CN101444492A - 注射用盐酸洛美沙星冻干粉针剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种注射用盐酸洛美沙星冻干粉针剂及其制备方法，该盐酸洛美沙星冻干粉针剂由活性成分盐酸洛美沙星、药学上可接受的冻干粉针剂赋形剂、pH值为3.0～6.5的缓冲溶液配制而成，三者的配比为50～150∶20～60∶1500～3500(g∶g∶ml)。本发明的盐酸洛美沙星冻干粉针剂其药效稳定且不易分解、析出，使用方便，耐受性好，生理刺激小，久放稳定。

Description

注射用盐酸洛美沙星冻干粉针剂及其制备方法

技术领域

本发明属于药物制剂领域，具体地说，涉及一种药效稳定且不易分解、析出的注射用盐酸洛美沙星冻干粉针剂及其制备方法。

背景技术

盐酸洛美沙星是以喹啉环作母核的第三代喹诺酮类抗菌剂，其化学名称为(±)-1-乙基-6，8-二氟-1，4-二氢-7-(3-甲基-1-哌嗪基)-4-氧代-3-喹啉羧酸盐酸盐。化学结构如下图，其喹啉环的6位和8位上有氟原子，7位上有3-甲基-哌嗪基。洛美沙星在喹啉环的6位上引入氟原子，对革兰氏阳性菌的抗菌谱扩大，抗菌活力增强。8位上引入氟原子，7位哌嗪基的3位上引入甲基后，不仅增加了消化道吸收和以原型药的尿排泄，还增强了体内抗菌活力。

C₁₇H₁₉F₂N₃O₃·HCl

盐酸洛美沙星对革兰氏阳性菌、阴性菌及部分厌氧菌的抗菌谱广和抗菌活力强，对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、耐氨苄青霉素流感嗜血菌、耐吡哌酸的大肠杆菌等也有较大抗菌作用。体外研究表明，本品对革兰氏阳性菌的抗菌效力虽不及氧氟沙星，但与诺氟沙星程度相同，强于依诺沙星；对革兰氏阴性菌的抗菌效力较诺氟沙星、氧氟沙星弱，与依诺沙星程度相同。本品的作用机制系通过抑制细菌DNA旋转酶来达到杀菌作用。体内感染的防御效果与氧氟沙星程度相同，优于诺氟沙星、依诺沙星。

另外，洛美沙星是投放世界市场的第一个一天一次剂量喹诺酮类抗菌药，它与茶碱无相互作用，不会延长茶碱的半衰期，对于接受茶碱治疗的哮喘和支气管哮喘患者不需禁忌，本品最大优点在于保持了其它喹诺酮类药物对G+菌和G-菌强的抗菌活性，同时在体内预防感染的效果优于同类药物。

目前市场上使用的盐酸洛美沙星有片剂、胶囊剂、注射剂。其中注射液在光照、温度过高时，稳定性差，容易分解，易析出，效果不稳定，严重影响产品质量和疗效。另外，盐酸洛美沙星注射液的处方中还需要添加DMF(N，N-二甲基甲酰胺)作为助溶剂，但DMF具有一定的毒性，中国药典将其划为药品中常见的残留溶剂第二类，应该限制使用，以防止对病人潜在的不良影响。

目前市售的盐酸洛美沙星粉针剂生产过程中，一般直接用注射用水配液，pH值波动较大，造成质量不稳定且病人的耐受性也差；不同的冻干工艺，还会使生产出来的产品成形性和复溶性产生很大的差异。

本发明的注射用盐酸洛美沙星冻干粉针剂克服了上述缺陷，在生产过程中采用缓冲液配液，pH值稳定且与人体生理pH接近，同时本缓冲液还可起到助溶剂的效果，所生产出的药品质量稳定，溶解性明显优于其他同类产品，患者耐受性好，医生使用方便。以其处方科学，工艺先进，安全有效为特点，并且其对光、热不敏感，质量稳定，疗效显著，易于保存和运输。

发明内容

本发明的目的是提供一种药效稳定且不易分解、析出的注射用冻干粉针剂。

本发明的又一目的是提供上述注射用盐酸洛美沙星冻干粉针剂的制备方法。

本发明的注射用盐酸洛美沙星冻干粉针剂，由活性成分盐酸洛美沙星、药学上可接受的冻干粉针剂赋形剂、pH值为3.0～6.5的缓冲溶液配制而成。

活性成分盐酸洛美沙星、药学上可接受的冻干粉针剂赋形剂及缓冲溶液的配比为50～150∶20～60∶1500～3500，优选100∶41.4：2600或100∶41.4∶2700(g∶g∶ml)。

