种提高海藻酸及海藻酸钠产率、降低产品粘度、减少化学药品使用的海藻酸及海藻酸钠生产方法。
一种汽爆联合生物酶制备海藻酸及海藻酸钠的方法,包括以下步骤:
(1)原料前处理:新鲜海带或马尾藻水洗去泥沙等杂质后切成小段,淋去表面水分;
(2)空气汽爆处理:将经过原料前处理的海带或马尾藻置于汽爆罐内,以空气作为汽爆介质,加压使爆破装置中的压力在0.5~1.5MPa,爆破时间为0.5~20min;
(3)复合生物酶处理:将空气汽爆后原料以水混悬,加入复合生物酶制剂,定向降解干扰海藻酸提取的其它大分子物质;
(4)消化:将经步骤(3)处理得到的物质加入0.5%~1.0%碳酸钠水溶液消化0.5~1.0h,反应温度为30~60℃;
(5)海藻酸的制备:将经(4)处理得到的物质过滤,滤液加酸调pH1~4,过滤,沉淀(海藻酸)备用;
(6)海藻酸钠的制备:将经(5)处理得到的海藻酸,用适量碳酸钠水溶液溶解,加乙醇沉淀,过滤,沉淀物干燥即得海藻酸钠。
在其中一个实施例中,步骤(1)中,当原料为干海带或干马尾藻时,先将其浸泡软化后,水洗去泥沙等杂质,切成小段,淋去表面水分;
在其中一个实施例中,步骤(2)中,以空气作为汽爆介质,加压使爆破装置中的压力在1MPa,爆破时间为10min。
在其中一个实施例中,步骤(3)中,加入的复合生物酶制剂由以下质量百分比的各组分组成:纤维素酶10~30%,木聚糖酶10~30%,果胶酶10~20%,漆酶5~15%,甘露聚糖酶5~15%,几丁质酶10~20%,壳聚糖酶5~10%。
在其中一个实施例中,步骤(3)中,复合生物酶的作用温度:15~60℃(或室温),pH:4.0~7.0,作用时间:1~6h,添加量:500g~5000g/吨物料。
在其中一个实施例中,步骤(5)中,调节pH用的酸可以为浓盐酸、浓硫酸、冰醋酸等酸。
在其中一个实施例中,步骤(6)中,沉淀物干燥可以用真空干燥、热风烘干、减压蒸干等多种干燥方式。
本发明针对目前以海带或马尾藻为原料,生产海藻酸及海藻酸钠的生产工艺产品产率低、产品的粘度较低、大量化学药品对环境的污染,考虑到细胞壁天然屏障系统对海藻酸提取的干扰,依据实验数据,发明了空气汽爆联用复合生物酶制剂制备海藻酸及海藻酸钠的新工艺。本发明从技术原理上有以下显著特点:
(1)空气汽爆技术可以将海带或马尾藻细胞壁中的果胶镶嵌的木质素、半纤维素和纤维素的共聚体打散为木质素、果胶、半纤维素和纤维素的分散体,从而破坏了复合生物酶难以迅速降解的木质素天然屏障系统,而对海藻酸没有任何破坏;
(2)复合生物酶可以将木质素、果胶、半纤维素、几丁质和壳聚糖等降解为小分子,打破海带和马尾藻的细胞结构,降低海藻酸及海藻酸钠制备过程中其它大分子物质对海藻酸提取的干扰;
(3)空气汽爆技术联用复合生物酶,以海带和马尾藻等为原材料,制备海藻酸及其衍生物的方法,可以实现最大限度的降低海藻酸钠制备过程中其它大分子物质对海藻酸提取的干扰。与传统工艺相比,能够大幅度降低生产能耗,降低化学试剂的用量,进一步提高海藻酸及其衍生物(海藻酸钠等)的产品产率及产品质量。
附图说明
图1为一实施方式的汽爆联合生物酶制备海藻酸及海藻酸钠的方法的流程图。
具体实施方式
为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂,下面对本发明的具体实施方式做详细的说明。在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明。但是本发明能够以很多不同于在此描述的其它方式来实施,本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似改进,因此本发明不受下面公开的具体实施的限制。
