CN105249321A - 一种组合物及其制备方法和用途 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种组合物及其制备方法和用途。所述组合物中的山楂黄酮与葛根素的重量比大于等于2。

Description

一种组合物及其制备方法和用途

技术领域

本发明涉及植物提取物领域。更具体地涉及一种以山楂黄酮和葛根素为主要有效成分的组合物及其制备方法和用途。

背景技术

WHO确认，肥胖将成为全球首位的健康问题，目前世界肥胖病患者至少已达12亿人。肥胖的危害在于，不仅影响人的体态和美观，更重要的它还是诱发脂肪肝、心脑血管疾病，如高血压、冠心病、脑中风，以及糖尿病等慢性疾病的独立危险因素和主要诱因，也是老年期死亡的重要预测因子。

目前中国已有三分之一的成人处于超重或肥胖状态。据2010年我国慢性病调查数据显示，我国成人超重率为27.9％，肥胖率5.1％，合计33.0％，提示另外，我国血脂异常发病率为18.8％，发病人数高达1.6亿人。

减肥和降血脂产品市场规模至少高达300亿元以上。有市场分析数据显示，2005年我国减肥产品市场销售规模达95亿元；如果按照每年以平均15％的保守增长速度计算，2014年我国减肥产品市场销售额已经高达333亿元。如果再考虑降血脂等功能方面的销售，保守估计我国减肥和降血脂市场规模至少高达300亿元以上。

减肥和降血脂功能分别属于两个独立的药物或保健功能体系，虽然肥胖与高血脂病因存在一定相关性，但也不尽相同，治疗机理和方法存在明显差异，因此研发减肥和降血脂产品需要独立进行功能评价，不能想当然地相互推断，许多降血脂药物并无明显减肥效果，反之亦然。因此，如果一个减肥产品同时还具有较好降血脂功能，显然具备更好治疗和保健价值。

降血脂药物目前国内外不乏成功产品，如他汀类产品就属于高效、安全性较好的降血脂产品。但遗憾的是，减肥药物尚处于贫乏状态。主要原因在于安全较差，化学减肥药品毒副作用表现很突出，发达国家曾经先后批准了多个减肥药，包括芬氟拉明、甲基苯丙胺、芬特明、利莫那班、西布曲明(sibutramine)、奥利司他(orlistat)等，作用机理主要包括中枢神经抑制剂抑制食欲、脂肪酶抑制剂减少食物脂肪消化吸收等，其中大多已经由于安全问题相继被迫退出市场。目前化学类减肥药已经到了近乎无药可用的尴尬境地。

目前国内减肥产品的临床应用以中药为主，主要是一些排毒清脂类产品，大多配方复杂、功效成分不明确，产品的质量良莠不齐，有些产品甚至加入泻药成分(如大黄、番泻叶、芒硝等)，长期服用容易导致习惯性腹泻、胃肠功能紊乱等副作用。因此，研发新型高效、安全的减肥产品具有重要意义、市场潜力巨大。

另外，目前虽然有些减肥或降血脂中药复方产品也常含有山楂、葛根等配伍，但由于这些产品处方药味众多、复杂，山楂和葛根所占份额较少，一方面在功效方面尚难以明确加入山楂、葛根对产品减肥疗效是否有显著贡献及其大小；另一方面这种产品配方的口感风味较差，难以开发为受欢迎的功能饮品，因此通常只能开发胶囊、片剂等感官要求较低的产品剂型。

因此，本领域迫切需要提供一种有效、口味佳的可用于减肥、降血脂的产品。

发明内容

本发明旨在提供一种有效、口味佳的可用于减肥、降血脂的组合物。

在本发明的第一方面，提供了一种组合物，其中的山楂黄酮与葛根素的重量比大于等于2；优选大于等于2.5；更优选为2.5-8.0；最优选为2.5-7.0。

在另一优选例中，所述山楂黄酮来自山楂或山楂叶、山楂提取物或山楂葛根提取物；所述葛根素来自葛根、葛根提取物或山楂葛根提取物。

在另一优选例中，所述提取物包括提取液及其浓缩液、提取物干粉。

在另一优选例中，以所述山楂提取物或山楂葛根提取物的总重量计(干燥品)，其中含有1-90％的山楂黄酮；以所述葛根提取物或山楂葛根提取物的总重量计(干燥品)，其中含有0.2-99.5％的葛根素。

在另一优选例中，以所述山楂提取物或山楂葛根提取物的总重量计(干燥品)，其中含有3-90％的山楂黄酮。

在另一优选例中，以所述山楂提取物或山楂葛根提取物的总重量计(干燥品)，其中含有大于等于80％的山楂黄酮。

在另一优选例中，以所述葛根提取物或山楂葛根提取物的总重量计(干燥品)，其中含有0.2-99.5％的葛根素；更佳地，含有0.5-99.5％的葛根素。

在另一优选例中，以所述葛根提取物或山楂葛根提取物的总重量计(干燥品)，其中含有大于等于98％的葛根素。

在另一优选例中，所述组合物中还含有药学上或食品学上可接受的载体。

在另一优选例中，所述的组合物为胶囊、片剂、口服液、饮料、膏、凝胶或糕状固体、粉剂或颗粒剂。

在本发明的第二方面，提供了一种如上所述的本发明提供的组合物的制备方法，所述方法包括的步骤选自下述：

获得山楂葛根提取物；

将获得的山楂提取物和获得的葛根提取物混合；

将获得的山楂提取物和葛根素混合；

将山楂黄酮和葛根素混合；或

将山楂黄酮和获得的葛根提取物混合。

在另一优选例中，所述山楂提取物、葛根提取物或山楂葛根提取物通过下述方法制备得到：

(i)将山楂和/或葛根与水混合，得到匀浆；和

(ii)将匀浆和果胶酶混合，经水解得到山楂提取物、葛根提取物或山楂葛根提取物。

在另一优选例中，所述果胶酶的用量以步骤(i)中使用的每克山楂和/或葛根计，为大于等于2果胶酶活力单位；步骤(ii)中的水解条件为pH1-7，10-80℃。

在另一优选例中，所述果胶酶的用量以步骤(i)中使用的每克山楂和/或葛根计，为大于等于10果胶酶活力单位；更优选为大于等于20果胶酶活力单位；最优选为20-100果胶酶活力单位。

