CN104140477A - 一种利用鸡腿骨制备硫酸软骨素的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明一种利用鸡腿骨制备硫酸软骨素的制备方法，包括：前处理、碱解、酶解、过滤、超滤、氧化、过滤、醇沉、分离、干燥、粉碎几个步骤；本发明具有利用单一酶解代替了传统的酶解过程，利用了超滤膜过滤代替了反复醇沉过程，方法步骤简单，生产周期短，效率高，得到的硫酸软骨素质地酥松、颗粒细小，容易脱水、烘干，节约能源、生产成本低；产品的色泽好，质量稳定，硫酸软骨素的含量在98%以上，适合大规模的工业化生产的优点。
Description
技术领域
本发明属于生物技术领域，具体涉及一种硫酸软骨素的制备方法。
背景技术
硫酸软骨素别名牛磺软骨素、康得宁等 ,是哺乳动物结缔组织的主要成分之一 , 多分布于软骨、鼻骨、喉骨、韧带、肌膜中。在医学上主要的应用途径是作为治疗关节疾病的药品，与氨基葡萄糖配合使用，具有止痛，促进软骨再生的功效，可以从根本改善关节问题。通过高科技深加工，可以治疗神经性头疼、三叉神经痛、冠心病、心绞痛、心肌缺氧、心脑血管疾病、关节痛、动脉粥样硬化及肝炎等症，其中 CS 还具有抗凝和抗血栓形成的作用，也可用于因链霉素引起的听觉障碍和肝脏功能受损的辅助治疗以及高血脂的辅助治疗。可以作为保健品、食品中的添加剂，具有增强人体体质及抗病菌、美容、抗衰老等作用。改善听力和肌肤干燥。在体内可抑制小肠对脂质和葡萄糖的吸收以达到减肥作用。随着硫酸软骨素生物活性不断被揭示和其应用领域的不断扩展 , 有关硫酸软骨素的提取、纯化和分离技术已取得了一定的研究成果。
目前，硫酸软骨素通常采用碱- 酶解提取法，主要包括以下步骤 ：（1）碱提酶解：原料软骨加水浸没，用氢氧化钠调pH8.5，升温至55-60℃，保温4-6小时，然后加入2%的碱性蛋白酶，保持pH8.5，保温55-60℃搅拌6-8小时，升温至沸腾15分钟左右，过滤，得滤液； （2）酒精沉淀：滤液中加入 3% 重量的氯化钠，降温至室温，按体积的2.5倍加入95% 酒精，静止8小时，取沉淀；（3）氧化：按沉淀 ：水的重量比为1:10的比例混合水，同时加入 3% 重量的氯化钠，调pH10-12，加入 2% 重量双氧水氧化8小时，过滤，取滤；（4）酒精沉淀干燥 ：滤液调 pH6，加入体积的 2.5 倍量酒精第二次沉淀，沉淀再用 95% 酒精脱水两次，干燥粉碎得到硫酸软骨素成品。由于硫酸软骨素溶液比较粘稠，在醇沉时传统的做法是将酒精加入到硫酸软骨素 溶液中使硫酸软骨素结晶析出沉淀下来，这样产生的硫酸软骨素沉淀结晶体容易结块而且粘稠，结晶体中包含的有机溶剂在脱水干燥过程中由于颗粒形状较大且坚硬致密，不容易挥发，致使产品的溶剂残留偏高，影响产品质量，满足不了客户要求。其次由于沉淀结 块粘稠，使得脱水、烘干、粉碎等操作变得困难，浪费能耗。
发明内容
为了克服以上的缺陷，本发明提供一种利用鸡腿骨制备硫酸软骨的制备方法，具体技术方案如下:
一种利用鸡腿骨制备硫酸软骨素的制备方法，包括以下步骤：
（1）将选取好的鸡腿骨除去脂肪组织后进行粉碎；
（2）将步骤（1）中的粉碎后的鸡腿骨放入反应罐中，加3—3.5mol/L氯化钠浸没，再加入50%的氢氧化钠调节PH至12—13，搅拌提取2h之后进行过滤；
（3）将步骤（2）中过滤后的产物放至反应罐中，使用2mol/L盐酸调节PH至7—8，升温至55—60℃，保温4—6小时；