其中，所述赋形剂为甘露醇、乳糖、右旋糖酐、葡萄糖、山梨醇、氯化钠中的一种。

所述pH值为3.0～6.5的缓冲溶液为醋酸-醋酸钠缓冲液、醋酸-醋酸铵缓冲液、醋酸盐缓冲液、枸橼酸-磷酸二氢钠缓冲液、磷酸盐缓冲液、乙醇-醋酸铵缓冲液、甲酸钠缓冲液中的一种。

上述注射用盐酸洛美沙星冻干粉针剂的制备方法，其包括如下步骤：

1、按盐酸洛美沙星、冻干粉针赋形剂及pH3.0～6.5缓冲溶液150∶20～60∶1500～3500(g:g:ml)的比例，加入缓冲溶液并加热至50℃～95℃，然后加入甘露醇搅拌使溶解，再缓慢均匀地加入盐酸洛美沙星搅拌使溶解，冷却至55℃～85℃；

2、调节pH值至4.4～5.5，加入活性炭搅拌吸附，过滤，滤液温度保持在50℃～95℃。

3、然后药液经0.22μm微孔滤膜过滤后，保持药液温度在0℃～50℃进行灌装，灌装结束后进行冷冻干燥。

优选地，步骤1中，缓冲溶液加热至70℃，加入盐酸洛美沙星搅拌溶解后，冷却至60℃；

步骤2中，加入0.15％(w/v)的活性炭搅拌吸附30分钟后，过滤，滤液温度保持在60℃；

步骤3中，药液经过滤后，保持药液温度在60℃～70℃，进行冷冻干燥。

在上述方法中，所述赋形剂为甘露醇、乳糖、右旋糖酐、葡萄糖、山梨醇、氯化钠中的一种。

所述pH值为3.0～6.5的缓冲溶液为醋酸-醋酸钠缓冲液、醋酸-醋酸铵缓冲液、醋酸盐缓冲液、枸橼酸-磷酸二氢钠缓冲液、磷酸盐缓冲液、乙醇-醋酸铵缓冲液、甲酸钠缓冲液中的一种。

在步骤2中，可用醋酸钠或/和乳酸、醋酸、醋酸铵、枸橼酸、磷酸盐、甲酸钠调节pH值。

在步骤3中，所述冷冻干燥包括预冻、升华干燥、再干燥。

其中，所述预冻过程采用速冻法，先将搁板温度降低至-5℃～-10℃，再放入制品以10℃/h的速率急速冷冻至-45℃，在-45℃下预冻2h～6h。

所述升华干燥过程采用一次升华法，控制真空度在10～40pa、温度在-10℃下，以每小时5～18℃升温升华。

所述再干燥过程中，真空度下限设定为2～6Pa，采用程序升温：以1～5℃/h升温至20℃，再以1～10℃/h升温至45±5℃，保温5～20小时。

制品在干燥之前必须进行预冻，预冻温度应低于产品共熔点10～20℃。如果预冻温度不在低共熔点以下，抽真空时则有少量液体“沸腾”而使制品表面凹凸不平。采用速冻法在产品进箱之前，先把冻干箱温度降到-45℃以下，再将制品装入箱内，这样急速冷冻，形成细微冰晶，使制得的产品疏松易溶。慢冻时形成的结晶粗，所形成的冰晶越大，越有利于水分升华，但冻出来的制品溶解性差，达不到药用标准要求。预冻的速度会影响冷冻时形成的冰晶大小，而冰晶大小又会影响干燥速率和干燥后产品的溶解速度。因此必须恰当的控制制品的预冻速率，对产品冰晶体的形成进行控制。经过反复试验，盐酸洛美沙星预冻速率控制在10℃/h，所形成的冰晶不但水分升华快，而且冻干后的制品能在短时间内完全溶解。

升华干燥法有两种，一种是一次升华法，另一种是反复预冻升华法。本发明采用一次升华法，先将处理好的制品溶液在干燥箱内预冻至共熔点以下10℃～20℃，同时将冷凝器温度下降至-45℃以下，启动真空泵，待真空度达一定数值后，缓缓打开蝶阀，当干燥箱内真空度达13.33pa(0.1mmHg)以下关闭冷冻机，通过搁置板下的加热系统缓缓加温，供给制品在升华过程中所需的热量，使冻结产品的温度逐渐升高至约-20℃，药液中的水分就可升华，最后可基本除尽，然后转入再干燥阶段。