在另一优选例中，步骤(ii)中的水解条件为pH2-6，20-70℃；更优选为pH3-5，30-65℃。

在另一优选例中，葛根提取物制备可以不加果胶酶。

在本发明的第三方面，提供了一种如上所述的本发明提供的组合物的用途，可用作食品、食品配料、膳食补充剂和天然药物原料；或用于制备预防和/或治疗肥胖和/或高血脂症的食品或药物。

在另一优选例中，所述的组合物可用作减肥、降血脂的食品或其配料、膳食补充剂或天然药物或其原料。

据此，本发明提供了一种有效、口味佳的可用于减肥、降血脂的产品。

具体实施方式

发明人经过广泛而深入的研究，将山楂黄酮(Flavonoids)和葛根素(Puerarin)作为主要有效成分的组合物，当两者的重量比在一定的范围内，该组合物对于减肥和/或降血脂会有特别好的效果，同时在达到同样或更佳效果的情况下，由于葛根素的用量大大减小，其通常会引起的食欲抑制等副作用也会随之减少甚至完全被摒除。

进一步地，发明人发现不仅山楂黄酮和葛根素的纯品组合能够有上述作用，当使用山楂的提取物与葛根的提取物的组合时，只要其中的山楂黄酮与葛根素的含量在上述的范围内，也同样可以产生良好的效果。

发明人进行了以山楂黄酮含量≥80％、葛根素含量≥98％的提取物作为原料的组合物的功效试验，也进行了“粗提物(山楂黄酮或葛根素含量在10％以下)”为原料的组合物的功效验证试验，证明两者功效基本相同，提示两者按照有效成分剂量核算用药具有一定的“等效性”，提示其它成分对功效的影响是较小的或者是可以忽略的。

以山楂黄酮含量10-80％，葛根素含量10-98％的提取物作为组合物原料，实际上就相当于把“纯品”与“粗提物”进行适当配比就可以得到。

在上述工作和发现的基础上，完成了本发明。

在本文中，“治疗(treatmentortreating)”一词包括可导致欲求的药学和/或生理效果的防止性(即，预防性)、治愈性或缓和性处置。该效果较佳是指医疗上可将体重减至正常水平范围内，或可防止体重增加至超出正常水平范围，或可将血脂减至正常水平范围内，或可防止血脂增加至超出正常水平范围。此外，“治疗”一词在此是指基于可部分或完全减轻、延迟发生、抑制进程、减轻严重性、和/或减少一种特定疾病、异常和/或医疗状况之一或多个病征出现机率的目的，而对受测个体(或患者)，尤指具有一种医疗状况、一种该医疗状况的症状、一种因该医疗状况而引起的疾病或病症、或是一种会使朝向该医疗状况发展的先期状况的个体，施用或施加本揭示内容的化合物。可对尚未出现特定疾病、异常和/或医疗状况的明显病征的个体，和/或仅对该特定疾病、异常和/或医疗状况产生早期病征的个体进行治疗，以期降低产生该特定疾病、异常和/或医疗状况相关的病理的风险。在本文中，所述病征、疾病、异常和/或医疗状况可以是肥胖或高脂血症。若能减少一或多个病征或临床指标即代表该治疗是“有效”的。

“预防(prophylaxis)”在此是指对一种未来事件的防制手段。因此，可在实施该手术或诊断程序之前、同时或之后，实施本文所述的预防性处置手段。

“一有效量(aneffectiveamount)”一词意将对于治疗减肥和/或降血脂的目的，此一用量在经过适当的给药期间后，能够达到减肥和/或降血脂的欲求效果。

“组合物(composition)”、“药剂(agent)”、“医药品(medicineormedicament)”或“饮品(drink)”等词在此可交替使用，且都是指当施用于一个体(人类或动物)时，能够透过局部和/或全身性作用而诱发所亟求的药学和/或生理反应的一种化合物或组合物。

本发明中可以根据不同的需要采用较优形式的组合物。例如制备组合物饮品时，采用粗提物较好，特别是山楂粗提物；制备胶囊和片剂等较小体积组合物制剂时，采用有效成分含量较高的提取物较好。在功效比较方面，在减肥和降血脂其它指标相近的情况下，以山楂和葛根粗提物为原料的组合物在提高HDL水平方面可能优于有效成分含量较高的提取物作为原料的组合物，也是较好组合物的一种选择。

如本文所用，术语“药学上可接受的载体”指用于治疗剂给药的载体，包括各种赋形剂和稀释剂。该术语指这样一些药剂载体：它们本身并不是必要的活性成分，且施用后没有过分的毒性。合适的载体是本领域普通技术人员所熟知的。在Remington'sPharmaceuticalSciences(MackPub.Co.，N.J.1991)中可找到关于药学上可接受的赋形剂的充分讨论。在组合物中药学上可接受的载体可包括液体，如水、盐水、甘油和乙醇。另外，这些载体中还可能存在辅助性的物质，如崩解剂、润湿剂、乳化剂、pH缓冲物质、海藻胶、果胶、羧甲基纤维素钠(CMC)、黄原胶、结冷胶、瓜尔胶、卡拉胶、蔗糖、麦芽糖醇、甜菊糖苷等。来自于银耳、银耳多糖或其提取物、果蔬汁、L-肉碱、牛磺酸、维生素C、维生素E、β-胡萝卜素、柠檬酸、钙营养素等也包括在药学上可接受的载体的定义中。

如本文所用，术语“食品学上可接受的载体”指用于食品制作的载体，包括各种调味剂和稀释剂。该术语指这样一些食物载体：它们本身并不是必要的有效成分，且施用后没有过分的毒性。在组合物中食品学上可接受的载体可包括液体，如水、盐水、甘油和乙醇。另外，这些载体中还可能存在辅助性的物质，如海藻胶、果胶、羧甲基纤维素钠(CMC)、黄原胶、结冷胶、瓜尔胶、卡拉胶、蔗糖、麦芽糖醇、甜菊糖苷等。来自于银耳、银耳多糖或其提取物、果蔬汁、L-肉碱、牛磺酸、维生素C、维生素E、β-胡萝卜素、柠檬酸、钙营养素等也包括在食品学上可接受的载体的定义中。

