CN105017343B - 一种茎瘤芥硫代葡萄糖苷的提取方法、降解其为异硫代氰酸盐的方法及功能性食品 - Google Patents

Abstract

本发明公开一种茎瘤芥硫代葡萄糖苷的提取方法、降解其为异硫代氰酸盐的方法及功能性食品，所述硫苷的提取方法中，用甲醇水溶液对脱脂后的茎瘤芥进行超声波萃取，分别采用乙酸乙酯、葡聚糖凝胶离子交换柱和HPLC进行纯化，对纯化后的硫苷冷冻干燥得到硫苷纯品；所述降解硫苷为异硫代氰酸盐的方法，用缓冲溶液将硫苷配成悬浊液，并添加抗坏血酸，用硫苷酶对茎瘤芥硫苷进行降解得到降解产物；所述功能性饮料包括如下成分：红糖、荔枝汁、苹果酸、抗坏血酸、瓜尔豆胶、山梨酸钾、茎瘤芥硫代葡萄糖苷和水；所述功能性饼干中原料包括如下成分：低筋面粉、黄油、白砂糖、全鸡蛋蛋液和硫苷降解后的产物。本发明具有工艺流程方法简单、易于操作的优点。

Description

一种茎瘤芥硫代葡萄糖苷的提取方法、降解其为异硫代氰酸 盐的方法及功能性食品

技术领域

本发明属于硫代葡萄糖苷技术领域，具体涉及一种茎瘤芥硫代葡萄糖苷的提取方法、降解其为异硫代氰酸盐的方法及功能性食品。

背景技术

茎瘤芥是芥菜的一种，属于十字花科植物，一般茎瘤芥的茎用以加工为腌制榨菜，然而在腌制榨菜的加工过程中，大量茎瘤芥的叶片和种子（每年约为120万吨）却没有被充分利用，绝大部分被废弃在田间，这不仅造成了资源浪费，也造成了一定的废物污染。

硫代葡萄糖苷是一类含硫次级代谢物,多数分布在芸薹属植物中，它是十字花科蔬菜中的一种重要的次生代谢产物，目前的研究显示蔬菜所含的各种硫苷的水解产物或衍生物—异硫代氰酸盐等均有较强的抗菌能力，可以用于提高人体的抗菌活性能力；并且硫苷及其降解产物可以抑制细胞有丝分裂，从而促进细胞凋亡，具有一定的预防肿瘤细胞的形成作用，可以预防由多种致癌物诱发的小鼠肺癌、乳腺癌、食管癌、肝癌及胃癌的发生；此外异硫代氰酸盐还有风味作用、杀菌杀虫作用、调节内分泌功能、改善性功能。

鉴于硫代葡萄糖苷及其降解产物的上述有益保健功效，目前对硫代葡萄糖苷及其降解产物的需求量急剧上升，对硫代葡萄糖苷及其降解产物的提取分离研究已成为当前的研究热点。目前已发现的硫代葡萄糖苷有120多种，存在于十字花科蔬菜中的约有15种，而存在于芥菜类蔬菜中就有9种，且在芥菜类蔬菜中发现了两种不同的硫代葡萄糖苷分布类型；然而目前并未有从茎瘤芥中提取纯化硫代葡萄糖苷，并将提取的硫代葡萄糖苷降解为异硫代氰酸盐的方法。

近年来将功能性成分与传统食品相结合制备成功能性食品成为一大研究热点，现有例如猴头菇饼干等功能性食品在市场上进行销售，取得了不错的市场反响；然而，目前并没有以硫苷或其降解产物异硫代氰酸盐作为功能性成分，制备成功能性食品的相关研究。

发明内容

针对现有技术存在的上述不足，本发明的目的是提供一种茎瘤芥硫代葡萄糖苷的提取方法。

本发明的另一目的是提供一种降解上述茎瘤芥硫代葡萄糖苷为异硫代氰酸盐的方法。

本发明的又一目的是提供一种功能性饮料，以上述茎瘤芥硫代葡萄糖苷作为功能性成分。

本发明的再一个目的是提供一种功能性饼干，以上述降解后的产物作为功能性成分。

实现上述目的，本发明采用以下技术方案：一种茎瘤芥硫代葡萄糖苷的提取方法，包括如下步骤：

1）预处理：对茎瘤芥叶子和种子进行预处理；将茎瘤芥叶子清洗干净，并自然风干至叶子表面枯干，将风干后的茎瘤芥叶子于烘箱中烘干18~32小时，干燥温度为90~100℃；将茎瘤芥种子于烘箱中烘干40~80分钟，干燥温度为95~105℃；

2）研磨：将步骤1）烘干后的种子和叶子研磨成粉末，粉末用60目筛网过筛，取筛下物待用；

3）脱脂：取步骤2）所述筛下物用无水乙醚于55~65℃水浴中使用索氏提取器脱脂2~5小时，脱脂结束后取出脱脂筛下物自然风干除去乙醚；

4）粗硫苷的萃取：将步骤3）所述除去乙醚的脱脂筛下物在20~35℃下用甲醇水溶液进行超声波萃取，萃取后对萃取溶液进行过滤；其中，所述甲醇水溶液的体积浓度为65%~75%；所述脱脂筛下物与甲醇水溶液的质量体积比为1:5~20；所述超声波的功率为80 Hz；萃取时间为20~60分钟；

5）粗硫苷的除杂：将步骤4）过滤后的滤液于2800~3200 r/min的离心条件下离心12~18分钟，离心后取上清液待用；向所述上清液中加入乙酸乙酯并转移入分液漏斗中，在室温下萃取5～15分钟除去脂溶性杂质后，弃去有机相层，保留上层清液，分离后的上层清液采用真空旋转蒸发仪蒸发出甲醇和乙酸乙酯，得粗提物；其中，乙酸乙酯与上清液体积比为1：1；蒸发仪的转速为95~105 r/min，温度为50~60℃，蒸发120～180 min；

6）硫苷的纯化：将步骤5）得到的粗提物倒入DEAE Sephadex A-25葡聚糖凝胶离子交换柱中，当粗提物全部倒入时，以40 mL 0.02 mol/L醋酸钠溶液进行洗涤，然后以40 mL水冲洗，最后以40 mL 0.5mol/L硫酸钾溶液洗脱，收集洗脱液；将所述洗脱液真空抽滤后，用高效液相色谱仪进行纯化；其中，液相色谱的流动相采用体积浓度为20%的乙腈水溶液，流动相的流速为3 mL/min；固定相采用反相C18柱，离子极性为负离子，柱温为25~30℃；清洗液采用甲醇；检测波长为229 nm，硫苷的收集时间为3.75~4.2分钟，收集得到纯化硫苷液体；

7）冷冻干燥：将步骤6）得到的纯化硫苷液体进行冷冻干燥，于-40~-50℃下干燥3~5天，直至出现结晶时干燥结束，所述结晶物质即为硫苷纯品。

一种降解上述提取的茎瘤芥硫代葡萄糖苷为异硫代氰酸盐的方法，将硫苷酶和上述提取的茎瘤芥硫代葡萄糖苷按照1:2~10的质量比混合均匀为混合物，并用pH 5.0～7.0的柠檬酸-磷酸盐缓冲液将所述混合物配制成悬浊液，向所述悬浊液中添加抗坏血酸溶解均匀后，于振动培养箱中在40~65℃下降解0.5~2.5小时，将硫苷降解为异硫代氰酸盐，得到降解产物；其中，所述混合物与缓冲液的料液比为1: 5~25，所述抗坏血酸与所述茎瘤芥硫代葡萄糖苷的质量比为1:20~250，振动培养箱的转速为120～150 r/min。

一种功能性饮料，包括如下重量份数的成分：红糖8~10份、荔枝汁10~12份、苹果酸0.2~0.3份、抗坏血酸0.1~0.2份、瓜尔豆胶0.5~1份、山梨酸钾0.03~0.05份、上述提取的茎瘤芥硫代葡萄糖苷0.003~0.03份和水70~80份；所述荔枝汁由新鲜荔枝直接剥皮去核榨汁而得。

一种功能性饼干，由原料经成形烘烤后制得，所述原料包括如下重量份数的成分：低筋面粉7~8份、黄油5~6份、白砂糖2~3份、全鸡蛋蛋液3~4份和上述降解后的降解产物0.05~0.5份。

相比现有技术，本发明具有如下有益效果：

1、本发明利用涪陵丰富的茎瘤芥资源，提出了一种茎瘤芥中硫代葡萄糖苷的提取方法，对茎瘤芥种子和叶子中的硫代葡萄糖苷进行提取，提取率高达50～77%；并提出将提取的硫代葡萄糖苷通过酶解的方式降解为异硫代氰酸盐的方法，填补了现有技术中并未有茎瘤芥硫苷相关提取和降解方法的空缺。

2、本发明提高了茎瘤芥的附加价值，通过本发明方法从茎瘤芥种子和叶子中提取并降解出具有功能性的异硫代氰酸盐，将硫苷和降解产物与食品相结合，开发出功能性饼干和饮料，发挥硫苷和异硫代氰酸盐的预防保健功效，使消费者在食用本发明功能性饼干和饮料后可达到提高机体机能，提高机体的抗氧化能力、免疫力和抗菌能力的效果。

3、本发明茎瘤芥硫苷的提取、纯化方法目前尚未有相关报道，本发明方法的提出填补了现有的技术空缺，且本发明工艺流程简单、易于操作，具有良好的可推广前景。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步详细说明，下述实施例中所用原料如无特殊说明，即为普通市售。

本发明提取和降解的工艺流程如下：

茎瘤芥叶子清洗、风干→将种子、叶子在电热鼓风干燥箱内干燥→研成粉末→乙醚脱脂→甲醇萃取→离心取上层清液→乙酸乙酯除杂→真空旋转蒸发除去甲醇和乙酸乙酯→葡聚糖凝胶离子交换柱除杂→色谱仪纯化→真空冷冻干燥机浓缩→茎瘤芥硫苷纯品→降解→异硫代氰酸盐

实施例1

1、一种茎瘤芥硫代葡萄糖苷的提取方法，包括如下步骤：

1）预处理：将茎瘤芥叶子清洗干净，并自然风干至叶子表面枯干；将风干后的茎瘤芥叶子于烘箱中烘干24小时，干燥温度为95℃；茎瘤芥种子于烘箱中烘干60分钟，干燥温度为100℃；

2）研磨：将步骤1）烘干后的种子和叶子研磨成粉末，粉末用60目筛网过筛，取筛下物待用；

3）脱脂：取步骤2）所述筛下物用无水乙醚于60℃水浴中使用索氏提取器脱脂，其中，脱脂时间为2小时，脱脂结束后取出脱脂筛下物自然风干除去乙醚；

4）粗硫苷的萃取：将步骤3）除去乙醚的脱脂筛下物在28℃下用甲醇水溶液进行超声波萃取，萃取后对萃取溶液进行过滤；其中，所述甲醇水溶液的体积浓度为70%；所述脱脂筛下物与甲醇水溶液的质量体积比为1:15；所述超声波的功率为80 Hz；萃取时间为45分钟；

5）粗硫苷的除杂：将步骤4）过滤后的滤液于3000 r/min的离心条件下离心15分钟，离心后取上清液待用；用乙酸乙酯对所述上清液进行除杂，向上清液中加入乙酸乙酯并转移入分液漏斗中，在室温下萃取静置10分钟除去脂溶性杂质后，弃去有机相层，保留上层清液，分离后的上层清液采用真空旋转蒸发仪蒸发出甲醇和乙酸乙酯，得到粗提物；所述乙酸乙酯与上清液体积比为1：1；蒸发仪的条件设置为转速100 r/min，温度为55℃，蒸发150min；

6）硫苷的纯化：将步骤5）得到的粗提物倒入DEAE Sephadex A-25葡聚糖凝胶离子交换柱中，当粗提物全部倒入时，以40 mL 0.02 mol/L醋酸钠溶液进行洗涤，然后以40 mL水冲洗，最后以40 mL0.5 mol/L硫酸钾溶液洗脱，收集洗脱液；将所述洗脱液真空抽滤后，用高效液相色谱仪进行纯化；其中，流动相采用体积浓度为20%的乙腈水溶液，所述流动相的流速为3 mL/min；固定相采用反相C18柱，离子极性为负离子，柱温为25~30℃；清洗液采用甲醇；检测波长为229 nm，硫苷的收集时间为3.75~4.2分钟，收集得到纯化硫苷液体；

7）冷冻干燥：将步骤6）得到的纯化硫苷液体进行冷冻干燥，于-45℃下干燥3~5天，直至出现结晶时干燥结束，所述结晶物质即为硫苷纯品。

参照国际标准化组织于1992年颁布的HPLC测定油菜中硫苷分量标准（标准号ISO9167-1：1992（E）），来测定硫苷含量。以每克干的茎瘤芥粉末中所含硫苷的微摩尔数表示，并结合峰面积计算，公式为：硫苷含量（微摩尔数）=AG/AS×n/m×Kg×100/100-wt；其中AG（脱硫硫苷峰面积的数值）；AS（标准脱硫硫苷峰面积的数值）；Kg（标准脱硫硫苷相对校正系数）；m（试样质量数值）；n（加入标准物质的量）；wt （试样中水分及挥发物含量，以质量面分比表示）；计算得到采用本实施例方法茎瘤芥中总的硫苷的提取率77%，纯度达到90%以上，收率为0.132%。

2、一种降解上述提取的茎瘤芥中硫代葡萄糖苷为异硫代氰酸盐的方法，将硫苷酶和上述提取的硫苷纯品按照1:3.4的质量比混合均匀为混合物，并用pH 6.5的柠檬酸-磷酸盐缓冲液配制成悬浊液，向所述悬浊液中添加抗坏血酸，溶解均匀后于振动培养箱中在55℃下降解1小时，将硫苷降解为异硫代氰酸盐；其中，所述混合物与缓冲液的料液比为1:10，所述抗坏血酸与所述硫苷纯品的质量比为1:167，振动培养箱的转速为120 r/min。

参照NY/T1596—2008《油菜饼粕中异硫代氰酸盐的测定硫脲比色法》，测得硫苷的降解率，经过计算得：采用本实施例方法纯的硫苷降解为异硫代氰酸盐的降解率77.5%。

实施例2

1、一种茎瘤芥中硫代葡萄糖苷的提取方法，包括如下步骤：

1）预处理：将茎瘤芥叶子清洗干净，并自然风干至叶子表面枯干；将风干后的茎瘤芥叶子于烘箱中烘干18小时，干燥温度为100℃；茎瘤芥种子于烘箱中烘干40分钟，干燥温度为105℃；

2）研磨：将步骤1）烘干后的种子和叶子研磨成粉末，粉末用60目筛网过筛，取筛下物待用；

3）脱脂：取步骤2）所述筛下物用无水乙醚于55℃水浴中使用索氏提取器脱脂，其中，脱脂时间为4小时，脱脂结束后取出脱脂筛下物自然风干除去乙醚；

4）粗硫苷的萃取：将步骤3）所述脱脂筛下物在35℃下用甲醇水溶液进行超声波萃取，萃取后对萃取溶液进行过滤；其中，所述甲醇水溶液的体积浓度为75%；所述脱脂筛下物与甲醇水溶液的质量体积比为1:10；所述超声波的功率为80 Hz；萃取时间为60分钟；

5）粗硫苷的除杂：将步骤4）过滤后的滤液于3200 r/min的离心条件下离心12分钟，离心后取上清液待用；用乙酸乙酯对所述上清液进行除杂，向上清液中加入乙酸乙酯并转移入分液漏斗中，在室温下萃取静置15分钟除去脂溶性杂质后，弃去有机相层，保留上层清液，分离后的上层清液采用真空旋转蒸发仪蒸发出甲醇和乙酸乙酯，得粗提物；所述乙酸乙酯与上清液体积比为1：1；蒸发仪的条件设置转速为105 r/min，温度为50℃，蒸发180min；

6）硫苷的纯化：将步骤5）得到的粗提物倒入DEAE Sephadex A-25葡聚糖凝胶离子交换柱中，当粗提物全部倒入时，以40 mL 0.02 mol/L醋酸钠溶液进行洗涤，然后以40 mL水冲洗，最后以40 mL 0.5 mol/L硫酸钾溶液洗脱，收集洗脱液；将所述洗脱液真空抽滤后，用高效液相色谱仪进行纯化；其中，流动相采用体积浓度为20%的乙腈水溶液，所述流动相的流速为3 mL/min；固定相采用反相C18柱，离子极性为负离子，柱温为25~30℃；清洗液采用甲醇；检测波长为229 nm，进行洗脱，硫苷的收集时间为3.75~4.2分钟，收集得到纯化硫苷液体；

7）冷冻干燥：将步骤6）得到的纯化硫苷液体进行冷冻干燥，于-50℃下干燥3~5天，直至出现结晶时干燥结束，所述结晶物质即为硫苷纯品。

采用与实施例1相同的方法（标准号ISO9167-1：1992（E）），计算得到采用本实施例方法茎瘤芥中总的硫苷的提取率65%，纯度达到90%以上，收率为0.132%。

2、一种降解上述提取的茎瘤芥硫代葡萄糖苷为异硫代氰酸盐的方法，将硫苷酶和上述提取的硫苷纯品按照1:5的质量比混合均匀为混合物，并用pH 5.5的柠檬酸-磷酸盐缓冲液配制成悬浊液，向所述悬浊液中添加抗坏血酸，溶解均匀后于振动培养箱中在45℃下降解1.5小时，将硫苷降解为异硫代氰酸盐；其中，所述混合物与缓冲液的料液比为1:15，所述抗坏血酸与所述硫苷纯品的质量比为1:250，振动培养箱的转速为130 r/min。

参照NY/T1596—2008《油菜饼粕中异硫代氰酸盐的测定硫脲比色法》，测得硫苷的降解率，经过计算得：采用本实施例方法纯的硫苷降解为异硫代氰酸盐的降解率51.5%。

实施例3

1、一种茎瘤芥中硫代葡萄糖苷的提取方法，包括如下步骤：

1）预处理：将茎瘤芥叶子清洗干净，并自然风干至叶子表面枯干；将风干后的茎瘤芥叶子于烘箱中烘干32小时，干燥温度为90℃；茎瘤芥种子于烘箱中烘干80分钟，干燥温度为95℃；

2）研磨：将步骤1）烘干后的种子和叶子研磨成粉末，粉末用60目筛网过筛，取筛下物待用；

3）脱脂：取步骤2）所述筛下物用无水乙醚于65℃水浴中使用索氏提取器脱脂，其中，脱脂时间为4小时，脱脂结束后取出脱脂筛下物自然风干除去乙醚；

4）粗硫苷的制备：将步骤3）所述除去乙醚的脱脂筛下物在20℃下用甲醇水溶液进行超声波萃取，萃取后对萃取溶液进行过滤；其中，所述甲醇水溶液的体积浓度为65%；所述脱脂筛下物与甲醇水溶液的质量体积比为1:5；所述超声波的功率为80 Hz；萃取时间为20分钟；

5）粗硫苷的除杂：将步骤4）过滤后的滤液于2800 r/min的离心条件下离心18分钟，离心后取上清液待用；用乙酸乙酯对所述上清液进行除杂，向上清液中加入乙酸乙酯并转移入分液漏斗中，在室温下萃取静置5分钟除去脂溶性杂质，弃去有机相层，保留上层清液，分离后的上层清液采用真空旋转蒸发仪蒸发出甲醇和乙酸乙酯，得粗提物；所述乙酸乙酯与上清液体积比为1：1；蒸发仪的条件设置转速为95 r/min，温度为60℃，蒸发120 min；

6）硫苷的纯化：将步骤5）得到的粗提物倒入DEAE Sephadex A-25葡聚糖凝胶离子交换柱中，当粗提物全部倒入时，以40 mL 0.02 mol/L醋酸钠溶液进行洗涤，然后以40 mL水冲洗，最后以40 mL 0.5 mol/L硫酸钾溶液洗脱，收集洗脱液；将所述洗脱液真空抽滤后，用高效液相色谱仪进行纯化；其中，流动相采用体积浓度为20%的乙腈水溶液，所述流动相的流速为3mL/min；固定相采用反相C18柱，离子极性为负离子，柱温为25~30℃；清洗液采用甲醇；检测波长为229 nm，硫苷的收集时间为3.75~4.2分钟，收集得到纯化硫苷液体；

7）冷冻干燥：将步骤6）得到的纯化硫苷液体进行冷冻干燥，于-40℃下干燥3~5天，直至出现结晶时干燥结束，所述结晶物质即为硫苷纯品。

采用与实施例1相同的方法（标准号ISO9167-1：1992（E）），计算得到采用本实施例方法茎瘤芥中总的硫苷的提取率49.8%，纯度达到90%以上，收率为0.132%。

2、一种降解上述提取的茎瘤芥中硫代葡萄糖苷为异硫代氰酸盐的方法，将硫苷酶和上述所提取的硫苷纯品按照1:10的质量比混合均匀为混合物，并用pH7.0的柠檬酸-磷酸盐缓冲液配制成悬浊液，向所述悬浊液中添加抗坏血酸，溶解均匀后于振动培养箱中在65℃下降解0.5小时，将硫苷降解为异硫代氰酸盐；其中，所述混合物与缓冲液的料液比为1:20，所述抗坏血酸与所述硫苷纯品的质量比为1:100，振动培养箱的转速为120 r/min。

参照NY/T1596—2008《油菜饼粕中异硫代氰酸盐的测定硫脲比色法》，测得硫苷的降解率，经过计算得：采用本实施例方法纯的硫苷降解为异硫代氰酸盐的降解率40%。

实施例4 一种功能性饮料

将上述提取的茎瘤芥硫代葡萄糖苷与其他原料复配，制备成功能性饮料；所述功能性饮料的配方具体如表1所示，所述荔枝汁由新鲜荔枝直接剥皮去核榨汁而得：

表1 功能性饮料的配方

采用上述配方制得的功能性饮料色泽均匀、无沉淀；具有纯正的香气，香气协调一体；口感方面，具有果汁清爽的口感，香味协调，余味悠长。

实施例5 一种功能性饼干

将上述硫苷降解后的降解产物与其他原料复配，通过成形烘烤后制备成功能性饼干；所述功能性饼干的原料配方具体如表2所示：

表2 功能性饼干的原料配方

采用上述配方的原料成形烘烤后制得的功能性饼干，香脆酥松可口，色泽金黄且均匀，无油腻感和焦糊味，具有饼干和黄油特有的气味。

最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的宗旨和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。

Claims (3)

1.一种茎瘤芥硫代葡萄糖苷的提取方法，其特征在于，包括如下步骤：

1）预处理：对茎瘤芥叶子和种子进行预处理；将茎瘤芥叶子清洗干净，并自然风干至叶子表面枯干，将风干后的茎瘤芥叶子于烘箱中烘干18~32小时，干燥温度为90~100℃；将茎瘤芥种子于烘箱中烘干40~80分钟，干燥温度为95~105℃；

2）研磨：将步骤1）烘干后的种子和叶子研磨成粉末，粉末用60目筛网过筛，取筛下物待用；

3）脱脂：取步骤2）所述筛下物用无水乙醚于55~65℃水浴中使用索氏提取器脱脂2~5小时，脱脂结束后取出脱脂筛下物自然风干除去乙醚；

4）粗硫苷的萃取：将步骤3）所述除去乙醚的脱脂筛下物在20~35℃下用甲醇水溶液进行超声波萃取，萃取后对萃取溶液进行过滤；其中，所述甲醇水溶液的体积浓度为65%~75%；所述脱脂筛下物与甲醇水溶液的质量体积比为1:5~20；所述超声波的功率为80 Hz；萃取时间为20~60分钟；

5）粗硫苷的除杂：将步骤4）过滤后的滤液于2800~3200 r/min的离心条件下离心12~18分钟，离心后取上清液待用；向所述上清液中加入乙酸乙酯并转移入分液漏斗中，在室温下萃取5～15分钟除去脂溶性杂质后，弃去有机相层，保留上层清液，分离后的上层清液采用真空旋转蒸发仪蒸发出甲醇和乙酸乙酯，得粗提物；其中，乙酸乙酯与上清液体积比为1：1；蒸发仪的转速为95~105 r/min，温度为50~60℃，蒸发120～180 min；

6）硫苷的纯化：将步骤5）得到的粗提物倒入DEAE Sephadex A-25葡聚糖凝胶离子交换柱中，当粗提物全部倒入时，以40 mL 0.02 mol/L醋酸钠溶液进行洗涤，然后以40 mL水冲洗，最后以40 mL 0.5mol/L硫酸钾溶液洗脱，收集洗脱液；将所述洗脱液真空抽滤后，用高效液相色谱仪进行纯化；其中，液相色谱的流动相采用体积浓度为20%的乙腈水溶液，流动相的流速为3 mL/min；固定相采用反相C18柱，离子极性为负离子，柱温为25~30℃；清洗液采用甲醇；检测波长为229 nm，硫苷的收集时间为3.75~4.2分钟，收集得到纯化硫苷液体；

7）冷冻干燥：将步骤6）得到的纯化硫苷液体进行冷冻干燥，于-40~-50℃下干燥3~5天，直至出现结晶时干燥结束，所述结晶物质即为硫苷纯品。

2.一种功能性饮料，其特征在于，包括如下重量份数的成分：红糖8~10份、荔枝汁10~12份、苹果酸0.2~0.3份、抗坏血酸0.1~0.2份、瓜尔豆胶0.5~1份、山梨酸钾0.03~0.05份、权利要求1所提取的茎瘤芥硫代葡萄糖苷0.003~0.03份和水70~80份；所述荔枝汁由新鲜荔枝直接剥皮去核榨汁而得。

3.根据权利要求2所述功能性饮料，其特征在于，包括如下优选重量份数的成分：红糖9份、荔枝汁11份、苹果酸0.275份、抗坏血酸0.165份、瓜尔豆胶1份、山梨酸钾0.05份、权利要求1所提取的茎瘤芥硫代葡萄糖苷0.01份和水78份。