CN105367686A - 一种硫酸软骨素提取工艺 - Google Patents
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Abstract
一种硫酸软骨素提取工艺，依照下列步骤进行：①对软骨进行预处理，烘干：②浸提：称取软骨碎末，加入15％～20％的NaCl溶液进行浸提；③二次浸提：用双层纱布过滤，滤液待用，滤渣再在相同条件下提取一次，用四层纱布过滤，弃滤渣，合并两次滤液；④盐解：调节滤液pH为7～8，并且通过升温、恒温和降温的温度调节过程得盐解液；⑤除杂：将盐解液经离心后取上清液，上清液再经稀释、加入乙醇搅拌均匀、静置后，虹吸除去上清液，沉淀物再过滤除去沉淀，所得上清液再用乙醇沉淀，所得到的沉淀物即为硫酸软骨素粗品；⑥提纯：将硫酸软骨素粗品经过脱水、脱脂后，将沉淀物放入烘箱中直接烘干得成品。本发明原料简单、产品得率较高、成本较低，适用于规模化生产。
Description
技术领域
本发明涉及生物医药领域，特别涉及—种硫酸软骨素提取工艺。具体涉及一种采用碱盐二次浸提法提取硫酸软骨素的工艺。
背景技术
硫酸软骨素是自哺乳动物气管等软骨提取而得的酸性黏多糖，白色粉末，无臭，无味，易吸湿，易溶于水，不溶于乙醇和丙酮等有机溶剂，遇水即膨胀或成黏浆，对热较不稳定。硫酸软骨素是糖胺聚糖的一种，由D-葡糖醛酸和N-乙酰氨基半乳糖以β-1，4-糖苷键连接而成的重复二糖单位组成的多糖，并在N-乙酰氨基半乳糖的C-4位或C-6位羟基上发生硫酸酯化。硫酸软骨素是软骨素的硫酸酯，构成结缔组织的主要成分，它具有澄清脂质，提高机体解毒功能，利尿和镇痛等作用。对胶原性疾患十分有效，对由链霉素引起的听觉障碍也有效果。酸性黏多糖是生物体内结缔组织基质中特有成分之一，硫酸软骨素A为酸性黏多糖之一种。医疗上用于冠心病防治。
发明内容
本发明的目的是提供一种硫酸软骨素提取工艺，该工艺采用碱盐二次浸提法提取硫酸软骨素。
如上构思，本发明的技术方案是：一种硫酸软骨素提取工艺，依照下列步骤进行：
①对软骨进行预处理，烘干：
②浸提：称取软骨碎末，加入软骨重量2.5～3倍的15％～20％的NaCl溶液进行浸提，调节pH值至12～13，加热至35～40℃并搅拌，恒温提取10～12h，此过程中实时校正保持pH为12～13；
③二次浸提：用双层纱布过滤，滤液待用，滤渣再在相同条件下提取一次，用四层纱布过滤，弃滤渣，合并两次滤液；
④盐解：调节滤液pH为7～8，并且通过升温、恒温和降温的温度调节过程得盐解液；
⑤除杂：将盐解液经离心后取上清液，上清液再经稀释、加入乙醇搅拌均匀、静置后，虹吸除去上清液，沉淀物再过滤除去沉淀，所得上清液再用乙醇沉淀，所得到的沉淀物即为硫酸软骨素粗品；
⑥提纯：将所得硫酸软骨素粗品经过脱水、脱脂后，将沉淀物放入烘箱中直接烘干得硫酸软骨素成品。
上述步骤①将预处理后的软骨在50～60℃温度下烘干。
上述步骤④滤液用1.5mol/LHCl调节pH。
上述步骤④温度调节过程是：将滤液升温至80～90℃，恒温15-20min后，3-5min内降温至室温。
上述步骤⑤的具体过程是：将盐解液静置1.5～2h后，以2500～3000r/min离心3～5min，弃沉淀，留取上清液，用1～1.5倍的去离子水稀释，稀释液中加入90～95％的乙醇，搅拌均匀，静置10～12h，虹吸除去上清液，沉淀物再用1～1.5％的NaCl溶液溶解，再离心，过滤除去沉淀，所得上清液再用90～95％的乙醇沉淀，所得到的沉淀物即为硫酸软骨素粗品；
上述步骤⑥的具体过程是：将所得硫酸软骨素粗品用脱水剂浸泡3～5min脱水一次，脱脂剂浸泡8～10min脱脂一次，将沉淀物放入55～60℃的烘箱中直接烘干得成品。
上述脱水剂采用丙酮。
上述脱脂剂采用乙醚。
本发明的优点在于：原料简单、产品得率较高、成本较低，适用于工业化、规模化生产。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步说明：
实施例1：一种硫酸软骨素提取工艺，依照下列步骤进行：
1、预处理：去除软骨上残留的肌肉、脂肪和其它结缔组织，用自来水冲洗干净，在电动绞肉机上将其绞碎，然后放入烘箱中，55℃烘干；
2、浸提：称取软骨碎末，加入与软骨重量2.8倍的18％的NaCl溶液进行浸提，用8％NaOH调节pH值至12。加热至35℃，用电动搅拌机不断搅拌，恒温提取10h，此过程中实时校正保持pH为12；
3、二次浸提：用双层纱布过滤，滤液待用。滤渣再在相同条件下提取一次，用四层纱布过滤，弃滤渣，合并两次滤液；
4、盐解：滤液用1.5mol/LHCl调节pH为7，然后迅速升温至85℃，恒温20min后，3min内降温至室温，得盐解液；
5、除杂：将盐解液静置1.5h后，以2500r/min离心3min，弃沉淀，留取上清液，用1倍的去离子水稀释。稀释液中加入90％的乙醇，搅拌均匀，静置11h，虹吸除去上清液。沉淀物再用1.2％的NaCl溶液溶解，再离心，过滤除去沉淀，所得上清液再用92％的乙醇沉淀，所得到的沉淀物即为硫酸软骨素粗品；
