CN104830817B - 一种类黄酮异戊烯基转移酶AhFDT1及其编码基因和应用 - Google Patents
一种类黄酮异戊烯基转移酶AhFDT1及其编码基因和应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN104830817B CN104830817B CN201510247088.1A CN201510247088A CN104830817B CN 104830817 B CN104830817 B CN 104830817B CN 201510247088 A CN201510247088 A CN 201510247088A CN 104830817 B CN104830817 B CN 104830817B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- flavonoids
- ahfdt1
- prenyltransferase
- isopentene group
- apiolin
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/10—Transferases (2.)
- C12N9/1085—Transferases (2.) transferring alkyl or aryl groups other than methyl groups (2.5)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/02—Oxygen as only ring hetero atoms
- C12P17/06—Oxygen as only ring hetero atoms containing a six-membered hetero ring, e.g. fluorescein
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明公开了一种类黄酮异戊烯基转移酶AhFDT1及其编码基因和应用。本发明从波罗蜜中克隆得到类黄酮异戊烯基转移酶基因AhFDT1,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;编码的类黄酮异戊烯基转移酶AhFDT1,其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。通过利用类黄酮异戊烯基转移酶基因AhFDT1构建表达载体转化酿酒酵母,获得超量表达类黄酮异戊烯基转移酶AhFDT1的酿酒酵母;利用其菌液或微粒体催化异戊烯基供体和类黄酮底物合成异戊烯基类黄酮,转化率可高达26%,产物纯度可达82‑96%。本发明为异戊烯基类黄酮的生物合成提供了一种新的方法,具有操作简便,反应污染小,产物纯度高等优势。
Description
技术领域
本发明属于生物技术领域,具体涉及一种类黄酮异戊烯基转移酶AhFDT1及其编码基因和应用。
背景技术
波罗蜜(Artocarpus heterophyllus Lam.)属于桑科水果类植物,主要种植于热带、亚热带区域。果实香味浓郁,酸甜可口,深受我国南方消费者的青睐。波罗蜜不仅是一种特色水果资源,其枝叶组织富含一类特殊结构的黄酮类物质,即异戊烯基类黄酮。该种黄酮类物质比常见结构的黄酮类物质生物活性更强,例如其在抑制肿瘤细胞增殖活性、免疫调节活性等方面,均比没有异戊烯基化的黄酮类物质更显著。波罗蜜组织中异戊烯基类黄酮的含量不仅高,而且结构种类丰富,目前已发现有二十余种不同结构形式的异戊烯基类黄酮。由此可见,波罗蜜既是丰富的异戊烯基类黄酮天然资源,也是类黄酮异戊烯基转移酶的丰富资源。异戊烯基类黄酮在肿瘤等疾病治疗方面具有非常重要的价值,具有广泛的应用前景。因此,利用菠萝蜜固有的天然优势,通过生物技术的手段来开发一种生物合成异戊烯基类黄酮的方法将具有重要的产业价值。
发明内容
本发明的第一个目的是提供一种类黄酮异戊烯基转移酶AhFDT1及其编码基因AhFDT1。
本发明的类黄酮异戊烯基转移酶AhFDT1,其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
本发明还提供了编码上述类黄酮异戊烯基转移酶AhFDT1的类黄酮异戊烯基转移酶基因AhFDT1,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
本发明的第二个目的是提供类黄酮异戊烯基转移酶AhFDT1在制备异戊烯基类黄酮中的应用。
所述的应用优选是将芹菜素加入表达类黄酮异戊烯基转移酶AhFDT1的酿酒酵母菌液中,经类黄酮异戊烯基转移酶AhFDT1催化产生异戊烯基芹菜素。
所述的应用优选是以类黄酮和异戊烯基供体作为底物,经类黄酮异戊烯基转移酶AhFDT1催化产生异戊烯基类黄酮。
优选,所述的催化,其反应体系的pH值为7~9,反应温度为20~40℃。
优选,所述的类黄酮为芹菜素,所述的异戊烯基供体为二甲基丙烯基焦磷酸,经类黄酮异戊烯基转移酶AhFDT1催化产生异戊烯基芹菜素。
优选,所述的类黄酮为山奈酚,所述的异戊烯基供体为二甲基丙烯基焦磷酸,经类黄酮异戊烯基转移酶AhFDT1催化产生异戊烯基山奈酚。
本发明从菠萝蜜中克隆得到类黄酮异戊烯基转移酶基因AhFDT1,其编码的类黄酮异戊烯基转移酶AhFDT1具有良好的催化合成异戊烯基类黄酮的活性。通过利用类黄酮异戊烯基转移酶基因AhFDT1构建表达载体转化酿酒酵母,获得超量表达类黄酮异戊烯基转移酶AhFDT1的酿酒酵母;利用其菌液或微粒体催化异戊烯基供体和类黄酮底物合成异戊烯基类黄酮,转化率可高达26%,产物纯度可达82-96%。本发明为异戊烯基类黄酮的生物合成提供了一种新的方法,具有操作简便,反应污染小,产物纯度高等优势。
附图说明
图1是异戊烯基芹菜素的一级质谱图。
图2是异戊烯基芹菜素的二级质谱图。
图3是酿酒酵母阳性菌的菌落PCR产物电泳图。
图4是异戊烯基山奈酚的一级质谱图。
图5是异戊烯基山奈酚的二级质谱图。
具体实施方式
以下实施例是对本发明的进一步说明,而不是对本发明的限制。
下列实例中未具体注明的实验方法,均可按照常规方法进行。
实施例1:克隆类黄酮异戊烯基转移酶基因AhFDT1、构建超表达载体及转化酿酒酵母
提取波罗蜜叶片的RNA,采用逆转录酶M-MLV,逆转录反应合成的cDNA。以该cDNA为模板,采用正向引物GCCACCATGGATTCTTTTCTTCTG,反向引物CCTAACGAGCGGTATAAGTAGATACTCG,TakaRa公司Ex Taq DNA聚合酶,进行PCR扩增;PCR条件为:94℃,5min;94℃,45s、60℃,1min、72℃,1.5min;35个循环;72℃延伸10min。采用琼脂糖凝胶电泳回收目的片段,将目的片段送交测序。经测序分析,克隆得到的类黄酮异戊烯基转移酶基因AhFDT1的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,其含有1233个碱基,编码的蛋白命名为类黄酮异戊烯基转移酶AhFDT1,共410个氨基酸,具体氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
连接类黄酮异戊烯基转移酶基因AhFDT1至超表达载体pYes2.1TOPO(购自Invitrogen公司,货号K4150-01)上,连接反应条件为:类黄酮异戊烯基转移酶基因AhFDT1、质粒pYES2.1TOPO、1.2M NaCl、0.06M MgCl2混合后,室温放置30min完成连接反应,获得重组质粒(类黄酮异戊烯基转移酶基因AhFDT1插入到超表达载体pYes2.1TOPO后的重组质粒)。然后将其再转化至酿酒酵母感受态细胞中,转化条件为:向酵母感受态细胞中加入2μL重组质粒、5μL鲑鱼精DNA,混匀;加入600μL转化液(转化液的配方是:1mL 50%PEG,125μL10×TE,125μL 10×LiAc),30℃、100rpm摇床转化30min;加入70μL DMSO(二甲基亚砜),42℃热激15min;冰浴放置2min后13000rpm离心5s,加200μL 1×TE悬浮细胞,涂布SC-U抑制平板,30℃培养3~5天。菌落PCR筛选重组质粒成功转化至酿酒酵母细胞的阳性菌,筛选方法为:挑选单个菌落转移至50μL无菌水,100℃加热5min,离心去除细胞碎片;取10μL上清液,加入5μL Ex Taq DNA聚合酶缓冲液、1μL 10mM dNTPs,1μL正向引物GCCACCATGGATTCTTTTCTTCTG,1μL来自质粒序列的反向引物ACCGAGGAGAGGGTTAGGGAT,0.5μLEx Taq DNA聚合酶,31.5μL无菌水,混合;PCR程序为:94℃,5min;94℃,40s、58℃,40s、72℃,1.5min;35个循环;72℃延伸10min。PCR得到的产物用琼脂糖凝胶电泳,结果如图3所示,图3的M为marker,1为阳性菌,该阳性菌能够扩增出目的片段,表明类黄酮异戊烯基转移酶基因AhFDT1插入到超表达载体pYes2.1TOPO后的重组质粒成功转化至酿酒酵母细胞,再经测序验证确认,由此得到将类黄酮异戊烯基转移酶基因AhFDT1插入到超表达载体pYes2.1TOPO后的重组质粒成功转化至酿酒酵母细胞的阳性菌,命名为酿酒酵母pYes2.1TOPO-AhFDT1。对酿酒酵母pYes2.1TOPO-AhFDT1进行大量培养,首先挑酿酒酵母pYes2.1TOPO-AhFDT1转移至50mL SC-U抑制培养基(2%葡萄糖为碳源),30℃,200rpm,培养至对数生长期;离心收集细胞,用SC-U诱导培养基(2%半乳糖,1%棉子糖为碳源)稀释至OD600=0.4,30℃,200rpm,培养24h。用SC-U诱导培养基培养酿酒酵母pYes2.1TOPO-AhFDT1,诱导其超量表达类黄酮异戊烯基转移酶AhFDT1,即获得超量表达类黄酮异戊烯基转移酶AhFDT1的酿酒酵母菌液。
实施例2:合成类黄酮异戊烯基转移酶基因AhFDT1、构建超表达载体及转化酿酒酵母
采用全合成的方法直接合成类黄酮异戊烯基转移酶基因AhFDT1全长序列(具体如SEQ ID NO.1所示),按照实施例1的方法连接类黄酮异戊烯基转移酶基因AhFDT1至超表达载体pYes2.1TOPO上,再转化至酿酒酵母感受态细胞中,得到酿酒酵母pYes2.1TOPO-AhFDT1。将酿酒酵母pYes2.1TOPO-AhFDT1进行大量培养,诱导超量表达类黄酮异戊烯基转移酶AhFDT1,得到超量表达类黄酮异戊烯基转移酶AhFDT1的酿酒酵母菌液。
实施例3:异戊烯基芹菜素的生物合成
1.合成异戊烯基芹菜素
在实施例1的超量表达类黄酮异戊烯基转移酶AhFDT1的酿酒酵母菌液中加入500μM芹菜素,25℃反应48小时后,采用体积分数90%乙醇溶液提取,乙醇相通过C18反相柱(16mm×460mm)纯化,以甲醇:水(50/50~100/0)洗脱,收集甲醇/水体积比为90/10的洗脱组分,得到化合物1(异戊烯基芹菜素)。
2.化合物1(异戊烯基芹菜素)的结构鉴定
化合物1可溶于甲醇,一级质谱结果显示[M+H]+m/z=339.1,如图1所示,表明该化合物分子量为338,比芹菜素多出一个异戊烯基的分子量。二级质谱产生了两个碎片,m/z分别为283.1和165.1,如图2所示,证明该异戊烯基连接在芹菜素的A环上。由此确认化合物1为异戊烯基芹菜素。
采用该实施例的方法合成异戊烯基芹菜素的转化率为16%,纯度为82%。
实施例4:异戊烯基芹菜素的生物合成
在实施例1的超量表达类黄酮异戊烯基转移酶AhFDT1的酿酒酵母菌液中加入500μM芹菜素,35℃反应2小时后,采用体积分数60%乙醇溶液提取,通过C18反相柱(16mm×460mm)纯化,以甲醇:水(50/50~100/0)洗脱,收集甲醇/水体积比为90/10的洗脱组分,得到异戊烯基芹菜素。采用本实施例的方法合成异戊烯基芹菜素的转化率为6%,纯度为85%。
实施例5:异戊烯基芹菜素的生物合成
在实施例1的超量表达类黄酮异戊烯基转移酶AhFDT1的酿酒酵母菌液中加入500μM芹菜素,30℃反应24小时后,采用体积分数80%乙醇溶液提取,通过C18反相柱(16mm×460mm)纯化,以甲醇:水(50/50~100/0)洗脱,收集甲醇/水体积比为90/10的洗脱组分,得到异戊烯基芹菜素。采用本实施例的方法合成异戊烯基芹菜素的转化率为19%,纯度为85%。
实施例6:异戊烯基芹菜素的生物合成
离心收集实施例2的超量表达类黄酮异戊烯基转移酶AhFDT1的酿酒酵母菌液中的菌株,提取微粒体;取100μg微粒体,加入100mM Tris-HCl(pH7.0)、10mM Mg2+、500μM DMAPP(二甲基丙烯基焦磷酸)、500μM芹菜素,20℃反应0.5小时后,采用乙酸乙酯萃取反应液,乙酸乙酯相通过C18反相柱(16mm×460mm)纯化,以甲醇:水(50/50~100/0)洗脱,收集甲醇/水体积比为90/10的洗脱组分,得到异戊烯基芹菜素(该化合物的结构确定同实施例3)。采用本实施例的方法合成异戊烯基芹菜素的转化率为15%,纯度为95%。
实施例7:异戊烯基芹菜素的生物合成
离心收集实施例1的超量表达类黄酮异戊烯基转移酶AhFDT1的酿酒酵母菌液中的菌株,提取微粒体;取100μg微粒体,加入100mM Tris-HCl(pH9.0)、10mM Mg2+、500μM DMAPP(二甲基丙烯基焦磷酸)、500μM芹菜素,40℃反应24小时后,采用乙酸乙酯萃取反应液,乙酸乙酯相通过C18反相柱(16mm×460mm)纯化,以甲醇:水(50/50~100/0)洗脱,收集甲醇/水体积比为90/10的洗脱组分,得到异戊烯基芹菜素。采用本实施例的方法合成异戊烯基芹菜素的转化率为26%,纯度为93%。
实施例8:异戊烯基芹菜素的生物合成
离心收集实施例1的超量表达类黄酮异戊烯基转移酶AhFDT1的酿酒酵母菌液中的菌株,提取微粒体;取100μg微粒体,加入100mM Tris-HCl(pH8.0)、10mM Mg2+、500μM DMAPP(二甲基丙烯基焦磷酸)、500μM芹菜素,30℃反应24小时后,采用乙酸乙酯萃取反应液,乙酸乙酯相通过C18反相柱(16mm×460mm)纯化,以甲醇:水(50/50~100/0)洗脱,收集甲醇/水体积比为90/10的洗脱组分,得到异戊烯基芹菜素。采用本实施例的方法合成异戊烯基芹菜素的转化率为24%,纯度为96%。
实施例9:异戊烯基山奈酚的生物合成
1.合成异戊烯基山奈酚
离心收集实施例1的超量表达类黄酮异戊烯基转移酶AhFDT1的酿酒酵母菌液中的菌株,提取微粒体;取100μg微粒体,加入100mM Tris-HCl(pH8.0)、10mM Mg2+、500μM DMAPP(二甲基丙烯基焦磷酸)、500μM山奈酚,30℃反应24小时后,采用乙酸乙酯萃取反应液,乙酸乙酯相通过C18反相柱(16mm×460mm)纯化,以甲醇:水(50/50~100/0)洗脱,得到化合物2(异戊烯基山奈酚)。
2.化合物2(异戊烯基山奈酚)的结构鉴定
化合物2可溶于甲醇,一级质谱结果显示[M+H]+m/z=355.1,如图4所示,表明该化合物2分子量为354,比山奈酚多出一个异戊烯基的分子量。二级质谱产生了一个碎片,m/z为299.1,如图5所示,表明由于异戊烯基的断裂产生的山奈酚碎片。由此确定化合物2为异戊烯基山奈酚。
采用本实施例的方法合成异戊烯基山奈酚的转化率为22%,纯度为93%。
Claims (8)
1.一种类黄酮异戊烯基转移酶AhFDT1,其特征在于,其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
2.一种编码权利要求1所述的类黄酮异戊烯基转移酶AhFDT1的类黄酮异戊烯基转移酶基因AhFDT1,其特征在于,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
3.权利要求1所述的类黄酮异戊烯基转移酶AhFDT1在制备异戊烯基类黄酮中的应用。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,将芹菜素加入表达类黄酮异戊烯基转移酶AhFDT1的酿酒酵母菌液中,经类黄酮异戊烯基转移酶AhFDT1催化产生异戊烯基芹菜素。
5.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,是以类黄酮和异戊烯基供体作为底物,经类黄酮异戊烯基转移酶AhFDT1催化产生异戊烯基类黄酮。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述的催化,其反应体系的pH值为7~9,反应温度为20~40℃。
7.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述的类黄酮为芹菜素,所述的异戊烯基供体为二甲基丙烯基焦磷酸,经类黄酮异戊烯基转移酶AhFDT1催化产生异戊烯基芹菜素。
8.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述的类黄酮为山奈酚,所述的异戊烯基供体为二甲基丙烯基焦磷酸,经类黄酮异戊烯基转移酶AhFDT1催化产生异戊烯基山奈酚。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201510247088.1A CN104830817B (zh) | 2015-05-14 | 2015-05-14 | 一种类黄酮异戊烯基转移酶AhFDT1及其编码基因和应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201510247088.1A CN104830817B (zh) | 2015-05-14 | 2015-05-14 | 一种类黄酮异戊烯基转移酶AhFDT1及其编码基因和应用 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN104830817A CN104830817A (zh) | 2015-08-12 |
CN104830817B true CN104830817B (zh) | 2018-01-16 |
Family
ID=53809017
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201510247088.1A Active CN104830817B (zh) | 2015-05-14 | 2015-05-14 | 一种类黄酮异戊烯基转移酶AhFDT1及其编码基因和应用 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN104830817B (zh) |
Families Citing this family (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN106318920B (zh) * | 2016-09-14 | 2019-10-11 | 中国科学院天津工业生物技术研究所 | 黄酮-6-羟化酶及其在灯盏乙素合成中的应用 |
CN109207448B (zh) * | 2017-06-30 | 2022-08-16 | 中国科学院分子植物科学卓越创新中心 | 新型黄酮异戊烯基转移酶及其应用 |
CN109207450B (zh) * | 2018-09-25 | 2022-04-15 | 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 | 一种类黄酮异戊烯基转移酶基因及其用途 |
CN113957085B (zh) * | 2021-10-13 | 2024-02-23 | 浙江理工大学 | 圆锥铁线莲异戊烯基转移酶pt1基因的应用及其过表达拟南芥株系和构建方法 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101137663A (zh) * | 2005-01-28 | 2008-03-05 | 索尔克生物学研究所 | 新型芳香异戊烯基转移酶,编码其的核酸和其使用 |
-
2015
- 2015-05-14 CN CN201510247088.1A patent/CN104830817B/zh active Active
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101137663A (zh) * | 2005-01-28 | 2008-03-05 | 索尔克生物学研究所 | 新型芳香异戊烯基转移酶,编码其的核酸和其使用 |
Non-Patent Citations (4)
Title |
---|
Molecular cloning and characterization of a geranyl diphosphate-specific aromatic prenyltransferase from lemon;R Munakata 等;《Plant Physiology》;20140730;第166卷(第1期);第80-90页 * |
乌拉尔甘草黄酮异戊烯基转移酶研究;李建华;《中国博士学位论文全文数据库(医药卫生科技辑)》;20150115(第01期);第1页第1-2节,第2页第3节,第15页第2段,第59页"引言",第74页第2.3.5节,第77页最后一段至第78页第一段,第80-81页第2.2.4节,第79-84页第2.2节,第89页第2.3.8节,第90页"本章小结",第101-102页3.2.5节和Table 3.2,第110页第3.2.2节 * |
类黄酮异戊烯转移酶基因在酿酒酵母中的表达;袁田田 等;《安徽农业科学》;20120620;第40卷(第18期);第9596-9697页 * |
粗毛淫羊藿的类黄酮异戊烯转移酶基因的克隆与表达分析;陈倩倩 等;《植物生理学报》;20110620;第47卷(第6期);第575-580页 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN104830817A (zh) | 2015-08-12 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN104830817B (zh) | 一种类黄酮异戊烯基转移酶AhFDT1及其编码基因和应用 | |
CN108893482B (zh) | 丹参萜类合酶基因SmTPS8、其克隆引物、表达载体、催化产物及应用 | |
CN105087739B (zh) | 一种新的制备稀有人参皂苷的催化体系及其应用 | |
CN104894080B (zh) | 一种类黄酮异戊烯基转移酶AhFDT3及其编码基因和应用 | |
CN115109763B (zh) | 一种黄酮醇3-o-葡萄糖苷生物合成相关的黄酮醇3-o-葡萄糖基转移酶及其应用 | |
CN104830816B (zh) | 一种类黄酮异戊烯基转移酶AhFDT2及其编码基因和应用 | |
CN111235046A (zh) | 异源合成α-檀香烯的重组解脂耶氏酵母及其构建方法 | |
CN104531637B (zh) | 一种β-葡萄糖苷酶和β-葡萄糖苷酶突变体及应用 | |
CN107699577A (zh) | 一种调控丹酚酸生物合成的SmAP2/ERF8转录因子的筛选、鉴定及应用 | |
CN115851790B (zh) | 一种樟树CcLis基因及其表达蛋白和应用 | |
Feng et al. | Identification and RNAi-based gene silencing of a novel UDP-glycosyltransferase from Panax quinquefolius | |
CN105002194B (zh) | 一种桉树tps基因、rna干扰载体及应用 | |
CN112522220A (zh) | 一种参与丹参酮生物合成的丹参cyp71be37的基因克隆引物、功能及应用 | |
CN106701800B (zh) | 一种出芽短梗霉聚酮合成酶基因及其应用 | |
KR101157116B1 (ko) | 토마토로부터 유래한 3’-o-메틸전이효소, 그의 유전자 및 그들의 제조방법과 이들을 이용하여 만든 미생물로부터 크리소에리올, 아이소람네틴을 생산하는 방법 | |
CN107849586B (zh) | 芳香化合物的生产 | |
CN106318920A (zh) | 黄酮‑6‑羟化酶及其在灯盏乙素合成中的应用 | |
CN108424943A (zh) | 一种生产2’-脱氧-2’-氟-β-D-阿拉伯糖腺苷酸的方法 | |
CN103374581B (zh) | 金银花4-香豆酸辅酶a连接酶(lj4cl)基因及其编码产物和应用 | |
CN109735523B (zh) | 雪松醇合酶Lc-CedS编码基因及其应用 | |
Wang et al. | Characterization of Various Subunit Combinations of ADP‐Glucose Pyrophosphorylase in Duckweed (Landoltia punctata) | |
CN107653234B (zh) | 一种姜花苯环型酯类花香基因HcBSMT及其应用 | |
CN103571858B (zh) | 芍药牻牛儿牻牛儿基焦磷酸合酶(plggps)基因及其编码产物和应用 | |
CN109371020A (zh) | PcFPS基因的引物对及利用该引物对扩增的基因在提高广藿香中百秋李醇含量的应用 | |
CN115109762B (zh) | 一种黄酮醇3-o-半乳糖苷生物合成相关的半乳糖基转移酶及其应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
EXSB | Decision made by sipo to initiate substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |