CN111557961A - 一种利用青蒿挥发油治疗呼吸道疾病及其给药方式 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种利用青蒿挥发油治疗呼吸道疾病及其给药方式，属于中药学技术领域。青蒿挥发油对引起呼吸道疾病常见的细菌有抑制和杀灭能力，将青蒿挥发油用β‑环糊精进行包合，增加青蒿挥发油的稳定性。通过加热β‑环糊精青蒿挥发油包合物，使青蒿挥发油气化，缓慢释放，经口鼻吸入的给药方式，将药物分子送至支气管病灶部位，从而达到定向给药治疗的目的。本发明使用青蒿挥发油代替传统的抗生素治疗，能有效减少抗生素损伤患者机体、产生耐药性等一系列问题。气化吸入式给药，实现局部给药，直达病灶，缩短治疗时间。药物使用量更小，避免肝脏代谢，减小药物副作用对人体的其它部位的伤害。

Description

一种利用青蒿挥发油治疗呼吸道疾病及其给药方式
技术领域
本发明属于中药学技术领域，具体涉及一种利用青蒿挥发油治疗呼吸道疾病及其给药方式。
背景技术
虽然目前医疗技术非常先进，但全球还会经常爆发传染性极强的新型流感病毒，对人类的生命财产造成巨大威胁。流感期间总有大量人口受到危害，不拘老年少年，亦无论男或女。细菌病毒肆虐的今天，空气中的病毒和细菌最容易引起呼吸道感染，继而应发呼吸道疾病。
呼吸道疾病是指人体鼻腔、咽喉、支气管、肺部因细菌及病毒感染而引起的一类疾病。主要包括咽炎、鼻炎、扁桃体炎、支气管炎、肺炎等。主要症状为咽喉疼痛、咳嗽、鼻塞、流清涕、面部潮红、缓急咳嗽、呼吸不畅、痰多，少部分症见四肢无力、胸闷、肺热。呼吸道疾病是临床上的常见病和多发病，中国每年发病人数约有25亿人（次）以上，如何简单且有效的治疗呼吸道疾病是一个重要的课题。
当前治疗此类疾病普遍使用抗生素药物，通过口服或者注射的形式进行给药。但是长期使用抗生素副作用大，易损伤患者机体，而且很容易产生耐药性，从而导致治疗效果越来越差。通过口服或注射给药，要求血药浓度达到杀菌浓度以上，药物使用剂量大、治疗时间长。因此，开发出副作用小的药物且能直达病灶的给药途径，将会有广泛地市场前景。
青蒿为菊科植物黄花蒿Artemisia annua L．的干燥地上部分。原植物系一年生草本，均为野生。全国大部地区均有生产。青蒿用于清热解暑，除蒸，截疟。主治暑邪发热，阴虚发热，夜热早凉，骨蒸劳热，疟疾寒热，湿热黄疸。青蒿挥发油为青蒿主要活性成分之一,淡黄色澄明液体,经气相色谱测定,油中含蒿酮、异蒿酮、桉油精、左旋樟脑、丁香烯 、蒎烯等16 个化学成分。具有抗菌、解热、止咳、平喘等药理作用。临床用于治疗上呼吸道感染、慢支炎、神经性皮炎及皮肤真菌病等多种疾病。
发明内容
针对上述存在的问题，本发明的目的在于提供一种利用青蒿挥发油治疗呼吸道疾病及其给药方式。通过加热青蒿挥发油β-环糊精包合物，使有效成分青蒿挥发油气化成气体分子，经口鼻吸入直达呼吸道，从而达到定向给药治疗的目的。
为了实现上述发明目的，本发明采用以下技术方案：
一种利用青蒿挥发油治疗呼吸道疾病及其给药方式，所述青蒿挥发油提取方法为：青蒿粉碎后置于超临界CO2萃取釜中，萃取一定时间，得青蒿油浸膏。浸膏通过分子蒸馏，所得轻组分即为青蒿挥发油。
优选的，所述超临界CO2萃取参数为：青蒿粉碎粒径10～100目，萃取压力15～30MPa，萃取温度35～55℃，CO2流量15～35kg/h萃取时间为0.5～3小时；解析釜温度为35～50℃、解析压力为1～15MPa。所述分子蒸馏参数为：真空度3～10Pa，刮膜转速150～300r/min，温度80～150℃，流速1～5ml/min。
更优选的，所述超临界CO2萃取参数为：青蒿粉碎粒径50目，萃取压力28MPa，萃取温度50℃，CO2流量20kg/h，萃取时间为2小时；解析釜温度为35℃、解析压力为12MPa。所述分子蒸馏参数为：真空度5Pa，刮膜转速200r/min，温度100℃，流速3ml/min。