升华过程是自冻结制品表面逐渐向下进行的，约有80％以上的游离水将被除去，其升华速率与系统温度和真空度有关，制品温度必须高于冷凝器温度，才能有利于制品内水分升华及冻干箱内水蒸气向冷凝器流动。因此，应尽可能提高制品的温度，降低冷凝器的温度，但制品的温度不能超过最低共熔点，否则过多热量会引起制品的回熔；同时，还会导致制品中形成冷冻核，而冷冻核熔化后将在制品中产生一个潮湿的区域，影响制品水分含量和成品外观。真空度也是影响制品水分升华的一个重要因素。在制品升华过程中，系统真空度不是越高越好，真空度高有利于制品中冰的升华，但真空度太高不利于传热，反而降低升华速率。当压强低于10Pa时，气体的对流传热效应极小，可忽略不计；压强大于10Pa时，气体的对流传热开始明显增加。但真空度不足，可能会导致制品中水分升华不完全，使制品含水量偏高。基于洛美沙星化学特性，经过发明人反复试验研究，将升华温度控制在-10℃以下，真空度控制在10～40Pa，制品内的自由水能在2～7小时，完成升华。

制品升华完成后其内部仍含有大约10％左右的结合水，要使水分达到药用要求，需进行再干燥，在此阶段制品温度越高，持续时间越长，越有利于除去残留水分，可是制品温度过高，持续时间过长，会影响药物活性，浪费能源，增加成本；但若干燥速度过慢，干燥时间过短，会导致制品水分残留量超标。经过工艺摸索，盐酸洛美沙星在再干燥阶段采用程序升温，以1～5℃/h升温至20℃，再以1～10℃/h升温至45±5℃，冷凝器控制在较低的极限温度，系统控制在较高的真空度2～6Pa，维持5～20小时。

盐酸洛美沙星具有明确的药理作用，可抑制细菌的DNA旋转酶和DNA复制，阻止细菌DNA超螺旋结构的形成，对细菌细胞膜有高度的穿透力，使得细菌细胞溶解，产生快速杀菌作用。其抗菌谱广，对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌及结核杆菌、分支杆菌、肺炎支原体、立克次体，杜氏嗜血杆菌等都有快速灭菌作用。

本发明研究人员发现，本发明的注射用盐酸洛美沙星冻干粉针剂，对大肠杆菌、沙门氏菌属等革兰氏阴性菌的最低抑菌浓度为<0.05～1.56μg/ml。

通过稳定性试验验证了本发明的注射用盐酸洛美沙星冻干粉针剂，除高湿条件下略有吸湿，水分有所增加外，其他条件下均符合规定，表现出较好的稳定性。

在临床应用过程中本发明的注射用盐酸洛美沙星冻干粉针剂总有效率为80％，对肠道感染菌的有效率为92％，对不同致病菌感染的临床总有效率为83％，细菌清除率为76％。通过试验进行了安全性检查，其不良反应发生率分别为7％，偶有皮疹，消化道症状恶心，伴旋晕，但无肝、肾、心血管及血液系统异常变化，其疗效显著，毒副作用低，不良反应发生率低，为安全有效的药物制剂。

本发明的注射用盐酸洛美沙星冻干粉针剂，具有如下优点：

1、药效稳定且不易分解、析出；

2、使用和运输方便，耐受性好，生理刺激小，久放稳定；

3、本发明的注射用盐酸洛美沙星粉针剂配制成注射剂静滴后，在体内分布广，组织穿透性好，80％通过肾脏以原药形式，从尿中排泄，无结晶尿现象，可与荼碱合用；

4、适用于呼吸道感染、消化道感染、泌尿道感染、盆腔感染、皮肤软组织感染及其它感染；

5、在生产过程中采用缓冲液配液，pH值稳定，有效保证了药品质量的稳定性；

6、本发明所用的缓冲液同时还可以起到助溶剂的效果，溶解性优于同类产品，方便了医生的用药；

7、本发明所采用的冻干工艺生产出来的产品粒子较细腻，外观均匀，比表面积大，多孔结构好，溶解速度快；

8、本发明通过控制预冻速率，对产品冰晶体的形成进行了控制，而良好的冰晶体结构可以使得冻干过程尤其是第一阶段升华时间大大缩短，同时冻干后产品的残余水量、复溶性、成形性均符合要求，达到了节约能源，降低成本的目的。

