发明内容
针对现有技术存在的不足,本发明的目的在于提供适于北方高寒地区的温室番茄越冬安全高效栽培方法,同时在一定程度上防治番茄生长过程中的黄瓜花叶病毒、烟草花叶病毒、烟草卷叶病毒和苜蓿花叶病毒、番茄斑萎病毒。
为实现上述目的,本发明提供了如下技术方案:
步骤一:棚室准备,棚室底部设置有防寒沟,即棚室前屋面角下挖深0.6~0.8米、宽0.4米的防寒沟,四周铺上旧薄膜,内填隔热物;
步骤二:棚室消毒,进行土壤消毒、高温焖棚、烟剂薰棚;
步骤三:施用底肥,在土壤中施加混合肥料,其中混合肥料包括生物有机肥、复合菌剂、复合肥、磷酸二铵重量比为200~400:5~20:10~30:15~30,均匀撒在土壤表面后深翻20~30公分;
步骤四:整地做垄,做宽70~90公分,高15~25公分的高垄,中间留有水道,水道两侧均为宽40~50公分的作业垄;
步骤五:建生物反应堆,在定植垄上开50-60公分宽、20-25公分深的沟,将秸秆和腐熟菌剂置于沟内后覆土、覆盖地膜,形成保温层。
具体操作如下:
S1:开沟,在定植垄上挖宽60~100cm,深20cm的沟。
S2:菌剂预处理:发酵菌剂、麦麸、水按照6~10:30~55:25~35的比例混合均匀,在阴凉处发酵3-5小时,制成混合剂。
S3:放秸秆:均匀平铺于沟内,略高出地面,秸秆头尾相接,秸秆超出沟两端约8~15cm。
S4:撒菌剂:将S2中的混合剂均匀撒到秸秆表面,再将秸秆拍平,使混合剂落到秸秆内。
S5:覆土:将挖沟的土覆盖在秸秆之上,厚约15~20cm。
步骤六:播种育苗,在定植前40-50天,采用工厂化方培育番茄壮苗,定植前5-7天开始炼苗。
步骤七:定植,定植前4-5天浇足底水,同时底水中加入硫酸铜或者氢氧化铜一起灌溉土壤中;定植时在高垄上挖株距30~50cm,行距50~75cm,深5~10cm的定植穴;将番茄苗置于定植穴中,施入肥水,覆土、定植。
步骤八:植株调整,包括吊蔓、打叉、授粉、疏花疏果。其中打叉过程中进行消毒处理;授粉采用振动授粉。
步骤九:肥水及温度管理:番茄进入膨果期后,每隔10-15天随水冲施氨基酸水溶肥料1次,每次用量40公斤;根据番茄生长对温度的要求,及时进行通风、起落棉被等温度管理。
步骤十:适时采收:番茄果实完成转色后要及时采收,保证其较好的商品特性。
其中,在番茄生长过程中施用下述式I化合物,所述生长过程包括步骤七以及番茄的其它生长过程:
I。
为实现北方高寒地区温室番茄越冬安全高效生产,首先要保证适宜番茄生长的温度条件。本发明中,生产温室选用北方地区特有的机建厚墙体日光温室,为提高温室保温性能,步骤一中,在棚室前屋面角下挖深0.6~0.8米、宽0.4米的防寒沟,四周铺上旧薄膜,内填麦秸等隔热物,减少温室内部土壤白天吸收热量在夜晚向外部的传导,提高温室蓄热保温性能。
步骤三中,施用底肥以生物有机肥为主,其主要成分为有机质、有益微生物和矿质营养元素,通过施用生物有机肥,可以提高土壤中有机质、有益微生物及番茄生长所需营养元素的含量,促进土壤团粒结构的形成,预防或改善土壤板结、盐渍化等问题;有益微生物的活动,还可以提高土壤温度,抑制病原微生物的繁殖,减少土传病害的发生,为番茄生长创造良好的根际环境。
