CN108575752B - 一种适用于规模化生产黑果腺肋花楸优质种苗的快速繁殖方法 - Google Patents
一种适用于规模化生产黑果腺肋花楸优质种苗的快速繁殖方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN108575752B CN108575752B CN201810417215.1A CN201810417215A CN108575752B CN 108575752 B CN108575752 B CN 108575752B CN 201810417215 A CN201810417215 A CN 201810417215A CN 108575752 B CN108575752 B CN 108575752B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- culture
- seedling
- root
- humidity
- matrix
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
- A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
- A01H4/008—Methods for regeneration to complete plants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
- A01G24/00—Growth substrates; Culture media; Apparatus or methods therefor
- A01G24/10—Growth substrates; Culture media; Apparatus or methods therefor based on or containing inorganic material
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
- A01G24/00—Growth substrates; Culture media; Apparatus or methods therefor
- A01G24/10—Growth substrates; Culture media; Apparatus or methods therefor based on or containing inorganic material
- A01G24/12—Growth substrates; Culture media; Apparatus or methods therefor based on or containing inorganic material containing soil minerals
- A01G24/15—Calcined rock, e.g. perlite, vermiculite or clay aggregates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
- A01G24/00—Growth substrates; Culture media; Apparatus or methods therefor
- A01G24/20—Growth substrates; Culture media; Apparatus or methods therefor based on or containing natural organic material
- A01G24/28—Growth substrates; Culture media; Apparatus or methods therefor based on or containing natural organic material containing peat, moss or sphagnum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
- A01G31/00—Soilless cultivation, e.g. hydroponics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