具体实施方式

以下实施例进一步说明本发明的内容，但不应理解为对本发明的限制。

实施例1 0.1g盐酸洛美沙星注射用冻干粉针剂的制备

处方组成：(1000瓶处方量)

盐酸洛美沙星(纯品以洛美沙星计)                100g

甘露醇                                        41.4g

冰醋酸-醋酸钠缓冲液(pH值为4.5)                2600ml

灌封于                                        7ml管制瓶中

冰醋酸-醋酸钠缓冲液(pH值为4.5)的制备：取9.8ml冰醋酸，加入醋酸钠18g，用注射用水稀释至1000ml即可。

将处方量的缓冲液加入浓配罐加热至70℃左右。

将处方量甘露醇加入浓配罐搅拌使溶解。

将处方量的盐酸洛美沙星缓缓均匀加入浓配罐搅拌使溶解，然后冷却至60℃左右。

测定药液pH值，用醋酸钠调pH值至4.5～5.5之间。

加入0.15％(w/v)活性炭搅拌吸附30分钟后，过滤至稀配罐，稀配罐温度保持在60℃左右，取样进行半成品检测(要求其含量控制在35.77～41.15mg/ml、pH值控制在4.5～5.5)。

检测合格后，药液经0.22μm微孔滤膜压滤至灌装间进行灌装，灌装时药液温度应为60℃左右。

灌装前应检查玻瓶、胶塞、药液的可见异物，灌装过程中应检查装量及可见异物，若有结晶析出及时返回稀配罐。

瓶塞处理：玻瓶灭菌温度350℃，大于5分钟；胶塞≥125℃，150分钟(干热)，胶塞≥121℃，30分钟(湿热)。

冷冻干燥包括预冷冻、升华干燥、再干燥三个阶段。

1、预冷冻：搁板温度预冻至-5～-10℃，药品进箱；将样品以10℃/h降温至-45℃，在-45℃预冻4小时。

2、升华干燥：真空度控制在10～40Pa，以17.5℃/h升温至-10℃。

3、再干燥：真空度下限设定为2～6Pa，采用程序升温：以3～3.5℃/h升温至20℃，再以2～7.5℃/h升温至45±5℃，保温5小时。

冷冻干燥后，制得0.1g/瓶的盐酸洛美沙星冻干粉针剂1000瓶，经检测盐酸洛美沙星(C₁₇H₁₉F₂N₃O₃·HCl)的含量为96.10％(按洛美沙星(C₁₇H₁₉F₂N₃O₃)计算)，符合应为标示量的93.0％～107.0％的规定。

实施例2 0.2g盐酸洛美沙星注射用冻干粉针剂的制备

处方组成：(1000瓶处方量)

盐酸洛美沙星(纯品以洛美沙星计)             200g

甘露醇                                     82.8g

冰醋酸-醋酸钠缓冲液(pH值为4.5)             5400ml

灌封于                                     12ml管制瓶中

冰醋酸-醋酸钠缓冲液(pH值为4.5)的制备：取9.8ml冰醋酸，加入醋酸钠18g，用注射用水稀释至1000ml即可。

将处方量的缓冲液加入浓配罐加热至70℃左右。

将处方量甘露醇加入浓配罐搅拌使溶解。

将处方量的盐酸洛美沙星缓缓均匀加入浓配罐搅拌使溶解，然后冷却至60℃左右。

测定药液pH值，用醋酸钠调pH值至4.5～5.5之间。

加入0.15％(w/v)活性炭搅拌吸附30分钟后，过滤至稀配罐，稀配罐温度保持在60℃左右，取样进行半成品测定(要求其含量控制在34.44～39.63mg/ml、pH值控制在4.5～5.5)。

检测合格后，药液经0.22μm微孔滤膜压滤至灌装间进行灌装，灌装时药液温度应为60℃左右。

灌装前应检查玻瓶、胶塞、药液的可见异物，灌装过程中应检查装量及可见异物，若有结晶析出及时返回稀配罐。

瓶塞处理：玻瓶灭菌温度350℃，大于5分钟；胶塞≥125℃，150分钟(干热)，胶塞≥121℃，30分钟(湿热)。

冷冻干燥包括预冷冻、升华干燥、再干燥三个阶段。

1、预冷冻：搁板温度预冻至-5～-10℃，药品进箱；将样品以10℃/h降温至-45℃，在-45℃预冻4小时。

2、升华干燥：真空度控制在10～40Pa，以11.5℃/h升温至-10℃。

3、再干燥：真空度下限设定为2～6Pa，采用程序升温：以2.5～3.5℃/h升温至20℃，再以1～2.5℃/h升温至45±5℃，保温8～11小时。

冷冻干燥后，制得0.2g/瓶的盐酸洛美沙星冻干粉针剂1000瓶，经检测盐酸洛美沙星(C₁₇H₁₉F₂N₃O₃·HCl)的含量为103.20％(按洛美沙星(C₁₇H₁₉F₂N₃O₃)计算)，符合应为标示量的93.0％～107.0％的规定。