“施用(administered、administering或、administration)”一词在此是指直接施用所述的化合物或组合物，或施用活性化合物的前驱药(prodrug)、衍生物(derivative)、或类似物(analog)等，而可在施用个体体内形成该活性化合物的一相当用量者。

本文中交替使用“个体(subject)”或“患者(patient)”等词，其是指可接受所述化合物和/或方法治疗的动物(包括人类)。“个体”或“患者”在此涵盖了雄性与雌性两种性别，除非另有具体说明。因此“个体”或“患者”包含任何哺乳类动物，包括，但不限于，人类、非人类的灵长类，如哺乳动物、狗、猫、马、羊、猪、牛等，其可因利用所述化合物进行治疗而获益。适合接受本发明化合物和/或方法治疗的动物较佳为人类。一般来说，“患者”一词及“个体”一词在本文中可彼此交替使用。

虽然用以界定本发明较广范围的数值范围与参数皆是约略的数值，此处已尽可能精确地呈现具体实施例中的相关数值。然而，任何数值本质上不可避免地含有因个别测试方法所致的标准偏差。在此处，“约”通常是指实际数值在一特定数值或范围的正负10％、5％、1％或0.5％之内。或者是，“约”一词代表实际数值落在平均值的可接受标准误差之内，视本领域技术人员的考虑而定。除了实验例之外，或除非另有明确的说明，当可理解此处所用的所有范围、数量、数值与百分比(例如用以描述材料用量、时间长短、温度、操作条件、数量比例及其它相似者)均经过“约”的修饰。因此，除非另有相反的说明，本说明书与附随权利要求书所揭示的数值参数皆为约略的数值，且可视需求而更动。至少应将这些数值参数理解为所指出的有效位数与套用一般进位法所得到的数值。

除非本说明书另有定义，此处所用的科学与技术词汇的含义与本领域技术人员所理解与惯用的意义相同。此外，在不和上下文冲突的情形下，本说明书所用的单数名词涵盖该名词的复数型；而所用的复数名词时亦涵盖该名词的单数型。

在本文中，“山楂黄酮”作为本发明提供的组合物中的有效成分，是山楂中多种黄酮化合物的混合物(其中代表性成分包括金丝桃苷、杜荆素及其甙、槲皮素及其甙包括芦丁等)，所述山楂黄酮的测定方法可以采用以芦丁为对照品的NaNO2-Al(N03)3-NaOH比色法【保健食品中总黄酮的测定，《保健食品检验与评价技术规范2003年版》,中华人民共和国卫生部，p308】。可以是市售产品也可以来自于山楂提取物或山楂葛根提取物。

在本文中，“葛根素”又名8-β-D-葡萄吡喃糖-4',7-二羟基异黄酮，作为本发明提供的组合物中的有效成分，是指结构式如下式所示的化合物：

所述葛根素的测定方法可以采用HPLC法【保健食品中葛根素的测定，GB/T22251-2008】。

在本文中，“F/P”是指组合物中所含有的山楂黄酮与葛根素的重量比。

在本文中，提取物中山楂黄酮或葛根素的重量百分含量是以提取物的总重量计的，其中的提取物的总重量以其干燥品计算。

在本文中，“山楂提取物”是指将山楂或山楂叶经加水匀浆和加入果胶酶水解后得到的混合物；果胶酶的水解工艺参数如下：pH1-7,温度10-80℃(较好的是pH2-6,温度20-70℃，更好的是pH3-5,温度30-65℃)；果胶酶添加量≥2U(果胶酶活力单位)/g原料(较好的是≥10U/g原料，更好的是≥20U/g原料，最好的是20-100U/g原料。原料以干燥品计。)。酶的加入量可以根据预期水解效果和搅拌水解时间确定，如果要求水解完全，可以适量多加或延长水解时间，可以采用酸乙醇法检验水解物使其达到果胶反应阴性即可(混匀15分钟内无絮状沉淀出现)，水解后经过滤和或离心后得山楂提取液。山楂提取物包括山楂提取液、浓缩液、及其干粉等。

在本文中，“纯品”如果是针对山楂黄酮而言的，就是指本发明的山楂提取物或山楂葛根提取物，以其总重量计，其中山楂黄酮的含量大于等于80％；如果是针对葛根素而言的，就是指本发明的葛根提取物，以其总重量计，其中葛根素的含量大于等于90％，更佳地是大于等于98％。

在本文中，“粗提物”如果是针对山楂黄酮而言的，就是指本发明的山楂提取物或山楂葛根提取物，以其总重量计，其中山楂黄酮的含量在1-15％，优选3-10％；如果是针对葛根素而言的，就是指本发明的葛根提取物或山楂葛根提取物，以其总重量计，其中葛根素的含量在0.2-15％，优选1-10％。

在本文中，“中间含量的提取物”如果是针对山楂黄酮而言的，就是指本发明的山楂提取物或山楂葛根提取物，以其总重量计，其中山楂黄酮的含量在15-80％，优选大于等于50％；如果是针对葛根素而言的，就是指本发明的葛根提取物或山楂葛根提取物，以其总重量计，其中葛根素的含量在15-90％，优选大于等于50％。

在本发明的一种优选实施方式中，除了果胶酶之外，还可加入适量淀粉酶、纤维素酶、半纤维素酶等，加入量通常不超过果胶酶的量。

在本文中，“山楂”为蔷薇科(Rosaceae)山楂属(CrataegusL.)植物，落叶乔木，伞房花房、花白色，果实近球形，一般为红色，有淡褐色色斑，原为我国特有果树，迄今已有3000多年的栽培历史。山楂有许多品种分布于不同地区，其中北山楂(CrataeguspinnatifidaBge)、山里红(Crataeguspinnatifidavarmajor)的果实和叶已列入中国药典，山楂果实属于药食两用品。