针对番茄越冬生产中温室温度及CO2浓度较低的问题,步骤五中,应用生物反应堆技术,通过秸秆腐熟菌剂对秸秆的分解释放出CO2、热量和有益生物孢子,提高棚室中的CO2浓度和土壤温度,促进番茄光合作用产物的积累,提高番茄植株的抗逆性,抑制蔬菜病虫害的发生,为实现安全高效生产提供保障。
通过步骤一、三、五,可以进一步提高温室保温性能,提高土壤温度,满足番茄生长期对温度条件的要求,同时,还可以改良土壤、提高温室CO2浓度、抑制病虫害的发生,且所用肥料、菌剂、秸秆等不仅对环境无任务污染,还能起到改良土壤环境的作用,符合绿色无公害蔬菜生产要求。
针对番茄病虫害问题,很多时候人们只重视在番茄遭受病虫害之后进行喷药,此时病虫害已对番茄造成伤害,且较难有效控制。本发明中除步骤三、五可以起到病虫害防治作用外,步骤二中,通过进行彻底的棚室消毒,杀灭病原菌及虫卵,从而在源头控制病虫害的发生,三种消毒方法优先选择高温闷棚,病虫害较严重时,进行土壤消毒和烟剂熏棚。
高温闷棚具体做法为,在天气晴朗的夏秋季节,将土壤深翻后,用透明吸热薄膜覆盖在地表,密闭棚室10~25天。
闷棚过程中午棚室最高温度可达到70-80℃,土壤温度达到60℃左右,可以消灭棚室内及土壤中的多数活体动植物病原体,是一种简便易行、环保有效的病虫害防控措施。
土壤消毒为每亩地用甲基-1H-2-苯并咪唑氨基甲酸酯4~5斤与50~60公斤土壤充分混拌,均匀撒在土壤表面,深翻30~40公分。
甲基-1H-2-苯并咪唑氨基甲酸酯又名多菌灵,是一种广谱性杀菌剂,对多种作物由真菌(如半知菌、多子囊菌)引起的病害有防治效果。番茄对真菌病害特别敏感,在常见的75种病害中,真菌病害就占有40种之多,因此通过土壤消毒的方法,特别选用多菌灵消灭土壤中的真菌性病原菌。
烟剂薰棚一般在阴天或棚室夜温小于20℃的条件下进行,密闭棚室,用烟剂薰棚10~15小时,后进行通风将烟气排除。
烟剂选用四氯间苯二甲腈、异丙威中至少一种。
四氯间苯二甲腈又名百菌清是广谱、保护性杀菌剂。作用机理是能与真菌细胞中的三磷酸甘油醛脱氢酶发生作用,与该酶中含有半胱氨酸的蛋白质相结合,从而破坏该酶活性,使真菌细胞的新陈代谢受破坏而失去生命力。
异丙威又称为叶蝉散、灭扑威,是一种触杀性兼有内吸作用的杀虫剂,属中等毒性杀虫剂。
两种烟剂配合使用,能够最大程度地灭杀残留在棚室内部及地表病原菌、害虫及虫卵。
根据当地及前茬作物病虫害发生情况,选择适宜的棚室消毒方法,如病虫害较轻,可只采取高温闷棚,如病虫害较严重,可同时采取三种消毒方法,以后可三种方法轮换使用,通过这三个步骤的处理,能够大大减少棚室病原菌及害虫数量,从源头控制病虫害的发生。
对比试验结果表明,与相同条件下未进行棚室消毒处理所种植的番茄相比,经棚室消毒处理的番茄植株病害发生率降低50-70%。
步骤三中所施用的底肥以生物有机肥为主,其主要成分为有机质≥45%,N+P2O5+K2O≥10%,有效活菌数(cfu)≥2亿/克,同时含有部分作物生长所必需的中、微量营养元素。在有益微生物和有机质的作用下,可以促进土壤团粒结构形成,防止土壤板结、改良土壤环境,刺激作物根系生长,分解土壤中难溶的磷、钾,促进作物对养分的吸收,提高肥料利用率。通过有益微生物在作物根系的大量繁殖,形成菌群优势,可以抑制病原微生物的繁殖,有效预防根腐病、立枯病、枯萎病、黄萎病、疫病及根结线虫病等多种病害,同时,提高作物的抗旱、抗逆、抗重茬能力,防止植物早衰和生理病害。
