CN104824135A

CN104824135A - 氧化白藜芦醇微乳及其制备方法与应用

Info

Publication number: CN104824135A
Application number: CN201510240354.8A
Authority: CN
Inventors: 郑宗平; 陈洁; 何建菲
Original assignee: Jiangnan University
Current assignee: Jiangnan University
Priority date: 2015-05-12
Filing date: 2015-05-12
Publication date: 2015-08-12
Anticipated expiration: 2035-05-12
Also published as: CN104824135B

Abstract

本发明公开了氧化白藜芦醇微乳及其制备方法与应用，属于食品、医药和化妆品技术领域。所述微乳的配方，按质量分数计，如下：表面活性剂10％～15％、助表面活性剂5％～10％、油相1％～5％、水相70％～80％，氧化白藜芦醇适量。所得微乳可根据实际需要稀释为不同浓度，目标物不会析出，且离心不分层，处于热力学稳定状态，可以长期保存，对人体无毒副作用，可用于果蔬酶抗促褐变、制备美白化妆品等。

Description

氧化白藜芦醇微乳及其制备方法与应用

技术领域

本发明涉及氧化白藜芦醇微乳及其制备方法与应用，属于食品、医药和化妆品技术领域。

背景技术

酪氨酸酶(EC 1.14.18.1)又称多酚氧化酶，在自然界中广泛存在。其化学本质是含铜蛋白，是黑色素生成过程中主要的限速酶，其活性与黑色素生成量正相关。在食品体系中，黑色素的生成是蔬菜水果褐变的主要原因，不仅影响产品的外观，也会导致产品质量的下降和营养的流失。因此，如何控制由酪氨酸酶引发的褐变已成为近年来的研究热点。酪氨酸酶作为黑色素合成的关键酶，其表达和活性也与人体色素沉着性疾病密切相关。

氧化白藜芦醇是一种天然二苯乙烯类酪氨酸酶抑制剂，具有抗病毒，抗氧化和保护神经等重要生物活性，近年的研究也表明其具有很强抑制酪氨酸酶活性的能力。但由于其在水中的溶解性很差，不稳定，使其在食品、医药、化妆品工业中的应用受到很大限制。

微乳化属于一种纳米技术，虽然微乳与传统乳液在成分和结构上有一定的相似之处，但两者本质上是完全不同的。微乳是一种透明或半透明略带乳光的溶液，其粒径通常只有1～100nm。微乳可以自发形成，离心不分层，处于热力学稳定状态下时可长期储藏。在药剂学和食品工业应用上显示出了广阔的发展前景。

发明内容

本发明要解决的第一个技术问题是提供一种氧化白藜芦醇微乳。它是一种无毒、高活性、纳米粒径的微乳，从而解决氧化白藜芦醇在水中溶解度小和不稳定的难题。

所述氧化白藜芦醇微乳含有基质、氧化白藜芦醇和水，所述基质由油相、表面活性剂和助表面活性剂组成。

所述氧化白藜芦醇微乳的配方，按质量分数计，含有：表面活性剂10％～15％、助表面活性剂5％～10％、油相1％～5％、水相70％～80％，氧化白藜芦醇适量。

所述氧化白藜芦醇微乳中，还可以添加适量维生素C，以增强微乳抗褐变的能力。

所述水是去离子水或纯净水中任意一种，根据需要适量添加。

所述油相为丁酸乙酯。

所述表面活性剂为吐温80。

所述助表面活性剂聚乙二醇400。

在本发明的一种实施方式中，所述的氧化白藜芦醇微乳，含有4％的丁酸乙酯、10.6％的吐温80和5.4％的PEG 400，80％的水，及8.56mg/mL的氧化白藜芦醇。

在本发明的一种实施方式中，所述的氧化白藜芦醇微乳还含有0.5g/L的维生素C。

所用上述试剂均为食品级。

本发明要解决的第二个技术问题是提供所述氧化白藜芦醇微乳的制备方法，通过下述步骤实现：

按配比将表面活性剂和助表面活性剂混合均匀作为混合活性剂，再加入一定比例的油相并搅拌均匀，继续搅拌同时用滴水法加入适量水使其含水量达到要求，搅拌均匀。在所得空白微乳液中加入稍过量的氧化白藜芦醇，搅拌24小时后经过8000r/min离心20分钟，取上清液即得到氧化白藜芦醇微乳。

本发明以氧化白藜芦醇为主，加入不同的辅料制成微乳，克服了氧化白藜芦醇已有剂型氧化白藜芦醇含量低，稳定性较差等缺点。所得微乳可根据实际需要稀释为不同浓度，目标物不会析出，且离心不分层，处于热力学稳定状态，可以长期保存，对人体无毒副作用。本发明所使用的试剂均为食品级，对人体无毒副作用，可用于果蔬抗酶促褐变、制备美白化妆品等应用领域。

附图说明

图1、藕切片在氧化白藜芦醇微乳及各种溶液中处理后抗褐变的L值。

图2、藕切片在CaCl₂及CaCl₂复配溶液处理后抗褐变的L值。

图3、藕切片在氧化白藜芦醇微乳及各种溶液中处理后抗褐变的ΔE值。

图4、藕切片在CaCl₂及CaCl₂复配溶液处理后抗褐变的ΔE值。

图5、苹果切片在氧化白藜芦醇微乳及各种溶液中处理后抗褐变的a值。

图6、苹果切片在CaCl₂及CaCl₂复配溶液处理后抗褐变的a值。

图7、苹果切片在氧化白藜芦醇微乳及各种溶液中处理后抗褐变的ΔE值。

图8、苹果切片在CaCl₂及CaCl₂复配溶液处理后抗褐变的ΔE值。

附图1-4中附图标记含义：▽--未加目标物的空白微乳水溶液，■--0.05％(w/v)的维生素C水溶液，○--0.01％(w/v)4-己基间苯二酚水溶液，▲--0.01％(w/v)4-己基间苯二酚水溶液加0.05％(w/v)的维生素C，◆--氧化白藜芦醇微乳水溶液，☆--氧化白藜芦醇微乳水溶液加0.05％(w/v)的维生素C，□--0.05％(w/v)氯化钙水溶液，×--0.05％(w/v)氯化钙水溶液加氧化白藜芦醇微乳加0.05％(w/v)的维生素C，+--0.05％(w/v)氯化钙水溶液加0.01％(w/v)4-己基间苯二酚加0.05％(w/v)的维生素C。

具体实施方式

实施例1氧化白藜芦醇微乳的制备

氧化白藜芦醇是一种存在于桑科植物的天然酪氨酸酶抑制剂，具有很强的酪氨酸酶抑制活性，但其在水中却很难溶解并且不稳定，实验测得其在水中的溶解度为0.43mg/mL。

氧化白藜芦醇微乳制备工艺：选择表面活性剂为吐温80，助表面活性剂为PEG400，油相为丁酸乙酯。25℃下，将吐温80和PEG 400按质量比约2：1混合搅拌均匀，再将混合表面活性剂和丁酸乙酯按8：2的质量比混合，搅拌均匀后取5克混合液，用滴水法加入20克水使其含水量达到80％，搅拌均匀。加入稍过量的氧化白藜芦醇，搅拌24小时后经过8000r/min离心20分钟取上清液即为微乳。制备的得到的微乳体系澄清透明稳定，经高效液相色谱测得目标物氧化白藜芦醇含量为8.56mg/mL，溶解度提高了22倍。用激光粒度仪测定氧化白藜芦醇微乳的粒径为15～30nm。

高效液相色谱检测条件：

仪器：岛津LC-20AT液相色谱仪配以DAD检测器。

色谱柱：Grace C18(250×4.6mm，5μm)。

流动相：A相：含0.1％甲酸的去离子水；B相：甲醇。线性洗脱梯度：0min，20％B；10min，60％B；20min，100％B；25min，100％B；30min，20％B。流速：1.0mL/min，检测波长：307nm。

实施例2氧化白藜芦醇微乳液抗莲藕褐变实验

实验选用的微乳按实施例1中配方制得，再加水稀释微乳后，氧化白藜芦醇微乳水溶液浓度为0.01％(w/v)，选用溶液体积为200mL，组1是未加氧化白藜芦醇的空白微乳水溶液，组2是0.05％(w/v)的维生素C水溶液，组3是0.01％(w/v)的4-己基间苯二酚水溶液，组4是0.01％(w/v)4-己基间苯二酚水溶液加0.05％(w/v)的维生素C，组5是氧化白藜芦醇微乳水溶液，组6是氧化白藜芦醇微乳水溶液加0.05％(w/v)的维生素C，组7是0.05％(w/v)氯化钙水溶液，组8是0.05％(w/v)氯化钙水溶液加0.01％(w/v)4-己基间苯二酚加0.05％(w/v)的维生素C，组9是0.05％(w/v)氯化钙水溶液加氧化白藜芦醇微乳加0.05％(w/v)的维生素C。

实验方法为将藕去皮洗净后切成厚度为1～1.5厘米片状(无孔)，分成9组，每组2个，在各组水溶液中浸泡4分钟之后取出，擦干其表面残留水分，放入培养皿中并使用色差仪测其L值、a值和b值，25℃下保存。每隔3小时，6小时，9小时，12小时，24小时继续测其L值、a值和b值，通过L值和ΔE值的变化程度判断藕片的褐变程度。每组平行三次。

实施例3氧化白藜芦醇微乳液抗苹果褐变实验

实验方法为选择大小、颜色一致，无损伤和虫害的健康苹果。将完整苹果用去离子水洗干净，切成1～1.5厘米厚的苹果切片，分为9组，每组2片，放入不同实验组溶液中浸泡4分钟(各实验组溶液与实验例2中相同)，用滤纸吸干水分后放入培养皿中并使用色差仪测其L值、a值和b值，20℃下保存。每隔3小时，6小时，12小时，24小时继续测其L值、a值和b值，并按下述公式计算每个时间点的△E值，以L值和△E的变化判断苹果切片的褐变程度。每组平行3次。

综合藕切片和苹果切片抗褐变实验结果上，除组1外各组均具有不同程度的抗褐变效果，其中组4和组6的抗褐变效果最为明显且没有显著性差异；组8和组9则相对前者抗褐变效果有所降低，且两组间也没有明显差异，但明显高于组7；组3，组7抗褐变效果最为微弱；而组5的抗褐变效果则明显较组2和组3强。这表明，第一，氧化白藜芦醇微乳水溶液本身就具有很好抗褐变能力；第二，虽然V_C水溶液抗褐变效果微弱，但是V_C在氧化白藜芦醇微乳水溶液体系中能很好的促进这种抗褐变作用，起到协同作用；第三，氯化钙水溶液的抗褐变效果微弱，与氧化白藜芦醇和V_C复配时对抗褐变能力的提高也没有明显作用。综上所述，说明氧化白藜芦醇微乳液在果蔬抗酶促褐变方面有着潜在的应用前景。

实施例4含氧化白藜芦醇微乳的美白保湿乳液配制

氧化白藜芦醇微乳0.5％，葡萄籽提取物1.2％，1,3-丁二醇6.0％，硬脂酸0.4％，十六醇与十八醇混合物1.5％，聚山梨醇酯60 1.5％，甘油硬脂酸1.0％，三乙醇胺0.25％，V_C2.0％，V_E3.0％，矿物油5.0％，角鲨烯3.0％，山豆油2.0％，山梨坦倍半油酸酯0.6％，羧基乙烯聚合物0.15％，α-红没药醇0.5％，维生素B₃0.5％，玻尿酸1.0％，胶原蛋白2.0％，防腐剂适量，香料适量，去离子水加至100％。

实施例5含氧化白藜芦醇微乳的精华液配制

氧化白藜芦醇微乳液1.0％，光果甘草1.0％，绿茶提取物2.0％，甘油4.0％，维他命C配糖体2.0％，丁二醇3.0％，卡波姆纳1.5％，乙基玻尿酸1.0％，乙二氨四醋酸四钠0.25％，苯氧乙醇0.5％，去离子水加至100％。

虽然本发明已以较佳实施例公开如上，但其并非用以限定本发明，任何熟悉此技术的人，在不脱离本发明的精神和范围内，都可做各种的改动与修饰，因此本发明的保护范围应该以权利要求书所界定的为准。

Claims

1.一种氧化白藜芦醇微乳，其特征在于，含有基质、氧化白藜芦醇和水，所述基质由油相、表面活性剂和助表面活性剂组成；所述氧化白藜芦醇微乳，按质量分数计，含有表面活性剂10％～15％、助表面活性剂5％～10％、油相1％～5％、水相70％～80％，及氧化白藜芦醇；所述油相为丁酸乙酯，所述表面活性剂为吐温80，所述助表面活性剂聚乙二醇400。

2.根据权利要求1所述的氧化白藜芦醇微乳，其特征在于，所述水是去离子水或纯净水中任意一种。

3.根据权利要求1所述的氧化白藜芦醇微乳，其特征在于，还含有维生素C。

4.根据权利要求1所述的氧化白藜芦醇微乳，其特征在于，配方如下：4％的丁酸乙酯、10.6％的吐温80和5.4％的PEG 400，80％的水，及8.56mg/mL的氧化白藜芦醇。

5.根据权利要求4所述的氧化白藜芦醇微乳，其特征在于，还含有0.5g/L的维生素C。

6.一种制备权利要求1-4任一所述氧化白藜芦醇微乳的方法，其特征在于，按配比将表面活性剂和助表面活性剂混合为混合活性剂，再按比例加入油相并搅拌均匀，后取5g混合液，用滴水法加入20g水使其含水量达到80％，搅拌均匀；加入稍过量的氧化白藜芦醇，搅拌24小时后经过8000r/min离心20分钟，取上清液即为氧化白藜芦醇微乳。

7.权利要求1-5任一所述氧化白藜芦醇微乳在抑制果蔬的酶促褐变和制备化妆品中的应用。

8.含有权利要求1-5任一所述氧化白藜芦醇微乳的美白保湿乳液。

9.含有权利要求1-5任一所述氧化白藜芦醇微乳的护肤精华液。