在本发明的一种实施方式中，所述山楂为作为核果类水果的果实和/或叶。

在本文中，“果胶酶”是指能协同分解果胶质的多种酶的总称，分别作用于果胶的不同位点进行水解，果胶酶通常包括：(1)负责解聚果胶链的聚甲基半乳糖醛酸酶(PMG)、聚甲基半乳糖醛酸裂解酶(PMGL)；(2)负责解聚果胶酸的聚半乳糖醛酸酶(PG)、聚半乳糖醛酸裂解酶(PGL)；(3)果胶酯酶(PE)，负责水解果胶分子中的甲酯生成果胶酸。果胶酶作用于果胶中D-半乳糖醛酸残基之间的糖苷键，可以降解果胶分子的多糖链，生成寡聚半乳糖醛酸和少量半乳糖醛酸小分子物质，从而降低粘度，提高过滤速度和榨汁效能，提高果汁出汁率，增强果味香，降低成本、提高产品品质等。

果胶酶通常是由微生物发酵液精制而成，属于蛋白质，加热可以灭活，可以作为营养素消化吸收，对人体和动物安全无害，在食品和医药等行业广泛应用。

本发明所用果胶酶属于酸性果胶酶，质量符合果胶酶制剂标准(QB1502-92)。酸性果胶酶酶活力定义为：1g酶粉或1ml酶液在50℃、pH3.5的条件下，1小时分解果胶溶液产生1mg半乳糖醛酸的酶量为1个酶活单位。

在本文中，“果胶酶活力单位”是通过果胶酶标准(QB1502-92)方法测定。

在本文中，“葛根提取物”是指将葛根经加水匀浆和加入果胶酶水解后得到的混合物；也可以是水提法(不加果胶酶)或醇提法得到的混合物。果胶酶的水解工艺参数如下：pH1-7,温度10-80℃(较好的是pH2-6,温度20-70℃，更好的是pH3-5,温度30-65℃)；果胶酶添加量≥2U(果胶酶活力单位)/g原料(较好的是≥10U/g原料，更好的是≥20U/g原料，最好的是20-100U/g原料。原料以干燥品计。)。酶的加入量可以根据预期水解效果和搅拌水解时间确定，如果要求水解完全，可以适量多加或延长水解时间，可以采用酸乙醇法检验水解物使其达到果胶反应阴性即可(混匀15分钟内无絮状沉淀出现)，水解后经过滤和或离心后得葛根提取液。葛根提取物包括葛根提取液、浓缩液、及其干粉等。

在本发明的一种优选实施方式中，除了果胶酶之外，还可加入适量淀粉酶、纤维素酶、半纤维素酶等，加入量通常不超过果胶酶的量。

在本文中，“葛根”(RadixPuerariae)是豆科植物野葛Puerarialobata(Willd.)Ohwi的干燥根，又称野葛根或柴葛根；也可以采用豆科植物甘葛藤P.thomsoniiBenth.的干燥根，亦称粉葛根。两者均为常用中药材，亦属于要药食两用品。鲜葛根采收后洗净切成厚片或小块；干燥后保存。

在本文中，“山楂葛根提取物”是指将葛根和山楂经加水匀浆和加入果胶酶水解后得到的混合物；果胶酶的水解工艺参数如下：pH1-7,温度10-80℃(较好的是pH2-6,温度20-70℃，更好的是pH3-5,温度30-65℃)；果胶酶添加量≥2U(果胶酶活力单位)/g原料(较好的是≥10U/g原料，更好的是≥20U/g原料，最好的是20-100U/g原料。原料以干燥品计。)。酶的加入量可以根据预期水解效果和搅拌水解时间确定，如果要求水解完全，可以适量多加或延长水解时间，可以采用酸乙醇法检验水解物使其达到果胶反应阴性即可(混匀15分钟内无絮状沉淀出现)，水解后经过滤和或离心后得山楂葛根提取液，经浓缩的可称为山楂葛根提取物，不经浓缩的可称为山楂葛根提取液也可以称为山楂葛根提取物。

在本发明的一种优选实施方式中，除了果胶酶之外，还可加入适量淀粉酶、纤维素酶、半纤维素酶等，加入量通常不超过果胶酶的量。

在本文中，“银耳[Tremellafuciformis(Berk.)]又称白木耳(Silverear)”，属于真菌门(Eumycota)异隔担子菌亚纲(Heterobasidiae)银耳科(Tremellaceae)银耳属(Tremella)，是一种胶质食用菌。银耳子实体呈胶质，干燥后会脱水形成角状皱褶的形状，可以长期保存，干品中碳水化合物含量可达60-70％。

在本文中，“银耳多糖”是指银耳的主要药理活性成分银耳多糖(Tremellafuciformispolysaccharides)，又称银耳酸性多糖(TremellafuciformisAcidicpolysaccharides)，属于葡酸木甘露聚糖(glucuronoxylomannan，GXM)，其分子特征为：GXM的组成至少包括甘露糖(mannose)、木糖(Xylose)和葡萄糖醛酸(glucuronicacid)等残基，主链结构为α(1,3)甘露聚糖。所谓“酸性”，与GXM中含有葡萄糖醛酸(羧基)有关。

本发明提供的组合物中的主要有效成分是山楂黄酮和葛根素，并且山楂黄酮和葛根素的重量比大于等于2；优选大于等于2.5；更优选为2.5-8.0；最优选为2.5-7.0；所述组合物基本组成可以选自下述几种方式：

山楂黄酮和葛根素；

山楂黄酮和葛根提取物；

山楂提取物和葛根素；

山楂提取物和葛根提取物；或

山楂葛根提取物。

在本发明的一种实施方式中，提供一种液态组合物：

当葛根素浓度≥4.0mg/ml时，其中山楂黄酮浓度≥0.20mg/ml，较好的是黄酮浓度≥0.40mg/ml，更好的是≥0.60mg/ml；

当葛根素浓度≥10mg/ml时，其中山楂黄酮浓度≥3.0mg/ml，较好的是黄酮浓度≥4.0mg/ml，更好的是≥5.0mg/ml。

在本发明的一种实施方式中，本发明提供的组合物中还含有银耳或银耳提取物，例如但不限于银耳多糖，以改善所获产品(例如饮品)的口感(浓稠饱满)和稳定性，减少有关食品添加剂的使用；另外还具有养胃、抗溃疡等胃肠道保护作用，可以减轻本发明提供的组合物(例如酸性饮品)对胃肠道的刺激作用；同时还能提高本发明提供的组合物的抗氧化和滋润美容等作用。

