CN105267615A - 一种治疗阿尔茨海默病的中药组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种治疗阿尔茨海默病的中药组合物及其制备方法。本发明中药组合物由五种中药材组成，分别为知母、百合、熟地黄、五味子、栀子按照2:2:1:1:1的比例配伍组成，其中知母、百合、熟地黄采用水提醇沉工艺，五味子、栀子水提取过大孔吸附树脂纯化，合并浓缩液，采用一步制粒机制备颗粒。本发明制备的中药组合物颗粒经动物模型测试其体内活性，结果表明其可用于预防和治疗阿尔茨海默病，有较大的临床应用价值。

Description

一种治疗阿尔茨海默病的中药组合物及其制备方法

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种治疗阿尔茨海默病的中药组合物及其制备方法。

背景技术

认知的过程包括意识、学习和思考等活动。认知的减退见于各种痴呆和记忆力受损患者，其中最为常见的是阿尔茨海默病（Alzheimer's disease, AD）和血管性痴呆（vasculardementia，VaD或VD）患者。AD是最常见的痴呆，大约占典型晚发型痴呆的50 %以上。此病的初期相当轻微，不易察觉，且呈缓慢地进行性发展。AD通常发生于50岁以上人群，是一种多病机异质性疾病，具有特征性神经病理和神经化学改变，起病常在老年前期，但老年期的发病率更高。AD病因及发病机制尚不明确，可能有多因素参与。目前较为认可的有以下3种发病机制：（1）微管相关蛋白tau异常学说，（2）Aβ毒性学说，（3）基因突变学说。

因AD的发病机制及其复杂，目前尚无特效治疗药物，化学药物有胆碱酯酶抑制剂，这类药物着重于增加中枢神经系统的乙酰胆碱酯酶抑制剂的释放，目前国内外研究及主要应用的药物有他克林、多奈哌齐、利斯的明、加兰他敏和石杉碱甲。胆碱受体激动剂，主要有M和N受体，尤其是M1受体的选择性激动剂。M1受体激动剂不但能减轻AD的症状，并能延缓病情的发展，这类药物有占诺美林、米拉美林等。另外还有抗氧化剂、钙离子拮抗剂、谷氨酸受体阻断剂、Aβ形成抑制剂、非甾体抗炎药等。

AD属于中医学的“呆病”、“癫证”、“善忘”等范畴。由于精气亏损、淸窍失养或心、肝、脾等脏腑功能失调，致气、血、痰、火、瘀诸邪阻滞脑窍，导致患者活动受碍，以呆、傻、愚、笨为主要临床表现的一种神志疾病，其病在脑，与诸脑功能失调有关。因此，中医在药物治疗上十分注重五脏与脑的关系，治疗原则主要有补虚扶正，充髓养脑，开郁逐痰，活血通窍，疏肝平肝，清热泻火，扶正祛邪，兼顾虚实等疗法。研究AD的复方用药规律，结果表明，使用频率居前的药物依次是补虚药、活血化瘀药、利水渗湿药、化痰平喘药，开窍药，安神药等，补虚药、活血化瘀药、开窍药、化痰药的配伍应用是中医药治疗AD的基本配伍规律，利水渗湿药、泻下药也是不可忽视的配伍药类。近年，日本对AD从郁、风、热、毒等角度进行研究，应用当归芍药散、钩藤散及黄连解毒汤等，认为对AD有一定地改善学习记忆的功效。由于中药多成分，多靶点特点，使得中医药在防治AD具有一定的优势。

发明内容

本发明的目的在于提供一种治疗阿尔茨海默病的中药组合物，该中药组合物具有清心安神、补肾宁心、利湿泻火的功效。

本发明的另一目的在于提供一种治疗阿尔茨海默病的中药组合物的制备方法。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案。

一种治疗阿尔茨海默病的中药组合物，其特征在于：其中组成活性成分的中药原料按下列重量配比：知母2份、百合2份、熟地黄1份、五味子1份、栀子1份。

本发明所述的一种治疗阿尔茨海默病的中药组合物，通过下列方法制备得到：

（1）知母、百合、熟地黄按比例混合加水煎煮2次，每次2 h，第一次加8倍量水，第二次加6倍量水，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.20（60 ℃）的浓缩液，加入乙醇，使含醇量达80 %，室温放置8 h，滤过，滤液回收乙醇，减压浓缩至相对密度为1.10～1.25（60 ℃）的清膏I。

