CN104224906A - 一种中药牛至油注射乳剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种中药牛至油注射乳剂及其制备方法，牛至油注射乳的组分为，牛至油0.005%-15%，注射用油0.08%-32%，乳化剂0.02%-18%，等渗调节剂0.001%-4%，稳定剂0.03%-12%，注射用水加至100%，注射乳剂中香芹酚含量为0.01-20mg/ml。本发明克服了现有牛至油口服制剂中存在的刺激性强，稳定性差，起效慢，生物利用度较低等问题。牛至油注射乳剂粒子均匀、吸收完全、起效迅速、药效显著、刺激性小、安全性高，满足了临床用药的需求，提高了患者的顺应性。

Description

一种中药牛至油注射乳剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及中药制剂技术领域，尤其涉及一种中药牛至油注射乳剂及其制备方法。

背景技术

牛至为唇形科牛至属多年生草本植物牛至(Origanum vulgare L)的干燥全草，又名白花茵陈、止痢草等。主要分布于地中海地区及我国的河南、江苏、福建、安徽、江西等大部分地区，为民间常用中药。具有清热解毒、利水消肿、理气化湿之功效。现代药理研究表明:牛至具有抗菌、消炎、镇痛以及调节免疫功能等多方面的作用，临床用于预防流感治疗黄疽、中暑、发热、呕吐、急性胃肠炎、腹痛等症，美国农业部的“植物化学和植物物种学”背景资料表明，牛至含有30多种抗菌化合物，是一种潜在的天然抗生素和药物生长促进剂。

牛至油是从植物牛至中提取的挥发油，为淡黄色油状液体，世界范围内均有以此为原料的人用药品和保健品，长期以来，欧美把它作为食品的抗菌防腐保鲜剂，也是我国农业部批准使用的饲料药物添加剂之一，具有安全、高效、绿色、无配伍禁忌等特点。其主要成分为酚类化合物，其中香芹酚约占80％；麝香草酚约占8.7％；对聚伞花素占约2.5％；萜品烯约占2.1％。研究发现，植物中的酚类化合物有抗菌作用，在含酚类化合物的植物中，牛至属植物(牛至、百里香等)中的香芹酚和百里香酚的含量最高。其中香芹酚和百里香酚，麝香草酚已证明有很强的抗菌活性，其活性成份具有非常强的表面活性和脂溶性，能迅速穿透病源微生物细胞膜，因此造成致病源微生物水失衡而死亡，另外香芹酚和百里酚在肠道上皮细胞的外层有活性，能加速肠道上皮细胞的更新率，减少病原体对肠道上皮细胞的感染，增强对营养物质的消化吸收能力，提高生长性能和饲料利用率。

近年来，鉴于临床上长期滥用抗生素导致的严重不良反应事件，我国逐步加强了对抗生素在管理和限制。由于牛至油独特的抗菌机理，可避免因长期使用抗生素所带来的副作用及耐菌株的产生，是一种新型的绿色植物抗生素。它含有的植物复合酚类，特别是对于大肠杆菌、沙门氏杆菌等所引起的肠道疾病有很好的控制效果，具有安全性高、抗菌谱广、作用迅速、不易产生耐药性等特点，与目前使用的抗生素和合成抗菌药无交叉抗药性，是一种比较理想的化药抗生素替代品，市场需求和发展潜力巨大。

目前有一些公开的专利涉及了中药牛至油的相关制剂，例如中国专利CN102090518A公开了牛至油预混剂及其制备方法；中国专利CN101530466A公开了一种含有牛至油和维生素的纳米药物；中国专利CN1943619A公开了中药牛至发挥油及其软胶囊的制备方法；中国专利CN1029781A公开了一种天然牛至油乳剂及其制备工艺；中国专利CN103550406A公开了一种禽用抗球虫复方牛至油口服纳米乳制剂及其制备方法。

以上专利所涉及到的制剂全部是口服制剂，虽然对牛至油的提取和稳定有一定的帮助，但口服给药并不能最终解决牛至油对消化道刺激性的问题，且口服给药吸收不完全，起效较慢，生物利用度较低，不能满足患者和临床用药的需求。