在本发明的一种较佳实施方式中，本发明提供的组合物(饮品)中银耳多糖的加入量≥1mg/ml,较好的是≥2mg/ml,更好的是≥3mg/ml。

在本发明的一种实施方式中，本发明提供的组合物中含有药学上或食品学上可接受的载体。

本发明提供的组合物可以是胶囊、片剂、口服液、饮料、膏、凝胶或糕状固体、颗粒冲剂等，制备片剂或胶囊，需要含量较高的提取物或纯品；而制备口服液，特别是作为饮料的饮品时，通常用山楂粗提物较好，风味也更好。当本发明提供的组合物做成可以销售的成品时，需要符合国家对于药品或食品的标准，包括包装、灌装、杀菌等的要求。

本发明提到的上述特征，或实施例提到的特征可以任意组合。本案说明书所揭示的所有特征可与任何组合物形式并用，说明书中所揭示的各个特征，可以任何可提供相同、均等或相似目的的替代性特征取代。因此除有特别说明，所揭示的特征仅为均等或相似特征的一般性例子。

本发明的主要优点在于：

1、首次找到山楂黄酮与葛根素对于减肥、降血脂非常有效的配比组成，其中山楂黄酮为主要成分。该配比不仅具有更好的减肥和降血脂功效，还可以减少或消除大剂量葛根素的食欲抑制活性可能造成的不良影响，试验结果显示组合物对大鼠的饮食行为和组织器官没有显著不良影响，提示具有较好的安全可靠性。

2、首次发现山楂黄酮对于葛根素的增溶作用，可有效改善葛根素水溶性较差的重要难题，为配制体积小、浓度大的含有葛根素的浓缩型产品提供了保障。

3、首次使用果胶酶解法获得的含有山楂黄酮和葛根素的提取物，不仅可以显著提高提取收率和工艺效率，而且产品还具有较好的山楂色香味品质，对于开发生产感官品质优异的液态剂型产品提供了良好的基础。

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则所有的百分数、比率、比例、或份数按重量计。

本发明中的重量体积百分比中的单位是本领域技术人员所熟知的，例如是指在100毫升的溶液中溶质的重量。

除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。

制备实施例1

山楂葛根减肥清脂口服液

1、山楂葛根提取液制备

取适量无核山楂干片、柴葛根粉按照3比1的质量比混合，加入10倍量的水搅拌加热至90℃保持10分钟，冷却后匀浆，加入适量果胶酶(50U/g原料)，搅拌加热至50℃水解3小时，测离心上清液果胶反应阴性，压滤得提取液F1和滤渣Z1；取滤渣Z1，加入10倍量的水，搅拌升温至90℃保持60分钟，冷却后压滤得提取液F2和滤渣Z2。合并滤液F1和F2，搅拌混匀后离心得上清液FtS(山楂葛根提取液)，减压浓缩后得浓缩山楂葛根提取液(nFtS)。nFtS可溶性固形物含量32％Brix(折光法测定)，比重d＝1.12g/ml，总黄酮含量约22.1mg/ml,葛根素含量约4.60mg/ml(F/P≈4.8)，酸度约4.3％。按照可溶性固形物计算，山楂葛根提取液中山楂黄酮含量约6.9％(w/w)、葛根素含量约1.4％(w/w)。

2、口服液调配生产：

取浓缩山楂葛根提取液100L，加入纯净水400L，搅拌下加入0.06％甜菊糖苷、0.2％黄原胶、搅拌加热至90℃溶解，趁热过滤，滤液经UHT超高温瞬时杀菌(125℃×3-8秒)后迅速冷却至92℃，趁热无菌热灌装(120ml/瓶)，倒瓶50秒，然后喷淋逐级冷却至40℃，吹干、贴标、装箱入库，得山楂葛根减肥清脂口服液成品。

山楂葛根减肥口服液：

性状：浅棕色匀质浓稠液

可溶性固形物：≥7.5％(Brix)

pH≥2.6

每瓶含量：总黄酮≥500mg，葛根素≥104mg。

浓度：总黄酮≥4.2mg/ml；葛根素≥0.87mg/ml，F/P≈4.8。

风味口感：酸甜适口，浓郁山楂风味，口感浓稠滑爽。

理化和卫生指标符合国家相关要求。

服用剂量：每次1瓶，每日1-2瓶。

制备实施例2

山楂葛根减肥清脂饮品制备

1、山楂葛根提取液制备

方法同实施例1。

2、银耳多糖提取液制备

取适量银耳干粉(100目)，搅拌加入40倍重量的纯净水中，搅拌加热至120℃×2小时，稍冷却后过滤取滤液或离心取上清液，得银耳多糖提取液：可溶性固形物含量约1.7％Brix，银耳多糖含量约1.5％(w/v)【酚硫酸法测定多糖含量，以葡萄糖为对照品】。

3、饮品调配生产：

取浓缩山楂葛根提取液100L、加入银耳多糖提取液250L，纯净水650L，搅拌下加入0.05％甜菊糖苷、0.05％维生素C、0.2％黄原胶、0.02％卡拉胶，搅拌加热至90℃溶解，趁热过滤，滤液经UHT超高温瞬时杀菌(125℃×3-8秒)后迅速冷却至92℃，趁热无菌热灌装(250ml/瓶)，倒瓶50秒，然后喷淋逐级冷却至40℃，吹干、贴标、装箱入库，得山楂葛根减肥清脂饮品成品。