（4）将步骤（3）中得到的产物按软骨原料重量1%—3%加入碱性蛋白酶，保持PH至8—9，保温55—60℃，搅拌6—8小时，升温至沸腾12—18分钟，过滤得到硫酸软骨素容易；
（5）将步骤（4）得到的软骨素容易加入硅藻土进行过滤，去除废渣；
（6）将步骤（5）中得到的产物加入纯化水进行超滤并排出废水；
（7）将步骤（6）中得到的硫酸软骨素沉淀加入水中溶解，同时向水中加入氯化钠，使溶液中氯化钠重量浓度为1—4%，含硫酸软骨素重量浓度为3—5%，加入氢氧化钠调PH至10—12，随后加入溶液重量的1—3%双氧水氧化6小时以上，过滤得滤液；
（8）将步骤（7）中得到的滤液加入硅藻土进行过滤，并去其废渣；
（9）将步骤（8）中得到过滤后的硫酸软骨素溶液将至室温，在搅拌状态下加入盐酸调节PH至3—5，再加入溶液体积2—3倍的重量浓度为90%以上的酒精，静止6小时以上抽取上层酒精过滤得到硫酸软骨素沉淀；
（10）将步骤（9）中得到的湿沉淀倒入干燥罐中，设置温度为70——75℃进行干燥，控制水分小于8%；
（11）将步骤（10）中得到的半成品硫酸软骨素倒入粉碎机内粉碎并过过滤筛进行过滤；
（12）将步骤（11）中混合的颗粒加入多功能搅拌机中进行搅拌混合得到成品硫酸软骨素。
其中步骤（2）中的过滤次数为1次或多次，并合并提取液，并且控制PH为12—13.
所述的粉碎机的粉碎规格为80目，过滤筛的孔隙直径为60目。
有益之处：本发明提供了一种利用鸡腿骨制备硫酸软骨素的制备方法，本发明利用单一酶解代替了传统的酶解过程，利用了超滤膜过滤代替了反复醇沉过程，方法步骤简单，生产周期短，效率高，得到的硫酸软骨素质地酥松、颗粒细小，容易脱水、烘干，节约能源、生产成本低 ；产品的色泽好，质量稳定，硫酸软骨素的含量在 98% 以上，适合大规模的工业化生产。
附图说明
图1为本发明的工艺流程图。
具体实施例
下面结合具体实施例进一步说明本发明的技术解决方案，这些实施例不能理解为是对技术解决方案的限制。
实施例1：依以下步骤制备硫酸软骨素
（1）将粉碎后的鸡腿骨100kg放入反应罐中，加3mol/L氯化钠浸没，再加入50%的氢氧化钠调节PH至12，搅拌提取2h之后进行过滤；
（2）将过滤后的产物放至反应罐中，使用2mol/L盐酸调节PH至7，升温至55℃，保温5小时；
（3）将得到的产物按软骨原料重量1%加入碱性蛋白酶，保持PH至8，保温55℃，搅拌6小时，升温至沸腾15分钟，过滤得到硫酸软骨素溶液500L；
（4）将得到的软骨素溶液加入硅藻土进行过滤，去除废渣；
（5）将得到的产物加入纯化水通过超滤膜进行超滤并排出废水，形成硫酸软骨素沉淀；
（6）将得到的硫酸软骨素沉淀加200L水中溶解，同时向水中加入氯化钠，使溶液中氯化钠重量浓度为2%，含硫酸软骨素重量浓度为4%，加入氢氧化钠调PH至10，随后加入溶液重量的1%双氧水氧化6小时以上，过滤得滤液；
（7）将得到的滤液加入硅藻土进行过滤，并去其废渣；
（8）将得到过滤后的硫酸软骨素溶液将至室温，在搅拌状态下加入盐酸调节PH至4，再加入溶液体积2倍的重量浓度为90%以上的酒精，静止6小时以上抽取上层酒精过滤得到硫酸软骨素沉淀；
（9）将得到的湿沉淀倒入干燥罐中，设置温度为75℃进行干燥，控制水分小于8%；
（10）将得到的半成品硫酸软骨素倒入粉碎机内粉碎并过过滤筛进行过滤；
（11）将混合的颗粒加入多功能搅拌机中进行搅拌混合得到成品硫酸软骨素。
实施例2：依以下步骤制备硫酸软骨素
（1）将粉碎后的鸡腿骨5kg放入反应罐中，加3.5mol/L氯化钠浸没，再加入50%的氢氧化钠调节PH至13，搅拌提取2h之后进行过滤；
