CN105168124A - 一种治疗呼吸系统疾病的注射剂 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种治疗呼吸系统疾病的注射剂，主要原料为1,8-桉叶素。用于呼吸道疾病的治疗包括：急慢性咽喉炎、鼻炎，哮喘、阻塞性（痉挛性）支气管炎、急性和慢性支气管炎、支气管扩张、粘稠物阻塞症、囊性肺纤维化症、慢性阻塞性肺炎。该注射剂具有起效迅速、药物用量少、安全性高等优点。

Description

一种治疗呼吸系统疾病的注射剂

技术领域

本发明属于药物制剂技术领域，涉及一种含有有机成份的医药配制品，特别是涉及一种以1,8-桉叶素（C₁₀H₁₈O,Eucalyptol）为主要活性成分的注射剂，该注射剂适用于治疗呼吸系统疾病。

背景技术

呼吸系统疾病严重威胁人类生命，尤其是呼吸道感染性疾病是严重的医疗问题，占发病率和死亡率的10％，占抗菌素使用的75％。呼吸道感染分为上呼吸道感染与下呼吸道感染。上呼吸道感染包括普通感冒、病毒性咽炎、喉炎、疱疹性咽峡炎、咽结膜热、细菌性咽-扁桃体炎等；下呼吸道感染包括急性气管炎、支气管炎、慢性支气管炎、肺炎、支气管扩张等。

对于呼吸道感染疾病的治疗，一般须明确引起感染的病原体以选择有效的抗生素，但由于现有检验水平和检验周期的限制，往往很难获得明确结果，一般选用各类广谱抗生素进行治疗。随着临床上供选择的抗生素日益增多，耐药菌株亦明显增多，由于大剂量头孢菌素的应用，导致院内感染特别是假单孢铜绿杆菌和肠球菌感染日益增多，长此以往将严重威胁人类的健康和生命安全。如急性支气管炎，国外有将本病归咳嗽性疾病，并明确其主要病原是病毒或系反应性气道疾患，因此病程<7d者很少有使用抗生素指征，在澳大利亚无需抗生素治疗。虽然细菌感染和浓痰是常见的并发症，但随即对照试验研究显示，抗生素治疗对患者无益处，且可能有害。毛细支气管炎无常规使用抗生素的指征，抗生素既不能缩短病程，也不能有效地预防继发细菌感染。尤其对由真菌引起的肺部呼吸道感染尚缺乏真正奏效迅速、疗效确切的临床治疗药物。为减少临床抗生素滥用问题，从中药中寻找疗效好、毒副作用小的替代药物势在必行。

1,8-桉叶素，中文别名：桉树脑，桉油精，桉叶油醇，1,8-环氧对孟烷，欧卡那卜托，1,3,3-三甲基-2-氧杂双环[2.2.2]辛烷。英文名：Cineole，eucalyptol(e)，1,3,3-Trimethyl-2-oxabicyclo[2.2.2]octane，1,8-Cineole，1,8-Epoxy-p-menthane，1,8-Oxido-p-menthane，Eucalyptol。

分子式：C₁₀H₁₈O，分子量：154.24

口服药物在临床使用中经常出现胃肠道的不良反应，且起效较慢。注射剂不受pH、酶、食物等影响，无首过效应，作用迅速，生物利用度高，可发挥全身或局部作用。呼吸道疾病发病急，临床需要奏效快的药品。1,8-桉叶素通过加入增溶剂溶解于注射用水以制剂手段制备成无色透明的液体或乳液，临床给药途径为静脉滴注或肌肉注射。本品具有强大的抗炎、抑菌、止咳、祛痰功效。临床用于治疗呼吸道疾患。对呼吸道疾患的治疗可逐步替代抗生素，尤其适合儿童、老人和不想滥用抗生素的人群。本品对由真菌感染、衣原体、支原体引起的呼吸道疾病具有独特的治疗作用。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种治疗呼吸系统疾病的注射剂，原料为1,8-桉叶素，原料纯度大于90%。用于呼吸道疾病的治疗包括：急慢性咽喉炎、鼻炎，哮喘、阻塞性（痉挛性）支气管炎、急性和慢性支气管炎、支气管扩张、粘稠物阻塞症、囊性肺纤维化症、慢性阻塞性肺炎。该制剂具有起效快、药物用量少、使用方便、安全性高等优点。