山楂葛根减肥清脂饮品(250ml/瓶)：

性状：橙色匀质浓稠液

可溶性固形物：≥5.0％(Brix)

pH：≥2.8

每瓶含量：总黄酮≥500mg，葛根素≥104mg，银耳多糖≥870mg。

浓度：总黄酮≥2.0mg/ml；葛根素≥0.42mg/ml，F/P≈4.8。

风味口感：酸甜适口，浓郁山楂风味，口感浓稠滑爽。

理化和卫生指标符合国家相关要求。

服用剂量：每次1瓶，每日1-2瓶。

制备实施例3

葛根山楂口服液

1、山楂提取液制备

方法参考实施例1，得山楂提取液：可溶性固形物6.4％Brix,山楂黄酮含量4.85mg/ml,pH2.90。按照可溶性固形物计算，山楂提取液中黄酮含量约7.6％(w/w)。

2、口服液调配生产：

取山楂提取液125L，加入纯净水375L，搅拌下加入3588g葛根素(含量≥98％)，再加入0.20％柠檬酸、0.02％甜菊糖苷、5％蔗糖、0.2％黄原胶、0.02％卡拉胶，搅拌加热至90℃溶解，趁热过滤，滤液经UHT超高温瞬时杀菌(125℃×3-8秒)后迅速冷却至92℃，趁热无菌热灌装(60ml/瓶)，倒瓶50秒，然后喷淋逐级冷却至40℃，吹干、贴标、装箱入库，得葛根山楂口服液成品。

山楂葛根口服液(60ml/瓶)：

性状：橙色匀质浓稠液

可溶性固形物：≥6.6％(Brix)

pH≥3.0

每瓶含量：总黄酮≥66mg，葛根素≥396mg。

浓度：总黄酮≥1.1mg/ml，葛根素≥6.6mg/ml，F/P≈0.17。

风味口感：酸甜适口，山楂风味，口感浓稠滑爽。

理化和卫生指标符合国家相关要求。

服用剂量：每次1瓶，每日1-2瓶。

制备实施例4

山楂葛根颗粒冲剂

1、山楂葛根提取物干粉制备

山楂葛根提取液制备方法同实施例1，浓缩后喷雾干燥，得山楂葛根提取物干粉：黄酮含量约5.8％(w/w),葛根素含量约1.2％(w/w)，含水量3-5％(w/w)。

2、处方及制备工艺

表1、山楂葛根颗粒冲剂的处方及制备工艺

制备实施例5

山楂葛根减肥清脂胶囊

表2、山楂葛根减肥清脂胶囊的处方及制备工艺

制备实施例6

山楂葛根减肥清脂胶囊

葛根提取物制备：

取适量葛根粉(≥80目)和3％葛根量的柠檬酸，加入7倍量的水搅拌加热至90℃保持60分钟，冷却后压滤得提取液F1和滤渣Z1；取滤渣Z1，加入7倍量的水，搅拌升温至90℃保持60分钟，冷却后压滤得提取液F2和滤渣Z2。合并滤液F1和F2，搅拌混匀后离心得上清液FtS(葛根提取液)，减压浓缩后得浓缩葛根提取液(nFtS)，喷雾干燥后得葛根提取物干粉，葛根素含量约4.5％(w/w)，含水量约3-5％(w/w)。

表3、山楂葛根减肥清脂胶囊的处方及制备工艺

制备实施例7

山楂葛根减肥清脂口服液

1、山楂提取液制备

取适量无核山楂干片，加入10倍量的水搅拌加热至90℃保持10分钟，冷却后匀浆，加入适量果胶酶(20U/g原料)和纤维素酶(5U/g原料)，搅拌加热至45℃水解5小时，测离心上清液果胶反应阴性，压滤得提取液F1和滤渣Z1；取滤渣Z1，加入6倍量的水，搅拌升温至90℃保持30分钟，冷却后压滤得提取液F2和滤渣Z2。合并滤液F1和F2，搅拌混匀后离心得上清液FtS(山楂提取液)，减压浓缩后得浓缩山楂提取液(nFtS)。nFtS可溶性固形物含量约51％Brix，总黄酮含量约37.5mg/ml。

2、葛根提取液制备

取适量葛根粉(≥60目)和2％葛根量的柠檬酸，加入7倍量的水搅拌加热至90℃保持5分钟，冷却后加入适量果胶酶(10U/g原料)和纤维素酶(5U/g原料)，搅拌加热至45℃水解5小时，测离心上清液果胶反应阴性，压滤得提取液F1和滤渣Z1；取滤渣Z1，加入7倍量的水，搅拌升温至90℃保持30分钟，冷却后压滤得提取液F2和滤渣Z2。合并滤液F1和F2，搅拌混匀后离心得上清液FtS(葛根提取液)，减压浓缩后得浓缩葛根提取液(nFtS)。nFtS可溶性固形物含量约50％Brix，葛根素含量约19.8mg/ml。

3、口服液调配生产

取浓缩山楂葛根提取液100L、浓缩葛根提取液50L，加入纯净水250L，搅拌下加入2％牛磺酸、0.05％维生素C、0.06％甜菊糖苷、0.15％黄原胶、0.10％羧甲基纤维素钠(CMC)、搅拌加热至90℃溶解，趁热过滤，滤液经UHT超高温瞬时杀菌(135℃×3-6秒)后迅速冷却至约252℃，无菌灌装(50ml/瓶)封口，贴标、装箱入库，得山楂葛根减肥清脂口服液成品。

山楂葛根减肥口服液(50ml/瓶)：

性状：棕色匀质浓稠液

可溶性固形物：≥18％(Brix)

pH≥2.5

每瓶含量：总黄酮≥450mg，葛根素≥118mg，F/P≈3.7。

风味口感：酸甜适口，浓郁山楂风味，口感浓稠滑爽。

理化和卫生指标符合国家相关要求。

服用剂量：每次1瓶，每日1-2瓶。

试验实施例1

减肥功能研究

就上述制备实施例的方法获得的产品，按照“减肥功能检验方法”【《保健食品检验与评价技术规范2003年版》,中华人民共和国卫生部，p105)】进行评价，采用大鼠肥胖模型，造模成功后开始分组，连续给药观测42天，然后采血解剖大鼠，其中正常对照，是正常饲养的大鼠(不给药)；模型对照，是以高热量饲料饲养的肥胖模型大鼠(不给药)；阳性对照组，是肥胖模型大鼠+给予阳性药物(奥利司他)；样品组，是肥胖模型大鼠+给予试验样品。