实施例3 0.4g盐酸洛美沙星注射用冻干粉针剂的制备

处方组成：(1000瓶处方量)

盐酸洛美沙星(纯品以洛美沙星计)          400g

甘露醇                                  165.6g

冰醋酸-醋酸钠缓冲液(pH值为4.5)          10400ml

灌封于                                  30ml管制瓶中

冰醋酸-醋酸钠缓冲液(pH值为4.5)的制备：取9.8ml冰醋酸，加入醋酸钠18g，用注射用水稀释至1000ml即可。

将处方量的缓冲液加入浓配罐加热至70℃左右。

将处方量甘露醇加入浓配罐搅拌使溶解。

将处方量的盐酸洛美沙星缓缓均匀加入浓配罐搅拌使溶解，然后冷却至60℃左右。

测定药液pH值，用醋酸钠调pH值至4.73～4.75后，加入乳酸调节pH值4.40～4.45。

加入0.15％(w/v)活性炭搅拌吸附30分钟后，过滤至稀配罐，稀配罐温度保持在60℃左右，取样进行半成品检测(要求其含量控制在35.77～41.15mg/ml、pH值控制在4.40～4.45)

检测合格后，药液经0.22μm微孔滤膜压滤至灌装间进行灌装，灌装时药液温度应为60℃左右。

灌装前应检查玻瓶、胶塞、药液的可见异物，灌装过程中应检查装量及可见异物，若有结晶析出及时返回稀配罐。

瓶塞处理：玻瓶灭菌温度350℃，大于5分钟；胶塞≥125℃，150分钟，干热(胶塞≥121℃，30分钟，湿热)。

冷冻干燥包括预冷冻、升华干燥、再干燥三个阶段。

1、预冷冻：搁板温度预冻至-5～-10℃，药品进箱；将样品以10℃/h降温至-45℃，在-45℃预冻4小时。

2、升华干燥：真空度控制在10～40Pa，以5～6℃/h升温至-10℃。

3、再干燥：真空度下限设定为2～6Pa，采用程序升温：以约1～2.5℃/h升温至20℃，再以2～3.5℃/h升温至45±5℃，保温16小时。

冷冻干燥后，制得0.4g/瓶的盐酸洛美沙星冻干粉针剂1000瓶，经检测盐酸洛美沙星(C₁₇H₁₉F₂N₃O₃·HCl)的含量为96.45％(按洛美沙星(C₁₇H₁₉F₂N₃O₃)计算)，符合应为标示量的93.0％～107.0％的规定。

实验例1 盐酸洛美沙星冻干粉针剂的稳定性试验

依据盐酸洛美沙星原料药质量标准【标准号：WS-523(X-447)-95】、注射用盐酸洛美沙星质量标准【标准号：WS-096(X-081)-2001(2)】以及中国药典2005年版二部附录XIX C原料药与药物制剂稳定性试验指导原则，对本发明的盐酸洛美沙星冻干粉针剂进行了影响因素试验、加速试验、长期试验。

1、影响因素试验

A.高温试验

取实施例1的样品置于恒温箱中在60℃条件下避光放置10天，于5天和10天取样，试验结果如表1所示：

表1  高温(60℃)试验结果

可见，供试品放置5天所考察项目均无明显变化，放置10天有关物质总杂质量增大，其他项目无明显变化。

B.强光照射试验

取实施例1的样品置于装有日光灯的光照箱内(照度为4500LX±500)，放置10天，于5天和10天取样，试验结果如表2所示：

表2  强光照射(4500±500LX)试验结果

可见，供试品放置5天所考察项目均无明显变化，放置10天有关物质总杂质量略微增大，其他项目无明显变化。

C.高湿试验

取实施例1的样品适量置表面皿中，置温度25℃，相对湿度为92.5％的条件下放置5天，增重为20.10％，超过了5％，故将样品在相对湿度为75％的条件下放置10天，增重为9.27％，并于第5和10天取样测定；并与0天样品比较，试验结果如表3