本发明解决上述问题的技术解决方案是：

一种治疗呼吸道系统疾病的药物制剂，其特征在于所述药物制剂中含有下列重量（份）组分：1,8-桉叶素1-20重量%、增溶剂1-10重量%、水20%-99重量%，最佳配比为1-3%1,8-桉叶素＋2-10%增溶剂，其他为水。临床给药途径为静脉滴注或肌肉注射。

本申请以药效证实，1,8-桉叶素是桉油止咳、化痰、抗炎、抑菌等的活性成分，1,8-桉叶素系从桃金娘科植物蓝桉(EucalyptusglobulusLabill.)、由富含1,8-桉叶素的精油如桉叶油或其他富含1,8-桉叶素的植物分离提取，也可由化学或生物合成制得，是治疗呼吸道疾病的有效成分。研究结果表明，1,8-桉叶素可能替代目前常用的抗感染药物用于呼吸道感染疾病的治疗。实验证实，该活性成分制备成注射剂剂剂型与口服比较生物利用度高，药效作用强。

实施例：

1.将注射用水加热至50-60℃，将20g1,8-桉叶素、80gSolutolHS15（聚乙二醇十二羟基硬脂酸锂）加入，搅匀，制成1000ml，除热源，滤过，灌装，灭菌，即得。

2.为说明雾化吸入剂与口服的效果，比较了相同剂量的该成分对小鼠腹腔毛细血管通透性增高的影响。

选取健康雄性小鼠，体重为20～22g，随机分组，实验时，以相同剂量的1,8-桉叶素分别进行筋脉注射和口服给药，于药后1小时由小鼠尾静脉注入2%伊文思蓝生理盐水溶液0.1ml/10g体重，同时于腹腔注射0.8%醋酸生理盐水溶液0.2ml/只，20分钟后断头放血处死小鼠，剖开腹腔用适量生理盐水反复冲洗，并收集洗出液，滤纸滤过，并调整容积至10ml，于722型光栅分光光度计中（波长590nm）测定OD值，比较各组的差异。结果见表1。

表1比较相同剂量不同给药途径对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增高的影响

表1结果表明，本品注射给药组、阿司匹林组可显著抑制醋酸所致小鼠毛细血管通透性增高（P<0.01）；相同剂量的口服给药组虽可抑制醋酸所致小鼠毛细血管通透性增高（P<0.05），但作用效果不如注射给药组。说明注射剂为合适的剂型。

3.辅料的筛选

非离子型和两性离子型表面活性剂毒性普遍较低，阴离子型居中，而阳离子表面活性剂有较高毒性，阳离子型表面活性剂常用作消毒剂，有一定的毒性，会使中枢神经系统和呼吸系统机能下降，使胃部充血。阴离子型表面活性剂毒性较低，在应用浓度范围内，一般不会对人体造成急性毒性伤害，口服后会有腹泻现象等胃肠道反应。非离子表面活性剂属于低毒或无毒类，经口服无毒。一般认为非离子型表面活性剂的亚急性和慢性毒性实验结果均为无毒级，长期服用不会造成病态反应，在大剂量口服时引起某些脏器可逆性功能改变，因此非离子型表面活性剂可作为高安全性物质使用。阴离子型表面活性剂的溶血性强，不在注射液中使用，阳离子型的溶血性次之，非离子型的溶血性最小。非离子型溶血性从小到大的排列次序为：Tween<PEG脂肪酸酯<PRG烷基酚<AEO。在Tween系列中，溶血性次序从小到大的排列次序为：Tween-80<Tween-40<Tween-60<Tween-20。因此，非离子型增溶剂优选Tween-80。

