CN105357963B - 含异丙醇溶液对抗嵌杯病毒科的用途 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及组合物，其包含：a)‑至少60重量％异丙醇和b)‑至少0.2重量％一种或多种富脂剂；所述组合物用于通过治疗处理人或动物体的方法中，以及所述组合物作为皮肤消毒剂用于通过治疗处理人或动物体的方法中，并且它用作无生命表面的消毒剂。

Description

含异丙醇溶液对抗嵌杯病毒科的用途
本发明涉及含异丙醇组合物及其在对抗皮肤上的嵌杯病毒科(嵌杯样病毒)的方法中的用途。另外，本发明涉及该组合物对抗无生命表面上的嵌杯病毒科的用途。
对抗病毒在大量技术领域中起关键作用。嵌杯病毒科(calciviridae)，特别是诺沃克样病毒(noroviruses)近年来受到关注，特别是在医院的消毒中。在这种情况下，手部和表面的消毒是打破感染链的重要方法。
EP 0 547 727 A1描述了可用作皮肤杀菌和手部消毒剂的组合物。没有描述对抗病毒的效力。WO 98/44792 A1公开了醇(特别是乙醇和正丙醇)在与盐混合时在低温下对抗病毒的效力。
EP 2 135 507 A1公开了杀病毒消毒剂，其包含：(a)40-90重量％乙醇、异丙醇或其混合物，(b)0.1-2重量％乳酸，(c)0.01-2重量％柠檬酸和(d)0.001-0.1重量％在溶液中释放锌的含锌化合物。
EP 1 685 854 A1公开了杀病毒组合物，其包含：(a)0.2-1.5重量％一种或几种含磷酸，(b)30-80重量％乙醇、1-丙醇、2-丙醇或者它们中两种或三种的混合物，和(c)一种或几种聚亚烷基二醇。
JP 200035506 A公开了对人体而言温和的杀菌组合物，其包含：(A)30-90体积％醇，例如乙醇、异丙醇或其混合物，(B)0.01-5体积％保湿剂，例如甘油、三甘油、乙二醇、聚乙二醇、山梨糖醇或POE甲基糖苷，和(C)余量水。
例如，推荐基于乙醇并充当杀病毒剂的消毒剂用于手部的卫生和消毒。Schülke&Mayr GmbH的产品
Figure BDA0000895600610000011
pure(78重量％乙醇96％、0.1重量％联苯-2-醇)显示了杀病毒活性。然而，关于包含大量乙醇的卫生和手术手部消毒用消毒剂存在保留，因为这类试剂具有强去脂效应。
另一方面，Schülke&Mayr GmbH的产品
Figure BDA0000895600610000012
industrial pure包含32重量％1-丙醇(正丙醇)和21重量％2-丙醇(异丙醇)。该产品未经稀释地用于手部消毒且有效对抗亲脂性病毒。然而，具有≥3％正丙醇含量的试剂必须归类为R41(“严重损害眼睛的风险”)以及符号“刺激物”；自2015年6月1日起，包含≥3％正丙醇的制剂必须归类为H318(GHS分类“导致严重的眼睛损害”)和“腐蚀性”符号。
在表面消毒中，为对抗病毒，the Robert Koch Institute(德国联邦传染病和非传染病研究所)推荐了具有一定含量的过氧化合物或醛作为活性物质的消毒剂(Epidemiological Bulletin 4/2009)。另外，根据
Figure BDA0000895600610000021
Praxis derSterilisation，Desinfektion，Antiseptik und Konservierung[
Figure BDA0000895600610000022
Practice of Sterilization，Disinfection，Antiseptics and Conservation](Kramer&Assadian，Publ.Thieme Verlag 2008)，仅具有氧化作用的物质，例如醛、卤素(特别是活性氯)和释放活性氧的化合物(例如过酸、过硼酸酯和过氧化氢)有效对抗无包膜病毒。