表3  高湿(25℃，RH75％)试验结果

可见，供试品放置5天、10天由于水分增加，含量分别降至91.43％、89.50％，其他项目无明显变化。

2、加速试验

取实施例1的样品用市售包装，在温度为40℃、相对湿度为75％的条件下放置6个月，于1、2、3和6月取样测定，并与0天样品比较，试验结果如表4所示。

表4  加速(40℃ RH75％)试验结果

可见，三批样品经放置6个月后，考察项目均无明显变化。结果见表4。

3、长期试验考察

取实施例1的样品同“加速试验”方法包装，在温度为25℃、相对湿度为60％条件下放置，于3、6、9、12、18、24和36月取样测定；并与0天样品比较，试验结果如表5所示：

表5  长期试验(25℃，RH60％)结果(批号：020301)

可见，三批样品考察至9个月，所考察项目均无明显变化。

结论：高温、高湿、光照均对本品的稳定性产生影响，加速试验及长期试验结果均表明按市售包装后、其稳定性良好。

实验例2 盐酸洛美沙星冻干粉针剂的安全性试验

1、注射用盐酸洛美沙星溶血试验

1.1于试验目的：检查注射用盐酸洛美沙星有无溶血和凝聚反应，判断其作为静脉注射用的的安全性。

1.2 实验材料

实验对象：雄性家兔，2.9kg，山西省药品检验所动物室提供。

供试品溶液：实施例1的注射用盐酸洛美沙星冻干粉针剂，白色粉末，每瓶100mg，使用时用生理盐水溶解为25mg/ml和50mg/ml，即为供试品溶液。

1.3 实验方法

制备2％兔血生理盐水混悬液：取家兔血15ml，去除纤维蛋白原，移入刻度离心试管内，加生理盐水，摇匀离心，去上清液，反复洗几次直至上清液呈无色透明为止，然后按红细胞的容积，用生理盐水稀释成2％的混悬液。

溶血性试验：取刻度离心试管14支，分为二组，每组7支，按表6的量加入各种液体，每组第6管不加入供试品溶液，作为空白对照管；第7支仍不加供试品溶液，并用蒸馏水代替生理盐水，作为溶血的阳性对照，将各管轻轻摇匀，在37℃水浴中保温3h，按15、30min、45min、1h、2h、3h时间段观察并记录结果。溶液澄明红色，为溶血；红细胞全部下沉，上层液无色澄明，为无溶血，试验结果如表6、表7所示：。

表6  注射用盐酸洛美沙星溶血性试验结果

表7  注射用盐酸洛美沙星试验结果

注：结果中“+”表示溶血；“-”表示不溶血。

由表1、表2可见，浓度为25mg/ml和50mg/ml的注射用盐酸洛美沙星溶液，0.1ml、0.2ml、0.3ml、0.4ml、0.5ml管，在37℃保温3h，均未出现溶血和凝聚反应，上层液无色澄明，红细胞全部下沉，表明注射用盐酸洛美沙星无明显溶血作用，符合静脉注射用安全性检查的要求。

2、注射用盐酸洛美沙星局部刺激试验

2.1 试验目的：观察家兔耳缘静脉推注和股四头肌注射用盐酸洛美沙星后对血管和肌肉所产生的刺激反应情况。

2.2 实验材料

实验对象：家兔、雌雄兼用，2.0～3.0kg，山西省华卫所实试动物中心提供。

供试品溶液：实施例1的注射用盐酸洛美沙星冻干粉针剂，白色粉末，每瓶100mg，使用时用生理盐水溶解为5mg/ml，即为供试品溶液。

2.3试验方法：

2.3.1 家兔耳缘一次性血管刺激试验

取健康家兔4只，于一侧耳缘静脉以无菌操作方法推注浓度为5mg/L的供试品溶液5ml，另一侧推注等体积生理盐水，于注完后24h先用肉眼观察注射部位的血管及周围组织的变化，然后将2只家兔猝死，离注射部位1cm剪下兔耳(含血管)约3～4cm放入10％甲醛溶液中固定，送病理切片检查，余下的2只家兔于给药后7天猝死，取材做病理切片检查。

2.3.2 家兔耳缘静脉多次性血管刺激试验

取健康家兔4只，于一侧耳缘静脉以无菌操作方法推注浓度为5mg/ml的供试品溶液5ml，另一侧推注等体积生理盐水，连续给药10天(10次)，于第10次给药24h，先用肉眼观察注射部位的血管及周围组织的变化，然后将2只家兔猝死，离注射部位1cm处剪下兔耳(含血管)约3～4cm，放入10％甲醛溶液中固定，送病理切片检查，余下的2只家兔给于停药7日后猝死，取材送做病理切片。