- A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
- A01H4/001—Culture apparatus for tissue culture
Abstract
一种适用于规模化生产黑果腺肋花楸的高效快速繁殖方法,包括初代培养,分化培养,继代培养,壮苗培养,生根培养,驯化移栽。其中,通过调节分化培养基中生长调节剂的种类和配比,使组培苗不经过形成愈伤组织阶段直接分化成苗,且分化系数高,长的壮;采用添加一定量活性炭的生根培养基,提供暗环境和对培养基中的代谢有害物质的吸收,根生长加快,且根健壮、质地柔韧不易折断,移栽易成活。通过本方法不仅缩短培育周期,还可以大幅降低生产成本。
Description
技术领域
本发明涉及一种适用于规模化生产的黑果腺肋花楸的快速繁殖方法,属于农业生物技术领域。
背景技术
黑果腺肋花楸(Aroniamelanocarpa)是集食用、药用、园林和生态价值于一身的蔷薇科落叶灌木。黑果腺肋花楸适应性广,抗寒性强,耐干旱,适合我国大部分区域栽植。黑果腺肋花楸果实含花青素(1%~2%)、黄酮(0.25%~0.35%)、多酚(1%~2%)、Vc(0.03%~0.06%)和β-胡萝(0.005%),是已知植物中含量最高或较高的。多酚是改善毛细血管和血管的结构与机能的非常重要的物质,还有助于刺激和改善循环系统。花青素和黄酮能够保持心脏,泌尿系统健康,提高免疫系统机能。Vc和p胡萝卜素具有抗衰老功能。果实提取物对治疗辐射病和重金属中毒症有很好的疗效。果实还含有多种维生素和矿质元素等物质。伊利诺斯州立大学功能食品项目的研究人员得出了黑果腺肋花楸果实含有治疗癌症和心脏病的特定化合物的结论。果实可用于加工果汁、果酒、果酱、罐头、果脯等食品和饮料。
该树种原产于美国东北部,欧洲已有100余年的引种栽培历史,加拿大、俄罗斯、保加利亚、匈牙利、波兰、捷克等国家都有相当规模的栽培和相关的加工产业。全球品种资源达30余个,分别适用于食用、药用、园林绿化和适生于不同的气候、土壤条件。在欧美和东亚地区,该树种在园林绿化方面的应用非常广泛;由果实加工的药品、保健饮料和食品在市场上非常普及和流行。
该树种适应性强、结果早、见效快、经济价值高,无论作为特种经济林栽培,还是用于园林绿化,都具有广阔的市场前景。目前,该树种已进入推广开发阶段。
目前,虽然已有少部分关于黑果腺肋花楸组织培养研究的报告,但现有黑果腺肋花楸组培快繁体系的研究基本上都是在实验室小规模扩繁,且生产周期较长,尚未有大规模开放式快速培育黑果腺肋花楸种苗的相关报道,这就给黑果腺肋花楸的工厂化育苗带来不便。
因此,提供一种适于规模化生产的黑果腺肋花楸快速繁殖方法,具有普遍适用性且操作过程简单方便、成苗繁殖速度快、成活率高的黑果腺肋花楸的高效快速繁殖方法就成为该技术领域急需解决的技术难题。
发明内容
本发明的目的在于针对现有技术的不足,提供一种适用于规模化生产黑果腺肋花楸的快速育苗方法,通过调节分化培养基中生长调节剂的种类和配比,使组培苗不经过形成愈伤组织阶段直接分化成苗,且分化系数高,长的壮;采用添加一定量活性炭的生根培养基,提供暗环境和对培养基中的代谢有害物质的吸收,根生长加快,且根健壮、质地柔韧不易折断,移栽易成活。整套方法不仅缩短培育周期,还可以大幅降低生产成本。
为实现上述目的,本发明采取以下技术方案:一种适用于规模化生产黑果腺肋花楸的高效快速繁殖方法,包括初代培养,分化培养,继代培养,壮苗培养,生根培养,驯化移栽,其特征在于,
在初代培养中,以黑果腺肋花楸带芽茎段为试验材料,分别选取4月初、4月中旬、4月下旬和5月初4个时期一年生幼嫩新枝条作为外植体材料,用塑料保鲜膜保湿带回实验室,用低浓度的高锰酸钾溶液涮洗2~3min,再用自来水冲洗1h左右,剪成1~2cm的茎段和顶芽在超净台上用75%酒精消毒10~15s,无菌水清洗3~5次,用2%NaClO消毒设置10min、15min、20min、25min4个处理,在消毒剂中加入1~2滴表面活性剂吐温80,用无菌水清洗3~5次后接种于起始诱导培养基上,起始诱导所用基本培养基为MS空白培养基;
进一步地,在分化培养中,选取初代培养中生长健壮的组培苗接种在MS+6-BA+NAA+30g/L蔗糖+7g/L琼脂粉培养基中,6-BA浓度(mg/L)设置0.6、0.8、1.0、1.2、1.4,5个处理,NAA浓度(mg/L)设置0.01、0.05、0.1、0.15、0.2,5个处理,每处理接种试管苗15株;培养基的pH值为5.8;培养条件:温度25℃±2℃,湿度25%-50%,光照强度3000lx-6000lx,光照时间10-12h/d;培养时间为15-20天。