一实施方式的汽爆联合生物酶制备海藻酸及海藻酸钠的方法,包括以下步骤:
步骤(1)原料前处理:新鲜海带或马尾藻水洗去泥沙等杂质后切成小段,淋去表面水分。
步骤(2)空气汽爆处理:将经过原料前处理的海带或马尾藻置于汽爆罐内,以空气作为汽爆介质,加压使爆破装置中的压力在0.5~1.5MPa,爆破时间为0.5~20min。
空气汽爆技术可以将海带或马尾藻细胞壁中的果胶镶嵌的木质素、半纤维素和纤维素的共聚体打散为木质素、果胶、半纤维素和纤维素的分散体,从而破坏了复合生物酶难以迅速降解的木质素天然屏障系统,使各种酶解底物的作用位点暴露出来,从而有利于复合生物酶的作用,而对海藻酸没有任何破坏。
优选的,步骤(2)中,以空气作为汽爆介质,加压使爆破装置中的压力在1MPa,爆破时间为10min。
步骤(3)复合生物酶处理:将空气汽爆后原料以水混悬20~30℃,按照500g~5000g/吨物料加入复合生物酶制剂,定向降解干扰海藻酸提取的其它大分子物质3~5h,其中,复合生物酶制剂由以下质量百分比的各组分组成:纤维素酶10~30%,木聚糖酶10~30%,果胶酶10~20%,漆酶5~15%,甘露聚糖酶5~15%,几丁质酶10~20%,壳聚糖酶5~10%。
发明人在研发过程发现,按照已知海带、马尾藻的主要成分加入纤维素酶、木聚糖酶、果胶酶时,虽然能在一定程度上提高海藻酸和海藻酸钠的产率,但是作用时间比较长,而且比理论产率低不少。当加入几丁质酶和壳聚糖酶时,发明人惊奇的发现,同样作用条件下,酶解时间缩短,产率也相应提高了。发明人认为,在海带和马尾藻的细胞壁成分中,含有一定量的几丁质和壳聚糖,它们的存在束缚了一些海藻酸,使之不能被提取出来,在几丁质酶、壳聚糖酶的协同作用下,打破了其细胞结构和木质纤维结构,从而使海藻酸更容易提取,从而提高了产率。
优选的,复合生物酶制剂由以下质量百分比的各组分组成:纤维素酶20%,木聚糖酶20%,果胶酶15%,漆酶15%,甘露聚糖酶15%,几丁质酶10%,壳聚糖酶5%。
步骤(4)消化:将经步骤(3)处理得到的物质加入0.5%~1.0%碳酸钠水溶液消化0.5~1.0h,反应温度为30~60℃。
步骤(5)海藻酸的制备:将经步骤(4)处理得到的物质过滤,滤液加酸调pH1~4,过滤,沉淀(海藻酸)备用。
步骤(6)海藻酸钠的制备:将经(5)处理得到的海藻酸,用适量碳酸钠水溶液溶解,加乙醇沉淀,过滤,沉淀物干燥即得海藻酸钠。
本发明利用空气汽爆联用复合生物酶,从本质上解决了传统工艺生产海藻酸及海藻酸钠产率低、海藻酸钠粘度低的致命问题,并且能够降低化学药品的使用量,降低能耗。
实验数据:以干海带为原料,以海藻酸钠产率、黏度为评价指标,对不同生产工艺进行评价。
由以上数据可以得出,在从海带或马尾藻中提取海藻酸钠的工艺中,以空气汽爆联用复合生物酶前处理的海藻酸钠的产率及其粘度要远高于其它工艺,空气汽爆联用复合生物酶前处理工艺的产率较传统工艺产率要高出一倍以上,而其产品海藻酸钠的粘度参数较传统工艺降低显著。
下面结合具体实施例,对本发明作进一步的阐述。
实施例1
一种汽爆联合生物酶制备海藻酸及海藻酸钠的方法,包括以下步骤:
(1)原料前处理:干海带用水浸泡1h软化后,水洗去泥沙等杂质,切成5~15cm小段,淋去表面水分;