在复合肥的选用中,选用氮元素重量份占10~20%、磷元素重量份占10~20%、钾元素重量份占10~20%的复合肥,氮、磷、钾这三种元素作为植物生长所必须的元素,在长期经验得出氮元素重量份占10~20%、磷元素重量份占10~20%、钾元素重量份占10~20%的复合肥较为符合番茄植株生长对营养元素的需求。
在复合菌剂的使用上选用含有枯草芽孢杆菌:有效菌数为30~40亿/g以及胶冻样芽孢杆菌:有效菌数为0.5~0.8亿/g的复合菌剂。
枯草芽胞杆菌,是芽胞杆菌属的一种。枯草芽孢杆菌菌体生长过程中产生的枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等活性物质,这些活性物质对致病菌或内源性感染的条件致土壤内病菌有明显的抑制作用。
胶冻样芽胞杆菌富含的有效、活性的胶冻样芽孢杆菌,它可在土壤中繁殖生长,并产生有机酸、荚膜多糖等代谢产物,破坏硅铝酸盐的晶格结构、难溶性磷化合物等,分解释放出可溶的磷钾元素及钙、硫、镁、铁、锌、钼、锰等中微量元素,既增进了土壤肥力,又为作物提供了可吸收利用的营养元素,同时产生赤霉素、细胞激动素、微生物酶、细菌多糖等生理活性物质,促进作物营养吸收和生长代谢。经多年多种作物田间应用试验证实,它能增加土壤速效磷含量90.5-110.8%、增加速效钾的含量20-35%。亩施用1公斤微生物菌剂增产效果与亩施15-20公斤过磷酸钙、亩施7.5-10公斤硫酸钾增产效果相当。一次施用,全生育期有效。
同时胶冻样芽胞杆菌在土壤中生长代谢,产生多种的激素类物质、生物酶、氨基多糖类物质和蛋白质、氨基酸类物质,促进作物生长发育,诱导作物增强抗性,增强抗寒、抗旱、抗病和抗逆能力,改善产品品质。
胶冻样芽胞杆菌补入大量有益微生物,在作物根部形成有益菌群,有效抑制土壤有害和致病微生物的繁殖,显著减少多种土传病害的发生,如白粉病、立枯病、枯萎病等。从而减少部分农药的使用,减轻农药污染。
同时复合菌剂在代谢过程中也能够产生热量,使得整个温室更能适应于高寒地区越冬生产。
在定植前,在挖好的定植穴中加入,每亩地用式I化合物、磷酸二氢钾、水以0.005~0.01:0.5~2:1的重量比例配置成肥水,苗子放入定植穴后每株灌肥水0.25kg,后覆土厚约2~5cm定植。
通过加强局部肥料的用量使得在新植株插入定植穴中后,其根系能够快速生长,达到快速生根的效果。
同样的,也可以在每亩地用HA钾1kg兑土30~100kg拌匀,平均施入定值穴中,栽苗覆土厚约1~2cm。也可以达到快速生根的效果。
同时可将硫酸铜或氢氧化铜稀释后随底水一同灌溉,可以降低溃疡病的发病率。
在植株调整过程中,吊蔓为公知技术,在本发明中吊蔓过程使用常规手段即可。在打叉过程中,需要用中生菌素的稀释液对打叉用具进行消毒,这里打叉过程中可以使用手,或者其他工具,最主要的就是要对其进行消毒处理,并在打叉后统一喷施800倍液中生菌素,防止病害通过伤口侵染、传播。
在授粉过程中通过振动授粉代替传统的激素蘸花,通过振动授粉提高了花的授粉率,进而提高了番茄的坐果率,促使果实自然发育成熟,提高果实的整齐度和品质,避免了使用激素对果实品质及消费者人身安全造成的不利影响,符合绿色无公害蔬菜生产要求。
