CN105079044A - 一种含有冬虫夏草的软胶囊的制备方法 - Google Patents

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Abstract

发明涉及一种含有冬虫夏草的软胶囊的制备方法，属于药物制剂技术领域。步骤：以明胶、甘油和纯水为囊体原料，将甘油和纯水注入溶胶罐内，加热搅拌，再加入明胶，继续搅拌均匀后真空脱泡，制作得到囊体；将北冬虫夏草子实体粉碎，浸提，过滤后得到浸提液，再将浸提液经过减压浓缩、喷雾干燥后，得到提取物粉末；将海参用蒸汽蒸熟，再经过干燥之后，研磨成微粉；将提取物粉末、海参微粉、葡萄甘露糖、褐藻胶、聚乙二醇及甘油进行混合，过胶体磨，得到混合均匀的内容物；将内容物及囊体经过压丸、定型、洗丸、干燥、拣丸和分装步骤，制备得到含有冬虫夏草的软胶囊。

Description

一种含有冬虫夏草的软胶囊的制备方法
技术领域
本发明涉及一种含有冬虫夏草的软胶囊的制备方法，属于药物制剂技术领域。
背景技术
冬虫夏草作为一种传统的中药，为我国名贵补品之一，古今对虫草的药用价值有很高的评价，《本草从新》、《本草纲目拾遗》及《柳崖外编》、《柑园小识》、《本草用法研究》等称冬虫夏草“甘平无毒”，“保肺益肾，止血化痰”，“治诸虚百损”。现代医学研究表明，虫草中含有虫草酸、虫草素及各种氨基酸等营养成份，能促进人体的新陈代谢、提高免疫能力、抗疲劳、抗衰老等功效。
但是，常规的冬虫夏草在服用的时候存在着服用不方便的问题，需要通过改进制剂对其进行解决。
发明内容
本发明的目的是：提供一种含有冬虫夏草提取物的软胶囊，具有提高免疫能力、抗疲劳等功效，并且软胶囊性状均匀稳定。
技术方案是：
一种含有冬虫夏草的软胶囊的制备方法，包括如下步骤：
第1步，制作囊体：按重量份计，以明胶10～20份、甘油5～15份和纯水3～6份为囊体原料，将甘油和纯水注入溶胶罐内，加热搅拌，再加入明胶，继续搅拌均匀后真空脱泡，制作得到囊体；
第2步：冬虫夏草提取物的制作：按重量份计，将5～10份北冬虫夏草子实体粉碎成200～400目的颗粒，再将颗粒用水回流浸提，过滤后得到浸提液，再将浸提液经过减压浓缩、喷雾干燥后，得到提取物粉末；
第3步：海参微粉的制作：按重量份计，将5～10份海参用蒸汽蒸熟，再经过干燥之后，研磨成400～800目的海参微粉；
第4步：配制内容物：将提取物粉末、海参微粉、葡萄甘露糖1～2份、褐藻胶3～5份、聚乙二醇15～30份及甘油5～15份进行混合，过胶体磨，得到混合均匀的内容物；
第5步：将第4步得到的内容物及第1步得到囊体经过压丸、定型、洗丸、干燥、拣丸和分装步骤，制备得到含有冬虫夏草的软胶囊。
所述的第1步中，搅拌加热的温度是60～70℃。
所述的第2步中，浸提的温度是70℃～80℃，浸提时间为120～180分钟，浸提用水的加入重量是北冬虫夏草子实体重量的5～10倍。
所述的第4步中，聚乙二醇是指聚乙二醇400。
所述的第4步中，混合时的温度50～70℃，混合时间20～40min，过胶体磨的次数是1～3次。
有益效果：本发明制备得到的含有冬虫夏草提取物的软胶囊，具有提高免疫能力、抗疲劳等功效，并且软胶囊性状均匀稳定。同时，辅助以海参提取物可以有效地提高胶囊内容物的均匀性，褐藻胶的加入可以有效地避免内容物发生长期存放后分层的现象。
具体实施方式
实施例1
第1步，制作囊体：按重量份计，以明胶10份、甘油5份和纯水3份为囊体原料，将甘油和纯水注入溶胶罐内，60℃下加热搅拌，再加入明胶，继续搅拌均匀后真空脱泡，制作得到囊体；
第2步：冬虫夏草提取物的制作：按重量份计，将5份北冬虫夏草子实体粉碎成200～400目的颗粒，再将颗粒用水回流浸提，浸提的温度是70℃，浸提时间为120分钟，浸提用水的加入重量是北冬虫夏草子实体重量的5倍，过滤后得到浸提液，再将浸提液经过减压浓缩、喷雾干燥后，得到提取物粉末；
第3步：海参微粉的制作：按重量份计，将5份海参用蒸汽蒸熟，再经过干燥之后，研磨成400～800目的海参微粉；