（2）五味子、栀子用8倍量的水或60 %乙醇提取2次，每次2 h，提取液回收乙醇，浓缩液过大孔吸附树脂，吸附完毕，用纯化水洗脱2~3倍柱体积至Molish反应阴性，继续用30 %~50 %乙醇梯度洗脱，收集洗脱液，洗脱液回收乙醇，继续浓缩至相对密度为1.10～1.25（60 ℃）的清膏II。

（3）将清膏I与清膏II合并，混匀，以5 %药材总重量的糊精，乳糖为底料，采用一步制粒机制备颗粒，即得。

本发明所述中药原料为市售的中药饮片，各组分的性味、归经及功效如下。

知母：性寒，味苦、甘。归肺、胃、肾经。具有清热泻火，滋阴润燥的功效。

百合：性寒，味甘。归心肺经。具有养阴润肺，清心安神功效。

熟地：性微温，味甘。归肝、肾经。具有补血滋阴，益精填髓等功效。

五味子：性温，味酸、甘。归肺、心、肾经。具有收敛固涩，益气生津，补肾宁心的功效。

栀子：性寒，味苦。归心、肺、三焦经。具有泻火除烦，清热利湿，凉血解毒等功效。

本发明的有益效果：

（1）本发明中药组合物在清心安神、补肾宁心、利湿泻火等方面具有更显著功效，清、泻、补协同发挥作用，用于预防和治疗阿尔茨海默病的应用。

（2）与当前防治阿尔茨海默病的化学药相比，本发明中药组合物为天然纯中药制剂，不良反应和副作用显著降低，能发挥中医药多成分，多靶点协同作用，疗效好于化学药物作用于单一靶点。

具体实施方式

实施例 1

本实施例所述中药原料为市售的中药饮片。

（1）取中药饮片知母5 kg、百合5 kg、熟地黄2.5 kg，混合加水煎煮2次，每次2 h，第一次加8倍量水，第二次加6倍量水，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.20（60 ℃）的浓缩液，加入乙醇，使含醇量达80 %，室温放置8 h，滤过，滤液回收乙醇，减压浓缩至相对密度为1.15（60 ℃）的清膏I约5.5 kg；

（2）取中药饮片五味子2.5 kg、栀子2.5 kg，用8倍量水或60 %乙醇提取2次，每次2 h，提取液回收乙醇，浓缩液过大孔吸附树脂，吸附完毕，用纯化水洗脱2~3倍柱体积至Molish反应阴性，继续用30 %~50 %乙醇梯度洗脱，收集洗脱液，洗脱液回收乙醇，继续浓缩至相对密度为1.20（60 ℃）的清膏II约2.1 kg；

（3）将清膏I与清膏II合并，混匀，以糊精，乳糖各0.4 kg为底料，采用一步制粒机制备颗粒（65 ℃），制成颗粒2500 g，即得。

实施例 2

应用动物模型测试中药组合物的体内活性。

采用雄性小鼠侧脑室立体定向注射Aβ_{1 - 42}的方法建立AD的动物模型。实验组：分高、中、低剂量组，分别灌胃给予实施例1中药组合物颗粒剂52，26，13 mg/kg体重；假手术组及模型组按体质量给予生理盐水；对照组：盐酸多奈哌齐0.65 mg/(kg·d)连续给药10 d。通过水迷宫、Y型迷宫检测模型记忆与行为学；分离小鼠海马及皮层，测定丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、氧化型谷胱甘肽（GGSG）、还原型谷胱甘肽（GSH）。

1 中药组合物颗粒对侧脑室注射 Aβ1-42 致痴呆模型小鼠的记忆与行为的影响

1.1 自发活动总路程

1.1.1 自发活动箱 自发活动实验箱由上海吉量软件科技有限公司生产，内箱40 cm ×40 cm ×50 cm，无顶，箱底铺有橡胶垫，且被分成 16 个面积为 10 cm ×10 cm 小格，中央 4 格所占的区域为中央区，边缘的 12 格为外周区。整个装置放置在隔音箱( 外箱) 中。隔音箱内的风扇提供 65 dB的背景噪声。内、外箱是由不透明的黑色有机玻璃组成，外箱顶部有 15W 白炽灯泡提供照明。

1.1.2 小鼠自发活动检测 小鼠在给药后后 10 天进行自发活动的检测。实验时将单只大鼠放于检测箱底板中央，录像 10 min。检测指标包括 10 min 内的水平活动距离( cm) 、中央活动距离( cm) 、周围活动距离( cm) 。