发明内容

针对上述现有技术的缺陷与不足，本发明的目的在于提供一种能防治人和畜禽由于细菌引起的消化道类疾病(如腹泻、痢疾、急慢性肠炎等)的新型纯天然抗菌药物——中药牛至油注射乳剂及其制备方法，其具有更好的稳定性、对消化道无刺激、起效迅速、生物利用度高、药效显著。本发明不但填补了牛至油类制剂临床用药的空白，增强了患者用药的顺从性，且该制剂原料来源广泛、无耐药性、绿色环保，市场需求强烈，开发潜力巨大。

本发明采取的技术方案是：

本发明的中药牛至油注射乳剂是由以下重量百分比的原料制成：

牛至油:0.005％-15％

注射用油:0.08％-32％

乳化剂:0.02％-18％

等渗调节剂:0.001％-4％

稳定剂:0.03％-12％

注射用水:加至100％，

最终制得的注射乳剂中香芹酚的含量：0.01-20mg/ml。

所述的中药牛至油注射乳剂是注射用亚微乳或注射用纳米乳。

所述的牛至油为中药牛至通过水蒸气蒸馏或超临界二氧化碳萃取法所得到的挥发油。

所述的注射用油选自注射用大豆油、花生油、玉米油、橄榄油、蓖麻油、桃仁油、油酸、鱼油、五味子油、红花油、亚油酸中的任意一种或几种的组合；所述的乳化剂选自大豆磷脂、蛋黄磷脂、氢化磷脂、泊洛沙姆化合物、吐温类化合物、司盘类化合物中的任意一种或几种的组合；所述的等渗调节剂为甘油或丙二醇；所述的稳定剂选自甘氨酸、烟酰胺、胆固醇、长连醇、油酸中的任意一种或几种的组合。

本发明的中药牛至油注射乳剂的制备方法的具体步骤如下：

(1)首先按配比称取各种原料；

(2)制取油相混合物:

将牛至油、乳化剂加入到注射用油中，超声溶解，水浴加热至60-90℃，混合至澄明，得油相混合物，恒温保存；

(3)制取水相混合物：

将剩余组分溶于注射用水中，超声溶解，水浴加热至60-90℃，混合至澄明，得水相混合物，恒温保存；

(4)制取初乳:

将油相混合物加入水相混合物中，超声搅拌混匀，制成初乳；

(5)制取终乳:

将上述初乳，再加入pH调节剂，边加边搅拌至pH6.5-7.5为止，将所得溶液高压乳匀机多次乳化，压力为80-120Mpa，即得终乳；

(6)灭菌：

将所得终乳，灌装，封口，于115℃热压灭菌30min，即得牛至油注射乳剂成品。

步骤(5)中，所述的pH调节剂为碳酸钠、碳酸氮钠或盐酸。

步骤(5)中，将初乳采用高压乳匀机乳化4次，每次10分钟，前两次乳化乳匀机压力为80Mpa；后两次乳化乳匀机压力为100Mpa，直至制成平均粒径为100-240nm的牛至油注射亚微乳。

步骤(5)中，将初乳采用高压乳匀机乳化4次，每次10分钟，前两次乳化乳匀机压力为100Mpa；后两次乳化乳匀机压力为120Mpa，直至制成平均粒径为20-80nm的牛至油注射纳米乳。

将步骤(6)制成的注射乳剂中加入冻干赋型剂，冻干赋型剂选自甘露醇、右旋糖酐、水解明胶、甘氨酸、葡萄糖、乳糖、蔗糖中的任意一种或几种的组合，其加入量为乳剂的0.006-0.8倍，经冷冻干燥去除水分即得牛至油注射冻干乳剂。

按照所述的制备方法，制得的牛至油注射乳剂(牛至油注射亚微乳、牛至油注射纳米乳、牛至油注射冻干乳)中含香芹酚为0.01-20mg/ml，系指每1毫升牛至油注射乳剂(牛至油注射亚微乳、牛至油注射纳米乳、牛至油注射冻干乳)中含香芹酚为0.01-20毫克。

本发明所制备的牛至油注射乳剂的用途为：用于防治人和畜禽由于细菌引起的消化道类疾病(如腹泻、痢疾、急慢性肠炎等)的新型抗菌药物。

与现有技术相比，本发明的牛至油注射乳剂具有以下优点:

(1)本发明的牛至油注射乳剂为均匀、透明的稳定体系，渗透性高，溶解度大，刺激性小，含量稳定，给药方便。

(2)本发明的牛至油注射乳剂给药后能迅速进入体循环，起效迅速，吸收充分，峰浓度高，达峰时间短，血药浓度-时间曲线下面积大，生物利用度远高于同类普通口服乳剂，日使用剂量远低于同类口服产品，用于防治人和畜禽由于细菌引起的消化道类疾病(如腹泻、痢疾、急慢性肠炎等)，疗效显著。

(3)本发明的制备方法简单，所需成本较低，能耗较小，产业化潜力巨大。

本发明的有益效果是：

本发明的处方及制备工艺是经过反复筛选和实验获得的，特别是乳化剂、等渗调节剂及稳定的选择及其相互的比例关系更是经过多次考察和比较才最终确定。同时所得牛至油注射乳剂的乳滴更小，分散更均匀，热稳定性更好，安全性更高。本发明有效的解决牛至油口服制剂稳定性差、刺激性大、起效慢、生物利用度低、药效不明显等的缺点，为市场提供一种稳定性强、安全性好、起效快、效果显著、无耐药性、绿色环保的新型抗菌注射乳剂。

具体实施方式

下面的实施例是对本发明的进一步详细描述。

实例一、牛至油注射亚微乳的实施例(见表1)

表1 牛至油注射亚微乳制备处方

(1)上表中配比的单位：份，为重量比。

(2)其中，所述的牛至油系天然牛至草采用水蒸汽蒸馏法或临界二氧化碳萃取法提取的牛至油，属于成熟技术，或可从市场上购得。

(3)注射用油选自大豆油、花生油、玉米油、橄榄油、蓖麻油、桃仁油、油酸、鱼油、五味子油、红花油、亚油酸中的任意一种或几种的组合。

(4)乳化剂选自大豆磷脂、蛋黄磷脂、氢化磷脂、泊洛沙姆化合物、吐温类化合物、司盘类化合物中的任意一种或几种的组合。

(5)等渗调节剂为甘油或丙二醇。

(6)稳定剂选自甘氨酸、烟酰胺、胆固醇、长连醇、油酸中的任意一种或几种的组合。

牛至油注射亚微乳的制备方法及步骤如下:

(1)按表1的配比称取各种原料；

(2)制取油相混合物:按处方配比称取一定量的牛至油、乳化剂加入到注射用油中，超声溶解，水浴加热至60-90℃，混合至澄明，得油相混合物，恒温保存；

(3)制取水相混合物：按处方配比将剩余组分溶于注射用水中，超声溶解，水浴加热至60-90℃，混合至澄明，得水相混合物，恒温保存；

(4)制取初乳:将油相加入水相中，超声搅拌混匀，制成初乳；

(5)制取终乳：将上述的初乳，再加入pH调节剂，边加边搅拌至pH6.5-7.5为止，将所得溶液用高压乳匀机乳化4次，每次10分钟，前两次乳化乳匀机压力为80Mpa；后两次乳化乳匀机压力为100Mpa，直至得到平均粒径为100-240nm的注射乳剂。

(6)灭菌：将所得乳剂，灌装，封口，于115℃热压灭菌30min，即得牛至油注射亚微乳成品。

所述的pH调节剂为碳酸钠、碳酸氢钠或盐酸

实例二、牛至油注射纳米乳的实施例(见表2)

表2 牛至油纳米乳制备处方

(1)上表中配比的单位：份，为重量比。

(2)其中，所述的牛至油位天然牛至草采用水蒸汽蒸馏法或临界二氧化碳萃取法提取的牛至油，属于成熟技术，或可从市场上购得。

(3)注射用油选自大豆油、花生油、玉米油、橄榄油、蓖麻油、桃仁油、油酸、鱼油、五味子油、红花油、亚油酸中的任意一种或几种的组合。

(4)乳化剂选自大豆磷脂、蛋黄磷脂、氢化磷脂、泊洛沙姆化合物、吐温类化合物、司盘类化合物中的任意一种或几种的组合。

(5)等渗调节剂为甘油或丙二醇。

(6)稳定剂选自甘氨酸、烟酰胺、胆固醇、长连醇、油酸中的任意一种或几种的组合。

牛至油注射纳米乳的制备方法及步骤如下:

(1)按表2的配比称取各种原料；

(2)制取油相混合物:按处方配比称取一定量的牛至油、乳化剂加入到注射用油中，超声溶解，水浴加热至60-90℃，混合至澄明，得油相混合物，恒温保存；

(3)制取水相混合物：按处方配比将剩余组分溶于注射用水中，超声溶解，水浴加热至60-90℃，混合至澄明，得水相混合物，恒温保存；

(4)制取初乳:将油相加入水相中，超声搅拌混匀，制成初乳；

(5)制取终乳:将上述的初乳，再加入pH调节剂，边加边搅拌至pH6.5-7.5为止，将所得溶液采用高压乳匀机乳化4次，每次10分钟，前两次乳化乳匀机压力为100Mpa；后两次乳化乳匀机压力为120Mpa，直至得到平均粒径为30-80nm的注射乳剂。

(6)灭菌：将所得乳剂，灌装，封口，于115℃热压灭菌30min，即得牛至油注射纳米乳成品。

所述的pH调节剂为碳酸钠或碳酸氢钠。

实例三、牛至油冻干注射乳剂的实施例(见表3)

表3 牛至油注射冻干乳剂制备处方

(1)上表中配比的单位为重量百分比。

(2)其中，所述的牛至油位天然牛至草采用水蒸汽蒸馏法或临界二氧化碳萃取法提取的牛至油，属于成熟技术，或可从市场上购得。

(3)冻干赋型剂的用量为乳剂的0.2-0.8倍，实施例数量1、2、3、4、5中冻干赋型剂的量分别为乳剂的0.8倍、0.6倍、0.5倍、0.4倍、0.2倍。

(4)冻干赋型剂选自甘露醇、右旋糖酐、水解明胶、甘氨酸、葡萄糖、乳糖、蔗糖中的任意一种或几种的组合。

(5)注射用油选自大豆油、花生油、玉米油、橄榄油、蓖麻油、桃仁油、油酸、鱼油、五味子油、红花油、亚油酸中的任意一种或几种的组合。

(6)乳化剂选自大豆磷脂、蛋黄磷脂、氢化磷脂、泊洛沙姆化合物、吐温类化合物、司盘类化合物中的任意一种或几种的组合。

(7)等渗调节剂为甘油或丙二醇。

(8)稳定剂选自甘氨酸、烟酰胺、胆固醇、长连醇、油酸中的任意一种或几种的组合。

牛至油冻干注射乳剂的制备方法及步骤如下:

(1)按表3的配比称取各种原料；

(2)制取油相混合物:按处方配比称取一定量的牛至油、乳化剂加入到注射用油中，超声溶解，水浴加热至60-90℃，混合至澄明，得油相混合物，恒温保存；

(3)制取水相混合物：按处方配比将剩余组分溶于注射用水中，超声溶解，水浴加热至60-90℃，混合至澄明，得水相混合物，恒温保存；

(4)制取初乳:将油相加入水相中，超声搅拌混匀，制成初乳；

(5)制取终乳：将上述初乳，再加入pH调节剂，边加边搅拌至pH6.5-7.5为止，将所得溶液高压乳匀机多次乳化4次，每次10分钟，前两次乳化乳匀机压力为100Mpa；后两次乳化乳匀机压力为120Mpa，直至得到平均粒径为50-120nm的乳剂。

(6)灭菌：将所得乳剂，灌装，封口，于115℃热压灭菌30min，即得牛至油注射乳剂。

所述的pH调节荆为碳酸钠或碳酸氢钠。

在上述制成的注射乳剂中加入冻干赋型剂，其加入量为乳剂的0.2-0.8倍，经冷冻干燥去除水分即得牛至油冻干注射乳剂成品。

四、牛至油注射乳剂药效实验

1.体外抗菌活实验

实验材料：金黄色葡萄球菌、埃希氏大肠杆菌、鼠沙门氏杆菌(江西农业大学兽医菌种室)，替米考星注射液、生理盐水(河南普旺生物工程有限公司)，牛至油注射乳剂(实例二中的配比2样品)。