进一步地,在继代培养中,继代培养基为:MS+6-BA+NAA+30g/L蔗糖+7g/L琼脂粉;培养条件:温度25℃±2℃,湿度25%-50%,光照强度3000lx-6000lx,光照时间10-12h/d;培养时间为15-20天。
进一步地,在壮苗培养中,壮苗培养基为:MS+0.05mg/LNAA+0.5mg/L6-BA+30g/L蔗糖+7g/L琼脂粉;培养条件:温度25℃±2℃,湿度25%-50%,光照强度3000lx-6000lx,光照时间10-12h/d;培养时间为15-20天。
进一步地,在生根培养中,用生长素吲哚丁酸(IBA)和萘乙酸(NAA)进行生根培养,单独使用IBA浓度(mg/L)设置0.4、0.6、0.8、1.0、1.2;NAA浓度(mg/L)设置0.05、0.1、0.2、0.3、0.4;且在生根培养时试验加入活性炭,设置0g/L、0.1g/L、0.3g/L、0.5g/L、0.8g/L5个处理,每处理接种试管苗15株,20d后观察生根情况;培养基的pH值为5.8;培养条件:温度25℃±2℃,湿度25%-50%,光照强度2000lx-3000lx之间,光照时间12h-14h,培养时间为10-15天;继续培养15-20天即可移栽。
进一步地,在驯化移栽中,包括以下步骤:
A、生根组培苗温室瓶内适应性炼苗
生根瓶苗由组培室移到温室,其培养环境发生了变化,在温室内要逐步将瓶内的湿度降下来,并逐渐适应较强的光线;湿度的控制主要采用松口、去盖、敞口,光线强度的控制主要是遮阴;
温室内温度白天控制在23-28度左右,夜里不低于18度,相对湿度一般在50%--70%;光强的控制利用温室内的遮阴网和瓶上覆盖遮荫网的方式;前5天,光强控制在4000lx以下,瓶内湿度在近100%;第6天,光强控制在6000lx内,将瓶口松开,瓶内湿度90%,第9天,将瓶盖反盖,光强控制在8000lx内,瓶内湿度在80-90%,第11天,去盖,光强控制在8000lx内,瓶内湿度在70-80%左右;第13天,洗苗;
B、基质的选择及消毒
基质的种类和配比决定了基质的持水量和通透性,二者的平衡是生根苗驯化成活的关键因素,不同的品种对基质的要求不同;基质的消毒:把基质密闭堆放,利用太阳光暴晒10-15天,里面温度要达到60度以上;消毒好的基质在定植苗木前浇透水后,放置到基质达到半干半湿即可栽苗;
采用草炭土、珍珠岩和沙三种材料混合后作为基质,配比设置草炭土∶珍珠岩1:1,草炭土∶珍珠岩∶沙1∶1∶1,草炭土∶珍珠岩∶沙2∶2∶1和草炭土∶珍珠岩∶沙3∶2∶1,共4个处理;当黑果腺肋花楸的驯化基质为草炭土∶珍珠岩∶沙按2∶2∶1混合时,驯化成活率达85%;当基质中不加沙时,根系扎不实,有倒伏现象,驯化成活率为75%;当基质配比为草炭土∶珍珠岩∶沙为1∶1∶1时,驯化苗长势较弱,叶色偏黄,驯化成活率为70%;当基质配比为草炭土∶珍珠岩∶沙3∶2∶1时,出现根部积水,驯化成活率为60%;
C、洗苗及定植
将生根瓶苗轻轻地从培养基中取出,先去掉大块的培养基,放入20度-25度左右的水中,然后小心地将根表面的培养基全部洗掉,注意尽量不要伤到根系;将洗好的苗用1000倍的多菌灵浸泡5分钟,放在水里等定植;定植时要将温室的内遮阴打开,以免光照太强,定植后及时喷水,以免苗木失水萎焉,然后搭建小拱棚,小拱棚用4mm粗的钢丝搭建,两边插入畦边,中间高50-60cm;小拱棚上覆盖0.8丝的塑料薄膜,并在薄膜上均匀地剪出透气孔。
D、定植后的管理
定植后第5天用2000倍的多菌灵进行喷施2次,基质在小拱棚内基本上不用浇水,如过干最多浇一次,基质湿度不能过大,以免出现沤根;定植后第25天去棚膜,撤去拱棚后,组培苗进入温室的正常管理,温度利用天窗、侧窗、棉被控制,湿度的控制主要是利用喷雾,光照的控制方法主要是利用外遮阴和内遮阴系统;去棚后,根据基质水分的蒸发情况,用0.2%的复合肥浇苗,水肥同时使用;当苗生长到一定程度,有时出现只长粗不长高、生长点封顶的现象,可用0.2%的尿素喷施;病虫害的防治:每10天喷杀菌药一次,2000倍多菌灵和2000倍甲霜灵交换使用;温室天窗和侧窗均装有防虫网,在温室内挂粘虫板。
本发明的优点在于:
1、本发明通过调节分化培养基中生长调节剂的种类和配比,使组培苗不经过形成愈伤组织阶段直接分化成苗,使成苗时间缩短了20-25天,这在快速规模化生产中,大大的提高了效率,不仅缩短培育周期,还可以大幅降低生产成本。
2、本发明配方采用MS培养基和1/2MS培养基,改良了各激素的类别和浓度比例。分化培养实现了瓶苗分化率100%,增殖系数可达到10,瓶苗长的壮,生长质量高。
3、本发明增加了壮苗培养基,瓶苗长得更壮,更有利于生根。
4、本发明在生根培养基中添加一定量活性炭,生根率达100%,并且生根条数也比常规培育方法的生根条数要多,生根条数在6以上。本发明方案中的添加的活性炭创造的黑暗环境有利于根的诱导和根系的生长,不加活性炭的组培苗根系愈伤化加重,根的组织疏松并褐化。本配方培养出的生根苗,根生长加快,且根健壮、质地柔韧不易折断,须根较少,且没有愈伤组织生成,可大大提高后期炼苗的成活率。移栽驯化成活率高于85%。
5、本发明在组培生根苗移栽后采用了自制小拱棚,小拱棚用4mm粗的钢丝搭建,两边插入畦边,中间高50-60cm;小拱棚上覆盖0.8丝的塑料薄膜,并在薄膜上均匀地剪出透气孔(如附图)。这种简易小拱棚的使用,不仅操作方便快捷,而且有效地保证了组培苗移栽初期对环境的要求,对组培苗新根的诱发起到重要的作用。
附图说明
图1(A)、图1(B)是根据本发明方法的初代培养情况;
图2(A)、图2(B)是根据本发明方法的分化培养情况;
图3(A)、图3(B)是根据本发明方法的生根培养情况;
图4是根据本发明方法的洗苗情况;
图5是根据本发明方法的修剪情况;
图6(A)、图6(B)是根据本发明方法的组培苗移栽后小拱棚管理的情况;
图7是根据本发明方法的植生袋移栽3个月后的情况;
图8是根据本发明方法的就地移栽3个月后的情况;
图9是根据本发明方法的驯化移栽半年后的情况。
具体实施方式
下面详细描述本发明的实施例,所述实施例的示例在附图中示出,其中自始至终相同或类似的标号表示相同或类似的元件或具有相同或类似功能的元件。下面通过参考附图描述的实施例是示例性的,旨在用于解释本发明,而不能理解为对本发明的限制。
本发明的适用于规模化生产黑果腺肋花楸的高效快速繁殖方法,其步骤如下:
(1)初代培养
以黑果腺肋花楸带芽茎段为试验材料,分别选取4月初、4月中旬、4月下旬和5月初4个时期一年生幼嫩新枝条作为外植体材料,用塑料保鲜膜保湿带回实验室,用低浓度的高锰酸钾溶液涮洗2~3min,再用自来水冲洗1h左右,剪成1~2cm的茎段和顶芽在超净台上用75%酒精消毒10~15s,无菌水清洗3~5次,用2%NaClO消毒设置10min、15min、20min、25min4个处理,在消毒剂中加入1~2滴表面活性剂吐温80,用无菌水清洗3~5次后接种于起始诱导培养基上,起始诱导所用基本培养基为MS空白培养基。
结果表明,选取4月中旬的一年生幼嫩新枝条作为外植体材料,用2%NaClO消毒15min效果最佳,污染率20%,初代苗生长情况也较好。选取4月初材料作为外植体时,用2%NaClO消毒10min效果最好,污染率为25%,但初代苗生长缓慢,长势弱。选取4月下旬和5月初材料作为外植体时,用2%NaClO消毒20min效果最好,初代苗生长健壮,但是污染率在80%以上。
(2)分化培养
选取初代培养中生长健壮的组培苗接种在MS+6-BA+NAA+30g/L蔗糖+7g/L琼脂粉培养基中,6-BA浓度(mg/L)设置0.6、0.8、1.0、1.2、1.4,5个处理,NAA浓度(mg/L)设置0.01、0.05、0.1、0.15、0.2,5个处理,每处理接种试管苗15株。培养基的pH值为5.8。培养条件:温度25℃±2℃,湿度25%-50%,光照强度3000lx-6000lx,光照时间10-12h/d;培养时间为15-20天。4周后调查茎芽增殖情况及分化苗生长情况。
试验结果表明,在试验处理范围内6-BA浓度为1.0mg/l,NAA浓度为0.1mg/l时,分化效果最好,分化率为100%,茎芽增殖数最多,增殖系数达10以上,且分化苗生长健壮、高度均匀。当6-BA浓度为0.6mg/l,NAA浓度为0.01mg/l、0.05mg/l、0.1mg/l、0.15mg/l、0.2mg/l时,分化率均低于60%。当NAA浓度为0.01mg/l,6-BA浓度0.6mg/l、0.8mg/l、1.0mg/l、1.2mg/l、1.4mg/l时,分化率随着6-BA浓度的增大而增加,但分化苗生长均较弱。当6-BA浓度为1.4mg/l,NAA浓度为0.2mg/l时,分化率为100%,茎芽增殖系数达12以上,但分化苗较弱,叶片太小,叶色为黄绿,影响下一步生根,且实验表明,生根后驯化移栽时不易成活。
