CN105052534A - 一种利用酸枣枝屑培养金针菇的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种利用酸枣枝屑为主料培养金针菇的方法，包括如下步骤：A.液体菌种的制备和培养；B.谷粒菌种的制备和培养；C.栽培用培养基的制备；D.无菌条件下，将步骤B制备得到的谷粒菌种接入步骤C制备得到的培养基，进行培养、出菇管理、采收；创新点在于，在步骤A或/和步骤B或/和步骤C的培养基中含有酸枣枝屑。本发明充分利用了林业废弃物酸枣枝，形成循环经济模式，避免了自然资源的浪费和环境的污染，而且还降低了栽培成本。利用酸枣枝屑栽培金针菇的栽培技术，具有显著的经济效益和生态效益，具有广阔的应用前景。

Description

一种利用酸枣枝屑培养金针菇的方法
技术领域
本发明属于食用真菌栽培的技术领域，具体涉及一种包含酸枣枝屑的金针菇培养料及其用于培养金针菇的方法。
金针菇(Flammulinavelutipes),又称冬菇、朴菇、构菌、毛柄金钱菌、青杠菌，其菌盖滑润、菌柄细长脆嫩，形美味鲜，营养价值和保健功效显著，且具益智作用和观赏效果，开发利用前景广阔。金针菇为世界上著名的食用、药用和观赏真菌之一，在现代真菌分类系统上，隶属于担子菌亚门、层菌纲、伞菌目、口蘑科、金钱菌属。近年来，随着国民经济的快速发展和人民生活水平的日益提高，金针菇逐渐成为营养学家的新宠，消费量随之陡升，发展潜力巨大目前，金针菇的生产规模和生产能力朝着多元化规范化和标准化的方向发展壮大。
目前国内金针菇栽培采用的主要原料是棉籽壳,但随着近年来国内食用菌产业规模的不断扩大,造成棉籽壳市场价格节节攀升,据报道2010年棉籽壳价格达到2000元/t,2010年和2012年基本维持在1400-1500元/t之间，2013年棉籽壳价格又继续攀升,目前达到1800元/t。原材料成本的上升直接影响到杏鲍菇生产的经济效益。因此,寻找价廉物美的本地原料显得日益迫切。
酸枣为鼠李科枣属的一种灌木或小乔木。为我国北方较普通的一种野生资源，多分布在海拔200-800米的低山丘陵区，仅以河北为例，可占太行山总面积的48.1％。通常酸枣枝的用途为：作柴烧，作篱笆护墙用，作果园的防护墙用，作为防风固沙之用或防止冲刷等树种用。目前，对酸枣资源的重视不够，其丰富的野生资源不能充分的被利用，造成极大的浪费。以酸枣枝屑为主要栽培原料，必然会产生很大的经济和生态效益，在完善当地经济结构调整、实现新欢经济方面将发挥巨大的作用。
发明内容
本发明的目的是提供一种利用酸枣枝屑培养金针菇的方法，解决目前野生酸枣枝尚未资源化开发的问题，在对环境无污染并且高收益的前提下实现农林废弃物的资源化开发利用。
为了实现上述目的，本发明提供了一种利用酸枣枝屑培养金针菇的方法，包括如下步骤：
A.液体菌种的制备和培养；
B.谷粒菌种的制备和培养；
C.栽培用培养基的制备；
D.无菌条件下，将步骤B制备得到的谷粒菌种接入步骤C制备得到的培养基，进行培养、出菇管理、采收；
创新点是在步骤A或/和步骤B或/和步骤C的培养基中含有酸枣枝屑。
所述的利用酸枣枝屑培养金针菇的方法，步骤A中金针菇的液体菌种培养基中作为底物诱导物提前加入酸枣枝屑；其优化液体菌种培养基配方重量百分比为：马铃薯20％，酸枣枝粉5％，麸皮3％，葡萄糖2％，KH2PO40.3％，MgSO40.15％，VB110mg/L，羧甲基纤维素0.3％，水1000mL，pH自然。
所述利用酸枣枝屑培养金针菇的方法，所述步骤A中液体菌种的制备特征在于：
a.一级液体菌种的制备
无菌条件下，将市售母种接入一级液体培养基中，24℃、160r/min恒温振荡培养7d，即制得一级液体菌种；
所述一级液体菌种培养基包括：以重量百分比计，马铃薯20％，麸皮3％，葡萄糖2％，KH2PO40.3％，MgSO40.15％，CMC0.3％，VB110mg/L；
b.二级液体菌种的制备
所述二级液体菌种培养基配方重量百分比为：马铃薯20％，酸枣枝粉5％，麸皮3％，葡萄糖2％，KH2PO40.3％，MgSO40.15％，CMC0.3％，VB110mg/L。制备方法是将马铃薯、酸枣枝屑粉和麸皮加水1000mL共煮，开锅后保持微沸30分钟，过滤，取滤液，趁热加入其它组分，搅拌化开后，定容至水1000mL，分装，灭菌，待接种；
无菌条件下，将一级液体菌种以10％的接种量接入二级液体培养基中，25℃、160r/min恒温振荡培养7d，即制得二级液体菌种。
所述的利用酸枣枝屑培养金针菇的方法，步骤B中金针菇的谷粒菌种培养基中也作为底物诱导物、提前加入酸枣枝屑；其优化的谷粒菌种培养基配方：麦粒84％，酸枣枝屑15％，生石灰1％。
所述利用酸枣枝屑培养金针菇的方法，所述步骤B中谷粒菌种的制备特征在于：
将步骤A得到的二级液体菌种接入谷粒菌种培养基，接种量为10％，24℃培养至满，得到谷粒菌种。
所述的利用酸枣枝屑培养金针菇的方法，步骤C中酸枣枝屑作为栽培金针菇的主料，栽培培养基重量组成包括：酸枣枝屑60％、棉籽皮19％、柿木屑10％、麸皮10％、生石灰1％。
所述利用酸枣枝屑培养金针菇的方法，所述步骤C中酸枣枝屑培养基的制备特征在于：将酸枣枝、芦苇粉碎成木屑状，配以棉籽皮、麸皮和生石灰，料水比为1∶1.4，堆闷30min，装入容器内，灭菌，冷却后备用。
所述利用酸枣枝屑培养金针菇的方法，步骤D中谷粒菌种的接种量为5-10％。
所述利用酸枣枝屑培养基栽培金针菇的方法，液体培养基中所用酸枣枝屑，事先粉碎并过80目筛。
所述利用酸枣枝屑培养金针菇的方法，步骤C中酸枣枝屑培养基的灭菌条件为121℃高压灭菌150min或100℃常压灭菌24h。
所述利用酸枣枝屑为主要培养料栽培金针菇的方法，步骤C中盛装酸枣枝屑培养料的容器可选用聚乙烯袋或玻璃瓶。
所述利用酸枣枝屑为主要培养料栽培金针菇的方法，谷粒菌种培养基中所用酸枣枝屑，事先粉碎为木屑状。
本发明的技术进步效果表现在以酸枣枝屑作为栽培金针菇的主要原料，优势主要有三点：
1、对于食用菌而言，为其提供生长所需碳源。
2、酸枣枝目前尚未得到开发利用，资源丰富，为食用菌栽培提供了一种价格低廉的栽培原料，生产成本低，经济效益高。
3、从生态的角度来看，实现了农林废弃物的再利用，具有可观的经济效益，应用前景广阔。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明所述内容做进一步详细的说明。
实施例1、利用酸枣枝屑培养金针菇的方法，金针菇菌种为市场采购。
如果采用常规工艺，则是PDA母种-棉籽皮和/或酸枣枝屑原种-酸枣枝屑栽培种-酸枣枝屑出菇袋；但采用PDA母种-液体菌种-酸枣枝屑菌种-酸枣枝屑出菇袋工艺，则可以缩短生产周期近三分之一。下面重点介绍液体菌种工艺：
A.液体菌种的制备
一级液体菌种培养基配方：马铃薯20％，麸皮3％，葡萄糖2％，KH2PO40.3％，MgSO40.15％，VB110mg/L，CMC0.3％，pH自然；制备方法是马铃薯、麸皮共煮沸30min，过滤去渣得浸提液加入其他成分。一级液体菌种制备时使用500mL锥形瓶，装液量为200mL，121℃高压灭菌30min后，无菌条件下接入市售的PDA斜面菌种，每瓶接种量为4块0.5cm×0.5cm菌种块。接种后在24℃、160r/min的条件下，恒温振荡培养6d。
二级液体菌种培养基配方：酸枣枝屑粉5％，马铃薯20％，麸皮3％，葡萄糖2％，KH2PO40.3％，MgSO40.15％，VB110mg/L，CMC0.3％，pH自然；制备方法是酸枣枝屑粉碎过80目筛得粉状，与马铃薯、麸皮共煮沸30min，过滤去渣得浸提液。二级液体菌种装液量规格、灭菌条件及培养条件同上，接种量为10％。
B.谷粒菌种的制备
谷粒菌种培养基配方：麦粒84％，酸枣枝屑15％，生石灰1％。
准确称取培养基各组成成分，料水比1︰1.4进行拌料，装入17cm×32cm×0.05cm聚乙烯塑料袋，每袋装干料300g，制备120袋。将优化得到的二级液体菌种以及未添加酸枣枝屑的对照组液体菌种分别接入谷粒菌种培养基，分别接种60袋，测定菌长速，并记录满袋时间。
为了考察本发明所述谷粒菌种培养基的优势，本发明进行了对比试验，对照组培养基为麦粒培养基：麦粒99％，生石灰1％；对比试验结果如表2所示。
表1金针菇谷粒菌种的满袋时间
由表2可知，菌丝在“麦粒+酸枣枝屑”谷粒培养基比纯麦粒培养基的长速快，这是因为谷粒之间的间隙和酸枣枝屑的添加更有利于菌丝的生长，在液体培养基中加入酸枣枝屑，使菌丝能够更快适应生长底物，从而加快发菌速度，缩短生产周期提高生产效率。
C.金针菇培养料的制备
按质量比，称取酸枣枝屑60％、柿木屑10％、棉籽皮19％、麸皮10％、生石灰1％，料水比为1︰1.4进行拌料，混合均匀后，堆闷30min后装入容器中进行灭菌和接种工作。
将上述培养料装入聚乙烯袋或玻璃瓶内，口径不限，常规扎口，高压灭菌一般以121℃灭菌150min；常压灭菌一般以100℃灭菌，保持24h；冷却后接种。
本发明在研究过程中对酸枣枝屑的用量进行了考察，具体如下：
按表3所示准确称取各组成成分，将其混匀，加水，料水比为1︰1.4，把配置好的培养料装入试管，每个配方重复5次，121℃高压灭菌150min。将步骤B所述谷粒菌种分别接入含有培养料的试管中，进行试管营养生长试验。
表2培养基配方(干料，％)
配方 酸枣枝屑 柿木屑 棉籽皮 麸皮 生石灰
P0 0 70 19 10 1
P1 30 40 19 10 1
P2 40 30 19 10 1
P3 50 20 19 10 1
P4 60 10 19 10 1
P5 70 0 19 10 1
P6 0 0 89 10 1
每隔2天观察一次试管中菌丝的长速和长势情况，用游标卡尺(精确度0.02mm)测定菌丝的长速。菌丝长速长势结果如表4所示。
表3金针菇的菌丝生长情况
配方 菌丝长速(mm/d) 菌丝长势
P6 5.06±0.02 +++
P4 4.88±0.01 +++
P3 4.81±0.04 +++
P2 4.75±0.05 +++
P5 4.65±0.03 ++
P1 4.57±0.02 ++
P0 4.42±0.02 +
(注：列出长速均为平均值±标准误；+++表示生长致密，++表示生长较致密，+表示生长一般。)
由表4可以看出，当酸枣枝屑添加量逐渐增加到60％时，其长势较好，菌丝洁白、较致密，与纯棉籽皮培养基具有可比性，菌丝在配方P6上生长最快，比纯酸枣枝屑P5组长速快。
按表3中的配方称取各成分，混合均匀，料水比1︰1.4进行拌料，装入17cm×32cm×0.05cm聚乙烯塑料袋，每袋装干料约300g，接种量为“液体菌种→酸枣枝屑+棉籽皮”制种的谷粒菌种一接种勺，观察并记录各个配方的生长情况并计算生物转化率。试验结果如表5所示。
表4金针菇的生物转化率
培养基编号 平均产量(g) 平均生物效率(％)
P6 305.37 101.79
P4 263.55 87.85
P3 257.61 85.87
P2 253.89 84.63
P5 250.32 83.44
P1 243.81 81.27
P0 235.77 78.59
从表5可以看出，当以酸枣枝屑为主要碳源达到60％，金针菇菌株的生物转化率达到了87.85％，尽管未达到栽培料主料纯棉籽皮的生物转化率101.79％，但说明酸枣枝屑可以栽培金针菇。酸枣枝这一废弃物也得到了资源化利用，对金针菇的高效栽培有重大意义。
本发明最终确定适宜配方为酸枣枝屑60％、柿木屑10％、棉籽皮19％，麸皮10％、生石灰1％，料水比为1︰1.4进行拌料。
D.接种、培养、采收
将灭菌冷却后的出菇袋，无菌操作下按照5-10％的接种量接入步骤B所得谷粒菌种。可将接好种的菌袋置于菌袋排放于阴暗、清洁、通气好的环境中，温度应保持在24-26℃范围内，空气湿度勿超过70％，使菌种尽快萌发、定植。
待菌丝满袋后，加强光照和通气条件,提高空气湿度至90％,温度降到12-15℃。待料面出现黄水时解开袋口,去掉料面的老菌膜,拉直袋口,覆盖报纸,经常向报纸喷水,保持湿润。如此管理7d,料面就可长满米粒状原基。
当菌柄长至约2cm长时,要降温、降湿、加大通气量、减弱光照,以利于菇体整齐、健壮、挺拔。要减少喷水,空气湿度为75％左右,温度降至约5℃。完成抑制期管理后,温度保持在10-15℃,湿度为85％-90％,减弱光照和通气量,促使菌柄伸长。喷水时勿喷到子实体上。当菌柄长至13-15cm时,将其成丛采收。采收时,一手握住菌袋,一手把菇丛拔起,基部附带的培养料用剪子剪去(剪齐)。刚采收的金针菇应放在光线较暗、湿度较低的地方存放,防止其继续生长,否则,会使菌柄弯曲,影响商品质量。
当采完一茬菇后,清净料面并进行骚菌(即将表面的老菌膜刮掉)后盖膜或覆上报纸。每批金针菇收获后,房间必须进行清洁、熏蒸消毒。温度降至22℃左右,停水养菌3-4d后恢复培养料的湿度和空气湿度,以利下茬菇的产生。
将采完1-2茬菇的菌袋,环割掉下半部袋膜,立排于畦中,覆营养土至袋高的2/3,上口拉直后覆盖报纸。经常向畦中浇水和向报纸上喷水,以提高金针菇的产量。
综上所述，本发明所述酸枣枝屑为主料可用于栽培金针菇，因此，将酸枣枝作为可循环利用的生物资源，用于产业化开发具有重要的创新意义和现实价值，再结合细胞工程定向选育适宜分解酸枣枝屑的优良菌株，将会产生更好效果。

Claims (10)

1.一种利用酸枣枝屑培养金针菇的方法，包括如下步骤：
A.液体菌种的制备和培养；
B.谷粒菌种的制备和培养；
C.栽培用培养基的制备；
D.无菌条件下，将步骤B制备得到的谷粒菌种接入步骤C制备得到的培养基，进行培养、出菇管理、采收；
其特征在于：在步骤A或/和步骤B或/和步骤C的培养基中含有酸枣枝屑。
2.根据权利要求1所述的利用酸枣枝屑培养金针菇的方法，其特征包括：步骤A中金针菇的液体菌种培养基中作为底物诱导物提前加入酸枣枝屑；其优化液体菌种培养基配方重量百分比为：马铃薯20％，酸枣枝粉5％，麸皮3％，葡萄糖2％，KH2PO40.3％，MgSO40.15％，VB110mg/L，羧甲基纤维素0.3％，水1000mL，pH自然。
3.根据权利要求2所述利用酸枣枝屑培养金针菇的方法，所述步骤A中液体菌种的制备特征在于：
a.一级液体菌种的制备
无菌条件下，将市售母种接入一级液体培养基中，24℃、160r/min恒温振荡培养7d，即制得一级液体菌种；
所述一级液体菌种培养基包括：以重量百分比计，马铃薯20％，麸皮3％，葡萄糖2％，KH2PO40.3％，MgSO40.15％，CMC0.3％，VB110mg/L；
b.二级液体菌种的制备
所述二级液体菌种培养基配方重量百分比为：马铃薯20％，酸枣枝粉5％，麸皮3％，葡萄糖2％，KH2PO40.3％，MgSO40.15％，CMC0.3％，VB110mg/L。制备方法是将马铃薯、酸枣枝屑粉和麸皮加水1000mL共煮，开锅后保持微沸30分钟，过滤，取滤液，趁热加入其它组分，搅拌化开后，定容至水1000mL，分装，灭菌，待接种；
无菌条件下，将一级液体菌种以10％的接种量接入二级液体培养基中，25℃、160r/min恒温振荡培养7d，即制得二级液体菌种。
4.根据权利要求1所述的利用酸枣枝屑培养金针菇的方法，其特征包括：步骤B中金针菇的谷粒菌种培养基中也作为底物诱导物、提前加入酸枣枝屑；其优化的谷粒菌种培养基配方：麦粒84％，酸枣枝屑15％，生石灰1％。
5.根据权利要求4所述利用酸枣枝屑培养金针菇的方法，所述步骤B中谷粒菌种的制备特征在于：
将步骤A得到的二级液体菌种接入谷粒菌种培养基，接种量为10％，24℃培养至满，得到谷粒菌种。
6.根据权利要求1所述的利用酸枣枝屑培养金针菇的方法，其特征包括：步骤C中酸枣枝屑作为栽培金针菇的主料，栽培培养基重量组成包括：酸枣枝屑60％、棉籽皮19％、柿木屑10％、麸皮10％、生石灰1％。
7.根据权利要求6所述利用酸枣枝屑培养金针菇的方法，所述步骤C中酸枣枝屑培养基的制备特征在于：将酸枣枝、芦苇粉碎成木屑状，配以棉籽皮、麸皮和生石灰，料水比为1∶1.4，堆闷30min，装入容器内，灭菌，冷却后备用。
8.根据权利要求1所述利用酸枣枝屑培养金针菇的方法，其特征在于，步骤D中谷粒菌种的接种量为5-10％。
9.根据权利要求2所述利用酸枣枝屑培养基栽培金针菇的方法，其特征在于，液体培养基中所用酸枣枝屑，事先粉碎并过80目筛。
10.根据权利要求1所述利用酸枣枝屑培养金针菇的方法，其特征在于，步骤C中酸枣枝屑培养基的灭菌条件为121℃高压灭菌150min或100℃常压灭菌24h。
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