上述式I化合物可制备成为农药组合物其农药上可接受的助剂、表面活性剂、溶剂和载体。其可制成可溶性液剂、微乳剂、水乳剂、悬乳剂、种衣剂、可湿性粉粒剂、缓释颗粒剂、控释颗粒剂、水分散粒剂、干悬乳剂,或直接使用的颗粒剂。
所述农药组合物的制备,各种剂型的制备及其使用都是本领域技术人员所熟知的。
本发明根据北方高寒地区气候特点及生产条件,建立了一套温室番茄越冬安全高效栽培方法,重点在提高棚室环境温度、改良土壤、预防病虫害等方面采取一系列措施,为番茄生长提供适宜的环境条件及科学的管理,从而达到优质高产的目的。本发明克服了低温严寒、病虫害多发的不利条件,实现了北方高寒地区温室番茄越冬安全高效生产。
实施例
下面通过实施例对本发明作进一步说明。应该理解的是,本发明实施例所述制备方法仅仅是用于说明本发明,而不是对本发明的限制,在本发明的构思前提下对本发明制备方法的简单改进都属于本发明要求保护的范围。实施例中用到的所有原料和溶剂均购自SigmaBiochemicalandOrganicCompoundsforResearchandDiagnosticClinicalReagents公司。
制备实施例1:式I化合物的制备
(1)25毫升单口烧瓶中加入2mmol吲哚醌,10毫升丙酮,2.5mmol碳酸钾,室温下缓慢滴加3mmol溴乙酸乙酯,升温回流反应,4小时之后停止反应,冷却至室温后将反应液倒入冰水中,析出大量白色固体,抽滤、水洗、烘干得到白色固体,收率70%。
(2)25毫升单口瓶内加入2mmol步骤(1)制备的产物,15毫升无水乙醇,搅拌下加入9mmol的80%水合肼,升温回流反应;2小时后停止反应,冷却至室温,抽滤,烘干得到白色固体,无水乙醇重结晶得到白色固体,收率65%。
(3)25毫升单口烧瓶中加入1mmol步骤(2)的产物,6毫升无水乙醇,搅拌下加入0.9mmol苯基异硫氰酸酯,升温回流反应,3小时之后停止反应,冷却至室温,抽滤,烘干,得到白色固体,收率87%。
(4)25毫升单口烧瓶中加入1mmol步骤(3)产物,7毫升5%的碳酸钾溶液,升温回流反应,5小时之后停止反应,趁热抽滤,待滤液冷却之后用10%盐酸调溶液pH至中性,析出大量白色固体,抽滤,烘干,DMF-H2O(5:1,V/V)重结晶得到白色固体,收率61%。
(5)25毫升单口烧瓶内加入0.4mmol步骤(4)的产物,6毫升DMF,将其溶解后加入1.1mmol的碳酸钾,0.4mmol苄溴,室温下继续搅拌2小时后停止反应,向体系内加入适量冷水,析出白色固体,继续搅拌半小时,抽滤,烘干,乙醇-二氯甲烷(10:1,V/V)重结晶后得到白色块状晶体0.09克式I化合物,m.p.196~197℃,
I。
1HNMR(CDCl3,500MHz)δ:4.36(s,CH22H),4.89(s,CH22H),7.12(d,CH1H),7.25(m,CH1H),7.27(t,2CH2H),7.38(t,2CH2H),7.42(t,2CH2H),7.48(t,2CH2H),7.54(d,CH1H),7.62(m,CH1H),7.89(d,CH1H),7.90(t,CH1H).