2.3.3 家兔股四头肌刺激试验

取健康家兔2只，分别在其左右两腿股四头肌内以无菌操作方法各注入浓度为5mg/ml的供试品溶液1ml，于注射完药液48h后放血猝死家兔，解剖取出股四头肌，纵向切开，观察注射部位肌肉的刺激反应，按通用“注射剂刺激反应评分标准”判断结果。

2.4 实验结果

2.4.1 家兔耳缘一次性血管刺激性试验

家兔耳缘静脉推注5mg/ml的供试品溶液5ml后，24h注射部位血管均未见明显充血和水肿现象，病理切片结果给药组亦未见血管内皮损伤和组织变性，与对照比较均无显著差异。注射7日后结果同上。

2.4.2 家兔耳缘静脉多次性刺激试验

家兔耳缘静脉推注5mg/ml的供试品溶液5ml，给药10次后24h，注射血管部位稍有充血和水肿现象，停药7日后恢复正常，组织学检查均末见有内皮损伤和组织变性。

2.4.3 股四头肌刺激试验

家兔股四头肌注射浓度为5mg/ml的供试品溶液1ml后，48h猝死动物，未见明显刺激反应，反应分值在0.16厘米以下表明注射用盐酸洛美沙星对家兔股四头肌无明显刺激作用。

2.5 结论

静脉一次性和多次性推注浓度为5mg/ml的注射用盐酸洛美沙星溶液对家兔耳缘静脉均无明显刺激反应；注射浓度为5ml/ml注射用盐酸洛美沙星溶液对家兔股四头肌亦无明显刺激反应，表明注射用盐酸洛美沙星局部刺激试验符合规定。

3、注射用盐酸洛美沙星过敏试验

3.1 试验目的：考察注射用盐酸洛美沙星有无全身过敏反应。

3.2 实验材料

实验对象：豚鼠，雌雄兼用，体重250～300g。由山西省医科大学动物中心提供。

供试品溶液：实施例1的注射用盐酸洛美沙星冻干粉针剂，白色粉末，每瓶100mg，使用时用生理盐水溶解为5mg/ml，即为供试品溶液。

其他材料：鸡蛋，市场购买。

3.3 实验方法

取健康无伤豚鼠9只，体重250～300g按无菌操作其中6只隔日每只肌肉注射浓度为5mg/ml的供试品溶液0.5ml，共3次，然后将其均分两组，一组于首次注射后的第14日，腹腔注射浓度为5mg/ml的供试品溶液2ml/只进行攻击；另一组于首次注射后的第21日同法进行攻击。阳性对照组的3只豚鼠隔日每只肌肉注射鸡蛋清0.5ml，共3次，于首次注射后的第14天，腹腔注射鸡蛋清2ml/只进行攻击。观察注射后动物有无抓鼻、竖毛、呼吸困难、痉挛、休克甚至死亡等过敏症状。

3.4、实验结果

给药两组的豚鼠进行攻击后，均无明显反应。蛋清组豚鼠攻击后，三只均发生咳嗽、竖毛等过敏反应症状。

3.5、结论

豚鼠肌肉注射浓度为5mg/ml的供试品溶液三次，进行攻击后，反应级数为0，表明该药过敏试验合格。

实验例3 盐酸洛美沙星冻干粉针剂的临床试验

经首都医科大学附属北京友谊医院、北京同仁医院、北京天坛医院、解放军北京304医院，对本发明实施例1的盐酸洛美沙星冻干粉针剂进行多中心临床协作组试验结果表明：注射用盐酸洛美沙星冻干粉针剂对呼吸道感染、泌尿系感染、消化系统感染、创伤、骨折继发感染及其它部位的感染均具有良好疗效。

本组采用注射用盐酸洛美沙星治疗各种细菌感染107例。痊愈42例，痊愈率为39％，显效44例，总有效率为80％。本组试验分离细菌92株，细菌阳性率为85％，细菌清除率为76％。

试验显示本品不仅对革兰氏阴性菌有很好的抗菌活性，对部分革兰氏阳性菌也有很好的抗菌作用，其中对肺炎双球菌、肠球菌(屎肠球菌、粪肠球菌)有较好的抗菌效果。本组不良反应总发生7％，主要表现为皮、轻度胃肠道反应及眩晕等症状，程度均较轻，停药后可缓解，未见肝、肾等脏器功能损伤等副作用，是一个安全有效的新品种。