SolutolHS15（聚乙二醇十二羟基硬脂酸锂）符合现代高效增溶剂的标准，且已通过注射药物应用验证。该品近已被收录在德国药典中。如果贮存在25℃，能保证24个月的稳定性。实验显示HS15可由蒸汽灭菌（121℃，15分钟）而不会出现重要的性质改变。溶血作用随增溶剂浓度的增加而增强，但在聚山梨醇酯80中的红血球溶解量高于在HS15中的十倍以上。组胺水平显示了同样的结果，聚山梨醇酯80中的组胺值高出SolutolHS15中的许多倍。这些结果证明了SolutolHS15的明显优势。急性口服毒性，大鼠半数致死量>20g/kg；急性口服毒性，小鼠半数致死量>20g/kg；急性腹膜内毒性，小鼠半数致死量8.74g/kg；急性静脉内毒性，大鼠雄鼠半数致死量接近1212mg/kg，雌鼠半数致死量接近1327mg/kg；急性静脉内毒性，小鼠雄鼠半数致死量接近3160mg/kg，雌鼠半数致死量接近5000mg/kg急性静脉内毒性；狗半数致死量>3160mg/kg。以上数据表明该增溶剂符合高效低毒增溶剂的标准。

3.1为证明其所选辅料适合作为本品增溶剂的效果，进行了制剂6个月的加速稳定性试验，结果见表2.

表2所选辅料对制剂稳定性的影响结果

上述结果表明，所选择辅料SolutolHS15和剂型对该成分制备成的制剂是合理的。

3.2SolutolHS15（聚乙二醇十二羟基硬脂酸锂）作为增溶剂的体外溶血性实验

3.2.1实验动物

新西兰兔，普通级,2±0.5kg。

3.2.2仪器

TCS-30型电子台秤；AB104-S型万分之一电子天平；DK-450B型电热恒温水槽；MR23i型台式高速冷冻离心机；T6新世纪紫外可见分光光度计。

3.2.3试剂

以SolutolHS15为增溶剂制备的注射剂，性状：无色透明液体；以吐温80为增溶剂制

备的注射剂，性状：浅黄色透明液体。

3.2.4实验步骤

血细胞悬液的制备：取家兔心脏采血约20ml，放入含玻璃珠的三角烧瓶中振摇10min，除去纤维蛋白原，使成脱纤血液；加入氯化钠注射液约10倍量，摇匀，1200r/min离心15min，除去上清液，沉淀的红细胞再用氯化钠注射液按上述方法洗涤2次-3次，至上清液不显红色为止；将所得红细胞用氯化钠注射液配成2%的混悬液，供试验用。

3.2.5实验结果

肉眼观察法：各观察时间点（15min-3h），吐温-80溶液呈澄明红色，管底无红细胞残留；阴性对照管红细胞全部下沉，上清液体无色澄明；以SolutolHS15为增溶剂制备的注射剂管红细胞全部下沉，上清液体无色澄明；以吐温80为增溶剂制备的注射剂管上清液为红色。

肉眼观察法及分光光度法结果均表明，以吐温80为增溶剂制备的注射剂管出现了溶血现象；以SolutolHS15为增溶剂制备的注射剂管内的溶液3h内未发生溶血和凝聚，可以注射使用。说明作为注射剂的增溶剂SolutolHS15较吐温-80更适宜。

以上举例仅是其中之一的配比。

本申请进行了动物药效实验，以说明本发明所述的治疗呼吸道疾病的药效，对本品的有效性作出科学的评价。实验过程如下：

1.实验目的

本研究的目的在于对本品的有效性作出科学的评价。

实验药物

以1,8-桉叶素注射剂为实验药物；以功效和主治与本品基本相似的双黄连粉针为阳性对照药物。

主要试剂及仪器

冰醋酸：分析纯，进口分装，广东医药站化学公司经销。氨水：广州化学试剂二厂产品。甲醛：分析纯，广东台山化工厂产品。枸椽酸：上海试剂一厂产品。印度墨水：上海长江日用粘合材料厂。内毒素：由中国药品生物制品检定所提供。722型分光光度计：上海第三分析仪器厂产品。CSW-613型雾化器：广东汕头光电研究所产品。

．剂量设置

受试药物按临床剂量的2.5倍、5倍、10倍（大鼠、豚鼠），或5倍、10倍、20倍（小鼠）分别设立3个剂量组。阳性药物剂量按该试验中受试药物的高剂量，根据临床剂量换算。

实验动物

SD系大鼠；NIH系小鼠；豚鼠。以上动物均购自广东省实验动物中心。

方法与结果

6.1本品的体内抗菌作用

对肺炎双球菌感染小鼠的保护作用选取健康小鼠，体重为18～22克，雌雄各半，随机分组，双黄连组与本品三个剂量组腹腔注射3天，每天1次。感染时，以预试实验时选定的使小鼠死亡率达90%的肺炎双球菌（菌号31001-20）悬液给各组小鼠腹腔注射造成感染（空白对照组和给药对照组腹腔注射蒸馏水），每只1.0ml（6亿菌/ml）。感染后1、6小时再给药一次，观察和统计一周内各组动物死亡率。试验结果见表3。

表3本品对肺炎双球菌感染小鼠的保护作用

注:采用卡方检验，与细菌对照组比较,**P＜0.01（以下同）

表3结果表明，本品三个剂量能显著降低肺炎双球菌感染小鼠的死亡率（P<0.01）；双黄连高剂量也可降低小鼠的死亡率（P<0.05）。

本品抗内毒素休克死亡的作用

选取健康小鼠，体重为18～22克，雌雄各半，随机分组，各组均腹腔注射给药5天，每天1次。末次给药后1小时各组动物（空白对照组除外）均分别腹腔注射D-GALN200mg/kg和内毒素1.5mg/kg，观察72小时，记录动物死亡数，见表4。

表4本品对内毒素引起休克死亡的影响

表4结果表明，本品高、中、低三个剂量组使小鼠死亡率明显减少（P<0.01），对内毒素引起的小鼠死亡有明显的保护作用，双黄连高剂量组有一定的保护作用（P<0.05）。

本品的抗炎作用

6.3.1对小鼠腹腔毛细血管通透性增高的影响

选取健康雄性小鼠，体重为20～22g，随机分组，实验时，按文献方法于药后1小时由小鼠尾静脉注入2%伊文思蓝生理盐水溶液0.1ml/10g体重，同时于腹腔注射0.8%醋酸生理盐水溶液0.2ml/只，20分钟后断头放血处死小鼠，剖开腹腔用适量生理盐水反复冲洗，并收集洗出液，滤纸滤过，并调整容积至10ml，于722型光栅分光光度计中（波长590nm）测定OD值，比较各组的差异。结果见表5。

表5本品对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增高的影响

表5结果提示，本品高、中、低剂量均能显著抑制醋酸所致小鼠毛细血管通透性增高（P<0.01）；双黄连高剂量组亦可抑制醋酸所致小鼠毛细血管通透性增高（P<0.05）。

6.3.2对大鼠蛋清性足肿胀的影响

选取健康雄性大鼠，体重为130～150g。实验时，先测定右后足踝关节以下容积（作为基础值），然后分别按照上述方法给药。药后1小时，于大鼠右后足跖腱膜下注射100%新鲜鸡蛋清（0.1ml/只）致炎，测量致炎后1、2、3、4小时的足肿容积，减去基础值，作为足肿胀度，比较各组的差异。结果见表6。

表6本品对大鼠蛋清性足肿胀的影响

表6结果提示，本品高剂量可显著抑制1、2、3、4小时的足肿胀度（P<0.01），中剂量可显著抑制1、2、3小时的足肿胀度（P<0.01），低剂量可显著抑制1小时的足肿胀度（P<0.01）以及抑制药后2小时的足肿胀度（P<0.05）；双黄连高剂量可抑制3小时的足肿胀度（P<0.05）。

本品的镇咳作用

6.4.1对小鼠氨水引咳的影响（EDT₅₀测定）

选取健康小白鼠，体重18～20g，雌雄各半。实验时，各组先分别按照上述方法给药，药后１小时（可待因组30分钟），让小白鼠置于恒压氨水喷雾装置内（压力为140mmHg，氨水浓度为28％），接受恒压氨水喷雾，氨水喷雾时间按等比级数递增，按序贯法改变氨水喷雾时间，计算小白鼠半数引咳时间（EDT₅₀），并按公式计算R值（R值＞130％为有镇咳作用，R值＞150％为有明显镇咳作用）。结果见表7。