栽培方法实施例:
步骤一:棚室准备,选择具有良好墙体结构的采光面的机建厚墙体日光温室,具有较好的透光性和保温、蓄热性,在棚室前屋面角下挖深0.6~0.8米、宽0.4米的防寒沟,四周铺上旧薄膜,内填麦秸;
步骤二:棚室消毒,可采用高温闷棚、土壤消毒、烟剂薰棚等方法。
高温闷棚:7-8月份光照好的条件下,施用秸秆粪肥并将土壤深翻后,用透明吸热薄膜覆盖在地表,密闭棚室15天左右,土壤温度可升高到50-60℃,一般的病原菌、害虫均能杀死。
土壤消毒:定植前15-20天,每亩地用甲基-1H-2-苯并咪唑氨基甲酸酯4~5斤与50~60公斤土壤充分混拌,均匀撒在土壤表面,深翻30~40公分。
烟剂薰棚:在阴天及棚室夜温不高于15℃条件下,密闭棚室,用百菌清、异丙威等烟剂薰棚12个小时,后进行通风将烟气排除烟剂放于棚室过道处,避免用量过大导致植物产生药害。
步骤三:施用底肥,定值前10-15天,将生物有机肥、复合菌剂、复合肥、磷酸二铵充分混合,均匀撒在土壤表面后深翻20-30公分。底肥使用标准如下:
6穗果底肥标准:每亩用生物机肥240千克,复合菌剂8000克,复合肥75公斤,磷酸二铵25公斤。
10穗果底肥标准:每亩用生物机肥400千克,蒙鼎微生物复合菌剂8000克,复合肥125公斤,磷酸二铵25公斤。
步骤四:整地做垄,定值前8-10天,将土地整平,做宽80公分,高15-20公分的高垄,中间留水道,两侧均为宽50公分的作业垄。
步骤五:建生物反应堆,在定植垄上开50-60公分宽、20-25公分深的沟,将秸秆和腐熟菌剂置于沟内后覆土、覆盖地膜,形成保温层。
具体操作如下:
S1:开沟,在定植垄上挖宽60~100cm,深20cm的沟。
S2:菌剂预处理:发酵菌剂、麦麸、水按照6~10:30~55:25~35的重量比例混合均匀,在阴凉处发酵3-5小时,制成混合剂。
S3:放秸秆:均匀平铺于沟内,略高出地面,秸秆头尾相接,秸秆超出沟两端约8~15cm。
S4:撒菌剂:将S2中的混合剂均匀撒到秸秆表面,再将秸秆拍平,使混合剂落到秸秆内。
S5:覆土:将挖沟的土覆盖在秸秆之上,厚约15~20cm。
步骤六:播种育苗,在定植前40-50天,采用工厂化方培育番茄壮苗,定植前5-7天开始炼苗。
步骤七:定植,具体操作如下:
S1:浇灌底水,定值前4-5天,提前浇足底水,可保证定值时墒情好、土壤温度高,同时可将硫酸铜或氢氧化铜稀释后随底水一同灌溉,可以降低溃疡病的发病率。
S2:确定种植密度,挖定值穴。依据品种的长势及栽培茬口确定番茄种植密度。如汉姆一号株距40-45cm,行距60-65cm,根据定值密度挖定值穴或用专用打孔工具打孔,定植穴一般深5-8cm,冬季可适当增加株距,以改善其通风透光性,防止病害的发生。
S3:定植过程可采用坐水栽培,每亩地用式I化合物、磷酸二氢钾、水以0.005~0.01:0.5~2:1的比例配置成肥水,苗子放入定植穴后每株灌肥水0.25kg,后覆土厚约2~5cm定植。
或者口肥栽培,每亩地用HA钾1kg兑土30~100kg拌匀,平均施入定值穴中,栽苗覆土厚约1~2cm。
对口肥定值的,在定值前一天用大水桶晾晒温水,定值后每株苗灌水半斤左右,促进缓苗;低温时,坐水栽培后不再浇水,温度过高或土壤较干旱的浇小水。
S4:定植后3-5天浇缓苗水,要求水量均匀充足,每亩地用1000克根乐康,根乐康为常见的氨基酸肥料。定值后12-15天用络氨铜水剂兑水灌根,预防溃疡病的发生。
步骤八:植株调整及授粉,整枝吊蔓,番茄生长至第6-7片真叶,第一穗花开放前单干整枝,将吊蔓绳一端系到植株底部,植株上部按一定方向缠绕到吊蔓绳上,根据栽培需要,留足果穗后,抹去顶芽。吊蔓绳不要系过紧,以免抑制植株生长打叉,当小叉长到5-8cm时,在晴天上午进行用中生菌素配制消毒液,双手消毒后进行打叉,用手将叉子轻轻推掉,避免将茎秆表皮连带下来;打叉之后喷施72%农用链霉素,避免病害侵染阴雨天不打叉,打叉后将叉子带出棚外授粉,花序达到“三开两裂”时进行在适宜的温度条件下一般25-28℃。
振动授粉:用振动棒(垂直振动方向)接触花序柄部位0.5-1秒钟即可利用自身花粉天然授粉,果实饱满充实。
疏花疏果,当果实直径达到2-3cm时;每穗选留4-5个较好的果,将其余的花果疏掉;及早去除花序前的花前叶及时疏花、疏果可以剔除畸形或生长不良的果实,避免养分浪费。
摘除老叶、病叶、花前叶,生长过程中对植株下部的老叶、病叶及花前叶要及时去除;当果实开始转色时可将其下部叶片打掉,增加通风透光,促进转色。
步骤九:环境调控及肥水管理。
缓苗期,保持较高的温度和湿度促进缓苗。白天25-30℃,夜间15-18℃,空气相对湿度70%,温度超过25℃放风,午后温度降至20℃闭风。
缓苗期至坐果期白天23-25℃,夜间13-15℃,相对湿度60%,温度超过25℃放风,下午18-20℃时关闭放风口,保持适温低湿防止病害发生,温度低于15℃时,授粉受精不良,易落花。
坐果后白天23-25℃,夜间15-18,上午棚温上升至25℃开始通风,下午18-20℃时关闭放风口,空气湿度50-60%。
在肥水管理上根据种植茬口及天气情况确定浇水周期,生长前期土壤见干见湿,番茄进入膨果期后,每隔10-15天随水冲施氨基酸水溶肥料1次,每次用量40公斤。
步骤十:适时采收,番茄果实完成转色后要及时采收,保证其较好的商品特性。
步骤十一:根据实际情况,可在番茄生长的不同阶段施用本发明的式I化合物以防治各种病害。
本项北方高寒地区温室番茄越冬安全高效栽培方法,重点在提高棚室环境温度、改良土壤、预防病虫害等方面采取一系列措施,为番茄生长提供适宜的环境条件及科学的管理,从而达到优质高产的目的。本发明克服了低温严寒、病虫害多发的不利条件,实现了北方高寒地区温室番茄越冬安全高效生产。
在实施例一、实施例二、对照组一、对照组二、对照组三中,选用同一品种、健康状况相似的番茄植株,在同一时期进行温室越冬栽培,对番茄植株的长势、病虫害发生情况及产量进行调查统计,实施例和对照处理情况及试验结果见表1。
表1实施例和对照处理情况及试验结果
表2对照组处理情况及实验结果
从表1和表2中可以看出,通过本发明方法栽培的番茄,植株长势健壮,具有较好的抗病虫害性能,番茄亩均产量达到9000公斤以上,显著高于对照处理。在实施例三中仅加入了复合菌剂进行防治,已经能够达到较好地效果,在实施例一和实施例二中加了复合菌剂和化合物I进行防治,进一步降低了病虫害率和提高了产量。同时通过对照组4进行对比,仅仅加入化合物I虽然能起到一定的效果,但是远不及加入化合物I和复合菌剂的效果。