第4步：配制内容物：将提取物粉末、海参微粉、葡萄甘露糖1份、褐藻胶3份、聚乙二醇40015份及甘油5份进行混合，混合时的温度50℃，混合时间20min，过胶体磨1次，得到混合均匀的内容物；
第5步：将第4步得到的内容物及第1步得到囊体经过压丸、定型、洗丸、干燥、拣丸和分装步骤，制备得到含有冬虫夏草的软胶囊。
实施例2
第1步，制作囊体：按重量份计，以明胶20份、甘油15份和纯水6份为囊体原料，将甘油和纯水注入溶胶罐内，70℃下加热搅拌，再加入明胶，继续搅拌均匀后真空脱泡，制作得到囊体；
第2步：冬虫夏草提取物的制作：按重量份计，将10份北冬虫夏草子实体粉碎成200～400目的颗粒，再将颗粒用水回流浸提，浸提的温度是80℃，浸提时间为180分钟，浸提用水的加入重量是北冬虫夏草子实体重量的10倍，过滤后得到浸提液，再将浸提液经过减压浓缩、喷雾干燥后，得到提取物粉末；
第3步：海参微粉的制作：按重量份计，将10份海参用蒸汽蒸熟，再经过干燥之后，研磨成400～800目的海参微粉；
第4步：配制内容物：将提取物粉末、海参微粉、葡萄甘露糖2份、褐藻胶5份、聚乙二醇40030份及甘油15份进行混合，混合时的温度70℃，混合时间40min，过胶体磨3次，得到混合均匀的内容物；
第5步：将第4步得到的内容物及第1步得到囊体经过压丸、定型、洗丸、干燥、拣丸和分装步骤，制备得到含有冬虫夏草的软胶囊。
实施例3
第1步，制作囊体：按重量份计，以明胶15份、甘油10份和纯水4份为囊体原料，将甘油和纯水注入溶胶罐内，65℃下加热搅拌，再加入明胶，继续搅拌均匀后真空脱泡，制作得到囊体；
第2步：冬虫夏草提取物的制作：按重量份计，将8份北冬虫夏草子实体粉碎成200～400目的颗粒，再将颗粒用水回流浸提，浸提的温度是75℃，浸提时间为160分钟，浸提用水的加入重量是北冬虫夏草子实体重量的8倍，过滤后得到浸提液，再将浸提液经过减压浓缩、喷雾干燥后，得到提取物粉末；
第3步：海参微粉的制作：按重量份计，将7份海参用蒸汽蒸熟，再经过干燥之后，研磨成400～800目的海参微粉；
第4步：配制内容物：将提取物粉末、海参微粉、葡萄甘露糖2份、褐藻胶4份、聚乙二醇40020份及甘油10份进行混合，混合时的温度60℃，混合时间30min，过胶体磨2次，得到混合均匀的内容物；
第5步：将第4步得到的内容物及第1步得到囊体经过压丸、定型、洗丸、干燥、拣丸和分装步骤，制备得到含有冬虫夏草的软胶囊。
对照例1
与实施例3的区别在于：海参采用的是在水中煮熟而不是蒸熟。
第1步，制作囊体：按重量份计，以明胶15份、甘油10份和纯水4份为囊体原料，将甘油和纯水注入溶胶罐内，65℃下加热搅拌，再加入明胶，继续搅拌均匀后真空脱泡，制作得到囊体；
第2步：冬虫夏草提取物的制作：按重量份计，将8份北冬虫夏草子实体粉碎成200～400目的颗粒，再将颗粒用水回流浸提，浸提的温度是75℃，浸提时间为160分钟，浸提用水的加入重量是北冬虫夏草子实体重量的8倍，过滤后得到浸提液，再将浸提液经过减压浓缩、喷雾干燥后，得到提取物粉末；
第3步：海参微粉的制作：按重量份计，将7份海参加入50份的水中，煮熟之后，取出，再经过干燥之后，研磨成400～800目的海参微粉；
第4步：配制内容物：将提取物粉末、海参微粉、葡萄甘露糖2份、褐藻胶4份、聚乙二醇40020份及甘油10份进行混合，混合时的温度60℃，混合时间30min，过胶体磨2次，得到混合均匀的内容物；
第5步：将第4步得到的内容物及第1步得到囊体经过压丸、定型、洗丸、干燥、拣丸和分装步骤，制备得到含有冬虫夏草的软胶囊。
对照例2
与实施例3的区别在于：未加入褐藻胶。
第1步，制作囊体：按重量份计，以明胶15份、甘油10份和纯水4份为囊体原料，将甘油和纯水注入溶胶罐内，65℃下加热搅拌，再加入明胶，继续搅拌均匀后真空脱泡，制作得到囊体；
第2步：冬虫夏草提取物的制作：按重量份计，将8份北冬虫夏草子实体粉碎成200～400目的颗粒，再将颗粒用水回流浸提，浸提的温度是75℃，浸提时间为160分钟，浸提用水的加入重量是北冬虫夏草子实体重量的8倍，过滤后得到浸提液，再将浸提液经过减压浓缩、喷雾干燥后，得到提取物粉末；