(3)继代培养
继代培养基为:MS+6-BA+NAA+30g/L蔗糖+7g/L琼脂粉;培养条件:温度25℃±2℃,湿度25%-50%,光照强度3000lx-6000lx,光照时间10-12h/d;培养时间为15-20天。
(4)壮苗培养
壮苗培养基为:MS+0.05mg/LNAA+0.5mg/L6-BA+30g/L蔗糖+7g/L琼脂粉;培养条件:温度25℃±2℃,湿度25%-50%,光照强度3000lx-6000lx,光照时间10-12h/d;培养时间为15-20天。
(5)生根培养
用生长素吲哚丁酸(IBA)和萘乙酸(NAA)进行生根培养,单独使用IBA浓度(mg/L)设置0.4、0.6、0.8、1.0、1.2;NAA浓度(mg/L)设置0.05、0.1、0.2、0.3、0.4;且在生根培养时试验加入活性炭,设置0g/L、0.1g/L、0.3g/L、0.5g/L、0.8g/L5个处理,每处理接种试管苗15株,20d后观察生根情况。培养基的pH值为5.8。培养条件:温度25℃±2℃,湿度25%-50%,光照强度2000lx-3000lx之间,光照时间12h-14h,培养时间为10-15天。继续培养15-20天即可移栽。
试验结果表明,生根培养基为1/2MS+0.1mg/LNAA+0.5g/L活性炭+30g/L蔗糖+7g/L琼脂粉时,生根效果最好生根率为100%,根数6条以上,根长4-5公分,且生根苗生长健壮,叶片墨绿伸展,适合驯化移栽。不加活性炭的组培苗根系愈伤化加重,根的组织疏松并褐化。当生根培养基使用IBA时生根率均低于80%。当NAA浓度为0.05时生根率偏低为60%,且有愈伤组织生成,大大降低了后期炼苗的成活率。当NAA浓度为0.2mg/L、0.3mg/L和0.4mg/L时生根率均在90%以上,但根生长较慢,且质地不够柔韧、须根较多。
(6)驯化移栽
A、生根组培苗温室瓶内适应性炼苗
生根瓶苗由组培室移到温室,其培养环境发生了变化,在温室内要逐步将瓶内的湿度降下来,并逐渐适应较强的光线。湿度的控制主要采用松口、去盖、敞口,光线强度的控制主要是遮阴。
温室内温度白天控制在23-28度左右,夜里不低于18度,相对湿度一般在50%--70%。光强的控制利用温室内的遮阴网和瓶上覆盖遮荫网的方式。前5天,光强控制在4000lx以下,瓶内湿度在近100%。第6天,光强控制在6000lx内,将瓶口松开,瓶内湿度90%,第9天,将瓶盖反盖,光强控制在8000lx内,瓶内湿度在80-90%,第11天,去盖,光强控制在8000lx内,瓶内湿度在70-80%左右。第13天,洗苗。
B、基质的选择及消毒
基质的种类和配比决定了基质的持水量和通透性,二者的平衡是生根苗驯化成活的关键因素,不同的品种对基质的要求不同。基质的消毒:把基质密闭堆放,利用太阳光暴晒10-15天,里面温度要达到60度以上。消毒好的基质在定植苗木前浇透水后,放置到基质达到半干半湿即可栽苗。
采用草炭土、珍珠岩和沙三种材料混合后作为基质,配比设置草炭土∶珍珠岩1:1,草炭土∶珍珠岩∶沙1∶1∶1,草炭土∶珍珠岩∶沙2∶2∶1和草炭土∶珍珠岩∶沙3∶2∶1,共4个处理。通过实验,黑果腺肋花楸的驯化基质为草炭土∶珍珠岩∶沙按2∶2∶1混合时驯化效果最好,驯化成活率达85%。当基质中不加沙时,根系扎不实,有倒伏现象,驯化成活率为75%;当基质配比为草炭土∶珍珠岩∶沙为1∶1∶1时,驯化苗长势较弱,叶色偏黄,驯化成活率为70%;当基质配比为草炭土∶珍珠岩∶沙3∶2∶1时,出现根部积水,驯化成活率为60%。
C、洗苗及定植
将生根瓶苗轻轻地从培养基中取出,先去掉大块的培养基,放入20度-25度左右的水中,然后小心地将根表面的培养基全部洗掉,注意尽量不要伤到根系。将洗好的苗用1000倍的多菌灵浸泡5分钟,放在水里等定植。定植时要将温室的内遮荫打开,以免光照太强,本发明采用无纺布育苗袋定植时将准备好的基质装入直径8cm、高12cm的育苗袋。定植时先在基质上打孔,后进行种植,注意不能窝根,也不能定植过深以免埋心。定植后及时喷水,以免苗木失水萎焉,然后搭建小拱棚,小拱棚用4mm粗的钢丝搭建,两边插入畦边,中间高50-60cm;小拱棚上覆盖0.8丝的塑料薄膜,并在薄膜上均匀地剪出透气孔。
D、定植后的管理