(2)空气汽爆处理:将经过原料前处理的海带置于汽爆罐内,以空气作为汽爆介质,使爆破装置中的压力在1.0MPa,爆破时间为10min;
(3)复合生物酶处理:将空气汽爆后海带以10倍量水混悬,按照1500g/吨原料加入复合生物酶制剂,在pH5.5、50℃条件下水解3h,所述复合生物酶制剂由以下质量百分比的各组分组成:纤维素酶20%,木聚糖酶20%,果胶酶15%,漆酶15%,甘露聚糖酶15%,几丁质酶10%,壳聚糖酶5%;
(4)消化:将经(3)处理得到的体系加入相当于原料10倍量的1.0%碳酸钠水溶液,60℃消化1.0h;
(5)海藻酸的制备:将经(4)处理得到的体系过滤,滤液用浓盐酸调pH2,过滤,沉淀(海藻酸)备用;
(6)海藻酸钠的制备:将经(5)处理得到的海藻酸,加10%碳酸钠水溶液溶解,至pH8,加乙醇至体系乙醇浓度为70%,过滤,沉淀物减压蒸干,即得海藻酸钠。
实施例2
一种汽爆联合生物酶制备海藻酸及海藻酸钠的方法,包括以下步骤:
(1)原料前处理:新鲜海带水洗去泥沙等杂质后切成5~15cm小段,淋去表面水分;
(2)空气汽爆处理:将经过原料前处理的海带置于汽爆罐内,以空气作为汽爆介质,使爆破装置中的压力在1.5MPa,爆破时间为15min;
(3)复合生物酶处理:将空气汽爆后海带以10倍量水混悬,按照500g/吨原料加入复合生物酶制剂,在pH6、60℃条件下水解2h,所述复合生物酶制剂由以下质量百分比的各组分组成:纤维素酶20%,木聚糖酶20%,果胶酶10%,漆酶10%,甘露聚糖酶20%,几丁质酶15%,壳聚糖酶5%;
(4)消化:将经(3)处理得到的体系加入相当于原料10倍量的0.5%碳酸钠水溶液,40℃消化1.0h;
(5)海藻酸的制备:将经(4)处理得到的体系过滤,滤液用浓盐酸调pH3,过滤,沉淀(海藻酸)备用;
(6)海藻酸钠的制备:将经(5)处理得到的海藻酸,加10%碳酸钠水溶液溶解,至pH8,加乙醇至体系乙醇浓度为70%,过滤,沉淀物减压蒸干,即得海藻酸钠。
实施例3
一种汽爆联合生物酶制备海藻酸及海藻酸钠的方法,包括以下步骤:
(1)原料前处理:新鲜海带或马尾藻水洗去泥沙等杂质后切成小段,淋去表面水分;
(2)空气汽爆处理:将经过原料前处理的海带或马尾藻置于汽爆罐内,以空气作为汽爆介质,加压使爆破装置中的压力在1.5MPa,爆破时间为5min;
(3)复合生物酶处理:将空气汽爆后海带以15倍量水混悬,按照2000g/吨原料加入复合生物酶制剂,在pH6、60℃条件下水解2h,所述复合生物酶制剂由以下质量百分比的各组分组成:纤维素酶25%,木聚糖酶25%,果胶酶10%,漆酶10%,甘露聚糖酶10%,几丁质酶10%,壳聚糖酶10%。
(4)消化:将经(3)处理得到的体系加入相当于原料12倍量的0.75%碳酸钠水溶液,消化0.75h,反应温度为45℃。
(5)海藻酸的制备:将经(4)处理得到的物质过滤,滤液加浓硫酸调pH3,过滤,沉淀(海藻酸)备用。
(6)海藻酸钠的制备:将经(5)处理得到的海藻酸,加10%碳酸钠水溶液溶解,至pH8,加乙醇至体系乙醇浓度为70%,过滤,沉淀物热风烘干,即得海藻酸钠。
实施例4
一种汽爆联合生物酶制备海藻酸及海藻酸钠的方法,包括以下步骤:
(1)原料前处理:干海带用水浸泡1h软化后,水洗去泥沙等杂质,切成5~15cm小段,淋去表面水分;
(2)空气汽爆处理:将经过原料前处理的海带置于汽爆罐内,以空气作为汽爆介质,使爆破装置中的压力在0.8MPa,爆破时间为15min;
