CN101845103B - 一种硫酸软骨素的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种硫酸软骨素的制备方法,属于生物工程领域。本方法采用超声波法包括预处理、提取、超声除杂、脱色、沉淀以及脱水等工艺步骤,可以保持生物活性,提高了破碎速度,缩短了破碎时间,可极大地提高提取效率,降低成本。
Description
技术领域
本发明涉及一种硫酸软骨素的制备方法,属于生物工程领域。
背景技术
硫酸软骨素(Chondroitin Sulfate,ChS)广泛分布于人和一些动物如猪、牛、羊、鱼等的组织(如软骨、脐带、血管壁等)中,其主要成分是4-ChS(ChS A)和6-ChS(ChS C)等异构体的混合物。
硫酸软骨素是一种酸性粘多糖,吸水性强,为白色粉末,易溶于水而成粘度大的溶液,不溶于乙醇、丙酮等有机溶剂。国内从猪的喉骨、鼻中骨、气管等软骨组织提取制备,用于某些神经性头痛、神经痛、关节痛、偏头痛、动脉硬化症等,也可用于链霉素引起的听觉障碍及肝炎等的辅助治疗。
近年来,ChS在防治冠心病和关节炎等方面日益受到人们的重视,出现了老药新用的趋势。目前国内数十个制药厂都在生产ChS,其普遍采用的是稀碱法和浓碱法,并都要使用胰酶,致使生产周期较长,成本较高。
发明内容
本发明旨在克服上述缺陷,提供一种采用超声波法制备硫酸软骨素的方法,降低成本,极大地提高提取效率。
为了实现上述技术目的,本发明的技术方案如下:
一种硫酸软骨素的制备方法,其特征在于:包括以下工艺步骤:预处理、提取、超声除杂、脱色、沉淀以及脱水。
一种硫酸软骨素的制备方法,其特征在于:所述工艺步骤具体为:
A、预处理:将猪喉骨置于沸水中煮8-15min,去油脂、肉渣,剪成1-2.5cm见方小块;
B、提取:将预处理的喉骨加入20g/l NaOH溶液中浸没,置于超声波清洗仪中超声处理1-3.5h,纱布过滤得滤液;
C、超声除杂:将滤液再超声处理2-7h,除去蛋白质等杂质得到处理液;
D、脱色:将处理液调pH至5-8,按喉骨干重的8-15%加入白陶土,按处理液体积0.5-5.5%加入等重的活性炭,快速升温至90℃处理0.5-2.5h,快速冷却后,抽滤得滤液;
E、沉淀:按滤液体积的1%加入等重的NaCl,抽滤,调滤液的pH至5.0,搅拌下加入食用酒精至体积分数为70%,搅拌静置;
F、脱水:倾去上清液,用体积分数70%的酒精洗涤沉淀,抽滤,沉淀用食用酒精脱水3-7次,抽干,干燥得成品。
在步骤B中所述的喉骨与20g/l NaOH溶液的质量体积比为1∶5-1∶10。
在步骤D中所述的活性炭经过活化处理。
在步骤F中所述的干燥过程为于65-90℃干燥15-30h。
本发明带来的有益技术效果:本发明提供的制备硫酸软骨素的方法采用超声波法,超声波破碎过程是一个物理过程,浸提过程中无化学反应,被浸提的生物活性物质在短时间内保持不变,生物活性不减,同时提高了破碎速度,缩短了破碎时间,可极大地提高提取效率,降低成本。
具体实施方式
实施例1
A、预处理:将猪喉骨置于沸水中煮8min,去油脂、肉渣,剪成1.5cm见方小块;
B、提取:将预处理的喉骨500g加入20g/l NaOH溶液3000ml中浸没,置于超声波清洗仪中超声处理1.2h,纱布过滤得滤液;
C、超声除杂:将滤液再超声处理6h,除去蛋白质等杂质得到处理液;
D、脱色:将处理液调pH至7.5,按喉骨干重的9.5%加入白陶土,按处理液体积4%加入等重的活化活性炭,快速升温至90℃处理1h,快速冷却后,抽滤得滤液;
E、沉淀:按滤液体积的1%加入等重的NaCl,抽滤,调滤液的pH至5.0,搅拌下加入食用酒精至体积分数为70%,搅拌静置;
F、脱水:倾去上清液,用体积分数70%的酒精洗涤沉淀,抽滤,沉淀用食用酒精脱水6次,抽干,于75℃干燥21h得成品。
实施例2
A、预处理:将猪喉骨置于沸水中煮13min,去油脂、肉渣,剪成2.5cm见方小块;
B、提取:将预处理的喉骨350g加入20g/l NaOH溶液2450ml中浸没,置于超声波清洗仪中超声处理2.5h,纱布过滤得滤液;
C、超声除杂:将滤液再超声处理2h,除去蛋白质等杂质得到处理液;
D、脱色:将处理液调pH至7,按喉骨干重的7.8%加入白陶土,按处理液体积4.2%加入等重的活化活性炭,快速升温至90℃处理2h,快速冷却后,抽滤得滤液;
E、沉淀:按滤液体积的1%加入等重的NaCl,抽滤,调滤液的pH至5.0,搅拌下加入食用酒精至体积分数为70%,搅拌静置;
F、脱水:倾去上清液,用体积分数70%的酒精洗涤沉淀,抽滤,沉淀用食用酒精脱水5次,抽干,于66℃干燥17h得成品。
实施例3
A、预处理:将猪喉骨置于沸水中煮6min,去油脂、肉渣,剪成1cm见方小块;
B、提取:将预处理的喉骨620g加入20g/l NaOH溶液3100ml中浸没,置于超声波清洗仪中超声处理3h,纱布过滤得滤液;
C、超声除杂:将滤液再超声处理7h,除去蛋白质等杂质得到处理液;
D、脱色:将处理液调pH至6.2,按喉骨干重的11%加入白陶土,按处理液体积0.9%加入等重的活化活性炭,快速升温至90℃处理1.8h,快速冷却后,抽滤得滤液;
E、沉淀:按滤液体积的1%加入等重的NaCl,抽滤,调滤液的pH至5.0,搅拌下加入食用酒精至体积分数为70%,搅拌静置;
F、脱水:倾去上清液,用体积分数70%的酒精洗涤沉淀,抽滤,沉淀用食用酒精脱水6次,抽干,于88℃干燥19h得成品。
Claims (2)
1.一种硫酸软骨素的制备方法,其特征在于:包括以下工艺步骤:预处理、提取、超声除杂、脱色、沉淀以及脱水;其具体工艺步骤为:
A、预处理:将猪喉骨置于沸水中煮13min,去油脂、肉渣,剪成2.5cm见方小块;
B、提取:将预处理的喉骨350g加入20g/l NaOH溶液2450ml中浸没,置于超声波清洗仪中超声处理2.5h,纱布过滤得滤液;
C、超声除杂:将滤液再超声处理2h,除去蛋白质杂质得到处理液;
D、脱色:将处理液调pH至7,按喉骨干重的7.8%加入白陶土,按处理液体积4.2%加入等重的活性炭,快速升温至90℃处理2h,快速冷却后,抽滤得滤液;
E、沉淀:按滤液体积的1%加入等重的NaCl,抽滤,调滤液的pH至5.0,搅拌下加入食用酒精至体积分数为70%,搅拌静置;
F、脱水:倾去上清液,用体积分数70%的酒精洗涤沉淀,抽滤,沉淀用食用酒精脱水5次,抽干,于66℃干燥17h,得成品。
2.根据权利要求1所述的一种硫酸软骨素的制备方法,其特征在于:在步骤D中所述的活性炭经过活化处理。
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