CN1050719A - 表鬼臼毒素阿卓糖苷衍生物的制备方法 - Google Patents

表鬼臼毒素阿卓糖苷衍生物的制备方法 Download PDF

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星英秋
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Abstract

本发明提供了抗肿瘤剂4′-脱甲基表鬼臼毒素 糖苷，其特征在于该糖苷部分是阿卓糖。

Description

本发明涉及4′-脱甲基表鬼臼毒素糖苷，它们作为抗肿瘤剂的应用，以及含有这些化合物的药用组合物。
式Ⅰ4′-脱甲基表鬼臼毒素糖苷是由天然存在的木质素，鬼臼毒素Ⅱ衍生的抗肿瘤剂，
Figure 901073962_IMG6
授予Keller-Juslen等人的美国专利3，524，844介绍了它们的合成方法。在式Ⅰ化合物中，已证实鬼臼乙叉苷（Ⅰa）和鬼臼噻吩苷（Ⅰb）可用作临床抗肿瘤剂，用于治疗下述各种肿瘤：小细胞肺癌、卵巢癌、睾丸癌、乳腺癌、膀胱癌、脑癌、非淋巴细胞白血病以及何杰金氏病。
已经制得了许多鬼臼乙叉苷和鬼臼噻吩苷的同系物、类似物和衍生物，并研究了它们的抗肿瘤活性。除个别几个化合物外，上述化合物均以带有D-葡萄糖部分为特征。
在J.Med.Chem.1971（10）936-40中报导了三个D-吡喃半乳糖苷，而在Chem.Lett.，1987，799-802中介绍了几个L-吡喃葡萄糖苷。
美国专利4，547，567和4，716，211中介绍了其中一个糖羟基被氨基或烷氨基置换的鬼臼乙叉苷的类似物。
日本公开特许63-192793中介绍了鬼臼乙叉苷的水溶性药物前体，鬼臼乙叉苷4′-磷酸酯。
系列号为240971的未审定普通登记专利申请介绍了（并要求保护）表鬼臼毒素糖苷，其中一个或两个糖羟基被氟置换。
已经报导了其中将葡萄糖部分的羟基酰化并保护酚基的4′-脱甲基表鬼臼毒素糖苷，这类化合物用作为制备相应的4′-脱甲基表鬼臼毒素例如式Ⅰ化合物的中间体。
加拿大专利956，939公开了式Ⅲ的化合物，
Figure 901073962_IMG7
式中R1是C1-5烷基;R2是乙酰基或甲酰基;和R3是苯基或取代苯基;该专利提及但未给出实施例的可能的取代苯基是对硝基苯基和对甲氧基苯基。
美国专利4，564，675公开了式（Ⅳ）的化合物
式中R是-C（O）CH2X，X是卤原子。
欧洲专利申请162，701公开了式（Ⅴ）的化合物，
Figure 901073962_IMG9
式中R1和R2可以相同或不同，并各自代表-C（O）CHX2或-C（O）CX3，其中X是卤原子。
日本公开特许58-225，096（Derwent  Abst.No84-0324268/06）和58-219，196（Derwent  Abst.No.84-027495/05）分别公开了式（Ⅵ）和式（Ⅶ）的化合物
Figure 901073962_IMG10
式中A代表-CO2-CH2-C（H）m（X）n，其中X是卤原子，m是0至2，n是1至3，m+n＝3，Ac是酰基。
欧洲专利申请226，202公开了用于合成式（Ⅷ）鬼臼乙叉苷的中间体，
Figure 901073962_IMG11
式中A代表乙酰基。
J.Pharm.Biomed.Anal.，1987  5（1）：11-20中报道了式Ⅸ鬼臼乙叉苷的单-半琥珀酸酯衍生物
Figure 901073962_IMG12
式中R1和R2之一是H，另一个是-CO（CH2）2CO2H。这些化合物可以用作为将鬼臼乙叉苷与牛血清清蛋白结合的一种物质。
本发明提供了下式Ⅹ的抗肿瘤化合物
Figure 901073962_IMG13
式中R3选自（C1-C10）烷基，苯基，呋喃基，和2-噻吩基;式中R4和R5之一选自羟基，C1-5烷氧基和C1-5酰氧基;而另一个则选自H，羟基，C1-5烷氧基，C1-5酰氧基，F，叠氮基和氨基;或者R4和R5之一是F，而另一个则选自叠氮基和氨基;R6选自氢，P（O）（OH）2及其碱金属或碱土金属盐。
图1至图6说明了本发明化合物的合成，其中，图2中的R相当于式Ⅹ中的R4，图6中的R1相当于式Ⅹ中的R5。
本发明化合物的主要特征是用阿卓糖置换了鬼臼乙叉苷的葡萄糖部分。
正如图1所示，该合成通过化合物4，苄基2，3-脱水-4，6-O-亚乙基-α-D-别吡喃糖苷来完成，该化合物可由苄基α-D-吡喃葡糖苷或相应的（C1-C10）烷基、苯基、呋喃基或2-噻吩基化合物制得，方法是先进行乙缩醛反应然后进行甲苯磺酰化，再在低级烷醇溶剂中与碱金属低级醇盐反应形成环氧化物4，而所有原料均为已知化合物，或者可通过已知反应制得。
可将图1中的化合物1至7看作起始原料。图2中的化合物既属于本发明的范围，也可以是用于制备这类化合物的新中间体。
如图中所示，用于合成本发明化合物的起始化合物是已知化合物苄基α-D-吡喃葡糖苷，它在酸性催化剂存在下用乙醛进行亚乙基化反应。该反应在下列反应惰性有机溶剂中进行;例如二氯甲烷、二氯乙烷、乙腈、四氢呋喃或它们的混合物。合适的酸性催化剂包括盐酸、硫酸、甲苯磺酸或路易斯酸，例如氯化锌。反应温度可为约10℃至50℃，最好是室温，反应时间约为1至4天。
可以通过在无水有机溶剂中，在用于中和所生成的HCl的含氮碱存在下与对甲苯磺酰氯反应进行甲苯磺酰化。该反应最好在约20℃至40℃（合适的是在环境温度）下在无水吡啶中进行约3至7天。
通过在低级烷醇中与碱金属醇盐反应，最好是在甲醇或乙醇中与甲醇或乙醇钠或钾反应，将经过甲苯磺酰化的化合物转化为化合物4。可使用反应惰性的有机溶剂例如酯或醚。另外，要使用过量的烷醇。反应时间是约16至30小时，反应温度是约20℃至40℃。
通过反应惰性的有机溶剂（最好是醚例如四氢呋喃或二噁烷）中，在约60℃至120℃下加热约1至3天，将环氧环打开，形成2′-羟基化合物。
在含氮碱存在下用酰化剂（最好是酸酐例如乙酐）进行酰化反应，形成例如6a类化合物。无水吡啶是优选的碱，一般过量使用该无水吡啶以使它也用作溶剂。反应温度约为20℃至40℃，最好是环境温度。反应时间是约30分钟至3小时。
一般在钯催化剂（最好是载于碳或硫酸钡上的钯）存在下，用氢进行氢解反应。一般采用包含低级烷醇和低级羧酸的混合溶剂。优选者是与乙酸混合的甲醇或乙醇。尽管可以采用加压，但是一般在常压下进行该反应，反应温度约为20℃至40℃，反应时间约为1至3天。采用这一方法可以制得图1中所示的化合物7a，b和d。
按照Wright等人在J.Org.Chem.，34，2632（1969）中介绍的方法，通过将普通中间体4与碱金属氢氟酸盐反应，可以制得氟化物5b。可在摩尔过量的氟化钾存在下，在高沸点反应惰性的有机溶剂（最好是有机多元醇，例如乙二醇）中进行该反应。反应时间约为1.5至3小时，反应温度是约175℃至300℃，优选的反应时间是约30分钟至1小时。
按前述方法将经过氟化的化合物5b酰化，形成6b，然后通过在钯-炭存在下用例如氢进行氢化而脱去苄基，形成异构体7b的混合物。
在反应惰性的无水有机溶剂（例如二甲基甲酰胺、二甲亚砜或四氢呋喃）中与碱金属叠氮化物（最好是叠氮化钠）反应，可以将化合物4转化为叠氮化物5c，反应温度是约90℃至125℃，反应时间是约1至3天。
按前述方法将该化合物酰化，形成化合物6c。
显然，将6c通过氢化的脱苄基不能得到纯产物。因此，采用Tetrahedron  Letters，28，3505（1987）中所述的Rashimoto方法制备3-O-乙酰基-2-叠氮基-2-脱氧-4，6-O-亚乙基α和β-D-阿卓吡喃糖，7c。
在该方法中，已脱苄基的化合物先在卤代有机溶剂（如四氯化碳或氯仿或它们的混合物）中与摩尔过量的N-溴代琥珀酰亚胺和1，2-环氧丙烷反应，反应时间是约1至3小时，反应温度是约75℃至100℃。然后，在与水混溶的反应惰性的充氧的有机溶剂（最好是含水丙酮）中，使所得产物与摩尔过量的Hg（ON）2反应，反应温度是约20℃至40℃，反应时间是约30分钟至2小时。
通过在无水有机溶剂（如醚、二噁烷或四氢呋喃）中例如用硼氢化钠或氢化铝锂还原化合物4，可以制得化合物5d，反应温度是约30℃至75℃，反应时间是1至3小时。
通过5d与乙酐的乙酰化反应，可以制得酰化的产物6d，然后再采用前述方法进行氢化，形成化合物7d。
分离出的所有阿卓糖衍生物（7a至7d）均为α和β端基异构体的混合物。
将选出的阿卓糖衍生物7a至7d（按前述方法制得）与4′-苄氧羰基-4′-脱甲基表鬼臼毒素，化合物8，或者与其中保护了酚基的类似化合物缩合，制得本发明的表鬼臼毒素。
在反应惰性的有机溶剂（如二氯甲烷或二氯乙烷）中于0℃以下，在催化剂（如三氟化硼-乙醚配合物）存在下进行该缩合反应，该反应时间约为10分钟至5小时，最好是约30分钟至1.5小时。通过在反应混合物中加入叔胺（如吡啶或三乙胺）可以使与三氟化硼-乙醚配合物进行的该反应骤停。选择何种酚基保护基并不受到具体的限制，可以包括形成酰基衍生物，例如酯类、以及碳酸酯类、醚类、缩醛等。采用常用的去保护法可除去这些保护基，所选择的方法取决于所采用的保护基的性质。可以提及的一般方法包括氢化，酸或碱催化的水解，在金属催化剂如锌粉或乙酸锌存在下的醇解。
在图2所示的方法中，苯酚保护基是苄氧羰基。通过采用前述方法的氢化作用，最好是采用钯-炭催化由氢进行的氢化反应除去该保护基。
显而易见的是将阿卓糖衍生物7a至7d的端基异构体的混合物苷化，所得到的主要是β-端基异构体。据认为这一高度的立体选择性是与3-乙酰氧基和1-羟基间的1，3-双轴向立体化学作用有关的，这一作用妨碍了α-异构体的苷化，而不影响β-异构体。
在热乙醇中用乙酸锌使化合物10a脱乙酰基，得到起始化合物的混合物，即，2″-O-乙酰基衍生物13、3″-O-乙酰基衍生物12和完全脱乙酰基的化合物11a，该混合物可经硅胶层析进行分离。
由化合物10b至10d在烷醇中与乙酸锌反应，可以同样制得化合物11b至11d。
叠氮化合物10c和11c经长时间和/或在乙酸中的催化还原将2″-叠氮基转化为氨基，并分别得到化合物10e，4′-脱甲基-4-O-（3-乙酰基-2-氨基-2-脱氧-4，6-O-亚乙基-β-D-吡喃阿卓糖基）表鬼臼毒素，和14，4′-脱甲基-4-O-（2-氨基-2-脱氧-4，6-O-亚乙基-β-D-吡喃阿卓糖基）表鬼臼毒素。按前述方法在钯-炭催化下用氢进行氢化反应。
通过将脱保护基的苯酚与磷酰化剂（如三氯氧化磷或焦磷酸，最好是前者）反应，形成本发明的4″-磷酰化的化合物。与氯氧化物的反应类似于甲苯磺酰化反应。在含氮碱（用于中和所产生的酸）存在下，于反应惰性的有机溶剂中进行上述反应。所采用的叔胺最好包括吡啶、二烷基芳胺和三烷基胺。图3说明了将化合物11b转化为化合物15，磷酸二钠盐。
在约0℃至20℃进行该反应，反应时间约为5至30分钟，如果需要，可以分离酸，但是，最好不经分离就地直接将它转化为盐，方法是加入金属碱，合适的是加入碱金属碳酸盐，碳酸氢盐或氢氧化物。最好是碳酸氢盐。
按图4所示，制得鬼臼乙叉苷的2″和/或3″-O-烷基类似物，例如，甲基类似物，化合物22、23和24。
在第一步合成反应中，于环境温度（即约25～40℃）下，在极性溶剂〔如二甲亚砜（DMSO）或二甲基甲酰胺（DMF）〕中，采用碱金属氢氧化物（如氢氧化钠）和烷基碘（如甲基碘）的混合物，将化合物5a，苄基4，6-O-亚乙基-α-D-吡喃阿卓糖苷烷基化。反应时间是约15至60分钟。可使用稍摩尔过量的氢氧化物和碘化物，但是一般等摩尔量就足够了。
如果采用甲基碘，得到下述异构体的混合物：苄基-2，3-二-O-甲基-4，6-O-亚乙基-α-D-吡喃阿卓糖苷，化合物16;苄基4，6-O-亚乙基-2-O-甲基-α-D-吡喃阿卓糖苷，化合物17;和苄基4，6-O-亚乙基-3-O-甲基-α-D-吡喃阿卓糖苷，化合物18。这些异构体可按实施例所述方法进行层析分离。
按前文所述实施例中说明和图4所示方法，先将化合物16还原，然后与4′-脱甲基-4′-苄氧羰基表鬼臼毒素缩合，再进行第二次还原，即可将化合物16转化为化合物22，4′-脱甲基-4-O-（2，3-二-O-甲基-4，6-O-亚乙基-β-D-吡喃阿卓糖基）表鬼臼毒素。
按照图4所示方法，即，乙酰化、还原、缩合、还原和与乙酸锌反应，制得化合物23，4′-脱甲基-4-O-（4，6-O-亚乙基-2-O-甲基-β-D-吡喃阿卓糖）表鬼臼毒素。上文和实施例中介绍和说明了所有的方法。
按照图4所示的系列反应，由化合物18制得了化合物24，4′-脱甲基-4-O-（2-O-乙酰基-4，6-O-亚乙基-3-O-甲基-β-D-吡喃阿卓糖基）表鬼臼毒素。前文和实施例中介绍和说明了该反应。它们包括乙酰化、还原、缩合、还原和最后一步与乙酸锌反应。
图5描述了本发明的另外两个活性化合物的制备方法，即，4′-脱甲基-4-O-（3-叠氮基-4，6-O-亚乙基-2-氟-β-D-吡喃阿卓糖基）表鬼臼毒素和4′-脱甲基-4-O-（3-氨基-4，6-O-亚乙基-2-氟-β-D-吡喃阿卓糖基）表鬼臼毒素。
由已知化合物3-叠氮基-2，3-二脱氧-4，6-O-亚乙基-2-氟-α-D-吡喃阿卓糖制得了上述化合物。参见：S.Castillon，等人的J.Org.Chem.，50，4913（1985）。附图和实施例中介绍了这些反应。除将化合物28还原成化合物30外，一般按前述方法进行上述反应。
对于制备化合物30，用于氢化反应的催化剂是氧化铂而不是钯-炭。一般在环境温度（即20℃至45℃）下，采用摩尔过量的氢在酸性溶剂（如乙酸∶水）中进行该还原反应。
从附图及实施例中可以看出，采用氧化铂催化剂还原化合物28时，不仅能将叠氮基还原，而且还可以除去苄氧羰基。
图6的顺序类似于图1所示的顺序〔它表示将图1中的化合物4转化为化合物5（a-d）、6（a-d）和7（a-d）〕，其不同点是在图6中，化合物4被苄基2，3-脱水-α-吡喃甘露糖苷-4，6-O-环缩醛所代替，该化合物按Robertson，G.J.等人（J.Chem.Soc.，1935 1193-1201）的方法制得。相应的（C1-10）烷基、苯基、呋喃基和2-噻吩基化合物是已知的或者可采用已知反应方法制得。
除按类似于图4所述的方法进行甲基化反应外，采用类似于图1反应的方法进行图6的反应。按图2和前述方法进行制备本发明产物的后续反应。
采用类似于图2、3和4所述的方法，由图6的化合物制备本发明的其他产物。实施例均对这些化合物作了说明。
采用本技术领域熟知的方法中的任一方法分离和纯化按上述方法制得的化合物，所述分离和纯化方法包括例如提取、沉淀、结晶和层析，实施例中对这些方法及其他一些方法均有描述。
根据对鼠移植P388白细胞的对抗作用，评价了有代表性的本发明化合物的抗肿瘤活性。给五周龄雌性CDF1鼠腹膜内接种0.4毫升含有106淋巴白细胞P388的稀释腹水流体。以1天单一剂量腹膜内给药试验化合物，观察动物45天。经试验得知，受治动物平均存活时间（MST）的增长百分率高于未经处理的对照动物，并以%T/C表示。%T/C值为125或大于125的化合物即被认为具有明显的抗肿瘤活性。表Ⅰ给出了体内评价结果，即，最大%T/C（在括号内同时列出获得最大效应的剂量），和最小有效剂量（MED），后者表示获得%T/C为125或大于125的最小剂量。
表Ⅰ.对P388白细胞的抗肿瘤活性
化合物  MST的最大%T/C（剂量，mg/kg/天）  MED（mg/kg/天）
鬼臼乙叉苷  288（120）  0.3
10a  170（120）  30
10b  152（60）  10
10c  150（120）  30
10d  135（120）  120
11a  220（30）  0.3
11b  181（60）  3
11c  139（120）  60
11d  145（120）  30
12  190（30）  0.3
13  160（120）  10
14  176（10）  0.3
15  185（120）  30
22  160（120）  10
23  170（120）  30
24  180（60）  1
29  133（30）  30
30  152（30）  30
因此，本发明提供了抑制哺乳动物肿瘤的方法，该方法包括给患肿瘤的宿主服用抑制肿瘤有效量的式Ⅲ抗肿瘤化合物。为此目的，采用惯用途径服用该药物，所谓惯用途径包括（但不限于）静脉给药、肌肉给药、肿瘤内给药、动脉给药、淋巴内给药和口服给药。
本发明的另一方面提供了包含式Ⅲ化合物和可药用载体的药用组合物。该抗肿瘤组合物可以采用适用于所需给药途径的任何药物剂型。这些组合物的实例包括用于口服的固体组合物，例如片剂、胶囊剂、丸剂、粉剂和颗粒剂，用于口服的液体组合物，例如溶液、悬浮液、糖浆或酏剂，以及用于胃肠道外给药的制剂，例如无菌溶液、悬浮液或乳液。也可以将它们制成无菌固体组合物，在使用前可将该组合物即刻溶解在无菌水、生理盐水或某些其他无菌注射用介质中。
本技术领域技术熟练人员可很容易确定给一定的哺乳动物宿主服药的最佳剂量和给药方案。当然，一般所采用的成人剂量应根据下述因素变化：所配制的具体组合物、所使用的具体化合物、施用方式以及所治疗的具体部位、宿主和疾病。应当加以考虑的可修正药物作用并为本领域技术熟练的人员所熟知的许多因素包括：年龄、体重、性别、饮食、给药时间、给药途径、排泄速率、患者症状、药物配伍、反应敏感性和疾病的严重程度。
下列实施例仅对本发明作进一步解释而不对本发明范围构成任何限制，附属于本申请书的权利要求书对本发明的范围作了限定。
起始原料的制备
苄基4，6-O-亚乙基-α-D-吡喃葡糖苷（2）
将2滴浓硫酸加到苄基α-D-吡喃葡糖苷（1）（22g，0.0815mol）和乙醛（20ml）于无水二氯甲烷（250ml）中的悬浮液中，该混合物于室温下剧烈搅拌3天。该反应混合物依次用碳酸氢钠水溶液、水和盐水洗涤，用MgSO4干燥。除去溶剂后，将油状残留物在硅胶柱（Wako gel C-200，250g）上进行层析。该柱先用氯仿，再用氯仿-甲醇（50∶1-25∶1）洗脱。收集含有所需产物的级分，蒸发至干，得到油状残留物，用异丙醚研制，得到19.22g（80%）题目化合物（2）。
MP 110-118℃.IRνmax（KBr）cm-11173，1160，1150，1127.1H NMR（CDCl3）δ1.37（3H，d，J＝5.13Hz，CH-CH3），4.72（1H，q，J＝5.13Hz，CH-CH3），4.98（1H，d，J＝4.03 Hz，H-1）.
元素分析计算值 C15H20O6：C60.80，H6.80
实验值：C60.90，H6.92.
苄基2，3-二（O-对甲苯磺酰基）-4，6-O-亚乙基-α-D-吡喃葡糖苷（3）
将对甲苯磺酰氯（76g，0.4mol）加到化合物2（29g，0.1mol）和4-二甲氨基吡啶（24.4g，0.2mol）的无水吡啶（300ml）溶液中，将该混合物于室温下搅拌3天。在该混合物中再加入38g（0.2mol）对甲苯磺酰氯，并将该混合物再搅拌4天。减压除去大部分溶剂。将残留物倒入1升水中，用1升二氯甲烷提取该混合物。该提取液依次用500ml 2N硫酸、水和盐水洗涤，用MgSO4干燥。真空蒸发该干燥的提取液，油状残留物用500ml乙醚研制，得到11.9g题目化合物（3）。将滤液浓缩，浓缩物经硅胶柱（Wako gel D-200，300g）层析纯化。该柱用氯仿和氯仿-甲醇（50∶1-10∶1）洗脱。收集含有（3）的级分，并蒸发至干，得到7.7g化合物3（第二批），（3）的总产量是19.6g（32.5%），
MP 140-42℃.IRνmax（KBr）cm-11600，1366，1347，1183，1178.1H NMR（CDCl3）δ0.98（3H，d，J＝5.13 Hz，CH-CH3），2.40（3H，s，CH3Ph），2.44（3H，s，CH3Ph），4.39（1H，dd，J＝9.52 & 3.66 Hz，H-2），4.40（1H，q，J＝5.13 Hz，CH-CH3），4.98（1H，dd，J＝9.89 & 9.52 Hz H-3），5.20（1H，d，J＝3.66Hz，H-1）.
元素分析计算值 C29H32O10S2：C57.60;H5.33.S10.60.
实验值：C57.52，H5.31，S10.60.
苄基2，3-脱水-4，6-O-亚乙基-α-D-吡喃阿洛糖苷（4）
将28%甲醇钠的甲醇溶液（20ml，0.1mol）加到化合物3（15.3g，0.0253mol）的乙酸乙酯（300ml）溶液中，将该混合物于室温下搅拌24小时。该反应混合物依次用水和盐水洗涤，用MgSO4干燥。蒸发至干后，用乙醚-正己烷研制残留物，得到4.31g题目化合物（4）。将滤液蒸发至干，残留物经硅胶柱（Kiesel gel 60，40g）层析纯化。该柱用甲苯/乙酸乙酯（10∶1）进行洗脱，收集所需的组分，蒸发至干，得到1.45g化合物4，4的总产量为5.76g（82%），
MP 132-134℃.IRνmax（KBr）cm-11170，1153，1119，1055，1034.1H NMR（CDCl3）δ1.38（3H，d，J＝5.13 Hz，CH-CH3），3.37（1H，d，J＝4.40 Hz，H-3），3.46（1H，dd，J＝4.40 & 1.10 Hz，H-2），4.79（1H，q，J＝5.13Hz，CH-CH3），5.04（1H，d，J＝1.10 Hz，H-1）.
元素分析计算值 C15H18O5：C64.74，H6.52
实验值：C64.51，H6.50
苄基4，6-O-亚乙基-α-D-吡喃阿卓糖苷（5a和32a）
将1N氢氧化钠（100ml，100mmol）加到化合物4（3.06g，11mmol）的二噁烷（100ml）溶液中，将该混合物搅拌回流2天。将该反应混合物浓缩至100ml，用300ml氯仿提取浓缩液。提取液依次用水和盐水洗涤，用MgSO4干燥。除去溶剂后，油状残留物经硅胶状（kiesel gel 60，50g）层析纯化。该柱用甲苯/乙酸乙酯（10∶1-1∶1）洗脱，收集所需的用甲苯-乙酸乙酯（1∶1）洗脱的级分，蒸发至干，得到2.53g（78%）题目化合物（5a），MP 116-118℃.IRνmax（KBr）cm-13450，3300，1412，1132.1H NMR（CDCl3）δ1.38（3H，d，J＝5.13 Hz，CH-CH3），4.83（1H，q，J＝5.13 Hz，CH-CH3），4.81（1H，br.s，H-1）.
元素分析计算值 C15H20O6：C60.80，H6.80.
实验值：C60.53，H6.81
按类似的方法，由苄基2，3-脱水-4，6-O-亚乙基-α-D-吡喃甘露糖苷（图6中的化合物31）制得了化合物32a。苄基2，3-二-O-乙酰基-4，6-O-亚乙基-α-D-吡喃阿卓糖苷（6a）
将化合物5a（2.5g，8.4mmol）和4-二甲氨基吡啶（250mg）于无水吡啶（25ml）和乙酐（10ml）中的混合物在室温下搅拌1小时。将10ml甲醇加到该反应混合物中，并将该溶液在室温下搅拌30分钟。将该混合物减压浓缩，用100ml乙酸乙酯稀释残留物，依次用5%硫酸、水、饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤，并用MgSO4干燥。将干燥过的提取液蒸发至干，残留物经硅胶柱（kiesel gel 60，40g）层析。该柱用甲苯-乙酸乙酯（10∶1）洗脱，收集所需级分，蒸发至干，得到2.55g（80%）题目化合物（6a）。
MP 94-96℃.IRνmax（KBr）cm-11746，1733，1240，1221，1136.1H NMR（CDCl3）δ1.34（3H，d，J＝5.13 Hz，CH-CH3），2.05（3H，s，OCOCH3），2.07（3H，s，OCOCH3），4.78（1H，d，J＝1.10 Hz，H-1），4.79（1H，q，J＝5.13 Hz，CH-CH3），5.09（1H，dd，J＝2.93 & 1.10 Hz，H-2），5.11（1H，t，J＝2.93 Hz，H-3）.
元素分析计算值 C19H24O8：C59.99，H6.36.
实验值：C60.03，H6.43.
2，3-二-O-乙酰基-4，6-O-亚乙基-吡喃阿卓糖（7a和34a）
将化合物6a（1.14g，3mmol）和10%钯-炭（1g）于乙酸（50ml）和乙醇（5ml）中的混合物在1个大气压下氢化2天。滤除催化剂，并用甲醇洗涤。将滤液和洗液蒸发至干，残留物经硅胶柱（kiesel  gel  60，40g）层析纯化。该柱用甲苯-乙酸乙酯（10∶1-1∶1）洗脱，收集所需的由甲苯-乙酸乙酯（1∶1）洗脱的级分，并蒸发至干，得到800mg（92%）7a，它是α和β-异构体的混合物。
MP ca.55℃.IRνmax（KBr）cm-1
1752，1374，1229.1H NMR（CDCl3）δ5.04（1H，d，J＝6.60 Hz，H-1 of α-异构体），5.16（1H，dd，J＝8.80 & 1.46 Hz，H-1 of β-异构体）.
元素分析计算值 C12H18O8：C49.65，H6.25.
实验值：C49.43，H6.46.
该化合物与按相同方法制得的图6中的化合物34a相同。苄基2-脱氧-4，6-O-亚乙基-2-氟-α-D-吡喃阿卓糖苷（15b）
将化合物4（10g，0.036mol）和氢氟酸钾（25g，0.32mol）于乙二醇（200ml）中的混合物在200℃搅拌加热45分钟。冷却至室温后，用500ml氯仿提取该反应混合物，提取液用NaHCO3水溶液洗涤，用MgSO4干燥。将干燥过的提取液浓缩至200ml。将乙醛缩二甲醇（19ml，0.18mol）和对甲苯磺酸（200mg）加到该浓缩液中，并将该混合物在室温下搅拌2小时。该反应混合物依次用NaHCO3水溶液、水和盐水洗涤，用MgSO4干燥。除去溶剂后，将油状残留物进行硅胶柱（kiesel gel 60，130g）层析。该柱用甲苯-乙酸乙酯（10∶1）洗脱，收集所需的第一批级分，蒸发至干，得到3g（28%）题目化合物（5b），为油状物。将第二批级分蒸干，得到1.03g（9.6%）苄基3-脱氧-4，6-O-亚乙基-3-氟-α-D-吡喃葡糖苷。IRνmax（液体）cm-13500，1500，1460，1420，1220，1160，1140.1H NMR（CDCl3）δ
1.38（3H，d，J＝5.13 Hz，CH-CH3），4.22（1H，dt，J＝6.60 & 2.93 Hz，H-3），4.67（1H，ddd，J＝43.97，3.30 & 1.10 Hz，H-2），4.83（1H，q，J＝5.13 Hz，CH-CH3），4.95（1H，d，J＝10.26 Hz，H-1）.
按类似的方法由化合物31制得了化合物32b
苄基3-O-乙酰基-2-脱氧-4，6-O-亚乙基-2-氟-α-D-吡喃阿卓糖苷（6b）
将乙酸酐（10ml）加到化合物5b（2.5g，8.39mmol）和4-二甲氨基吡啶（250mg）于无水吡啶（25ml）中的混合物中，该混合物在室温下搅拌30分钟。将20ml甲醇加到该混合物中，该混合物在室温下搅拌30分钟，并蒸发至干，残留物用150ml乙酸乙酯稀释，依次用5%硫酸、水、NaHCO3水溶液、水和盐水洗涤，用MgSO4干燥。将干燥过的提取液蒸发至干，油状残留物经硅胶柱（kiesel gel 60，40g）层析。该柱用甲苯-乙酸乙酯（20∶1）洗脱，收集所需的级分，并蒸发至干，得到2.57g（90%）题目化合物6b，为油状物。
IRνmax（液体）cm-11750，1500，1410，1380.1H NMR（CDCl3）δ1.35（3H，d，J＝5.13 Hz，CH-CH3），2.05（3H，s，OCOCH3），4.75（1H，ddd，J＝43.23，3.30 & 1.10 Hz，H-2），4.80（1H，q，J＝5.13 Hz，CH-CH3），4.94（1H，d，J＝10.99 Hz，H-1），5.27（1H，dt，J＝6.23 & 3.30 Hz，H-3）.