定植后第5天用2000倍的多菌灵进行喷施2次,基质在小拱棚内基本上不用浇水,如过干最多浇一次,基质湿度不能过大,以免出现沤根。定植后第25天去棚膜,撤去拱棚后,组培苗进入温室的正常管理,温度利用天窗、侧窗、棉被控制,湿度的控制主要是利用喷雾,光照的控制方法主要是利用外遮阴和内遮阴系统。去棚后,根据基质水分的蒸发情况,用0.2%的复合肥浇苗,水肥同时使用。当苗生长到一定程度,有时出现只长粗不长高、生长点封顶的现象,可用0.2%的尿素喷施,效果较好。病虫害的防治:每10天喷杀菌药一次,2000倍多菌灵和2000倍甲霜灵交换使用;温室天窗和侧窗均装有防虫网,在温室内挂粘虫板。
在本说明书的描述中,参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中,对上述术语的示意性表述不一定指的是相同的实施例或示例。而且,描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任何的一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。
尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例,可以理解的是,上述实施例是示例性的,不能理解为对本发明的限制,本领域的普通技术人员在不脱离本发明的原理和宗旨的情况下在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。
Claims (1)
1.一种适用于规模化生产黑果腺肋花楸的高效快速繁殖方法,其特征在于:
包括初代培养、分化培养、继代培养、壮苗培养、生根培养、驯化移栽步骤;在初代培养中,以黑果腺肋花楸带芽茎段为试验材料,选取4月中旬一年生幼嫩新枝条作为外植体材料,用塑料保鲜膜保湿带回实验室,用低浓度的高锰酸钾溶液涮洗2~3min,再用自来水冲洗1h,剪成1~2cm的茎段和顶芽在超净台上用75%酒精消毒10~15s,无菌水清洗3~5次,用2%NaClO消毒设置15min在消毒剂中加入1~2滴表面活性剂吐温80,用无菌水清洗3~5次后接种于起始诱导培养基上,起始诱导所用基本培养基为MS空白培养基;
在分化培养中,选取初代培养中生长健壮的组培苗接种在
MS+1.0mg/L6-BA+0.1mg/LNAA+30g/L蔗糖+7g/L琼脂粉培养基中,培养基的pH值为5.8;培养条件:温度25℃±2℃,湿度25%-50%,光照强度3000lx-6000lx,光照时间10-12h/d;培养时间为15-20天;
在继代培养中,继代培养基为:MS+6-BA+NAA+30g/L蔗糖+7g/L琼脂粉;H培养条件:温度25℃±2℃,湿度25%-50%,光照强度3000lx-6000lx,光照时间10-12h/d;培养时间为15-20天;
在壮苗培养中,壮苗培养基为:MS+0.05mg/LNAA+0.5mg/L6-BA+30g/L蔗糖+7g/L琼脂粉;培养条件:温度25℃±2℃,湿度25%-50%,光照强度3000lx-6000lx,光照时间10-12h/d;培养时间为15-20天;
在生根培养中,生根培养基为1/2MS+0.1mg/LNAA+0.5g/L活性炭+30g/L蔗糖+7g/L琼脂粉,20d后观察生根情况;培养基的pH值为5.8;培养条件:温度25℃±2℃,湿度25%-50%,光照强度2000lx-3000lx之间,光照时间12h-14h,培养时间为10-15天;继续培养15-20天即移栽;
在驯化移栽中,包括以下步骤:
A、生根组培苗温室瓶内适应性炼苗
生根瓶苗由组培室移到温室,其培养环境发生了变化,在温室内要逐步将瓶内的湿度降下来,并逐渐适应较强的光线;湿度的控制主要采用松口、去盖、敞口,光线强度的控制主要是遮阴;
温室内温度白天控制在23-28度,夜里不低于18度,相对湿度为50%-70%;光强的控制利用温室内的遮阴网和瓶上覆盖遮阴网的方式;前5天,光强控制在4000lx以下,瓶内湿度为100%;第6天,光强控制在6000lx内,将瓶口松开,瓶内湿度90%,第9天,将瓶盖反盖,光强控制在8000lx内,瓶内湿度在80-90%,第11天,去盖,光强控制在8000lx内,瓶内湿度在70-80%;第13天,洗苗;
B、基质的选择及消毒
