CN105158235A - 一种吖啶酯增强发光系统 - Google Patents
一种吖啶酯增强发光系统 Download PDFInfo
- Publication number
- CN105158235A CN105158235A CN201410249241.XA CN201410249241A CN105158235A CN 105158235 A CN105158235 A CN 105158235A CN 201410249241 A CN201410249241 A CN 201410249241A CN 105158235 A CN105158235 A CN 105158235A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- liquid
- acridinium ester
- concentration
- preexciting
- exciting
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Landscapes
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
Abstract
本发明公开了一种吖啶酯增强发光系统，包括预激发液、激发液以及用于与待测物相联接的吖啶酯，该用于与待测物相联接的吖啶酯与待测物联接后通过预激发液和激发液的依次作用而发光，所述预激发液为含有0.125～1％稳定剂和0.125～1％增强剂的H2O2溶液，所述激发液为含有0.125～1％稳定剂和0.125～1％增强剂的NaOH溶液，其中所述稳定剂为二甲基甲酰胺或乙醇，所述增强剂为Triton？X-100或Tween-20。本发明可以有效的增强了吖啶酯的发光强度，同时还能减少发光系统出现气泡的机会，并且可以降低发光系统的凝固点，在冬季时长时间运输也不至于结冰。
Description
技术领域
本发明属于化学发光免疫分析技术领域，具体涉及一种吖啶酯增强发光系统。
背景技术
免疫分析技术现在在生物医学领域内的应用非常广泛，并已经在临床诊断、环境及卫生检测、法医鉴定、食品安全等诸多领域中已经成为必备的常规技术手段，发挥着不可替代的作用，具有巨大的市场。而免疫分析试剂所采用的信号系统对于免疫分析试剂的性能起着决定性的作用，从放射免疫分析(RIA)到酶联免疫吸附分析(ELISA)再到化学发光免疫分析(CLIA)，免疫分析技术的发展和进步，主要就是信号系统的进步和革命，免疫分析技术使用抗原和抗体以及它们的各种结合物这一免疫反应的基础并没有变化，因此如何获得更强、更灵敏以及更稳定的信号就显得致关重要。
众所周知，吖啶酯是一类可用作化学发光标记物的化学物质，在碱性H2O2溶液中，吖啶酯的分子受到过氧化氢离子进攻时，吖啶环上的取代基能与吖啶环上的C-9和H2O2(过氧化氢)形成不稳定的二氧乙烷，此二氧乙烷分解为CO2和电子激发态的N-甲基吖啶酮，当其回到基态时发出最大发射波长为430nm的光子。吖啶结构中都有共同的吖啶环和不同的取代基，根据取代基的不同，常用作化学发光标记物的吖啶取代物分为吖啶酯和吖啶磺酰胺两类。它们的结构中都有共同的吖啶环，这类化合物从发光的机理来说的特点是发光反应中在形成电子激发态中间体之前，联结于吖啶环上的不发光的取代基部分从吖啶环上脱离开来，即未发光部分与发光部分分离，因而其发光效率基本不受取代基结构的影响。并且吖啶酯或吖啶磺酰胺类化合物在有H2O2的稀碱性溶液中即能发光，不需要催化剂，发光系统简单。同时这类化合物的发光为闪光型，加入发光启动试剂后0.4s左右发射光强度即达到最大，半衰期为0.9s左右，非常省时。基于上述特点，为增强吖啶酯或吖啶磺酰胺类化合物的化学发光强度，有些在发光启动试剂中加入TritonX-100、CTAC、Tween-20(吐温-20)等表面活性剂。这样做使整个反应系统中电子激发态中间体的水溶性增加，但同时也降低了发光系统的表面张力，从而使得整个系统更容易产生气泡，这样测光时受到影响，从而降低了对发光强度的增强效果，同时气泡的产生还在测光系统中引入了较大的变异，导致测定结果的变异很大。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术缺陷，提供一种吖啶酯增强发光系统。
本发明的具体技术方案如下：
一种吖啶酯增强发光系统，包括预激发液、激发液以及用于与待测物相联接的吖啶酯，该用于与待测物相联接的吖啶酯与待测物联接后通过预激发液和激发液的依次作用而发光，所述预激发液为含有0.125～1％稳定剂和0.125～1％增强剂的H2O2溶液，所述激发液为含有0.125～1％稳定剂和0.125～1％增强剂的NaOH溶液，其中所述稳定剂为二甲基甲酰胺或乙醇，所述增强剂为TritonX-100或Tween-20。
在本发明的一个优选实施方案中，所述增强剂在预激发液和激发液中的浓度均为0.2～1％。
进一步优选的，所述稳定剂为二甲基甲酰胺，其在预激发液和激发液中的浓度均为0.25％；所述增强剂为TritonX-100，其在预激发液和激发液中的浓度均为0.5％。