试验样品的含量规格如下：山楂黄酮(含量≥80％，w/w)、葛根素(含量≥98％，w/w)；结果见表4。

表4、山楂黄酮与葛根素合用对肥胖大鼠体重增重率的影响

(Mean±SEM；n＝10；*P<0.05，**P<0.01vs模型对照组)

试验样品的含量规格如下：山楂提取液来源于实施例3，黄酮含量约7.6％(w/w)；山楂葛根提取液来源于实施例1，其中山楂黄酮含量约6.9％(w/w)、葛根素含量约1.4％(w/w)；结果见表5。

表5、山楂葛根提取液对肥胖大鼠减肥功效试验

(Mean±SD；n＝10；*P<0.05，**P<0.01vs模型对照组。

结果显示，山楂黄酮与葛根素合用于减肥具有明显的“区域协同作用”，有必要优选较好的配比。例如，在总剂量相同的情况下，山楂黄酮与葛根素的配比(F/P)在F/P＝4-8区域时对于抑制肥胖大鼠体重增重率具有一定协同增效作用(按照组成权重计算)，在F/P＝2.6时减弱为相加作用，在F/P＝1.0-0.22区域时效果最差(相当于拮抗作用)，在F/P＝0.14时相当于相加作用。各组合物试验组与模型组相比均能显著降低肥胖大鼠体重和Lee^,s值，并且对摄食量、饮水量、行为状态等指标没有显著影响。提示山楂黄酮与葛根素组合物用于减肥是安全有效的，F/P≥2.0为组合物的优选配比，其中F/P≥2.5较好，F/P为2.5-8.0更好，F/P为2.5-7.0最好。

相关数据都是**P<0.01，都有效但效果(程度)不同，组间比较方法是：按照每个有效成分在组合物中的权重计算理论“体重增重率”，与实际值比较优劣。例如在F/p＝1时，理论“体重增重率”＝73.5％×0.50+68.6％×0.50＝36.8％+34.3％＝71.1％，但实际值＝76.8％，提示实际效果较差，可能存在部分拮抗作用；在F/p＝0.22时，理论“体重增重率”＝73.5％×0.18+68.6％×0.82＝13.2％+56.3％＝69.5％，但实际值＝74.7％，提示实际效果较差，可能存在部分拮抗作用。计算和比较方法依此类推，例如在F/p＝4.6时，理论“体重增重率”＝73.5％×0.82+68.6％×0.18＝60.3％+12.3％＝72.6％，但实际值＝70.2％，实际效果优于理论值，提示可能存在协调增效作用。

葛根素单独用于减肥具有明显的“中枢食欲抑制作用”(有文献确证)，不符合健康减肥的理念，保健食品法规也不许可存在该“食欲抑制活性”，因此葛根素不宜单独(大剂量)用于减肥产品。

功效验证试验结果显示(参见表5)：(1)山楂葛根提取液(来源于实施例1)也具有显著减肥作用，与按照“有效成分”给药结果(参见表4)类似，提示山楂黄酮和葛根素分别是山楂和葛根中的减肥有效成分；(2)降低脂肪含量是减肥药评价的重要指标，山楂提取液单独给药虽然可以显著降低体重，但大小剂量均无显著降低内脏脂肪含量作用；相比之下，山楂提取液与葛根素配伍(XYFB)给药，大小剂量均具有显著降内脏低脂肪含量作用，其中组合物的小剂量(40mg/kg)优于山楂提取液单独给药组的大剂量(100mg/kg)，提示本发明所述组合物具有较好协同减肥作用，减肥效果显著提高。

试验实施例2

降脂功能研究

就上述制备实施例的方法获得的产品，按照“减肥功能检验方法”【《保健食品检验与评价技术规范2003年版》,中华人民共和国卫生部，p105)】进行评价，采用高脂高糖饲料饲养制备大鼠肥胖模型，造模成功后开始分组，连续给药观测42天，然后采血解剖大鼠。其中正常对照，是正常饲养的大鼠(不给药)；模型对照，是以高脂高糖饲料饲养的肥胖模型大鼠(不给药)；阳性对照组，是肥胖模型大鼠+给予阳性药物(奥利司他)；样品组，是肥胖模型大鼠+给予试验样品。

试验样品的含量规格如下：山楂黄酮(含量≥80％，w/w)、葛根素(含量≥98％，w/w)；结果见表6。

表6、山楂黄酮与葛根素合用对肥胖大鼠血脂的影响

(Mean±SEM；n＝10；#P<0.05，##P<0.01，模型对照组vs正常对照组；*P<0.05，**P<0.01，给药组vs模型对照组)

试验样品的含量规格如下：山楂葛根提取液来源于实施例1，其中山楂黄酮含量约6.9％(w/w)、葛根素含量约1.4％(w/w)；结果见表7。

表7、山楂葛根提取液对肥胖大鼠血脂的影响

(Mean±SD；n＝10；*P<0.05，**P<0.01vs模型对照组)

试验样品的含量规格如下：山楂葛根提取液来源于实施例1，其中山楂黄酮含量约6.9％(w/w)、葛根素含量约1.4％(w/w)；结果见表8。

表8、山楂葛根提取液提高HDL及HDL/LDL比值活性优于其纯品组合物

(Mean±SEM；n＝10；#P<0.05，##P<0.01，模型对照组vs正常对照组；*P<0.05，**P<0.01，给药组vs模型对照组。)