实验例4 不同溶剂对盐酸洛美沙星的溶解状况比较

由于盐酸洛美沙星的理化性质为：在水中略溶，在甲醇中微溶，在氯仿、醋酸乙酯或冰醋酸中几乎不溶；在氢氧化钠溶液中易溶。遇光色渐变深。为此，用下述不同溶剂对盐酸洛美沙星的溶解状况进行了比较，结果，结果如下表8所示。

表8  不同溶剂对盐酸洛美沙星的溶解状况(盐酸洛美沙星的浓度为5％)

结论：由表8可见，盐酸洛美沙星对大多数的有机酸及有机酸钠盐溶解性都很差，最后选定醋酸钠缓冲溶液为本发明盐酸洛美沙星冻干粉针剂的助溶剂。

Claims (10)

1、一种注射用盐酸洛美沙星冻干粉针剂，其特征在于，由活性成分盐酸洛美沙星、药学上可接受的冻干粉针剂赋形剂、pH值为3.0～6.5的缓冲溶液配制而成；

活性成分盐酸洛美沙星、药学上可接受的冻干粉针剂赋形剂及缓冲溶液的配比为50～150∶20～60∶1500～3500(g∶g∶ml)。

2、如权利要求1所述的冻干粉针剂，其特征在于，所述赋形剂为甘露醇、乳糖、右旋糖酐、葡萄糖、山梨醇、氯化钠中的一种。

3、如权利要求1所述的冻干粉针剂，其特征在于，所述pH值为3.0～6.5的缓冲溶液为醋酸-醋酸钠缓冲液、醋酸-醋酸铵缓冲液、醋酸盐缓冲液、枸橼酸-磷酸二氢钠缓冲液、磷酸盐缓冲液、乙醇-醋酸铵缓冲液、甲酸钠缓冲液中的一种。

4、权利要求1-3任一所述注射用盐酸洛美沙星冻干粉针剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)按盐酸洛美沙星、冻干粉针赋形剂及pH3.0～6.5缓冲溶液50～150∶20～60∶1500～3500(g∶g∶ml)的比例，加入缓冲溶液并加热至50℃～95℃，然后加入甘露醇搅拌使溶解，再缓慢均匀地加入盐酸洛美沙星搅拌使溶解，冷却至55℃～85℃；

(2)调节pH值至4.4～5.5，加入活性炭搅拌吸附，过滤，滤液温度保持在50℃～95℃；

(3)然后药液经0.22μm微孔滤膜过滤后，保持药液温度在0℃～50℃进行灌装，灌装结束后进行冷冻干燥。

5、如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，缓冲溶液加热至70℃，加入盐酸洛美沙星搅拌溶解后，冷却至60℃；

步骤(2)中，加入0.15％(w/v)的活性炭搅拌吸附30分钟后，过滤，滤液温度保持在60℃；

步骤(3)中，药液经过滤后，保持药液温度在60～70℃灌装，灌装结束后进行冷冻干燥。

6、如权利要求4或5所述的制备方法，其特征在于，所述赋形剂为甘露醇、乳糖、右旋糖酐、葡萄糖、山梨醇、氯化钠中的一种。

7、如权利要求4或5所述的制备方法，其特征在于，所述pH值为3.0～6.5的缓冲溶液为醋酸-醋酸钠缓冲液、醋酸-醋酸铵缓冲液、醋酸盐缓冲液、枸橼酸-磷酸二氢钠缓冲液、磷酸盐缓冲液、乙醇-醋酸铵缓冲液、甲酸钠缓冲液中的一种。

8、如权利要求4或5所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，用醋酸钠或/和乳酸、醋酸、醋酸铵、枸橼酸、磷酸盐、甲酸钠调节pH值。

9、如权利要求4或5所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，所述冷冻干燥包括预冻、升华干燥、再干燥。

10、如权利要求9所述的制备方法，其特征在于，所述预冻过程采用速冻法，先将搁板温度降低至-5～-10℃，再放入制品以10℃/h的速率急速冷冻至-45℃，在-45℃下预冻2h～6h；所述升华干燥过程采用一次升华法，控制真空度在10～40pa、温度在-10℃下，以每小时5～18℃升温升华；所述再干燥过程中，真空度下限设定为2～6Pa，采用程序升温：以1～5℃/h升温至20℃，再以1～10℃/h升温至45±5℃，保温5～20小时。