1.1.3 数据统计 各组数据均以 表示，采用spss. 13 软件进行组间t检验，P＜0.05为差异有显著性，结果见表1。

表1 中药组合物颗粒对痴呆模型小鼠自发活动总路程的影响（n=10, ）

结果表明，中药组合物颗粒能增加小鼠自发活动能力。

1.2 Y迷宫自发交替反应率

实验装置由 3 个成 120°夹角的等长木制支臂组成，即迷宫的 A、B、C 3臂。每臂长40 cm，高12 cm，上宽10 cm，下宽5 cm。 实验时将小鼠放入 3个臂交接处，让其自由出入 3个臂，记录5 min内每只小鼠进入 3个臂的顺序及总次数，以连续进入 3 个不同的臂为 1 次正确交替反应，记录正确交替反应次数。用自发交替反应率反映空间工作记忆能力。 自发反应交替率（%）=正确进臂次数 /（ 进臂总次数-2）×100 %。各组数据均以 表示，采用spss. 13 软件进行组间t检验，P＜0.05为差异有显著性，结果见表2。

表2 中药组合物颗粒对痴呆模型小鼠自发交替反应率的影响（n=10, ）

结果表明，中药组合物颗粒剂量依赖性增加小鼠 Y 迷宫自发交替反应率。

1.3 水迷宫游泳时间

每只小鼠每天训练7次，共训练4天。以30 s内到达安全台为正确反应。每次训练记录小鼠进入水中至到达安全台的时间，计算每日的平均时间。各组数据均以 表示，采用spss. 13 软件进行组间t检验，P＜0.05为差异有显著性，结果见表3。

表3 中药组合物颗粒对痴呆模型小鼠水迷宫游泳时间的影响（n=10, ）

结果，与模型组比较，阳性药盐酸多奈哌及中药组合物颗粒计量依赖性地缩短了到达安全台的游泳时间，改善Aβ_1-42所致的空间学习记忆障碍及小鼠空间辨别学习记忆障碍。

2 中药组合物对侧脑室注射 Aβ_{1 - 42} 致痴呆模型小鼠海马及皮层中部分酶的影响

小鼠行为学测试结束后快速断头取脑，称重，冻存与-80℃冰箱备用。进行生化指标检测时，以质量׃体积=1׃9加入冷生理盐水，制成质量分数为10 %的脑组织匀浆，3000 r/min低温离心15 min，取上清液，按试剂盒说明测定大脑组织中MDA、谷胱甘肽（GSH），脑组织总抗氧化能力（T-AOC）活性。结果见表4。

表4 中药组合物颗粒对侧脑室注射Aβ1-42致痴呆模型小鼠海马及皮层中部分酶的影响（n=10, ）

结论：该中药组合物颗粒可提高GSH-Px活性，减少MDA含量，增加GSH含量，提示中药组合物颗粒可能通过多种途径清除体内氧化应激所产生的自由基，抑制脂质过氧化，提高机体抗氧化能力，从而改善Aβ_1-42所致的氧化应激损伤，具有抗AD的活性。

Claims (3)

1. 一种治疗阿尔茨海默病的中药组合物，其特征在于：其中组成活性成分的中药原料按下列重量配比：知母2份、百合2份、熟地黄1份、五味子1份、栀子1份。

2. 如权利要求1所述的一种治疗阿尔茨海默病的中药组合物，其特征在于：通过下列方法制备得到：（1）知母、百合、熟地黄按比例混合加水煎煮2次，每次2 h，第一次加8倍量水，第二次加6倍量水，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.20（60 ℃）的浓缩液，加入乙醇，使含醇量达80 %，室温放置8 h，滤过，滤液回收乙醇，减压浓缩至相对密度为1.10～1.25（60 ℃）的清膏I；（2）五味子、栀子用8倍量的水或60 %乙醇提取2次，每次2 h，提取液回收乙醇，浓缩液过大孔吸附树脂，吸附完毕，用纯化水洗脱2~3倍柱体积至Molish反应阴性，继续用30 %~50 %乙醇梯度洗脱，收集洗脱液，洗脱液回收乙醇，继续浓缩至相对密度为1.10～1.25（60 ℃）的清膏II；（3）将清膏I与清膏II合并，混匀，以5 %药材总重量的糊精、乳糖为底料，采用一步制粒机制备颗粒，即得。

3. 如权利要求1所述的一种治疗阿尔茨海默病的中药组合物，其特征在于：所述的中药组合物用于预防和治疗阿尔茨海默病的应用。