人诺沃克样病毒导致所有类型的传染性胃肠炎中的超过80％。已在各种试验中显示异丙醇对抗诺沃克样病毒的效力是有限的。另外，对于对抗无生命表面上的诺沃克样病毒，Magulski等人(BMC-Infectious Diseases2009，9:107)因此推荐了基于过乙酸、戊二醛、乙醇或正丙醇的产品。在Magulski等人的试验中，鼠诺沃克样病毒用作人诺沃克样病毒的代用品。以60体积％的最高测试浓度，异丙醇的效力在乙醇和正丙醇的效力以下三个十进制等级。这些结果还由Eggers(International Conference on Prevention andInfection Control，Schülke Satellite Symposia，Geneva2011)证实。
本发明的主题是待用于皮肤、手部和表面消毒的对抗嵌杯病毒科的消毒剂。该消毒剂有效对抗诺沃克样病毒，更特别是对抗鼠诺沃克样病毒。此外，该消毒剂容易配制且在用于卫生和手术手部消毒时具有最小可能的去脂效应。
因此，根据第一实施方案，本发明涉及包含以下组分的组合物：
a)-至少60重量％异丙醇，和
b)-至少0.2重量％一种或多种富脂剂(relipidizing agent)。
本发明尤其基于这一事实：已惊讶地发现基于异丙醇和富脂剂的如上文所定义的消毒剂组合物对抗嵌杯病毒科的效力类似于基于乙醇的消毒剂的效力。该结果是不可预测的，因为已前认为即使在高浓度，异丙醇也不足以破坏嵌杯病毒科。此外，还发现作为组分b)的富脂剂不抑制异丙醇对抗嵌杯病毒科的效果。
在这种情况下，在实际试验中在测试人员皮肤上的效果证据是确定无疑的。该效果是令人惊讶的，因为尽管以前在悬浮液测试中的实验已证明了4-log等级降低，但以前在皮肤上的实验显示出相反的结果。因此，迄今为止仅在体外测试(悬浮液测试)中显示了异丙醇对鼠诺沃克样病毒(MNV)和猫嵌杯样病毒(FCV)的效力。然而，Eggers(见上文)已表明了不能由悬浮液测试结果中直接获取皮肤上的效力这一事实。
在上文定义的组合物中，异丙醇的含量优选为至多95重量％，优选至多90重量％，优选65％至85重量％，特别是70％至80重量％，例如72％至78重量％，例如约75重量％。
在上文定义的组合物中，富脂剂在德语中称为“ein Rückfetter(保湿剂)”。b)富脂剂的总含量优选为至多4.0重量％，优选0.5-2.5重量％，特别是0.8-2.0重量％。
因此，根据一个特定实施方案，如前文所定义的组合物包含：
a)-至少60重量％且至多95重量％异丙醇，和
b)-至少0.2重量％且至多4.0重量％一种或多种富脂剂；
该组合物特别包含：
a)-60重量％至90重量％异丙醇，和
b)-0.2重量％至2.5重量％一种或多种富脂剂；
更特别包含：
a)-至少65重量％且至多85重量％异丙醇，和
b)-至少0.5重量％且至多2.5重量％一种或多种富脂剂。
根据如前文所定义的组合物的一个非常特别的实施方案，包含：
a)-至少70重量％且至多80重量％异丙醇，和
b)-至少0.5重量％且至多2.5重量％一种或多种富脂剂。
例如，富脂剂选自：
(i)-(聚)甘油的(偏)酯，例如甘油(单-、二-、三-)[己二酸酯、链烷酸(C8、C10和C18)酯、异硬脂酸酯]、三甘油二异硬脂酸酯、聚甘油-2二多羟基硬脂酸酯、油酸甘油酯和椰油酸甘油酯，
(ii)-羊毛脂和卵磷脂以及聚乙氧基化或酰化羊毛脂和卵磷脂衍生物，
(iii)-多元醇，例如甘油、赤藓醇、1,2,6-己三醇、肌醇、乳糖醇、麦芽糖醇、甘露醇、甲基丙二醇、植烷三醇、聚甘油、山梨糖醇和木糖醇，其中特别优选甘油，