番茄开花坐果初期,分别对实施例一、实施例二、实施例三、、对照组一、对照组二、对照组三、对照组四于早上、中午、晚上测量处理和对照地下25cm深处地温,测量结果为:
表3地下25cm深处地温比较
通过表3,可以看出,通过本发明栽培的土壤具有良好的产热保温效果,从而适应高寒地区番茄越冬种植。
生物活性实施例1:
活性实验(1):
本发明的由式I表示的化合物的PPARδ活性通过转染检测确认。另外,对于PPAR亚型PPARα和PPARγ的选择性也进行检验。通过MTT检测测试细胞毒性,通过动物实验研究体内活性。
本检测中使用的是CV-1细胞。将所述细胞接种至含有添加有10%FBS、DBS(非特异性牛血清,经脱脂)和1%青霉素/链霉素的DMEM的96孔板中,并在37℃、5%CO2的培养箱中培养。实验按照接种、转染、样品施用和确认的步骤进行。具体地说,将CV-1细胞接种至96孔板(5000个细胞/孔),24小时后转染。将全长PPAR质粒DNA、因具有荧光素酶活性而可以确认PPAR活性的报告DNA、提供有关转染效率信息的β-半乳糖苷酶DNA和转染试剂用于转染。将样品溶解在二甲亚砜(DMSO)中,通过介质将其以不同浓度施用到细胞中。在培养箱中培养细胞24小时后,通过使用裂解缓冲液使细胞裂解。使用光度计和酶标仪测量荧光素酶活性和β-半乳糖苷酶活性。使用β-半乳糖苷酶的值修正获得的荧光素酶的值。利用这些值绘制图形,并计算出EC50。
由此可见本发明的化合物对于PPARδ具有高选择性。
执行MTT检测是为了测试本发明的由式I表示的化合物的细胞毒性。MTT是溶于水的黄色物质,但是当其被引入活细胞中时会通过线粒体中的脱氢酶变成紫色不溶的晶体。在将MTT溶解在二甲亚砜中后可以通过测量OD550确认细胞毒性。实验如下进行。
将CV-1细胞接种于96孔板中(5000个细胞/孔)。在37℃、5%CO2的培养箱中培养所述细胞24小时,并对其施用不同浓度的样品。然后,再次将所述细胞培养24小时,向其中加入MTT试剂。培养15分钟后,生成的紫色晶体溶解在二甲亚砜中。使用酶标仪测量光密度,以确认细胞毒性。
结果,由式I表示的化合物被确认对于PPAR不具有细胞毒性,即使在其浓度为EC50值的100倍~1000倍时亦如此。
活性实验(2):
烟草花叶病田间药效试验(山东市淄博市沂源县中庄镇):
处理1:10%式I化合物WP
处理2:30%吲唑磺菌胺WP
处理3:20%戊唑醇WP
处理4:空白对照
试验方法:烟草移栽15-20d后第一次施药,间隔7d再次施药,共施药三次。
调查方法:分别于三次药后7d、14d、21d调查,根据相关资料调查标准分级,统计病情指数,计算防效,结果见表4。
表4供试药剂防治烟草花叶病的效果
由表4可知,10%式I化合物WP效果好于30%吲唑磺菌胺WP和20%戊唑醇WP。
番茄斑萎病田间药效(山东市淄博市沂源县中庄镇):
处理1:10%式I化合物WP
处理2:10%吡虫啉WP
处理3:空白对照
试验方法:番茄移栽10~15d后第一次施药,间隔7d再次施药,共施药两次,每个处理90平方米。
调查方法:分别于两次药后7d、14d、21d调查,采用5点取样,每小区调查200丛,根据相关资料调查标准分级,统计病情指数,计算防效,结果见表5。
表5不同处理防治番茄斑萎病的效果
实验结果:由表5可知,10%式I化合物WP,效果好于10%吡虫啉WP。