基质的种类和配比决定了基质的持水量和通透性,二者的平衡是生根苗驯化成活的关键因素,不同的品种对基质的要求不同;基质的消毒:把基质密闭堆放,利用太阳光暴晒10-15天,里面温度要达到60度以上;消毒好的基质在定植苗木前浇透水后,放置到基质达到半干半湿即栽苗;
采用草炭土、珍珠岩和沙三种材料混合后作为基质,配比设置草炭土∶珍珠岩=1:1,草炭土∶珍珠岩∶沙=1∶1∶1,草炭土∶珍珠岩∶沙=2∶2∶1和草炭土∶珍珠岩∶沙=3∶2∶1,共4个处理;当黑果腺肋花楸的驯化基质为草炭土∶珍珠岩∶沙按2∶2∶1混合时,驯化成活率达85%;当基质中不加沙时,根系扎不实,有倒伏现象,驯化成活率为75%;当基质配比为草炭土∶珍珠岩∶沙=1∶1∶1时,驯化苗长势较弱,叶色偏黄,驯化成活率为70%;当基质配比为草炭土∶珍珠岩∶沙=3∶2∶1时,出现根部积水,驯化成活率为60%;
C、洗苗及定植
将生根瓶苗轻轻地从培养基中取出,先去掉大块的培养基,放入20度-25度的水中,然后小心地将根表面的培养基全部洗掉,注意尽量不要伤到根系;将洗好的苗用1000倍的多菌灵浸泡5分钟,放在水里定植;定植时要将温室的内遮阴打开,以免光照太强,注意不能窝根,也不能定植过深以免埋心;定植后及时喷水,以免苗木失水萎焉,然后搭建小拱棚,小拱棚用4mm粗的钢丝搭建,两边插入畦边,中间高50-60cm;小拱棚上覆盖0.8丝的塑料薄膜,并在薄膜上均匀地剪出透气孔;
D、定植后的管理
定植后第5天用2000倍的多菌灵进行喷施2次,基质在小拱棚内不用浇水,如过干最多浇一次,基质湿度不能过大,以免出现沤根;定植后第25天去棚膜,撤去拱棚后,组培苗进入温室的正常管理,温度利用天窗、侧窗、棉被控制,湿度的控制主要是利用喷雾,光照的控制方法主要是利用外遮阴和内遮阴系统;去棚后,根据基质水分的蒸发情况,用0.2%的复合肥浇苗,水肥同时使用;当苗生长到一定程度,有时出现只长粗不长高、生长点封顶的现象,用0.2%的尿素喷施;病虫害的防治:每10天喷杀菌药一次,2000倍多菌灵和2000倍甲霜灵交换使用;温室天窗和侧窗均装有防虫网,在温室内挂粘虫板。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201810417215.1A CN108575752B (zh) | 2018-05-04 | 2018-05-04 | 一种适用于规模化生产黑果腺肋花楸优质种苗的快速繁殖方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201810417215.1A CN108575752B (zh) | 2018-05-04 | 2018-05-04 | 一种适用于规模化生产黑果腺肋花楸优质种苗的快速繁殖方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN108575752A CN108575752A (zh) | 2018-09-28 |
CN108575752B true CN108575752B (zh) | 2019-10-18 |
Family
ID=63620730
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201810417215.1A Active CN108575752B (zh) | 2018-05-04 | 2018-05-04 | 一种适用于规模化生产黑果腺肋花楸优质种苗的快速繁殖方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN108575752B (zh) |
Families Citing this family (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN109463283A (zh) * | 2018-12-26 | 2019-03-15 | 武威茂瑞特色树种技术推广有限公司 | 黑果腺肋花楸嫩芽诱导培养方法 |
CN109548639B (zh) * | 2018-12-26 | 2021-05-04 | 旺盛生态环境股份有限公司 | 一种楸树组培苗移栽方法 |
CN114521402A (zh) * | 2022-03-07 | 2022-05-24 | 江苏农牧科技职业学院 | 一种黑果腺肋花楸扦插繁殖方法 |