按类似的方法，由化合物32b制得了相应的3-氟化合物。3-O-乙酰基-2-脱氧-4，6-O-亚乙基-2-氟-α和β-D-吡喃阿卓糖（7b）
将化合物6b（2.5g，7.35mmol）和10%钯-炭（2.5g）于乙酸（50ml）中的混合物在室温以及一个大气压下氢化24小时。滤除催化剂，用甲醇洗涤，将滤液和洗液蒸发至干。将残留物溶于200ml氯仿中，该溶液依次用NaHCO3水溶液、水和盐水洗涤，用MgSO4干燥。除去溶剂后，油状残留物经硅胶柱（keesel gel 60，60g）层析纯化。该柱用氯仿和氯仿-甲醇（50∶1）洗脱。收集由氯仿-甲醇洗脱的第一批级分，并蒸发至干，得到800mg（32%）回收的起始物（6b）为油状物。收集第二批级分，并蒸发至干，得到910mg（49.5%）题目化合物（7b），为油状物。
IRνmax（液体）cm-13450，1750，1420，1380.1H NMR（CDCl3）δ1.33 & 1.34（each 3H，d，J＝5.13 Hz，CH-CH3），2.15（6H，s，OCOCH3），4.75 and 4.79（each 1H，q，J＝5.13 Hz，CH-CH3），4.69（1H，ddd，J＝43.2，3.30 & 1.10 Hz，H-2，α），4.57（1H，ddd，J＝45.43，3.66 & 0.73 Hz，H-2，β），5.21（1H，dd，J＝10.63 & 6.23 Hz，H-1，α），4.99（1H，dd，J＝20.52 & 11.73 Hz，H-1，β），5.38（1H，dd，J＝5.50 & 3.30 Hz，H-3，α），5.51（1H，dd，J＝7.33 & 3.30 Hz，H-3，β）.
按类似的方法，由前面制备的3-氟化合物制得了相应的化合物34b。
苄基2-叠氮基-2-脱氧-4，6-O-亚乙基-α-D-吡喃阿卓糖苷（5c）
将化合物4（11.12g，0.04mol）和叠氮化钠（26g，0.4mol）于无水DMF（200ml）中的混合物在100℃加热搅拌2天。将该反应混合物浓缩至50ml，用800ml氯仿提取浓缩液。提取液用水和盐水洗涤，用MgSO4干燥。将干燥过的提取液蒸干，油状残留物经硅胶柱（kiesel gel 60，130g）层析纯化。该柱用甲苯-乙酸乙酯（20∶1）洗脱，收集所需的级分，并蒸发至干，得到10g（78%）粗产物5c，它无需进一步纯化直接用于下一步乙酰化反应。IRνmax（液体）cm-12100。
按类似的方法，由化合物31制得了化合物32c。
苄基3-O-乙酰基-2-叠氮基-2-脱氧-4，6-O-亚乙基-α-D-吡喃阿卓糖苷（6c）
向化合物5c粗品（10g，0.03mol）于含有4-二甲氨基吡啶（1g）的无水吡啶（100ml）中的溶液中加入乙酸酐（50ml），将该溶液在室温下搅拌30分钟。冷却下滴加甲醇（50ml），将该混合物于室温下搅拌30分钟并蒸发至干。用500ml乙酸乙酯提取该残留物，提取液依次用5%H2SO4、水和盐水洗涤，用MgSO4干燥。除去溶剂后，将油状残留物进行硅胶柱（kiesel gel 60，100g）层析纯化。该柱用甲苯-乙酸乙酯（50∶1-10∶1）洗脱。收集含有6c的级分，在硅胶柱上重复层析4次，用相同的溶剂洗脱。收集第一批级分，并蒸发至干，得到2.16g（19%）葡萄糖衍生物，后者经静置结晶。
MP 76-80℃.IRνmax（KBr）cm-12106，1747.
元素分析计算值 C17H19N3O6：C56.51，H5.30，N11.63
实验值：C56.21，H5.83，N11.65.
按同样的方法收集第二批级分，蒸干，得到7.35g（65%）阿卓糖衍生物（6c），后者用正己烷结晶。
MP 56-57℃.IRνmax（KBr）cm-12109，1736.1H NMR（CDCl3）δ1.35（3H，d，J＝5.1 Hz，8-H）2.03（3H，s，OCOCH3），3.55（1H，t，J＝10.3 Hz，6-Hax），3.77（1H，dd，J＝2.9 & 9.5 Hz，4-H），4.05（1H，dd，J＝0.7 & 2.9 Hz，2-H），4.11（1H，dd，J＝5.1 & 10.3 Hz，6-Heq），4.20（1H，ddd，J＝5.5，9.9 & 10.3 Hz，5-H），4.46 & 4.74（2H，each d，CH2Ph），4.78（1H，q，J＝5.1 Hz，7-H），4.83（1H，brs，1-H），5.07（1H，t，J＝2.9 Hz，3-H）.
元素分析计算值 C17H19N3O6：C56.51，H5.30，N11.63.
实验值：C56.12，H5.81，N11.65.
按类似的方法，由化合物32c制得了相应的3-叠氮基化合物。
3-O-乙酰基-2-叠氮基-2-脱氧-4，6-O-亚乙基-α和β-D-吡喃阿卓糖（7c）
将化合物（6c）（1.27g，3.5mmol）、N-溴琥珀酰胺（1.88g，10.6mmol）和1，2-环氧丙烷（7ml）于四氯化碳（30ml）和氯仿（30ml）中的混合物回流1.5小时。将该反应混合物蒸发至干，将残留物溶于40ml丙酮中。向该溶液中加入氰化汞（1.76g，7.6mmol）于水（20ml）中的溶液，将该混合物在室温下搅拌1小时，并浓缩至20ml。用100ml氯仿提取该浓缩液，用水和盐水洗涤，用MgSO4干燥，将干燥过的提取液蒸发至干。油状残留物进行硅胶柱（kiesel gel 60，50g）层析。该柱用甲苯-乙酸乙酯（10∶1-2∶1）进行梯度洗脱。收集用甲苯-乙酸乙酯（2∶1）洗脱的所需级分，蒸发至干，得到710mg（67.5%）7c，为油状物。IRνmax（Neat）cm-13300-3500，2110，1410，1220，1090，1070.
1HNMR未见苄基质子峰。
按类似的方法，由前面制备的3-叠氮基化合物制得了相应的3-叠氮基化合物，化合物34c。
苄基2-脱氧-4，6-O-亚乙基-α-D-吡喃阿卓糖苷（5d）
在回流温度下，向氢化铝锂（5g，0.132mol）无水乙醚（200ml）中的搅拌的悬浮液中，滴加化合物4（3.17g，11.4mmol）于200ml无水乙醚中的溶液，将该混合物回流1.5小时，并冷却至0℃。依次将50ml乙酸乙酯、50ml水和150ml 2N硫酸滴加到该反应混合物中。分离出有机层，用水和盐水洗涤，用MgSO4干燥。将干燥过的提取液蒸发至干，油状残留物经硅胶柱（kiesel gel 60，80g）层析纯化，该柱用甲苯/乙酸乙酯（2∶1）洗脱。收集通过TLC监测的所需级分，并蒸发至干，得到3.13g（98%）5d。MP 74-76℃.IRνmax（KBr）cm-13550，1165，1149，1125，1100，1056，1034，1026.
1H NMR（CDCl3）δ1.39（3H，d，J＝5.1 Hz，H-8），4.81（1H，q，J＝5.1 Hz，H-7），4.95（1H，d，J＝3.8 H，H-1）.
按类似的方法，由化合物31制得了化合物32d。
苄基3-O-乙酰基-2-脱氧-4，6-O-亚乙基-α-D-吡喃阿卓糖苷（6d）
将化合物5d（3g，0.0107mol）和4-N，N-二甲氨基吡啶（0.3g）于吡啶（60ml）和乙酐（30ml）中的溶液在室温下搅拌1小时。将60ml甲醇滴加到该反应溶液中，将该混合物蒸发至干。残留物用200ml乙酸乙酯提取，依次用2N硫酸、水、盐水洗涤，用MgSO4干燥，除去溶剂后，油状残留物经硅胶柱（kiesel gel 60，100g）层析纯化，该柱用甲苯-乙酸乙酯（10∶1-5∶1）进行梯度洗脱。收集所需级分，并蒸发至干，得到2.65g（77%）6d，为油状物。
1H NMR（CDCl3）δ1.35（3H，d，J＝5.1Hz，8-H），1.96（1H，ddd，J＝3.0，4.3 & 15.4 Hz，2-Hax），2.04（3H，s，OCOCH3），2.36（1H，ddd，J＝0.9，3.0 & 15.4 Hz，2-Heq），3.49（1H，dd，J＝3.0 & 9.8 Hz，4-H），3.50（1H，t，J＝10.3 Hz，6-Hax），4.09（1H，dd，J＝5.1 & 10.3 Hz，6-Heq），4.24（1H，ddd，J＝5.1，9.8 & 10.3 Hz，5-H），4.42 & 4.73（2H，each，d，CH2Ph），4.77（1H，q，J＝5.1 Hz，7-H），4.90（1H，d，J＝4.3 Hz，1-H）.
按类似的方法，由化合物32d制得了相应的2-O-乙酰基-3-脱氧化合物。
3-O-乙酰基-2-脱氧-4，6-O-亚乙基-α和β-D-吡喃阿卓糖（7d）
将化合物6d（2.47g，7.67mmol）和10%钯-炭（1g）于乙酸（50ml）和乙醇（10ml）中的混合物在一大气压氢化20小时。滤除催化剂，用50ml乙醇将催化剂洗涤两次。合并滤液和洗涤液并蒸发至干，油状残留物经硅胶柱（kiesel  gel  60，100g）层析纯化，该柱用甲苯-乙酸乙酯（2∶1）洗涤。收集通过TLC监测的所需级分，蒸发至干，得到1.32g（74%）7d，为油状物，1H NMR谱表明，组成为α-和β-异构体的1∶2混合物。
按类似的方法，由前述制备的化合物制得了相应的2-O-乙酰基-3-脱氧化合物，化合物34d。
实施例1
4′-苄氧羰基-4′-脱甲基-4-O-（2，3-二-O-乙酰基-4，6-O亚乙基-β-D-吡喃阿卓糖基）表鬼臼毒素（9a）
在-18℃下，向4′-苄氧羰基-4′-脱甲基表鬼臼毒素（8，226mg，0.4mmol）和7a（232mg，0.8mmol）于20ml无水1，2-二氯乙烷中的冷却和搅拌的混合物中，加入0.15ml（1.2mmol）三氟化硼-醚配合物，将该混合物在-18℃搅拌45分钟。将0.3ml无水吡啶加到该混合物中，将该混合物在-18℃搅拌10分钟。用100ml氯仿提取该混合物，提取液依次用水、饱和NaHCO3水溶液、水和盐水洗涤，用MgSO4干燥。将干燥过的提取液蒸发，残留物经硅胶柱（kiesel，gel 60，30g）层析纯化。该柱用甲苯-乙酸乙酯（2∶1）洗脱。收集通过TLC（甲苯-乙酸乙酯＝1∶1）监测的所需级分，蒸发至干，用乙醚研制，得到250mg（75%）题目化合物9a。MP 135-140℃.IRνmax（KBr）cm-11767，1600，1507，1486，1234，1218，1165，1132，1099，1072，1038.UVλmax（MeOH）nm（ε）292（3000）.
由HPLC预测的纯度为90%;（75%  MeOH-缓冲液（pH  7））.
元素分析计算值 C43H42O7H2O：C60.84，H5.22.
实验值：C60.56，H5.24
实施例2
4′-脱甲基-4-O-（2，3-二-O-乙酰基-4，6-O-亚乙基-β-D-吡喃阿卓糖基）表鬼臼毒素（10a）
将220mg（0.265mmol）化合物9a和100mg  10%钯-炭于20ml乙醇和20ml丙酮中的混合物在一大气压下氢化1.5小时，滤除催化剂，用丙酮洗涤。合并滤液和洗涤液，并蒸发至干。残留物经硅胶柱（kiesel  gel  60，15g）层析纯化。该柱用甲苯-乙酸乙酯（1∶1）洗脱，收集通过TLC监测的所需级分，并蒸发至干。残留物用乙醚研制，得到155mg（90%）题目化合物10a。
MP 205-210℃（分解）.IRνmax（KBr）cm-13400，1762，1610，1507，1485，1373，1230，1190，1113，1098，1072，1039.UVλmax（MeOH）nm（ε）235（sh）（12，000），285（2，900）.1H NMR（CDCl3）δ1.34（3H，d，J＝5.13 Hz，CH-CH3），2.11（3H，s，OAc），2.13（3H，s，OAc），4.79（1H，q，J＝5.13Hz，CH-CH3），4.97（1H，d，J＝3.30 Hz，AG-H-4），5.00（1H，d，J＝1.10 Hz，糖-H-1），5.02（1H，dd，J＝3.30 & 1.10 Hz，糖-H-2），5.29（1H，t，J＝3.30 Hz，糖-H-3）.
元素分析计算值 C33H36O15：C58.93，H5.40
实验值：C58.70，H5.41
10a的脱乙酰化：4′-脱甲基-4-O-（4，6-O-亚乙基-β-D-吡喃阿卓糖基）表鬼臼毒素（11a）、4′-脱甲基-4-O-（3-O-乙酰基-4，6-O-亚乙基-β-D-吡喃阿卓糖基）表鬼臼毒素（12）和4′-脱甲基-4-O-（2-O-乙酰基-4，6-O-亚乙基-β-D-吡喃阿卓糖基）表鬼臼毒素（13）的制备
将1.1g（1.6mmol）化合物10a和3.52g（16mmol）乙酸锌二水合物于50ml乙醇和50ml二噁烷中的混合物在搅拌下回流16小时，并将该混合物蒸发至干。用含有1ml乙酸的氯仿提取残留物，依次用NaHCO3水溶液、水和盐水洗涤该提取液，用MgSO4干燥。将提取液蒸发至干，残留物经硅胶柱（kiesel gel 60，50g）层析。该柱用氯仿-甲醇（100∶1）洗脱。
将第一批级分蒸发至干得到142mg（9%）起始原料（10a）。将第二批级分蒸发至干得到334mg（32%）2-O-乙酰基衍生物（13）。将第三批级分蒸发至干，并经制备HPLC纯化，得到77mg（8%）3-O-乙酰基衍生物（12）。收集第四批级分，并将其蒸发至干，用乙醚研制，得到145mg（15%）完全脱去乙酰基的化合物（11）。
11a的数据：
MP：约280℃（逐渐分解）由HPLC预测的纯度＞95%（55%甲醇-缓冲系;滞留时间：4分钟）IRνmax（KBr）cm-11767，1730，1610，1518，1507，1486，1231，1164，1111.UVλmax（MeOH）nm（ε）238（sh）（12，000），285（4，000）.
元素分析计算值 C29H32O131/2H2O：C58.29，H5.57.
实验值：C58.50，H5.57.
12的数据
MP  160-165℃（分解）。由HPLC预测的纯度90%（55%甲醇-缓冲系pH7;滞留时间：7.7分钟）。
IRνmax（KBr）cm-13426，1777，1754，1612，1512，1505，1485，1234，1117，1039.UVλmax（MeOH）nm（ε）238（sh）（12，000），286（3，900）.
元素分析计算值 C31H34O141/2H2O：C58.21，H5.52
实验值：C58.13，H5.76.
13的数据
MP  180-190℃（分解）由HPLC预测的纯度＞95%（55%甲醇-缓冲系;滞留时间：6.7分钟）
IRνmax（KBr）cm-13470，1777，1754，1613，1513，1505，1484，1230，1160，1090.UVλmax（MeOH）nm（ε）238（sh）（12，000），284（3，900）.
元素分析计算值 C31H34O14H2O：C57.40，H5.59
实验值：C57.86，H5.56
实施例3
4′-苄氧羰基-4′-脱甲基-4-O-（3-O-乙酰基-2-脱氧-4，6-O-亚乙基-2-氟-β-D-吡喃阿卓糖基）表鬼臼毒素（9b）
在-18℃下，向4′-苄氧羰基-4′-脱甲基表鬼臼毒素（8，830mg，1.47mmol）和化合物7b（550mg，2.2mmol）于无水1，2-二氯乙烷（50ml）冷却和搅拌的混合物中，加入三氟化硼-醚配合物（0.55ml，4.4mmol），将该混合物在-18℃搅拌1小时。在该混合物中加入1ml吡啶，将该混合物在-18℃搅拌5分钟。该混合物用100ml氯仿稀释，依次用水、饱和NaHCO3溶液、水和盐水洗涤，用MgSO4干燥。将干燥过的提取液浓缩至干，残留物经硅胶柱（kiesel gel 60，30g）层析纯化，该柱用甲苯-乙酸乙酯（4∶1）洗脱。收集第一批级分，蒸发至干，得到27mg（2.4%）题目化合物的α异构体〔经NMR（400MHz）确定其结构〕，为次要产物。收集第二批级分，蒸发至干，得到959mg（85%）所需化合物（9b）。
MP：约145℃（逐渐分解）。预测纯度：80%HPLC（80%MeOH-pH7缓冲系）。IRνmax（KBr）cm-11772，1600，1507，1486.UVλmax（MeOH）nm（ε）290.5（3900）.
元素分析计算值 C39H39O15F：C61.09，H5.13.
实验值：C60.86，H5.13.
按类似的方法，用8将醇（7c和7d）苷化，分别制得了化合物（9c和9d）。
按类似的方法制得了所有的相应的3-氟化合物。
4′-苄氧羰基-4′-脱甲基-4-O-（3-O-乙酰基-2-叠氮基-2-脱氧-4，6-O-亚乙基-β-D-吡喃阿卓糖基）表鬼臼毒素（9c）
MP  120-130℃。由HPLC预测纯度：85%。
IRνmax（KBr）cm-12109，1772，1602，1507，1485.UVλmax（MeOH）nm（ε）291（4100）.
元素分析计算值 C39H39N3O15：C59.31，H4.98，N5.32.
实验值：C59.28，H5.02，N5.33
4′-苄氧羰基-4′-脱甲基-4-O-（3-O-乙酰基-2-脱氧-β-D-吡喃阿卓糖基）表鬼臼毒素（9d）
MP：150℃。由HPLC预测纯度：80%。IRνmax（KBr）cm-11772，1746，1600，1485.UVλmax（MeOH）nm（ε）291（2700）.
元素分析计算值 C31H40O15.H2O：C61.09，H5.52
实验值：C61.25，H5.31
按类似的方法，由适宜的起始化合物制得了相应的3-叠氮基和2-O-乙酰基化合物。
实施例4
4′-脱甲基-4-O-（3-O-乙酰基-2-脱氧-4，6-O-亚乙基-2-氟-β-D-吡喃阿卓糖基）表鬼臼毒素（10b）
将化合物9b（825mg，1.077mmol）和10%钯-炭（100mg）于乙醇（50ml）和丙酮（50ml）中的混合物在一大气压下氢化1小时。滤除催化剂，并用甲醇洗涤。将滤液和洗液蒸发至干，残留物经硅胶柱（kiesel  gel  60，60g）层析，该柱用甲苯-乙酸乙酯（3∶1-2∶1）洗脱，收集通过TLC监测的所需级分，蒸干，得到620mg（91%）题目化合物（10b），
MP 209-212℃.IRνmax（KBr）cm-11762，1610，1484.UVλmax（MeOH）nm（ε）235（sh）（13，000），284.5（4，000）.
元素分析计算值 C31H38O13F：C58.86，H5.26.
实验值：C58.67，H5.21.
按类似的方法将9c和9d氢解，分别得到4′-酚;10c和10d。
按类似的方法，由适宜的起始化合物制得了相应的3-氟化合物。
4′-脱甲基-4-O-（3-O-乙酰基-2-叠氮基-2-脱氧-4，6-O-亚乙基-β-D-吡喃阿卓糖基）表鬼臼毒素（10c）
MP：150-160℃。由HPLC预测纯度：95%。
IRνmax（KBr）cm-13438，2107，1615，1502.UVλmax（MeOH）nm（ε）238（sh，12，800），285（4，100）.
元素分析计算值 C31H33N3O13.1/4 toluene：C57.96，H5.20，N6.19.
实验值：C57.67，H5.21，N6.08.
4′-脱甲基-4-O-（3-O-乙酰基-2-脱氧-4，6-O-亚乙基-β-D-吡喃阿卓糖基）表鬼臼毒素（10d）。
MP：185-188℃。由HPLC预测纯度：95%。
IRνmax（KBr）cm-11759，1610，1484，1230，1217.UVλmax（MeOH）nm（ε）237（sh，12，000），285（3，900）.
元素分析计算值 C31H34O13：C60.58，H5.58
实验值：C60.58，H5.60
按类似的方法，由适宜的起始化合物制得了相应的3-叠氮基和2-O-乙酰基化合物
4′-脱甲基-4-O-（3-O-乙酰基-2-氨基-2-脱氧-4，6-O-亚乙基-β-D-吡喃阿卓糖基）表鬼臼毒素盐酸盐（10e）
在与将9c还原成10c不同的条件（溶剂，反应时间等）下将9c氢化，制得了该化合物。
将900mg（1.1mmol）化合物9c和500mg 10%钯-炭于40ml乙酸和8ml乙醇中的混合物在室温和一大气压下氢化4小时。滤除催化剂，用20ml甲醇洗涤两次。合并滤液和洗涤液，将该混合物蒸干，残留物经硅胶柱（kiesel gel 60，20g）层析纯化。该柱先用氯仿然后再用氯仿-甲醇（25∶1）洗脱。收集通过TLC监测的所需级分，蒸干，用乙醚研制残留物，得到452mg（63%）题目化合物（35）的游离胺，MP 245-250℃（分解）。IRνmax（KBr）cm-1
1770，1740，1600，1480，1230，1110，1040;UVλ（MeOH） maxnm（ε）285（4100），292（4000）.
将该游离胺（308mg，0.5mmol）悬浮于5ml甲醇中。将1ml（2.7mmol）10%的盐酸甲醇溶液加到该悬浮液中，得到澄清液。用100ml乙醚稀释该溶液，过滤收集所得固体，用乙醚洗涤，得到300mg（92%）题目化合物（10e），MP约215℃（分解）：IRνmax（KBr）cm-11750，1610，1480，1230，1100，1030;UVλ（MeOH） maxnm（ε）285（3，500）;由HPLC预测的纯度为（95%，60%MeOH缓冲液;4.7分钟）;MS FAB（+），m/z630（M+1）+;1H NMR（400 MHz，D2O）δ5.42（1H，d，J＝1.83 Hz，H-1），3.66（1H，m，H-2），5.50（1H，t，J＝2.93 Hz，H-3），5.00（1H，q，J＝5.13Hz，H-7）， .36（1H，d，J＝5.13 Hz，H-8），2.20（3H，s，OAc）.
实施例5
4′-脱甲基-4-O-（2-脱氧-4，6-O-亚乙基-2-氟-β-D-吡喃阿卓糖基）表鬼臼毒素（11b）
将化合物10b（520mg，0.8mmol）和乙酸锌二水化合物（530mg，2.4mmol）于甲醇（100ml）中的混合物在搅拌下回流16小时，将该混合物蒸发至干。用100ml含0.4ml乙酸的氯仿提取残留物，用水和盐水洗涤提取液，用MgSO4干燥。除去溶剂后，残留物经硅胶柱层析纯化，该柱用氯仿-甲醇（100∶1）洗脱，收集通过TLC监测的所需级分，蒸干。用乙醚研制残留物，得到468mg（79%）11b。MP 277-279℃（分解）.IRνmax（KBr）cm-11764，1610，1484.UVλmax（MeOH）nm（ε）235（sh）（14，000），284（4，300），
元素分析计算值 C29H31O12F：C58.98，H5.29
实验值：C58.98，H5.30.
将10c和10d脱乙酰基分别得到11c和11d。
按照类似的方法，由适宜的起始化合物制得了相应的3-氟化合物。
4′-脱甲基-4-O-（2-叠氮基-2-脱氧-4，6-O-亚乙基-β-D-吡喃阿卓糖基）表鬼臼毒素（11c）
MP.283-285℃，由HPLC预测纯度：95%IRνmax（KBr）cm-13438，2107，1767，1615，1517.UVλmax（MeOH）nm（ε）238（sh，12，000），286（4，000）.
元素分析计算值 C29H31N3O12Et2O：C57.63，H6.01，N6.11.
实验值：C57.21，H5.89，M6.08.
4′-脱甲基-4-O-（2-脱氧-4，6-O-亚乙基-β-D-吡喃阿卓糖基）表鬼臼毒素（11d）
MP 288-292℃。由HPLC预测纯度：95%。IRνmax（KBr）cm-13300，1762，1610，1484.UVλmax（MeOH）nm（ε）237（sh，12，000），286（4，000），291（3，900）.
元素分析计算值 C29H32O12：C60.83，H5.63
实验值：C60.76，H5.76
按类似的方法，由适宜的起始化合物制得了相应的3-叠氮基化合物和2-脱氧表异构体。
实施例6
4′-脱甲基-4-O-（2-氨基-2-脱氧-4，6-O-亚乙基-β-D-吡喃阿卓糖基）表鬼臼的毒素（14）
将11c（203mg，0.33mmol）和10%钯-炭（200mg）于乙酸（15ml）和乙醇（5ml）中的混合物在一大气压下氢化4小时。滤除催化剂，用50ml甲醇洗涤。合并滤液和洗涤液，蒸干。残留物经硅胶柱（kiesel gel 60，20g）层析，该柱用氯仿-甲醇（50∶1-25∶1）洗脱，收集由氯仿-甲醇（25∶1）洗脱出的所需级分，蒸干，用乙醚研制，得到98mg（50.5%）14，为游离胺。MP 285-288℃（分解）。由HPLC预测纯度：95% IRνmax（KBr）cm-13380，1765，1610，1461，1230，1137，1089，1034.UVλmax（MeOH）nm（ε）238（sh，13，000），285（4，200）.
元素分析计算值 C29H33NO12：C59.28，H5.66，N2.38
实验值：C59.10，H5.87，N2.24
将该游离胺（60mg，0.1mmol）溶解在4ml二噁烷中，在该溶液中加入0.1ml（0.27mmol）10%氯化氢的甲醇溶液，在30℃以下将该混合物浓缩至2毫升。将该浓缩液冻干，得到62mg（100%）14的盐酸盐。IRνmax（KBr）cm-11770，1610，1507，1458.UVλmax（MeOH）nm（ε）238（11，000），285（3，700）.
按类似的方法制得了相应的3-氨基-3-脱氧化合物。
实施例7
4′-脱甲基-4-O-（2-脱氧-4，6-O-亚乙基-2-氟-β-D-吡喃阿卓糖基）表鬼臼毒素-4′-脱氧-4′-磷酸二钠盐（15）
在5℃下，向11b（118mg，0.2mmol）和N，N-二异丙基乙胺（0.52ml，3mmol）于无水乙腈（10ml）中的冷却和搅拌的溶液中，加入磷酰氯（122mg，0.8mmol）无无水乙腈（0.5ml）中的溶液，将该混合物在5℃搅拌10分钟。在该反应混合液中加入1ml水，在30℃以下浓缩至2ml。将浓缩液溶解在10ml含有300mg NaHCO3的水中，用30ml乙醚洗涤该溶液。将水层载于装有50ml制备PAK-C18柱填料（Waters）的柱上。该柱用水洗涤，然后依次用20%甲醇和30%甲醇洗脱。收集由20%甲醇洗脱的所需级分，浓缩至5ml，冻干，得到50mg15。收集由20%甲醇和30%甲醇洗脱的粗级分，浓缩至10ml，冻干，得到50mg粗产品，后者经制备HPLC纯化，得到17mg15。15的总产量是67mg（49%）。MP.190-195℃（分解）。由HPLC预测纯度：＞95%。
IRνmax（KBr）cm-11772，1600，1506，1486，1235.UVλmax（MeOH）nm（ε）289.5（3，500）.
按类似的方法，制得了相应的3-氟化合物。
实施例8
下述化合物的O-甲基化：苄基4，6-O-亚乙基-α-D-吡喃阿卓糖苷（5a）;苄基2，3-二-O-甲基-4，6-O-亚乙基-α-D-吡喃阿卓糖苷（16）;苄基4，6-O-亚乙基-2-O-甲基-α-D-吡喃阿卓糖苷（17）和苄基4，6-O-亚乙基-3-O-甲基-α-D-吡喃阿卓糖苷（18）
向2.23g（7.5mmol）苄基4，6-O-亚乙基-α-D-吡喃阿卓糖苷（5a）于15ml DMSO中的溶液中，加入360mg（7.5mmol）50%的氢化钠-油分散体，将该混合物在室温搅拌30分钟。在该混合物中加入10ml甲基碘，将该混合物在室温下搅拌30分钟。用150ml氯仿提取该反应混合物，依次用水和盐水洗涤，用MgSO4干燥。将干燥过的提取液蒸干，油状残留物经硅胶柱（kiesel gel 60，50g）层析，该柱用甲苯-乙酸乙酯（5∶1-2∶1）洗脱。收集由甲苯-乙酸乙酯（5∶1）洗脱出的第一批级分，蒸干，得到920mg（38%）16。1H NMR（CDCL3）δ3.40和3.55（各为3H，s，OCH3），4.79（1H，br-s，H-1）.
收集由甲苯-乙酸乙酯（5∶1）洗脱的第二批级分，蒸干，得到250mg（10%）17，
1H NMR（CDCL3）δ3.42（3H，s，OCH3），4.89（1H，br-s，H-1）.
收集由甲苯-乙酸乙酯（2∶1）洗脱出的第三批级分，蒸干，得到780mg（33.5%）18，
1H NMR（CDCl3）δ3.55（3H，s，OCH3），4.71（1H，br-s，H-1）.
收集由甲苯-乙酸乙酯（2∶1）洗脱出的最后的级分，蒸干，得到400mg（18%）起始原料5a。
实施例9
2，3-二-O-甲基-4，6-O-亚乙基-D-吡喃阿卓糖（19（19）
将920mg（2.84mmol）化合物16和500mg10%钯-炭于10ml乙酸和2ml乙醇中的混合物在室温和一大气压下氢化20小时。滤除催化剂，用20ml乙醇洗涤两次。合并滤液和洗涤液，将该混合物蒸干。油状残留物经硅胶柱（kiesel gel 60，30g）层析纯化，该柱用甲苯-乙酸乙酯（2∶1）洗脱。在TLC监测下收集所需级分，蒸干，得到650mg（98%）题目化合物19，为油状物，其NMR（400MHz）谱表明它是α和β端基异构体的混合物。1H NMR（CDCl3）δ
3.53 & 3.54（各为3H，s，OCH3，α-端基异构体），3.45 & 3.61（各为3H，s，OCH3，β-端基异构体），.99（1H，br-s，H-1α）5.00（1H，br-s，H-1β）.
实施例10
3-O-乙酰基-4，6-O-亚乙基-2-O-甲基-D-吡喃阿卓糖（20）
将乙酸酐（2.5ml）加到250mg（0.8mmol）化合物17和25mg N，N-二甲氨基吡啶于5ml无水吡啶中的溶液中，将该混合物在室温下搅拌30分钟。在该混合物中加入5ml甲醇，将该溶液蒸干。残留物用50ml乙酸乙酯提取，依次用2N硫酸、水和盐水洗涤，用MgSO4干燥。将提取液蒸干，油状残留物经硅胶柱（kiesel gel 60，15g）层析纯化。该柱用甲苯-乙酸乙酯（5∶1）洗脱，在TLC监测下收集所需级分，蒸干，得到290mg（＞100%）3-O-乙酰化的化合物，为油状物。1H NMR（CDCl3）δ2.03（3H，s，OCOCH3），3.48（3H，s，OCH3），4.84（1H，br-s，H-1）.
将280mg（0.795mmol）3-O-乙酰基化合物和280mg 10%钯-炭于5ml乙酸和1ml乙醇中的混合物在室温和一大气压下氢化3天。滤除催化剂，用10ml甲醇洗涤两次。合并滤液和洗涤液，将该溶液蒸干。油状残留物经硅胶柱（kiesel gel 60，20g）层析纯化。该柱用甲苯-乙酸甲酯（5∶1-2∶1）洗脱，收集由甲苯-乙酸乙酯（2∶1）洗脱的所需级分，蒸干，得到160mg（77%）题目化合物20，为油状物。1H NMR（400MHz）谱表明：该产物是α-和β端基异构体的混合物。1H NMR（CDCl3）δ4.95（1H，d，J＝1.3Hz，H-1，H-1α），5.09（1H，br-s，H-1β），5.33（1H，t，J＝3.3Hz，H-3β），5.47（1H，t，3.3Hz，H-3α）.
实施例11
2-O-乙酰基-4，6-O-亚乙基-3-O-甲基-D-吡喃阿卓糖（21）
按类似于前述制备3-O-乙酰基衍生物（20）的方法制得了2-O-乙酰基衍生物（21）。因此，用乙酸酐将18（780mg，2.5mmol）O-乙酰化，得到860mg（98%）中间体，苄基2-O-乙酰基吡喃阿卓糖苷，为油状物。1H NMR（CDCl3）δ2.09（3H，s，OCOCH3），3.57（3H，s，OCH3），4.71（1H，br-s，H-1）5.18（dd，J＝3.00 & 0.85Hz，H-2）.
在10%钯-炭（500mg）存在下，在乙酸和乙醇中将上述2-O-乙酰基化合物（850mg，2.4mmol）氢化，得到580mg（92%）21，为油状物。NMR（400MHz）谱表明它是α-和β-端基异构体的混合物。
1H NMR（CDCl3）δ4.92（1H，br-s，H-1α），5.03（1H，dd，J＝3.9 & 1.3 Hz，H-2α），5.16（1H，br-s，H-1β），5.04（1H，dd，J＝4.7 & 1.7 Hz，H-2β）.
实施例12
4′-脱甲基-4-O-（2，3-二-O-甲基-4，6-O-亚乙基-β-D-吡喃阿卓糖基）表鬼臼毒素（22）
在-18℃下，向320mg（0.6mmol）4′-脱甲基-4′-苄氧羰基表鬼臼毒素（8）和170mg（0.726mmol）化合物19于20ml无水1，2-二氯乙烷中的冷却和搅拌的溶液中，加入0.25ml（2mmol）三氟化硼-醚配合物，将该混合物于-18℃搅拌30分钟，在该混合物中加入0.25ml吡啶，在同一温度下将其搅拌5分钟。用100ml氯仿提取该混合物，依次用NaHCO3水溶液、水和盐水洗涤，用MgSO4干燥。除去溶剂后，残留物经硅胶柱（kiesel gel 60，20g）层析纯化。该柱用甲苯-乙酸乙酯（3∶1）洗脱，在TLC监测下收集所需级分，蒸干，用醚-正己烷研制，得到145mg（32%）22的4′-O-苄氧羰基衍生物。MP 125-132℃（分解）
max（KBr）cm-11772，1602，1484，1235，1109，1044.UVλmax（MeOH）nm（ε）292（4700）.1H NMR（CDCl3）δ3.49 & 3.51（各为3H，s，OCH3），4.94（1H，d，J＝0.36Hz，H-1″）.
将135mg（0.18mmol）上述O-苄氧羰基衍生物和50mg  10%钯-炭于10ml乙醇和10ml丙酮中的混合物在室温和一个大气压下氢化5分钟。滤除催化剂，用10ml丙酮洗涤两次，合并滤液和洗液，将该溶液蒸干。残留物经硅胶柱（kiesel  gel  60，15g）层析纯化。该柱用甲苯-乙酸乙酯（2∶1）洗脱。在TLC（甲苯-乙酸乙酯＝1∶1）监测下收集所需级分，蒸干，用乙醚研制残留物，得到76mg（68.5%）题目化合物22。
MP 140-150℃（分解）.IRνmax（KBr）cm-11774，1751，1616，1485，1230，1111，1040.UVλmax（MeOH）nm（ε）237（sh，10，000），284（3，300）.1H NMR（CDCl3）δ4.94（1H，d，J＝0.85 Hz，H-1″），3.37（1H，dd，J＝3.42 & 0.85 Hz，H-2″），4.71（1H，q，J＝5.13 Hz，H-7″），1.37（3H，d，J＝5.13，H-8″），3.49 & 3.50（各为3H，s，OCH3）.
元素分析计算值 C31H36O13·2.5H2O：C56.23，H6.25
实验值：C56.39，H6.61
实施例13
4′-脱甲基-4-O-（4，6-O-亚乙基-2-O-甲基-β-D-吡喃阿卓糖基）表鬼臼毒素（23）
按类似于制备22的方法，用20将8苷化，然后进行脱苄氧羰基反应。这样，用20（150mg，0.57mmol）将8苷化，得到230mg（59%）粉末状苷化的产物。MP  132-134℃（分解）。
IRνmax（KBr）cm-11772，1602，1485，1235，1109，1040.UVλmax（MeOH）nm（ε）291（4，300）.1H NMR（CDCl3）δ4.91（1H，d，J＝0.85 Hz，H-1″），3.35（1H，dd，J＝3.84 & 1.28 Hz，H-2″），5.34（1H，dd，J＝3.42 & 2.66 Hz，H-3″），4.76（1H，q，J＝5.13 Hz，H-7″），1.34（3H，d，J＝5.13 Hz，H-8″）3.51（3H，s，OCH3），2.12（3H，s，OAc）.
在10%钯-炭存在下，将上述苷化的产物（220mg，0.8mmol）氢化，得到210mg（约100%）23的3″-O-乙酰基衍生物。MP  140-150℃（分解）。
IRνmax（KBr）cm-11779，1751，1617，1486，1232，1110，1037.UVλmax（MeOH）nm（ε）237（sh，13，000），284（3，900）.1H NMR（CDCl3）δ4.91（1H，d，J＝0.86 Hz，H-1″），3.35（1H，dd，J＝3.42 & 0.86 Hz，H-2″），5.34（1H，t，J＝3.42 Hz，H-3″），4.75（1H，q，J＝5.13 Hz，H-7″），1.34（3H，d，J＝5.13 Hz，H-8″），3.51（3H，s，OMe），2.12（3H，s，OAc）.
将200mg（0.3mmol）上述3″-O-乙酰基化合物和660mg（3mmol）乙酸锌二水合物于30ml无水甲醇中的混合物搅拌回流6小时，将该混合物蒸干。残留物用含0.5ml乙酸的100ml氯仿提取，用水和盐水洗涤，用MgSO4干燥。将干燥过的提取液蒸干，残留物经硅胶柱（kiesel gel 60，20g）层析纯化，该柱用氯仿-甲醇（100∶1）洗脱。收集所需级分，蒸干，用乙醚研制，得到94mg（52%）题目化合物23。MP 173-180℃（分解）。IRνmax（KBr）cm-13445，1772，1615，1518，1507，1485，1286，1190，1116，1037.UVλmax（MeOH）nm（ε）237（sh，12，000），284（3，800）.1H NMR（CDCl3）δ5.03（1H，d，J＝1.10 Hz，H-1″），3.89（1H，dd，J＝3.66 & 1.10 Hz，H-2″），4.16（1H，t，J＝3.30 Hz，H-3″），4.82（1H，q，J＝5.13 Hz，H-7″），1.36（3H，d，J＝5.13 Hz，H-8″）.3.50（3H，s，OCH3）.
元素分析计算值 C30H34O13.（C2H5）2O：C60.35，H6.55
实验值：C60.33，H6.60
4′-脱甲基-4-O-（4，6-O亚乙基-3-O-甲基-β-D-吡喃阿卓糖基）表鬼臼毒素（24）
按前述方法，用21将8苷化，然后进行氢解和脱乙酰基化反应，得到最终化合物24
（1）在该苷化反应中，可以分离出α-和β-糖苷产物。这样，用21（530mg，2mmol）将8（801mg，1.5mmol）苷化，得到α-和β-端基异构体的粗品混合物，经硅胶柱层析（甲苯∶乙酸乙酯＝3∶1）分离，得到400mg（34%）β-D-吡喃阿卓糖基衍生物，和570mg（49%）它的α-端基异构体。它们的光谱数据如下：
苷化产物（β-端基异构体）：
MP 130-135℃（分解）。IRνmax（KBr）cm-11772，1602，1485，1235，1108，1042.UVλmax（MeOH）nm（ε）291（4，100）.1H NMR（CDCl3）δ4.80（1H，br-s，H-1″），5.07（1H，d，J＝2.56 Hz，H-2″），3.61（1H，t，J＝2.93 Hz，H-3″）.
（2）在一个大气压下，在10%钯-炭的存在下将上述β-端基异构体（345mg，0.44mmol）在丙酮-乙醇中氢化，得到280mg（98%）2″-O-乙酰基-4′-羟基衍生物，为无色粉末。
2″-O-乙酰基-4′-羟基衍生物：
MP约150℃（分解）.IRνmax（KBr）cm-11779，1751，1617，1486，1229，1111，1039.UVλmax（MeOH）nm（ε）237（sh，13，000），285（3，900）.1H NMR（CDCl3）δ5.03（1H，d，J＝1.46 Hz，H-1″），5.05（1H，dd，J＝3.30 & 1.46 Hz，H-2″），3.64（1H，t，J＝3.66 Hz，H-3″）.
（3）用乙酸锌二水合物将上述2″-O-乙酰基衍生物（270mg，0.42mmol）脱去乙酰基，得到163mg（59%）24，为无色粉末。
化合物24：
MP 205-210℃（分解）.IRνmax（KBr）cm-13475，1772，1751，1617，1485，1232，1193，1162，1110，1039.UVλmax（MeOH）nm（ε）240（11，000），286（3，500）.1H NMR（CDCl3）δ5.00（1H，d，J＝1.10 Hz，H-1″），3.86（1H，dd，J＝3.66 & 1.10 Hz，H-2″），3.74（1H，t，J＝3.30 Hz，H-3″），4.73（1H，q，J＝4.76 Hz，H-7″），1.38（3H，d，J＝4.76 Hz，H-8″），3.53（3H，s，OMe）.
元素分析计算值 C30H34O13：C59.80，H5.68
实验值：C59.70，H5.82
实施例14
3-叠氮基-2，3-二脱氧-4，6-O-亚乙基-2-氟-α-D-吡喃阿卓糖（27）
将对甲苯磺酰（10mg，0.05mmol）加到苄基3-叠氮基-4，6-O-亚苄基-2，3-二脱氧-2-氟-α-D-吡喃阿卓糖苷（420mg，1.09mmol）的乙醇-水（4∶1，5ml）溶液中，使该混合物回流5小时。将该反应混合物浓缩，用二氯甲烷稀释，用水洗涤，用MgSO4干燥。将有机层浓缩，得到380mg固体粗产物，后者经硅胶柱层析纯化（己烷∶乙酸乙酯＝1∶1），得到274mg（85%）苄基3-叠氮基-2，3-二脱氧-2-氟-α-D-吡喃阿卓糖苷。在上述二醇（274mg，0.92mmol）于二氯甲烷（4ml）中的搅拌的溶液中加入乙醛缩二甲醇（0.3ml）和对甲苯磺酸（10mg），将该混合物在室温下搅拌6小时。用NaHCO3水溶液使该反应骤停，然后用水洗涤，用MgSO4干燥。将有机层浓缩，得到289mg无色油状物，后者经硅胶柱层析纯化（己烷∶乙酸乙酯＝2∶1），得到250mg（84%）4，6-O-亚乙基衍生物。
将NBS（243mg）加到4，6-O-亚乙基衍生物（250mg，0.77mmol）的CCl4（8ml）溶液中，将该混合物回流1小时，并浓缩。用丙酮-水（4∶1，5ml）稀释该残留物，然后加入Hg（CN）2，将该混合物在室温下搅拌4小时。按标准方法处理后，将所得粗产物进行硅胶柱层析，得到118mg题目化合物（27），为纯油状物。
1H NMR（CDCl3）δ5.40-4.56（2H，m），4.56-3.23（7H，m），1.37（3H，d，J＝5Hz）.
实施例15
4′-苄氧羰基-4′-脱甲基-4-O-（3-叠氮基-2，3-二脱氧-4，6-O-亚乙基-2-氟-β-D-吡喃阿卓糖基）表鬼臼毒素（28）。
在-10℃下，向4′-苄氧羰基-4′-脱甲基表鬼臼毒素（8，220mg，0.41mmol）和化合物27（118mg，0.53mmol）于二氯乙烷（6ml）中的溶液中，加入BF3·Et2O（104μl），将该混合物在-10℃至-5℃搅拌1小时。然后将该反应混合物与三乙胺（0.1ml）混合并在室温下搅拌1小时。按标准方法处理后，将所得粗产物进行硅胶柱层析，得到227mg（75%）28，为无色粉末。
IRνmax（KBr）cm-12114，1771，1602.UVλmax（MeOH）nm（ε）292（3，140）.
元素分析计算值 C37H36N3O13F.3H2O：C55.29，H5.27，N5.23.
实验值：C55.33，H4.53，N5.25.
实施例16
4′-脱甲基-4-O-（3-叠氮基-2，3-二脱氧-4，6-O-亚乙基-2-氟-β-D-吡嘧阿卓糖基）表鬼臼毒素（29）
将化合物28（87mg，0.12mmol）于乙醇-乙酸乙酯（4∶1，5ml）中的搅拌的溶液，在10%Pd-C存在下，在一个大气压下氢化20分钟，滤除催化剂。将滤液浓缩，得到固体粗产物（75mg），后者经硅胶柱层析纯化，得到53mg（73%）29，为无色粉末，MP  132-134℃。由HPLC（SSC-ODS-262，65%  MeOH-pH  7缓冲液预测的纯度80%。
IRνmax（KBr）cm-12120，1777，1616.UVλmax（MeOH）nm（ε）240（sh，11，960），285（3，850）.1H NMR（CDCl3）δ4.90（1H，d，J＝20.6 Hz，1″-H），4.80（1H，q，J＝4.8 Hz，7″-H），4.44（1H，dd，J＝4 & 47 Hz，2″-H），3.65（1H，t，J＝10 Hz，6″ax-H），1.40（3H，d，J＝4.8 Hz，8″-CH3）.
元素分析计算值 C29H30N3O11F.1/2H2O：C55.77，H5.00，N6.73
实验值：C55.55，H5.09，N6.25
实施例17
4′-脱甲基-4-O-（3-氨基-2，3-二脱氧-4，6-O-亚乙基-2-氟-β-D-吡喃阿卓糖基）表鬼臼毒素（30）
在PtO2（50mg）存在下，于55psi的压力下，将化合物28（100mg，0.14mmol）于乙酸-水（1∶1，10ml）中的摇振的悬浮液氢化过夜。滤除催化剂，浓缩滤液，得到120mg淡黄色油状粗产物，后者经硅胶柱层析纯化，得到61mg（77%）30，为无色粉末。MP 169-172℃。预测纯度80%（HPLC）。
IRνmax（KBr）cm-11775，1610.UVλmax（MeOH）nm（ε）237（sh，12，050），285（3，700）.1H NMR（DMSO-d6）δ5.34（1H，d，J＝22.2 Hz，1″-H），4.85（1H，q，J＝5.1 Hz，7″-H），4.43（1H，dd，J＝3.5 & 47 Hz，2″-H），4.10（1H，dd，J＝5.1 & 10.3 Hz，6″eq-H），3.93（1H，dt，J＝5 & 10 Hz，5″-H），3.66（1H，m，4″-H），3.56（1H，t，J＝10.3 Hz，6″ax-H），3.51（1H，m，3″-H），1.24（3H，d，J＝5.1 Hz，8″-CH3）.
元素分析计算值 C29H32NO11F.3H2O：C54.12，H5.95，N2.18.
实验值：C54.32，H5.21，N2.24
实施例18
胶囊剂
以干燥态混合下述物质，然后装入硬质明胶胶囊中，填充重量为0.345g。
100g4′-脱甲基-4-O-（3-O-乙酰基-2-脱氧-4，6-O-亚乙基-2-氟-β-D-吡喃阿卓糖基）表鬼臼毒素，
2.0g硬脂酸镁，
30.0g微晶纤维素（Avicel  pH  102），
10.5g淀粉，
这一批料足以装1000粒口服用胶囊。
实施例19
栓剂
由下述成分制得了一批100粒适于口服给药的栓剂的批料
154.8g硬质脆性低羟基脂肪类栓剂基质，例如Witepsol  H-15（Dynamit-Nobel）
12g  4′-脱甲基-4-O-（4，6-O-亚乙基）-β-D-吡喃阿卓糖基）表鬼臼毒素。
在50-60℃将脂肪类基质料熔化，然后在温和搅拌下将该基料冷却至其熔点（35℃）以上。然后将活性化合物散布在经过熔化的基质表面，在15分钟内将所有活性成分散布完毕。连续搅拌1小时，然后将该混合物倒入预热的栓剂模具中。然后将模具和内含物冷却至22-26℃，取出栓粒，包装。每粒栓剂含有100mg抗肿瘤剂。
实施例20
口服组合物
将下述成分混合，得到每5ml组合物含有100mg活性化合物的口服液体组合物。
100mg4′-脱甲基-4-O-（3-O-乙酰基-4，6-O-亚乙基-β-D-吡喃阿卓糖基）表鬼臼毒素，
10mg无水柠檬酸，
150mg苄醇，
400mg多乙氧基醚-80，经过纯化
3.25g聚乙二醇300
5.12g无水乙醇
实施例21
胃肠道外给药组合物
用0.9%注射用氯化钠或5%右旋糖将实施例18的组合物稀释20至50倍，然后缓慢地静脉输入。

Claims (3)

1、制备下式化合物的方法
式中R3选自(C1-C10)烷基、苯基、呋喃基和2-噻吩基；R4和R5之一选自C1-5烷氧基和C1-5酰氧基，而另一个则选自H、C1-5烷氧基、C1-5酰氧基、F和叠氮基；或者R4和R5之一是F，而另一个则是叠氮基；R6是H或PO3H2或其可药用的盐；
该方法包括下述步骤：
A.在三氟化硼一醚配合物存在下将下式化合物
Figure 901073962_IMG2
与下式化合物反应，
Figure 901073962_IMG3
式中R3，R4和R5的定义如前；
B.将步骤A产物氢化，除去酚保护基；
C.任意地将该酚磷酰化，得到其中R6是PO3H2的产物或其盐。
2、制备下式化合物的方法，
式中R3选自（C1-C10）烷基、苯基、呋喃基和2-噻吩基;R4和R5之一是OH，而另一个则选自H、OH、C1-5烷氧基、C1-5酰氧基、F和叠氮基;R6是H、或PO2H2或其可药用的盐;
该方法包括将其中R4和R5之一是C1-5酰氧基而不是OH，而另一个基团定义如前的上式化合物与锌试剂反应。
3、制备下式化合物的方法，
Figure 901073962_IMG5
式中R3选自（C1-C10）烷基、苯基、呋喃基和2-噻吩基;R4和R5之一是氨基，而另一个则选自羟基、C1-5烷氧基、C1-5酰氧基和氟;R6是H或PO2H2或其可药用的盐;
该方法包括在催化剂存在下将其中R4和R5之一是叠氯基而不是氨基，另一个基团定义同前的上式化合物氢化。
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