(iv)-脂肪醇，即衍生自具有6-22个碳原子的非支化、任选单-或多不饱和烃残基的单价伯醇，例如月桂醇、肉豆寇醇、鲸蜡醇和硬脂醇，和
(v)-酯，例如脱水山梨糖醇月桂酸酯、肉豆蔻酸异丙酯、棕榈酸异丙酯和乙酸鲸蜡基硬脂基酯。
根据另一特定实施方案，如前文所定义的组合物的特征在于组分b)为甘油，更特别在于它包含至多2重量％甘油，优选至多1.0重量％，特别是至多0.5重量％甘油。
根据另一特定实施方案，如前文所定义的组合物的特征在于组分b)为至少两种或更多种脂肪醇的混合物。根据该实施方案，所述两种或更多种脂肪醇的混合物为鲸蜡醇和硬脂醇的混合物或者鲸蜡醇、硬脂醇和肉豆寇醇的混合物。
根据另一特定实施方案，如前文所定义的组合物的特征在于它进一步包含不同于甘油的至少另一种富脂剂。根据该实施方案，所述不同于甘油的至少另一种富脂剂为鲸蜡醇、硬脂醇和肉豆寇醇的混合物。
根据另一特定实施方案，如前文所定义的组合物进一步包含：
c)-0.05-2.0重量％至少一种或几种其它成分。
这类成分为例如润湿剂如山梨糖醇以及脲和/或D-泛醇作为皮肤保护和医药皮肤护理剂或试剂。另外，甘油醚可包含在消毒剂中，如EP 0547 727 A所述，特别是1-(2-乙基己基)甘油醚(
Figure BDA0000895600610000051
SC50)。
根据该实施方案，组合物的特征更特别地在于所述至少一种或几种成分选自山梨糖醇、脲、D-泛醇、1-(2-乙基己基)甘油醚、山梨糖醇和D-泛醇的组合、或者山梨糖醇、D-泛醇和1-(2-乙基己基)甘油醚的组合。
根据更特别的实施方案，如上文所定义的组合物的特征在于它由以下组分组成，就100重量％而言：
a)-至少60重量％且至多95重量％异丙醇，和
b)-至少0.2重量％且至多4.0重量％一种或多种富脂剂，
c)-0.05-2.0重量％至少一种或几种其它成分，
d)-余量的水。
另外，根据本发明使用的试剂优选特征在于它们具有微含量的过氧化物，例如过氧化氢或过乙酸，如常用于对抗嵌杯病毒科(特别是诺沃克样病毒)的那些。优选过氧化物的量为至多1.0重量％，更优选至多0.5重量％，特别是至多0.1重量％，特别优选地，消毒剂基本不含过氧化物。
另外，根据本发明使用的消毒剂优选特征在于它们具有低含量的醛(例如戊二醛或甲醛)，如常用于对抗嵌杯病毒科(特别是诺沃克样病毒)的那些。优选醛的量为至多1.0重量％，优选至多0.5重量％，特别是至多0.1重量％，消毒剂特别优选基本不含醛。
另外，根据本发明使用的试剂优选特征在于它们具有低含量的阳离子表面活性剂，如常用于消毒剂中的那些，例如季铵盐和氯己定衍生物。优选阳离子表面活性剂的量为至多1.0重量％，优选至多0.5重量％，特别是至多0.1重量％，消毒剂特别优选基本不含阳离子表面活性剂。
根据另一实施方案，本发明涉及如上文所定义的组合物，其用于通过治疗处理人或动物体的方法中，更特别地作为皮肤消毒剂用于通过治疗处理人或动物体的方法中。
所述组合物有效对抗嵌杯病毒科(嵌杯样病毒)。这些主要是诺沃克样病毒属的病毒，特别是人诺沃克样病毒或鼠诺沃克样病毒。或者，嵌杯病毒科为水疮性病毒(vesivirus)属的病毒，特别是猫嵌杯样病毒。
最优选，如上文所定义的组合物用于处理人皮肤，例如手部。
根据最后一个实施方案，本发明涉及如上文所定义的组合物作为无生命表面的消毒剂，例如在区域消毒中的用途。
根据本发明使用的消毒剂因此提供以下优点：
-对多种微生物，特别是对嵌杯病毒科，例如诺沃克样病毒和水疮性病毒(vesivirus)具有良好效力，同时具有与皮肤的良好相容性(甚至在重复应用的情况下)，
-在短暴露时间内的良好效力，和
-对有生命和无生命表面上的嵌杯病毒科的效力。
本发明的优点更特别地显示于以下实施例中。除非另外说明，百分数指重量百分数。
