CN104914178A - 高效液相色谱法测定蜂蜜中果糖和葡萄糖的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种高效液相色谱法测定蜂蜜中果糖和葡萄糖的方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1:样品预处理,取样品5g用30ml水溶解后用乙醇定容至100ml,过滤后备用;步骤2:采用高效液相色谱法进行分析;高效液相色谱法进行分析的参数设置如下:流动相:乙醇-水;流速:1ml/min;柱温:40℃;色谱柱:Thermo Acclaim混合基质色谱柱,4.6μm×250mm,5μm。本发明的目的在于提供一种高效液相色谱法测定蜂蜜中果糖和葡萄糖的方法。

Description

高效液相色谱法测定蜂蜜中果糖和葡萄糖的方法
技术领域
本发明涉及检测领域,特别是一种高效液相色谱法测定蜂蜜中果糖和葡萄糖的方法。
背景技术
GB/T18932.22-2003《蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖含量的测定方法》中采用液相色谱法测定蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖含量,该方法测定准确,主峰出峰清晰、各组分能够清楚的分离,作为国标,虽然具有高度的准确性和稳定性,但是依然在测试精度上有提高的可能。
电喷雾检测器(CAD)技术的工作原理是将分析物转化成溶质颗粒。颗粒的大小随着被分析物的含量而增加;溶质颗粒与带正电荷的氮气颗粒相撞,电荷随之转移到颗粒上(溶质颗粒越大,带电越多);溶质颗粒把它们的电荷转移给收集器,通过高灵敏度的静电检测计测出溶质颗粒的带电量,由此产生的信号电流与溶质的含量成正比。检测结果与分析物颗粒有关,信号电流与样品中分析物的质量成正比,因此无论何种化合物,只要进样质量相同响应基本都一致。使得需要在不同检测器(比如示差折光(RI)、低波长紫外(UV)、蒸发光散射(ELSD)等)上完成的分析任务只需在一台通用型检测器上即可完成,极大提高了分析效率。CAD检测技术拥有更高的灵敏度,更宽的动态检测范围以及更一致的检测结果。可适用于检测所有非挥发或半挥发性物质(如药物化合物、碳水化合物、蛋白质、类固醇、脂类等)。而不论被测分子结构如何。可作为UV和质谱检测器的强有力补充。
发明内容
本发明的目的在于提供一种分离效率高、测定准确的高效液相色谱法测定蜂蜜中果糖和葡萄糖的方法。
本发明的技术方案为:一种高效液相色谱法测定蜂蜜中果糖和葡萄糖的方法,包括以下步骤:
步骤1:样品预处理,取样品5g用30ml水溶解后用乙醇定容至100ml,过滤后备用;
步骤2:采用高效液相色谱法进行分析;
高效液相色谱法进行分析的参数设置如下:
流动相:乙醇-水;流速:1ml/min柱温:40℃
色谱柱:Thermo Acclaim混合基质色谱柱,4.6μm×250mm,5μm;所述的流动相中乙醇和水的体积比为60:40~80:20;所述的流动相在0~20分钟内乙醇和水的体积比逐渐从60:40均匀上升至80:20,并在20~30分钟时间段内保持乙醇和水的体积比为80:20;
所述的高效液相色谱仪的型号为:hermo U3000高效液相色谱仪,所述的hermo U3000高效液相色谱仪附带Corona Ultra电喷雾检测器。
在上述的高效液相色谱法测定蜂蜜中果糖和葡萄糖的方法中,所述的Corona Ultra电喷雾检测器与Thermo Acclaim混合基质色谱柱的出口连接。
本发明的有益效果如下:
采用上述方案可以有效的提高果糖和葡萄糖的分析精度,特别是采用Corona Ultra电喷雾检测器后能够全程显现较为规整的线性关系,即使在极低浓度下也能准确测定,避免了传统高效液相色谱在低浓度范围内呈曲线显示。
具体实施方式
下面结合具体实施方式,对本发明的技术方案作进一步的详细说明,但不构成对本发明的任何限制。
实施例1
一种高效液相色谱法测定蜂蜜中果糖和葡萄糖的方法,包括以下步骤:
步骤1:样品预处理,取样品5g用30ml水溶解后用乙醇定容至100ml,过滤后备用;
步骤2:采用高效液相色谱法进行分析;
高效液相色谱法进行分析的参数设置如下:
流动相:乙醇-水;流速:1ml/min柱温:40℃
色谱柱:Thermo Acclaim混合基质色谱柱,4.6μm×250mm,5μm;所述的流动相中乙醇和水的体积比为60:40~80:20;所述的流动相在0~20分钟内乙醇和水的体积比逐渐从60:40均匀上升至80:20,并在20~30分钟时间段内保持乙醇和水的体积比为80:20;
所述的高效液相色谱仪的型号为:hermo U3000高效液相色谱仪,所述的hermo U3000高效液相色谱仪附带Corona Ultra电喷雾检测器,所述的Corona Ultra电喷雾检测器与Thermo Acclaim混合基质色谱柱的出口连接。
上述测试方法采用梯度洗脱的方式进行洗脱,能够在较宽的范围内实现待测成分的有效分离,同时,采用Corona Ultra电喷雾检测器能够实现极低浓度时的准确测量,克服了传统测试方法的不稳定性。
以上所述的仅为本发明的较佳实施例,凡在本发明的精神和原则范围内所作的任何修改、等同替换和改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (2)

1.一种高效液相色谱法测定蜂蜜中果糖和葡萄糖的方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1:样品预处理,取样品5g用30ml水溶解后用乙醇定容至100ml,过滤后备用;
步骤2:采用高效液相色谱法进行分析;
高效液相色谱法进行分析的参数设置如下:
流动相:乙醇-水;流速:1ml/min;柱温:40℃;
色谱柱:Thermo Acclaim混合基质色谱柱,4.6μm×250mm,5μm;所述的流动相中乙醇和水的体积比为60:40~80:20;所述的流动相在0~20分钟内乙醇和水的体积比逐渐从60:40均匀上升至80:20,并在20~30分钟时间段内保持乙醇和水的体积比为80:20;
所述的高效液相色谱仪的型号为:hermo U3000高效液相色谱仪,所述的hermo U3000高效液相色谱仪附带Corona Ultra电喷雾检测器。
2.根据权利要求1所述的高效液相色谱法测定蜂蜜中果糖和葡萄糖的方法,其特征在于,所述的Corona Ultra电喷雾检测器与Thermo Acclaim混合基质色谱柱的出口连接。
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Assignor: Wuzhou food and Drug Inspection Institute

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Denomination of invention: Method for determining fructose and glucose in honey through high performance liquid chromatography

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