CN104837858A - 酮酰胺免疫蛋白酶体抑制剂 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及式(I)的化合物：及其药学上可接受的盐，其中X、R1、R1’、R2、R2’、R3、R4、R4’和R5如详述和权利要求中所定义。另外，本发明还涉及制备和使用式(I)的化合物的方法和含有所述化合物的药物组合物。式(I)的化合物是LMP7抑制剂，可用于治疗相关的炎性疾病和障碍，例如类风湿性关节炎、狼疮和易激惹性肠病。

Description

酮酰胺免疫蛋白酶体抑制剂
发明领域
本发明涉及用于治疗和/或预防哺乳动物的炎性疾病或障碍的有机化合物，特别是涉及用于治疗类风湿性关节炎、狼疮和易激惹性肠病(irritablebowel disease,IBD)的酮酰胺化合物、它们的制备、含有它们的药物组合物和它们作为LMP7抑制剂的用途。
发明背景
LMP7是免疫蛋白酶体的必需组分，其主要在免疫细胞例如T/B淋巴细胞和单核细胞以及暴露于包括IFN-γ和TNFα在内的炎性细胞因子的非免疫细胞中表达。免疫蛋白酶体在抗原肽所有组成成分的传代和成形MHCI类限制的CD8+T细胞应答中起关键作用。Moebius J.等人EuropeanJournal of Immunology.2010；Basler,M.等人Journal of Immunology.2004.3925-34。新出现的数据提示，除了对MHC I类介导的抗原呈递的调节，LMP7还调节炎性细胞因子产生和免疫细胞功能。
已经证实小分子LMP7抑制剂PR-957有效阻断Th1/17分化、B细胞效应器功能和炎性细胞因子产生(IL-6、TNF-α、IL-23)。Muchamuel T.等人Natural Medicine.2009.15,781-787；Basler M.等人Journal ofImmunology.2010,634-41。
此外，已经证实用PR-957阻断LMP7在几种临床前自身免疫性疾病模型中产生治疗有益性。首先，PR-957在小鼠CAIA和CIA关节炎模型中显著地减少了疾病评分，具有显著减轻的炎症和骨侵蚀的标志。Muchamuel T.等人Natural Medicine.2009.15,781-787。此外，PR-957在有MRL/lpr狼疮倾向的小鼠模型中降低血浆细胞数量和抗-dsDNA IgG水平，防止这些小鼠的疾病进展。Ichikawa HT,等人Arthritis&Rheumatism.2012.64,493-503。此外，PR-957在DSS-诱导的小鼠结肠炎模型中减轻炎症和组织破坏。Basler M.等人Journal of Immunology.2010,634-41。最后，证实在IBD模型中LMP7敲除小鼠被保护免于发生疾病。Schmidt N.等人Gut 2010.896-906。
这些数据一起有力地提示，LMP7活性与B/T淋巴细胞功能和炎性细胞因子产生紧密相关，所有这些均是临床上验证的类风湿性关节炎、狼疮和IBD发病机制中的靶标/途径。因此，现有的数据提供了靶向于LMP7的针对自身免疫性疾病适应征的强有力的理论基础。由于在慢性疾病如自身免疫性中长期使用共价抑制剂的潜在倾向性，共价可逆或非共价小分子LMP7抑制剂对于自身免疫性疾病适应征而言是高度符合需要的。
发明概述
本发明提供式(I)的化合物：
其中：
X是-C(O)-或-S(O)2-；
R1或R1’中的一个是H或未取代的C1-7烷基，另一个是未取代的C1-7烷基或被苯基取代的C1-7烷基，或
R1和R1’与它们所连接的碳原子结合在一起形成茚满基原子团；
R2或R2’中的一个是H或甲基，另一个是环烷基、未取代的C1-7烷基或被苯基、烷氧基或杂芳基取代的C1-7烷基；
R3是未取代的C1-7烷基或被苯基、甲氧基苯基、吲哚基、烷氧基、-SO2CH3、杂芳基、氯苯基、杂环或–CF3取代的C1-7烷基；
R4或R4’中的一个是H或未取代的C1-7烷基，另一个是未取代的C1-7烷基或被烷氧基或环烷基取代的C1-7烷基，或
R4或R4’与它们所连接的碳原子结合在一起形成环烷基原子团；
R5选自：
CH3C(O)NHCH(CH2-苯基甲基)、
异吲哚基、
二氢异吲哚基、
-CH2-杂环、
-CH2-杂芳基、
-CH2-CH2-甲基吡唑基、
甲基-茚基、
-CH2-苯基、
茚满基、
甲基-异唑基、
未取代的杂芳基、
被C1-7烷基或–CF3单取代或独立地二取代的杂芳基、
未取代的苯基、
被C1-7烷基或卤素单取代或独立地二取代的苯基、
-CH2-苯并[1,4]嗪基、
-CH2-二氢苯并[1,4]嗪基、
-O-CH2-苯基、
甲基-吲哚基、
甲基-吡咯并[3,2-b]吡啶基或
咪唑并[1,2-a]吡啶基，
或其药学上可接受的盐。
本发明还提供了包含所述化合物的药物组合物、使用所述化合物的方法和制备所述化合物的方法。
将引述的或依赖的所有文献通过引用明确合并入本文。
发明详述
除非另有说明，否则本说明书和权利要求书中所使用的下列具体术语和措词定义如下：
术语“原子团”是指通过一个或多个化学键与另一个原子或分子连接、从而形成分子的一部分的原子或化学键合的原子组。例如，式I的变量R1至R6是指通过共价键与式I的核心结构连接的原子团。
当提及具有一个或多个氢原子的特定原子团时，术语“取代的”、“被……取代”是指以下事实：该原子团的至少一个氢原子被另一个取代基或原子团替代。例如，术语“被卤素取代的C1-7烷基”是指以下事实：C1-7烷基(如下所定义)的一个或多个氢原子被一个或多个卤素原子替代(例如，三氟甲基、二氟甲基、氟甲基、氯甲基等)。
术语“烷基”是指具有1-20个碳原子的脂族的直链或支链的饱和的烃原子团。在特定的实施方案中，所述烷基具有1-10个碳原子。
术语“C1-7烷基”是指具有1-7个碳原子的烷基。低级烷基的实例包括甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲-丁基和叔-丁基。
术语“烷氧基”表示式-O-R’的基团，其中R’是烷基。烷氧基原子团的实例包括甲氧基、乙氧基、异丙氧基和叔丁氧基。
“芳基”意指具有单环、二环或三环芳族环的一价的环状芳族烃原子团。芳基可以任选地如本文所定义的那样被取代。芳基原子团的实例包括、但不限于苯基、萘基、菲基、芴基、茚基、并环戊二烯基、基、氧代联苯基(oxydiphenyl)、联苯基、亚甲基二苯基、氨基二苯基、二苯基硫基(diphenylsulfidyl)、二苯基磺酰基、二苯基亚异丙基(diphenylisopropylidenyl)、苯并二烷基、苯并呋喃基、苯并二烯基(benzodioxylyl)、苯并吡喃基、苯并嗪基、苯并嗪酮基、苯并哌啶基(benzopiperadinyl)、苯并哌嗪基、苯并吡咯烷基、苯并吗啉基、亚甲基二氧基苯基、亚乙基二氧基苯基等，包括其部分氢化的衍生物，它们各自任选被取代。
术语“杂芳基”表示包含1、2、3或4个选自N、O和S的杂原子、其余的环原子是碳的5－12个环原子的一价的芳族的杂环单环或二环环系。杂芳基的实例包括吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、唑基、噻唑基、三唑基、二唑基、噻二唑基、四唑基、吡啶基、吡嗪基、吡唑基、哒嗪基、嘧啶基、三嗪基、氮杂基、二氮杂基、异唑基、苯并呋喃基、异噻唑基、苯并噻吩基、吲哚基、异吲哚基、异苯并呋喃基。苯并咪唑基、苯并唑基、苯并异唑基、苯并噻唑基、苯并异噻唑基、苯并二唑基、苯并噻二唑基、苯并三唑基、嘌呤基、喹啉基、异喹啉基、喹唑啉基或喹喔啉基。
术语“卤代”、“卤素”和“卤化物”可以互换使用，是指取代基氟、氯、溴或碘。
术语“卤代烷基”表示其中烷基的至少一个氢原子已经被相同或不同的卤素原子、特别是氟原子替代的烷基。卤代烷基的实例包括一氟-、二氟-或三氟-甲基、-乙基或-丙基，例如3,3,3-三氟丙基、2-氟乙基、2,2,2-三氟乙基、氟甲基或三氟甲基。
“环烷基”意指具有单环或二环的一价的饱和的碳环原子团。环烷基原子团可以任选被一个或多个取代基取代。环烷基原子团的实例包括、但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基等，包括其部分不饱和的(环烯基)衍生物。
除非另有说明，否则术语“氢”或“氢化”是指氢原子的原子团(-H)，而不是指H2。
除非另有说明，否则术语“式……的化合物”是指选自用所述化学式定义的化合物种类的任意化合物(如果没有另外说明，则包括任意所述化合物的任意药学上可接受的盐或酯)。
术语“药学上可接受的盐”是指保持游离碱或游离酸的生物学有效性和性质的、在生物学上或其它方面没有不期望的性质的那些盐。盐可以用无机酸和有机酸形成，所述无机酸例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等，优选盐酸；所述有机酸例如乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、马来酸、丙二酸、水杨酸、琥珀酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、N-乙酰基半胱氨酸等。此外，盐可以通过向游离酸中加入无机碱或有机碱来制备。衍生自无机碱的盐包括、但不限于钠盐、钾盐、锂盐、铵盐、钙盐和镁盐等。衍生自有机碱的盐包括、但不限于伯、仲和叔胺、取代的胺(包括天然存在的取代的胺)、环胺和碱性离子交换树脂例如异丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、乙醇胺、赖氨酸、精氨酸、N-乙基哌啶、哌啶、聚胺树脂等的盐。
本发明的化合物可以以药学上可接受的盐的形式存在。本发明的化合物也可以以药学上可接受的酯的形式存在(即，作为前药使用的式I的酸的甲酯和乙酯)。本发明的化合物还可以被溶剂化，即水化。溶剂化可以在制备方法过程中进行或者可以作为最初无水的式I的化合物的吸湿性的结果发生(水化)。
具有相同的分子式、但其原子的键合性质或顺序或者其原子的空间排列不同的化合物被称作“异构体”。其原子的空间排列不同的异构体被称作“立体异构体”。非对映体是在一个或多个手性中心上具有相反构型的、不是对映体的立体异构体。彼此为不可叠加镜像的具有一个或多个不对称中心的立体异构体被称作“对映体”。当化合物具有不对称中心时，例如，如果一个碳原子与4个不同基团键合，则一对对映体是可能的。对映体可以用其一个或多个不对称中心的绝对构型表征，用Cahn,Ingold和Prelog的R-和S-排序规则来描述，或者通过其中分子旋转偏振光平面并且被指定为右旋或左旋的方法来描述(即，分别为(+)或(-)-异构体)。手性化合物可以以各对映体的形式或者以其混合物的形式存在。含有等比例的对映体的混合物被称作“外消旋混合物”。
术语化合物的“治疗有效量”意指有效预防、缓解或改善疾病症状或延长所治疗的个体的存活的化合物的量。治疗有效量的确定在本领域技术人员技能范围内。本发明的化合物的治疗有效量或剂量可以在宽范围内变化，可以用本领域已知的方式确定。在每个特定的病例中，所述剂量可以针对个体需求进行调整，包括所施用的化合物、施用途径、所治疗的病症以及所治疗的患者。一般而言，在口服或肠胃外施用于体重约70Kg的成年人的情况中，约0.1mg–约5,000mg、1mg–约1,000mg或1mg–100mg的日剂量可以是适宜的，不过当适用时可以超出所述下限和上限。所述日剂量可以作为单剂量施用或以多个分剂量的形式施用，或者对于肠胃外施用而言，可以以连续输注的形式给予。
术语“药学上可接受的载体”包括与药物施用相容的任意和所有物质，包括溶剂、分散介质、包衣、抗细菌和抗真菌剂、等张(isotonic)和吸收延迟剂、和与药物施用相容的其它物质和化合物。除了与活性化合物不相容的任意常规媒介物或试剂外，其在本发明的组合物中的应用均包括在内。还可以向组合物中掺入补充性活性化合物。
用于制备其组合物的有用的药物载体可以是固体、液体或气体；因此，组合物可以采用片剂、丸剂、胶囊剂、栓剂、散剂、肠溶包衣的或其它被保护的制剂(例如结合在离子交换树脂上或包在脂质-蛋白质囊泡内)、持续释放制剂、溶液剂、混悬剂、酏剂、气雾剂等形式。载体可以选自各种油，包括石油、动物、植物或合成来源的油，例如花生油、豆油、矿物油、芝麻油等。水、盐水、右旋糖水溶液和乙二醇是优选的液体载体，特别是(当与血液等张时)对于注射溶液而言。例如，用于静脉内施用的制剂包含一种或多种活性成分的无菌水溶液，其是通过将一种或多种固体活性成分溶于水以产生水溶液并且使该溶液无菌来制备的。适合的药用赋形剂包括淀粉、纤维素、滑石粉、葡萄糖、乳糖、滑石粉、明胶、麦芽、稻、面粉、白垩、二氧化硅、硬脂酸镁、硬脂酸钠、单硬脂酸甘油酯、氯化钠、脱脂奶粉、甘油、丙二醇、水、乙醇等。可以向组合物中加入常规药物添加剂，例如防腐剂、稳定剂、湿润剂或乳化剂、调节渗透压的盐、缓冲剂等。适合的药物载体和它们的制剂描述在E.W.Martin的Remington'sPharmaceutical Sciences中。在任意情况下，这类组合物均含有有效量的活性化合物以及适合的载体，以制备适合施用于接受者的适合的剂型。
在实施本发明的方法的过程中，通过本领域已知的任意常用的、可接受的方法单独地或组合地施用有效量的本发明化合物的任意一种或本发明化合物的任意组合或其药学上可接受的盐或酯。因此，所述化合物或组合物可以口服(例如口腔含服)、舌下、肠胃外(例如肌内、静脉内或皮下)、直肠(例如用栓剂或洗涤液(washing))、经皮(例如皮肤电穿孔)或吸入(例如用气雾剂)并且以固体、液体或气体剂型(包括片剂和混悬剂)的形式施用。施用可以在单个单位剂型中用连续疗法进行或在单剂量疗法中无限制地进行。治疗组合物也可以是与亲脂性盐例如双羟萘酸联合的油乳剂或分散物的形式或者是用于皮下或肌内施用的生物可降解的持续释放组合物的形式。
详细地，本发明提供了式(I)的化合物：
式(I)的化合物：
其中：
X是-C(O)-或-S(O)2-；
R1或R1’中的一个是H或未取代的C1-7烷基，另一个是未取代的C1-7烷基或被苯基取代的C1-7烷基，或
R1和R1’与它们所连接的碳原子结合在一起形成茚满基原子团；
R2或R2’中的一个是H或甲基，另一个是环烷基、未取代的C1-7烷基或被苯基、烷氧基或杂芳基取代的C1-7烷基；
R3是未取代的C1-7烷基或被苯基、甲氧基苯基、吲哚基、烷氧基、-SO2CH3、杂芳基、氯苯基、杂环或–CF3取代的C1-7烷基；
R4或R4’中的一个是H或未取代的C1-7烷基，另一个是未取代的C1-7烷基或被烷氧基或环烷基取代的C1-7烷基，或
R4或R4’与它们所连接的碳原子结合在一起形成环烷基原子团；
R5选自：
CH3C(O)NHCH(CH2-苯基甲基)、
异吲哚基、
二氢异吲哚基、
-CH2-杂环、
-CH2-杂芳基、
-CH2-CH2-甲基吡唑基、
甲基-茚基、
-CH2-苯基、
茚满基、
甲基-异唑基、
未取代的杂芳基、
被C1-7烷基或–CF3单取代或独立地二取代的杂芳基、
未取代的苯基、
被C1-7烷基或卤素单取代或独立地二取代的苯基、
-CH2-苯并[1,4]嗪基、
-CH2-二氢苯并[1,4]嗪基、
-O-CH2-苯基、
甲基-吲哚基、
甲基-吡咯并[3,2-b]吡啶基或
咪唑并[1,2-a]吡啶基，
或其药学上可接受的盐。
在本发明的另一个实施方案中，提供了式(I)的化合物，其中X是-C(O)-。
在本发明的另一个实施方案中，提供了式(I)的化合物，其中R1或R1’中的一个是H，另一个是丁基或-CH2-苯基。
在本发明的另一个实施方案中，提供了式(I)的化合物，其中R1或R1’中的一个是H，另一个是-CH2-苯基。
在本发明的另一个实施方案中，提供了式(I)的化合物，其中R2或R2’中的一个是H，另一个是环丙基、甲基、-CH2-苯基、-CH2-CH2-苯基、-CH2CH2OCH3或-CH2-吡啶基。
在本发明的另一个实施方案中，提供了式(I)的化合物，其中R2或R2’是H，另一个是-CH2-苯基。
在本发明的另一个实施方案中，提供了式(I)的化合物，其中R3是叔-丁基、异-丁基、-CH2-苯基、-CH2-甲氧基苯基、-CH2-吲哚基、-CH2-甲氧基、-CH2CH2SO2CH3、-CH2-吡喃基、-CH2-吡啶基、-CH2-氯苯基、-CH2-四氢吡喃基或-CH2CF3。
在本发明的另一个实施方案中，提供了式(I)的化合物，其中R3是-CH2-甲氧基苯基或-CH2-吲哚基。
在本发明的另一个实施方案中，提供了式(I)的化合物，其中R4或R4’中的一个是H，另一个是甲基、叔-丁基、-CH2-OCH3或环丙基。
在本发明的另一个实施方案中，提供了式(I)的化合物，其中R4或R4’与它们所连接的碳原子结合在一起形成环丙基原子团。
在本发明的另一个实施方案中，提供了式(I)的化合物，其中R4或R4’中的一个是H，另一个是甲基。
在本发明的另一个实施方案中，提供了式(I)的化合物，其中R5是CH3C(O)NHCH(CH2-苯基甲基)、-二氢吲哚基、-CH2-吗啉、-CH2-CH2-甲基吡唑基、甲基-茚基、-CH2-苯基、茚满基、甲基-异唑基、吡嗪基、甲基-吡唑基、二甲基-吡唑基、乙基-吡唑基、甲基-三氟甲基-吡唑基、苯基、二氯-苯基、甲基-苯基、-CH2-苯并[1,4]嗪基、-CH2-二氢苯并[1,4]嗪基、-O-CH2-苯基、甲基-吲哚基、甲基-吡咯并[3,2-b]吡啶基或咪唑并[1,2-a]吡啶基。
在本发明的另一个实施方案中，提供了式(I)的化合物，其中R5是茚满基或-O-CH2-苯基。
本发明的另一个实施方案涉及式(I’)的化合物：
其中R3和R5如上文所定义；或其药学上可接受的盐。
本发明的一个特定的实施方案涉及式(I’)的化合物，其中
R3是-CH2-甲氧基苯基或-CH2-吲哚基，
R5是茚满基或-O-CH2-苯基，
或其药学上可接受的盐。
在本发明的另一个实施方案中，提供了式(I)的化合物，其中所述化合物是：
(S)-3-{(S)-2-[(S)-2-((S)-2-乙酰基氨基-3-邻甲苯基-丙酰基氨基)-3,3-二甲基-丁酰基氨基]-4-甲基-戊酰基氨基}-2-氧代-庚酸苄基酰胺；
(S)-3-{(S)-2-[(S)-3,3-二甲基-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丁酰基氨基]-4-甲基-戊酰基氨基}-2-氧代-庚酸苄基酰胺；
(S)-3-{(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-[(S)-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酰基氨基}-2-氧代-庚酸苄基酰胺；
5-甲基-异唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基氨基乙二酰基-戊基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
3-甲基-1H-茚-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基氨基乙二酰基-戊基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
5-甲基-异唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基氨基乙二酰基-戊基氨基甲酰基)-2-甲氧基-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
3-甲基-1H-茚-2-甲酸((S)-1-{(S)-2-(1H-吲哚-3-基)-1-[(S)-1-((S)-1-苯基-乙基氨基乙二酰基)-戊基氨基甲酰基]-乙基氨基甲酰基}-乙基)-酰胺；
3-甲基-1H-茚-2-甲酸((S)-1-{(S)-2-(1H-吲哚-3-基)-1-[(S)-1-((R)-1-苯基-乙基氨基乙二酰基)-戊基氨基甲酰基]-乙基氨基甲酰基}-乙基)-酰胺；
{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基氨基乙二酰基-戊基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯；
(S)-3-{(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-[(S)-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酰基氨基}-2-氧代-庚酸苄基酰胺；
茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基氨基乙二酰基-戊基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
N-{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基氨基乙二酰基-戊基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-2,3-二氯-苯甲酰胺；
2-甲基-2H-吡唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基氨基乙二酰基-戊基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
(S)-3-{(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-[(S)-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酰基氨基}-2-氧代-庚酸甲基酰胺；
3-甲基-1H-茚-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基氨基乙二酰基-戊基氨基甲酰基)-3-甲磺酰基-丙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯；
{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯；
茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
3-甲基-1H-茚-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-3-甲磺酰基-丙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
5-甲基-异唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
(S)-N-苄基-3-{(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-[(S)-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酰基氨基}-2-氧代-4-苯基-丁酰胺；
茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-2-甲氧基-乙基}-酰胺；
茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-3-甲基-丁基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
3-甲基-1H-茚-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
茚满-2-甲酸{(S)-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-环丙基-甲基}-酰胺；
茚满-2-甲酸{1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-环丙基}-酰胺；
{1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-环丙基}-氨基甲酸苄基酯；
吡嗪-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
2-甲基-2H-吡唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-甲基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯；
{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-环丙基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯；
{(S)-1-[(S)-1-[(S)-1-苄基-2-(2-甲氧基-乙基氨基甲酰基)-2-氧代-乙基氨基甲酰基]-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯；
{(S)-1-[(S)-1-{(S)-1-苄基-2-氧代-2-[(吡啶-2-基甲基)-氨基甲酰基]-乙基氨基甲酰基}-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯；
(S)-N-苄基-3-[(S)-2-[(S)-2-(2-2,3-二氢-苯并[1,4]嗪-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酰基氨基]-2-氧代-4-苯基-丁酰胺；
{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-3-甲基-丁基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯；
2-甲基-2H-吡唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-3-甲基-丁基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
{(S)-1-[(S)-1-[(S)-1-苄基-2-(苄基-甲基-氨基甲酰基)-2-氧代-乙基氨基甲酰基]-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯；
(S)-3-[(S)-2-((S)-2-苯磺酰基氨基-丙酰基氨基)-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酰基氨基]-N-苄基-2-氧代-4-苯基-丁酰胺；
(S)-N-苄基-3-{(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-[(S)-2-(甲苯-2-磺酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酰基氨基}-2-氧代-4-苯基-丁酰胺；
(S)-N-苄基-3-((S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-{(S)-2-[3-(2-甲基-2H-吡唑-3-基)-丙酰基氨基]-丙酰基氨基}-丙酰基氨基)-2-氧代-4-苯基-丁酰胺；
茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-3-苯基-丙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-苯基-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
1-甲基-1H-吲哚-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-苯基-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
1-甲基-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
(S)-N-苄基-3-{(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-[(S)-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酰基氨基}-2-氧代-4-苯基-丁酰胺；
5-甲基-异唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
3-甲基-1H-茚-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-吡啶-2-基-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯；
{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-氯-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯；
1,3-二氢-异吲哚-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-苯基-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
2,5-二甲基-2H-吡唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-苯基-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
2-乙基-2H-吡唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-苯基-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
2-甲基-5-三氟甲基-2H-吡唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-苯基-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
{(S)-1-[1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(四氢-吡喃-4-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯；
{(S)-1-[1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-3,3,3-三氟-丙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯；
{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-吡啶-4-基-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯；或
茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-(2-苄基氨基乙二酰基-茚满-2-基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；或
其药学上可接受的盐。
在本发明的另一个实施方案中，提供了式(I)的化合物，其中所述化合物是：
{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯；
{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯；
茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；或
茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；或
其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本发明提供了药物组合物，其包含治疗有效量的式(I)的化合物和药学上可接受的载体。
在另一个实施方案中，本发明提供了式(I)的化合物，其用作治疗活性物质。
在另一个实施方案中，本发明提供了式(I)的化合物用于治疗或预防炎性疾病或障碍的用途。
在另一个实施方案中，本发明提供了式(I)的化合物在制备用于治疗或预防炎性疾病或障碍的药剂中的用途。
在另一个实施方案中，本发明提供了式(I)的化合物，其用于治疗或预防炎性疾病或障碍。
在另一个实施方案中，本发明提供了治疗炎性疾病或障碍的方法，所述炎性疾病或障碍选自类风湿性关节炎、狼疮和易激惹性肠病(IBD)，所述方法包括给需要其的个体施用治疗有效量的式(I)的化合物的步骤。
在另一个实施方案中，提供了上文所述的发明。
用于制备这些化合物的起始材料和试剂一般是可从商业供应商例如Aldrich Chemical Co.处获得的或者是通过本领域技术人员已知的方法按照文献例如Fieser and Fieser’s Reagents for Organic Synthesis；Wiley&Sons：New York,1991,第1-15卷；Rodd’s Chemistry of CarbonCompounds,Elsevier Science Publishers,1989,第1-5卷和增刊；和Organic Reactions,Wiley&Sons：New York,1991,第1-40卷中所给出的操作制备的。
下面的合成反应方案仅是能合成本发明的化合物的一些方法的举例说明，可以对这些合成反应方案进行各种调整，并且在参考本申请的公开内容的情况下对本领域技术人员而言提示了所述调整。
如果需要，可以使用常规技术分离和纯化合成反应方案的起始材料和中间体，所述常规技术包括、但不限于过滤、蒸馏、结晶、色谱法等。所述材料可以使用常规手段表征，包括物理常数和光谱数据。
除非有相反规定，否则本文所述的反应优选在惰性气氛中、在大气压力下、在约-78℃至约150℃、更优选约0℃至约125℃下、最优选和便利地在约室温(或环境温度)、例如约20℃下进行。
可以通过任意数量的常规手段制备本发明的化合物。例如，可以根据下面的方案1－3中概述的方法制备它们。
方案1
如在方案1中看到的那样，可以将N-Boc保护的氨基酸1转化成Weinreb酰胺2，然后可以使用氢化铝锂(LiAlH4)还原成醛3。可以将该醛立即用丙酮羟腈处理，形成非对映体混合物形式的新羟腈4。该腈可以通过与盐酸一起加热连同失去Boc保护基而被水解成羧酸。可以使用焦炭酸二叔丁酯(di-tert-butyl dicarbonate)重新装配Boc基团，得到酸5，随后使用活化试剂例如HATU使其与适宜的胺6偶联，得到羟基酰胺7。
R基团可以是例如实施例和权利要求中所述的原子团。
方案2
如方案2中所示，可以用三氟乙酸(TFA)处理带有适宜的羧基保护的N-Boc氨基酸9。可以使用活化试剂例如HATU使由此生成的游离胺盐原位与适宜地官能化的氨基酸8偶联，得到二肽基酯10。酸11可以由可变条件下的酯水解获得。
R基团可以是例如如实施例和权利要求中所述的原子团。
方案3
根据方案3，可以用三氟乙酸(TFA)处理羟基酰胺7。可以使用活化试剂例如HATU使由此生成的游离胺盐原位与酸11偶联，得到羟基酰胺12。可以通过用戴斯-马丁过碘烷(Dess-Martin periodinane)氧化得到酮酰胺13。R基团可以是例如如实施例和权利要求中所述的原子团。
实施例
尽管本文描绘和描述了一些举例性的实施方案，但是本发明的化合物可以使用适宜的原料根据本文概括描述的方法和/或通过本领域技术人员可利用的方法制备。所有涉及空气敏感试剂的反应均在惰性气氛下进行。除非另有说明，否则试剂以从商业供应商处接收的形式被使用。
I.一些中间体的制备
中间体1
[(S)-1-(苄基氨基甲酰基-羟基-甲基)-戊基]-氨基甲酸叔丁酯
向(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)己酸(2.16g,9.34mmol)和N,O-二甲基羟基胺盐酸盐(1.37g,14.0mmol)在DMF(20ml)中的混悬液中加入HATU(3.73g,9.81mmol)和N,N-二异丙基乙胺(4.9ml,28.0mmol)。将反应化合物在室温搅拌过夜，然后用水猝灭，用EtOAc(3x)萃取。用水(3x)和盐水洗涤合并的有机层，然后用MgSO4干燥，浓缩，得到2.64g[(S)-1-(甲氧基-甲基-氨基甲酰基)-戊基]-氨基甲酸叔丁酯，为粘性无色油状物，将其不经进一步纯化即使用。
在0℃向[(S)-1-(甲氧基-甲基-氨基甲酰基)-戊基]-氨基甲酸叔丁酯(2.56g,9.34mmol)在THF(30ml)中的溶液中缓慢地加入LiAlH4(1.0M的THF溶液,9.34ml,9.34mmol)。将反应混合物在0℃搅拌45min，然后小心地用固体硫酸钠十水合物猝灭。当气体停止放出时，加入EtOAc，将反应混合物在室温剧烈搅拌30min。用瓷漏斗过滤混合物，用EtOAc冲洗。浓缩滤液，得到2.24g((S)-1-甲酰基-戊基)-氨基甲酸叔丁酯，为无色油状物，将其不经进一步纯化立即用于下一步。
向((S)-1-甲酰基-戊基)-氨基甲酸叔丁酯(2.01g,9.34mmol)在二氯甲烷(20ml)中的溶液中加入丙酮羟腈(2.56ml,28.0mmol)和三乙胺(0.78ml,5.6mmol)。将反应在室温搅拌4h，然后用Et2O(100ml)稀释，用水(5x)洗涤。用MgSO4干燥有机相，浓缩。通过硅胶色谱法(10％－35％EtOAc/己烷)纯化残余物，得到1.85g(82％,3步)[(S)-1-(氰基-羟基-甲基)-戊基]-氨基甲酸叔丁酯，为浅黄色油状物。
向[(S)-1-(氰基-羟基-甲基)-戊基]-氨基甲酸叔丁酯(1.85g,7.63mmol)中加入6M HCl水溶液(30ml)。将反应混合物在100℃加热15h，然后冷却至室温，减压浓缩。将粘性固体残余物溶于1,4-二烷(15ml)和水(15ml)，然后加入碳酸氢钠(6.41g,76.3mmol)和焦炭酸二叔丁酯(2.5g,11.5mmol)。将非均质的反应混合物在室温剧烈搅拌过夜。减压除去有机相。用水稀释剩余的非均质的水层，用Et2O萃取(弃去)。然后通过加入2M HCl水溶液使水层达到pH＝3。用Et2O和EtOAc萃取水层。合并这些萃取物，用MgSO4干燥，浓缩，得到1.14g(57％)(S)-3-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-庚酸，为粘性无色油状物，将其不经进一步纯化即使用。
向(S)-3-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-庚酸(540mg,2.07mmol)在DMF(8ml)中的溶液中加入苄胺(0.27ml,2.48mmol)、HATU(864mg,2.27mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.54ml,3.1mmol)。将亮黄色反应混合物在室温搅拌过夜，然后用水猝灭，用EtOAc(2x)萃取。用水(3x)和盐水洗涤合并的有机物，然后用MgSO4干燥，浓缩。通过硅胶色谱法(20％－50％EtOAc/己烷)纯化残余物，分离得到464mg(64％)[(S)-1-(苄基氨基甲酰基-羟基-甲基)-戊基]-氨基甲酸叔丁酯，为白色固体。LC/MS：(M-Boc)+＝251。
中间体2
((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯
在氮气气氛下于室温向(S)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-苯基-丙酸(25g,94.34mmol)在DMF(250mL)中的溶液中加入N,O-二甲基羟基胺盐酸盐(13.72g,141.50mmol)、HATU(37.64g,99.05mmol)和N,N-二异丙基乙胺(50.70mL,283.01mmol)。将反应混合物在室温搅拌16h，然后用乙酸乙酯(1000mL)稀释，用水(5x 250mL)洗涤。干燥有机层，减压浓缩。通过使用20％EtOAc的己烷溶液的CombiFlash柱色谱法纯化粗残余物，得到27.5g(94％)(S)-1-(甲氧基-甲基-氨基甲酰基)-2-苯基-乙基]-氨基甲酸叔丁酯，为无色油状物。LC/MS：(M+H)+＝309.0。
在0℃向搅拌着的(S)-1-(甲氧基-甲基-氨基甲酰基)-2-苯基-乙基]-氨基甲酸叔丁酯(15g,48.70mmol)在THF(180mL)中的溶液中加入LiAlH4(1.0M的THF溶液,57mL,57mmol)。将反应混合物在0℃搅拌1h，然后通过分份加入硫酸钠十水合物小心地猝灭，直到气体放出停止。加入EtOAc，将反应混合物在室温剧烈搅拌30min，然后过滤。干燥滤液，减压浓缩，得到11.0g(91％)((S)-1-苄基-2-氧代-乙基)-氨基甲酸叔丁酯，为白色固体，将其不经进一步纯化即使用。
向((S)-1-苄基-2-氧代-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(7.0g,28.1mmol)在DCM(80mL)中的溶液中加入丙酮羟腈(7.16g,84.3mmol)和三乙胺(2.36mL,16.86mmol)。将反应在室温搅拌3h，然后加入水，减压除去有机物。用乙酸乙酯萃取水性残余物，用水洗涤2次。干燥有机层，减压浓缩。通过使用20％EtOAc的己烷溶液作为流动相的CombiFlash柱色谱法纯化粗残余物，得到5.0g(58％)((S)-1-苄基-2-氰基-2-羟基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯，为黄色油状物。LC/MS：(M+H)+＝277.4。
将((S)-1-苄基-2-氰基-2-羟基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(5.0g,18.11mmol)在6M HCl(90mL)中的溶液在100℃加热16h，然后冷却至室温，真空浓缩，得到4.0g(95％)(S)-3-氨基-2-羟基-4-苯基-丁酸盐酸盐，为类黄色(offyellow)固体，将其不经进一步纯化即使用。LC/MS：(M+H)+＝196.2。
向(S)-3-氨基-2-羟基-4-苯基-丁酸盐酸盐(18.0g,77.9mmol)在1,4-二烷(150ml)和水(150mL)中的溶液中加入碳酸氢钠(65.45g 779mmol)和焦碳酸二叔丁酯(25.48g,116.9mmol)。将混合物在室温剧烈搅拌16h。减压除去有机相。用水(200mL)稀释剩余的非均质的水层，用Et2O萃取(2x 200mL,弃去)。然后通过加入2M HCl水溶液使水层达到pH＝3，用EtOAc(3x 400mL)萃取。干燥合并的萃取物，减压浓缩，得到18.0g(78％)(S)-3-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-4-苯基-丁酸，为类白色(off white)固体。LC/MS：(M+H)+＝296.6。
向搅拌着的(S)-3-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-4-苯基-丁酸(10.0g,33.89mmol)在DMF(150mL)中的溶液中加入苄胺(4.35g,40.67mmol)、HATU(14.16g,37.28mmol)和N,N-二异丙基乙胺(6.56g,50.84mmol)。将反应混合物在氮气气氛下于室温搅拌3h，然后用乙酸乙酯(800mL)稀释，用冰冷水(2x950mL)洗涤。用硫酸钠干燥有机层，减压浓缩。通过使用30％EtOAc的己烷溶液的CombiFlash柱色谱法纯化粗残余物，得到7.3g(56％)(S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯，为白色固体。LC/MS：(M+H)+＝385.2。
II.本发明的一些实施方案的制备
实施例1
(S)-3-{(S)-2-[(S)-2-((S)-2-乙酰基氨基-3-邻甲苯基-丙酰基氨基)-3,3-二甲基-丁酰基氨基]-4-甲基-戊酰基氨基}-2-氧代-庚酸苄基酰胺
在0℃向(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3,3-二甲基丁酸(600mg,2.59mmol)、(S)-2-氨基-4-甲基戊酸苄基酯4-甲基苯磺酸盐(1.07g,2.72mmol)和HATU(1.09g,2.85mmol)在DMF(10ml)中的溶液中加入N,N-二异丙基乙胺(1.36ml,7.78mmol)。将亮黄色反应混合物在室温搅拌过夜，然后用水猝灭，用EtOAc(2x)萃取。用饱和NaHCO3、水(3x)和盐水洗涤合并的有机物，然后用MgSO4干燥，浓缩，得到1.29g(S)-2-((S)-2-叔丁氧基羰基氨基-3,3-二甲基-丁酰基氨基)-4-甲基-戊酸苄基酯，为白色固体，将其不经进一步纯化即使用。
向(S)-2-((S)-2-叔丁氧基羰基氨基-3,3-二甲基-丁酰基氨基)-4-甲基-戊酸苄基酯(550mg,1.27mmol)在CH2Cl2(10ml)中的溶液中加入三氟乙酸(2ml)。将反应在室温搅拌2h，然后浓缩。将残余物溶于DMF(8ml)，加入N,N-二异丙基乙胺(1.13ml,6.44mmol)，然后加入(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-邻甲苯基丙酸(300mg,1.07mmol)和HATU(449mg,1.18mmol)。将黄色反应混合物在室温搅拌过夜，然后用水猝灭，用EtOAc(2x)萃取。用水(3x)和盐水洗涤合并的有机物，然后用MgSO4干燥，浓缩。通过硅胶色谱法(10％－30％EtOAc/己烷)纯化残余物，得到495mg(77％)(S)-2-[(S)-2-((S)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-邻甲苯基-丙酰基氨基)-3,3-二甲基-丁酰基氨基]-4-甲基-戊酸苄基酯，为白色泡沫状固体。
向(S)-2-[(S)-2-((S)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-邻甲苯基-丙酰基氨基)-3,3-二甲基-丁酰基氨基]-4-甲基-戊酸苄基酯(490mg,0.82mmol)在CH2Cl2(10ml)中的溶液中加入三氟乙酸(2ml)。将反应在室温搅拌2.5h，然后浓缩。将残余物溶于CH2Cl2(7ml)，冷却至0℃，加入N,N-二异丙基乙胺(0.58ml,3.29mmol)，然后加入乙酰氯(64μl,0.91mmol)。将反应混合物在室温搅拌1h，然后用水猝灭，用CH2Cl2萃取。用水洗涤合并的有机层，然后用MgSO4干燥，浓缩。通过硅胶色谱法(50％－100％EtOAc/己烷)纯化残余物，得到344mg(78％)(S)-2-[(S)-2-((S)-2-乙酰基氨基-3-邻甲苯基-丙酰基氨基)-3,3-二甲基-丁酰基氨基]-4-甲基-戊酸苄基酯，为类白色固体。
向(S)-2-[(S)-2-((S)-2-乙酰基氨基-3-邻甲苯基-丙酰基氨基)-3,3-二甲基-丁酰基氨基]-4-甲基-戊酸苄基酯(345mg,0.64mmol)在MeOH(15ml)中的溶液中加入10％披钯碳(palladium on carbon)(湿)(68mg,0.06mmol)。将反应混合物在氢气囊下于室温搅拌1.5h，然后用Celite过滤，用EtOAc/MeOH冲洗。浓缩滤液，然后将残余物再溶于MeOH，通过0.2uM尼龙釉料盘(nylon fritted disk)过滤。浓缩滤液，得到290mg(S)-2-[(S)-2-((S)-2-乙酰基氨基-3-邻甲苯基-丙酰基氨基)-3,3-二甲基-丁酰基氨基]-4-甲基-戊酸，为白色固体。
向[(S)-1-(苄基氨基甲酰基-羟基-甲基)-戊基]-氨基甲酸叔丁酯(132mg,0.38mmol)在CH2Cl2(3ml)中的溶液中加入三氟乙酸(0.5ml)。将反应混合物在室温搅拌1.5h，然后浓缩，用己烷处理，得到无色油状物。将该油状物溶于DMF(2.5ml)，加入N,N-二异丙基乙胺(0.25ml,1.45mmol)，然后加入(S)-2-[(S)-2-((S)-2-乙酰基氨基-3-邻甲苯基-丙酰基氨基)-3,3-二甲基-丁酰基氨基]-4-甲基-戊酸(130mg,0.29mmol)和HATU(121mg,0.32mmol)。将反应混合物在室温搅拌3h，然后用水猝灭。通过过滤收集得到的浓稠白色沉淀物，用水冲洗，在高度真空下干燥，得到183mg(93％)(S)-3-{(S)-2-[(S)-2-((S)-2-乙酰基氨基-3-邻甲苯基-丙酰基氨基)-3,3-二甲基-丁酰基氨基]-4-甲基-戊酰基氨基}-2-羟基-庚酸苄基酰胺，为白色固体。
向(S)-3-{(S)-2-[(S)-2-((S)-2-乙酰基氨基-3-邻甲苯基-丙酰基氨基)-3,3-二甲基-丁酰基氨基]-4-甲基-戊酰基氨基}-2-羟基-庚酸苄基酰胺(90mg,0.13mmol)在CH2Cl2(3ml)中的溶液中加入戴斯-马丁过碘烷(62mg,0.15mmol)。在几分钟内，形成浓稠白色沉淀物。将浆液在室温搅拌45min，然后加入饱和NaHCO3溶液(2ml)和10％Na2S2O3水溶液(2ml)。将双相混合物剧烈搅拌15min，然后分离各层，用CH2Cl2(2x)萃取水相。用MgSO4干燥合并的有机物，浓缩。使残余物吸附在硅胶上，通过色谱法(50％－100％EtOAc/己烷)纯化，得到22mg(25％)(S)-3-{(S)-2-[(S)-2-((S)-2-乙酰基氨基-3-邻甲苯基-丙酰基氨基)-3,3-二甲基-丁酰基氨基]-4-甲基-戊酰基氨基}-2-氧代-庚酸苄基酰胺，为白色固体。LC/MS：(M+H)+＝678。
实施例2
(S)-3-{(S)-2-[(S)-3,3-二甲基-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丁酰基氨基]-4-甲基-戊酰基氨基}-2-氧代-庚酸苄基酰胺
向(S)-2-((S)-2-叔丁氧基羰基氨基-3,3-二甲基-丁酰基氨基)-4-甲基-戊酸苄基酯(353mg,0.81mmol)在二氯甲烷(8ml)中的溶液中加入三氟乙酸(2ml)。将反应在室温搅拌4h，然后浓缩。将残余物溶于DMF(3ml)，加入N,N-二异丙基乙胺(0.72ml,4.13mmol)。然后加入2-吗啉代乙酸(100mg,0.69mmol)，然后加入HATU(288mg,0.76mmol)。将黄色反应混合物在室温搅拌过夜，然后用水猝灭，用EtOAc(2x)萃取。用水(3x)和盐水洗涤合并的有机物，然后用MgSO4干燥，浓缩。通过使用50％－100％EtOAc/己烷的硅胶色谱法纯化残余物，得到290mg(91％)(S)-2-[(S)-3,3-二甲基-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丁酰基氨基]-4-甲基-戊酸苄基酯，为白色泡沫状固体。
向(S)-2-[(S)-3,3-二甲基-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丁酰基氨基]-4-甲基-戊酸苄基酯(290mg,0.63mmol)在MeOH(12ml)中的溶液中加入20％披氢氧化钯碳(palladium hydroxide on carbon)(70mg,0.10mmol)。将反应混合物在氢气气囊下于室温搅拌1.5h，然后用Celite过滤，用EtOAc/MeOH冲洗。浓缩滤液，然后将残余物再溶于EtOAc/MeOH，通过0.2uM尼龙釉料盘过滤。浓缩滤液，得到242mg(S)-2-[(S)-3,3-二甲基-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丁酰基氨基]-4-甲基-戊酸，为白色固体。
向[(S)-1-(苄基氨基甲酰基-羟基-甲基)-戊基]-氨基甲酸叔丁酯(101mg,0.29mmol)在CH2Cl2(3ml)中的溶液中加入三氟乙酸(0.5ml)。将反应混合物在室温搅拌2h，然后浓缩，用己烷处理，得到无色油状物。将该油状物溶于DMF(2ml)，加入N,N-二异丙基乙胺(0.19ml,1.1mmol)。然后加入(S)-2-[(S)-3,3-二甲基-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丁酰基氨基]-4-甲基-戊酸(82mg,0.22mmol)和HATU(92mg,0.24mmol)。将反应化合物在室温搅拌过夜，然后用水猝灭。通过过滤收集得到的浓稠白色沉淀物，用水冲洗，在高度真空下干燥，得到93mg(70％)(S)-3-{(S)-2-[(S)-3,3-二甲基-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丁酰基氨基]-4-甲基-戊酰基氨基}-2-羟基-庚酸苄基酰胺，为白色固体和差向异构体混合物。LC/MS：(M+H)+＝604。
向(S)-3-{(S)-2-[(S)-3,3-二甲基-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丁酰基氨基]-4-甲基-戊酰基氨基}-2-羟基-庚酸苄基酰胺(90mg,0.15mmol)在CH2Cl2(3ml)中的溶液中加入戴斯-马丁过碘烷(70mg,0.16mmol)。在几分钟内，形成浓稠白色沉淀物。将浆液在室温搅拌1h，然后加入饱和NaHCO3溶液(2ml)和10％Na2S2O3(2ml)。将双相混合物剧烈搅拌15min，然后分离各层，用CH2Cl2(2x)萃取水相。用MgSO4干燥合并的有机物，浓缩。使残余物吸附在硅胶上，通过使用30％－100％EtOAc/己烷的色谱法纯化，得到27mg(30％)(S)-3-{(S)-2-[(S)-3,3-二甲基-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丁酰基氨基]-4-甲基-戊酰基氨基}-2-氧代-庚酸苄基酰胺，为白色固体。LC/MS：(M+H)+＝602。
实施例3
(S)-3-{(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-[(S)-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酰基氨基}-2-氧代-庚酸苄基酰胺
在250ml 3-颈圆底烧瓶中，将Boc-O-甲基-L-酪氨酸(1.50g,5.08mmol)溶于65ml二氯甲烷。将无色溶液冷却至0℃。在0℃加入三乙胺(1.09g,1.5ml,10.8mmol)，然后加入4-二甲基氨基吡啶(90mg,0.74mmol)。滴加氯甲酸苄基酯(1.04g,0.87ml,6.09mmol)在10ml二氯甲烷中的溶液。将反应混合物在0℃搅拌3h，在室温搅拌1h。用20ml饱和NaHCO3溶液猝灭反应混合物，然后用20ml二氯甲烷萃取。然后用20ml饱和NaHCO3溶液洗涤有机层。用50ml二氯甲烷萃取水层。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。用80g硅胶与EtOAc/己烷(梯度0-20％EtOAc)对残余物进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到1.97g(96％)(S)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸苄基酯，为白色固体。
在100ml圆底烧瓶中，将(S)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸苄基酯(1.95g,4.81mmol)溶于15ml二氯甲烷，缓慢地加入三氟乙酸(10ml,130mmol)。将反应混合物在室温搅拌2h，然后浓缩。将残余物溶于14ml DMF，将溶液在0℃搅拌5min。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(5.18g,7.0ml,40.1mmol)。加入Boc-L-丙氨酸(761mg,4.02mmol)，然后加入HATU(1.68g,4.42mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌48h。用水猝灭反应混合物，用120ml乙醚萃取2次。将有机层用15ml水洗涤2次，用15ml盐水洗涤1次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得到(S)-2-((S)-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸苄基酯，为淡黄色油状物，将其不经进一步纯化即使用。
在100ml圆底烧瓶中，将(S)-2-((S)-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸苄基酯(2.42g,3.98mmol；纯度＝75％)溶于13ml二氯甲烷。缓慢加入三氟乙酸(8.5ml,110mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h，然后浓缩。将残余物溶于12ml DMF，将溶液在0℃搅拌5min。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(4.44g,6.0ml,34.4mmol)。加入2-吗啉代乙酸(502mg,3.46mmol)，然后加入HATU(1.45g,3.8mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜。用15ml水猝灭反应混合物，用120ml乙醚萃取2次。将有机层用15ml水洗涤2次，用15ml盐水洗涤1次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。用40g硅胶和EtOAc/己烷(梯度0-100％EtOAc)和MeOH/EtOAc(梯度0-5％MeOH)对残余物进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到962mg(58％)(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-[(S)-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酸苄基酯，为类白色固体。
在100ml圆底烧瓶中，将(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-[(S)-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酸苄基酯(0.96g,1.99mmol)溶于20ml甲醇。交替给烧瓶抽真空、充氩气3次。小心地加入20％披氢氧化钯碳(湿的,180mg,0.26mmol)。给烧瓶抽真空、充氩气、抽真空、充氢气。将反应混合物在氢气气氛(气囊)下于室温搅拌3h。
用Celite过滤反应混合物，用乙酸乙酯/甲醇冲洗。浓缩滤液，得到761mg(97％)(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-[(S)-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酸，为白色泡沫。
在10ml圆底烧瓶中，将[(S)-1-(苄基氨基甲酰基-羟基-甲基)-戊基]-氨基甲酸叔丁酯(100mg,0.29mmol)溶于3ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(0.5ml,6.49mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h，然后浓缩。将残余物溶于2ml DMF，将溶液在0℃搅拌5min。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(178mg,0.24ml,1.37mmol)。加入(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-[(S)-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酸(0.090g,0.23mmol)，然后加入HATU(96mg,0.25mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜。用3ml水猝灭反应混合物，用30ml乙醚萃取2次。将有机层用3ml水洗涤2次，用3ml盐水洗涤1次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。用30ml乙醚/EtOAc(1:1)将合并的水层再萃取3次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。用12g硅胶和MeOH/二氯甲烷(梯度0-5％MeOH)对合并的残余物进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到130mg(91％)(S)-2-羟基-3-{(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-[(S)-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酰基氨基}-庚酸苄基酰胺，为白色固体和差向异构体混合物。
在25ml圆底烧瓶中，将(S)-2-羟基-3-{(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-[(S)-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酰基氨基}-庚酸苄基酰胺(126mg,0.20mmol)溶于8ml二氯甲烷，加入戴斯-马丁过碘烷(128mg,0.30mmol)。将反应混合物在室温搅拌2h。用3ml饱和NaHCO3溶液和3ml 10％Na2S2O3溶液猝灭反应混合物，在室温剧烈搅拌30min。然后用30ml二氯甲烷萃取双相混合物。然后用5ml饱和NaHCO3溶液洗涤有机层。用30ml二氯甲烷将水层萃取2次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。使将残余物吸附在硅胶上，用12g硅胶和MeOH/二氯甲烷(梯度0-5％MeOH)进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到86mg(65％)(S)-3-{(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-[(S)-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酰基氨基}-2-氧代-庚酸苄基酰胺，为类白色固体。LC/MS：(M+H)+＝624。
实施例4
5-甲基-异唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基氨基乙二酰基-戊基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺
在250ml 3-颈圆底烧瓶中，将N-Boc-L-色氨酸(2.500g,8.21mmol)混悬于100ml二氯甲烷中。将反应混合物冷却至0℃。在0℃加入三乙胺(1.82g,2.5ml,17.9mmol)，然后加入4-二甲基氨基吡啶(146mg,1.19mmol)。滴加氯甲酸苄基酯(1.67g,1.4ml,9.81mmol)在10ml二氯甲烷中的溶液。将反应混合物在0℃搅拌2h，在室温搅拌2h。用30ml饱和NaHCO3溶液猝灭反应混合物，然后用50ml二氯甲烷萃取。然后用30ml饱和NaHCO3溶液洗涤有机层。用100ml二氯甲烷萃取水层。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。使残余物吸附在10g硅胶上，用80g硅胶和EtOAc/己烷(梯度0-30％EtOAc)进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到2.204g(68％)(S)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-(1H-吲哚-3-基)-丙酸苄基酯，为类白色固体。
在100ml圆底烧瓶中，将(S)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-(1H-吲哚-3-基)-丙酸苄基酯(2.200g,5.58mmol)溶于18ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(11ml,143mmol)。将反应混合物在室温搅拌2h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下。将残余物溶于18ml DMF，将溶液在0℃搅拌5min。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(6.66g,9.0ml,51.5mmol)。加入Boc-L-丙氨酸(948mg,5.01mmol)，然后加入HATU(2.1g,5.51mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜。用120ml乙醚和15ml水萃取反应混合物。用120ml乙醚萃取水层。将有机层用15ml水洗涤2次，用15ml盐水洗涤1次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。将残余物用80g硅胶和EtOAc/己烷(梯度0-40％EtOAc)进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到1.918g(82％)(S)-2-((S)-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-3-(1H-吲哚-3-基)-丙酸苄基酯，为类白色泡沫。
在50ml圆底烧瓶中，将(S)-2-((S)-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-3-(1H-吲哚-3-基)-丙酸苄基酯(1.915g,4.11mmol)溶于三氟乙酸(8.0ml,104mmol)。将淡棕色溶液在室温搅拌30min。将反应混合物滴加到冰冷的剧烈搅拌着的40ml饱和Na2CO3-溶液和40ml二氯甲烷的双相混合物中，然后用100ml二氯甲烷萃取。用100ml二氯甲烷将水层萃取2次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得到1.507g(100％)(S)-2-((S)-2-氨基-丙酰基氨基)-3-(1H-吲哚-3-基)-丙酸苄基酯，为类白色泡沫，将其不经进一步纯化即使用。
在50ml圆底烧瓶中，将5-甲基异唑-3-甲酸(219mg,1.72mmol)和(S)-2-((S)-2-氨基-丙酰基氨基)-3-(1H-吲哚-3-基)-丙酸苄基酯(750mg,2.05mmol)溶于6.0ml DMF。将反应混合物冷却至0℃。在0℃缓慢加入N,N-二异丙基乙胺(740mg,1.0ml,5.73mmol)，然后加入HATU(719mg,1.89mmol)。将黄色溶液在室温搅拌过夜，在此期间反应混合物变成橙色。用70ml乙醚和5ml水萃取反应混合物。用70ml乙醚萃取水层。将有机层用5ml水洗涤2次，用5ml盐水洗涤1次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。用25g硅胶和EtOAc/己烷(梯度0-70％EtOAc)对残余物进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到540mg(66％)(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-{(S)-2-[(5-甲基-异唑-3-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-丙酸苄基酯，为淡黄色油状物。
在50ml圆底烧瓶中，将(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-{(S)-2-[(5-甲基-异唑-3-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-丙酸苄基酯(530mg,1.12mmol)溶于12ml甲醇。将烧瓶交替抽真空、充氩气3次。小心地加入20％披氢氧化钯碳(湿的,102mg,0.15mmol)。给烧瓶抽真空、充氩气、抽真空、充氢气。将反应混合物在氢气气氛(气囊)下于室温搅拌3h。用Celite过滤反应混合物，用乙酸乙酯/甲醇冲洗。浓缩滤液，得到414mg(87％；纯度＝90％)(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-{(S)-2-[(5-甲基-异唑-3-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-丙酸，为橙色泡沫。
在10ml圆底烧瓶中，将[(S)-1-(苄基氨基甲酰基-羟基-甲基)-戊基]-氨基甲酸叔丁酯(100mg,0.29mmol)溶于3.0ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(0.5ml,6.49mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。蒸发溶剂，将残余物置于高度真空下30min。将残余物溶于2.0ml DMF，将溶液在0℃搅拌5min。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(185mg,0.25ml,1.43mmol)。加入(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-{(S)-2-[(5-甲基-异唑-3-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-丙酸(100mg,0.23mmol；纯度＝90％)，然后加入HATU(98mg,0.26mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜。用40ml乙醚和3ml水萃取反应混合物。用40ml乙醚萃取水层。将有机层用3ml水洗涤2次，用3ml盐水洗涤1次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。用12g硅胶和MeOH/二氯甲烷(梯度0-5％MeOH)对残余物进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到80mg(55％)5-甲基-异唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-[(S)-1-(苄基氨基甲酰基-羟基-甲基)-戊基氨基甲酰基]-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为类白色固体，为差向异构体混合物。
在25ml圆底烧瓶中，将5-甲基-异唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-[(S)-1-(苄基氨基甲酰基-羟基-甲基)-戊基氨基甲酰基]-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺(73mg,0.12mmol)溶于4.2ml二氯甲烷，加入戴斯-马丁过碘烷(75mg,0.18mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。用2.5ml饱和NaHCO3溶液和2.5ml 10％Na2S2O3溶液猝灭反应混合物，在室温剧烈搅拌1h。然后用30ml二氯甲烷萃取双相混合物。然后用5ml饱和NaHCO3-溶液洗涤有机层。用30ml二氯甲烷将水层萃取2次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。用12g硅胶和MeOH/二氯甲烷(梯度0-5％MeOH)对残余物进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到18mg(24％)5-甲基-异唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基氨基乙二酰基-戊基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为淡棕色固体。LC/MS：(M+H)+＝613。
实施例5
3-甲基-1H-茚-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基氨基乙二酰基-戊基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺
在100ml圆底烧瓶中，将L-色氨酸叔丁酯盐酸盐(1.17g,3.94mmol)冷却至0℃。加入13ml DMF，将溶液在0℃搅拌5min。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(1.41g,1.9ml,10.9mmol)。加入N-苄氧基羰基-L-丙氨酸(0.800g,3.58mmol)，然后加入HATU(1.5g,3.94mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜。用120ml乙醚和15ml水萃取反应混合物。用120ml乙醚萃取水层。将有机层用15ml水洗涤2次，用15ml盐水洗涤1次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得到(S)-2-((S)-2-苄氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-3-(1H-吲哚-3-基)-丙酸叔丁酯，为类白色泡沫，将其不经进一步纯化即使用。
在200ml圆底烧瓶中，将(S)-2-((S)-2-苄氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-3-(1H-吲哚-3-基)-丙酸叔丁酯(1.959g,3.37mmol；纯度＝80％)溶于35ml甲醇。将烧瓶交替抽真空、充氩气3次。小心地加入20％披氢氧化钯碳(湿的,307mg,0.44mmol)。给烧瓶抽真空、充氩气、抽真空、充氢气。将反应混合物在氢气气氛(气囊)下于室温搅拌2.5h。用Celite过滤反应混合物，用乙酸乙酯冲洗。浓缩滤液，得到(S)-2-((S)-2-氨基-丙酰基氨基)-3-(1H-吲哚-3-基)-丙酸叔丁酯，为淡黄色油状物，将其不经进一步纯化即使用。
在100ml圆底烧瓶中，将3-甲基-1H-茚-2-甲酸(0.500g,2.87mmol)和(S)-2-((S)-2-氨基-丙酰基氨基)-3-(1H-吲哚-3-基)-丙酸叔丁酯(1.48g,3.35mmol；纯度＝75％)溶于10ml DMF。将反应混合物冷却至0℃。在0℃缓慢地加入N,N-二异丙基乙胺(1.18g,1.6ml,9.16mmol)，然后加入HATU(1.2g,3.16mmol)。将黄色溶液在室温搅拌过夜。用水和石油醚稀释反应混合物(形成类白色沉淀物)。过滤该混悬液，用水和少量石油醚冲洗。用旋转蒸发器干燥得到的类白色固体，然后置于高度真空下，得到1.181g(84％)(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-{(S)-2-[(3-甲基-1H-茚-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-丙酸叔丁酯。
向微波小瓶中加入(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-{(S)-2-[(3-甲基-1H-茚-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-丙酸叔丁酯(0.120g,0.25mmol)和1,1,1,3,3,3-六氟-2-丙醇(2.0ml,19.0mmol)。向小瓶中充氩气，密封。将无色溶液在微波照射下于120℃加热2h。
浓缩反应混合物，得到(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-{(S)-2-[(3-甲基-1H-茚-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-丙酸，为类白色泡沫，将其不经进一步纯化即使用。
在10ml圆底烧瓶中，将[(S)-1-(苄基氨基甲酰基-羟基-甲基)-戊基]-氨基甲酸叔丁酯(100mg,0.29mmol)溶于3.0ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(0.5ml,6.49mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下15min。将残余物溶于1.0ml DMF，将溶液在0℃搅拌5min。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(185mg,0.25ml,1.43mmol)。加入溶于1.0ml DMF的(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-{(S)-2-[(3-甲基-1H-茚-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-丙酸(132mg,0.23mmol；纯度＝75％)，然后加入HATU(96mg,0.25mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜。用水和石油醚稀释反应混合物(形成类白色沉淀物)。过滤混悬液，用水和少量石油醚冲洗。用旋转蒸发器干燥得到的类白色固体，然后置于高度真空下，得到121mg(79％)3-甲基-1H-茚-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-[(S)-1-(苄基氨基甲酰基-羟基-甲基)-戊基氨基甲酰基]-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为差向异构体混合物。
在25ml圆底烧瓶中，将3-甲基-1H-茚-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-[(S)-1-(苄基氨基甲酰基-羟基-甲基)-戊基氨基甲酰基]-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺(118mg,0.18mmol)溶于6.5ml二氯甲烷，加入戴斯-马丁过碘烷(113mg,0.27mmol)。将反应混合物在室温搅拌3h(形成沉淀物)。用3ml饱和NaHCO3-溶液和3ml 10％Na2S2O3-溶液猝灭反应混合物，在室温剧烈搅拌1h。然后用30ml二氯甲烷萃取双相混合物。然后用5ml饱和NaHCO3-溶液洗涤有机层。用30ml二氯甲烷将水层萃取2次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。使残余物吸附在1g硅胶上，用12g硅胶和MeOH/二氯甲烷(梯度0-5％MeOH)进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩。将残余物(44mg棕色固体)与二氯甲烷/己烷一起研磨，得到28mg(23％)3-甲基-1H-茚-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基氨基乙二酰基-戊基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为淡棕色固体。LC/MS：(M-H)-＝660。
实施例6
5-甲基-异唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基氨基乙二酰基-戊基氨基甲酰基)-2-甲氧基-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺
在250ml 3-颈圆底烧瓶中，将Boc-O-甲基-L-丝氨酸二环己基铵盐(1.800g,4.49mmol)溶于55ml二氯甲烷。将无色溶液冷却至0℃。在0℃加入三乙胺(1.02g,1.4ml,10.0mmol)，然后加入4-二甲基氨基吡啶(80mg,0.65mmol)。滴加氯甲酸苄基酯(1.67g,1.4ml,9.81mmol)在10ml二氯甲烷中的溶液(反应混合物变成黄色混悬液)。将反应混合物在0℃搅拌2h，在室温搅拌过夜。用20ml饱和NaHCO3-溶液猝灭反应混合物，然后用50ml二氯甲烷和10ml水萃取。然后用20ml饱和NaHCO3-溶液洗涤有机层。用100ml二氯甲烷萃取水层。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。用80g硅胶和EtOAc/己烷(梯度0-20％EtOAc)对残余物(黄色油状物)进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到1.223g(88％)(S)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-甲氧基-丙酸苄基酯，为淡黄色油状物。
将(S)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-甲氧基-丙酸苄基酯(1.22g,3.94mmol)溶于13ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(8.5ml,110mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下。将残余物(淡黄色油状物)溶于12ml DMF，将溶液在0℃搅拌5min。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(3.7g,5.0ml,28.6mmol)。加入Boc-L-丙氨酸(641mg,3.39mmol)，然后加入HATU(1.42g,3.73mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜。用100ml乙醚和10ml水萃取反应混合物。用100ml乙醚萃取水层。将有机层用10ml水洗涤3次，用10ml盐水洗涤1次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得到(S)-2-((S)-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-3-甲氧基-丙酸苄基酯，为黄色油状物，将其不经进一步纯化即使用。
在50ml圆底烧瓶中，将(S)-2-((S)-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-3-甲氧基-丙酸苄基酯(863mg,1.7mmol；纯度＝75％)溶于6.0ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(3.0ml,38.9mmol)。将反应混合物在室温搅拌3h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下30min。将残余物溶于5.0mlDMF，将溶液在0℃搅拌5min。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(1.48g,2.0ml,11.5mmol)。加入5-甲基异唑-3-甲酸(190mg,1.49mmol)，然后加入HATU(625mg,1.64mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜。用70ml乙醚和5ml水萃取反应混合物。用70ml乙醚萃取水层。将有机层用5ml水洗涤2次，用5ml盐水洗涤1次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。用25g硅胶和EtOAc/己烷(梯度0-70％EtOAc)对残余物进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到571mg(93％)(S)-3-甲氧基-2-{(S)-2-[(5-甲基-异唑-3-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-丙酸苄基酯，为淡黄色油状物。
在50ml圆底烧瓶中，将(S)-3-甲氧基-2-{(S)-2-[(5-甲基-异唑-3-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-丙酸苄基酯(565mg,1.38mmol)溶于12ml甲醇。将烧瓶交替抽真空、充氩气3次。小心地加入20％披氢氧化钯碳(125mg,0.18mmol)。给烧瓶抽真空、充氩气、抽真空、充氢气。将反应混合物在氢气气氛(气囊)下于室温搅拌2h。用Celite过滤反应混合物，用乙酸乙酯/甲醇冲洗。浓缩滤液，得到427mg(93％；纯度＝90％)(S)-3-甲氧基-2-{(S)-2-[(5-甲基-异唑-3-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-丙酸，为淡黄色泡沫。
在10ml圆底烧瓶中，将[(S)-1-(苄基氨基甲酰基-羟基-甲基)-戊基]-氨基甲酸叔丁酯(100mg,0.29mmol)溶于3.0ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(0.5ml,6.49mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下30min。将残余物溶于2.0ml DMF，将溶液在0℃搅拌5min。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(185mg,0.25ml,1.43mmol)。加入(S)-3-甲氧基-2-{(S)-2-[(5-甲基-异唑-3-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-丙酸(79mg,0.24mmol；纯度＝90％)，然后加入HATU(99mg,0.26mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜。用40ml乙醚/EtOAc(1:1)和3ml水萃取反应混合物。用40ml乙醚/EtOAc(1:1)萃取水层。将有机层用3ml水洗涤2次，用3ml盐水洗涤1次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。用12g硅胶和MeOH/二氯甲烷(梯度0-5％MeOH)对残余物进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到80mg(63％)5-甲基-异唑-3-甲酸((S)-1-{(S)-1-[(S)-1-(苄基氨基甲酰基-羟基-甲基)-戊基氨基甲酰基]-2-甲氧基-乙基氨基甲酰基}-乙基)-酰胺，为类白色固体，为差向异构体混合物。
在25ml圆底烧瓶中，将5-甲基-异唑-3-甲酸((S)-1-{(S)-1-[(S)-1-(苄基氨基甲酰基-羟基-甲基)-戊基氨基甲酰基]-2-甲氧基-乙基氨基甲酰基}-乙基)-酰胺(77mg,0.15mmol)溶于5.2ml二氯甲烷，加入戴斯-马丁过碘烷(92mg,0.22mmol)。将反应混合物在室温搅拌3h。用3ml饱和NaHCO3-溶液和3ml 10％Na2S2O3-溶液猝灭反应混合物，在室温剧烈搅拌30min。然后用30ml二氯甲烷萃取双相混合物。然后用5ml饱和NaHCO3-溶液洗涤有机层。用30ml二氯甲烷将水层萃取2次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。用12g硅胶和MeOH/二氯甲烷(梯度0-5％MeOH)对残余物进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到48mg(59％)5-甲基-异唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基氨基乙二酰基-戊基氨基甲酰基)-2-甲氧基-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为类白色固体，为差向异构体混合物(比例～6:1；基于NMR)。LC/MS：(M+H)+＝530。
实施例7
3-甲基-1H-茚-2-甲酸((S)-1-{(S)-2-(1H-吲哚-3-基)-1-[(S)-1-((S)-1-苯基-乙基氨基乙二酰基)-戊基氨基甲酰基]-乙基氨基甲酰基}-乙基)-酰胺
向10ml圆底烧瓶中加入(S)-3-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-庚酸(200mg,0.77mmol)、(S)-1-苯基乙胺(124mg,0.13ml,1.02mmol)和3.0ml DMF。加入N,N-二异丙基乙胺(244mg,0.33ml,1.89mmol)，然后加入HATU(320mg,0.84mmol)。将黄色溶液在室温搅拌过夜。用40ml乙醚/EtOAc(1:1)和3ml水萃取反应混合物。用40ml乙醚/EtOAc(1:1)萃取水层。将有机层用3ml水洗涤2次，用3ml盐水洗涤1次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。用25g硅胶和EtOAc/己烷(梯度0-30％EtOAc)对残余物进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到148mg(53％){(S)-1-[羟基-((S)-1-苯基-乙基氨基甲酰基)-甲基]-戊基}-氨基甲酸叔丁酯，为类白色固体，为差向异构体混合物。
在10ml圆底烧瓶中，将{(S)-1-[羟基-((S)-1-苯基-乙基氨基甲酰基)-甲基]-戊基}-氨基甲酸叔丁酯(135mg,0.37mmol)溶于3.7ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(0.65ml,8.44mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下30min。将残余物溶于2.5ml DMF，将溶液在0℃搅拌5min。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(259mg,0.35ml,2.00mmol)。加入(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-{(S)-2-[(3-甲基-1H-茚-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-丙酸(0.180g,0.29mmol；纯度＝70％)，然后加入HATU(122mg,0.32mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜。用40ml乙醚/EtOAc(1:1)和3ml水萃取反应混合物。用40ml乙醚/EtOAc(1:1)萃取水层。将有机层用3ml水洗涤2次，用3ml盐水洗涤1次。合并有机层，浓缩。将残余物与石油醚一起研磨，得到274mg(97％；纯度＝70％)3-甲基-1H-茚-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-{(S)-1-[羟基-((S)-1-苯基-乙基氨基甲酰基)-甲基]-戊基氨基甲酰基}-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为淡黄色固体和差向异构体混合物。
在50ml圆底烧瓶中，将3-甲基-1H-茚-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-{(S)-1-[羟基-((S)-1-苯基-乙基氨基甲酰基)-甲基]-戊基氨基甲酰基}-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺(272mg,0.28mmol；纯度＝70％)溶于10ml二氯甲烷，加入戴斯-马丁过碘烷(179mg,0.42mmol)。将反应混合物在室温搅拌3h。用4ml饱和NaHCO3-溶液和4ml 10％Na2S2O3-溶液猝灭反应混合物，在室温剧烈搅拌1h。然后用30ml二氯甲烷萃取双相混合物。然后用5ml饱和NaHCO3-溶液洗涤有机层。用30ml二氯甲烷将水层萃取2次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。用12g硅胶和MeOH/二氯甲烷(梯度0-5％MeOH)对残余物进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩。将残余物(棕色油状物)与二氯甲烷/己烷一起研磨，得到15mg(7％；纯度＝90％)3-甲基-1H-茚-2-甲酸((S)-1-{(S)-2-(1H-吲哚-3-基)-1-[(S)-1-((S)-1-苯基-乙基氨基乙二酰基)-戊基氨基甲酰基]-乙基氨基甲酰基}-乙基)-酰胺，为淡棕色固体。LC/MS：(M-H)-＝674。
实施例8
3-甲基-1H-茚-2-甲酸((S)-1-{(S)-2-(1H-吲哚-3-基)-1-[(S)-1-((R)-1-苯基-乙基氨基乙二酰基)-戊基氨基甲酰基]-乙基氨基甲酰基}-乙基)-酰胺
向10ml圆底烧瓶中加入(S)-3-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-庚酸(200mg,0.77mmol)、(R)-1-苯基乙胺(124mg,0.13ml,1.02mmol)和3.0ml DMF。加入N,N-二异丙基乙胺(244mg,0.33ml,1.89mmol)，然后加入HATU(320mg,0.84mmol)。将黄色溶液在室温搅拌过夜。用40ml乙醚/EtOAc(1:1)和3ml水萃取反应混合物。用40ml乙醚/EtOAc(1:1)萃取水层。将有机层用3ml水洗涤2次，用3ml盐水洗涤1次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。用25g硅胶和EtOAc/己烷(梯度0-30％EtOAc)对残余物进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到123mg(44％){(S)-1-[羟基-((R)-1-苯基-乙基氨基甲酰基)-甲基]-戊基}-氨基甲酸叔丁酯，为类白色固体，为差向异构体混合物。
在10ml圆底烧瓶中，将{(S)-1-[羟基-((R)-1-苯基-乙基氨基甲酰基)-甲基]-戊基}-氨基甲酸叔丁酯(121mg,0.33mmol)溶于3.3ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(0.58ml,7.53mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下30min。将残余物溶于2.5ml DMF，将溶液在0℃搅拌5min。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(222mg,0.30ml,1.72mmol)。加入(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-{(S)-2-[(3-甲基-1H-茚-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-丙酸(160mg,0.26mmol；纯度＝70％)，然后加入HATU(109mg,0.29mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜。用水和石油醚稀释反应混合物(形成类白色沉淀物)。过滤该混悬液，用水和少量石油醚冲洗。用旋转蒸发器干燥得到的类白色固体，然后置于高度真空下，得到136mg(77％)3-甲基-1H-茚-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-{(S)-1-[羟基-((R)-1-苯基-乙基氨基甲酰基)-甲基]-戊基氨基甲酰基}-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为差向异构体混合物。
在50ml圆底烧瓶中，将3-甲基-1H-茚-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-{(S)-1-[羟基-((R)-1-苯基-乙基氨基甲酰基)-甲基]-戊基氨基甲酰基}-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺(134mg,0.20mmol)溶于7.0ml二氯甲烷，加入戴斯-马丁过碘烷(126mg,0.30mmol)。将反应混合物在室温搅拌3h。用4ml饱和NaHCO3-溶液和4ml 10％Na2S2O3-溶液猝灭反应混合物，在室温剧烈搅拌1.5h。然后用30ml二氯甲烷萃取双相混合物。然后用5ml饱和NaHCO3-溶液洗涤有机层。用30ml二氯甲烷将水层萃取2次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。用12g硅胶MeOH/二氯甲烷(梯度0-5％MeOH)对残余物进行色谱。合并含有产物的所有级分，浓缩。将残余物与二氯甲烷/己烷一起研磨，得到28mg(20％)3-甲基-1H-茚-2-甲酸((S)-1-{(S)-2-(1H-吲哚-3-基)-1-[(S)-1-((R)-1-苯基-乙基氨基乙二酰基)-戊基氨基甲酰基]-乙基氨基甲酰基}-乙基)-酰胺，为淡黄色固体。LC/MS：(M-H)-＝674。
实施例9
{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基氨基乙二酰基-戊基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯
向微波小瓶中加入(S)-2-((S)-2-苄氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-3-(1H-吲哚-3-基)-丙酸叔丁酯(145mg,0.26mmol；纯度＝85％)和1,1,1,3,3,3-六氟-2-丙醇(2.2ml,20.9mmol)。向小瓶中充氩气，密封。将无色溶液在微波照射下于120℃加热2h。浓缩反应混合物，得到(S)-2-((S)-2-苄氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-3-(1H-吲哚-3-基)-丙酸，为类白色泡沫，将其不经进一步纯化即使用。
在10ml圆底烧瓶中，将[(S)-1-(苄基氨基甲酰基-羟基-甲基)-戊基]-氨基甲酸叔丁酯(95mg,0.27mmol)溶于3.0ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(0.5ml,6.49mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下30min。将残余物溶于1.0ml DMF，将溶液在0℃搅拌5min。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(185mg,0.25ml,1.43mmol)。加入溶于1.0ml DMF的(S)-2-((S)-2-苄氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-3-(1H-吲哚-3-基)-丙酸(161mg,0.24mmol；纯度＝60％)，然后加入HATU(99mg,0.26mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜。用水和石油醚稀释反应混合物(形成类白色沉淀物)。过滤该混悬液，用水和少量石油醚冲洗。用旋转蒸发器干燥得到的类白色固体，然后置于高度真空下，得到134mg(89％){(S)-1-[(S)-1-[(S)-1-(苄基氨基甲酰基-羟基-甲基)-戊基氨基甲酰基]-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯，为差向异构体混合物。
在25ml圆底烧瓶中，将{(S)-1-[(S)-1-[(S)-1-(苄基氨基甲酰基-羟基-甲基)-戊基氨基甲酰基]-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯(132mg,0.21mmol)溶于7.5ml二氯甲烷，加入戴斯-马丁过碘烷(131mg,0.31mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。用4ml饱和NaHCO3-溶液和4ml 10％Na2S2O3-溶液猝灭反应混合物，在室温剧烈搅拌1h。然后用30ml二氯甲烷萃取双相混合物。然后用5ml饱和NaHCO3-溶液洗涤有机层。用30ml二氯甲烷将水层萃取2次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。用1g硅胶吸附残余物，用12g硅胶和MeOH/二氯甲烷(梯度0-5％MeOH)进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩。将残余物与二氯甲烷/己烷一起研磨，得到35mg(24％；纯度＝90％){(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基氨基乙二酰基-戊基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯，为淡棕色固体。LC/MS：(M+H)+＝640。
实施例10
(S)-3-{(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-[(S)-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酰基氨基}-2-氧代-庚酸苄基酰胺
在50ml圆底烧瓶中，2-吗啉代乙酸(275mg,1.89mmol)和(S)-2-((S)-2-氨基-丙酰基氨基)-3-(1H-吲哚-3-基)-丙酸叔丁酯(900mg,2.17mmol；纯度＝80％)溶于6.6ml DMF。将反应混合物冷却至0℃。在0℃缓慢地加入N,N-二异丙基乙胺(740mg,1.0ml,5.73mmol)，然后加入HATU(792mg,2.08mmol)。将黄色溶液在室温搅拌过夜。用二氯甲烷和水萃取反应混合物。用水洗涤有机层。用二氯甲烷将水层萃取2次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩，然后置于高度真空下。用40g硅胶和MeOH/二氯甲烷(梯度0-5％MeOH)对残余物进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到937mg(97％；纯度＝90％)(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-[(S)-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酸叔丁酯，为类白色泡沫。
向微波小瓶中加入(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-[(S)-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酸叔丁酯(135mg,0.27mmol；纯度＝90％)和1,1,1,3,3,3-六氟-2-丙醇(2.2ml,20.9mmol)。向小瓶中充氩气，密封。将无色溶液在微波照射下于120℃加热2h(反应混合物变成黄色溶液)。浓缩反应混合物，得到(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-[(S)-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酸，为黄色泡沫，将其不经进一步纯化即使用。
在10ml圆底烧瓶中，将[(S)-1-(苄基氨基甲酰基-羟基-甲基)-戊基]-氨基甲酸叔丁酯(100mg,0.29mmol)溶于3.0ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(0.5ml,6.49mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下15min。将残余物和(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-[(S)-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酸(205mg,0.25mmol；纯度＝50％)溶于2.0ml二氯甲烷，冷却至0℃。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(222mg,0.30ml,1.72mmol)，然后加入HATU(107mg,0.28mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜。用3ml水和30ml二氯甲烷萃取反应混合物。然后用3ml水洗涤有机层。用30ml二氯甲烷将水层萃取2次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。用12g硅胶和MeOH/二氯甲烷(梯度0-10％MeOH)对残余物进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到100mg(62％)(S)-2-羟基-3-{(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-[(S)-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酰基氨基}-庚酸苄基酰胺，为黄色固体和差向异构体混合物。
在25ml圆底烧瓶中，将(S)-2-羟基-3-{(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-[(S)-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酰基氨基}-庚酸苄基酰胺(89mg,0.140mmol)溶于5.2ml二氯甲烷，加入戴斯-马丁过碘烷(90mg,0.21mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h(反应混合物变成深棕色)。用3ml饱和NaHCO3-溶液和3ml 10％Na2S2O3-溶液猝灭反应混合物，在室温剧烈搅拌30min。然后用30ml二氯甲烷萃取双相混合物。然后用5ml饱和NaHCO3-溶液洗涤有机层。用30ml二氯甲将水层萃取2次烷。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。用12g硅胶和MeOH/二氯甲烷(梯度0-5％MeOH)对残余物进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到18mg(19％)(S)-3-{(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-[(S)-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酰基氨基}-2-氧代-庚酸苄基酰胺，为淡棕色泡沫。LC/MS：(M+H)+＝633。
实施例11
茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基氨基乙二酰基-戊基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺
在50ml圆底烧瓶中，将(S)-2-((S)-2-氨基-丙酰基氨基)-3-(1H-吲哚-3-基)-丙酸叔丁酯(800mg,1.93mmol；纯度＝80％)溶于5.9ml DMF。将浅黄色溶液冷却至0℃。在0℃缓慢地加入N,N-二异丙基乙胺(666mg,0.90ml,5.15mmol)。加入2-茚满甲酸(275mg,1.7mmol)，然后加入HATU(709mg,1.87mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌3天。用70ml乙醚和10ml水萃取反应混合物。用70ml乙醚萃取水层。将有机层用10ml水洗涤2次，用10ml盐水洗涤1次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。将残余物(淡黄色油状物)用40g硅胶和EtOAc/己烷(梯度0-60％EtOAc)进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到761mg(90％)(S)-2-{(S)-2-[(茚满-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-3-(1H-吲哚-3-基)-丙酸叔丁酯，为类白色泡沫。
向微波小瓶中加入(S)-2-{(S)-2-[(茚满-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-3-(1H-吲哚-3-基)-丙酸叔丁酯(136mg,0.27mmol)和1,1,1,3,3,3-六氟-2-丙醇(2.2ml,20.9mmol)。向小瓶中充氩气，密封。将无色溶液在微波照射下于120℃加热2h。浓缩反应混合物，得到(S)-2-{(S)-2-[(茚满-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-3-(1H-吲哚-3-基)-丙酸，为淡棕色油状物，将其不经进一步纯化即使用。
在10ml圆底烧瓶中，将[(S)-1-(苄基氨基甲酰基-羟基-甲基)-戊基]-氨基甲酸叔丁酯(110mg,0.31mmol)溶于3.0ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(0.55ml,7.14mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下15min。将残余物溶于1.0ml DMF，将溶液在0℃搅拌5min。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(222mg,0.30ml,1.72mmol)。加入溶于1.1ml DMF的(S)-2-{(S)-2-[(茚满-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-3-(1H-吲哚-3-基)-丙酸(210mg,0.25mmol；纯度＝50％)，然后加入HATU(105mg,0.28mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜。用水和石油醚稀释反应混合物(形成类白色沉淀物)。过滤该混悬液，用水和少量石油醚冲洗。用旋转蒸发器干燥得到的类白色固体，然后置于高度真空下，得到157mg(96％)茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-[(S)-1-(苄基氨基甲酰基-羟基-甲基)-戊基氨基甲酰基]-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为差向异构体混合物。
在25ml圆底烧瓶中，将茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-[(S)-1-(苄基氨基甲酰基-羟基-甲基)-戊基氨基甲酰基]-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺(151mg,0.23mmol)部分溶于8.5ml二氯甲烷，加入戴斯-马丁过碘烷(147mg,0.35mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。用4ml饱和NaHCO3-溶液和4ml 10％Na2S2O3-溶液猝灭反应混合物，在室温剧烈搅拌30min。然后用30ml二氯甲烷萃取双相混合物。然后用5ml饱和NaHCO3-溶液洗涤有机层。用30ml二氯甲烷将水层萃取2次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。用12g硅胶和MeOH/二氯甲烷(梯度0-5％MeOH)对残余物进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩。将残余物与二氯甲烷/己烷一起研磨，得到51mg(30％；纯度＝90％)茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基氨基乙二酰基-戊基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为棕色固体。LC/MS：(M-H)-＝648。
实施例12
N-{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基氨基乙二酰基-戊基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-2,3-二氯-苯甲酰胺
在50ml圆底烧瓶中，将(S)-2-((S)-2-氨基-丙酰基氨基)-3-(1H-吲哚-3-基)-丙酸叔丁酯(800mg,1.93mmol；纯度＝80％)溶于5.9ml DMF。将浅黄色溶液冷却至0℃。在0℃缓慢地加入N,N-二异丙基乙胺(666mg,0.9ml,5.15mmol)。加入2,3-二氯苯甲酸(325mg,1.7mmol)，然后加入HATU(712mg,1.87mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜。用70ml乙醚和10ml水萃取反应混合物。用70ml乙醚萃取水层。将有机层用10ml水洗涤2次，用10ml盐水洗涤1次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。将残余物(淡黄色油状物)用40g硅胶和EtOAc/己烷(梯度0-40％EtOAc)进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到794mg(93％)(S)-2-[(S)-2-(2,3-二氯-苯甲酰基氨基)-丙酰基氨基]-3-(1H-吲哚-3-基)-丙酸叔丁酯，为类白色泡沫。
向微波小瓶中加入(S)-2-[(S)-2-(2,3-二氯-苯甲酰基氨基)-丙酰基氨基]-3-(1H-吲哚-3-基)-丙酸叔丁酯(137mg,0.27mmol)和1,1,1,3,3,3-六氟-2-丙醇(2.2ml,20.9mmol)。向小瓶中充氩气，密封。将无色溶液在微波照射下于120℃加热2h。浓缩反应混合物，得到(S)-2-[(S)-2-(2,3-二氯-苯甲酰基氨基)-丙酰基氨基]-3-(1H-吲哚-3-基)-丙酸，为类白色泡沫，将其不经进一步纯化即使用。
在10ml圆底烧瓶中，将[(S)-1-(苄基氨基甲酰基-羟基-甲基)-戊基]-氨基甲酸叔丁酯(110mg,0.31mmol)溶于3.0ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(0.55ml,7.14mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下15min。将残余物溶于1.0ml DMF，将溶液在0℃搅拌5min。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(222mg,0.30ml,1.72mmol)。加入溶于1.1ml DMF的(S)-2-[(S)-2-(2,3-二氯-苯甲酰基氨基)-丙酰基氨基]-3-(1H-吲哚-3-基)-丙酸(149mg,0.27mmol；纯度＝80％)，然后加入HATU(111mg,0.29mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜。用水和石油醚稀释反应混合物(形成类白色沉淀物)。过滤该混悬液，用水和少量石油醚冲洗。用旋转蒸发器干燥得到的类白色固体，然后置于高度真空下，得到158mg(87％)N-{(S)-1-[(S)-1-[(S)-1-(苄基氨基甲酰基-羟基-甲基)-戊基氨基甲酰基]-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-2,3-二氯-苯甲酰胺，为差向异构体混合物。
在25ml圆底烧瓶中，将N-{(S)-1-[(S)-1-[(S)-1-(苄基氨基甲酰基-羟基-甲基)-戊基氨基甲酰基]-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-2,3-二氯-苯甲酰胺(152mg,0.22mmol)部分溶于8.0ml二氯甲烷，加入戴斯-马丁过碘烷(142mg,0.33mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。用3.5ml饱和NaHCO3-溶液和3.5ml 10％Na2S2O3-溶液猝灭反应混合物，在室温剧烈搅拌30min。然后用30ml二氯甲烷萃取双相混合物。然后用5ml饱和NaHCO3-溶液洗涤有机层。用30ml二氯甲烷将水层萃取2次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。用12g硅胶和MeOH/二氯甲烷(梯度0-5％MeOH)对残余物进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩。将残余物与二氯甲烷/己烷一起研磨，得到38mg(24％)N-{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基氨基乙二酰基-戊基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-2,3-二氯-苯甲酰胺，为淡黄色固体。LC/MS：(M-H)-＝676。
实施例13
2-甲基-2H-吡唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基氨基乙二酰基-戊基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺
在50ml圆底烧瓶中，将(S)-2-((S)-2-氨基-丙酰基氨基)-3-(1H-吲哚-3-基)-丙酸叔丁酯(800mg,1.93mmol；纯度＝80％)溶于5.9ml DMF。将浅黄色溶液冷却至0℃。在0℃缓慢地加入N,N-二异丙基乙胺(666mg,0.9ml,5.15mmol)。加入1-甲基-1H-吡唑-5-甲酸(214mg,1.7mmol)，然后加入HATU(710mg,1.87mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜。用70ml乙醚和10ml水萃取反应混合物。用70ml乙醚萃取水层。将有机层用10ml水洗涤2次，用10ml盐水洗涤1次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。将残余物(淡黄色油状物)用40g硅胶和EtOAc/己烷(梯度0-70％EtOAc)进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到774mg(99％；纯度＝95％)(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-{(S)-2-[(2-甲基-2H-吡唑-3-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-丙酸叔丁酯，为类白色泡沫。
向微波小瓶中加入(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-{(S)-2-[(2-甲基-2H-吡唑-3-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-丙酸叔丁酯(126mg,0.27mmol)和1,1,1,3,3,3-六氟-2-丙醇(2.2ml,20.9mmol)。向小瓶中充氩气，密封。将无色溶液在微波照射下于120℃加热2h(反应混合物变成淡紫色溶液)。浓缩反应混合物，得到(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-{(S)-2-[(2-甲基-2H-吡唑-3-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-丙酸，为紫色泡沫，将其不经进一步纯化即使用。
在10ml圆底烧瓶中，将[(S)-1-(苄基氨基甲酰基-羟基-甲基)-戊基]-氨基甲酸叔丁酯(110mg,0.31mmol)溶于3.0ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(0.55ml,7.14mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下15min。将残余物溶于1.0ml DMF，将溶液在0℃搅拌5min。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(296mg,0.40ml,2.29mmol)。加入溶于1.1ml DMF的(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-{(S)-2-[(2-甲基-2H-吡唑-3-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-丙酸(169mg,0.26mmol；纯度＝60％)，然后加入HATU(111mg,0.29mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜。用水和石油醚稀释反应混合物(形成类白色沉淀物)。过滤该混悬液，用水和少量石油醚冲洗。用旋转蒸发器干燥得到的类白色固体，然后置于高度真空下(78mg类白色固体)。用40ml乙醚/EtOAc(3:1)萃取来自以上的滤液。用40ml乙醚/EtOAc(3:1)萃取水层。将有机层用5ml水洗涤2次，用5ml盐水洗涤1次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。将残余物与石油醚和几滴二氯甲烷一起研磨。将得到的类白色固体再溶于二氯甲烷，与来自以上的78mg类白色固体合并，浓缩，得到134mg(82％)2-甲基-2H-吡唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-[(S)-1-(苄基氨基甲酰基-羟基-甲基)-戊基氨基甲酰基]-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为类白色固体和差向异构体混合物。
在25ml圆底烧瓶中，将2-甲基-2H-吡唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-[(S)-1-(苄基氨基甲酰基-羟基-甲基)-戊基氨基甲酰基]-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺(131mg,0.21mmol)部分溶于8.0ml二氯甲烷，加入戴斯-马丁过碘烷(135mg,0.32mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。用3.5ml饱和NaHCO3-溶液和3.5ml 10％Na2S2O3-溶液猝灭反应混合物，在室温剧烈搅拌30min。然后用30ml二氯甲烷萃取双相混合物。然后用5ml饱和NaHCO3-溶液洗涤有机层。用30ml二氯甲烷将水层萃取2次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。用12g硅胶和MeOH/二氯甲烷(梯度0-5％MeOH)对残余物进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩。将残余物与二氯甲烷/己烷一起研磨，得到29mg(21％)2-甲基-2H-吡唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基氨基乙二酰基-戊基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为淡棕色固体。LC/MS：(M-H)-＝612。
实施例14
(S)-3-{(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-[(S)-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酰基氨基}-2-氧代-庚酸甲基酰胺
向10ml圆底烧瓶中加入(S)-3-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-庚酸(250mg,0.96mmol)、甲胺盐酸盐(84mg,1.24mmol)和4.0ml二氯甲烷。加入N,N-二异丙基乙胺(370mg,0.50ml,2.86mmol)，然后加入HATU(400mg,1.05mmol)。将黄色溶液在室温搅拌过夜。用3ml水和30ml二氯甲烷萃取反应混合物。然后用3ml水洗涤有机层。用30ml二氯甲烷将水层萃取2次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。用12g硅胶和EtOAc/己烷(梯度0-70％EtOAc)对残余物进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到236mg(63％；纯度＝70％)[(S)-1-(羟基-甲基氨基甲酰基-甲基)-戊基]-氨基甲酸叔丁酯，为无色油状物，为差向异构体混合物。
在10ml圆底烧瓶中，将[(S)-1-(羟基-甲基氨基甲酰基-甲基)-戊基]-氨基甲酸叔丁酯(231mg,0.59mmol；纯度＝70％)溶于4.0ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(1.0ml,13.0mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下15min。将残余物(黄色油状物)溶于2.7mlDMF，将溶液在0℃搅拌5min。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(370mg,0.50ml,2.86mmol)。加入(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-[(S)-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酸(150mg,0.38mmol)，然后加入HATU(159mg,0.42mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜。用40ml乙醚/乙酸乙酯(1:1)和3ml水萃取反应混合物。用40ml乙醚/乙酸乙酯(1:1)萃取水层。将有机层用3ml水洗涤2次，用3ml盐水洗涤1次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。用12g硅胶和MeOH/二氯甲烷(梯度0-10％MeOH)对残余物进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到57mg(27％)(S)-2-羟基-3-{(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-[(S)-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酰基氨基}-庚酸甲基酰胺，为类白色固体，为差向异构体混合物。
在25ml圆底烧瓶中，将(S)-2-羟基-3-{(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-[(S)-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酰基氨基}-庚酸甲基酰胺(52mg,0.09mmol)溶于3.5ml二氯甲烷，加入戴斯-马丁过碘烷(60mg,0.14mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。用1.5ml饱和NaHCO3-溶液和1.5ml 10％Na2S2O3-溶液猝灭反应混合物，在室温剧烈搅拌30min。然后用25ml二氯甲烷萃取双相混合物。然后用3ml饱和NaHCO3-溶液洗涤有机层。用25ml二氯甲烷将水层萃取2次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。使残余物吸附在1g硅胶上，用4g硅胶和MeOH/二氯甲烷(梯度0-10％MeOH)进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩。将残余物与二氯甲烷/己烷一起研磨，得到20mg(37％)(S)-3-{(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-[(S)-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酰基氨基}-2-氧代-庚酸甲基酰胺，为白色固体。LC/MS：(M+H)+＝548。
实施例15
3-甲基-1H-茚-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基氨基乙二酰基-戊基氨基甲酰基)-3-甲磺酰基-丙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺
向(S)-2-(苄氧基羰基氨基)丙酸(900mg,4.03mmol)、(S)-2-氨基-4-(甲硫基)丁酸叔丁酯盐酸盐(1.02g,4.23mmol)和HATU(1.69g,4.43mmol)在DMF(10ml)中的溶液中加入N,N-二异丙基乙胺(2.11ml,12.1mmol)。反应变成轻微放热，因此使用冰浴调节温度。将亮黄色的反应混合物在室温搅拌过夜，然后用水猝灭，用EtOAc(2x)萃取。用水(3x)和盐水洗涤合并的有机物，然后用MgSO4干燥，浓缩，得到2.1g(S)-2-((S)-2-苄氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-4-甲硫基-丁酸叔丁酯，为黄色油状物，将其不经进一步纯化即使用。
在0℃向(S)-2-((S)-2-苄氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-4-甲硫基-丁酸叔丁酯(1.66g,4.04mmol,来自步骤1的粗品)在CH2Cl2(30ml)中的溶液中加入m-CPBA(77％,1.99g,8.9mmol)。将浑浊混合物温热至室温，搅拌1.5h，然后用CH2Cl2(20ml)稀释，加入饱和NaHCO3水溶液(50ml)。将双相混合物在室温剧烈搅拌1h，然后分离各层，用CH2Cl2萃取水层。用饱和NaHCO3洗涤合并的有机物，用MgSO4干燥，浓缩。通过硅胶色谱法(50％－100％EtOAc/己烷)纯化残余物，得到1.48g(83％)(S)-2-((S)-2-苄氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-4-甲磺酰基-丁酸叔丁酯，为白色泡沫状固体。LC/MS：(M+Na)+＝465。
向(S)-2-((S)-2-苄氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-4-甲磺酰基-丁酸叔丁酯(1.48g,3.34mmol)在MeOH(35ml)中的溶液中加入20％披氢氧化钯碳(200mg,0.29mmol)。将反应混合物在氢气气氛(气囊)下搅拌2h，然后用Celite过滤，用EtOAc/MeOH冲洗。向滤液中加入1.0M HCl的MeOH溶液(3.7ml,3.7mmol,由AcCl和MeOH新鲜制备的)。浓缩滤液，得到1.27g(S)-2-((S)-2-氨基-丙酰基氨基)-4-甲磺酰基-丁酸叔丁酯盐酸盐，为白色泡沫状固体。
在0℃向(S)-2-((S)-2-氨基-丙酰基氨基)-4-甲磺酰基-丁酸叔丁酯盐酸盐(327mg,0.95mmol)、3-甲基-1H-茚-2-甲酸(150mg,0.86mmol)和HATU(360mg,0.95mmol)在DMF(4ml)中的溶液中加入N,N-二异丙基乙胺(45ml,2.58mmol)。将反应混合物在室温搅拌过夜，然后用水猝灭，用EtOAc(2x)萃取。用水(3x)洗涤合并的有机物，用MgSO4干燥，浓缩。通过硅胶色谱法(50％－100％EtOAc/己烷)纯化残余物，分离得到336mg(84％)(S)-4-甲磺酰基-2-{(S)-2-[(3-甲基-1H-茚-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-丁酸叔丁酯，为白色固体。LC/MS：(M+H)+＝465。
向[(S)-1-(苄基氨基甲酰基-羟基-甲基)-戊基]-氨基甲酸叔丁酯(98mg,0.28mmol)在CH2Cl2(3ml)中的溶液中加入三氟乙酸(0.5ml)。将反应混合物在室温搅拌2h，然后浓缩，用己烷处理，得到无色油状物。向(S)-4-甲磺酰基-2-{(S)-2-[(3-甲基-1H-茚-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-丁酸叔丁酯(100mg,0.22mmol)在CH2Cl2(3ml)中的溶液中加入三氟乙酸(0.5ml)。将反应混合物在室温搅拌2h，然后浓缩，用己烷处理，得到粉红色油状物。将来自以上的两批油状物溶于CH2Cl2，合并，浓缩，在高度真空下干燥。将残余物溶于DMF(3ml)，加入HATU(90mg,0.24mmol)。将反应混合物冷却至0℃，加入N,N-二异丙基乙胺(0.30ml,1.72mmol)。将反应混合物温热至室温，搅拌过夜，然后用水猝灭。通过过滤收集得到的沉淀物，用水冲洗，在高度真空下干燥，得到120mg(87％)3-甲基-1H-茚-2-甲酸((S)-1-{(S)-1-[(S)-1-(苄基氨基甲酰基-羟基-甲基)-戊基氨基甲酰基]-3-甲磺酰基-丙基氨基甲酰基}-乙基)-酰胺，为淡黄色固体和差向异构体混合物。LC/MS：(M+Na)+＝663。
将3-甲基-1H-茚-2-甲酸((S)-1-{(S)-1-[(S)-1-(苄基氨基甲酰基-羟基-甲基)-戊基氨基甲酰基]-3-甲磺酰基-丙基氨基甲酰基}-乙基)-酰胺(120mg,0.187mmol)在CH2Cl2(8ml)和THF(1ml)中的部分混悬液超声处理，直至大部分固体溶解。然后加入戴斯-马丁过碘烷(119mg,0.28mmol)，将浑浊的混合物在室温搅拌1.5h。形成浓稠的白色沉淀物。加入10％Na2S2O3水溶液(5ml)和饱和NaHCO3(5mL)，将双相混合物剧烈搅拌30min，然后用水稀释，用CH2Cl2(2x)萃取。用饱和NaHCO3洗涤合并的有机物，浓缩。使残余物吸附在硅胶上，通过色谱法(0％－5％MeOH/CH2Cl2)纯化，得到48mg(40％)3-甲基-1H-茚-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基氨基乙二酰基-戊基氨基甲酰基)-3-甲磺酰基-丙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为浅黄色固体。LC/MS：(M+H)+＝639。
实施例16
{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯
在10ml圆底烧瓶中，将((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(125mg,0.33mmol)溶于3.4ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(0.57ml,7.4mmol)。将反应混合物在室温搅拌3h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下30min。将残余物(黄色油状物)溶于1.0ml DMF，将溶液在0℃搅拌5min。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(222mg,0.30ml,1.72mmol)。加入溶于1.2ml DMF的(S)-2-((S)-2-苄氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-3-(1H-吲哚-3-基)-丙酸(158mg,0.25mmol；纯度＝65％)，然后加入HATU(105mg,0.28mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜。用水和石油醚稀释反应混合物(形成类白色沉淀物)。过滤该混悬液，用水和少量石油醚冲洗。用旋转蒸发器干燥得到的类白色固体，然后置于高度真空下，得到118mg(70％){(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯，为差向异构体混合物。
在25ml圆底烧瓶中，将{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯(117mg,0.17mmol)溶于6.5ml二氯甲烷，加入戴斯-马丁过碘烷(110mg,0.26mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。用3ml饱和NaHCO3-溶液和3ml 10％Na2S2O3-溶液猝灭反应混合物，在室温剧烈搅拌30min。然后用30ml二氯甲烷萃取双相混合物。然后用5ml饱和NaHCO3-溶液洗涤有机层。用30ml二氯甲烷将水层萃取2次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。用12g硅胶和MeOH/二氯甲烷(梯度0-5％MeOH)对残余物进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩。将残余物与二氯甲烷/己烷一起研磨，得到33mg(27％){(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯，为淡棕色固体。LC/MS：(M+H)+＝674。
实施例17
{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯
在0℃向(S)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸(1.0g,3.39mmol)在MeOH(20ml)中的溶液中滴加三甲基硅烷基重氮甲烷(2.0M的Et2O溶液,3.4ml,6.8mmol)。以1mL等分试样加入另外的三甲基硅烷基重氮甲烷(2.0M的Et2O溶液)，直到持续为浅黄色。总计加入10mL(～6eq)试剂。用几滴乙酸猝灭反应，解释溶液变成无色。浓缩该混合物，得到1.13g(S)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸甲酯，为无色油状物，将其不经进一步纯化即使用。1H NMR(CDCl3)δ：6.88(d,J＝8.3Hz,1H),6.63-6.72(m,1H),4.80(d,J＝7.9Hz,1H),4.33-4.45(m,1H),3.63(s,3H),3.56(s,3H),2.87(t,J＝5.9Hz,2H),1.26(s,9H).
向(S)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸甲酯(1.05g,3.39mmol)在CH2Cl2(12ml)中的溶液中加入TFA(3ml)。将反应混合物在室温搅拌3h，然后浓缩，用己烷处理(2x)，在高度真空下干燥。将残余物溶于DMF(8ml)，冷却至0℃。然后加入(S)-2-(苄氧基羰基氨基)丙酸(660mg,2.96mmol)和HATU(1.24g,3.25mmol)，然后加入N,N-二异丙基乙胺(2.6ml,14.8mmol)。将反应混合物温热至室温，搅拌过夜，然后用水猝灭，用EtOAc(2x)萃取。用水(3x)和盐水洗涤合并的有机物，然后用MgSO4干燥，浓缩。通过硅胶色谱法(20％－50％EtOAc/己烷)纯化残余物，得到994mg(81％)(S)-2-((S)-2-苄氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸甲酯，为白色固体。LC/MS：(M+H)+＝415。
向(S)-2-((S)-2-苄氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸甲酯(250mg,0.60mmol)在1,2-二氯乙烷(6ml)中的溶液中加入氢氧化三甲基锡(327mg,1.81mmol)。将反应混合物在80℃加热3h。加入另外的氢氧化三甲基锡(100mg,0.55mmol)，持续加热2h。将反应冷却至室温，减压浓缩。将残余物溶于EtOAc，用0.5M HCl水溶液(3x)洗涤。用MgSO4干燥有机相，浓缩，得到330mg(S)-2-((S)-2-苄氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸，为白色固体，将其不经进一步纯化即使用。
向((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(100mg,0.26mmol)在CH2Cl2(4ml)中的溶液中加入三氟乙酸(0.5ml)。将反应混合物在室温搅拌2h，然后浓缩，用己烷处理。将残余物溶于DMF(3ml)，加入(S)-2-((S)-2-苄氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸(80mg,0.22mmol)和HATU(90mg,0.24mmol)。将混合物冷却至0℃，加入N,N-二异丙基乙胺(0.30ml,1.73mmol)。将黄色混合物温热至室温，搅拌过夜，然后用水猝灭。通过过滤收集得到的沉淀物，用水冲洗，在高度真空下干燥，得到112mg(78％){(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯，为类白色固体和差向异构体混合物。LC/MS：(M-OBn)-＝557。
向{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯(106mg,0.16mmol)在CH2Cl2(10ml)中的部分混悬液中加入戴斯-马丁过碘烷(101mg,0.24mmol)。几分钟后，大部分固体溶解。将轻微浑浊的混合物在室温搅拌2h，在此期间形成浓稠的白色沉淀物。加入10％Na2S2O3水溶液(5ml)和饱和NaHCO3(5mL)。将双相混合物剧烈搅拌20min，然后用水稀释，用CH2Cl2(2x)萃取。用饱和NaHCO3洗涤合并的有机物，浓缩。使残余物吸附在硅胶上，通过色谱法(0％－5％MeOH/CH2Cl2)纯化，分离得到类白色固体。与CH2Cl2/己烷一起研磨，得到52mg(49％){(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯，为白色固体。LC/MS：(M+Na)+＝687。
实施例18
茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺
在10ml圆底烧瓶中，将((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(130mg,0.34mmol)溶于4.0ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(0.70ml,9.09mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下30min。将残余物溶于1.2ml DMF，将溶液在0℃搅拌5min。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(244mg,0.33ml,1.89mmol)。加入溶于1.5ml DMF的(S)-2-{(S)-2-[(茚满-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-3-(1H-吲哚-3-基)-丙酸(253mg,0.27mmol；纯度＝45％)，然后加入HATU(114mg,0.30mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜。用水和石油醚稀释反应混合物(形成类白色沉淀物)。过滤该混悬液，用水和少量石油醚冲洗。用旋转蒸发器干燥得到的类白色固体，然后置于高度真空下，得到185mg(94％)茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为差向异构体混合物。
在25ml圆底烧瓶中，将茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺(182mg,0.25mmol)溶于9.5ml二氯甲烷，加入戴斯-马丁过碘烷(160mg,0.38mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。用4ml饱和NaHCO3-溶液和4ml 10％Na2S2O3-溶液猝灭反应混合物，在室温剧烈搅拌45min。然后用30ml二氯甲烷萃取双相混合物。然后用5ml饱和NaHCO3-溶液洗涤有机层。用30ml二氯甲烷将水层萃取2次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。使残余物吸附在1g硅胶上，用12g硅胶和MeOH/二氯甲烷(梯度0-5％MeOH)进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩。使残余物吸附在1g硅胶上，用12g硅胶和MeOH/二氯甲烷(梯度0-5％MeOH)进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到20mg(11％)茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为淡棕色固体。LC/MS：(M-H)-＝682。
实施例19
茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺
在50ml圆底烧瓶中，将(S)-2-((S)-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸苄基酯(762mg,1.5mmol；纯度＝90％)溶于8.0ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(2.7ml,35.0mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下30min。将残余物(浅棕色油状物)溶于5.0ml DMF，将溶液在0℃搅拌10min。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(1.11g,1.5ml,8.59mmol)。加入2-茚满甲酸(225mg,1.39mmol)，然后加入HATU(580mg,1.53mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌48h。用水和石油醚稀释反应混合物(形成类白色沉淀物)。过滤该混悬液，用水和少量石油醚冲洗。用旋转蒸发器干燥得到的类白色固体，然后置于高度真空下，得到614mg(88％)(S)-2-{(S)-2-[(茚满-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸苄基酯，为类白色固体。
在100ml圆底烧瓶中，将(S)-2-{(S)-2-[(茚满-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸苄基酯(612mg,1.22mmol)溶于15ml甲醇和15ml THF。将烧瓶交替抽真空、充氩气3次。小心地加入20％披氢氧化钯碳(湿的,111mg,0.16mmol)。给烧瓶抽真空、充氩气、抽真空、充氢气。将反应混合物在氢气气氛(气囊)下在室温搅拌2h。用Celite过滤反应混合物，用乙酸乙酯/甲醇冲洗。浓缩滤液，得到518mg(98％；纯度＝95％)(S)-2-{(S)-2-[(茚满-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸，为类白色固体。
在10ml圆底烧瓶中，将((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(120mg,0.31mmol)溶于3.2ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(0.56ml,7.27mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下30min。将残余物溶于2.2ml DMF，将溶液在0℃搅拌5min。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(244mg,0.33ml,1.89mmol)。加入(S)-2-{(S)-2-[(茚满-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸(120mg,0.28mmol)，然后加入HATU(116mg,0.31mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜。用水和石油醚稀释反应混合物(形成类白色沉淀物)。过滤该混悬液，用水和少量石油醚冲洗。用旋转蒸发器干燥得到的类白色固体，然后置于高度真空下，得到186mg(99％)茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为差向异构体混合物。
在25ml圆底烧瓶中，将茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺(174mg,0.26mmol)溶于9.5ml二氯甲烷，加入戴斯-马丁过碘烷(164mg,0.39mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。用4ml饱和NaHCO3-溶液和4ml 10％Na2S2O3-溶液猝灭反应混合物，在室温剧烈搅拌30min。然后用30ml二氯甲烷萃取双相混合物。用10ml饱和NaHCO3-溶液洗涤有机层。用30ml二氯甲烷将水层萃取2次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。使残余物吸附在1g硅胶上，用12g硅胶和MeOH/二氯甲烷(梯度0-5％MeOH)进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩。将残余物与二氯甲烷/己烷一起研磨，得到42mg(23％)茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为白色固体。LC/MS：(M-H)-＝673。
实施例20
3-甲基-1H-茚-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-3-甲磺酰基-丙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺
向(S)-4-甲磺酰基-2-{(S)-2-[(3-甲基-1H-茚-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-丁酸叔丁酯(100mg,0.22mmol)和((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(100mg,0.26mmol)在CH2Cl2(4ml)中的溶液中加入三氟乙酸(1.0ml)。将反应混合物在室温搅拌2h，然后浓缩，用己烷处理。将残余物溶于DMF(3ml)，加入HATU(90mg,0.24mmol)。将反应混合物冷却至0℃，加入N,N-二异丙基乙胺(0.30ml,1.72mmol)。将反应混合物温热至室温，搅拌过夜，然后用水猝灭。通过过滤收集得到的沉淀物，用水和Et2O/石油醚冲洗，然后在高度真空下干燥，得到133mg(92％)3-甲基-1H-茚-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-3-甲磺酰基-丙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为类白色固体和差向异构体混合物。(M-H)-＝673。
将3-甲基-1H-茚-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-3-甲磺酰基-丙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺(130mg,0.19mmol)在CH2Cl2(8ml)和THF(4ml)中的部分混悬液超声处理，直至大部分固体溶解。然后加入戴斯-马丁过碘烷(123mg,0.29mmol)，将浑浊的混合物在室温搅拌1.5h。形成浓稠的白色沉淀物。加入10％Na2S2O3水溶液(5ml)和饱和NaHCO3(5mL)，将双相混合物剧烈搅拌10min，然后用水稀释，用5％MeOH/CH2Cl2(2x)萃取。用饱和NaHCO3洗涤合并的有机层，浓缩。使残余物吸附在硅胶上，通过色谱法(0％－5％MeOH/CH2Cl2)纯化，然后与CH2Cl2/己烷一起研磨，得到43mg(33％)3-甲基-1H-茚-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-3-甲磺酰基-丙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为类白色固体。LC/MS：(M+H)+＝673。
实施例21
5-甲基-异唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺
在50ml圆底烧瓶中，将(S)-2-((S)-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸苄基酯(740mg,1.46mmol；纯度＝90％)溶于8.0ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(2.6ml,33.7mmol)。将反应混合物在室温搅拌3h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下30min。将残余物(浅棕色油状物)溶于5.0ml DMF，将溶液在0℃搅拌10min。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(1.11g,1.5ml,8.59mmol)。加入5-甲基异唑-3-甲酸(170mg,1.34mmol)，然后加入HATU(559mg,1.47mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌48h。用70ml乙醚和5ml水萃取反应混合物。用70ml乙醚萃取水层。将有机层用5ml水洗涤3次，用5ml盐水洗涤1次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得到(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-{(S)-2-[(5-甲基-异唑-3-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-丙酸苄基酯，为淡棕色油状物，将其不经进一步纯化即使用。
在100ml圆底烧瓶中，将(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-{(S)-2-[(5-甲基-异唑-3-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-丙酸苄基酯(714mg,1.3mmol；纯度＝85％)溶于13ml甲醇。将烧瓶交替抽真空、充氩气3次。小心地加入20％披氢氧化钯碳(湿的,118mg,0.17mmol)。给烧瓶抽真空、充氩气、抽真空、充氢气。将反应混合物在氢气气氛(气囊)下在室温搅拌2h。用Celite过滤反应混合物，用乙酸乙酯/甲醇冲洗。浓缩滤液，得到(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-{(S)-2-[(5-甲基-异唑-3-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-丙酸，为类白色泡沫，将其不经进一步纯化即使用。
在10ml圆底烧瓶中，将((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(120mg,0.31mmol)溶于3.2ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(0.56ml,7.27mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下15min。将残余物溶于2.2ml DMF，将溶液在0℃搅拌5min。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(244mg,0.33ml,1.89mmol)。加入(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-{(S)-2-[(5-甲基-异唑-3-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-丙酸(120mg,0.27mmol；纯度＝85％)，然后加入HATU(114mg,0.30mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜。用水和石油醚稀释反应混合物(形成类白色沉淀物)。过滤该混悬液，用水和少量石油醚冲洗。用旋转蒸发器干燥得到的类白色固体，然后置于高度真空下，得到149mg(85％)5-甲基-异唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为差向异构体混合物。
在25ml圆底烧瓶中，将5-甲基-异唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺(145mg,0.23mmol)混悬于(部分溶于)8.5ml二氯甲烷，加入戴斯-马丁过碘烷(144mg,0.34mmol)。将反应混合物在室温搅拌3.5h(形成浓稠的沉淀物)。用3.5ml饱和NaHCO3-溶液和3.5ml 10％Na2S2O3-溶液猝灭反应混合物，在室温剧烈搅拌30min。然后用30ml二氯甲烷萃取双相混合物。然后用5ml饱和NaHCO3-溶液洗涤有机层。用30ml二氯甲烷将水层萃取2次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。使残余物吸附在1g硅胶上，用12g硅胶和MeOH/二氯甲烷(梯度0-5％MeOH)进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩。将残余物与二氯甲烷/乙醚/己烷一起研磨，得到24mg(15％；纯度＝90％)5-甲基-异唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为类白色固体。LC/MS：(M-H)-＝638。
实施例22
(S)-N-苄基-3-{(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-[(S)-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酰基氨基}-2-氧代-4-苯基-丁酰胺
在10ml圆底烧瓶中，将((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(150mg,0.39mmol)溶于4.0ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(0.67ml,8.7mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下15min。将残余物和(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-[(S)-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酸(270mg,0.34mmol；纯度＝50％)溶于2.7ml二氯甲烷，冷却至0℃。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(296mg,0.40ml,2.29mmol)，然后加入HATU(140mg,0.37mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜。用5ml水和40ml二氯甲烷萃取反应混合物。用5ml水洗涤有机层。用40ml二氯甲烷将水层萃取2次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。用12g硅胶和MeOH/二氯甲烷(梯度0-10％MeOH)对残余物进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到161mg(72％)(S)-N-苄基-2-羟基-3-{(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-[(S)-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酰基氨基}-4-苯基-丁酰胺，为淡黄色固体，为差向异构体混合物。
在25ml圆底烧瓶中，将(S)-N-苄基-2-羟基-3-{(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-[(S)-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酰基氨基}-4-苯基-丁酰胺(156mg,0.23mmol)溶于8.5ml二氯甲烷，加入戴斯-马丁过碘烷(148mg,0.35mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。用3.5ml饱和NaHCO3-溶液和3.5ml 10％Na2S2O3-溶液猝灭反应混合物，在室温剧烈搅拌1h。然后用30ml二氯甲烷萃取双相混合物。用5ml饱和NaHCO3-溶液洗涤有机层。用30ml二氯甲烷将水层萃取2次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。使残余物吸附在1g硅胶上，用12g硅胶和MeOH/二氯甲烷(梯度0-5％MeOH)进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩。将残余物与二氯甲烷/己烷一起研磨，得到13mg(8％)(S)-N-苄基-3-{(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-[(S)-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酰基氨基}-2-氧代-4-苯基-丁酰胺，为类白色固体。LC/MS：(M+H)+＝667。
实施例23
茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-2-甲氧基-乙基}-酰胺
将Boc-O-甲基-L-丝氨酸二环己基铵盐(1.300g,3.25mmol)溶于50ml二氯甲烷，用10ml 1M HCl萃取。用10ml 1M HCl洗涤有机层。用50ml二氯甲烷将水层萃取2次，然后用EtOAc萃取2次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得到Boc-O-甲基-L-丝氨酸，将其不经进一步纯化即使用。在50ml圆底烧瓶中，将(S)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸苄基酯(1.340g,3.3mmol)溶于10.5ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(7.0ml,90.9mmol)。将反应混合物在室温搅拌3.5h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下30min。将残余物(浅棕色油状物)溶于5.0ml DMF，将溶液在0℃搅拌10min。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(3.18g,4.3ml,24.6mmol)。加入溶于3.0ml DMF的Boc-O-甲基-L-丝氨酸，然后加入HATU(1.36g,3.57mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌2天。用80ml乙醚和10ml水萃取反应混合物。用80ml乙醚萃取水层，将有机层用10ml水洗涤2次，用10ml盐水洗涤1次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得到(S)-2-((S)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-甲氧基-丙酰基氨基)-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸苄基酯，为淡棕色油状物，将其不经进一步纯化即使用。
在100ml圆底烧瓶中，将(S)-2-((S)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-甲氧基-丙酰基氨基)-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸苄基酯(2.093g,3.01mmol；纯度＝70％)溶于9.0ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(6.0ml,77.9mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下15min。将残余物(淡棕色固体)溶于6.0ml DMF，将溶液在0℃搅拌10min。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(2.29g,3.1ml,17.7mmol)。加入2-茚满甲酸(444mg,2.74mmol)，然后加入HATU(1.15g,3.01mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜。用80ml乙醚和10ml水萃取反应混合物。用80ml乙醚萃取水层。将有机层用10ml水洗涤2次，用10ml盐水洗涤1次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得到1.255g(86％)(S)-2-{(S)-2-[(茚满-2-羰基)-氨基]-3-甲氧基-丙酰基氨基}-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸苄基酯，为类白色固体。
在150ml圆底烧瓶中，将(S)-2-{(S)-2-[(茚满-2-羰基)-氨基]-3-甲氧基-丙酰基氨基}-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸苄基酯(1.250g,2.36mmol)溶于12ml甲醇和12ml THF。将烧瓶交替抽真空、充氩气3次。小心地加入20％披氢氧化钯碳(213mg,0.30mmol)。给烧瓶抽真空、充氩气、抽真空、充氢气。将反应混合物在氢气气氛(气囊)下在室温搅拌2.5h。用Celite过滤反应混合物，用乙酸乙酯/甲醇冲洗。浓缩滤液，得到1.024g(99％)(S)-2-{(S)-2-[(茚满-2-羰基)-氨基]-3-甲氧基-丙酰基氨基}-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸，为类白色固体。
在10ml圆底烧瓶中，将((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(120mg,0.31mmol)溶于3.2ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(0.56ml,7.27mmol)。将反应混合物在室温搅拌3h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下15min。将残余物溶于2.2ml DMF，将溶液在0℃搅拌5min。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(259mg,0.35ml,2.00mmol)。加入(S)-2-{(S)-2-[(茚满-2-羰基)-氨基]-3-甲氧基-丙酰基氨基}-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸(130mg,0.30mmol)，然后加入HATU(123mg,0.32mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜。用水和石油醚稀释反应混合物(形成类白色沉淀物)。过滤该混悬液，用水和少量石油醚冲洗。将残余物吸附在1g硅胶上，用12g硅胶和MeOH/二氯甲烷(梯度0-5％MeOH)进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到123mg(59％)茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-2-甲氧基-乙基}-酰胺，为类白色固体，为差向异构体混合物。
在25ml圆底烧瓶中，将茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-2-甲氧基-乙基}-酰胺(122mg,0.17mmol)溶于8.5ml二氯甲烷，加入戴斯-马丁过碘烷(110mg,0.26mmol)。将反应混合物在室温搅拌2h。用3ml饱和NaHCO3-溶液和3ml 10％Na2S2O3-溶液猝灭反应混合物，在室温剧烈搅拌15min。然后用30ml二氯甲烷萃取双相混合物。用5ml饱和NaHCO3-溶液洗涤有机层。将水层用30ml二氯甲烷萃取2次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。使残余物吸附在1g硅胶上，用12g硅胶和MeOH/二氯甲烷(梯度0-5％MeOH)进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到68mg(50％；纯度＝90％)茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-2-甲氧基-乙基}-酰胺，为类白色固体。LC/MS：(M-H)-＝703。
实施例24
茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-3-甲基-丁基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺
向Boc-L-丙氨酸(600mg,3.17mmol)、L-亮氨酸苄基酯对-甲苯磺酸盐(1.31g,3.33mmol)和HATU(1.33g,3.49mmol)在DMF(10ml)中的溶液中加入N,N-二异丙基乙胺(1.23g,1.66ml,9.51mmol)。反应变得轻度放热，因此使用冰浴调节温度。将亮黄色反应混合物在室温搅拌过夜。用水猝灭，用EtOAc(2x)萃取。用饱和NaHCO3、水(3x)和盐水洗涤合并的有机物，然后用MgSO4干燥，浓缩。通过硅胶色谱法(10％－30％EtOAc/己烷)纯化残余物，分离1.22g(98％)(S)-2-((S)-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-4-甲基-戊酸苄基酯，为粘性无色油状物。
在25ml圆底烧瓶中，将(S)-2-((S)-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-4-甲基-戊酸苄基酯(499mg,1.27mmol)溶于6.5ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(2.4ml,31.2mmol)。将反应混合物在室温搅拌3h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下30min。将残余物(浅黄色油状物)溶于4.5mlDMF，将溶液在0℃搅拌10min。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(1.04g,1.4ml,8.02mmol)。加入2-茚满甲酸(195mg,1.2mmol)，然后加入HATU(503mg,1.32mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜。用水稀释反应混合物(形成类白色沉淀物)。过滤该混悬液，用水和少量石油醚冲洗。用旋转蒸发器干燥得到的类白色固体，然后置于高度真空下，得到455mg(87％)(S)-2-{(S)-2-[(茚满-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-4-甲基-戊酸苄基酯，为类白色固体。
在100ml圆底烧瓶中，将(S)-2-{(S)-2-[(茚满-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-4-甲基-戊酸苄基酯(453mg,1.04mmol)溶于10ml甲醇。将烧瓶交替抽真空、充氩气3次。小心地加入20％披氢氧化钯碳(湿的,94mg,0.13mmol)。给烧瓶抽真空、充氩气、抽真空、充氢气。将反应混合物在氢气气氛(气囊)下在室温搅拌2h。用Celite过滤反应混合物，用乙酸乙酯/甲醇冲洗。浓缩滤液，得到374mg(99％；纯度＝95％)(S)-2-{(S)-2-[(茚满-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-4-甲基-戊酸，为类白色泡沫。
在10ml圆底烧瓶中，将((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(120mg,0.31mmol)溶于3.2ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(0.56ml,7.27mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下30min。将残余物溶于2.2ml DMF，将溶液在0℃搅拌5min。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(252mg,0.34ml,1.95mmol)。加入(S)-2-{(S)-2-[(茚满-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-4-甲基-戊酸(105mg,0.29mmol)，然后加入HATU(120mg,0.32mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜。用水稀释反应混合物(形成淡黄色沉淀物)。过滤该混悬液，用水和少量石油醚冲洗。使用旋转蒸发器干燥得到的淡黄色固体，然后置于高度真空下，得到188mg(96％；纯度＝90％)茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-3-甲基-丁基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为差向异构体混合物。
在25ml圆底烧瓶中，将茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-3-甲基-丁基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺(183mg,0.27mmol)部分溶于10.0ml二氯甲烷，加入戴斯-马丁过碘烷(171mg,0.40mmol)(反应混合物变成黄色混悬液)。将反应混合物在室温搅拌2h。用4.5ml饱和NaHCO3-溶液和4.5ml 10％Na2S2O3-溶液猝灭反应混合物，在室温剧烈搅拌15min。然后用30ml二氯甲烷萃取双相混合物。用10ml饱和NaHCO3-溶液洗涤有机层。用30ml二氯甲烷将水层萃取2次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。使残余物吸附在2g硅胶上，用12g硅胶和MeOH/二氯甲烷(梯度0-5％MeOH)进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩。使残余物吸附在1g硅胶上，再用4g硅胶和MeOH/二氯甲烷(梯度0-5％MeOH)进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩。将残余物(淡黄色固体)与二氯甲烷/乙醚一起研磨，得到86mg(50％)茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-3-甲基-丁基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为类白色固体。LC/MS：(M+H)+＝611。
实施例25
3-甲基-1H-茚-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺
在10ml圆底烧瓶中，将3-甲基-1H-茚-2-甲酸(80mg,0.46mmol)和(S)-2-((S)-2-氨基-丙酰基氨基)-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸甲酯盐酸盐(150mg,0.47mmol)溶于2.2ml DMF。将反应混合物冷却至0℃。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(178mg,0.24ml,1.37mmol)，然后加入HATU(192mg,0.50mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜。用水稀释反应混合物(形成沉淀物)。过滤该混悬液，用水和少量石油醚冲洗。使用旋转蒸发器干燥得到的淡灰色固体，然后置于高度真空下，得到179mg(89％)(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-{(S)-2-[(3-甲基-1H-茚-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-丙酸甲酯。
在25ml圆底烧瓶中，将(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-{(S)-2-[(3-甲基-1H-茚-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-丙酸甲酯(176mg,0.40mmol)部分溶于4.0ml 1,2-二氯乙烷。加入氢氧化三甲基锡(292mg,1.61mmol)，将反应混合物在80℃搅拌4h。将反应混合物冷却至室温，然后浓缩。将残余物用30ml乙酸乙酯和3ml 1M HCl吸收。用30ml乙酸乙酯萃取水层。将有机层用3ml 1M HCl洗涤2次，用3ml水洗涤1次，用3ml盐水洗涤1次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。将残余物与二氯甲烷/己烷一起研磨，得到143mg(84％)(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-{(S)-2-[(3-甲基-1H-茚-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-丙酸，为淡棕色固体。
在10ml圆底烧瓶中，将(S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(130mg,0.34mmol)溶于3.0ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(0.68ml,8.83mmol)。将反应混合物在室温搅拌3h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下15min。将残余物溶于2.0ml DMF，将溶液在0℃搅拌10min。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(266mg,0.36ml,2.06mmol)。加入(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-{(S)-2-[(3-甲基-1H-茚-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-丙酸(130mg,0.31mmol)，然后加入HATU(129mg,0.34mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜(形成沉淀物)。用水稀释反应混合物。过滤该混悬液，用水和少量石油醚冲洗。用旋转蒸发器干燥得到的类白色固体，然后置于高度真空下，得到212mg(95％；纯度＝95％)3-甲基-1H-茚-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为差向异构体混合物。
在50ml圆底烧瓶中，将3-甲基-1H-茚-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺(208mg,0.29mmol)部分溶于13ml二氯甲烷，加入戴斯-马丁过碘烷(183mg,0.43mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。用4.5ml饱和NaHCO3-溶液和4.5ml 10％Na2S2O3-溶液猝灭反应混合物，在室温剧烈搅拌15min。然后用30ml二氯甲烷萃取双相混合物。用10ml饱和NaHCO3-溶液洗涤有机层。用30ml二氯甲烷将水层萃取2次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。使残余物吸附在1g硅胶上，用12g硅胶和MeOH/二氯甲烷(梯度0-5％MeOH)进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩。将残余物与二氯甲烷/己烷一起研磨，得到82mg(38％；纯度＝90％)3-甲基-1H-茚-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为类白色固体。LC/MS：(M-H)-＝685。
实施例26
茚满-2-甲酸{(S)-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-环丙基-甲基}-酰胺
在25ml圆底烧瓶中，将(S)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸苄基酯(360mg,0.93mmol)溶于3.2ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(1.8ml,23.4mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下15min。将残余物(无色油状物)溶于2.1ml DMF，将溶液在0℃搅拌10min。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(666mg,0.9ml,5.15mmol)。加入Boc-L-环丙基甘氨酸(175mg,0.81mmol)，然后加入HATU(340mg,0.89mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜。用～40ml乙醚和3ml水萃取反应混合物。用40ml乙醚萃取水层。将有机层用3ml水洗涤3次，用3ml盐水洗涤1次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得到(S)-2-((S)-2-叔丁氧基羰基氨基-2-环丙基-乙酰基氨基)-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸苄基酯，为淡黄色油状物，将其不经进一步纯化即使用。
在25ml圆底烧瓶中，将(S)-2-((S)-2-叔丁氧基羰基氨基-2-环丙基-乙酰基氨基)-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸苄基酯(526mg,0.76mmol)溶于4.2ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(1.7ml,22.1mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下15min。将残余物(类白色固体)溶于2.8ml，将溶液在0℃搅拌10min。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(577mg,0.78ml,4.47mmol)。加入2-茚满甲酸(120mg,0.74mmol)，然后加入HATU(309mg,0.81mmol)。加入完成后，除去冰浴。形成浓稠的沉淀物，因此加入2.0ml DMF，将黄色混悬液在室温搅拌过夜。用水稀释反应混合物。过滤该混悬液，用水和少量石油醚冲洗。用旋转蒸发器干燥得到的类白色固体，然后置于高度真空下，得到372mg(95％)(S)-2-{(S)-2-环丙基-2-[(茚满-2-羰基)-氨基]-乙酰基氨基}-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸苄基酯。
在50ml圆底烧瓶中，将(S)-2-{(S)-2-环丙基-2-[(茚满-2-羰基)-氨基]-乙酰基氨基}-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸苄基酯(370mg,0.70mmol)部分溶于10ml甲醇、10ml THF和2.0ml DMF。将烧瓶交替抽真空、充氩气3次。小心地加入20％披氢氧化钯碳(湿的,70mg,0.10mmol)。给烧瓶抽真空、充氩气、抽真空、充氢气。将反应混合物在氢气气氛(气囊)下在40℃(＝油浴温度)搅拌1h。用Celite过滤反应混合物，用乙酸乙酯/甲醇冲洗。浓缩滤液，然后置于高度真空下。将残余物(浅淡色固体)与二氯甲烷/己烷一起研磨，得到286mg(93％)(S)-2-{(S)-2-环丙基-2-[(茚满-2-羰基)-氨基]-乙酰基氨基}-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸，为白色固体。
在10ml圆底烧瓶中，将((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(130mg,0.34mmol)溶于3.0ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(0.68ml,8.83mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下30min。将残余物溶于2.0ml DMF，将溶液在0℃搅拌10min。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(266mg,0.36ml,2.06mmol)。加入(S)-2-{(S)-2-环丙基-2-[(茚满-2-羰基)-氨基]-乙酰基氨基}-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸(134mg,0.31mmol)，然后加入HATU(128mg,0.34mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜(形成沉淀物)。用水稀释反应混合物。过滤该混悬液，用水和少量石油醚冲洗。用旋转蒸发器干燥得到的类白色固体，然后置于高度真空下，得到198mg(92％)茚满-2-甲酸{(S)-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-环丙基-甲基}-酰胺，为差向异构体混合物。
在50ml圆底烧瓶中，将茚满-2-甲酸{(S)-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-环丙基-甲基}-酰胺(194mg,0.28mmol)部分溶于12ml二氯甲烷，加入戴斯-马丁过碘烷(176mg,0.41mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。用4.5ml饱和NaHCO3-溶液和4.5ml 10％Na2S2O3-溶液猝灭反应混合物，在室温剧烈搅拌30min。然后用30ml二氯甲烷萃取双相混合物。用10ml饱和NaHCO3-溶液洗涤有机层。将水层用30ml二氯甲烷萃取2次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。使残余物吸附在1g硅胶上，用12g硅胶和MeOH/二氯甲烷(梯度0-5％MeOH)进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩。将残余物与二氯甲烷/己烷一起研磨，得到106mg(49％；纯度＝90％)茚满-2-甲酸{(S)-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-环丙基-甲基}-酰胺，为类白色固体。LC/MS：(M-H)-＝699。
实施例27
茚满-2-甲酸{1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-环丙基}-酰胺
在25ml圆底烧瓶中，将(S)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸苄基酯(548mg,1.42mmol)溶于5.2ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(2.8ml,36.3mmol)。将反应混合物在室温搅拌3h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下30min。将残余物(无色油状物)溶于3.4ml DMF，将溶液在0℃搅拌10min。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(1.18g,1.6ml,9.16mmol)。加入1-(Boc-氨基)环丙烷甲酸(260mg,1.29mmol)，然后加入HATU(540mg,1.42mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过周末。用70ml乙醚和5ml水萃取反应混合物。用70ml乙醚萃取水层。将有机层用5ml水洗涤3次，用5ml盐水洗涤1次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得到(S)-2-[(1-叔丁氧基羰基氨基-环丙烷羰基)-氨基]-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸苄基酯，为棕色油状物，将其不经进一步纯化即使用。
在25ml圆底烧瓶中，将(S)-2-[(1-叔丁氧基羰基氨基-环丙烷羰基)-氨基]-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸苄基酯(800mg,1.2mmol；纯度＝70％)溶于6.2ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(2.5ml,32.4mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下30min。将残余物(棕色油状物)溶于4.2ml DMF，将溶液在0℃搅拌10min。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(888mg,1.2ml,6.87mmol)。加入2-茚满甲酸(178mg,1.1mmol)，然后加入HATU(459mg,1.21mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜。用70ml乙醚和5ml水萃取反应混合物。用70ml乙醚萃取水层。将有机层用5ml水洗涤2次，用5ml盐水洗涤1次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。用25g硅胶和EtOAc/己烷(梯度0-50％EtOAc)对残余物(棕色油状物)进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到518mg(92％)(S)-2-({1-[(茚满-2-羰基)-氨基]-环丙烷羰基}-氨基)-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸苄基酯，为淡黄色泡沫。
在50ml圆底烧瓶中，将(S)-2-({1-[(茚满-2-羰基)-氨基]-环丙烷羰基}-氨基)-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸苄基酯(514mg,1.00mmol)溶于10ml甲醇。将烧瓶交替抽真空、充氩气3次。小心地加入20％披氢氧化钯碳(湿的,91mg,0.13mmol)。给烧瓶抽真空、充氩气、抽真空、充氢气。将反应混合物在氢气气氛(气囊)下在室温搅拌2.5h。用Celite过滤反应混合物，用乙酸乙酯/甲醇冲洗。浓缩滤液，得到416mg(98％)(S)-2-({1-[(茚满-2-羰基)-氨基]-环丙烷羰基}-氨基)-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸，为类白色泡沫。
在10ml圆底烧瓶中，将((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(130mg,0.34mmol)溶于3.0ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(0.68ml,8.83mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下30min。将残余物溶于2.0ml DMF，将溶液在0℃搅拌10min。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(266mg,0.36ml,2.06mmol)。加入(S)-2-({1-[(茚满-2-羰基)-氨基]-环丙烷羰基}-氨基)-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸(130mg,0.31mmol)，然后加入HATU(129mg,0.34mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜。用40ml乙醚和5ml水萃取反应混合物。用40ml乙醚萃取水层。将有机层用5ml水洗涤2次，用5ml盐水洗涤1次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。用12g硅胶和MeOH/二氯甲烷(梯度0-5％MeOH)对残余物进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到204mg(96％)茚满-2-甲酸{1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-环丙基}-酰胺，为类白色固体，为差向异构体混合物。
在25ml圆底烧瓶中，将茚满-2-甲酸{1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-环丙基}-酰胺(200mg,0.29mmol)溶于13ml二氯甲烷，加入戴斯-马丁过碘烷(185mg,0.44mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。用4.5ml饱和NaHCO3-溶液和4.5ml 10％Na2S2O3-溶液猝灭反应混合物，在室温剧烈搅拌15min。然后用30ml二氯甲烷萃取双相混合物。用10ml饱和NaHCO3-溶液洗涤有机层。将水层用30ml二氯甲烷萃取2次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。使残余物吸附在1g硅胶上，用12g硅胶和MeOH/二氯甲烷(梯度0-5％MeOH)进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩。将残余物与二氯甲烷/己烷一起研磨，得到80mg(36％；纯度＝90％)茚满-2-甲酸{1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-环丙基}-酰胺，为白色固体。LC/MS：(M-H)-＝685。
实施例28
{1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-环丙基}-氨基甲酸苄基酯
向(S)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸甲酯(524mg,1.69mmol)在CH2Cl2(8ml)中的溶液中加入TFA(3ml)。将反应混合物在室温搅拌3h，然后浓缩，用己烷处理(2x)，在高度真空下干燥。将残余物溶于DMF(5ml)，冷却至0℃。然后加入1-(苄氧基羰基氨基)环丙烷甲酸(340mg,1.45mmol)和HATU(605mg,1.59mmol)，然后加入N,N-二异丙基乙胺(1.26ml,7.23mmol)。将反应混合物温热至室温，搅拌过夜，然后用水猝灭，用EtOAc(2x)萃取。用水(3x)和盐水洗涤合并的有机物，然后用MgSO4干燥，浓缩。通过硅胶色谱法(20％－50％EtOAc/己烷)纯化残余物，得到550mg(89％)(S)-2-[(1-苄氧基羰基氨基-环丙烷羰基)-氨基]-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸甲酯，为白色泡沫。
向(S)-2-[(1-苄氧基羰基氨基-环丙烷羰基)-氨基]-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸甲酯(550mg,1.29mmol)在1,2-二氯乙烷(12ml)中的溶液中加入氢氧化三甲基锡(933mg,5.16mmol)。将浑浊的反应混合物在80℃搅拌6h，然后冷却至室温，减压浓缩。使残余物在EtOAc与1.0M HCl之间分配。用EtOAc萃取水层。用1.0M HCl(5x)洗涤合并的有机物，然后用MgSO4干燥，浓缩，得到(S)-2-[(1-苄氧基羰基氨基-环丙烷羰基)-氨基]-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸，为无色半固体，将其不经进一步纯化即使用。
向((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(120mg,0.31mmol)在CH2Cl2(4ml)中的溶液中加入三氟乙酸(1.0ml)。将反应混合物在室温搅拌2h，然后浓缩，用己烷处理。向残余物中加入(S)-2-[(1-苄氧基羰基氨基-环丙烷羰基)-氨基]-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸(150mg,0.26mmol)在DMF(3ml)和HATU(106mg,0.28mmol)中的溶液。将该混合物冷却至0℃，加入N,N-二异丙基乙胺(0.36ml,2.04mmol)。将反应温热至室温，搅拌过夜，然后用水猝灭，用EtOAc(2x)萃取。用水(3x)和盐水洗涤合并的有机物，然后用MgSO4干燥，浓缩。使残余物吸附在硅胶上，通过色谱法(30％－100％EtOAc/己烷)纯化，得到106mg(61％){1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-环丙基}-氨基甲酸苄基酯，为白色泡沫状固体和差向异构体混合物。LC/MS(M-OBn)-＝569。
向{1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-环丙基}-氨基甲酸苄基酯(103mg,0.15mmol)在CH2Cl2(6ml)中的溶液中加入戴斯-马丁过碘烷(97mg,0.23mmol)。将反应混合物在室温搅拌2h，在此期间形成细沉淀物。加入10％Na2S2O3水溶液(5ml)和饱和NaHCO3(5mL)。将双相混合物剧烈搅拌20min，然后用水稀释，用CH2Cl2(2x)萃取。用饱和NaHCO3洗涤合并的有机层，浓缩。将残余物与Et2O一起研磨，得到77mg(75％){1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-环丙基}-氨基甲酸苄基酯，为类白色固体。LC/MS：(M+H)+＝677。
实施例29
吡嗪-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺
在25ml圆底烧瓶中，将(S)-2-((S)-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸苄基酯(600mg,1.25mmol)溶于7.0ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(2.7ml,35.1mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下15min。将残余物(淡棕色固体)溶于4.6ml DMF，将溶液在0℃搅拌10min。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(962mg,1.3ml,7.44mmol)。加入吡嗪-2-甲酸(145mg,1.17mmol)，然后加入HATU(489mg,1.29mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜。用70ml乙醚和5ml水萃取反应混合物。用70ml乙醚萃取水层。将有机层用5ml水洗涤2次，用5ml盐水洗涤1次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。用25g硅胶和EtOAc/己烷(梯度0-80％EtOAc)对残余物进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到615mg(97％；纯度＝85％)(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-{(S)-2-[(吡嗪-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-丙酸苄基酯，为类白色固体。
在50ml圆底烧瓶中，将(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-{(S)-2-[(吡嗪-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-丙酸苄基酯(592mg,1.09mmol；纯度＝85％)溶于6.0ml甲醇和6.0ml THF。将烧瓶交替抽真空、充氩气3次。小心地加入20％披氢氧化钯碳(湿的,100mg,0.14mmol)。给烧瓶抽真空、充氩气、抽真空、充氢气。将反应混合物在氢气气氛(气囊)下在室温搅拌1.5h。用Celite过滤反应混合物，用乙酸乙酯/甲醇冲洗。浓缩滤液，得到(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-{(S)-2-[(吡嗪-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-丙酸，为深棕色油状物，将其不经进一步纯化即使用。
在10ml圆底烧瓶中，将((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(130mg,0.34mmol)溶于3.0ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(0.68ml,8.83mmol)。将反应混合物在室温搅拌3.5h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下30min。将残余物和(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-{(S)-2-[(吡嗪-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-丙酸(150mg,0.32mmol；纯度＝80％)溶于3.0ml DMF，将深棕色溶液冷却至0℃。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(266mg,0.36ml,2.06mmol)，然后加入HATU(135mg,0.35mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜。用60ml乙醚/乙酸乙酯(2:1)和5ml水萃取反应混合物。用60ml乙醚/乙酸乙酯(2:1)萃取水层。将有机层用5ml水洗涤3次，用5ml盐水洗涤1次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。合并水层，用30ml乙酸乙酯萃取3次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，与来自第一次萃取的残余物合，浓缩。将残余物与甲醇一起研磨。将固体置于一旁。浓缩滤液，用12g硅胶和MeOH/二氯甲烷(梯度0-5％MeOH)进行色谱处理。合并含有产物的所有级分以及来自研磨的固体，浓缩，得到151mg(73％)吡嗪-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为淡棕色固体，为差向异构体混合物。
在25ml圆底烧瓶中，将吡嗪-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺(148mg,0.23mmol)部分溶于10.0ml二氯甲烷，加入戴斯-马丁过碘烷(147mg,0.35mmol)。将反应混合物在室温搅拌2h。用4ml饱和NaHCO3-溶液和4ml 10％Na2S2O3-溶液猝灭反应混合物，在室温剧烈搅拌15min。然后用30ml二氯甲烷萃取双相混合物。然后用10ml饱和NaHCO3-溶液洗涤有机层。将水层用30ml二氯甲烷萃取2次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。使残余物吸附在1g硅胶上，用12g硅胶和MeOH/二氯甲烷(梯度0-5％MeOH)进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩。将残余物与二氯甲烷/己烷一起研磨，得到81mg(49％；纯度＝90％)吡嗪-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为类白色固体。LC/MS：(M-H)-＝635。
实施例30
2-甲基-2H-吡唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺
在10ml圆底烧瓶中，将((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(120mg,0.31mmol)溶于3.0ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(0.63ml,8.18mmol)。将反应混合物在室温搅拌3h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下30min。将残余物和(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-{(S)-2-[(2-甲基-2H-吡唑-3-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-丙酸(190mg,0.27mmol；纯度＝55％)溶于2.0ml DMF，将棕色溶液冷却至0℃。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(222mg,0.30ml,1.72mmol)，然后加入HATU(114mg,0.30mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌2天。用乙醚/EtOAc(1:1)和水萃取反应混合物。用乙醚/EtOAc(1:1)反萃取水层。将有机层用水洗涤2次，用盐水洗涤1次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。用12g硅胶和MeOH/二氯甲烷(梯度0-5％MeOH)对残余物进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到118mg(67％)2-甲基-2H-吡唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为类白色固体，为差向异构体混合物。
在25ml圆底烧瓶中，将2-甲基-2H-吡唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺(116mg,0.18mmol)部分溶于8.0ml二氯甲烷，加入戴斯-马丁过碘烷(114mg,0.27mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。用3ml饱和NaHCO3-溶液和3ml 10％Na2S2O3-溶液猝灭反应混合物，在室温剧烈搅拌30min。然后用30ml二氯甲烷萃取双相混合物。用10ml饱和NaHCO3-溶液洗涤有机层。用30ml二氯甲烷将水层萃取2次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。使残余物吸附在2g硅胶上，用12g硅胶和MeOH/二氯甲烷(梯度0-5％MeOH)进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩。将残余物与二氯甲烷/己烷一起研磨，得到34mg(26％；纯度＝90％)2-甲基-2H-吡唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为淡棕色固体。LC/MS：(M-H)-＝648。
实施例31
{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-甲基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯
向10ml圆底烧瓶中加入(S)-3-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-4-苯基-丁酸(200mg,0.64mmol)、甲胺盐酸盐(61mg,0.90mmol)和2.5ml二氯甲烷。加入N,N-二异丙基乙胺(237mg,0.32ml,1.83mmol)，然后加入HATU(269mg,0.71mmol)。将黄色溶液在室温搅拌过夜。用5ml水和30ml二氯甲烷萃取反应混合物。用30ml二氯甲烷萃取水层。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。用12g硅胶和EtOAc/己烷(梯度0-80％EtOAc)对残余物进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到178mg(72％；纯度＝80％)((S)-1-苄基-2-羟基-2-甲基氨基甲酰基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯，为类白色固体，为差向异构体混合物。
在10ml圆底烧瓶中，将((S)-1-苄基-2-羟基-2-甲基氨基甲酰基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(170mg,0.44mmol；纯度＝80％)溶于3.0ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(0.76ml,9.86mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下30min。将残余物(淡黄色油状物)溶于2.0ml DMF，冷却至0℃。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(259mg,0.35ml,2.00mmol)，然后加入(S)-2-((S)-2-苄氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-3-(1H-吲哚-3-基)-丙酸(170mg,0.33mmol；纯度＝80％)和HATU(139mg,0.37mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜。用水稀释反应混合物(形成沉淀物)。过滤该混悬液，用水和少量石油醚冲洗。用旋转蒸发器干燥得到的类白色固体，然后置于高度真空下，得到164mg(82％){(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-羟基-2-甲基氨基甲酰基-乙基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯，为差向异构体混合物。
在25ml圆底烧瓶中，将{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-羟基-2-甲基氨基甲酰基-乙基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯(161mg,0.27mmol)部分溶于11ml二氯甲烷，加入戴斯-马丁过碘烷(171mg,0.40mmol)。将反应混合物在室温搅拌2h(反应混合物变成深棕色溶液)。用4.5ml饱和NaHCO3-溶液和4.5ml 10％Na2S2O3-溶液猝灭反应混合物，在室温剧烈搅拌30min。然后用30ml二氯甲烷萃取双相混合物。然后用10ml饱和NaHCO3-溶液洗涤有机层。将水层用30ml二氯甲烷萃取2次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。将残余物与乙酸乙酯和少量乙醚一起研磨，得到46mg(27％){(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-甲基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯，为棕色固体。LC/MS：(M+H)+＝598。
实施例32
{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-环丙基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯
向10ml圆底烧瓶中加入(S)-3-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-4-苯基-丁酸(200mg,0.64mmol)、环丙基胺(56mg,0.98mmol)和2.5ml二氯甲烷。加入N,N-二异丙基乙胺(170mg,0.23ml,1.32mmol)，然后加入HATU(269mg,0.71mmol)。将黄色溶液在室温搅拌过夜。用5ml水和30ml二氯甲烷萃取反应混合物。用30ml二氯甲烷萃取水层。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。用12g硅胶和EtOAc/己烷(梯度0-70％EtOAc)对残余物进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到61mg(28％)((S)-1-苄基-2-环丙基氨基甲酰基-2-羟基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯，为类白色蜡状固体，为差向异构体混合物。
在10ml圆底烧瓶中，将((S)-1-苄基-2-环丙基氨基甲酰基-2-羟基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(60mg,0.18mmol)溶于1.5ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(0.31ml,4.02mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下15min。将残余物(淡黄色油状物)溶于1.0mlDMF，冷却至0℃。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(104mg,0.14ml,0.80mmol)，然后加入(S)-2-((S)-2-苄氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-3-(1H-吲哚-3-基)-丙酸(70mg,0.14mmol；纯度＝80％)和HATU(58mg,0.15mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜。用水稀释反应混合物(形成沉淀物)。过滤该混悬液，用水和少量石油醚冲洗。使用旋转蒸发器干燥得到的淡黄色固体，然后置于高度真空下，得到67mg(78％){(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-环丙基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯，为差向异构体混合物。
在25ml圆底烧瓶中，将{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-环丙基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯(65mg,0.10mmol)部分溶于4.4ml二氯甲烷，加入戴斯-马丁过碘烷(66mg,0.16mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h(反应混合物变成深棕色溶液)。用1.5ml饱和NaHCO3-溶液和1.5ml 10％Na2S2O3-溶液猝灭反应混合物，在室温剧烈搅拌30min。然后用30ml二氯甲烷萃取双相混合物。用3ml饱和NaHCO3-溶液洗涤有机层。将水层用30ml二氯甲烷萃取2次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。将残余物与乙酸乙酯/乙醚一起研磨，得到29mg(43％){(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-环丙基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯，为棕色固体。LC/MS：(M+H)+＝624。
实施例33
{(S)-1-[(S)-1-[(S)-1-苄基-2-(2-甲氧基-乙基氨基甲酰基)-2-氧代-乙基氨基甲酰基]-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯
向10ml圆底烧瓶中加入(S)-3-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-4-苯基-丁酸(200mg,0.64mmol)、2-甲氧基乙胺(86.4mg,0.10ml,1.15mmol)和2.5ml二氯甲烷。加入N,N-二异丙基乙胺(170mg,0.23ml,1.32mmol)，然后加入HATU(269mg,0.71mmol)。将黄色溶液在室温搅拌过夜。用5ml水和30ml二氯甲烷萃取反应混合物。用30ml二氯甲烷萃取水层。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。用12g硅胶和EtOAc/己烷(梯度0-70％EtOAc)对残余物进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到75mg(30％；纯度＝90％)[(S)-1-苄基-2-羟基-2-(2-甲氧基-乙基氨基甲酰基)-乙基]-氨基甲酸叔丁酯，为淡黄色油状物，为差向异构体混合物。
在10ml圆底烧瓶中，将[(S)-1-苄基-2-羟基-2-(2-甲氧基-乙基氨基甲酰基)-乙基]-氨基甲酸叔丁酯(70mg,0.18mmol；纯度＝90％)溶于1.5ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(0.36ml,4.67mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下15min。将残余物溶于1.0mlDMF，冷却至0℃。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(118mg,0.16ml,0.92mmol)，然后加入(S)-2-((S)-2-苄氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-3-(1H-吲哚-3-基)-丙酸(80mg,0.16mmol；纯度＝80％)和HATU(66mg,0.17mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜。用EtOAc和水萃取反应混合物。用EtOAc反萃取水层。将有机层用水洗涤2次，用盐水洗涤1次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。使残余物吸附在1g硅胶上，用4g硅胶和MeOH/二氯甲烷(梯度0-10％MeOH)进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到67mg(67％){(S)-1-[(S)-1-[(S)-1-苄基-2-羟基-2-(2-甲氧基-乙基氨基甲酰基)-乙基氨基甲酰基]-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯，为淡黄色固体，为差向异构体混合物。
在25ml圆底烧瓶中，将{(S)-1-[(S)-1-[(S)-1-苄基-2-羟基-2-(2-甲氧基-乙基氨基甲酰基)-乙基氨基甲酰基]-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯(64mg,0.10mmol)溶于4.2ml二氯甲烷，加入戴斯-马丁过碘烷(64mg,0.15mmol)。将反应混合物在室温搅拌2h。用1.5ml饱和NaHCO3-溶液和1.5ml 10％Na2S2O3-溶液猝灭反应混合物，在室温剧烈搅拌30min。然后用30ml二氯甲烷萃取双相混合物。然后用3ml饱和NaHCO3-溶液洗涤有机层。将水层用30ml二氯甲烷萃取2次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。使残余物吸附在1g硅胶上，用4g硅胶和MeOH/二氯甲烷(梯度0-10％MeOH)进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩。将残余物与乙酸乙酯/乙醚和二氯甲烷/己烷一起研磨，得到14mg(20％；纯度＝90％){(S)-1-[(S)-1-[(S)-1-苄基-2-(2-甲氧基-乙基氨基甲酰基)-2-氧代-乙基氨基甲酰基]-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯，为淡棕色固体。LC/MS：(M+H)+＝642。
实施例34
{(S)-1-[(S)-1-{(S)-1-苄基-2-氧代-2-[(吡啶-2-基甲基)-氨基甲酰基]-乙基氨基甲酰基}-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯
向10ml圆底烧瓶中加入(S)-3-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-4-苯基-丁酸(220mg,0.71mmol)、2-(氨基甲基)吡啶(157mg,0.15ml,1.46mmol)和2.5ml DMF。加入N,N-二异丙基乙胺(185mg,0.25ml,1.43mmol)，然后加入HATU(296mg,0.78mmol)。将黄色溶液在室温搅拌4天。用50ml EtOAc和5ml水萃取反应混合物。用50ml EtOAc萃取水层。将有机层用5ml水洗涤3次，用5ml盐水洗涤1次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。用12g硅胶和EtOAc/己烷(梯度50-100％EtOAc)对残余物进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到107mg(31％；纯度＝80％)，为淡黄色蜡状固体，为差向异构体混合物。
在25ml圆底烧瓶中，将{(S)-1-苄基-2-羟基-2-[(吡啶-2-基甲基)-氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸叔丁酯(105mg,0.22mmol；纯度＝80％)溶于2.1ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(0.42ml,5.45mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下30min。将残余物(淡黄色油状物)溶于1.4ml DMF，冷却至0℃。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(148mg,0.20ml,1.15mmol)。加入(S)-2-((S)-2-苄氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-3-(1H-吲哚-3-基)-丙酸(95mg,0.19mmol；纯度＝80％)，然后加入HATU(78mg,0.21mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜。用水稀释反应混合物(形成沉淀物)。过滤该混悬液，用水和少量石油醚冲洗。使用旋转蒸发器干燥得到的淡黄色固体，然后置于高度真空下，得到112mg(89％){(S)-1-[(S)-1-{(S)-1-苄基-2-羟基-2-[(吡啶-2-基甲基)-氨基甲酰基]-乙基氨基甲酰基}-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯，为差向异构体混合物。
在25ml圆底烧瓶中，将{(S)-1-[(S)-1-{(S)-1-苄基-2-羟基-2-[(吡啶-2-基甲基)-氨基甲酰基]-乙基氨基甲酰基}-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯(107mg,0.16mmol)部分溶于7.0ml二氯甲烷，加入戴斯-马丁过碘烷(101mg,0.24mmol)。将反应混合物在室温搅拌2h。用3ml饱和NaHCO3-溶液和3ml 10％Na2S2O3-溶液猝灭反应混合物，在室温剧烈搅拌30min。然后用30ml二氯甲烷萃取双相混合物。用10ml饱和NaHCO3-溶液洗涤有机层。将水层用30ml二氯甲烷萃取2次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。使残余物吸附在1g硅胶上，用12g硅胶和MeOH/二氯甲烷(梯度0-5％MeOH)进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到22mg(19％；纯度＝90％){(S)-1-[(S)-1-{(S)-1-苄基-2-氧代-2-[(吡啶-2-基甲基)-氨基甲酰基]-乙基氨基甲酰基}-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯，为淡棕色固体。LC/MS：(M+H)+＝675。
实施例35
(S)-N-苄基-3-[(S)-2-[(S)-2-(2-2,3-二氢-苯并[1,4]嗪-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酰基氨基]-2-氧代-4-苯基-丁酰胺
在室温向3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪(500mg,3.7mmol)在DMF(12ml)中的溶液中加入碳酸钾(1.02g,7.4mmol)，然后加入2-溴乙酸甲酯(622mg,0.38ml,4.07mmol)。将反应混合物在室温搅拌30min，然后在50℃加热3hr。冷却酯室温过夜。用水猝灭，用Et2O/EtOAc(2x)萃取。用水(3x)和盐水洗涤合并的有机层，然后用MgSO4干燥，浓缩。通过使用40g硅胶和10％－25％EtOAc/己烷的色谱法纯化残余物，得到545mg(71％)(2,3-二氢-苯并[1,4]嗪-4-基)-乙酸甲酯，为橙色油状物。
向(2,3-二氢-苯并[1,4]嗪-4-基)-乙酸甲酯(545mg,2.63mmol)在THF(4ml)、MeOH(4ml)和水(2ml)中的溶液中加入氢氧化锂一水合物(166mg,3.94mmol)。将橙色反应混合物在室温搅拌过夜，然后减压浓缩。用1.0MHCl酸化剩余的橙色水溶液残余物。通过过滤收集得到的淡棕色沉淀物，用水冲洗，在高度真空下干燥，得到323mg(64％)(2,3-二氢-苯并[1,4]嗪-4-基)-乙酸。
在25ml圆底烧瓶中，将(S)-2-((S)-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸苄基酯(557mg,1.16mmol)溶于6.0ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(2.3ml,29.9mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下15min。将残余物(淡棕色固体)溶于4.0ml DMF，冷却至0℃。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(814mg,1.1ml,6.3mmol)。加入(2,3-二氢-苯并[1,4]嗪-4-基)-乙酸(200mg,1.04mmol)，然后加入HATU(433mg,1.14mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜。用水稀释反应混合物(形成沉淀物)。过滤该混悬液，用水和少量石油醚冲洗。用旋转蒸发器干燥得到的类白色固体，然后置于高度真空下，得到508mg(92％)(S)-2-[(S)-2-(2-2,3-二氢-苯并[1,4]嗪-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸苄基酯。
在100ml圆底烧瓶中，将(S)-2-[(S)-2-(2-2,3-二氢-苯并[1,4]嗪-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸苄基酯(505mg,0.95mmol)溶于6.0ml甲醇和6.0ml THF。将烧瓶交替抽真空、充氩气3次。小心地加入20％披氢氧化钯碳(湿的,86mg,0.12mmol)。给烧瓶抽真空、充氩气、抽真空、充氢气。将反应混合物在氢气气氛(气囊)下在室温搅拌2h。用Celite过滤反应混合物，用乙酸乙酯/甲醇冲洗。浓缩滤液，得到464mg(99％；纯度＝90％)(S)-2-[(S)-2-(2-2,3-二氢-苯并[1,4]嗪-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸，为淡棕色固体。
在10ml圆底烧瓶中，将((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(130mg,0.34mmol)溶于3.0ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(0.68ml,8.83mmol)。将反应混合物在室温搅拌3.5h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下15min。将残余物(淡棕色油状物)溶于2.0ml DMF，冷却至0℃。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(222mg,0.30ml,1.72mmol)。加入(S)-2-[(S)-2-(2-2,3-二氢-苯并[1,4]嗪-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸(140mg,0.29mmol；纯度＝90％)，然后加入HATU(119mg,0.31mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜。用水稀释反应混合物(形成沉淀物)。过滤该混悬液，用水和少量石油醚冲洗。使用旋转蒸发器干燥得到的淡棕色固体，然后置于高度真空下，得到195mg(97％)(S)-N-苄基-3-[(S)-2-[(S)-2-(2-2,3-二氢-苯并[1,4]嗪-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酰基氨基]-2-羟基-4-苯基-丁酰胺，为差向异构体混合物。
在50ml圆底烧瓶中，将(S)-N-苄基-3-[(S)-2-[(S)-2-(2-2,3-二氢-苯并[1,4]嗪-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酰基氨基]-2-羟基-4-苯基-丁酰胺(184mg,0.26mmol)部分溶于11ml二氯甲烷，加入戴斯-马丁过碘烷(165mg,0.39mmol)。将反应混合物在室温搅拌1.5h。用4.5ml饱和NaHCO3-溶液和4.5ml 10％Na2S2O3-溶液猝灭反应混合物，在室温剧烈搅拌15min。然后用30ml二氯甲烷萃取双相混合物。然后用10ml饱和NaHCO3-溶液洗涤有机层。用30ml二氯甲烷将水层萃取2次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。使残余物吸附在1g硅胶上，用12g硅胶和MeOH/二氯甲烷(梯度0-5％MeOH)进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩。将残余物与乙酸乙酯/乙醚和几滴二氯甲烷一起研磨，得到54mg(26％；纯度＝90％)(S)-N-苄基-3-[(S)-2-[(S)-2-(2-2,3-二氢-苯并[1,4]嗪-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酰基氨基]-2-氧代-4-苯基-丁酰胺，为橙色固体。LC/MS：(M-H)-＝704。
实施例36
{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-3-甲基-丁基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯
在50ml圆底烧瓶中，将L-亮氨酸叔丁酯盐酸盐(662mg,2.96mmol)溶于10ml DMF，冷却至0℃。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(1.04g,1.4ml,8.02mmol)。加入N-苄氧基羰基-L-丙氨酸(600mg,2.69mmol)，然后加入HATU(1.12g,2.96mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜。用100ml乙醚和10ml水萃取反应混合物。用100ml乙醚萃取水层。将有机层用10ml水洗涤3次，用10ml盐水洗涤1次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得到(S)-2-((S)-2-苄氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-4-甲基-戊酸叔丁酯，为淡黄色油状物，将其不经进一步纯化即使用。
向微波小瓶中加入(S)-2-((S)-2-苄氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-4-甲基-戊酸叔丁酯(125mg,0.27mmol；纯度＝85％)和1,1,1,3,3,3-六氟-2-丙醇(2.2ml,20.9mmol)。向小瓶中充氩气，密封。将无色溶液在微波照射下于120℃加热2h。浓缩反应混合物，得到(S)-2-((S)-2-苄氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-4-甲基-戊酸，为无色油状物，将其不经进一步纯化即使用。
在10ml圆底烧瓶中，将((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(125mg,0.33mmol)溶于3.0ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(0.60ml,7.79mmol)。将反应混合物在室温搅拌3h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下15min。将残余物和(S)-2-((S)-2-苄氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-4-甲基-戊酸(111mg,0.23mmol；纯度＝70％)溶于2.0mlDMF，冷却至0℃。在0°滴加N,N-二异丙基乙胺(222mg,0.30ml,1.72mmol)，然后加入HATU(97mg,0.26mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜。用水稀释反应混合物(形成沉淀物)。过滤该混悬液，用水和少量石油醚冲洗。用旋转蒸发器干燥得到的类白色固体，然后置于高度真空下，得到123mg(80％；纯度＝90％){(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-3-甲基-丁基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯，为差向异构体混合物。
在25ml圆底烧瓶中，将{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-3-甲基-丁基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯(117mg,0.17mmol；纯度＝90％)部分溶于7.0ml二氯甲烷，加入戴斯-马丁过碘烷(111mg,0.26mmol)。将反应混合物在室温搅拌2h。用3.5ml饱和NaHCO3-溶液和3.5ml 10％Na2S2O3-溶液猝灭反应混合物，在室温剧烈搅拌30min。然后用30ml二氯甲烷萃取双相混合物。用10ml饱和NaHCO3-溶液洗涤有机层。将水层用30ml二氯甲烷萃取2次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。将残余物与乙酸乙酯/乙醚一起研磨，得到71mg(64％){(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-3-甲基-丁基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯，为白色固体。LC/MS：(M+H)+＝601。
实施例37
2-甲基-2H-吡唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-3-甲基-丁基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺
在50ml圆底烧瓶中，将(S)-2-((S)-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-4-甲基-戊酸苄基酯(400mg,0.97mmol)溶于6.0ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(2.0ml,26.0mmol)中的溶液中。将反应混合物在室温搅拌2.5h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下15min。将残余物(无色油状物)溶于4.0ml DMF，冷却至0℃。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(1.48g,2.0ml,11.5mmol)。加入1-甲基-1H-吡唑-5-甲酸(115mg,0.91mmol)，然后加入HATU(381mg,1.00mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜。用70ml乙醚和5ml水萃取反应混合物。用70ml乙醚萃取水层。将有机层用5ml水洗涤3次，用5ml盐水洗涤1次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。用12g硅胶和EtOAc/己烷(梯度0-70％EtOAc)对残余物进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到382mg(99％；纯度＝95％)(S)-4-甲基-2-{(S)-2-[(2-甲基-2H-吡唑-3-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-戊酸苄基酯，为无色油状物。
在50ml圆底烧瓶中，将(S)-4-甲基-2-{(S)-2-[(2-甲基-2H-吡唑-3-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-戊酸苄基酯(380mg,0.90mmol)溶于9.0ml甲醇。将烧瓶交替抽真空、充氩气3次。小心地加入20％披氢氧化钯碳(湿的,82mg,0.12mmol)。给烧瓶抽真空、充氩气、抽真空、充氢气。将反应混合物在氢气气氛(气囊)下在室温搅拌2h。用Celite过滤反应混合物，用乙酸乙酯/甲醇冲洗。浓缩滤液，得到292mg(94％；纯度＝90％)(S)-4-甲基-2-{(S)-2-[(2-甲基-2H-吡唑-3-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-戊酸，为白色固体。
在10ml圆底烧瓶中，将((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(125mg,0.33mmol)溶于3.0ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(0.60ml,7.79mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下15min。将残余物和(S)-4-甲基-2-{(S)-2-[(2-甲基-2H-吡唑-3-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-戊酸(100mg,0.29mmol；纯度＝90％)溶于2.0ml DMF，冷却至0℃。在0°滴加N,N-二异丙基乙胺(259mg,0.35ml,2.00mmol)，然后加入HATU(121mg,0.32mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜。用水稀释反应混合物(形成沉淀物)。过滤该混悬液，用水和少量石油醚冲洗。用旋转蒸发器干燥得到的类白色固体，然后置于高度真空下，得到146mg(87％)2-甲基-2H-吡唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-3-甲基-丁基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为差向异构体混合物。
在25ml圆底烧瓶中，将2-甲基-2H-吡唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-3-甲基-丁基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺(141mg,0.24mmol)部分溶于10ml二氯甲烷，加入戴斯-马丁过碘烷(156mg,0.37mmol)。将反应混合物在室温搅拌2h。用4ml饱和NaHCO3-溶液和4ml 10％Na2S2O3-溶液猝灭反应混合物，在室温剧烈搅拌30min。然后用30ml二氯甲烷萃取双相混合物。然后用10ml饱和NaHCO3-溶液洗涤有机层。用30ml二氯甲烷将水层萃取2次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。将残余物与二氯甲烷/乙醚一起研磨，得到111mg(75％)2-甲基-2H-吡唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-3-甲基-丁基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为类白色固体。LC/MS：(M+H)+＝575。
实施例38
{(S)-1-[(S)-1-[(S)-1-苄基-2-(苄基-甲基-氨基甲酰基)-2-氧代-乙基氨基甲酰基]-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯
向10ml圆底烧瓶中加入(S)-3-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-4-苯基-丁酸(220mg,0.71mmol)、N-苄基甲胺(170mg,0.18ml,1.4mmol)和2.5mlDMF。加入N,N-二异丙基乙胺(185mg,0.25ml,1.43mmol)，然后加入HATU(296mg,0.78mmol)。将黄色溶液在室温搅拌过夜。用50mlEtOAc和5ml水萃取反应混合物。用50ml EtOAc萃取水层。将有机层用5ml水洗涤3次，用5ml盐水洗涤1次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。用12g硅胶和EtOAc/己烷(梯度0-30％EtOAc)对残余物进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到213mg(76％)[(S)-1-苄基-2-(苄基-甲基-氨基甲酰基)-2-羟基-乙基]-氨基甲酸叔丁酯，为淡黄色油状物，为差向异构体混合物。
在25ml圆底烧瓶中，将[(S)-1-苄基-2-(苄基-甲基-氨基甲酰基)-2-羟基-乙基]-氨基甲酸叔丁酯(209mg,0.52mmol)溶于3.0ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(0.81ml,10.5mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下15min。将残余物溶于2.0ml DMF，冷却至0℃。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(274mg,0.37ml,2.12mmol)。加入(S)-2-((S)-2-苄氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-3-(1H-吲哚-3-基)-丙酸(180mg,0.35mmol；纯度＝80％)，然后加入HATU(147mg,0.39mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌2天。用40ml乙醚和4ml水萃取反应混合物。用40ml乙醚萃取水层。将有机层用4ml水洗涤2次，用4ml盐水洗涤1次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。用12g硅胶和MeOH/二氯甲烷(梯度0-5％MeOH)对残余物进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到212mg(87％){(S)-1-[(S)-1-[(S)-1-苄基-2-(苄基-甲基-氨基甲酰基)-2-羟基-乙基氨基甲酰基]-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯，为淡黄色固体，为差向异构体混合物。
在25ml圆底烧瓶中，将{(S)-1-[(S)-1-[(S)-1-苄基-2-(苄基-甲基-氨基甲酰基)-2-羟基-乙基氨基甲酰基]-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯(205mg,0.30mmol)溶于12ml二氯甲烷，加入戴斯-马丁过碘烷(189mg,0.45mmol)。将反应混合物在室温搅拌3.5h。用4.5ml饱和NaHCO3-溶液和4.5ml 10％Na2S2O3-溶液猝灭反应混合物，在室温剧烈搅拌30min。然后用30ml二氯甲烷萃取双相混合物。用10ml饱和NaHCO3-溶液洗涤有机层。用30ml二氯甲烷将水层萃取2次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。用12g硅胶和MeOH/二氯甲烷(梯度0-5％MeOH)对残余物进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到29mg(13％；纯度＝90％){(S)-1-[(S)-1-[(S)-1-苄基-2-(苄基-甲基-氨基甲酰基)-2-氧代-乙基氨基甲酰基]-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯，为淡棕色泡沫。LC/MS：(M-OBn)-＝578。
实施例39
(S)-3-[(S)-2-((S)-2-苯磺酰基氨基-丙酰基氨基)-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酰基氨基]-N-苄基-2-氧代-4-苯基-丁酰胺
在50ml圆底烧瓶中，将(S)-2-((S)-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸苄基酯(400mg,0.70mmol；纯度＝80％)溶于6.0ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(1.3ml,16.9mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下30min。将残余物(类白色固体)部分溶于4.8ml二氯甲烷，冷却至0℃。在0℃加入N,N-二异丙基乙胺(459mg,0.62ml,3.55mmol)，然后加入苯磺酰氯(137mg,0.10ml,0.78mmol)。将反应混合物在搅拌下缓慢地温热至室温过夜。用5ml水猝灭反应混合物，用30ml二氯甲烷萃取2次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。用12g硅胶和EtOAc/己烷(梯度0-40％EtOAc)对残余物(棕色油状物)进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到187mg(51％)(S)-2-((S)-2-苯磺酰基氨基-丙酰基氨基)-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸苄基酯，为棕色油状物。
在25ml圆底烧瓶中，将(S)-2-((S)-2-苯磺酰基氨基-丙酰基氨基)-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸苄基酯(184mg,0.35mmol)溶于4.0ml甲醇。将烧瓶交替抽真空、充氩气3次。小心地加入20％披氢氧化钯碳(33mg,0.05mmol)。给烧瓶抽真空、充氩气、抽真空、充氢气。将反应混合物在氢气气氛(气囊)下在室温搅拌2h。用Celite过滤反应混合物，用乙酸乙酯/甲醇冲洗。浓缩滤液，得到142mg(94％；纯度＝95％)(S)-2-((S)-2-苯磺酰基氨基-丙酰基氨基)-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸，为淡黄色泡沫。
在10ml圆底烧瓶中，将((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(125mg,0.33mmol)溶于3.0ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(0.60ml,7.79mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下30min。将残余物和(S)-2-((S)-2-苯磺酰基氨基-丙酰基氨基)-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸(125mg,0.29mmol)溶于2.0ml DMF，冷却至0℃。在0°滴加N,N-二异丙基乙胺(222mg,0.30ml,1.72mmol)，然后加入HATU(122mg,0.32mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜(形成沉淀物)。用水稀释反应混合物。过滤该混悬液，用水和少量石油醚冲洗。将得到的淡黄色固体溶于二氯甲烷/甲醇，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩，然后置于高度真空下，得到157mg(76％)(S)-3-[(S)-2-((S)-2-苯磺酰基氨基-丙酰基氨基)-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酰基氨基]-N-苄基-2-羟基-4-苯基-丁酰胺，为差向异构体混合物。
在50ml圆底烧瓶中，将(S)-3-[(S)-2-((S)-2-苯磺酰基氨基-丙酰基氨基)-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酰基氨基]-N-苄基-2-羟基-4-苯基-丁酰胺(153mg,0.22mmol)部分溶于9.0ml二氯甲烷，加入戴斯-马丁过碘烷(137mg,0.32mmol)。将反应混合物在室温搅拌2h。用4ml饱和NaHCO3-溶液和4ml10％Na2S2O3-溶液猝灭反应混合物，在室温剧烈搅拌30min。然后用30ml二氯甲烷萃取双相混合物。用10ml饱和NaHCO3-溶液洗涤有机层。用30ml二氯甲烷将水层萃取2次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。将残余物(淡黄色固体)与二氯甲烷/乙醚一起研磨，得到87mg(60％)(S)-3-[(S)-2-((S)-2-苯磺酰基氨基-丙酰基氨基)-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酰基氨基]-N-苄基-2-氧代-4-苯基-丁酰胺，为白色固体。C/MS：(M-H)-＝669。
实施例40
(S)-N-苄基-3-{(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-[(S)-2-(甲苯-2-磺酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酰基氨基}-2-氧代-4-苯基-丁酰胺
在50ml圆底烧瓶中，将(S)-2-((S)-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸苄基酯(400mg,0.70mmol；纯度＝80％)溶于6.0ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(1.3ml,16.9mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下30min。将残余物(类白色固体)部分溶于4.8ml二氯甲烷，冷却至0℃。在0℃加入N,N-二异丙基乙胺(459mg,0.62ml,3.55mmol)，然后加入邻-甲苯磺酰氯(145mg,0.11ml,0.76mmol)。将反应混合物在搅拌下缓慢地温热至室温过夜。用5ml水猝灭反应混合物，用30ml二氯甲烷萃取2次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。用12g硅胶和EtOAc/己烷(梯度0-30％EtOAc)对残余物(棕色油状物)进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到212mg(56％)(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-[(S)-2-(甲苯-2-磺酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酸苄基酯，为淡棕色油状物。
在25ml圆底烧瓶中，将(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-[(S)-2-(甲苯-2-磺酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酸苄基酯(210mg,0.39mmol)溶于4.0ml甲醇。将烧瓶交替抽真空、充氩气3次。小心地加入20％披氢氧化钯碳(36mg,0.05mmol)。给烧瓶抽真空、充氩气、抽真空、充氢气。将反应混合物在氢气气氛(气囊)下在室温搅拌2h。用Celite过滤反应混合物，用乙酸乙酯/甲醇冲洗。浓缩滤液，得到164mg(95％；纯度＝95％)(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-[(S)-2-(甲苯-2-磺酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酸，为淡黄色泡沫。
在10ml圆底烧瓶中，将((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(125mg,0.33mmol)溶于3.0ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(0.60ml,7.79mmol)。将反应混合物在室温搅拌3h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下30min。将残余物和(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-[(S)-2-(甲苯-2-磺酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酸(130mg,0.29mmol)溶于2.0ml DMF，冷却至0℃。在0°滴加N,N-二异丙基乙胺(222mg,0.30ml,1.72mmol)，然后加入HATU(123mg,0.32mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜。用水稀释反应混合物(形成沉淀物)。过滤该混悬液，用水和少量石油醚冲洗。将得到的淡棕色固体溶于二氯甲烷/甲醇，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩，然后置于高度真空下，得到175mg(82％)(S)-N-苄基-2-羟基-3-{(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-[(S)-2-(甲苯-2-磺酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酰基氨基}-4-苯基-丁酰胺，为差向异构体混合物。
在50ml圆底烧瓶中，将(S)-N-苄基-2-羟基-3-{(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-[(S)-2-(甲苯-2-磺酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酰基氨基}-4-苯基-丁酰胺(170mg,0.24mmol)部分溶于10.0ml二氯甲烷，加入戴斯-马丁过碘烷(150mg,0.35mmol)。将反应混合物在室温搅拌2h。用4ml饱和NaHCO3-溶液和4ml 10％Na2S2O3-溶液猝灭反应混合物，在室温剧烈搅拌30min。然后用30ml二氯甲烷萃取双相混合物。用10ml饱和NaHCO3-溶液洗涤有机层。用30ml二氯甲烷将水层萃取2次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。将残余物(淡黄色固体)与二氯甲烷/乙醚一起研磨，得到122mg(72％)(S)-N-苄基-3-{(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-[(S)-2-(甲苯-2-磺酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酰基氨基}-2-氧代-4-苯基-丁酰胺，为白色固体。LC/MS：(M-H)-＝683。
实施例41
(S)-N-苄基-3-((S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-{(S)-2-[3-(2-甲基-2H-吡唑-3-基)-丙酰基氨基]-丙酰基氨基}-丙酰基氨基)-2-氧代-4-苯基-丁酰胺
向50ml 2-颈圆底烧瓶中加入1-甲基-1H-吡唑-5-硼酸频哪醇酯(1.15g,5.51mmol)、碳酸氢钠(154mg,1.84mmol)、氯(1,5-环辛二烯)铑(I)二聚体(55mg,0.11mmol),12ml 1,4-二烷和2.0ml水。将反应混合物在室温搅拌15min，然后加入丙烯酸乙酯(368mg,0.40ml,3.68mmol)。将反应混合物在80℃搅拌2h，然后冷却至室温，用70ml EtOAc和10ml水萃取。用70ml EtOAc萃取水层。用10ml水和10ml盐水洗涤有机层。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。用25g硅胶和EtOAc/己烷(梯度0-40％EtOAc)对残余物进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到314mg(47％)3-(2-甲基-2H-吡唑-3-基)-丙酸乙酯，为黄色油状物。
在25ml圆底烧瓶中，将3-(2-甲基-2H-吡唑-3-基)-丙酸乙酯(313mg,1.72mmol)溶于3.6ml THF和3.6ml甲醇。加入氢氧化锂(185mg,7.73mmol)，然后加入3.6ml水。将黄色混悬液在室温搅拌2天。蒸发有机溶剂，用20ml二氯甲烷萃取水层。将有机层置于一旁，随后弃去。用1M HCl将水层酸化至pH＝4，然后用40ml EtOAc萃取2次。用3ml水和3ml盐水洗涤有机层，然后合并，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得到149mg(56％)3-(2-甲基-2H-吡唑-3-基)-丙酸，为黄色固体。
在50ml圆底烧瓶中，将(S)-2-((S)-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸苄基酯(620mg,1.09mmol；纯度＝80％)溶于6.0ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(2.0ml,26.0mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下15min。将残余物(类白色固体)和3-(2-甲基-2H-吡唑-3-基)-丙酸(147mg,0.95mmol)溶于4.0mlDMF。将黄色溶液冷却至0℃。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(740mg,1.0ml,5.73mmol)，然后加入HATU(399mg,1.05mmol)。加入完成后，除去冰浴，将黄色溶液在室温搅拌过夜。用70ml乙醚和5ml水萃取反应混合物。用70ml乙醚萃取水层。将有机层用5ml水洗涤2次，用5ml盐水洗涤1次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。用25g硅胶和EtOAc/己烷(梯度0-100％EtOAc)、然后用EtOAc/MeOH 19:1对残余物(淡黄色油状物)进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到223mg(47％)(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-{(S)-2-[3-(2-甲基-2H-吡唑-3-基)-丙酰基氨基]-丙酰基氨基}-丙酸苄基酯，为类白色固体。
在50ml圆底烧瓶中，将(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-{(S)-2-[3-(2-甲基-2H-吡唑-3-基)-丙酰基氨基]-丙酰基氨基}-丙酸苄基酯(222mg,0.45mmol)溶于5.0ml甲醇。将烧瓶交替抽真空、充氩气3次。小心地加入20％披氢氧化钯碳(42mg,0.06mmol)。给烧瓶抽真空、充氩气、抽真空、充氢气。将反应混合物在氢气气氛(气囊)下在室温搅拌2h(沉淀出产物)。过滤反应混合物，用热乙酸乙酯/甲醇冲洗。浓缩滤液，得到172mg(95％)(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-{(S)-2-[3-(2-甲基-2H-吡唑-3-基)-丙酰基氨基]-丙酰基氨基}-丙酸，为白色固体。
在10ml圆底烧瓶中，将((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(125mg,0.33mmol)溶于3.0ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(0.60ml,7.79mmol)。将反应混合物在室温搅拌3.5h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下30min。将残余物和(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-{(S)-2-[3-(2-甲基-2H-吡唑-3-基)-丙酰基氨基]-丙酰基氨基}-丙酸(115mg,0.29mmol)溶于2.0ml DMF，冷却至0℃。在0°滴加N,N-二异丙基乙胺(222mg,0.30ml,1.72mmol)，然后加入HATU(120mg,0.31mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜(形成沉淀物)。用水稀释反应混合物。过滤该混悬液，用水和少量石油醚冲洗。将得到的(湿)淡黄色固体溶于二氯甲烷/甲醇，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩，然后置于高度真空下，得到221mg(98％；纯度＝85％)(S)-N-苄基-2-羟基-3-((S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-{(S)-2-[3-(2-甲基-2H-吡唑-3-基)-丙酰基氨基]-丙酰基氨基}-丙酰基氨基)-4-苯基-丁酰胺，为差向异构体混合物。
在50ml圆底烧瓶中，将(S)-N-苄基-2-羟基-3-((S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-{(S)-2-[3-(2-甲基-2H-吡唑-3-基)-丙酰基氨基]-丙酰基氨基}-丙酰基氨基)-4-苯基-丁酰胺(215mg,0.27mmol；纯度＝85％)部分溶于12ml二氯甲烷，加入戴斯-马丁过碘烷(174mg,0.41mmol)。将反应混合物在室温搅拌2h。用4.5ml饱和NaHCO3-溶液和4.5ml 10％Na2S2O3-溶液猝灭反应混合物，在室温剧烈搅拌30min。然后用30ml二氯甲烷萃取双相混合物。用10ml饱和NaHCO3-溶液洗涤有机层。用30ml二氯甲烷将水层萃取2次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。将残余物(淡黄色固体)与二氯甲烷/乙醚/乙酸乙酯一起研磨。使残余物(类白色固体)吸附在1g硅胶上，用4g硅胶和MeOH/二氯甲烷(梯度0-10％MeOH)进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到41mg(20％；纯度＝90％)(S)-N-苄基-3-((S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-{(S)-2-[3-(2-甲基-2H-吡唑-3-基)-丙酰基氨基]-丙酰基氨基}-丙酰基氨基)-2-氧代-4-苯基-丁酰胺，为白色固体。LC/MS：(M-H)-＝665。
实施例42
茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-3-苯基-丙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺
在0℃向(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-4-苯基丁酸(1.5g,5.37mmol)在二氯甲烷(75ml)中的溶液中加入三乙胺(1.59ml,11.4mmol)和DMAP(95.1mg,0.78mmol)。然后加入氯甲酸苄基酯(0.92ml,6.44mmol)在二氯甲烷(10ml)中的溶液。将反应混合物在0℃搅拌3h，然后在室温搅拌1h。然后用饱和碳酸氢钠猝灭混合物，用二氯甲烷(3x)萃取。用水(3x)和盐水洗涤合并的萃取物，用硫酸镁干燥。浓缩有机相，通过硅胶色谱法(10％－20％EtOAc/己烷)纯化残余物，得到1.5g(76％)(S)-2-叔丁氧基羰基氨基-4-苯基-丁酸苄基酯，为无色油状物。LC/MS：(M+H)＝370。
向(S)-2-叔丁氧基羰基氨基-4-苯基-丁酸苄基酯(1.5g,4.0mmol)在二氯甲烷(30ml)中的溶液中加入三氟乙酸(9ml)。将反应混合物在室温搅拌2.5h，然后浓缩。将残余物溶于DMF(20ml)，加入N,N-二异丙基乙胺(5.39ml,30.9mmol)，然后加入Boc-L-丙氨酸(768mg,4.06mmol)和HATU(1.7g,4.47mmol)。将黄色反应混合物在室温搅拌2.5h，然后用水猝灭，用EtOAc(3x)萃取。用水(3x)和盐水洗涤合并的萃取物，然后用硫酸镁干燥，浓缩。通过硅胶色谱法(10％－20％EtOAc/己烷)纯化残余物，得到0.26g(15％)(S)-2-((S)-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-4-苯基-丁酸苄基酯。1H NMR(DMSO-d6)δ：8.26(d,J＝7.5Hz,1H),7.35(d,J＝2.5Hz,5H),7.21-7.29(m,2H),7.13-7.20(m,3H),6.85-6.99(m,1H),5.10(d,J＝5.5Hz,2H),4.18–4.35(m,1H),3.96-4.10(m,1H),2.60(br.s.,2H),1.87-2.02(m,2H),1.38(s,9H),1.16(d,J＝7.0Hz,3H)。
向(S)-2-((S)-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-4-苯基-丁酸苄基酯(0.25g,0.57mmol)在二氯甲烷(30ml)中的溶液中加入三氟乙酸(1.09ml)。将反应在室温搅拌2.5h，然后浓缩。将残余物溶于DMF(20ml)，加入N,N-二异丙基乙胺(0.60ml,3.40mmol)，然后加入茚满-2-甲酸(92mg,0.57mmol)和HATU(0.237g,624mmol)。将棕色反应混合物在室温搅拌24h，然后用水猝灭。通过过滤收集得到的沉淀物，用水冲洗，在高度真空下干燥，得到270mg(98％)(S)-2{(S)-2-[(茚满-2-羰基)-氨基]-丙酰基}-4-苯基-丁酸苄基酯，为类白色固体。1H NMR(DMSO-d6)δ：8.39(d,J＝7.3Hz,1H),8.14(d,J＝7.5Hz,1H),6.95–7.46(m,14H),5.11(d,J＝6.0Hz,2H),4.40(t,J＝7.3Hz,1H),4.18-4.30(m,1H),3.27(br.s.,1H),3.05(d,J＝8.0Hz,4H),2.58-2.64(m,2H),1.85-2.08(m,2H),1.21(d,J＝7.0Hz,3H)。
向(S)-2{(S)-2-[(茚满-2-羰基)-氨基]-丙酰基}-4-苯基-丁酸苄基酯(0.27g,0.56mmol)在1:1THF/MeOH(20ml)中的溶液中加入披氢氧化钯碳(50mg,0.072mmol)。将反应在氢气囊下于室温搅拌2.5h，然后用Celite过滤，用乙酸乙酯和甲醇冲洗。浓缩滤液，得到130mg(59％)(S)-2-{(S)-2-[(茚满-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-4-苯基-丁酸，为类白色固体。1H NMR(DMSO-d6)δ：8.22(t,J＝8.5Hz,2H),6.96–7.40(m,9H),4.47(t,J＝7.2Hz,1H),4.21(dd,J＝8.0,4.3Hz,1H),3.37(br.s.,1H),3.13(d,J＝8.0Hz,4H),2.65-2.72(m,2H),1.89-2.16(m,2H),1.31(dd,J＝6.7,2.4Hz,3H)。
向((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(0.142g,0.37mmol)在二氯甲烷(20ml)中的溶液中加入三氟乙酸(0.66ml)。将反应在室温搅拌2h，然后浓缩。将残余物溶于DMF(20ml)，加入N,N-二异丙基乙胺(0.39ml,2.24mmol)，然后加入(S)-2{(S)-2-[(茚满-2-羰基)-氨基]-丙酰基}-4-苯基-丁酸(0.13g,0.33mmol)和HATU(0.237g,0.62mmol)。将浅棕色反应混合物在室温搅拌24h，用水猝灭。通过过滤收集得到的沉淀物，用石油醚冲洗，在高度真空下干燥，得到120mg(55％)茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-3-苯基-丙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为类白色固体。LC/MS：(M+H)＝661。
向茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-3-苯基-丙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺(0.12g,0.18mmol)中的溶液中加入戴斯-马丁过碘烷(0.116mg,0.27mmol)。在几分钟内已经形成浓稠的白色沉淀物。将浆液在室温搅拌2.5h，然后加入饱和碳酸氢钠(4ml)和10％Na2S2O3水溶液(4ml)。将双相混合物剧烈搅拌15min，然后分离各层，用二氯甲烷(3x)萃取水相。用硫酸镁干燥合并的有机相，浓缩。将粗残余物与乙醚/二氯甲烷/己烷一起研磨，得到茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-3-苯基-丙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺47mg(39％)，为类白色固体。LC/MS：(M+H)＝659；1H NMR(DMSO-d6)δ：9.23(t,J＝6.4Hz,1H),8.34(d,J＝6.8Hz,1H),8.16(d,J＝7.3Hz,1H),7.94(d,J＝8.0Hz,1H),7.01-7.36(m,19H),5.11-5.35(m,1H),4.23-4.44(m,4H),3.21-3.32(m,2H),3.12(dd,J＝14.1,4.5Hz,1H),3.04(dd,J＝8.3,2.5Hz,4H),2.86(dd,J＝13.9,8.9Hz,1H),1.70-1.99(m,2H),1.21(d,J＝7.0Hz,3H)。
实施例43
茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-苯基-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺
在0℃向(S)-2-叔丁氧基羰基氨基-苯基丙酸(1.5g,5.65mmol)在二氯甲烷(75ml)中的溶液中加入DMAP(100mg,0.82mmol)和三乙胺(1.67ml,12.0mmol)。然后加入氯甲酸苄基酯(0.97ml,6.44mmol)在二氯甲烷(10ml)中的溶液。将反应混合物在0℃搅拌3h，然后在室温搅拌1h。然后用饱和碳酸氢钠猝灭混合物，用二氯甲烷(3x)萃取。用水(3x)和盐水洗涤合并的萃取物，然后用硫酸镁干燥。浓缩有机相，通过硅胶色谱法(10％－20％EtOAc/己烷)纯化残余物，得到1.57g(78％)(S)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-苯基-丙酸苄基酯。1H NMR(DMSO-d6)δ：7.12-7.47(m,10H),5.10(s,2H),4.17-4.34(m,1H),2.82-3.10(m,2H),1.32(s,9H).
向(S)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-苯基-丙酸苄基酯(1.5g,4.22mmol)在二氯甲烷(30ml)中的溶液中加入三氟乙酸(9.75ml)。将反应混合物在室温搅拌2.5h，然后浓缩。将残余物溶于DMF(20ml)，加入N,N-二异丙基乙胺(5.6ml,32.0mmol)，然后加入Boc-L-丙氨酸(799mg,4.22mmol)和HATU(1.77g,4.64mmol)。将黄色反应混合物在室温搅拌2.5h，然后用水猝灭，用EtOAc(3x)萃取。用水(3x)和盐水洗涤合并的萃取物，然后用硫酸镁干燥。通过硅胶色谱法(10％－20％EtOAc/己烷)纯化残余物，得到1.6g(89％)(S)-2-((S)-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-3-苯基-丙酸苄基酯。1H NMR(DMSO-d6)δ：8.18(d,J＝7.5Hz,1H),7.11-7.42(m,10H),6.81(d,J＝7.8Hz,1H),5.06(d,J＝4.5Hz,2H),4.53(q,J＝7.2Hz,1H),2.87-3.08(m,2H),1.36(s,9H),1.11(d,J＝7.0Hz,3H).
向(S)-2-((S)-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-3-苯基-丙酸苄基酯(0.83g,1.95mmol)在二氯甲烷(30ml)中的溶液中加入三氟乙酸(3.75ml)。将反应在室温搅拌2.5小时，然后浓缩。将残余物溶于DMF(20ml)，加入N,N-二异丙基乙胺(1.36ml,7.78mmol)，然后加入茚满-2-甲酸(0.32g,1.97mmol)和HATU(0.81g,2.14mmol)。将棕色反应混合物在室温搅拌24h，然后用水猝灭，用EtOAc(3x)萃取。用水(3x)和盐水洗涤合并的萃取物，然后用硫酸镁干燥，浓缩。使用硅胶色谱法(10％－20％乙酸乙酯/己烷)纯化粗残余物，得到220mg(24％)(S)-2{(S)-2-[(茚满2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-3-苯基-丙酸苄基酯，为白色固体。LC/MS：(M+H)＝471。
向(S)-2{(S)-2-[(茚满-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-3-苯基-丙酸苄基酯(0.22g,0.47mmol)在1:1THF/MeOH(20ml)中的溶液中加入披氢氧化钯碳(50mg,.072mmol)。将反应在氢气囊下于室温搅拌2.5h，然后用Celite过滤，用乙酸乙酯和甲醇冲洗。浓缩滤液，得到170mg(95％)(S)-2-{(S)-2-[(茚满-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-3-苯基-丙酸，为类白色固体。LC/MS：(M+H)＝381。
向((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(0.92g,0.50mmol)在二氯甲烷(20ml)中的溶液中加入三氟乙酸(0.9ml)。将反应混合物在室温搅拌2h，然后浓缩。将残余物溶于DMF(20ml)，加入N,N-二异丙基乙胺(0.53ml,2.24mmol)，然后加入(S)-2-{(S)-2-[(茚满-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-3-苯基-丙酸(0.17g,0.45mmol)和HATU(0.187g,0.492mmol)。将浅棕色反应混合物在室温搅拌24h，用水猝灭。通过过滤收集得到的白色沉淀物，用石油醚冲洗，在高度真空下干燥，得到110mg(38％)茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-苯基-丙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为类白色固体。LC/MS：(M+H)＝647。
向茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-苯基-丙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺(0.110g,0.170mmol)中的溶液中加入戴斯-马丁过碘烷(0.108g,0.272mmol)。在几分钟内已经形成浓稠的白色沉淀物。将浆液在室温搅拌2.5h，然后加入饱和碳酸氢钠(4ml)和10％Na2S2O3水溶液(4ml)。将双相混合物剧烈搅拌15min，然后分离各层，用二氯甲烷(3x)萃取水相。用硫酸镁干燥合并的有机相，浓缩。将粗残余物与乙醚/二氯甲烷/己烷一起研磨，得到52mg(47％)茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-苯基-丙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为类白色固体。LC/MS：(M+H)＝645；1H NMR(DMSO-d6)δ：9.24(t,J＝6.1Hz,1H),8.41(d,J＝6.8Hz,1H),8.03(d,J＝7.3Hz,1H),7.87(d,J＝8.3Hz,1H),7.07-7.37(m,19H),5.19-5.38(m,1H),4.46-4.64(m,1H),4.32(d,J＝6.0Hz,2H),4.25(t,J＝7.2Hz,1H),3.08-3.24(m,3H),2.94-3.06(m,4H),2.88(dd,J＝13.8,8.5Hz,1H),2.75(dd,J＝13.8,9.8Hz,1H),1.12(d,J＝7.0Hz,3H)。
实施例44
1-甲基-1H-吲哚-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-苯基-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺
向(S)-2-((S)-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-3-苯基-丙酸苄基酯(1.2g,2.81mmol)在二氯甲烷(40ml)中的溶液中加入三氟乙酸(4.34ml)。将反应在室温搅拌2.0h，然后浓缩。将残余物溶于DMF(20ml)，加入N,N-二异丙基乙胺(0.96ml,5.51mmol)，然后加入1-甲基-1H-吲哚-2-甲酸(0.161g,0.919mmol)和HATU(0.384g,1.01mmol)。将棕色反应混合物在室温搅拌24h，然后用水猝灭，用EtOAc(3x)萃取。用硫酸镁干燥合并的萃取物，浓缩。用水洗涤残余物，与石油醚一起研磨，得到330mg(74％)(S)-2-{(S)-2-[(1-甲基-1H-吲哚-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-3-苯基-丙酸苄基酯，为白色固体。LC/MS：(M+H)＝445。
向(S)-2-{(S)-2-[(1-甲基-1H-吲哚-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-3-苯基-丙酸苄基酯(0.32g,0.662mmol)在1:1THF/MeOH(10ml)中的溶液中加入披氢氧化钯碳(60.4mg,0.09mmol)。将反应在氢气囊下于室温搅拌2.5h，然后用Celite过滤，用乙酸乙酯和甲醇冲洗。浓缩滤液，得到260mg(99％)(S)-2-{(S)-2-[(1-甲基-1H-吲哚-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-3-苯基-丙酸，为类白色固体。LC/MS：(M+H)＝394。
向((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(0.188g,0.489mmol)在二氯甲烷(20ml)中的溶液中加入三氟乙酸(0.90ml)。将反应混合物在室温搅拌2h，然后浓缩。将残余物溶于DMF(20ml)，加入N,N-二异丙基乙胺(0.46ml,2.64mmol)，然后加入(S)-2-{(S)-2-[(1-甲基-1H-吲哚-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-3-苯基-丙酸(0.26g,.66mmol)、1-羟基苯并三唑(89.3mg,0.66mmol)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.177g,0.93mmol)。将反应混合物在室温搅拌72h，然后浓缩，与水和石油醚一起研磨。通过过滤收集得到的沉淀物，在高度真空下干燥，得到300mg(68％)1-甲基-1H-吲哚-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-苯基-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为白色固体。LC/MS：(M+H)＝659。
向1-甲基-1H-吲哚-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-苯基-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺(0.153g,0.232mmol)中的溶液中加入戴斯-马丁过碘烷(147mg,0.348mmol)。在几分钟内已经形成浓稠的白色沉淀物。将浆液在室温搅拌2.5h，然后加入饱和碳酸氢钠(4ml)和10％Na2S2O3水溶液(4ml)。将双相混合物剧烈搅拌15min，然后分离各层，用二氯甲烷(2x)萃取水相。用硫酸镁干燥合并的有机相，浓缩，得到13mg(8％)1-甲基-1H-吲哚-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-苯基-乙基氨基甲酰基]-乙基}酰胺，为白色固体。LC/MS：(M+H)＝658；1H NMR(DMSO-d6)δ：8.47(d,J＝7.5Hz,1H),7.92(d,J＝8.3Hz,1H),7.65(d,J＝8.0Hz,1H),7.52(d,J＝8.3Hz,1H),6.99-7.38(m,20H),5.27(dd,J＝8.4,4.9Hz,1H),4.53-4.65(m,1H),4.37-4.44(m,1H),4.29-4.35(m,2H),3.91(s,3H),3.13(dd,J＝13.9,4.6Hz,1H),2.99(dd,J＝13.9,4.4Hz,1H),2.72-2.91(m,2H),1.23(d,J＝7.0Hz,3H)。
实施例45
1-甲基-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺
在50ml 2-颈圆底烧瓶中，将1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-甲酸甲酯(300mg,1.7mmol)溶于6.0ml DMF。将反应混合物冷却至0℃。在0℃加入氢化钠在矿物油中的60％分散物(85mg,2.13mmol)。将反应混合物在0℃搅拌30min。然后加入碘甲烷(295mg,0.13ml,2.08mmol)，将反应混合物在0℃搅拌1h。用水猝灭反应混合物，用60ml乙醚/EtOAc(1:1)和5ml水萃取。用60ml乙醚/EtOAc(1:1)萃取水层。将有机层用5ml水洗涤2次，用5ml盐水洗涤1次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。用25g硅胶和EtOAc/己烷(梯度0-40％EtOAc)对残余物进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到206mg(64％)1-甲基-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-甲酸甲酯，为类白色固体。
在25ml圆底烧瓶中，将1-甲基-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-甲酸甲酯(200mg,1.05mmol)溶于2.2ml THF和2.2ml甲醇。加入氢氧化锂(113mg,4.73mmol)，然后加入2.2ml水。将反应混合物在室温搅拌过夜。用1MHCl将水层酸化至pH＝6，蒸发有机溶剂。用30ml EtOAc将残余物萃取4次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。将残余物(～30mg类白色固体)与水层再次合并，浓缩，然后置于高度真空下，得到236mg(64％；纯度＝50％)1-甲基-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-甲酸，为类白色蜡状固体，将其不经进一步纯化即使用(分离的产物含有作为杂质的LiCl)。
在25ml圆底烧瓶中，将(S)-2-((S)-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸苄基酯(400mg,0.70mmol；纯度＝80％)溶于6.0ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(1.3ml,16.9mmol)。将反应混合物在室温搅拌3h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下30min。将残余物(类白色固体)和1-甲基-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-甲酸(229mg,0.65mmol；纯度＝50％)溶于4.0ml DMF。将淡黄色溶液冷却至0℃。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(503mg,0.68ml,3.89mmol)，然后加入HATU(272mg,0.72mmol)。加入完成后，除去冰浴，将黄色溶液在室温搅拌过夜。用5ml水猝灭反应混合物，用60ml乙醚/EtOAc(1:1)萃取2次。将有机层用5ml水洗涤2次，用5ml盐水洗涤1次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。用25g硅胶和EtOAc/己烷(梯度0-100％EtOAc)对残余物进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到264mg(79％)(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-{(S)-2-[(1-甲基-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-丙酸苄基酯，为类白色固体。
在50ml圆底烧瓶中，将(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-{(S)-2-[(1-甲基-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-丙酸苄基酯(262mg,0.51mmol)溶于5.2ml甲醇和2.6ml THF。将烧瓶交替抽真空、充氩气3次。小心地加入20％披氢氧化钯碳(湿的,47mg,0.07mmol)。给烧瓶抽真空、充氩气、抽真空、充氢气。将反应混合物在氢气气氛(气囊)下在室温搅拌2h(沉淀出产物)。用甲醇和乙酸乙酯稀释反应混合物，加热以溶解期望的产物。过滤该混悬液，用温热的甲醇/乙酸乙酯冲洗。浓缩滤液，得到199mg(92％)(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-{(S)-2-[(1-甲基-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-丙酸，为类白色固体。
在10ml圆底烧瓶中，将((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(125mg,0.33mmol)溶于3.0ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(0.60ml,7.79mmol)。将反应混合物在室温搅拌3h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下1h。残余物和(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-{(S)-2-[(1-甲基-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-丙酸(125mg,0.29mmol)溶于2.0ml DMF，冷却至0℃。在0°滴加N,N-二异丙基乙胺(222mg,0.30ml,1.72mmol)，然后加入HATU(112mg,0.29mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌过夜。用水稀释反应混合物(形成沉淀物)。过滤该混悬液，用水和少量石油醚冲洗。使用旋转蒸发器干燥得到的淡棕色固体，然后置于高度真空下，得到144mg(71％)1-甲基-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为差向异构体混合物。
在50ml圆底烧瓶中，将1-甲基-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺(136mg,0.20mmol)部分溶于8.0ml二氯甲烷，加入戴斯-马丁过碘烷(125mg,0.30mmol)。将反应混合物在室温搅拌2h。用3.5ml饱和NaHCO3-溶液和3.5ml 10％Na2S2O3-溶液猝灭反应混合物，在室温剧烈搅拌30min。然后用30ml二氯甲烷萃取双相混合物。用10ml饱和NaHCO3-溶液洗涤有机层。将水层用30ml二氯甲烷萃取2次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。将残余物与二氯甲烷/乙醚/乙酸乙酯一起研磨，得到74mg(49％；纯度＝90％)1-甲基-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为黄色固体。LC/MS：(M-H)-＝687。
实施例46
(S)-N-苄基-3-{(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-[(S)-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酰基氨基}-2-氧代-4-苯基-丁酰胺
将(S)-3-氨基-N-苄基-2-羟基-4-苯基-丁酰胺三氟乙酸盐(100mg,0.25mmol)在DMF(2.5ml)中的溶液冷却至0℃，搅拌5min。滴加N,N-二异丙基乙胺(0.24ml,1.37mmol)，然后加入(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-[(S)-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酸(90mg,0.23mmol)和HATU(96mg,0.25mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌18h，然后用水稀释，用EtOAc萃取。用盐水洗涤有机物，用MgSO4干燥，浓缩。通过色谱法(硅胶，梯度：0-10％MeOH/二氯甲烷)纯化残余物，得到140mg(93％)(S)-N-苄基-2-羟基-3-{(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-[(S)-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酰基氨基}-4-苯基-丁酰胺，为淡黄色粉末。
向(S)-N-苄基-2-羟基-3-{(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-[(S)-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酰基氨基}-4-苯基-丁酰胺(140mg,0.21mmol)在二氯甲烷(10ml)中的溶液中加入戴斯-马丁过碘烷(99mg,0.23mmol)。将反应混合物在室温搅拌4h，然后用～4ml饱和NaHCO3溶液和～4ml10％Na2S2O3溶液猝灭。将双相混合物剧烈搅拌30min，然后用二氯甲烷萃取。用饱和NaHCO3溶液洗涤有机物，干燥(Na2SO4)，浓缩。通过色谱法(硅胶，梯度：0-10％MeOH/二氯甲烷)纯化残余物，得到43mg(27％)(S)-N-苄基-3-{(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-[(S)-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酰基氨基}-2-氧代-4-苯基-丁酰胺，为淡黄色粉末。LC/MS：(M+H)+＝658。
实施例47
5-甲基-异唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺
将(S)-3-氨基-N-苄基-2-羟基-4-苯基-丁酰胺三氟乙酸盐(131mg,0.33mmol)在DMF(2ml)中的溶液冷却至0℃，搅拌5min。滴加N,N-二异丙基乙胺(0.31ml,1.8mmol)，然后加入(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-{(S)-2-[(5-甲基-异唑-3-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-丙酸(115mg,0.30mmol)和HATU(125mg,0.33mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌18h，然后用水稀释，用EtOAc萃取。用盐水洗涤有机层，干燥(MgSO4)，浓缩。通过色谱法(硅胶，梯度：0-10％MeOH/二氯甲烷)纯化残余物，得到163mg(83％)5-甲基-异唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为淡黄色粉末。
在0℃向5-甲基-异唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺(160mg,0.25mmol)在二氯甲烷(8ml)中的溶液中加入戴斯-马丁过碘烷(115mg,0.27mmol)。将反应混合物在室温搅拌4h，然后用～4ml饱和NaHCO3溶液和～4ml 10％Na2S2O3溶液猝灭。将双相混合物剧烈搅拌30min，然后用二氯甲烷萃取。用饱和NaHCO3溶液洗涤有机物，干燥(Na2SO4)，浓缩。通过色谱法(硅胶，梯度：0-10％MeOH/二氯甲烷)纯化残余物，得到15mg(9％)5-甲基-异唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为淡黄色粉末。LC/MS：(M+H)+＝649
实施例48
3-甲基-1H-茚-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺
向微波小瓶中加入(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-{(S)-2-[(3-甲基-1H-茚-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-丙酸叔丁酯(290mg,0.60mmol)和1,1,1,3,3,3-六氟-2-丙醇(2.75ml,26.1mmol)。给小瓶充氮气，密封。将无色溶液在微波照射下于120℃加热4h。
浓缩反应混合物，得到(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-{(S)-2-[(3-甲基-1H-茚-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-丙酸，为类白色泡沫，将其不经进一步纯化即使用。
将(S)-3-氨基-N-苄基-2-羟基-4-苯基-丁酰胺三氟乙酸盐(147mg,0.37mmol)在DMF(2ml)中的溶液冷却至0℃，搅拌5min。滴加N,N-二异丙基乙胺(0.35ml,2.0mmol)，然后加入(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-{(S)-2-[(3-甲基-1H-茚-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-丙酸(145mg,0.34mmol)在DMF(1ml)和HATU(141mg,0.37mmol)中的溶液。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌18h，然后用水稀释，用EtOAc萃取。用盐水洗涤有机物，干燥(MgSO4)，浓缩。通过色谱法(硅胶，梯度：0-10％MeOH/二氯甲烷)纯化残余物，得到178mg(76％)3-甲基-1H-茚-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为类白色粉末。
在0℃向3-甲基-1H-茚-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺(73mg,0.105mmol)在二氯甲烷(10ml)中的溶液中加入戴斯-马丁过碘烷(49mg,0.115mmol)。将反应混合物在0℃搅拌2h，然后在室温搅拌4h。用饱和NaHCO3溶液和10％Na2S2O3溶液猝灭反应。将双相混合物剧烈搅拌30min，然后用二氯甲烷萃取。用饱和NaHCO3溶液洗涤有机物，干燥(Na2SO4)，浓缩。通过色谱法(硅胶，梯度：1-5％MeOH/二氯甲烷)纯化残余物，得到7mg(9％)3-甲基-1H-茚-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为类白色粉末。LC/MS：(M+H)+＝696。
实施例49
咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺
向(S)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸甲酯(1.01g,3.26mmol)在二氯甲烷(10ml)中的溶液中加入TFA(5.03ml,65.3mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h，然后真空除去溶剂。用50％Et2O-石油醚混合物处理残余物，过滤得到的沉淀物，干燥，得到1.01g(96％)(S)-2-氨基-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸甲酯三氟乙酸盐，为白色粉末。
在0℃向(S)-2-氨基-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸甲酯三氟乙酸盐(1.01g,3.12mmol)在DMF(10ml)中的溶液中滴加N,N-二异丙基乙胺(5.46ml,31.2mmol)。将反应混合物搅拌5min，然后加入(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)丙酸(591mg,3.12mmol)，然后加入HATU(1.31g,3.44mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌18h，然后用水猝灭，用EtOAc萃取。用盐水洗涤有机物，干燥(MgSO4)，浓缩。通过色谱法(硅胶，梯度：10-50％EtOAc/己烷)纯化残余物，得到1.07g(90％)(S)-2-((S)-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸甲酯，为淡黄色泡沫。
向(S)-2-((S)-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸甲酯(0.65g,1.71mmol)在二氯甲烷(10ml)中的溶液中加入TFA(3.3ml,42.7mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h，然后真空除去溶剂。用50％Et2O-石油醚混合物处理残余物，过滤得到的沉淀物，用乙醚洗涤，干燥，得到0.66g(98％)(S)-2-((S)-2-氨基-丙酰基氨基)-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸甲酯三氟乙酸盐，为类白色粉末。
将(S)-2-((S)-2-氨基-丙酰基氨基)-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸甲酯三氟乙酸盐(250mg,0.63mmol)在DMF(4ml)中的溶液冷却至0℃，搅拌5min。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺，然后加入咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酸(113mg,0.70mmol)在DMF(1ml)和HATU(265mg,0.70mmol)中的溶液。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌18h，然后用水猝灭，用EtOAc萃取。用盐水洗涤有机物，干燥(MgSO4)，浓缩。通过色谱法(硅胶，梯度：2-10％MeOH/二氯甲烷)纯化残余物，得到177mg(66％)(S)-2-{(S)-2-[(咪唑并[1,2-a]吡啶-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸甲酯，为类白色泡沫。
向(S)-2-{(S)-2-[(咪唑并[1,2-a]吡啶-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸甲酯(177mg,0.42mmol)在1,2-二氯乙烷(10ml)中的溶液中加入氢氧化三甲基锡(302mg,1.67mmol)。将反应混合物在80℃加热4h，然后减压浓缩。将残余物溶于二氯甲烷，用1M HCl洗涤，然后用MgSO4干燥，浓缩，得到160mg(94％)(S)-2-{(S)-2-[(咪唑并[1,2-a]吡啶-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸，为类白色粉末。
在0℃向(S)-3-氨基-N-苄基-2-羟基-4-苯基-丁酰胺三氟乙酸盐(161mg,0.40mmol)在DMF(2.5ml)中的混合物中滴加N,N-二异丙基乙胺(0.67ml,3.85mmol)。然后加入(S)-2-{(S)-2-[(咪唑并[1,2-a]吡啶-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸(158mg,0.39mmol)，然后加入HATU(161mg,0.42mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌18h，然后通过加入冰猝灭。通过过滤收集得到的固体，用冷水和Et2O洗涤，干燥。通过色谱法(硅胶，梯度：1-15％MeOH/二氯甲烷)纯化粗固体，得到131mg(50％)咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为类白色粉末。
向咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺(131mg,0.19mmol)在二氯甲烷(10ml)中的溶液中加入戴斯-马丁过碘烷(123mg,0.29mmol)。将浑浊的混合物在室温搅拌4h，然后用10％Na2S2O3水溶液和饱和NaHCO3猝灭。将双相混合物剧烈搅拌30min,，然后用水稀释，用二氯甲烷萃取。用NaHCO3洗涤有机物，用MgSO4干燥，浓缩。将残余物与Et2O一起研磨，得到96mg(74％)咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为淡黄色粉末。LC/MS：(M+H)+＝675。
实施例50
{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-吡啶-2-基-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯
向(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(吡啶-2-基)丙酸(705mg,2.65mmol)在MeOH(15ml)中的溶液中滴加三甲基硅烷基重氮甲烷(2.0M的己烷溶液,7.9ml,15.9mmol)。将反应混合物在室温搅拌30min，此时持续为浅黄色。用几滴乙酸猝灭反应，此时溶液变成无色。浓缩该混合物，得到740mg(S)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-吡啶-2-基-丙酸甲酯，为棕色油状物，将其不经进一步纯化即使用。
向(S)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-吡啶-2-基-丙酸甲酯(740mg,2.65mmol)在二氯甲烷(15ml)中的溶液中加入TFA(3.06ml,39.7mmol)。将反应混合物在室温搅拌2h，然后浓缩，用己烷处理，在高度真空下干燥。将残余物溶于DMF(5ml)，冷却至0℃。加入N,N-二异丙基乙胺(4.6ml,26.5mmol)，将混合物搅拌5min。然后加入(S)-2-(苄氧基羰基氨基)丙酸(591mg,2.65mmol)，然后加入HATU(1.11g,2.91mmol)。将反应混合物温热至室温，搅拌过夜，然后用冷水猝灭。通过过滤收集得到的沉淀物，干燥，得到1.01g(99％)(S)-2-((S)-2-苄氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-3-吡啶-2-基-丙酸甲酯，为类白色粉末。
向(S)-2-((S)-2-苄氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-3-吡啶-2-基-丙酸甲酯(1.01g,2.62mmol)在1,2-二氯乙烷(20ml)中的溶液中加入氢氧化三甲基锡(1.9g,10.5mmol)。将浑浊的混合物在85℃加热4h，然后真空除去溶剂。将残余物溶于EtOAc，用1M HCl洗涤，然后用MgSO4干燥，浓缩，得到630mg(65％)(S)-2-((S)-2-苄氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-3-吡啶-2-基-丙酸，为淡棕色油状物。
向((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(214mg,0.56mmol)在二氯甲烷(10ml)中的溶液中加入TFA(0.975ml,12.7mmol)。将反应混合物在室温搅拌2h，然后真空除去溶剂。在高度真空下干燥残余物，然后溶于DMF(5ml)。向该溶液中加入(S)-2-((S)-2-苄氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-3-吡啶-2-基-丙酸(188mg,0.51mmol)、HATU(212mg,0.56mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.88ml,5.06mmol)。将反应混合物在室温搅拌4h，然后用水猝灭，用EtOAc萃取。用MgSO4干燥有机物，浓缩。通过色谱法(硅胶，梯度：0-5％MeOH/二氯甲烷)纯化残余物，得到198mg(61％){(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-吡啶-2-基-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯，为淡黄色油状物。
向{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-吡啶-2-基-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯(198mg,0.31mmol)在二氯甲烷(10ml)中的溶液中加入戴斯-马丁过碘烷(145mg,0.34mmol)。将浑浊的混合物在室温搅拌4h，然后用10％Na2S2O3水溶液和饱和NaHCO3猝灭。将双相混合物剧烈搅拌30min,，然后用水稀释，用二氯甲烷萃取。用饱和NaHCO3洗涤有机层，用MgSO4干燥，浓缩。通过色谱法(硅胶，梯度：0％－5％MeOH/二氯甲烷)纯化残余物，得到27mg(14％){(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-吡啶-2-基-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯，为淡黄色粉末。LC/MS：(M+H)+＝636。
实施例51
{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-氯-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯
向(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(4-氯苯基)丙酸(2.5g,8.34mmol)在MeOH(40ml)中的溶液中滴加三甲基硅烷基重氮甲烷(2.0M的己烷溶液,25.0ml,50.0mmol)。将反应混合物在室温搅拌30min。此时持续为浅黄色。用几滴乙酸猝灭反应，此时溶液变成无色。浓缩混合物，得到2.62g(S)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-(4-氯-苯基)-丙酸甲酯，为淡黄色固体，将其不经进一步纯化即使用。
向(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(4-氯苯基)丙酸甲酯(2.62g,8.35mmol)在二氯甲烷(50ml)中的溶液中加入TFA(9.6ml,125mmol)。将反应混合物在室温搅拌2h，然后浓缩，用己烷处理，在高度真空下干燥。将残余物溶于DMF(20ml)，冷却至0℃。加入N,N-二异丙基乙胺(14.6ml,83.3mmol)，将混合物搅拌5min。然后加入(S)-2-(苄氧基羰基氨基)丙酸(1.86g,8.33mmol)，然后加入HATU(3.49g,9.17mmol)。将反应混合物温热至室温，搅拌过夜，然后用水猝灭，用EtOAc萃取。用MgSO4干燥有机物，浓缩。通过色谱法(硅胶，梯度：10-75％EtOAc/己烷)纯化残余物，得到1.78g(51％)(S)-2-((S)-2-苄氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-3-(4-氯-苯基)-丙酸甲酯，为白色粉末。
向(S)-2-((S)-2-苄氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-3-(4-氯-苯基)-丙酸甲酯(550mg,1.31mmol)在1,2-二氯乙烷(10ml)中的溶液中加入氢氧化三甲基锡(950mg,5.25mmol)。将浑浊的混合物在85℃加热4h，然后真空除去溶剂。将残余物溶于EtOAc，用1M HCl洗涤，然后用MgSO4干燥，浓缩，得到395mg(74％)(S)-2-((S)-2-苄氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-3-(4-氯-苯基)-丙酸，为白色粉末。
在0℃向(S)-3-氨基-N-苄基-2-羟基-4-苯基-丁酰胺三氟乙酸盐(102mg,0.26mmol)在DMF(2ml)中的溶液中加入N,N-二异丙基乙胺(0.22ml,1.28mmol)。将反应搅拌5min，然后加入(S)-2-((S)-2-苄氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-3-(4-氯-苯基)-丙酸(104mg,0.26mmol)和HATU(107mg,0.28mmol)。除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌4h，然后用水猝灭。过滤得到的沉淀物，用水洗涤，干燥。将粗固体与Et2O一起研磨，得到128mg(74％){(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-(4-氯-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯，为类白色粉末。
向{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-(4-氯-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯(128mg,0.19mmol)在二氯甲烷(5ml)中的溶液中加入戴斯-马丁过碘烷(89mg,0.21mmol)。将浑浊的混合物在室温搅拌6h，然后用10％Na2S2O3水溶液和饱和NaHCO3猝灭。将双相混合物剧烈搅拌30min，然后用水稀释，用二氯甲烷萃取。用饱和NaHCO3洗涤有机相，然后用MgSO4干燥，浓缩。将残余物与Et2O一起研磨，得到82mg(64％){(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-氯-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯，为白色粉末。LC/MS：(M+H)+＝670。
实施例52
1,3-二氢-异吲哚-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-苯基-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺
在0℃向三光气(2.49g,8.39mmol)在二氯甲烷(10ml)中的溶液中加入吡啶(0.68ml,8.39mmol)。然后历经10min的时间加入异吲哚啉(1.0g,8.39mmol)在5ml二氯甲烷中的溶液。将反应混合物温热至室温，搅拌2h，然后通过小心地加入1N HCl(10ml)猝灭。分离有机相，用饱和NaHCO3溶液洗涤，然后用Na2SO4干燥，浓缩。通过色谱法(硅胶，梯度：0-25％EtOAc/己烷)纯化残余物，得到420mg(28％)1,3-二氢-异吲哚-2-甲酰氯，为类白色粉末。
向(S)-2-((S)-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-3-苯基-丙酸苄基酯(0.61g,1.43mmol)和披氢氧化钯碳(26mg,0.19mmol)的混合物中小心地加入MeOH(5ml)。将反应混合物使用气囊在氢气下(1atm)搅拌2h。通过Celite床过滤反应，用MeOH洗涤，浓缩，得到480mg(S)-2-((S)-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-3-苯基-丙酸，为白色泡沫。
向((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(454mg,1.18mmol)在二氯甲烷(10ml)中的溶液中加入TFA(1.8ml,23.6mmol)。将反应混合物在室温搅拌2h，然后浓缩，在高度真空下干燥。将残余物溶于DMF(5ml)，加入(S)-2-((S)-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-3-苯基-丙酸(437mg,1.3mmol)、HATU(494mg,1.3mmol)和N,N-二异丙基乙胺(1.03ml,5.9mmol)。将反应混合物在室温搅拌2h，然后用水猝灭。过滤得到的沉淀物，用水洗涤，然后在高度真空下干燥。将粗固体与Et2O一起研磨，得到602mg(85％){(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-苯基-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸叔丁酯，为类白色粉末。
在室温下向{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-苯基-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸叔丁酯(601mg,1.0mmol)在二氯甲烷(25ml)中的溶液中加入戴斯-马丁过碘烷(465mg,1.1mmol)。将浑浊的混合物在室温搅拌3h，然后用10％Na2S2O3水溶液和饱和NaHCO3猝灭。将双相混合物剧烈搅拌30min，然后用水稀释，用二氯甲烷萃取。用饱和NaHCO3洗涤有机层，用MgSO4干燥，然后浓缩。通过色谱法(硅胶，梯度：0％－5％MeOH/二氯甲烷)纯化残余物，得到369mg(62％){(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-苯基-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸叔丁酯，为类白色粉末。
向{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-苯基-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸叔丁酯(114mg,0.19mmol)在二氯甲烷(5ml)中的溶液中加入TFA(0.29ml,3.8mmol)。将反应混合物在室温搅拌2h，然后浓缩，在高度真空下干燥。将残余物溶于二氯甲烷(5ml)，加入N,N-二异丙基乙胺(0.73ml,4.18mmol)，然后加入1,3-二氢-异吲哚-2-甲酰氯(35mg,0.19mmol)。将反应混合物在室温搅拌2h，然后用水猝灭，用二氯甲烷萃取。用MgSO4干燥有机相，浓缩。通过色谱法(硅胶，梯度：0-5％MeOH/二氯甲烷)纯化残余物，得到27mg(22％)1,3-二氢-异吲哚-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-苯基-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为白色粉末。LC/MS：(M+H)+＝646。
实施例53
2,5-二甲基-2H-吡唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-苯基-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺
向{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-苯基-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸叔丁酯(252mg,0.42mmol)在二氯甲烷(10ml)中的溶液中加入TFA(0.65ml,8.39mmol)。将反应混合物在室温搅拌2h，然后浓缩，在高度真空下干燥。将残余物与Et2O一起研磨，得到247mg(95％)(S)-3-[(S)-2-((S)-2-氨基-丙酰基氨基)-3-苯基-丙酰基氨基]-N-苄基-2-氧代-4-苯基-丁酰胺三氟乙酸盐，为类白色粉末。
向(S)-3-[(S)-2-((S)-2-氨基-丙酰基氨基)-3-苯基-丙酰基氨基]-N-苄基-2-氧代-4-苯基-丁酰胺三氟乙酸盐(100mg,0.16mmol)在DMF(2ml)中的溶液中加入1,3-二甲基-1H-吡唑-5-甲酸(24mg,0.17mmol)、HATU(68mg,0.18mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.28ml,1.63mmol)。将反应混合物在室温搅拌1h，然后用冷水猝灭。过滤得到的沉淀物，用水和Et2O洗涤，干燥，得到76mg(75％)2,5-二甲基-2H-吡唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-苯基-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为白色粉末。LC/MS：(M+H)+＝623。
实施例54
2-乙基-2H-吡唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-苯基-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺
向(S)-3-[(S)-2-((S)-2-氨基-丙酰基氨基)-3-苯基-丙酰基氨基]-N-苄基-2-氧代-4-苯基-丁酰胺三氟乙酸盐(60mg,0.098mmol)在DMF(2ml)中的溶液中加入1-乙基-1H-吡唑-5-甲酸(21mg,0.15mmol)、HATU(41mg,0.107mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.085ml,0.49mmol)。将反应混合物在室温搅拌30min，然后用冷水猝灭。过滤得到的沉淀物，用水洗涤，然后干燥。将粗固体与Et2O一起研磨，然后通过色谱法(硅胶，梯度：0-10％MeOH/二氯甲烷)纯化，得到15mg(24％)2-乙基-2H-吡唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-苯基-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为淡黄色粉末。LC/MS：(M+H)+＝623。
实施例55
2-甲基-5-三氟甲基-2H-吡唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-苯基-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺
向(S)-3-[(S)-2-((S)-2-氨基-丙酰基氨基)-3-苯基-丙酰基氨基]-N-苄基-2-氧代-4-苯基-丁酰胺三氟乙酸盐(60mg,0.098mmol)在DMF(2ml)中的溶液中加入1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-甲酸(20mg,0.103mmol)、HATU(41mg,0.107mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.085ml,0.49mmol)。将反应混合物在室温搅拌30min，然后用冷水猝灭。过滤得到的沉淀物，用水和Et2O洗涤，干燥，得到33mg(49％)2-甲基-5-三氟甲基-2H-吡唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-苯基-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为淡黄色粉末。LC/MS：(M+H)+＝677。
实施例56
{(S)-1-[1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(四氢-吡喃-4-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯
向((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(200mg,0.52mmol)在二氯甲烷(5ml)中的溶液中加入TFA(0.80ml,10.4mmol)。将反应混合物在室温搅拌2h，然后浓缩，用己烷处理，在高度真空下干燥。将残余物溶于DMF(2ml)，加入2-叔丁氧基羰基氨基-3-(四氢-吡喃-4-基)-丙酸(149mg,0.55mmol)、HATU(218mg,0.57mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.91ml,5.2mmol)。将反应混合物在室温搅拌2h，然后用水猝灭，用EtOAc萃取。用MgSO4干燥有机物，浓缩，得到251mg(89％)[1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-(四氢-吡喃-4-基)-乙基]-氨基甲酸叔丁酯，为差向异构体混合物，将其不经进一步纯化即使用。
向[1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-(四氢-吡喃-4-基)-乙基]-氨基甲酸叔丁酯(270mg,0.50mmol)在二氯甲烷(10ml)中的溶液中加入TFA(0.77ml,10.0mmol)。将反应混合物在室温搅拌2h，然后浓缩，在高度真空下干燥。将残余物溶于DMF(4ml)，加入(S)-2-(苄氧基羰基氨基)丙酸(123mg,0.55mmol)、HATU(209mg,0.55mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.44ml,2.5mmol)。将反应混合物在室温搅拌2h，然后用水猝灭。过滤得到的沉淀物，用水洗涤，干燥。将粗固体与Et2O一起研磨，然后通过色谱法(硅胶，梯度：0-5％MeOH/二氯甲烷)纯化，得到270mg(84％){(S)-1-[1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-(四氢-吡喃-4-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯。
在室温下向{(S)-1-[1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-(四氢-吡喃-4-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯(270mg,0.42mmol)在二氯甲烷(10ml)中的溶液中加入戴斯-马丁过碘烷(195mg,0.46mmol)。将反应混合物在室温搅拌过夜，然后用10％Na2S2O3水溶液和饱和NaHCO3猝灭。将双相混合物剧烈搅拌30min，然后用水稀释，用二氯甲烷萃取。用饱和NaHCO3洗涤有机相，然后用MgSO4干燥，浓缩。通过色谱法(硅胶，梯度：0-5％MeOH/二氯甲烷)纯化残余物，得到80mg(30％){(S)-1-[1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(四氢-吡喃-4-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯，为淡黄色粉末。LC/MS：(M+H)+＝643。
实施例57
{(S)-1-[1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-3,3,3-三氟-丙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯
向(S)-3-氨基-N-苄基-2-羟基-4-苯基-丁酰胺三氟乙酸盐(98mg,0.25mmol)在DMF(1ml)中的溶液中加入(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-4,4,4-三氟丁酸(70mg,0.27mmol)、HATU(103mg,0.27mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.22ml,1.23mmol)。将反应混合物在室温搅拌3h，然后用水猝灭。过滤得到的沉淀物，干燥。将粗固体与Et2O一起研磨，得到91mg(71％)[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-3,3,3-三氟-丙基]-氨基甲酸叔丁酯，为类白色粉末。
向[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-3,3,3-三氟-丙基]-氨基甲酸叔丁酯(85mg,0.16mmol)在二氯甲烷(5ml)中的溶液中加入TFA(0.25ml,3.25mmol)。将反应混合物在室温搅拌16h，然后浓缩，在高度真空下干燥。将残余物溶于DMF(1ml)，加入(S)-2-(苄氧基羰基氨基)丙酸(40mg,0.18mmol)、HATU(68mg,0.18mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.14ml,0.81mmol)。将反应混合物在室温搅拌1h，然后用水猝灭。过滤得到的沉淀物，用水洗涤，干燥。将粗固体与Et2O一起研磨，得到95mg(93％){(S)-1-[1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-3,3,3-三氟-丙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯，为类白色粉末。
在室温下向{(S)-1-[1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-3,3,3-三氟-丙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯(82mg,0.13mmol)在二氯甲烷(5ml)中的溶液中加入戴斯-马丁过碘烷(61mg,0.14mmol)。将反应混合物在室温搅拌过夜，然后用10％Na2S2O3水溶液和饱和NaHCO3猝灭。将双相混合物剧烈搅拌30min，然后用水稀释，用二氯甲烷萃取。用饱和NaHCO3洗涤有机物，然后用MgSO4干燥，浓缩。将残余物与Et2O一起研磨，得到28mg(34％){(S)-1-[1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-3,3,3-三氟-丙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯，为白色粉末。(M+H)+＝627。
实施例58
{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-吡啶-4-基-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯
向((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(541mg,1.41mmol)在二氯甲烷(5ml)中的溶液中加入TFA(2.17ml,28.1mmol)。将反应混合物在室温搅拌4h，然后浓缩，用己烷处理，在高度真空下干燥。将残余物溶于DMF(2ml)，加入(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(吡啶-4-基)丙酸(375mg,1.41mmol)、HATU(589mg,1.55mmol)和N,N-二异丙基乙胺(2.46ml,14.1mmol)。将反应混合物在室温搅拌16h，然后用水猝灭。过滤得到的沉淀物，用水洗涤，干燥。将粗固体与Et2O一起研磨，得到710mg(95％)[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-吡啶-4-基-乙基]-氨基甲酸叔丁酯，为白色粉末。
向[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-吡啶-4-基-乙基]-氨基甲酸叔丁酯(710mg,1.33mmol)在二氯甲烷(10ml)中的溶液中加入TFA(2.05ml,26.7mmol)。将反应混合物在室温搅拌4h，然后浓缩，用己烷处理，在高度真空下干燥。将残余物溶于DMF(5.0ml)，加入(S)-2-(苄氧基羰基氨基)丙酸(327mg,1.47mmol)、HATU(558mg,1.47mmol)和N,N-二异丙基乙胺(1.16ml,6.67mmol)。将反应混合物在室温搅拌16h，然后用水猝灭。过滤得到的沉淀物，用水洗涤，然后干燥。将粗固体与Et2O一起研磨，得到750mg(88％){(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-吡啶-4-基-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯，为类白色粉末。
在室温下向{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-羟基-乙基氨基甲酰基)-2-吡啶-4-基-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯(400mg,0.63mmol)在二氯甲烷(10ml)中的溶液中加入戴斯-马丁过碘烷(293mg,0.69mmol)。将反应混合物在室温搅拌过夜，然后用10％Na2S2O3水溶液和饱和NaHCO3猝灭。将双相混合物剧烈搅拌30min，然后用水稀释，用二氯甲烷萃取。用饱和NaHCO3洗涤有机物，然后用MgSO4干燥，浓缩。对残余物进行色谱处理(硅胶，梯度：2-10％MeOH/二氯甲烷)，得到49mg(11％){(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-吡啶-4-基-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯，为白色粉末。LC/MS：(M+H)+＝636。
实施例59
茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-(2-苄基氨基乙二酰基-茚满-2-基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺
在50ml圆底烧瓶中，将2-叔丁氧基羰基氨基-茚满-2-甲酸(940mg,3.39mmol)和N,O-二甲基羟基胺盐酸盐(496mg,5.08mmol)溶于9.0mlDMF。加入N,N-二异丙基乙胺(1.26g,1.7ml,9.76mmol)，然后加入HATU(1.42g,3.73mmol)。将黄色溶液在室温搅拌过夜。用10ml水猝灭反应混合物，用70ml乙醚萃取2次，将有机层用10ml水洗涤2次，用10ml盐水洗涤1次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。用40g硅胶和EtOAc/己烷(梯度0-30％EtOAc)对残余物进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到1.03g(95％)[2-(甲氧基-甲基-氨基甲酰基)-茚满-2-基]-氨基甲酸叔丁酯，为类白色泡沫。
在100ml 2-颈圆底烧瓶中，将[2-(甲氧基-甲基-氨基甲酰基)-茚满-2-基]-氨基甲酸叔丁酯(1.025g,3.2mmol)溶于12ml THF。将无色溶液冷却至0℃。在0℃滴加氢化铝锂的1.0M的THF溶液(3.4ml,3.4mmol)(观察到气体放出)。将反应混合物在0℃搅拌1h。小心地加入硫酸钠十水合物以猝灭反应。当不再检测到气体放出时，除去冰浴。加入硫酸钠和乙酸乙酯，将混合物在室温剧烈搅拌30min。用滤纸过滤该混悬液，用乙酸乙酯冲洗。浓缩滤液，得到(2-甲酰基-茚满-2-基)-氨基甲酸叔丁酯，为无色油状物，将其不经进一步纯化理解使用。
在50ml圆底烧瓶中，将(2-甲酰基-茚满-2-基)-氨基甲酸叔丁酯(931mg,3.03mmol；纯度＝85％)溶于9.5ml二氯甲烷。加入丙酮羟腈(781mg,0.84ml,9.18mmol)，然后加入三乙胺(203mg,0.28ml,2.01mmol)。将反应混合物在室温搅拌4h。用70ml乙醚和10ml水萃取反应混合物。用70ml乙醚萃取水层。将有机层用10ml水洗涤4次，用10ml盐水洗涤1次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得到846mg(97％)[2-(氰基-羟基-甲基)-茚满-2-基]-氨基甲酸叔丁酯，为类白色固体，将其不经进一步纯化即使用。
向100ml圆底烧瓶中加入[2-(氰基-羟基-甲基)-茚满-2-基]-氨基甲酸叔丁酯(0.844g,2.93mmol)和6M盐酸(13ml,78.0mmol)。将反应混合物在100℃搅拌过夜。将反应混合物冷却至室温，在旋转蒸发器上浓缩，然后在高度真空下干燥，得到粘性棕色固体。将残余物溶于5.2ml 1,4-二烷和5.2ml水。加入碳酸氢钠(2.46g,29.3mmol)，然后加入焦碳酸二叔丁酯(958mg,4.39mmol)。将非均质的淡棕色反应混合物在室温剧烈搅拌2天。用15ml水稀释反应混合物，用70ml乙醚萃取。将有机层用5ml水洗涤2次。将有机层置于一旁，随后弃去。合并水层，用浓HCl酸化至pH＝～2，然后用70ml乙醚萃取3次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得到229mg(25％)(2-叔丁氧基羰基氨基-茚满-2-基)-羟基-乙酸，为淡黄色固体。
在50ml圆底烧瓶中，将(2-叔丁氧基羰基氨基-茚满-2-基)-羟基-乙酸(226mg,0.74mmol)溶于2.5ml DMF。加入苄胺(98.1mg,0.10ml,0.92mmol)，然后加入N,N-二异丙基乙胺(200mg,0.27ml,1.55mmol)和HATU(308mg,0.81mmol)。将黄色溶液在室温搅拌5天。用EtOAc和水萃取反应混合物。用EtOAc反萃取水层。将有机层用水洗涤2次，用盐水洗涤1次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。用25g硅胶和EtOAc/己烷(梯度0-20％EtOAc)对残余物进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到95mg(33％)[2-(苄基氨基甲酰基-羟基-甲基)-茚满-2-基]-氨基甲酸叔丁酯，为类白色固体。
在25ml圆底烧瓶中，将[2-(苄基氨基甲酰基-羟基-甲基)-茚满-2-基]-氨基甲酸叔丁酯(95mg,0.24mmol)溶于2.7ml二氯甲烷。缓慢地加入三氟乙酸(0.47ml,6.1mmol)。将反应混合物在室温搅拌2h。蒸发溶剂，然后置于高度真空下15min。将残余物和(S)-2-{(S)-2-[(茚满-2-羰基)-氨基]-丙酰基氨基}-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酸(100mg,0.23mmol)溶于1.8ml DMF，冷却至0℃。在0℃滴加N,N-二异丙基乙胺(178mg,0.24ml,1.37mmol)，然后加入HATU(97mg,0.26mmol)。加入完成后，除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌2天。用EtOAc和水萃取反应混合物。用EtOAc反萃取水层。将有机层用水洗涤3次，用盐水洗涤1次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。用12g硅胶和MeOH/二氯甲烷(梯度0-5％MeOH)对残余物进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到159mg(70％；纯度＝90％)茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-[2-(苄基氨基甲酰基-羟基-甲基)-茚满-2-基氨基甲酰基]-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为无色油状物。
在50ml圆底烧瓶中，将茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-[2-(苄基氨基甲酰基-羟基-甲基)-茚满-2-基氨基甲酰基]-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺(121mg,0.16mmol；纯度＝90％)部分溶于6.5ml二氯甲烷，加入戴斯-马丁过碘烷(101mg,0.24mmol)。将反应混合物在室温搅拌2h。用3ml饱和NaHCO3-溶液和3ml 10％Na2S2O3-溶液猝灭反应混合物，在室温剧烈搅拌15min。然后用30ml二氯甲烷萃取双相混合物。用10ml饱和NaHCO3-溶液洗涤有机层。用30ml二氯甲烷将水层萃取2次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。将残余物与乙醚/乙酸乙酯一起研磨，得到61mg类白色固体。用12g硅胶和MeOH/二氯甲烷(梯度0-5％MeOH)对残余物进行色谱处理。合并含有产物的所有级分，浓缩，得到39mg(34％)茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-(2-苄基氨基乙二酰基-茚满-2-基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺，为类白色固体。LC/MS：(M-H)-＝685。
实施例60
测定方案和结果
基于细胞的蛋白酶体活性/选择性测定法
基于细胞的蛋白酶体亚基活性/选择性测定法是一组5种荧光测定法，其独立地测定β5c或β5i(胰凝乳蛋白酶样活性)、β2c/2i(胰蛋白酶样)和β1c或β1i(胱天蛋白酶样)蛋白酶活性(与培养细胞中蛋白酶体复合物相关)。具体地，下列底物被用于各亚基活性：β1i：(PAL)2Rh110、β1c：(LLE)2Rh110、β2c/2i：(KQL)2Rh110、β5c：(WLA)2Rh110、β5i：(ANW)2Rh110。遵循如下操作：
细胞制备：将25μl Ramos细胞(在DPBS中2×106个/ml)铺板入一半区域的板(PerkinElmer Cat 6005569)，至最终5×104个细胞/孔。向每个孔中加入0.5μl 100×4倍系列稀释的测试化合物或DMSO。所测试的化合物的最高浓度为20μM，因此化合物的系列稀释液从200mM开始。在37℃温育30分钟。然后在室温平衡15分钟。加入25μl 2x由在DPBS中的0.025％洋地黄皂苷、20μM每种底物和0.5M蔗糖组成的反应混合物。以700rpm振摇1分钟。在室温温育120min。然后用Envision multilabel板读数仪(PerkinElmer)在500nm激发波长/519nm发射波长下对板进行读数。
改进的PBMC蛋白酶体活性测定法
这种基于细胞的蛋白酶体活性测定法与之前的基于Ramos细胞的测定法在底物方面类似，但在具有10％FBS的完全RPMI作为反应缓冲液的情况下使用人PBMC。该测定法被设计用于评价测试化合物在原代人细胞中的细胞渗透水平。遵循如下操作：将来自健康供体的新鲜分离的PBMC以1×105个细胞/孔在100μl具有10％FBS的完全RPMI中铺板在V形底96孔板中。加入1μl 100X 4倍系列稀释的化合物/孔并温育1小时。所测试的最高化合物浓度为20μM(100X工作储备液从2mM开始)。以2000rpm旋降细胞5min。除去全部上清液。然后将细胞重新混悬于25μl DPBS中，将细胞转入新鲜的一半区域的板(PerkinElmer Cat 6005569)中。最终反应体积为50μl，包括25μl细胞混悬液、0.5μl 100x抑制剂或DMSO、25μl含0.025％洋地黄皂苷、20uM底物(底物：(PAL)2Rh110、(LLE)2Rh110、(KQL)2Rh110、(WLA)2Rh110或(ANW)2Rh110)/在10％FBS和0.5M蔗糖混合物中的底物混合物。振摇1分钟(700rpm)。温育2小时。然后使用500nm激发波长/519nm发射波长用Envision板读数仪对板进行读数。
PBMC IP-10测定法
如下从全血中分离得到PBMC：在无菌环境中将血液采集入肝素化试管中。用等体积的PBS/2％FCS稀释血液，将30ml该混合物加入到含有已经以800g离心30秒的15ml Histopaque-1077的ACCUSPIN管中，温热至室温。然后将管于室温在无制动的情况下以800g离心20分钟。用巴斯德吸管(Pasteur pipet)取出恰在聚乙烯釉料上的单核带。用无菌PBS将这些单核细胞洗涤3次，计数，重新混悬在补充了10％热灭活胎牛血清、10mM HEPES、1mM丙酮酸钠、青霉素(50U/ml)、链霉素(50μg/ml)和谷氨酰胺(2mM)的RPMI 1640中至约1.5×106/ml。将约2×105个细胞/孔铺在96孔组织培养板(BD Falcon 353072)中，与剂量递增(titration)的化合物一起预温育60mi/37℃，终浓度为1％DMSO。然后用终浓度为2.5μM的CpG Type A(Invivogen,Cat#tlrl-2216；ODN 2216)刺激细胞。将细胞温育过夜，除去上清液。按照制造商的说明书用ATPlite发光测定法(Perkin-Elmer)测定孔中剩余的PBMC细胞生存力。在Perkin-ElmerEnvision上用发光过滤器测定发光。除了将所有体积减半之外，按照制造商的说明书用CXCL10/IP10 AlphaLISA试剂盒(Perkin-Elmer)测定IP10水平。用AlphaScreen标准设置在Envision Multilabel板读书仪上测定荧光。
结果：
在下面的表1中提供了本发明的代表性化合物在上述测定法中的结果，其中IC50和EC50活性值的单位是μM：
表1
应当理解的是，本发明不限于上述本发明的具体实施方案，因为可以对具体的实施方案进行改变，且这些改变仍然落入所附的权利要求书的范围内。

Claims (24)

1.式(I)的化合物：
其中：
X是-C(O)-或-S(O)2-；
R1或R1’中的一个是H或未取代的C1-7烷基，另一个是未取代的C1-7烷基或被苯基取代的C1-7烷基，或
R1和R1’与它们所连接的碳原子结合在一起形成茚满基原子团；
R2或R2’中的一个是H或甲基，另一个是环烷基、未取代的C1-7烷基或被苯基、烷氧基或杂芳基取代的C1-7烷基；
R3是未取代的C1-7烷基或被苯基、甲氧基苯基、吲哚基、烷氧基、-SO2CH3、杂芳基、氯苯基、杂环或–CF3取代的C1-7烷基；
R4或R4’中的一个是H或未取代的C1-7烷基，另一个是未取代的C1-7烷基或被烷氧基或环烷基取代的C1-7烷基，或
R4或R4’与它们所连接的碳原子结合在一起形成环烷基原子团；
R5选自：
CH3C(O)NHCH(CH2-苯基甲基)、
异吲哚基、
二氢异吲哚基、
-CH2-杂环、
-CH2-杂芳基、
-CH2-CH2-甲基吡唑基、
甲基-茚基、
-CH2-苯基、
茚满基、
甲基-异唑基、
未取代的杂芳基、
被C1-7烷基或–CF3单取代或独立地二取代的杂芳基、
未取代的苯基、
被C1-7烷基或卤素单取代或独立地二取代的苯基、
-CH2-苯并[1,4]嗪基、
-CH2-二氢苯并[1,4]嗪基、
-O-CH2-苯基、
甲基-吲哚基、
甲基-吡咯并[3,2-b]吡啶基或
咪唑并[1,2-a]吡啶基，
或其药学上可接受的盐。
2.权利要求1的化合物，其中X是-C(O)-。
3.权利要求1的化合物，其中R1或R1’中的一个是H，另一个是丁基或-CH2-苯基。
4.权利要求1的化合物，其中R1或R1’中的一个是H，另一个是-CH2-苯基。
5.权利要求1的化合物，其中R2或R2’中的一个是H，另一个是环丙基、甲基、-CH2-苯基、-CH2-CH2-苯基、-CH2CH2OCH3或-CH2-吡啶基。
6.权利要求1的化合物，其中R2或R2’是H，另一个是-CH2-苯基。
7.权利要求1的化合物，其中R3是叔丁基、异丁基、-CH2-苯基、-CH2-甲氧基苯基、-CH2-吲哚基、-CH2-甲氧基、-CH2CH2SO2CH3、-CH2-吡喃基、-CH2-吡啶基、-CH2-氯苯基、-CH2-四氢吡喃基或-CH2CF3。
8.权利要求1的化合物，其中R3是-CH2-甲氧基苯基或-CH2-吲哚基。
9.权利要求1的化合物，其中R4或R4’中的一个是H，另一个是甲基、叔丁基、-CH2-OCH3或环丙基。
10.权利要求1的化合物，其中R4或R4’与它们所连接的碳原子结合在一起形成环丙基原子团。
11.权利要求1的化合物，其中R4或R4’中的一个是H，另一个是甲基。
12.权利要求1的化合物，其中R5是CH3C(O)NHCH(CH2-苯基甲基)、-二氢吲哚基、-CH2-吗啉、-CH2-CH2-甲基吡唑基、甲基-茚基、-CH2-苯基、茚满基、甲基-异唑基、吡嗪基、甲基-吡唑基、二甲基-吡唑基、乙基-吡唑基、甲基-三氟甲基-吡唑基、苯基、二氯-苯基、甲基-苯基、-CH2-苯并[1,4]嗪基、-CH2-二氢苯并[1,4]嗪基、-O-CH2-苯基、甲基-吲哚基、甲基-吡咯并[3,2-b]吡啶基或咪唑并[1,2-a]吡啶基。
13.权利要求1的化合物，其中R5是茚满基或-O-CH2-苯基。
14.权利要求1的式(I’)的化合物：
其中R3和R5如权利要求1中所定义；
或其药学上可接受的盐。
15.权利要求14的式(I’)的化合物，其中：
R3是-CH2-甲氧基苯基或-CH2-吲哚基，
R5是茚满基或-O-CH2-苯基，
或其药学上可接受的盐。
16.权利要求1的化合物，其中所述化合物是：
(S)-3-{(S)-2-[(S)-2-((S)-2-乙酰基氨基-3-邻甲苯基-丙酰基氨基)-3,3-二甲基-丁酰基氨基]-4-甲基-戊酰基氨基}-2-氧代-庚酸苄基酰胺；
(S)-3-{(S)-2-[(S)-3,3-二甲基-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丁酰基氨基]-4-甲基-戊酰基氨基}-2-氧代-庚酸苄基酰胺；
(S)-3-{(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-[(S)-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酰基氨基}-2-氧代-庚酸苄基酰胺；
5-甲基-异唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基氨基乙二酰基-戊基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
3-甲基-1H-茚-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基氨基乙二酰基-戊基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
5-甲基-异唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基氨基乙二酰基-戊基氨基甲酰基)-2-甲氧基-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
3-甲基-1H-茚-2-甲酸((S)-1-{(S)-2-(1H-吲哚-3-基)-1-[(S)-1-((S)-1-苯基-乙基氨基乙二酰基)-戊基氨基甲酰基]-乙基氨基甲酰基}-乙基)-酰胺；
3-甲基-1H-茚-2-甲酸((S)-1-{(S)-2-(1H-吲哚-3-基)-1-[(S)-1-((R)-1-苯基-乙基氨基乙二酰基)-戊基氨基甲酰基]-乙基氨基甲酰基}-乙基)-酰胺；
{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基氨基乙二酰基-戊基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯；
(S)-3-{(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-[(S)-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酰基氨基}-2-氧代-庚酸苄基酰胺；
茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基氨基乙二酰基-戊基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
N-{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基氨基乙二酰基-戊基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-2,3-二氯-苯甲酰胺；
2-甲基-2H-吡唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基氨基乙二酰基-戊基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
(S)-3-{(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-[(S)-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酰基氨基}-2-氧代-庚酸甲基酰胺；
3-甲基-1H-茚-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基氨基乙二酰基-戊基氨基甲酰基)-3-甲磺酰基-丙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯；
{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯；
茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
3-甲基-1H-茚-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-3-甲磺酰基-丙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
5-甲基-异唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
(S)-N-苄基-3-{(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-[(S)-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酰基氨基}-2-氧代-4-苯基-丁酰胺；
茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-2-甲氧基-乙基}-酰胺；
茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-3-甲基-丁基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
3-甲基-1H-茚-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
茚满-2-甲酸{(S)-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-环丙基-甲基}-酰胺；
茚满-2-甲酸{1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-环丙基}-酰胺；
{1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-环丙基}-氨基甲酸苄基酯；
吡嗪-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
2-甲基-2H-吡唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-甲基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯；
{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-环丙基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯；
{(S)-1-[(S)-1-[(S)-1-苄基-2-(2-甲氧基-乙基氨基甲酰基)-2-氧代-乙基氨基甲酰基]-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯；
{(S)-1-[(S)-1-{(S)-1-苄基-2-氧代-2-[(吡啶-2-基甲基)-氨基甲酰基]-乙基氨基甲酰基}-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯；
(S)-N-苄基-3-[(S)-2-[(S)-2-(2-2,3-二氢-苯并[1,4]嗪-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酰基氨基]-2-氧代-4-苯基-丁酰胺；
{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-3-甲基-丁基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯；
2-甲基-2H-吡唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-3-甲基-丁基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
{(S)-1-[(S)-1-[(S)-1-苄基-2-(苄基-甲基-氨基甲酰基)-2-氧代-乙基氨基甲酰基]-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯；
(S)-3-[(S)-2-((S)-2-苯磺酰基氨基-丙酰基氨基)-3-(4-甲氧基-苯基)-丙酰基氨基]-N-苄基-2-氧代-4-苯基-丁酰胺；
(S)-N-苄基-3-{(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-[(S)-2-(甲苯-2-磺酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酰基氨基}-2-氧代-4-苯基-丁酰胺；
(S)-N-苄基-3-((S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-{(S)-2-[3-(2-甲基-2H-吡唑-3-基)-丙酰基氨基]-丙酰基氨基}-丙酰基氨基)-2-氧代-4-苯基-丁酰胺；
茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-3-苯基-丙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-苯基-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
1-甲基-1H-吲哚-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-苯基-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
1-甲基-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
(S)-N-苄基-3-{(S)-3-(4-甲氧基-苯基)-2-[(S)-2-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-丙酰基氨基}-2-氧代-4-苯基-丁酰胺；
5-甲基-异唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
3-甲基-1H-茚-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-吡啶-2-基-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯；
{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-氯-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯；
1,3-二氢-异吲哚-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-苯基-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
2,5-二甲基-2H-吡唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-苯基-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
2-乙基-2H-吡唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-苯基-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
2-甲基-5-三氟甲基-2H-吡唑-3-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-苯基-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；
{(S)-1-[1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(四氢-吡喃-4-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯；
{(S)-1-[1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-3,3,3-三氟-丙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯；
{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-吡啶-4-基-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯；或
茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-(2-苄基氨基乙二酰基-茚满-2-基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；或
其药学上可接受的盐。
17.权利要求1的化合物，其中所述化合物是：
{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯；
{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯；
茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；或
茚满-2-甲酸{(S)-1-[(S)-1-((S)-1-苄基-2-苄基氨基甲酰基-2-氧代-乙基氨基甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-乙基}-酰胺；或
其药学上可接受的盐。
18.药物组合物，其包含治疗有效量的权利要求1-17中任意一项的化合物和药学上可接受的载体。
19.权利要求1-17中任意一项的化合物，其用作治疗活性物质。
20.权利要求1-17中任意一项的化合物用于治疗或预防炎性疾病或障碍的用途。
21.权利要求1-7中任意一项的化合物在制备用于治疗或预防炎性疾病或障碍的药剂中的用途。
22.权利要求1-7中任意一项的化合物，其用于治疗或预防炎性疾病或障碍。
23.治疗选自类风湿性关节炎、狼疮和易激惹性肠病的炎性疾病或障碍的方法，其包括给需要其的个体施用治疗有效量的权利要求1-17中任意一项的化合物的步骤。
24.上文所述的发明。
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