第3步：海参微粉的制作：按重量份计，将7份海参用蒸汽蒸熟，再经过干燥之后，研磨成400～800目的海参微粉；
第4步：配制内容物：将提取物粉末、海参微粉、葡萄甘露糖2份、聚乙二醇40020份及甘油10份进行混合，混合时的温度60℃，混合时间30min，过胶体磨2次，得到混合均匀的内容物；
第5步：将第4步得到的内容物及第1步得到囊体经过压丸、定型、洗丸、干燥、拣丸和分装步骤，制备得到含有冬虫夏草的软胶囊。
对本实施例3制备的含有冬虫夏草的软胶囊的增强免疫力功能进行检测。
1、样品：本实施例第4步制备的冬虫夏草软胶囊的内容物
2、试验动物及环境：SPF昆明种小白鼠，许可证号：SCXK(沪)2002-0010，体重18～22克，雌性100只，雄性100只，分为四个免疫大组，每大组50只，每个免疫大组的小鼠分为水对照组、溶剂对照组、低、中、高剂量组，各10只。免疫一组(雌性小鼠50只)用于迟发型变态反应(DTH)实验、血清溶血素的测定、抗体生成细胞数的测定；免疫二组(雄性小鼠50只)用于小鼠碳廓清实验；免疫三组(雌性小鼠50只)用于小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验；免疫四组(雄性小鼠50只)用于小鼠淋巴细胞转化实验和小鼠NK细胞活性实验测定。实验环境温度22±2℃，相对湿度50％±10％。
3、剂量设计与受试物给予方式：本发明的冬虫夏草软胶囊对人体的推荐剂量为每日1.0g内容物/60kg体重，相当于0.0167g/kg.BW，按相当于人体推荐剂量的5、10、30倍剂量确定小鼠的低中高三种剂量，本实施例中对小鼠的剂量分别设为0.083g内容物/kg.BW，0.167g内容物/kg.BW，0.50g内容物/kg.BW三种，经口每日一次灌胃给予小鼠受试物，灌胃体积按10ml/kg.BW。灌胃前用玉米油配制受试物，低、中、高剂量组中受试物的浓度分别为8.33g/L、16.667g/L及50.00g/L，阴性对照组以等体积的蒸馏水代替受试物，溶剂对照组以等体积的玉米油代替受试物，30天后测试各项免疫指标。小鼠以远交系小鼠专用饲料喂饲。
4、实验方法
4.1脏器体重比值测定
小鼠称重后颈椎脱臼处死，取其胸腺、脾脏，去尽筋膜，用滤纸吸干脏器表面血污并称重，计算胸腺体重比值与脾脏体重比值。所得数据用PEMS统计软件进行方差分析。
4.2抗体生成细胞测定(Jerne改良玻片法)
动物连续给样30天后，将脱纤维绵阳红细胞免疫5天后，动物颈椎脱臼处死，取出脾脏，制成脾细胞悬液，调整细胞浓度为5×106个/ml。将表层培养基(1g琼脂糖加双蒸水100ml)加热溶解后，放入45℃水浴保温，与等量pH7.2-7.4、2倍浓度的Hanks液混合，分装小试管，每管0.5ml，再向管内加入50μl10％SRBC，20μl脾细胞悬液，迅速混匀，倾倒于已刷琼脂薄层的6cm平皿上，继续温育1.5h后，计数溶血空斑数。结果用方差分析进行统计。若受试物组淋巴细胞的增殖能力高于对照组，且差异有显著性，可判定该受试物有增强小鼠抗体细胞数的作用。
4.3小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验(半体内法)：
动物连续给样30天后，每鼠腹腔注射20％鸡红细胞悬液1ml，间隔30分钟，颈椎脱臼处死，固定在鼠板上，剪开腹壁皮肤，注射生理盐水2ml，转动鼠板1分钟，吸出腹腔洗液1ml，分滴于2片玻璃片上，37℃孵箱湿孵30分钟，用生理盐水漂洗，晾干，以1∶1丙酮甲醇溶液固定，4％Giemsa-磷酸缓冲液染色3分钟，再用蒸馏水漂洗晾干，用油镜镜检，计算吞噬百分比和吞噬指数。其中，吞噬率(％)＝吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数/计数的巨噬细胞数×100；
吞噬指数＝被吞噬的鸡红细胞总数/计数的巨噬细胞数。
所得结果的吞噬率按X=sin-1(P-0.5)进行换算，式中P为吞噬百分率，用小数表示，若受试物的吞噬率或吞噬指数明显高于对照组，且差异有显著性，可判定受试物有提高巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力的作用。
4.4小鼠NK细胞活性测定：
动物连续给样30天后，颈椎脱臼处死，取脾脏，制成脾细胞悬液(效应细胞)，取传代后24hYAC-1细胞加1640完全培养液，调整细胞浓度为4×105个/ml(靶细胞)，取靶细胞和效应细胞各100μl效靶比(50∶1)，加入U形96孔培养板，靶细胞自然释放孔加靶细胞和培养液各100μl，最大释放孔加靶细胞和1％NP40各100μl，上述各项均设有三个复孔，与37℃、5％二氧化碳培养箱中培养4小时，每孔吸取上清液100μl置于平底96孔培养板中，同时加入LDH基质液100μl，反应3min，每孔加入1mol/l的HCL30μl终止，用酶标仪在490mm处测定A值。按以下公式计算NK细胞活性：
NK细胞活性％＝(反应孔A-自然释放孔A)/(最大释放孔A-自然释放孔A)×100；
NK细胞活性需按X=sin-1(P-0.5)进行数据转换，式中P为NK细胞活性，用小数表示，若受试物的吞噬率或吞噬指数明显高于对照组，且差异有显著性，可判定受试物有提高小鼠NK细胞活性的作用。
冬虫夏草软胶囊对小鼠脏器体重比值的影响：见表1、表2,
表1冬虫夏草软胶囊对小鼠脾脏体重比值的影响（x±SD）
组别 动物数（只） 脾脏体重比值（mg/g） P
水对照组 10 6.15±1.22
溶剂对照组 10 6.81±1.61 0.267
低剂量组 10 6.68±0.75 0.125
中剂量组 10 6.78±1.03 0.118
高剂量组 10 6.71±1.17 0.224
从表1可以看出不同的剂量与对照组相比，小鼠的脾脏体重比值无显著性差异，因此冬虫夏草软胶囊对动物的脾脏体重比值没有明显影响。
表2冬虫夏草软胶囊对小鼠胸腺体重比值的影响（x±SD）
组别 动物数（只） 脾脏体重比值（mg/g） P
水对照组 10 3.44±0.42
溶剂对照组 10 3.42±0.71 0.925
低剂量组 10 3.45±0.58 0.814
中剂量组 10 3.32±0.57 0.525
高剂量组 10 6.28±0.67 0.218
从表1可以看出不同的剂量与对照组相比，小鼠的脾脏体重比值无显著性差异，因此冬虫夏草软胶囊对动物的胸腺体重比值没有明显影响。
冬虫夏草软胶囊对小鼠抗体生成细胞数的影响，见表3。
表3冬虫夏草软胶囊对小鼠抗体生成细胞数的影响（x±SD）
组别 动物数（只） 溶血空斑数（×103个/全脾） P
水对照组 10 24.22±15.47
溶剂对照组 10 35.25±16.58 0.135
低剂量组 10 45.22±16.11 0.025
中剂量组 10 55.57±23.45 0.005
高剂量组 10 60.44±25.66 0.005
可见，水对照组与低剂量组、中剂量组及高剂量组对溶血空斑数的影响具有明显的差异，认为冬虫夏草软胶囊具有增加小鼠抗体生成细胞数的能力。
冬虫夏草软胶囊对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力的影响，见表4、表5。
表4冬虫夏草软胶囊对小鼠腹腔巨噬细胞鸡红细胞吞噬率的影响（x±SD）
组别 动物数（只） 吞噬率平方根反正弦转化值A P
水对照组 10 0.41±0.14
溶剂对照组 10 0.42±0.14 0.655
低剂量组 10 0.558±0.29 0.158
中剂量组 10 0.668±0.25 0.021
高剂量组 10 0.95±0.27 0.0003
表5冬虫夏草软胶囊对小鼠腹腔巨噬细胞鸡红细胞吞噬指数的影响（x±SD）
组别 动物数（只） 吞噬指数 P
水对照组 10 0.44±0.22