实验方法：最小抑菌浓度(MIC)测定采用试管二倍稀释法。挑取平板上生长典型的菌落，接种于肉汤中，35℃培养18h后，菌液用3～5ml生理盐水校正浓度至0.5麦氏比浊标准，再用肉汤1:10稀释，稀释后菌液在15min内迅速接种。用微量加样器取0.1ml检测菌液有低至高浓度一次加入个试管中，35℃培养24h后记录结果。抑制检测菌液肉眼未见生长的最低浓度即为各药对检测菌的MIC。由表4看出，牛至油注射乳剂对于金黄色葡萄球菌及大肠埃希菌的抑菌效果最为明显，强于普通牛至油口服剂，与替米考星相当；而对于沙门氏的抑菌效果较强与普通牛至油口服剂相当。

表4 MIC测定结果

2.体内抗菌活性实验

实验材料：雏鸡(北京实验动物研究中心)，金黄色葡萄球菌(江西农业大学兽医菌种室)，替米考星注射液(河南普旺生物工程有限公司)，注射用油(铁岭北亚药用油有限公司),牛至油注射乳剂(实例二中的配比2样品)。

实验方法：取7日龄210只健康雏鸡，根据预实验结果，我们采用金黄色葡萄球菌的攻毒剂量为0.05ml腹腔注射，注射2h后，随即分为7组：牛至油注射乳剂高、中、低剂量组(分别为0.8mg/ml mg/ml、0.4mg/ml、0.2mg/ml皮下注射给药)、替米考星40mg/kg皮下注射(阳性对照)、感染对照组(感染不给药)、注射油0.8mg/ml皮下注射(阴性对照)，以上各组每天给药2次连续2天，健康对照组(不感染不给药)。由表5看出，除了阴性对照组注射油以外，各治疗组与感染组相比均能显著降低实验鸡的死亡率，其中牛至油高、中、低剂量组疗效显著(p<0.05)优于替米考星、牛至油口服乳剂治疗组。

表5 雏鸡感染金黄色葡萄球菌后的死亡率

五、牛至油注射乳剂刺激性实验

1.血管刺激性实验

实验材料：家兔(江西中医药大学动物实验中心)，牛至油注射乳剂(实例一中的配比3样品)。

实验方法：取健康家兔8只，随机分为两组，即空白组(家兔经右耳缘静脉滴注生理盐水)与给药组(滴注牛至油注射剂)，1次/天，连续2天。以左耳为对照组，肉眼观察家兔耳缘静脉的变化情况。于末次给药24h后将动物放血处死，取下家兔右耳，用10％甲醛固定后进行组织切片检查，切片部位为注射部位得多近心端，分别距离注射部位1.0、2.0、4.0cm处取材。

结果显示：两组家兔注药耳肉眼观察均未见血管充血、出血、水肿、组织坏死等。组织病理学检查：对照组与给药组(1.0、2.0、4.0cm)皮肤、皮下组织形态正常，耳缘静脉血管内皮细胞排列正常，未见层次增多，排列紊乱的改变，血管腔内无附壁血栓，无炎细胞浸润，血管壁无增厚，血管壁周围未见明显变性，坏死及炎症等形态学改变。表明在临床应用浓度下，牛至油注射剂对静脉血管不会造成明显的病理损伤。

2.溶血实验

实验材料：家兔(江西中医药大学动物实验中心)，多西他赛注射液(江苏奥赛康药业股份有限公司)、牛至油注射乳剂(实例三中的配比4样品)。

实验方法：制备2％红细胞悬液：取家兔血10ml，放入洁净盛有玻璃球的三角烧杯中振摇10min，除去纤维蛋白原后，加约10倍量生理盐水(0.9％)，摇匀，以2000r/min离心15min，弃去上清液，沉淀红细胞，再用生理盐水反复洗涤至上清液无红色为止，量取血球，以生理盐水配置成2％红细胞悬液。