6、提纯：所得硫酸软骨素粗品用丙酮浸泡4min脱水一次，乙醚浸泡9min脱脂一次。将沉淀物放入56℃的烘箱中直接烘干得成品。
实施例2：一种硫酸软骨素提取工艺，依照下列步骤进行：
1、预处理：去除软骨上残留的肌肉、脂肪和其它结缔组织，用自来水冲洗干净，在电动绞肉机上将其绞碎，然后放入烘箱中，60℃烘干；
2、浸提：称取软骨碎末，加入与软骨重量3倍的20％的NaCl溶液进行浸提，用9％NaOH调节pH值至12.5。加热至38℃，用电动搅拌机不断搅拌，恒温提取11.6h，此过程中实时校正保持pH为12.5；
3、二次浸提：用双层纱布过滤，滤液待用。滤渣再在相同条件下提取一次，用四层纱布过滤，弃滤渣，合并两次滤液；
4、盐解：滤液用1.7mol/LHCl调节pH为7.8。迅速升温至88℃，恒温20min后，3.5min内降温至室温，得盐解液；
5、除杂：将盐解液静置16h后，以2800r/min离心4min，弃沉淀，留取上清液，用1.2倍的去离子水稀释。稀释液中加入93％的乙醇，搅拌均匀，静置10.2h，虹吸除去上清液。沉淀物再用1.2％的NaCl溶液溶解，再离心，过滤除去沉淀，所得上清液再用93％的乙醇沉淀，所得到的沉淀物即为硫酸软骨素粗品；
6、提纯：所得硫酸软骨素粗品用丙酮浸泡3.6min脱水一次，乙醚浸泡8.7min脱脂一次。将沉淀物放入56℃的烘箱中直接烘干得成品。
Claims (8)
1.一种硫酸软骨素提取工艺，其特征在于：依照下列步骤进行：
①对软骨进行预处理，烘干：
②浸提：称取软骨碎末，加入软骨重量2.5～3倍的15％～20％的NaCl溶液进行浸提，调节pH值至12～13，加热至35～40℃并搅拌，恒温提取10～12h，此过程中实时校正保持pH为12～13；
③二次浸提：用双层纱布过滤，滤液待用，滤渣再在相同条件下提取一次，用四层纱布过滤，弃滤渣，合并两次滤液；
④盐解：调节滤液pH为7～8，并且通过升温、恒温和降温的温度调节过程得盐解液；
⑤除杂：将盐解液经离心后取上清液，上清液再经稀释、加入乙醇搅拌均匀、静置后，虹吸除去上清液，沉淀物再过滤除去沉淀，所得上清液再用乙醇沉淀，所得到的沉淀物即为硫酸软骨素粗品；
⑥提纯：将所得硫酸软骨素粗品经过脱水、脱脂后，将沉淀物放入烘箱中直接烘干得硫酸软骨素成品。
2.根据权利要求1所述的一种硫酸软骨素提取工艺，其特征在于：上述步骤①将预处理后的软骨在50～60℃温度下烘干。
3.根据权利要求1所述的一种硫酸软骨素提取工艺，其特征在于：上述步骤④滤液用1.5mol/LHCl调节pH。
4.根据权利要求1所述的一种硫酸软骨素提取工艺，其特征在于：上述步骤④温度调节过程是：将滤液升温至80～90℃，恒温15-20min后，3-5min内降温至室温。
5.根据权利要求1所述的一种硫酸软骨素提取工艺，其特征在于：上述步骤⑤的具体过程是：将盐解液静置1.5～2h后，以2500～3000r/min离心3～5min，弃沉淀，留取上清液，用1～1.5倍的去离子水稀释，稀释液中加入90～95％的乙醇，搅拌均匀，静置10～12h，虹吸除去上清液，沉淀物再用1～1.5％的NaCl溶液溶解，再离心，过滤除去沉淀，所得上清液再用90～95％的乙醇沉淀，所得到的沉淀物即为硫酸软骨素粗品。
6.根据权利要求1所述的一种硫酸软骨素提取工艺，其特征在于：上述步骤⑥的具体过程是：将所得硫酸软骨素粗品用脱水剂浸泡3～5min脱水一次，脱脂剂浸泡8～10min脱脂一次，将沉淀物放入55～60℃的烘箱中直接烘干得成品。
7.根据权利要求6所述的一种硫酸软骨素提取工艺，其特征在于：上述脱水剂采用丙酮。
8.根据权利要求6所述的一种硫酸软骨素提取工艺，其特征在于：上述脱脂剂采用乙醚。
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| CN201410421850.9A CN105367686A (zh) | 2014-08-25 | 2014-08-25 | 一种硫酸软骨素提取工艺 |
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Cited By (1)
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| CN112390897A (zh) * | 2020-11-24 | 2021-02-23 | 邯郸学院 | 从植物花中提取分离高纯度多糖的方法 |
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2014
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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| CN112390897B (zh) * | 2020-11-24 | 2022-09-30 | 邯郸学院 | 从植物花中提取分离高纯度多糖的方法 |
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