HDL可谓血脂健康指标，HDL值及HDL/LDL比值越高说明血脂状况越健康。

结果显示：

(1)在降血脂方面，与减肥功能类似，山楂黄酮与葛根素合用也出现了明显的“区域协同作用”：在总剂量相同的情况下，山楂黄酮单独使用降血脂效果较弱，但与适量葛根素配伍后降低TG和LDL作用显著增强，例如在F/P＝2.0-8.0区域内，随葛根素相对含量的增加降血脂作用趋于增强，有明显的剂量依赖性协同作用(按照组成权重计算)；但在F/P≤1.0的区域内，降血脂效果却出现大幅反弹变弱并维持在相加作用水平上。相比之下，阳性减肥药物奥利司他(orlistat)降血脂效果很弱或无效(仅对LDL有轻度降低作用)。提示山楂黄酮与葛根素组合物用于降血脂用途，F/P≥2.0为组合物的优选配比，其中F/P≥2.5-8.0较好，F/P≥2.5-7.0更好。

(2)功效验证试验结果显示(参见表7)：(a)山楂葛根提取液(来源于实施例1)也具有显著降血脂作用，与按照“有效成分”给药结果(参见表6)类似和有效，提示山楂黄酮和葛根素分别是山楂和葛根中的降血脂有效成分；(b)山楂葛根提取液提高HDL及HDL/LDL比值活性优于其纯品(山楂黄酮和葛根素)组合物，提示山楂葛根提取液可以作为本发明组合物的较好选择例。

综上所述，本发明提供的含有山楂黄酮和葛根素的组合物具有显著减肥和降血脂双重作用，因此具有更大治疗和保健应用价值。山楂黄酮和葛根素组合物用于减肥和降血脂功能时，F/P≥2.0为组合物的优选配比，其中F/P≥2.5-8.0较好，F/P≥2.5-7.0更好。据此可以作为优化产品配比的依据。

关于本发明所述组合物的人体(成人)每日服用剂量，其中黄酮≥200mg,较好的是≥300mg，更好的是≥400mg。

山楂葛根提取液组，具有显著减肥和降血脂作用，可以剂量依赖性地降低肥胖大鼠体重和体脂重量，显著降低TG、TC和LDL，显著升高HDL，而且试验组与模型组相比对大鼠摄食量、饮水量等指标没有显著影响。提示山楂黄酮与葛根素分别是山楂和葛根的减肥和降血脂有效成分，山楂葛根组合提取液与有效成分组合物相比同样安全有效。

山楂葛根提取液在升高肥胖大鼠HDL指标方面显著优于山楂黄酮和葛根素组合物(高含量纯品)，提示山楂葛根组合提取液具有更高降血脂保健价值，而且风味等感官品质较好。

L-肉碱单独给药无显著减肥作用，但山楂葛根提取液+L-肉碱组，似乎可以降低山楂黄酮和葛根素的有效剂量，但并未明显提升减肥和降血脂效果。

试验实施例3

葛根素溶解性和稳定性研究

以葛根素或葛根提取物(葛根素含量≥98％)和山楂黄酮或山楂提取物(山楂黄酮含量≥80％)为原料，称取适量加水加热配制所需浓度的葛根素水溶液或葛根素-山楂黄酮水溶液，然后密闭室温放置，观察溶液性状稳定性。结果见表9：

表9、山楂黄酮对葛根素的增容作用

结果显示，山楂黄酮对葛根素有显著增溶作用。例如，葛根素的水溶解度约4.6mg/ml,但4.0mg/ml的葛根素溶液长期放置也会析出结晶或絮状物沉淀；浓度为10mg/ml的葛根素水溶液，在加热溶解后冷却至室温，不久就会析出沉淀并形成白色凝胶状固体；但如果在该液中加入山楂黄酮3mg/ml后，则可以得到透明、长期稳定的葛根素水溶液。随着葛根素浓度的增加，增溶所需山楂黄酮的配比也需要相应增加。据此可以通过应用山楂黄酮与葛根素组合物，建立葛根素浓度≥4.0mg/ml的可溶性饮品技术解决方案，而无需已知工艺那样依靠添加有机溶剂来增溶(如葛根素注射液中含50％丙二醇为助溶剂)，具有更好的天然品质和安全性。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并非用以限定本发明的实质技术内容范围，本发明的实质技术内容是广义地定义于申请的权利要求范围中，任何他人完成的技术实体或方法，若是与申请的权利要求范围所定义的完全相同，也或是一种等效的变更，均将被视为涵盖于该权利要求范围之中。

Claims (10)

1.一种组合物，其中的山楂黄酮与葛根素的重量比大于等于2；优选大于等于2.5；更优选为2.5-8.0；最优选为2.5-7.0。

2.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述山楂黄酮来自山楂或山楂叶、山楂提取物或山楂葛根提取物；所述葛根素来自葛根、葛根提取物或山楂葛根提取物。

3.如权利要求2所述的组合物，其特征在于，所述提取物包括提取液及其浓缩液、提取物干粉。

4.如权利要求2或3所述的组合物，其特征在于，以所述山楂提取物或山楂葛根提取物的总重量计，其中含有1-90％的山楂黄酮；以所述葛根提取物或山楂葛根提取物的总重量计，其中含有0.2-99.5％的葛根素。

5.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物中还含有药学上或食品学上可接受的载体。

6.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述的组合物为胶囊、片剂、口服液、饮料、膏、凝胶或糕状固体、粉剂或颗粒剂。

7.一种如权利要求1所述的组合物的制备方法，其特征在于，所述方法包括的步骤选自下述：

获得山楂葛根提取物；

将获得的山楂提取物和获得的葛根提取物混合；

将获得的山楂提取物和葛根素混合；

将山楂黄酮和葛根素混合；或

将山楂黄酮和获得的葛根提取物混合。

8.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述山楂提取物、葛根提取物或山楂葛根提取物通过下述方法制备得到：

(i)将山楂和/或葛根与水混合，得到匀浆；

(ii)将匀浆和果胶酶混合，经水解得到山楂提取物、葛根提取物或山楂葛根提取物。

9.如权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述果胶酶的用量以步骤(i)中使用的每克山楂和/或葛根计，为大于等于2果胶酶活力单位；步骤(ii)中的水解条件为pH1-7，10-80℃。

10.一种如权利要求1所述的组合物的用途，其特征在于，它可用作食品、食品配料、膳食补充剂和天然药物原料；或用于制备预防和/或治疗肥胖和/或高血脂症的食品或药物。