进一步优选的，所述稳定剂为乙醇，其在预激发液和激发液中的浓度均为0.25％；所述增强剂为TritonX-100，其在预激发液和激发液中的浓度均为0.5％。
进一步优选的，所述稳定剂为二甲基甲酰胺，其在预激发液和激发液中的浓度均为0.25％；所述增强剂为Tween-20，其在预激发液和激发液中的浓度均为0.5％。
进一步优选的，所述稳定剂为乙醇，其在预激发液和激发液中的浓度均为0.25％；所述增强剂为Tween-20，其在预激发液和激发液中的浓度均为0.5％。
在本发明的一个优选实施方案中，所述H2O2溶液的浓度为1％，所述NaOH溶液的浓度为1mol/L，上述两种溶液中均含有5mmol/LEDTA。
进一步优选的，所述用于与待测物相联接的吖啶酯在待测样品中的浓度为5×10-8mmol/L。
本发明的有益效果是：本发明在预激发液和激发液中均添加乙醇或二甲基甲酰胺作为稳定剂，TritonX-100或Tween-20作为增强剂，可以有效的增强了吖啶酯的发光强度，同时还能减少发光系统出现气泡的机会，并且可以降低发光系统的凝固点，在冬季时长时间运输也不至于结冰。
具体实施方式
以下通过具体实施方式对本发明的技术方案进行进一步的说明和描述。
实施例1
以含1％H2O2的溶液为预激发液，以含1mol/LNaOH的溶液为激发液，做为基本发光系统，在系统中分别加入5mmol/LEDTA，同时分别加入0.125％或0.25％或0.5％或1％的TritonX-100(TX-100)、Tween-20、二甲基甲酰胺(DMF)和乙醇。在反应杯加入10μL稀释的吖啶酯(AE)与抗甲胎蛋白(AFP)抗体联结物(AE含量约为5×10-8mmol/L)，用单管式化学发光仪siriusL测定(设定检测时间为0.8s)各个配方的相对发光强度，以之前的基本发光系统的相对发光强度为100％计，分别算出各组配方的相对发光强度及相对活性如下表1所示：
表1不同添加物对吖啶酯相对发光强度的影响
表结果显示稳定剂和增强剂都能够增强吖啶酯的相对发光值，且不同添加物、不同浓度的影响程度不同。
实施例2
以含1％H2O2的溶液为预激发液，以含1mol/LNaOH的溶液为激发液，做为基本发光系统，在系统中分别加入5mmol/LEDTA。在实施例1的基础上，将作为增强剂的TX-100和Tween-20，与作为稳定剂的DMF和乙醇进行配对组合，考核稳定剂的加入对增强剂效果的影响，筛选该发光系统的最终配方。在反应杯加入10μL稀释的吖啶酯(AE)与抗甲胎蛋白(AFP)抗体联结物(AE含量约为5×10-8mmol/L)，用单管式化学发光仪siriusL测定(设定检测时间为0.8s)各个配方的相对发光强度，以之前的基本发光系统的相对发光强度为100％计，分别算出各组配方的相对发光强度及相对活性如下表2所示：
表2不同配方对吖啶酯相对发光强度的影响
在上述4个配方中，0.5％Tween-20和0.25％乙醇的相对活性最高，相对活性达到349.6％。表明在加入0.25％乙醇作为稳定剂的情况下，不会使增强剂的作用降低。该配方在保证了消泡的作用的同时，能够增强该发光系统的发光强度。
以上所述，仅为本发明的较佳实施例而已，故不能依此限定本发明实施的范围，即依本发明专利范围及说明书内容所作的等效变化与修饰，皆应仍属本发明涵盖的范围内。
Claims (8)
1.一种吖啶酯增强发光系统，包括预激发液、激发液以及用于与待测物相联接的吖啶酯，该用于与待测物相联接的吖啶酯与待测物联接后通过预激发液和激发液的依次作用而发光，其特征在于：所述预激发液为含有0.125～1％稳定剂和0.125～1％增强剂的H2O2溶液，所述激发液为含有0.125～1％稳定剂和0.125～1％增强剂的NaOH溶液，其中所述稳定剂为二甲基甲酰胺或乙醇，所述增强剂为TritonX-100或Tween-20。
2.如权利要求1所述的一种吖啶酯增强发光系统，其特征在于：所述增强剂在预激发液和激发液中的浓度均为0.2～1％。
3.如权利要求2所述的一种吖啶酯增强发光系统，其特征在于：所述稳定剂为二甲基甲酰胺，其在预激发液和激发液中的浓度均为0.25％；所述增强剂为TritonX-100，其在预激发液和激发液中的浓度均为0.5％。
4.如权利要求2所述的一种吖啶酯增强发光系统，其特征在于：所述稳定剂为乙醇，其在预激发液和激发液中的浓度均为0.25％；所述增强剂为TritonX-100，其在预激发液和激发液中的浓度均为0.5％。
5.如权利要求2所述的一种吖啶酯增强发光系统，其特征在于：所述稳定剂为二甲基甲酰胺，其在预激发液和激发液中的浓度均为0.25％；所述增强剂为Tween-20，其在预激发液和激发液中的浓度均为0.5％。
6.如权利要求2所述的一种吖啶酯增强发光系统，其特征在于：所述稳定剂为乙醇，其在预激发液和激发液中的浓度均为0.25％；所述增强剂为Tween-20，其在预激发液和激发液中的浓度均为0.5％。
7.如权利要求1至6中任一权利要求所述的一种吖啶酯增强发光系统，其特征在于：所述H2O2溶液的浓度为1％，所述NaOH溶液的浓度为1mol/L，上述两种溶液中均含有5mmol/LEDTA。
