CN104871830B - 以豆虫为载体种植蛹虫草的方法 - Google Patents

以豆虫为载体种植蛹虫草的方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种以豆虫为载体种植蛹虫草的方法，包括菌种的驯化、液体菌种的制备、灭菌、接种、菌丝体的培养、虫体的分离、子实体的培养、采收等步骤。本发明方法简便，种植效果好。在豆虫下面铺上大米有两个作用，一是大米可以吸收豆虫灭菌过程中产生的水分及其它营养成分，可防止豆虫营养成分流失；二是有利于菌丝快速扩散进入虫体，防止杂菌侵染虫体。

Description

以豆虫为载体种植蛹虫草的方法
技术领域
本发明涉及一种种植蛹虫草的方法。
背景技术
豆虫，学名豆天蛾，又称豆丹，是一种以豆叶为食，喝甘露为生的一种软体小动物。豆虫的组成除了水分以外，干物质大部分是蛋白质，占干重的63.2%，而且人体所需的微量元素也很丰富，尤其钙、磷、铁、镁等非常丰富，维生素E也较高，含有18种氨基酸，且人体必需的8种氨基酸比例适中，肉浆无毒无害，是人体理想的蛋白质资源。具有提高人体免疫力、提高人体的抗病、抗癌能力，有治疗胃寒疾病和营养不良的特殊疗效。以豆虫为载体种植蛹虫草不仅材料易得且安全无毒，营养价值高，获得的虫草酸、虫草素含量均高于蚕蛹虫草，因此具有较高的开发价值。
发明内容
本发明的目的在于提供一种方法简便，种植效果好的以豆虫为载体种植蛹虫草的方法。
本发明的技术解决方案是：
一种以豆虫为载体种植蛹虫草的方法，其特征是：包括下列步骤：
（1）菌种的驯化：
配置营养液：葡萄糖5-10克，牛肉膏5-10克，酵母浸粉3-5克，大米粉5-10克，新鲜豆虫浆液20-25克，硫酸镁1-2克，磷酸二氢钾1-3克，维生素B10.1-0.5毫克，琼脂粉15-20克，加水至1000毫升；将上述平板培养基营养液在121℃，0.1MPa条件下灭菌30分钟，待冷却后倒入培养皿中；将蛹虫草菌种接入培养皿中，22℃黑暗条件下培养5-10天，选取生长速度快，菌丝致密，颜色纯正的菌落，再转接到斜面培养基上，斜面培养基的成分和平板培养基营养液相同，22℃黑暗条件下继续培养5-10天，所得菌种即为适应豆虫和大米培养基的虫草菌种；
（2）液体菌种的制备
首先，按下列配方配制营养液：葡萄糖5-10克，牛肉膏5-10克，大米粉5-10克，新鲜豆虫浆液20-25克，硫酸镁1-2克，磷酸二氢钾1-3克，维生素B10.1-0.5毫克，加水至1000毫升；然后将此营养液分装在锥形瓶中，每瓶250毫升，封口膜封口，在121℃，0.1MPa条件下，灭菌30分钟，待冷却后在超净台上接入活化的虫草菌种，再在140转/分钟，22℃的摇床中震荡培养5-9天，待液体变为粘稠状备用；
（3）灭菌：
取培养盒，先将培养盒的底部均匀的铺上一层2厘米厚的大米，然后将经冷冻处理的豆虫紧密的摆在大米表面，封口膜封口；在121℃，0.1MPa条件下，灭菌30分钟，超净台上紫外灭菌20分钟；
（4）接种：
将液体菌种均匀的洒在虫体表面，每盒25-30毫升菌液，封口膜封口；
（5）菌丝体的培养：
将接种后的虫体转入恒温培养箱中避光培养10-15天，保持温度18-22℃；
（6）虫体的分离：
在超净台上，将长满菌丝的虫体单条分开，分装在培养瓶中，每瓶2-3条，在培养瓶中加入5-10毫升无菌水；
（7）子实体的培养：
将培养瓶转移在光下继续培养，每天保持光照12-14小时，光照强度500-800勒克斯，温度20-24℃，瓶内湿度保持60%-75%，直到子实体长出；
（8）采收：
待子实体长到5-7厘米后，用镊子将虫体连同子实体夹出，-55--60℃超低温干燥，超微细磨粉（800-1000目），-20℃避光保存。
步骤（3）中所述的冷冻处理，是指在-18℃--30℃速冻2小时。
步骤（3）中所述的培养盒长35厘米，宽25厘米，高15厘米，盒子的侧面有一个直径3厘米的通风口，可以摆放30-40条豆虫。
虫体分离后，取出豆虫的大米培养基，进行培养，获得虫草；培养过程如下：将装有大米的培养盒用聚乙烯薄膜封口，放在光下继续培养，每天保持光照12-14小时，光照强度500-800勒克斯，温度20-24℃，盒内湿度保持60%-75%，直到子实体长出；待子实体长到2-3厘米时，打开培养盒的通风口，保持盒内有新鲜空气，每隔5-6天向盒内喷少量的水，培养30-35天，子实体长到6-8厘米时即可采收。
步骤（6）中所述培养瓶是800毫升的组织培养瓶，瓶盖是与瓶子配套的带过滤口的塑料瓶盖，在培养过程中将水洒在盖的表面即可，部分水分可透过盖口渗进瓶内。
本发明方法简便，种植效果好。在豆虫下面铺上大米有两个作用，一是大米可以吸收豆虫灭菌过程中产生的水分及其它营养成分，可防止豆虫营养成分流失；二是有利于菌丝快速扩散进入虫体，防止杂菌侵染虫体。
本发明的另外一个创新点就是取出豆虫的大米培养基，同时在适宜条件下培养，也可获得虫草，且产量很高，经过检测这种大米虫草所含的虫草酸、虫草素及其它活性成分和豆虫培养出的虫草几乎没有区别，可以使产出生物量增加一倍，大大提高了经济效益。
下面结合实施例对本发明作进一步说明。
具体实施方式
一种以豆虫为载体种植蛹虫草的方法，包括下列步骤：
（1）菌种的驯化：
配置营养液：葡萄糖5-10克，牛肉膏5-10克，酵母浸粉3-5克，大米粉5-10克，新鲜豆虫浆液20-25克，硫酸镁1-2克，磷酸二氢钾1-3克，维生素B10.1-0.5毫克，琼脂粉15-20克，加水至1000毫升；将上述平板培养基营养液在121℃，0.1MPa条件下灭菌30分钟，待冷却后倒入培养皿中；将蛹虫草菌种接入培养皿中，22℃黑暗条件下培养5-10天，选取生长速度快，菌丝致密，颜色纯正的菌落，再转接到斜面培养基上，斜面培养基的成分和平板培养基营养液相同，22℃黑暗条件下继续培养5-10天，所得菌种即为适应豆虫和大米培养基的虫草菌种；
（2）液体菌种的制备
首先，按下列配方配制营养液：葡萄糖5-10克，牛肉膏5-10克，大米粉5-10克，新鲜豆虫浆液20-25克，硫酸镁1-2克，磷酸二氢钾1-3克，维生素B10.1-0.5毫克，加水至1000毫升；然后将此营养液分装在锥形瓶中，每瓶250毫升，封口膜封口，在121℃，0.1MPa条件下，灭菌30分钟，待冷却后在超净台上接入活化的虫草菌种，再在140转/分钟，22℃的摇床中震荡培养5-9天，待液体变为粘稠状备用；
（3）灭菌：
取培养盒，先将培养盒的底部均匀的铺上一层2厘米厚的大米，然后将经冷冻处理的豆虫紧密的摆在大米表面，封口膜封口（如果虫体比较大可以在腹面剪2-3个切口，利于菌丝的侵染）；在121℃，0.1MPa条件下，灭菌30分钟，超净台上紫外灭菌20分钟；
（4）接种：
将液体菌种均匀的洒在虫体表面，每盒25-30毫升菌液，封口膜封口；
（5）菌丝体的培养：
将接种后的虫体转入恒温培养箱中避光培养10-15天，保持温度18-22℃；
（6）虫体的分离：
在超净台上，将长满菌丝的虫体单条分开，分装在培养瓶中，每瓶2-3条，在培养瓶中加入5-10毫升无菌水；
（7）子实体的培养：
将培养瓶转移在光下继续培养，每天保持光照12-14小时，光照强度500-800勒克斯，温度20-24℃，瓶内湿度保持60%-75%，直到子实体长出；
（8）采收：
待子实体长到5-7厘米后，用镊子将虫体连同子实体夹出，超低温干燥(-55--60℃)，超微细磨粉（800-1000目），-20℃避光保存。
步骤（3）中所述的冷冻处理，是指在-18℃--30℃速冻2小时。
步骤（3）中所述的培养盒长35厘米，宽25厘米，高15厘米，盒子的侧面有一个直径3厘米的通风口，可以摆放30-40条豆虫虫体，长满菌丝后，可以比较容易的将虫体分离到培养瓶中。
虫体分离后，取出豆虫的大米培养基，进行培养，获得虫草；培养过程如下：将装有大米的培养盒用聚乙烯薄膜封口，放在光下继续培养，每天保持光照12-14小时，光照强度500-800勒克斯，温度20-24℃，盒内湿度保持60%-75%，直到子实体长出；待子实体长到2-3厘米时，打开培养盒的通风口，保持盒内有新鲜空气，每隔5-6天向盒内喷少量的水，培养30-35天，子实体长到6-8厘米时即可采收。
步骤（6）中所述培养瓶是800毫升的组织培养瓶，瓶盖是与瓶子配套的带过滤口的塑料瓶盖，在培养过程中将水洒在盖的表面即可，部分水分可透过盖口渗进瓶内，既能满足虫草在发育过程中对湿度的要求，又有一定的透气性，大大降低了子实体生长后期的管理难度和劳动强度，节省劳动力，从而降低培养成本，利于规模化生产。
菌种的固体培养基和液体培养液中添加了一定量的新鲜豆虫浆液和大米粉，目的是选择出对豆虫和大米都比较适应的菌种，这个过程可以重复进行2-3次，选择出的菌种再扩大培养，即可作为生产用的菌种。新鲜的豆虫浆液是指将鲜活的豆虫用豆浆机打成匀浆。

Claims (5)

1.一种以豆虫为载体种植蛹虫草的方法，其特征是：包括下列步骤：
(1)菌种的驯化：
配置营养液：葡萄糖5-10克，牛肉膏5-10克，酵母浸粉3-5克，大米粉5-10克，新鲜豆虫浆液20-25克，硫酸镁1-2克，磷酸二氢钾1-3克，维生素B10.1-0.5毫克，琼脂粉15-20克，加水至1000毫升；将平板培养基营养液在121℃，0.1MPa条件下灭菌30分钟，待冷却后倒入培养皿中；将蛹虫草菌种接入培养皿中，22℃黑暗条件下培养5-10天，选取生长速度快，菌丝致密，颜色纯正的菌落，再转接到斜面培养基上，斜面培养基的成分和平板培养基营养液相同，22℃黑暗条件下继续培养5-10天，所得菌种即为适应豆虫和大米培养基的虫草菌种；
(2)液体菌种的制备
首先，按下列配方配制营养液：葡萄糖5-10克，牛肉膏5-10克，大米粉5-10克，新鲜豆虫浆液20-25克，硫酸镁1-2克，磷酸二氢钾1-3克，维生素B10.1-0.5毫克，加水至1000毫升；然后将此营养液分装在锥形瓶中，每瓶250毫升，封口膜封口，在121℃，0.1MPa条件下，灭菌30分钟，待冷却后在超净台上接入活化的虫草菌种，再在140转/分钟，22℃的摇床中震荡培养5-9天，待液体变为粘稠状备用；
(3)灭菌：
取培养盒，先将培养盒的底部均匀的铺上一层2厘米厚的大米，然后将经冷冻处理的豆虫紧密的摆在大米表面，封口膜封口；在121℃，0.1MPa条件下，灭菌30分钟，超净台上紫外灭菌20分钟；
(4)接种：
将液体菌种均匀的洒在虫体表面，每盒25-30毫升菌液，封口膜封口；
(5)菌丝体的培养：
将接种后的虫体转入恒温培养箱中避光培养10-15天，保持温度18-22℃；
(6)虫体的分离：
在超净台上，将长满菌丝的虫体单条分开，分装在培养瓶中，每瓶2-3条，在培养瓶中加入5-10毫升无菌水；
(7)子实体的培养：
将培养瓶转移在光下继续培养，每天保持光照12-14小时，光照强度500-800勒克斯，温度20-24℃，瓶内湿度保持60％-75％，直到子实体长出；
(8)采收：
待子实体长到5-7厘米后，用镊子将虫体连同子实体夹出，-55--60℃超低温干燥，800-1000目超微细磨粉，-20℃避光保存。
2.根据权利要求1所述的以豆虫为载体种植蛹虫草的方法，其特征是：步骤(3)中所述的冷冻处理，是指在-18℃--30℃速冻2小时。
3.根据权利要求1或2所述的以豆虫为载体种植蛹虫草的方法，其特征是：步骤(3)中所述的培养盒长35厘米，宽25厘米，高15厘米，盒子的侧面有一个直径3厘米的通风口，可以摆放30-40条豆虫。
4.根据权利要求1或2所述的以豆虫为载体种植蛹虫草的方法，其特征是：虫体分离后，取出豆虫的大米培养基，进行培养，获得虫草；培养过程如下：将装有大米的培养盒用聚乙烯薄膜封口，放在光下继续培养，每天保持光照12-14小时，光照强度500-800勒克斯，温度20-24℃，盒内湿度保持60％-75％，直到子实体长出；待子实体长到2-3厘米时，打开培养盒的通风口，保持盒内有新鲜空气，每隔5-6天向盒内喷少量的水，培养30-35天，子实体长到6-8厘米时即可采收。
5.根据权利要求1或2所述的以豆虫为载体种植蛹虫草的方法，其特征是：步骤(6)中所述培养瓶是800毫升的组织培养瓶，瓶盖是与瓶子配套的带过滤口的塑料瓶盖，在培养过程中将水洒在盖的表面即可，部分水分可透过盖口渗进瓶内。
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