(3)复合生物酶处理:将空气汽爆后海带以10倍量水混悬,按照4500g/吨原料加入复合生物酶制剂,在pH4.5、35℃条件下水解2h,所述复合生物酶制剂由以下质量百分比的各组分组成:纤维素酶25%,木聚糖酶20%,果胶酶15%,漆酶15%,甘露聚糖酶15%,几丁质酶10%,壳聚糖酶10%;
(4)消化:将经(3)处理得到的体系加入相当于原料10倍量的0.7%碳酸钠水溶液,60℃消化0.8h;
(5)海藻酸的制备:将经(4)处理得到的体系过滤,滤液用浓盐酸调pH1.5,过滤,沉淀(海藻酸)备用;
(6)海藻酸钠的制备:将经(5)处理得到的海藻酸,加10%碳酸钠水溶液溶解,至pH8,加乙醇至体系乙醇浓度为70%,过滤,沉淀物减压蒸干,即得海藻酸钠。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式,其描述较为具体和详细,但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是,对于本领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可以做出若干变形和改进,这些都属于本发明的保护范围。因此,本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (5)

1.一种汽爆联合生物酶制备海藻酸及海藻酸钠的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)原料前处理:新鲜海带或马尾藻水洗去泥沙等杂质后切成小段,淋去表面水分;
(2)空气汽爆处理:将经过原料前处理的海带或马尾藻置于汽爆罐内,以空气作为汽爆介质,加压使爆破装置中的压力在0.5~1.5MPa,爆破时间为0.5~20min;
(3)复合生物酶处理:将空气汽爆后原料以水混悬,加入复合生物酶制剂,定向降解干扰海藻酸提取的其它大分子物质;
(4)消化:将经步骤(3)处理得到的物质加入0.5%~1.0%碳酸钠水溶液消化0.5~1.0h,反应温度为30~60℃;
(5)海藻酸的制备:将经(4)处理得到的物质过滤,滤液加酸调pH1~4,过滤,沉淀(海藻酸)备用;
(6)海藻酸钠的制备:将经(5)处理得到的海藻酸,用适量碳酸钠水溶液溶解,加乙醇沉淀,过滤,沉淀物干燥即得海藻酸钠。
2.根据权利要求1所述的汽爆联合生物酶制备海藻酸及海藻酸钠的方法,其特征在于,步骤(3)中,加入的复合生物酶制剂由以下质量百分比的各组分组成:纤维素酶10~30﹪,木聚糖酶10~30%,果胶酶10~20%,漆酶5~15%,甘露聚糖酶5~15%,几丁质酶10~20%,壳聚糖酶5~10%。
3.根据权利要求1所述的汽爆联合生物酶制备海藻酸及海藻酸钠的方法,其特征在于,步骤(3)中,复合生物酶的作用温度:15~60℃(或室温),pH:4.0~7.0,作用时间:1~6h,添加量:500g~5000g/吨物料。
4.根据权利要求1所述的汽爆联合生物酶制备海藻酸及海藻酸钠的方法,其特征在于,步骤(3)中,复合生物酶制剂由以下质量百分比的各组分组成:纤维素酶20%,木聚糖酶20%,果胶酶15%,漆酶15%,甘露聚糖酶15%,几丁质酶10%,壳聚糖酶5%。
5.根据权利要求1所述的汽爆联合生物酶制备海藻酸及海藻酸钠的方法,其特征在于,步骤(2)中,以空气作为汽爆介质,加压使爆破装置中的压力在1MPa,爆破时间为10min。
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