实施例
测试以下配制剂：
配制剂A 配制剂B 配制剂C
纯化水，％ 23.30 23.50 24.00
异丙醇，％ 75.00 75.00 74.00
甘油，％ – – 2.00
山梨糖醇70％，％ 0.50 0.50 –
1-(2-乙基己基)甘油醚，％ 0.20
D-泛醇，％ 0.20 0.20 –
肉豆寇醇，％ 0.50 0.50 –
鲸蜡硬脂醇，％ 0.30 0.30 –
外观 清澈，无色 无色，清澈 无色，清澈
方法A：根据EN 14476的杀病毒效果的定量悬浮液测试：鼠诺沃克样病毒(低应激)
储存条件：在原始包装中在室温下
包装：塑料瓶
方法：EN 14476:2005-04/A1:2006-10和PrEN 14476:2011：化学消毒剂和杀菌剂—人类医学中所用化学消毒剂和杀菌剂的杀病毒效果的定量悬浮液测试，测试方法和要求(第2阶段，第1期)
为证明根据EN 14476的杀病毒效力，8体积份消毒剂(产品测试溶液)与1份应激物质(在脏污条件的测试中为0.3％，或者在干净条件的测试中为0.03％)的悬浮液和1体积份病毒悬浮液的培育以至少107TC ID 50/ml的滴定量进行。为实现97％的浓度，将0.1ml病毒、0.2ml的5倍浓缩应激物质和9.7ml产品混合。在暴露时间终止以后，消毒剂的作用通过稀释(或者凝胶过滤)而停止，并根据进程1:10/1:100/1:1,000等应用一系列稀释以测定残留病毒含量。滴定在微量滴定系统中在96孔板上进行。另外，进行以下对照：病毒对照、细胞毒性对照、易感性对照和0.7％甲醛的参比失活。结果的计算根据
Figure BDA0000895600610000071
进行并作为病毒对照的滴定量与产物测试溶液的滴定量之间的差计算，同时包括95％置信区间。
测试溶液
暴露时间：30秒，60秒，120秒
应激：0.3g BSA/l(低应激)
测试温度：20℃±0.5℃
测试产物浓度(V/V)：97％(V/V)，80％(V/V)，50％
稀释剂：具有标准化硬度的水
测试病毒：鼠诺沃克样病毒，菌株S 99Berlin
繁殖细胞系：RAW细胞ATCC TIB-71
滴定方法：在在96孔微量滴定板上作为单层的细胞上的病毒滴定
将0.5ml产品测试溶液用4.5ml冰冷DMEM+2％FBS稀释至10-8的稀释物。将100μl的各稀释物吸移至微量滴定板的6个孔中。
终止产品作用和降低细胞毒性的方法：
用MicroSpin柱凝胶过滤并在10秒内用冰冷DMEM+2％FBS稀释至10-4。
易感性测试：
对比病毒滴定在已用0.1％产品溶液或PBS处理过的细胞上进行。
参比病毒失活：0.7％甲醛溶液。
暴露时间：5、15、30、60分钟。
杀病毒效力的计算
TCID50根据
Figure BDA0000895600610000083
的方法计算。
m＝xk+d/2–d∑pi
m＝相对于测试体积的滴定量的负对数
xk＝其中所有测试对象都正反应的最小稀释级的对数
d＝稀释因子的对数
pi＝观察到的反应速率
标准偏差的计算
Figure BDA0000895600610000081
Sm＝对数化滴定量的标准偏差
d＝稀释因子的对数
pi＝观察到的反应速率
n＝每稀释物的测试数目
减缩系数(RF)的计算
RF＝log(病毒对照)–log(测试产物)
Figure BDA0000895600610000082
KRF＝减缩系数的95％置信区间
Sm＝对数化滴定量的标准偏差
根据EN 14476用优选的配制剂A和鼠诺沃克样病毒的定量悬浮液测试结果的汇总在表1和2中给出。对照结果汇总于表3中。
方法B：改进的EN 1500测试“手部的卫生消毒”
该测试基于EN 1500(手部卫生消毒的实际测试方法)。