测试方法：取洁净试管7支，进行编号，1－5号管为供试品管，6号为阴性对照管，7号为阳性对照管。按表6配比量依次加入2％红细胞悬液和生理盐水，混匀后，于37℃±0.5℃恒温水浴放置30min，然后分别加入不同量多西他赛注射液，第6管不加药液，加生理盐水做阴性对照管，第7管亦不加药液，生理盐水改加蒸馏水，做阳性对照管，各试管45min、1h、2h、3h、4h有无溶血出现，判断标准见表7

表6 溶血试验配比表

表7 溶血判断标准

结果显示，如表8所示，4h内观察，1－6管溶液红细胞下沉，上层液体无色澄明，振摇后红细胞能完全分散，表明牛至油注射剂和生理盐水无溶血和红细胞凝聚作用，7号管红色澄明，管底无红细胞残留表明全部溶血。

表8 溶血试验结果

注：“——”表示不溶血也不凝聚，“+”表示凝聚，“++”表示部分溶血，“+++”表示完全溶血。

六、牛至油稳定性实验

1、试验材料：药物:按照实施例一、二、三中的制剂各制备一种，即为所得样品。

2、试验方法

(1)离心加速试验

取各样品适量于离心管中，密封管口，置高速离心机中，以10000rpm离心40min。观察本发明制剂外观是否保持澄清，是否分层，是否出现浑浊，以及在离心管底是否出现絮状沉淀。

(2)影响因素实验

Ⅰ.高温试验

取各样品置于适宜的开口洁净容器中，温度60℃下放置10天，于第5天和第10天取样检测(参考《中国药典》2010年版)，以考察样品热稳定。

Ⅱ.高湿度试验

取各样品置于恒湿密闭容器中，在25℃于相对湿度90％±5％条件下放置10天，于第5天和第10天取样检测(参考《中国药典》2010年版)，同时称量样品在试验前后的重量，以考察样品吸湿性能。

Ⅲ.强光照射试验

取各样品置于光照箱中，于照度为4500LX±500LX条件下放置10天，于第5天和第10天取样检测(参考《中国药典》2010年版)，以考察样品的光敏性。

(3)长期稳定性试验

取各样品在温度25±2℃，相对湿度60％±10％的条件下放置12个月，分别于0、3、6、9、12个月取样检测，观察样品外观、性状、粒径的变化。

(4)热压灭菌实验

取各样品25ml充氮、密封在50ml的输液瓶中，测定微粒的粒径、pH和乳剂的稳定性参数KE。将密封好的乳剂样品于，115℃高压灭菌30min，放至室温，观察其外观，测定粒径、PH和稳定性参数KE的变化。

3、试验结果

(1)离心加速试验

样品经高速离心试验结果显示:经8000r/min离心40min，外观仍然澄清透明，

未见分层、浑浊、絮凝等物理变化，在离心管底未见有药物沉淀，结果见表9。

表9 离心加速试验结果

(2)影响因素实验

Ⅰ.高温试验

样品经高温试验结果显示:于60℃条件下放置10天，外观仍然透明，未见分层、浑浊、絮凝等物理变化，含量稳定，香芹酚在0.01-20mg/ml的范围内，牛至油注射亚微乳粒径分布于100-240nm，牛至油注射纳米乳粒径分布于30-80nm，牛至油冻干注射乳剂粒径分布于50-120nm。

Ⅱ.高湿度试验

样品经高湿试验结果显示:于在25℃于相对湿度90％±5％条件下放置10天，外观仍然透明，未见分层、浑浊、絮凝等物理变化，含量稳定，香芹酚在0.01-20mg/ml的范围内，牛至油注射亚微乳粒径分布于100-240nm，牛至油注射纳米乳粒径分布于30-80nm，牛至油冻干注射乳剂粒径分布于50-120nm。

Ⅲ.强光照射试验

样品经高湿试验结果显示:于照度为4500LX±500LX条件下放置10天，外观仍然透明，未见分层、浑浊、絮凝等物理变化，含量稳定，香芹酚在0.01-20mg/ml的范围内，牛至油注射亚微乳粒径分布于100-240nm，牛至油注射纳米乳粒径分布于30-80nm，牛至油冻干注射乳剂粒径分布于50-120nm。