Family Cites Families (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN106069790B (zh) * | 2016-08-24 | 2017-12-19 | 济南浩隆生物科技有限公司 | 一种黑果腺肋花楸开放式组织培养快速育苗方法 |
-
2018
- 2018-05-04 CN CN201810417215.1A patent/CN108575752B/zh active Active
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN108575752A (zh) | 2018-09-28 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN100418400C (zh) | 一种药用石蒜的规范化种植方法 | |
CN104472330A (zh) | 一种有机辣椒的基质栽培方法 | |
CN105145109B (zh) | 一种适于北方高寒地区的温室番茄越冬栽培方法 | |
CN105165512B (zh) | 台湾桤木控偏冠四季扦插快繁方法 | |
CN107343445A (zh) | 铁皮石斛松树林下仿野生栽培方法 | |
CN106576476B (zh) | 富硒甘蔗的组培种植方法 | |
CN105145104B (zh) | 利用白芨块茎进行分割繁殖育苗方法 | |
CN103004566A (zh) | 一种铁皮石斛种植方法 | |
CN107493940B (zh) | 一种番茄绿色栽培方法及植株残体再利用方法 | |
CN103733874A (zh) | 一种灵芝仿野生栽培方法 | |
CN105766385B (zh) | 一种提高马铃薯脱毒原原种产量的植保方法 | |
CN106258755B (zh) | 一种红橡树林下套种白芨的种植方法 | |
CN101707965A (zh) | 富硒有机大麦苗种植方法 | |
CN108575752B (zh) | 一种适用于规模化生产黑果腺肋花楸优质种苗的快速繁殖方法 | |
CN107125016A (zh) | 一种兰花的大棚规模化培育方法 | |
CN103329802A (zh) | 一种无公害草莓高产栽培方法 | |
CN103999665A (zh) | 一种用葵菜养殖烟蚜茧蜂的方法 | |
CN108077022A (zh) | 用于蓝莓炼苗的基质及蓝莓炼苗方法 | |
CN102960226A (zh) | 一种铁皮石斛组培苗驯化方法 | |
CN106489527B (zh) | 野生裂盖马鞍菌人工大田栽培方法 | |
CN106165640A (zh) | 一种25节点集约化育苗方法 | |
CN105900662A (zh) | 一种有机韭菜无土半水培的种植方法 | |
CN108925358A (zh) | 一种有机白牛茶树的种植方法 | |
CN103583196A (zh) | 一种温室薄皮甜瓜的栽培方法 | |
KR100356762B1 (ko) | 복합 미생물 배양체 제조방법 및 복합 미생물 배양체를이용한 비료 제조방법 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant | ||
CP03 | Change of name, title or address |
Address after: 046000 No. 188, Taihang North Road, Changzhi City, Shanxi Province (Building 8, science and technology enterprise accelerator) Patentee after: Shennong Zhihua Biotechnology (Shanxi) Co.,Ltd. Address before: 046204 No.95, East District, Chuangxin street, Houbao Town, Xiangyuan County, Changzhi City, Shanxi Province Patentee before: SHANXI LU'AN ZHIHUA AGRICULTURE AND FORESTRY TECHNOLOGY CO.,LTD. |
|
CP03 | Change of name, title or address |