溶剂对照组 10 0.46±0.21 0.587
低剂量组 10 0.874±0.43 0.198
中剂量组 10 1.427±0.52 0.009
高剂量组 10 2.207±0.62 0.0003
由表4及表5可见，水对照组、中剂量组及高剂量组对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力之间具有显著性差异，认为冬虫夏草软胶囊具有增加小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力。
冬虫夏草软胶囊对小鼠NK细胞活性的影响，见表6。
表6冬虫夏草软胶囊对小鼠NK细胞活性的影响
组别 动物数（只） NK细胞活性 % NK细胞活性平方根正弦转化值A P
水对照组 10 25.77±3.58 0.52±0.04
溶剂对照组 10 27.38±5.52 0.51±0.05 0.587
低剂量组 10 30.22±8.11 0.58±0.12 0.198
中剂量组 10 35.11±9.51 0.68±0.15 0.009
高剂量组 10 52.07±15.69 0.81±0.28 0.0003
由表6可见，水对照组与高剂量组对小鼠NK细胞活性之间具有显著性差异，认为冬虫夏草软胶囊可增强小鼠NK细胞活性。
内容物稳定性考察
将内容物放置5天，观察内容物是否产生分层现象。结果见表7。
表7内容物稳定性试验
均一性 流动性 稳定性 考察（5天）
实施例1 均一 流动性好 微粘稠 不分层
实施例2 均一 流动性好 微粘稠 不分层
实施例3 均一 流动性好 微粘稠 不分层
对照例1 不均一 流动性差 粘稠 分层
对照例2 均一 流动性差 粘稠 分层
从表中可以看出，本发明制备得到冬虫夏草软胶囊具有良好的均匀性；实施例3和对照例1相比，是将海参以蒸熟的方式加工，保留了海参中的胶体物质，可以有效地使胶囊具有良好的流动性，而如果采用煮熟的方式，会使海参中的胶状物流失，导致了软胶囊的内容物的均匀性还好实施例3和对照例2相比，加入了褐藻胶，使胶囊经过放置之后，不会出现分层的问题。

Claims (5)

1.一种含有冬虫夏草的软胶囊的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
第1步，制作囊体：按重量份计，以明胶10～20份、甘油5～15份和纯水3～6份为囊体原料，将甘油和纯水注入溶胶罐内，加热搅拌，再加入明胶，继续搅拌均匀后真空脱泡，制作得到囊体；
第2步：冬虫夏草提取物的制作：按重量份计，将5～10份北冬虫夏草子实体粉碎成200～400目的颗粒，再将颗粒用水回流浸提，过滤后得到浸提液，再将浸提液经过减压浓缩、喷雾干燥后，得到提取物粉末；
第3步：海参微粉的制作：按重量份计，将5～10份海参用蒸汽蒸熟，再经过干燥之后，研磨成400～800目的海参微粉；
第4步：配制内容物：将提取物粉末、海参微粉、葡萄甘露糖1～2份、褐藻胶3～5份、聚乙二醇15～30份及甘油5～15份进行混合，过胶体磨，得到混合均匀的内容物；
第5步：将第4步得到的内容物及第1步得到囊体经过压丸、定型、洗丸、干燥、拣丸和分装步骤，制备得到含有冬虫夏草的软胶囊。
2.根据权利要求1所述的含有冬虫夏草的软胶囊的制备方法，其特征在于：所述的第1步中，搅拌加热的温度是60～70℃。
3.根据权利要求1所述的含有冬虫夏草的软胶囊的制备方法，其特征在于：所述的第2步中，浸提的温度是70℃～80℃，浸提时间为120～180分钟，浸提用水的加入重量是北冬虫夏草子实体重量的5～10倍。
4.根据权利要求1所述的含有冬虫夏草的软胶囊的制备方法，其特征在于：所述的第4步中，聚乙二醇是指聚乙二醇400。
5.根据权利要求1所述的含有冬虫夏草的软胶囊的制备方法，其特征在于：所述的第4步中，混合时的温度50～70℃，混合时间20～40min，过胶体磨的次数是1～3次。
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