（2）再将过滤后的溶液进行在过滤，并加入50%的氢氧化钠调节PH至13
（3）将过滤后的产物放至反应罐中，使用2mol/L盐酸调节PH至8，升温至60℃，保温6小时；
（4）将得到的产物按软骨原料重量3%加入碱性蛋白酶，保持PH至9，保温60℃，搅拌8小时，升温至沸腾18分钟，过滤得到硫酸软骨素容易；
（5）将得到的软骨素容易加入硅藻土进行过滤，去除废渣；
（6）将得到的产物加入纯化水进行超滤并排出废水；
（7）将得到的硫酸软骨素沉淀加入水中溶解，同时向水中加入氯化钠，使溶液中氯化钠重量浓度为4%，含硫酸软骨素重量浓度为5%，加入氢氧化钠调PH至12，随后加入溶液重量的3%双氧水氧化6小时以上，过滤得滤液；
（8）将得到的滤液加入硅藻土进行过滤，并去其废渣；
（9）将得到过滤后的硫酸软骨素溶液将至室温，在搅拌状态下加入盐酸调节PH至5，再加入溶液体积3倍的重量浓度为90%以上的酒精，静止6小时以上抽取上层酒精过滤得到硫酸软骨素沉淀；
（10）将得到的湿沉淀倒入干燥罐中，设置温度为75℃进行干燥，控制水分小于8%；
（11）将得到的半成品硫酸软骨素倒入粉碎机内粉碎并过过滤筛进行过滤；
（12）将混合的颗粒加入多功能搅拌机中进行搅拌混合得到成品硫酸软骨素。
Claims (3)
1.一种利用鸡腿骨制备硫酸软骨素的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）将选取好的鸡腿骨除去脂肪组织后进行粉碎；
（2）将步骤（1）中的粉碎后的鸡腿骨放入反应罐中，加3—3.5mol/L氯化钠浸没，再加入50%的氢氧化钠调节PH至12—13，搅拌提取2h之后进行过滤；
（3）将步骤（2）中过滤后的产物放至反应罐中，使用2mol/L盐酸调节PH至7—8，升温至55—60℃，保温4—6小时；
（4）将步骤（3）中得到的产物按软骨原料重量1%—3%加入碱性蛋白酶，保持PH至8—9，保温55—60℃，搅拌6—8小时，升温至沸腾12—18分钟，过滤得到硫酸软骨素溶液；
（5）将步骤（4）得到的软骨素容易加入硅藻土进行过滤，去除废渣；
（6）将步骤（5）中得到的产物加入纯化水通过超滤膜进行超滤并排出废水；
（7）将步骤（6）中得到的硫酸软骨素沉淀加入水中溶解，同时向水中加入氯化钠，使溶液中氯化钠重量浓度为1—4%，含硫酸软骨素重量浓度为3—5%，加入氢氧化钠调PH至10—12，随后加入溶液重量的1—3%双氧水氧化6小时以上，过滤得滤液；
（8）将步骤（7）中得到的滤液加入硅藻土进行过滤，并去其废渣；
（9）将步骤（8）中得到过滤后的硫酸软骨素溶液将至室温，在搅拌状态下加入盐酸调节PH至3—5，再加入溶液体积2—3倍的重量浓度为90%以上的酒精，静止6小时以上抽取上层酒精过滤得到硫酸软骨素沉淀；
（10）将步骤（9）中得到的湿沉淀倒入干燥罐中，设置温度为70——75℃进行干燥，控制水分小于8%；
（11）将步骤（10）中得到的半成品硫酸软骨素倒入粉碎机内粉碎并过过滤筛进行过滤；
（12）将步骤（11）中混合的颗粒加入多功能搅拌机中进行搅拌混合得到成品硫酸软骨素。
2.根据权利要求1所述的一种利用鸡腿骨制备硫酸软骨素的制备方法，其特征在于，所述的步骤（2）中的过滤次数为1次或多次，并合并提取液。
3.根据权利要求1所述的一种利用鸡腿骨制备硫酸软骨素的制备方法，其特征在于，所述的粉碎机的粉碎规格为80目，过滤筛的空隙直径为60目。
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