一种利用青蒿挥发油治疗呼吸道疾病及其给药方式，所述青蒿挥发油β-环糊精包合物制备方法如下：
第一步，精密称取β-环糊精16g ,置于250ml 圆底烧瓶中,加入蒸馏水 160ml,搅拌均匀，加热使环糊精完全溶解,后缓慢降温至30℃，得到β-环糊精饱和溶液。
第二步，用移液管精密量取青蒿挥发油2ml,按1∶1加入无水乙醇稀释,缓慢滴入β-环糊精饱和溶液中, 加塞,继续恒温匀速搅拌1h。
第三步，所得溶液置于冰箱中冷藏24h,抽滤,滤饼用5ml 乙酸乙酯洗涤3次,再置于60℃真空干燥箱中干燥24h,得白色疏松粉末,即为β-环糊精青蒿挥发油包合物。
所述第一步中搅拌速度为100-300r/min。
所述青蒿挥发油以β-环糊精包合形式存在，基于青蒿挥发油易挥发、不便贮藏的特征，用微胶囊技术对其进行包埋，可将液态的挥发油转变为固体粉末，提高其稳定性，同时利用壁材的透气性可实现青蒿挥发油的缓释效果。
一种利用青蒿挥发油治疗呼吸道疾病及其给药方式，所述给药方式为：青蒿挥发油β-环糊精包合物配合电子加热器使用。将青蒿挥发油β-环糊精包合物置于电子加热器加热腔内，打开电子加热控制器开关，设置加热腔温度，当加热腔的温度超过青蒿挥发油中化合物沸点时，药物气化为气体分子逸出，将药物分子吸入支气管病灶部位，从而达到定向给药治疗的目的。
所述加热腔设置温度为300-1000℃。
所述吸入方式包括口腔吸入和鼻腔吸入。
所述呼吸道疾病包括：咽炎、鼻炎、扁桃体炎、支气管炎、肺炎。
与现有技术相比，本发明的优点和创新之处在于：
（1）用天然产物青蒿挥发油代替抗生素治疗支气管炎，能有效减少抗生素损伤患者机体、产生耐药性等一系列问题。
（2）青蒿挥发油以β-环糊精包合形式存在，提高药物稳定性，便于贮藏。同时利用壁材的透气性可实现连翘挥发油的缓释效果。
（3）药物通过气化升华，经口鼻吸入式给药，能直达支气管，实现局部给药，直达病灶，提高药物的利用度和病灶部位的血药浓度。
（4）与注射和口服给药相比，气化吸入式给药，药物到达病灶的速度更快，缩短治疗时间。药物使用量更小，避免肝脏代谢，减小药物副作用对人体的其它部位伤害。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。
实施例
1. 青蒿挥发油的制备
第一步，称取8kg青蒿粉碎至50目，置于10L超临界CO2萃取釜中，设置参数萃取压力28MPa，萃取温度50℃，CO2流量20kg/h，解析釜温度为35℃、解析压力为12MPa。萃取2小时，得青蒿油浸膏。
第二步，用蠕动泵以3ml/min的速度将青蒿油泵入刮膜分子蒸馏设备中，真空度5Pa，刮膜转速200r/min，温度100℃。所得轻组分即为青蒿挥发油。
2. 青蒿挥发油β-环糊精包合物的制备
第一步，精密称取β-环糊精16g ,置于250ml 圆底烧瓶中,加入蒸馏水 160ml,搅拌均匀，加热使环糊精完全溶解,后缓慢降温至30℃，得到β-环糊精饱和溶液。
第二步，用移液管精密量取青蒿挥发油2ml,按1∶1加入无水乙醇稀释,缓慢滴入β-环糊精饱和溶液中, 加塞,继续恒温匀速搅拌1h。
第三步，所得溶液置于冰箱中冷藏24h,抽滤,滤饼用5ml 乙酸乙酯洗涤3次,再置于60℃真空干燥箱中干燥24h,得白色疏松粉末,即为β-环糊精青蒿挥发油包合物。
3. 青蒿挥发油β-环糊精包合物包合率的测定
3.1气相色谱条件
石英毛细管柱CBP1-M25-025 (日本岛津公司)；柱温60℃→240℃(3℃/min，30min)；载气
N2 40ml/min；空气400ml/min；检测室、气化温度均为270℃；FID检测器；进样量0.5μL。
3.2 样品的制备
精密称取包合物约0.1g，置15 mL具塞离心管中，精密加入无水乙醇10 mL，混匀，密封，超声15min后放置过夜，次日离心(2500r/min)10min，倾取上清液为样品溶液。
3.3青蒿挥发油β-环糊精包合物包合率计算
经气相色谱法测定包合物中青蒿挥发油含量,并按下列公式计算青蒿挥发油包合率:青蒿挥发油包合率=包合物中青蒿挥发油含量(mg)/所加青蒿挥发油含量(mg)×100%。经上述公式计算得青蒿挥发油包合率为90.8%。
4.β-环糊精青蒿挥发油包合物稳定性测试
4.1强光照射实验
分别称取青蒿挥发油β-环糊精包合物和按制备投料比混匀所得的青蒿挥发油与β-环糊精的混合物(以下简称混合物)各若干份，照射30d(强度为4000Lx)，于第0，5，10,20，30天时取样，测定挥发油相对含量，结果见表1。表明包合物抗光解性远优于混合物，且应避光保存。
表1 青蒿挥发油β-环糊精包合物和混合物的抗光解性实验结果
Figure DEST_PATH_IMAGE001
4.2高温实验
分别称取包合物和混合物各若干份，密封于玻璃瓶中，分别于40，60，80℃恒温于干燥箱内放置10d，于第0，5，10，20,30天时取样，测定挥发油相对含量，结果见表2。表明包合物的热稳定性优于混合物，应室温保存。
表2 青蒿挥发油β-环糊精包合物和混合物的热稳定性实验结
Figure DEST_PATH_IMAGE003
4.3高湿实验
分别称取包合物和混合物适量，于25℃置入相对湿度分别为75％(NaCl)和92．5％(KNO3)的两个密闭器皿中，放置10d。第0，5，10天时取样，测定挥发油相对含量，结果见表3。表明．在高湿条件下，包合物较混合物稳定。
表3 青蒿挥发油β-环糊精包合物和混合物的湿稳定性实验结果
Figure DEST_PATH_IMAGE005
4. β-环糊精青蒿挥发油包合物抑菌性能测试
通过测定青蒿挥发油对供试菌的抑菌圈大小来考察青蒿挥发油的抑菌活性，采用平板打孔法测定。待营养琼脂培养基冷却至45℃左右，在直径为12cm的玻璃培养皿内倒入约40mL培养基。待培养基凝固后，用无菌移液枪吸取供试菌悬液100μL止于相应培养基上，并用无菌三角玻璃棒涂布均匀。待菌液被吸收后，用直径为9 mm的无菌枪头在培养基上均匀打4个孔，用无菌镊子剔去孔内培养基，用无菌移液枪吸取一滴液体培养基封底。对于不同的菌，4个孔中加入的供试液及添加量分别为：4个孔内分别注入10μL此包埋前、后的青蒿挥发油、相同体积的施保克原液和无菌水。其中施保克和无菌水分别作为阳性和阴性对照。每个菌种分别做3次重复。
以上操作均在无菌条件下进行。然后将培养皿放入生化培养箱中培养(细菌在37℃条件下恒温培养20 h，酵母菌在28℃条件下恒温培养48h，霉菌在28℃条件下恒温培养4～5d)。培养结束，用十字交叉法测量各抑菌圈直径，结果取平均值，以抑菌圈大小来表示抑菌活性。β-环糊精青蒿挥发油包合物抑菌性能测试结果见表4。
抑菌圈的判定标准：直径>20 mm，极敏；15～20 mm，高敏；10～14 mm，中敏；7～9mm，低 敏；直径<7mm，不敏感。
表4 β-环糊精青蒿挥发油包合物对供试细菌抑菌圈直径
Figure 859081DEST_PATH_IMAGE006
实验结果表明，青蒿挥发油β-环糊精包合物的抑菌效果略低于包合前，但对于引起呼吸道疾病的常见细菌：葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、嗜血流感杆菌，抑菌效果都在高度敏感以上。
5.临床实验
5.1病例选择
临床分别选择呼吸道疾病患者，咽炎、鼻炎、扁桃体炎、支气管炎、肺炎各120例，不分性别，年龄18～75岁之间。
5.2患者病情表现
患者表现为咽喉疼痛、咳嗽、鼻塞、流清涕、面部潮红、缓急咳嗽、呼吸不畅、痰多，少部分症见四肢无力、胸闷、肺热，未见咳血、眩晕。
5.3实验分组