表7结果可见，本品三个剂量组对氨水引咳均具显著的抑制作用（R值大于150％）；双黄连高剂量对氨水引咳的抑制作用不明显（R值<130％）。

6.4.2对豚鼠的止咳作用（枸椽酸喷雾引咳法）

选取健康敏感豚鼠（实验前一日作预试筛选，五分钟内咳嗽次数少于10次者不用），体重250～280g，雌雄各半。实验时，各组分别按照上述方法给药，１小时后，让豚鼠置于3L容积密封的玻璃钟罩内，用超声雾化器恒压喷入17.5％枸椽酸１分钟，观察豚鼠咳嗽的潜伏期，并记录5分钟内豚鼠咳嗽的次数。结果见表8。

表8本品对豚鼠枸椽酸喷雾引咳的影响(X±SD)

表8结果表明，本品高、中、低三个剂量均可明显延长咳嗽的潜伏期（P<0.01），三个剂量均可显著减少5分钟内的咳嗽次数（P<0.01）；双黄连高剂量对减少5分钟内的咳嗽次数和对咳嗽的潜伏期均无明显影响（P>0.05）。

结论

7.1本品有体内抗菌作用。本品三个剂量均能明显降低肺炎双球菌感染小鼠的死亡率。

7.2本品有抗毒素作用。本品对大肠杆菌内毒素引起的小鼠休克死亡有明显的保护作用。

7.3本品有抗炎作用。本品能显著抑制醋酸所致小鼠毛细血管通透性增高以及抑制大鼠蛋清性和甲醛性足肿胀。

7.4本品具明显的镇咳作用。能对小鼠氨水引咳和豚鼠枸椽酸喷雾引咳均有明显的止咳作用。

研究结果表明，本品具有显著的体内抑菌、抗毒素、抗炎、止咳的作用。

以上所述是本发明的优选实施例，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明所述原理的前提下，还可以作出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (8)

1.一种治疗呼吸道感染疾病的注射剂，其特征在于所述注射剂的活性成分包括1,8-桉叶素，优选的，1,8-桉叶素占活性成分的重量比为90%以上，优选为95%以上。

2.根据权利要求1所述的注射剂，其特征在于所述注射剂中含有下列重量份的组分：：1,8-桉叶素1-20重量%、增溶剂1-40重量%、水20%-99重量%，最佳配比为1-3%1,8-桉叶素＋2-10%增溶剂，其它为水。

3.根据权利要求2所述的注射剂，其特征在于所述的注射剂中不含有其它辅料或者还可添加适量辅料，选自：渗透压调整剂（氯化钠、葡萄糖等）、pH调整剂（氢氧化钠、碳酸钠、盐酸、醋酸等）、潜溶剂（甘油、乙醇、丙二醇等）、防腐剂（尼泊金酯类、苯甲酸及其钠盐、山梨酸及其钾盐等）、稳定剂（亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠、维生素C、EDTA等），以上添加剂在配方中均可为一种或数种的组合。

4.根据权利要求2所述的注射剂，其特征在于注射剂的pH值范围为4-9。

5.根据权利要求1-3所述的注射剂，其渗透压范围为0.5-3个生理盐水等渗浓度。

6.根据权利要求2-5任意一项所述的注射剂，所述的所述增溶剂选自脂肪酸山梨坦类（如：司盘20-85）、聚山梨酯类（如：吐温20-85）、聚氧乙烯脂肪酸酯类（如：卖泽类）、聚氧乙烯脂肪醇醚类（如：苄泽、聚氧乙烯氢化蓖麻油）、聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物（如：普流罗尼克F68、泊洛沙姆188）、聚乙二醇十二羟基硬脂酸锂等其中的一种或数种的组合，优选聚乙二醇十二羟基硬脂酸锂和/或吐温80。

7.根据权利要求1-6所述的任意一种注射剂在制备治疗呼吸道感染疾病药物中的应用。

8.根据权利要求6所述的应用，所述的呼吸系统疾病选自：急慢性咽喉炎、鼻炎，哮喘、阻塞性（痉挛性）支气管炎、急、慢性支气管炎、支气管扩张、粘稠物阻塞症、囊性肺纤维化症和/或慢性阻塞性肺炎中的一种或者多种的组合。