(3)长期稳定性试验

样品长期稳定性试验结果显示:在常温下放置12个月，外观仍然澄清透明，未见分层、浑浊、絮凝等物理变化，含量稳定，香芹酚在0.01-20mg/ml的范围内，牛至油注射亚微乳粒径分布于100-240nm，牛至油注射纳米乳粒径分布于30-80nm，牛至油冻干注射乳剂粒径分布于50-120nm，结果见表10。

(4)热压灭菌实验

样品热压灭菌实验结果显示，乳剂的物理性质稳定，各指标未见明显变化，结果见表11。

表10 牛至油注射乳剂长期稳定性试验结果

表11 热压灭菌实验结果

尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。

Claims (10)

1. 一种中药牛至油注射乳剂，其特征在于：所述的中药牛至油注射乳剂是由以下重量百分比的原料制成：

牛至油:0.005%-15%

          注射用油:0.08%-32%

          乳化剂:0.02%-18%

          等渗调节剂:0.001%-4%

          稳定剂:0.03%-12%

          注射用水:加至100% ，

          注射乳剂中香芹酚的含量：0.01-20 mg/ml。

2.如权利要求1所述的中药牛至油注射乳剂，其特征在于：所述的中药牛至油注射乳剂是注射用亚微乳或注射用纳米乳。

3.如权利要求1所述的中药牛至油注射乳剂，其特征在于：所述的牛至油为中药牛至通过水蒸气蒸馏或超临界二氧化碳萃取法所得到的挥发油。

4.如权利要求1所述的中药牛至油注射乳剂，其特征在于：所述的注射用油选自注射用大豆油、花生油、玉米油、橄榄油、蓖麻油、桃仁油、油酸、鱼油、五味子油、红花油、亚油酸中的任意一种或几种的组合；所述的乳化剂选自大豆磷脂、蛋黄磷脂、氢化磷脂、泊洛沙姆化合物、吐温类化合物、司盘类化合物中的任意一种或几种的组合。

5.如权利要求1所述的中药牛至油注射乳剂，其特征在于：所述的等渗调节剂为甘油或丙二醇；所述的稳定剂选自甘氨酸、烟酰胺、胆固醇、长连醇、油酸中的任意一种或几种的组合。

6.一种制备如权利要求1-5任一项所述的中药牛至油注射乳剂的方法，其特征在于：所述方法的具体步骤如下：

（1）首先按配比称取各种原料；

（2）制取油相混合物:

将牛至油、乳化剂加入到注射用油中，超声溶解，水浴加热至60-90℃，混合至澄明，得油相混合物，恒温保存；

（3）制取水相混合物：

将剩余组分溶于注射用水中，超声溶解，水浴加热至60-90℃，混合至澄明，得水相混合物，恒温保存；

（4）制取初乳:

将油相混合物加入水相混合物中，超声搅拌混匀，制成初乳；

（5）制取终乳:

将上述初乳，再加入pH调节剂，边加边搅拌至pH 6.5-7.5为止，将所得溶液高压乳匀机多次乳化，压力为80-120Mpa，即得终乳；

（6）灭菌：

将所得终乳，灌装，封口，于115℃热压灭菌30 min，即得牛至油注射乳剂成品。

7.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于：步骤（5）中，所述的pH调节剂为碳酸钠、碳酸氮钠或盐酸。

8.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于：步骤（5）中，将初乳采用高压乳匀机乳化4次，每次10分钟，前两次乳化乳匀机压力为80Mpa；后两次乳化乳匀机压力为100Mpa，直至制成平均粒径为100-240nm的牛至油注射亚微乳。

9.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于：步骤（5）中，将初乳采用高压乳匀机乳化4次，每次10分钟，前两次乳化乳匀机压力为100Mpa；后两次乳化乳匀机压力为120Mpa，直至制成平均粒径为20-80nm的牛至油注射纳米乳。

10.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于：将步骤（6）制成的注射乳剂中加入冻干赋型剂，冻干赋型剂选自甘露醇、右旋糖酐、水解明胶、甘氨酸、葡萄糖、乳糖、蔗糖中的任意一种或几种的组合，其加入量为乳剂的0.006-0.8倍，经冷冻干燥去除水分即得牛至油注射冻干乳剂。