随机将五种呼吸道疾病各120名患者分成三组，实验组1、实验组2和对照组，各40名。
5.4治疗方法
对照组：口服安慰剂，一天三次，服用15天。
实验组1：口服青蒿挥发油，一天三次，服用15天。。
实验组2：将实施例制备的青蒿挥发油β-环糊精包合物置于电子加热器加热腔内，设置加热温度300℃，待加热器预热结束后，嘴部对准加热器吸嘴，通过口腔吸入呼吸道，半分钟吸入一次，十分钟为一个疗程。一天三个疗程，治疗15天。
5.5疗效评定标准
(1)痊愈；疗程终了时症状及体征基本消失；
(2)显效：病情以重度变为轻度，或中度、轻度的症状及体征有显著好转；
(3)有效：病情以重度变为中度，或由中度变为轻度，或主诉症状好转，体征无明显改善。
(4)无效：症状及体征皆无改善或加重。
5.6治疗结果
表5 呼吸道疾病治疗结果
Figure DEST_PATH_IMAGE007
实验结果表明，青蒿挥发油通过加热气化，口腔吸入的方式摄入，对呼吸道疾病的治疗效果远高于直接口服。说明气化吸入式给药能增强呼吸道疾病的治疗效果。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (8)

1.一种利用青蒿挥发油治疗呼吸道疾病及其给药方式，其特征在于，所述青蒿挥发油提取方法为：青蒿粉碎后置于超临界CO2萃取釜中，萃取一定时间，得青蒿油浸膏；浸膏通过分子蒸馏，所得轻组分即为青蒿挥发油。
2.根据权利要求1所述的一种利用青蒿挥发油治疗呼吸道疾病及其给药方式，其特征在于，所述超临界CO2萃取参数为：青蒿粉碎粒径10～100目，萃取压力15～30MPa，萃取温度35～55℃，CO2流量15～35kg/h萃取时间为0.5～3小时；解析釜温度为35～50℃、解析压力为1～15MPa；所述分子蒸馏参数为：真空度3～10Pa，刮膜转速150～300r/min，温度80～150℃，流速1～5ml/min。
3.根据权利要求1所述的一种利用青蒿挥发油治疗呼吸道疾病及其给药方式，其特征在于，所述青蒿挥发油β-环糊精包合物制备方法如下：
第一步，精密称取β-环糊精16g ,置于250ml 圆底烧瓶中,加入蒸馏水 160ml,搅拌均匀，加热使环糊精完全溶解,后缓慢降温至30℃，得到β-环糊精饱和溶液；
第二步，用移液管精密量取青蒿挥发油2ml,按1∶1加入无水乙醇稀释,缓慢滴入β-环糊精饱和溶液中, 加塞,继续恒温匀速搅拌1h；
第三步，所得溶液置于冰箱中冷藏24h,抽滤,滤饼用5ml 乙酸乙酯洗涤3次,再置于60℃真空干燥箱中干燥24h,得白色疏松粉末,即为β-环糊精青蒿挥发油包合物。
4.根据权利要求3所述的一种利用青蒿挥发油治疗呼吸道疾病及其给药方式，其特征在于，所述第一步中搅拌速度为100-300r/min。
5.根据权利要求1所述的一种利用青蒿挥发油治疗呼吸道疾病及其给药方式，其特征在于，所述给药方式为：青蒿挥发油β-环糊精包合物配合电子加热器使用；将青蒿挥发油β-环糊精包合物置于电子加热器加热腔内，打开电子加热控制器开关，设置加热腔温度，当加热腔的温度超过青蒿挥发油中化合物沸点时，药物气化为气体分子逸出，将药物分子吸入病灶部位，从而达到定向给药治疗的目的。
6.根据权利要求5所述的一种利用青蒿挥发油治疗呼吸道疾病及其给药方式，其特征在于，所述加热腔设置温度为300-1000℃。
7.根据权利要求5所述的一种利用青蒿挥发油治疗呼吸道疾病及其给药方式，其特征在于，所述吸入方式包括口腔吸入和鼻腔吸入。
8.根据权利要求1所述的一种利用青蒿挥发油治疗呼吸道疾病及其给药方式，其特征在于，所述呼吸道疾病包括：咽炎、鼻炎、扁桃体炎、支气管炎、肺炎。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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