CN104973909B - 一种蛹虫草液体培养基及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种蛹虫草液体培养基及其制备方法，其特征在于：它由糖、蚕蛹提取液、蛋白胨、磷酸二氢钾、磷酸二氢钠、硫酸镁和水组成，由蚕蛹提取液和蛋白胨联合作为氮源，其中各组分的浓度为：糖15‑30g/L，蚕蛹提取液5‑30(蚕蛹提取液对应的蚕蛹粉的重量)g/L；蛋白胨5‑30g/L；磷酸二氢钾1.2‑1.5g/L；磷酸二氢钠0.8‑1.2g/L。本发明所述液体培养基培养出的虫草菌丝体产量高，配方简单，易于推广，并且可以满足人们提高菌丝体产量的需求。

Description

一种蛹虫草液体培养基及其制备方法

技术领域

本发明属于食用菌栽培领域，具体涉及一种蛹虫草液体培养基及其制备方法。

技术背景

利用虫草液体培养生产虫草替代品，既可有效保护虫草这一珍贵资源，又不受气候、地理环境和虫草寄生条件严格的限制，适合于工业化大规模生产。虫草菌丝体中含有多种活性成分，如虫草多糖、胆甾醇、真菌甾醇、麦角甾醇、腺嘌呤核苷、腺嘌呤、尿嘧啶、蛋白质、多种氨基酸、硬脂酸、软脂酸、D-甘露醇、维生素、有机酸和微量元素。人工生产出的替代品如菌丝体其成分和药效也与天然虫草相似。目前蛹虫草的人工培养仍然不能满足人们的需求，所以高产量蛹虫草培养基一直是人们追求的。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明的目的在于提供一种蛹虫草液体培养基及其制备方法，该液体培养基培养出的虫草菌丝体产量高，配方简单，易于推广，并且可以满足人们提高菌丝体产量的需求。

为实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：

一种蛹虫草液体培养基，其特征在于：它由糖、蚕蛹提取液、蛋白胨、磷酸二氢钾、磷酸二氢钠、硫酸镁和水组成，由蚕蛹提取液和蛋白胨联合作为氮源。

作为优选，所述蚕蛹提取液由蚕蛹粉加水，文火煮后冷却，沉淀后用纱布过滤，滤液离心后，从而制得蚕蛹提取液。

作为优选，各组分的浓度为：糖15-30g/L，蚕蛹提取液5-30(蚕蛹提取液对应的蚕蛹粉的重量)g/L；蛋白胨5-30g/L；磷酸二氢钾1.2-1.5g/L；磷酸二氢钠0.8-1.2g/L；硫酸镁1g/L。

作为优选，各组分的浓度为：糖25g/L，蚕蛹提取液15-20(蚕蛹提取液对应的蚕蛹粉的重量)g/L；蛋白胨10-15g/L；磷酸二氢钾1.5g/L；磷酸二氢钠1g/L；硫酸镁1g/L。

作为优选，所述蚕蛹提取液(对应蚕蛹粉的质量)：蛋白胨的质量比为1-3：1-2。

作为优选，所述蚕蛹提取液(对应蚕蛹粉的质量)：蛋白胨的质量比为1-2：1。

作为优选，所述的糖是可提供碳源的碳水化合物，葡萄糖或麦芽糖。

作为优选，所述蚕蛹提取液用的蚕蛹粉是用蚕蛹或缫丝后蚕蛹制得。

一种蛹虫草液体培养基的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1)在蚕蛹粉中加入水，文火煮8-60min，冷却、沉淀后用纱布过滤，取滤液；

2)取蚕蛹提取液，加入糖、蛋白胨、磷酸二氢钾、磷酸二氢钠和硫酸镁，搅拌溶解，加入水定容至所需体积，分装，121摄氏度1.1Mpa下高压灭菌20-30min，冷却待用。

一种蛹虫草液体培养基在蛹虫草菌丝体培养中的应用。

本发明的有益效果是：本发明所述液体培养基培养出的虫草菌丝体产量高，配方简单，易于推广，并且可以满足人们提高菌丝体产量的需求。

附图说明

图1是本发明不同培养基培养菌丝体质量的示意图。

具体实施方式

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

一种蛹虫草液体培养基，它由糖、蚕蛹提取液、蛋白胨、磷酸二氢钾、磷酸二氢钠、硫酸镁和水组成，由蚕蛹提取液和蛋白胨联合作为氮源。所述的糖是可提供碳源的碳水化合物，葡萄糖或麦芽糖。所述蚕蛹提取液用的蚕蛹粉是用蚕蛹或缫丝后蚕蛹制得。本发明所述蚕蛹提取液是在水中加入5-100g/L蚕蛹粉，文火煮后冷却，沉淀后上清用纱布过滤，滤液离心后取上清，从而制得蚕蛹提取液。

本发明所述各组分的浓度为：糖15-30g/L，蚕蛹提取液5-30(蚕蛹提取液对应的蚕蛹粉的重量)g/L；蛋白胨5-30g/L；磷酸二氢钾1.2-1.5g/L；磷酸二氢钠0.8-1.2g/L；硫酸镁1g/L。更为优选的，其各组分的浓度为：糖25g/L，蚕蛹提取液15-20(蚕蛹提取液对应的蚕蛹粉的重量)g/L；蛋白胨10-15g/L；磷酸二氢钾1.5g/L；磷酸二氢钠1g/L；硫酸镁1g/L。

本发明所述的蚕蛹提取液(对应蚕蛹粉的质量)：蛋白胨的质量比为1-3：1-2。更为优选的，蛋白胨的质量比为1-2：1。

一种蛹虫草液体培养基的制备方法，包括以下步骤：

1)在蚕蛹粉中加入水，文火煮8-60min，冷却、沉淀后用纱布过滤，取滤液；

2)取蚕蛹提取液，加入糖、蛋白胨、磷酸二氢钾、磷酸二氢钠和硫酸镁，搅拌溶解，加入水定容至所需体积，分装，121摄氏度、1.1Mpa下高压灭菌20-30min，冷却待用。

一种蛹虫草液体培养基在蛹虫草菌丝体培养中的应用。

实施例1

一种蛹虫草液体培养基及其制备方法，包括如下步骤：

1、培养基的配制

A、蚕蛹提取液的配制

按照5-100g/L称取所需蚕蛹粉(优选30g/L)，加入水中搅拌均匀，文火煮8-60min(优选30min)，冷却、沉淀后用8-16层纱布过滤(优选8层)，取滤液，5000-10000rpm(优选8000rpm)离心5-10min(优选8min)，取上清，补水至初始加入水的体积，混匀备用。

B、培养基配制

称(量)取培养基各组分，培养基的组成成分为：葡萄糖或麦芽糖(优选葡萄糖)15-30g/L，磷酸二氢钾1.2-1.5g/L；磷酸二氢钠0.8-1.2g/L，蚕蛹提取液0-50(蚕蛹提取液对应的蚕蛹粉的重量)g/L；蛋白胨0-50g/L；硫酸镁1g/L。按下文中表1的比例称取以上各固体成分，加入对应比例的蚕蛹提取液，然后加入水混匀，定容到所需体积。本实施例具体获得如表1所示的10种不同培养基各3瓶，每瓶100ml。

表1 各培养基成分表(单位g/100ml)

C、培养基灭菌

将配置好的液体培养基高压蒸汽灭菌1.1Mpa、121℃、20min。冷却后备用。

2、一种蛹虫草液体培养基的应用，

1)虫草菌丝体培养

在超净台中或无菌状态下接种虫草菌体(菌种为Cordyceps militaris(L)Link)，液体菌种，密度控制在3-5个菌球/mL，按体积比1:100接种，每种培养基做三个重复。在温度22℃条件下避光静置培养24h，然后22℃、170rpm继续避光培养72h。

2)收集菌丝体

收集菌液，8000r/min离心10min，除去上清液，将沉淀(菌丝体)60℃烘干至恒重，冷却称重，各种培养基获得菌丝体重量如表2和图1所示。

表2 各组分培养基培养菌丝体重量(单位g)

从实验结果我们可以总结出，在相同培养条件下，蛋白胨和蚕蛹提取液同时作为氮源同时添加时，其菌丝体的产量明显高于只用蛋白胨和蚕蛹提取液其中一种作为氮源培养基培养的菌丝体产量，且差异显著。另外当蚕蛹提取物和蛋白胨同时添加到培养基时，当蚕蛹提取物和蛋白胨的质量比例在1:2以上时菌丝体产量相对较高，其中当蚕蛹提取物和蛋白胨的质量比例在1:1-2:1时菌丝体产量最高。这里所说的蚕蛹提取物和蛋白胨的质量比例是指制得培养基中所含蚕蛹提取液对应的蚕蛹粉的质量与蛋白胨的质量比。

以上所述实施例仅是为充分说明本发明而所举的较佳的实施例，本发明的保护范围不限于此。本技术领域的技术人员在本发明基础上所作的等同替代或变换，均在本发明的保护范围之内。

Claims (8)

1.一种蛹虫草液体培养基，其特征在于：它由糖、蚕蛹提取液、蛋白胨、磷酸二氢钾、磷酸二氢钠、硫酸镁和水组成，由蚕蛹提取液和蛋白胨联合作为氮源；所述蚕蛹提取液是在水中加入5-100g/L蚕蛹粉，文火煮后冷却，沉淀后上清用纱布过滤，滤液离心后取上清，从而制得蚕蛹提取液；蚕蛹提取液：蛋白胨的质量比为1-3：1-2，所述蚕蛹提取液对应蚕蛹粉的质量。

2.如权利要求1所述的蛹虫草液体培养基，其特征在于：各组分的浓度为：糖15-30g/L，蚕蛹提取液5-30g/L，蛋白胨5-30g/L，磷酸二氢钾1.2-1.5g/L，磷酸二氢钠0.8-1.2g/L，硫酸镁1g/L，所述蚕蛹提取液对应蚕蛹粉的重量。

3.如权利要求1所述的蛹虫草液体培养基，其特征在于：各组分的浓度为：糖25g/L，蚕蛹提取液15-20g/L，蛋白胨10-15g/L，磷酸二氢钾1.5g/L，磷酸二氢钠1g/L，硫酸镁1g/L，所述蚕蛹提取液对应蚕蛹粉的重量。

4.如权利要求1所述的蛹虫草液体培养基，其特征在于：蚕蛹提取液：蛋白胨的质量比为1-2：1，所述蚕蛹提取液对应蚕蛹粉的质量。

5.如权利要求1所述的蛹虫草液体培养基，其特征在于：所述的糖是可提供碳源的碳水化合物。

6.如权利要求1所述的蛹虫草液体培养基，其特征在于所述蚕蛹提取液用的蚕蛹粉是用蚕蛹或缫丝后蚕蛹制得。

7.一种如权利要求1-6任一项所述蛹虫草液体培养基的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1)在蚕蛹粉中加入水，文火煮8-60min，冷却、沉淀后用纱布过滤，取滤液；

2)取蚕蛹提取液，加入糖、蛋白胨、磷酸二氢钾、磷酸二氢钠和硫酸镁，搅拌溶解，加入水定容至所需体积，分装，121摄氏度、1.1Mpa下高压灭菌20-30min，冷却待用。

8.一种权利要求1-6中任一项所述蛹虫草液体培养基在蛹虫草菌丝体培养中的应用。