在该测试中，将测试人员的手部用3ml鼠诺沃克样病毒污染，即参比组的测试人员的手部和测试组的测试人员的手部。然后在消毒以前(1分钟)取得试样。其后，各组测试人员用消毒剂将他们的手部消毒。参比组的测试人员每种情况下用3ml参比产品消毒两次，使所述参比产品作用30秒，并在每次消毒以后摩擦。而测试组的测试人员用3ml所测消毒剂消毒两次。其后在参比组和测试组中取得消毒试样(1分钟)。
然后在第二次测试中交换各组测试人员。
实施例1
鼠诺沃克样病毒的结果(方法A)
表1：配制剂A和鼠诺沃克样病毒的结果汇总
Figure BDA0000895600610000101
鼠诺沃克样病毒的结果(方法A)
表2：配制剂A和鼠诺沃克样病毒的结果汇总
Figure BDA0000895600610000111
鼠诺沃克样病毒的结果(方法A)
表3：用鼠诺沃克样病毒的病毒对照和参比失活
Figure BDA0000895600610000121
方法验证
细胞毒性：在凝胶过滤以后，以10-2稀释的配制剂A的97％、80％和50％产品(2.5CD50)没有显示出细胞毒性效果。这因此不影响稀释证明杀病毒效果的必要性。
病毒控制：鼠诺沃克样病毒的病毒滴定量合计为7.50±0.47TCID50/0·1ml，因此合计为8.50±0.47TCID50/ml。可证明的滴定量降低因此合计为≥4.00lg10。
易感性：关于预处理和未处理细胞的对比病毒滴定显示<1.00log10等级的差异。
参比失活：在30分钟暴露时间以后0.7％甲醛减缩系数合计为2·33log10，在60分钟暴露时间以后合计为3.17log10。
结果
在用具有低应激的97％配制剂A的30秒暴露时间以后，在RAW细胞培养物中未能显示鼠诺沃克样病毒的繁殖。已经可以证明对于80％施用浓度，4log10等级的必需滴定量降低。
实施例2(方法B)
配制剂B 配制剂C 乙醇70％w/w
log TCID50/ml 2×30秒 2×30秒 2×30秒
消毒以前的平均值 563 5.28 5.6
标准偏差 0.44 0.38 0.39
消毒以后的平均值 2.75 2.58 3.02
标准偏差 0.08 0.23 0.65
RF 2.88 2.70 2.58
标准偏差 0.45 0.43 0.73
测试人数 5 5 5
以上数据显示，根据本发明的异丙醇(75重量％)与富脂剂的组合(配制剂B)具有比70％乙醇更好的效果。另外，惊讶的是本发明的消毒剂与富脂剂(B)组合的效果甚至比在甘油作为唯一富脂剂存在的情况下(配制剂C)更好。

Claims (5)

1.组合物，其特征在于由如下组分组成，就100重量％而言：
a)-至少60重量％且至多95重量％异丙醇，和
b)-至少0.5重量％且至多2.5重量％的富脂剂，其为鲸蜡醇、硬脂醇和肉豆寇醇的混合物，
c)-0.05-2.0重量％至少一种或几种成分，其选自山梨糖醇、脲、D-泛醇、1-(2-乙基己基)甘油醚，山梨糖醇和D-泛醇的组合，或者山梨糖醇、D-泛醇和1-(2-乙基己基)甘油醚的组合，
d)-余量水。
2.根据权利要求1的组合物，其特征在于组分c)为山梨糖醇和D-泛醇的组合，或者山梨糖醇、D-泛醇和1-(2-乙基己基)甘油醚的组合。
3.根据权利要求1或2的组合物，其用于通过治疗处理人或动物体的方法中。
4.根据权利要求1或2的组合物，其作为皮肤消毒剂用于通过治疗处理人或动物体的方法中。
5.根据权利要求1或2的组合物用于卫生和手术手部消毒的用途。
CN201480037936.XA 2013-07-05 2014-07-02 含异丙醇溶液对抗嵌杯病毒科的用途 Active CN105357963B (zh)

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