8.如权利要求7所述的一种吖啶酯增强发光系统，其特征在于：所述用于与待测物相联接的吖啶酯在待测样品中的浓度为5×10-8mmol/L。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410249241.XA CN105158235B (zh) | 2014-06-06 | 2014-06-06 | 一种吖啶酯增强发光系统 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410249241.XA CN105158235B (zh) | 2014-06-06 | 2014-06-06 | 一种吖啶酯增强发光系统 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN105158235A true CN105158235A (zh) | 2015-12-16 |
| CN105158235B CN105158235B (zh) | 2018-05-08 |
Family
ID=54799168
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201410249241.XA Active CN105158235B (zh) | 2014-06-06 | 2014-06-06 | 一种吖啶酯增强发光系统 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN105158235B (zh) |
Cited By (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106645756A (zh) * | 2016-12-30 | 2017-05-10 | 广州市达瑞生物技术股份有限公司 | 一种检测nmp22的试剂盒及其制备方法 |
| CN109211883A (zh) * | 2017-07-03 | 2019-01-15 | 苏州长光华医生物医学工程有限公司 | 一种检测溶液中过氧化氢浓度的化学发光分析法 |
| CN109283171A (zh) * | 2017-07-20 | 2019-01-29 | 苏州长光华医生物医学工程有限公司 | 一种化学发光试剂稳定剂的筛选方法 |
| CN109709336A (zh) * | 2018-12-26 | 2019-05-03 | 张嘉庆 | 一种血管内皮生长因子的检测试剂盒及检测方法 |
| CN111579765A (zh) * | 2019-02-19 | 2020-08-25 | 北京北方生物技术研究所有限公司 | 一种提高吖啶酯发光信噪比的激发液系统 |
| CN112578128A (zh) * | 2020-12-02 | 2021-03-30 | 苏州海狸生物医学工程有限公司 | 一种检测β-hCG含量直接化学发光试剂盒及使用方法 |
| CN113406062A (zh) * | 2021-06-29 | 2021-09-17 | 山东中鸿特检生物科技有限公司 | 一种适用于吖啶酯发光体系的化学发光底物液及其应用 |
| CN115436621A (zh) * | 2022-09-29 | 2022-12-06 | 江苏奥雅生物科技有限公司 | 一种吖啶酯抗体结合物的稀释液 |
| CN115656152A (zh) * | 2022-10-26 | 2023-01-31 | 苏州颐坤生物科技有限公司 | 一种吖啶酯底物发光系统 |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5093270A (en) * | 1989-05-24 | 1992-03-03 | Ciba Corning Diagnostics Corp. | Method for enhancing signal release from liposomes using water-miscible alcohols |
| WO1996002839A1 (en) * | 1994-07-15 | 1996-02-01 | Abbott Laboratories | Chemiluminescent signal enhancement |
| CN1156506A (zh) * | 1994-09-02 | 1997-08-06 | 鲁米根公司 | 利用9、10-二氢化吖啶的水解酶的化学发光检测 |
| CN101226200A (zh) * | 2007-01-19 | 2008-07-23 | 天津天美生物技术有限公司 | 吖啶酯和碱性磷酸酶化学发光免疫分析检测心肌钙蛋白t超敏感方法 |
| CN102565405A (zh) * | 2011-08-24 | 2012-07-11 | 苏州长光华医生物试剂有限公司 | 一种用吖啶酯标记技术结合通用型磁颗粒进行免疫学检测的方法 |
| CN103293145A (zh) * | 2013-05-16 | 2013-09-11 | 赫利森（厦门）生物科技有限公司 | 一种化学发光试剂 |
-
2014
- 2014-06-06 CN CN201410249241.XA patent/CN105158235B/zh active Active
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5093270A (en) * | 1989-05-24 | 1992-03-03 | Ciba Corning Diagnostics Corp. | Method for enhancing signal release from liposomes using water-miscible alcohols |
| WO1996002839A1 (en) * | 1994-07-15 | 1996-02-01 | Abbott Laboratories | Chemiluminescent signal enhancement |
| CN1156506A (zh) * | 1994-09-02 | 1997-08-06 | 鲁米根公司 | 利用9、10-二氢化吖啶的水解酶的化学发光检测 |
| CN101226200A (zh) * | 2007-01-19 | 2008-07-23 | 天津天美生物技术有限公司 | 吖啶酯和碱性磷酸酶化学发光免疫分析检测心肌钙蛋白t超敏感方法 |
| CN102565405A (zh) * | 2011-08-24 | 2012-07-11 | 苏州长光华医生物试剂有限公司 | 一种用吖啶酯标记技术结合通用型磁颗粒进行免疫学检测的方法 |
| CN103293145A (zh) * | 2013-05-16 | 2013-09-11 | 赫利森（厦门）生物科技有限公司 | 一种化学发光试剂 |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| ANAND NATRAJAN, ET AL.: "Enhanced immunoassay sensitivity using chemiluminescent acridinium esters with increased light output", 《ANALYTICAL BIOCHEMISTRY》 * |
| ANAND NATRAJAN, ET AL.: "Use of degradable cationic surfactants with cleavable linkages for enhancing the chemiluminescence of acridinium ester labels", 《RSC ADVANCES》 * |
| ZIA RAZAVI, ET AL.: "Stable and versatile active acridinium esters I", 《LUMINESCENCE 》 * |
| 尹东光: "吖啶酯DMAE•NHS的合成及TSH和TT_4化学发光免疫分析的研究", 《中国优秀博硕士学位论文全文数据库(博士) 工程科技Ⅰ辑》 * |
| 穆小静 等: "10-甲基吖啶苯酚酯衍生物的合成、表征及化学发光特性", 《影响科学与光化学》 * |
Cited By (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106645756A (zh) * | 2016-12-30 | 2017-05-10 | 广州市达瑞生物技术股份有限公司 | 一种检测nmp22的试剂盒及其制备方法 |
| CN109211883A (zh) * | 2017-07-03 | 2019-01-15 | 苏州长光华医生物医学工程有限公司 | 一种检测溶液中过氧化氢浓度的化学发光分析法 |
| CN109283171A (zh) * | 2017-07-20 | 2019-01-29 | 苏州长光华医生物医学工程有限公司 | 一种化学发光试剂稳定剂的筛选方法 |
| CN109709336A (zh) * | 2018-12-26 | 2019-05-03 | 张嘉庆 | 一种血管内皮生长因子的检测试剂盒及检测方法 |
| CN111579765A (zh) * | 2019-02-19 | 2020-08-25 | 北京北方生物技术研究所有限公司 | 一种提高吖啶酯发光信噪比的激发液系统 |
| CN111579765B (zh) * | 2019-02-19 | 2023-05-23 | 北京北方生物技术研究所有限公司 | 一种提高吖啶酯发光信噪比的激发液系统 |
| CN112578128A (zh) * | 2020-12-02 | 2021-03-30 | 苏州海狸生物医学工程有限公司 | 一种检测β-hCG含量直接化学发光试剂盒及使用方法 |
| CN113406062A (zh) * | 2021-06-29 | 2021-09-17 | 山东中鸿特检生物科技有限公司 | 一种适用于吖啶酯发光体系的化学发光底物液及其应用 |
| CN115436621A (zh) * | 2022-09-29 | 2022-12-06 | 江苏奥雅生物科技有限公司 | 一种吖啶酯抗体结合物的稀释液 |
| CN115436621B (zh) * | 2022-09-29 | 2024-08-06 | 江苏奥雅生物科技有限公司 | 一种吖啶酯抗体结合物的稀释液 |
| CN115656152A (zh) * | 2022-10-26 | 2023-01-31 | 苏州颐坤生物科技有限公司 | 一种吖啶酯底物发光系统 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN105158235B (zh) | 2018-05-08 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN105158235A (zh) | 一种吖啶酯增强发光系统 | |
| Huang et al. | Ultrasensitive fluorescence immunoassay for detection of ochratoxin A using catalase-mediated fluorescence quenching of CdTe QDs | |
| CN103674935B (zh) | 一种基于杂交链式反应信号放大技术测定赤霉素的方法 | |
| CN102435598A (zh) | 一种稳定的hrp酶促化学发光底物液 | |
| DK1196780T3 (da) | Fremstilling og anvendelse af luminescerende mikro- og nanopartikler | |
| CN105806830A (zh) | 一种稳定的hrp酶促化学发光底物液、其制备方法及应用 | |
| CN102153576A (zh) | 二氧化硅包覆的稀土配合物及其制备方法 | |
| CN106990100B (zh) | 一种稳定的hrp酶促化学发光底物液 | |
| Wen et al. | Molecular imprinting-based ratiometric fluorescence sensors for environmental and food analysis | |
| CN115656152A (zh) | 一种吖啶酯底物发光系统 | |
| CN103472047A (zh) | 一种不同pH值下氨基酸的荧光检测方法 | |
| CN101935529A (zh) | 一种具有上转换发光、氧传感和生物连接性的多功能纳米复合材料及其制备方法 | |
| Liyanage et al. | Optimization of electromagnetic hot spots in surface-enhanced Raman scattering substrates for an ultrasensitive drug assay of emergency department patients’ plasma | |
| CN104568925A (zh) | 一种硫酸链霉素的检测方法 | |
| CN103940797B (zh) | 利用铜离子特异性DNA和SYBR Green I荧光法检测铜的方法 | |
| CN105439948A (zh) | 定量检测亚硝酸盐和亚硝化硫醇的小分子荧光探针 | |
| CN108586391B (zh) | 一种蒽醌改性的石墨烯量子点aag及其制备方法与制备赖氨酸荧光检测试剂上的应用 | |
| CN103575900B (zh) | 一种检测erbb2蛋白的试剂盒及其制备方法 | |
| CN103575899B (zh) | 一种检测npm蛋白的试剂盒及其制备方法 | |
| CN104020162A (zh) | 化学发光增敏液及其制备方法 | |
| US20170016887A1 (en) | Enhancement solution for enhancing chemiluminescence and method for preparing chemiluminescent solution | |
| CN106190109B (zh) | 化学发光增强剂及化学发光免疫检测试剂盒 | |
| CN103575897B (zh) | 一种检测akt2蛋白的试剂盒及其制备方法 | |
| US20140353558A1 (en) | Mixed catalyst systems and methods for chemiluminescent reactions | |
| CN118311023B (zh) | 一种近红外发光团超灵敏全自动化学发光法检测新冠抗原的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |