CN104823860A - 一种藤本月季的组培快繁方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种藤本月季的组培快繁方法，该方法通过对藤本月季半木质化枝条，切段、灭菌后进行无菌苗诱导培养，待诱导出芽后，再将藤本月季无菌苗接种到增殖培养基上，待分化出不定芽后接种到生根培养基上，生根后进行移栽。即可获得大量优质藤本月季种苗。本发明所用方法可以周年进行藤本月季的快繁生产，所建立的再生快繁体系可以解决在优良种苗需求量大或繁殖材料少情况下，尤其是优选单株，难以采集到合适的枝条时，在短时间里不能获取大量优质种苗的技术难题，移栽成活率达90%-95%。该方法具有成活率高、生长速率快等特点，有效地提高了生产速率，节约了资源及成本，具有优质苗木快繁生产广泛的实用性。
Description
技术领域
本发明涉及园艺生物技术领域，尤其涉及一种藤本月季的组培快繁方法。
背景技术
藤本月季繁殖一般是采用扦插技术进行繁殖的，但优良品种扦插难以成活，在优良种苗需求量大或繁殖材料少的情况下，尤其是优选单株，难以采集到合适的枝条时，采用该技术能够周年进行生产，在短时间里可获取大量优质种苗。藤本月季与月季都是蔷薇属植物，但藤本月季为蔷薇亚科灌木，其植株生长快、高大，而月季植株比较矮小，因而两种植物的繁殖方法，尤其是组培快繁的培养基，差异很大。本发明提供的是一种以藤本月季茎段为外植体的植株再生方法，该方法简单易行、操作方便，繁殖、生根速度快，根系健壮、成活率高。
发明内容
本发明的目的在于，提供一种藤本月季的组培快繁方法，该方法通过选择腋芽饱满的藤本月季半木质化枝条，并切成单芽茎段，消毒后接种于MS培养基中进行无菌培养，直至腋芽萌发；将萌发的腋芽切下后，接种于培养基进行诱导丛生芽；然后将丛生芽切分成单芽，转入增殖培养基中；再将增殖的苗切成单芽，转接至生根培养基中进行生根培养，获得大量植株；最后将植株洗去根部附着的残留培养基，定植于温室苗床上，移栽成活率为90%-95%。该方法具有成活率高、生长速率快等特点，提高了效率，节约了资源，具有广泛的实用性。克服了目前在优良种苗需求量大或繁殖材料少情况下，尤其是优选单株，难以采集到合适的枝条时，在短时间里不能获取大量优质种苗的技术难题。
本发明所述的一种藤本月季的组培快繁方法，按下列步骤进行：
a、选择腋芽饱满的藤本月季半木质化枝条，并切成单芽茎段，用浓度为5%的洗衣粉水溶液搅动洗涤, 在流水条件下冲洗2-4h, 晾干后放置备用；
b、将步骤a中清洗好的茎段置于浓度75%的酒精溶液、20%+0.1%升汞溶液和80%+吐温80 2-3滴的混合液中消毒8min, 再用无菌水冲洗4-5遍,用灭菌滤纸吸干水分后,接种于MS固体培养基中进行无菌培养，直至腋芽萌发；
c、 将步骤b中萌发的腋芽切下后，接种于固体培养基MS+BA1.0mg/L+NAA0.05mg/L中，培育25d，培养温度25℃，光照强度2000LX，光照时间12h，诱导丛生芽；
d、将步骤c中的诱导的丛生芽切分成单芽，转入MS+BA1.0mg/L+IAA0.1mg/L的增殖固体培养基中，培养25d，培养温度24℃，光照强度2000LX，光照时间12h；
e、将步骤d中增殖的苗切成单芽，转接至1/2MS+IBA0.3mg/L的生根固体培养基中进行生根培养，培养温度24℃，光照强度3000LX，光照时间16h，20-25d获得植株；
f、将步骤e中获得的植株洗去根部附着的残留培养基，定植于草炭土∶珍珠岩＝2∶1的温室苗床上，栽培完浇透水，喷施50%多菌灵可湿性粉剂1000倍液进行消毒后，搭建小拱棚，覆上薄膜，每天通风1-2次，通风时间由10min逐渐增加至全天，揭膜前不用再浇水，只是在通风时稍喷一些清水在叶面上，20-25d后逐渐撤去薄膜，进行种苗正常管理。
本发明所述的一种藤本月季的组培快繁方法，该方法中所述的50%多菌灵可湿性粉剂为市售产品，其中多菌灵为河南省金亮精细化工有限公司生产。
本发明所述的一种藤本月季的组培快繁方法，该方法达到的效果为：通过对藤本月季半木质化枝条，切段、灭菌后进行无菌苗诱导培养，待诱导出芽后，再将藤本月季无菌苗接种到增殖培养基上，待分化出不定芽后接种到生根培养基上，生根后进行移栽。即可获得大量优质藤本月季种苗。本发明所用方法可以周年进行藤本月季的快繁生产，所建立的再生快繁体系可以解决在种苗需求量大或繁殖材料少情况下，尤其是优选单株，难以采集到合适的枝条时，在短时间里不能获取大量优质种苗的技术难题，移栽成活率达90%-95%。该方法具有成活率高、生长速率快等特点，有效地提高了生产速率，节约了资源及成本，具有优质苗木快繁生产广泛的实用性。
附图说明
图1为本发明组培苗移栽一个半月的图；
图2为本发明组培苗栽培在地里的图；
图3为本发明组培苗第二年开花的图。
具体实施方式
本发明并不限于下述的实施例。另外，在本发明中，如无特别说明，%皆指m/m质量百分比。
本发明中选用的所有试剂、工具和仪器都为本领域熟知市售产品，但不限制本发明的实施，其他本领域熟知的一些试剂和设备都可适用于本发明。
实施例1：
选择新疆农业科学院作为实施的地点：
a、选择腋芽饱满的藤本月季半木质化枝条，并切成单芽茎段，用体积浓度为5%的洗衣粉水溶液搅动洗涤, 流水条件下冲洗2h, 晾干后放置备用；
b、将步骤a中清洗好的茎段置于浓度75%的酒精溶液、20%+0.1%升汞溶液和80%+吐温80 2滴的混合液中消毒8min, 再用无菌水冲洗4遍,用灭菌滤纸吸干水分后,接种于MS培养基中进行无菌培养，直至腋芽萌发；
c、 将步骤b中萌发的腋芽切下后，接种于培养基MS+BA1.0mg/L+NAA0.05mg/L中，培育25d，培养温度25℃，光照强度2000LX，光照时间12h，诱导丛生芽；
d、将步骤c中的诱导的丛生芽切分成单芽，转入MS+BA1.0mg/L+IAA0.1mg/L的增殖培养基中，培养25d，培养温度24℃，光照强度2000LX，光照时间12h；
e、将步骤d中增殖的苗切成单芽，转接至1/2MS+IBA0.3mg/L的生根培养基中进行生根培养，培养温度24℃，光照强度3000LX，光照时间16h，20d即可获得大量植株；
f、将步骤e中植株洗去根部附着的残留培养基，定植于草炭土∶珍珠岩＝2∶1的温室苗床上，栽培完浇透水，喷施50%的多菌灵或石硫合剂1000倍液消毒后，搭建小拱棚，覆上薄膜，每天通风1-2次，通风时间由10min逐渐增加至全天，揭膜前不用再浇水，只是在通风时稍喷一些清水在叶面上，20-25d后逐渐撤去薄膜，进行种苗正常管理，移栽成活率为90%-95%。
实施例2：
选择新疆乌鲁木齐县为实施的地点：
a、选择腋芽饱满的藤本月季半木质化枝条，并切成单芽茎段，用洗衣粉加水搅动洗涤, 流水条件下冲洗3h, 晾干后放置备用；
b、将步骤a中清洗好的茎段置于浓度75%的酒精溶液20%+0.1%升汞溶液80%+吐温80 3滴混合液中消毒8min, 再用无菌水冲洗5遍,用灭菌滤纸吸干水分后,接种于MS培养基中进行无菌培养，直至腋芽萌发；
c、 将步骤b中萌发的腋芽切下后，接种于培养基MS+BA1.0mg/L+NAA0.05mg/L中，培育25d，培养温度25℃，光照强度2000LX，光照时间12h，诱导丛生芽；
d、将步骤c中的诱导的丛生芽切分成单芽，转入MS+BA1.0mg/L+IAA0.1mg/L的增殖培养基中，培养25d，培养温度24℃，光照强度2000LX，光照时间12h；
e、将步骤d中增殖的苗切成单芽，转接至1/2MS+IBA0.3mg/L的生根培养基中进行生根培养，培养温度24℃，光照强度3000LX，光照时间16h，23d即可获得大量植株；
f、将步骤e中植株洗去根部附着的残留培养基，定植于草炭土∶珍珠岩＝2∶1的温室苗床上，栽培完浇透水，喷施50%的多菌灵或石硫合剂1000倍液消毒后，搭建小拱棚，覆上薄膜，每天通风1-2次，通风时间由10min逐渐增加至全天，揭膜前不用再浇水，只是在通风时稍喷一些清水在叶面上，20-25d后逐渐撤去薄膜，进行种苗正常管理，移栽成活率为90%-95%。
实施例3：
选择新疆伊犁为实施的地点：
a、选择腋芽饱满的藤本月季半木质化枝条，并切成单芽茎段，用洗衣粉加水搅动洗涤, 流水条件下冲洗4h, 晾干后放置备用；
b、将步骤a中清洗好的茎段置于浓度75%的酒精溶液20%+0.1%升汞溶液80%+吐温80 3滴混合液中消毒8min, 再用无菌水冲洗4遍,用灭菌滤纸吸干水分后,接种于MS培养基中进行无菌培养，直至腋芽萌发；
c、 将步骤b中萌发的腋芽切下后，接种于培养基MS+BA1.0mg/L+NAA0.05mg/L中，培育25d，培养温度25℃，光照强度2000LX，光照时间12h，诱导丛生芽；
d、将步骤c中的诱导的丛生芽切分成单芽，转入MS+BA1.0mg/L+IAA0.1mg/L的增殖培养基中，培养25d，培养温度24℃，光照强度2000LX，光照时间12h；
e、将步骤d中增殖的苗切成单芽，转接至1/2MS+IBA0.3mg/L的生根培养基中进行生根培养，培养温度24℃，光照强度3000LX，光照时间16h，25d即可获得大量植株；
f、将步骤e中植株洗去根部附着的残留培养基，定植于草炭土∶珍珠岩＝2∶1的温室苗床上，栽培完浇透水，喷施50%的多菌灵或石硫合剂1000倍液消毒后，搭建小拱棚，覆上薄膜，每天通风1-2次，通风时间由10min逐渐增加至全天，揭膜前不用再浇水，只是在通风时稍喷一些清水在叶面上，20-25d后逐渐撤去薄膜，进行种苗正常管理，移栽成活率为90%-95%。
Claims (1)
1.一种藤本月季的组培快繁方法，其特征在于按下列步骤进行：
选择腋芽饱满的藤本月季半木质化枝条，并切成单芽茎段，用浓度为5%的洗衣粉水溶液搅动洗涤, 在流水条件下冲洗2-4h, 晾干后放置备用；
将步骤a中清洗好的茎段置于浓度75%的酒精溶液、20%+0.1%升汞溶液和80%+吐温80 2-3滴的混合液中消毒8min, 再用无菌水冲洗4-5遍,用灭菌滤纸吸干水分后,接种于MS固体培养基中进行无菌培养，直至腋芽萌发；
c、 将步骤b中萌发的腋芽切下后，接种于固体培养基MS+BA1.0mg/L+NAA0.05mg/L中，培育25d，培养温度25℃，光照强度2000LX，光照时间12h，诱导丛生芽；
d、将步骤c中的诱导的丛生芽切分成单芽，转入MS+BA1.0mg/L+IAA0.1mg/L的增殖固体培养基中，培养25d，培养温度24℃，光照强度2000LX，光照时间12h；
e、将步骤d中增殖的苗切成单芽，转接至1/2MS+IBA0.3mg/L的生根固体培养基中进行生根培养，培养温度24℃，光照强度3000LX，光照时间16h，20-25d获得植株；
f、将步骤e中获得的植株洗去根部附着的残留培养基，定植于草炭土∶珍珠岩＝2∶1的温室苗床上，栽培完浇透水，喷施50%多菌灵可湿性粉剂1000倍液进行消毒后，搭建小拱棚，覆上薄膜，每天通风1-2次，通风时间由10min逐渐增加至全天，揭膜前不用再浇水，只是在通风时稍喷一些清水在叶面上，20-25d后逐渐撤去薄膜，进行种苗正常管理。
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