CN104758334A - 南非叶及其提取物在治疗糖尿病药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了南非叶及其提取物在治疗糖尿病药物中的应用;本发明还公开了用于治疗糖尿病的药物,其特征在于:其有效成分中至少含有南非叶或其提取物。本发明公开了南非叶及其提取物在治疗糖尿病药物中的新应用,经过试验表明,南非叶及其提取物具有降血糖的功效,是一种可以控制血糖和改善糖尿病果明显的中药提取物,具有实际应用价值,并具有天然、高效、安全无毒的特点。
Description
技术领域
本发明涉及植物的药用新用途,特别涉及南非叶及其提取物在治疗糖尿病药物中的应用。
背景技术
糖尿病作为一种慢性代谢性疾病已经成为影响人类健康乃至危害生命的疾病之一。糖尿病是因为胰岛素分泌绝对或相对不足造成的,发病的原因不是单一的,而是多种因素综合所致,如遗传因素、免疫因素、环境因素、饮食习惯等。我国近期一项流行病学调查报告表明,中国糖尿病患病率高达9.7%,远高于全球平均患病率6.4%,甚至超过了美国的8%。按此患病率估算,我国糖尿病患病人数已超过9000万,即我国糖尿病患病人数约占全球糖尿病人数的1/3。糖尿病本身不一定造成危害,但长期血糖增高、大血管及微血管受损危及心、脑、肾、周围神经、眼睛、足等,据世界卫生组织统计,糖尿病并发症高达100多种,是目前已知并发症最多的一种疾病。因糖尿病死亡者有一半以上是心脑血管所致,10%是肾病变所致。因糖尿病截肢是非糖尿病的10~20倍。为此预防糖尿病的并发症是至关重要的社会问题。目前糖尿病治疗尚缺乏根治药物,治疗多以西药为主,但存在低血糖症、胃肠道反应等副作用;同时随着治疗时间的延长,降糖效果呈下降趋势;因此,寻找糖尿病新药,特别是从天然中药中筛选有效、安全、方便使用的降糖药物,一度为世界各国医药工作者所瞩目。使用现代科研技术探讨中药治疗糖尿病的机理对于临床治疗糖尿病及治疗药物的研制具有重要意义。
中医药是一个开放的体系,历史上许多药物都是外来之品,从中医药的角度对南非叶进行研究,可为扩展中药资源和发展中医药提供基础与依据。但到目前为止,未见南非叶在糖尿病治疗方面的研究,国内外对该属植物的化学和药理研究工作还不够系统和深入,而且乙醇提取南非叶中有效成分的作用机制尚未揭示,有关其药理活性的物质基础还不明确,这些都有待今后进行深入研究。这一生物资源还未被有效开发。有关其药理活性的物质基础还不明确,这些都有待今后进行深入研究。
发明内容
针对上述问题,本发明的目的在于公开南非叶及其提物物在治疗糖尿病中的药用新用途。
南非叶为菊科斑鸠菊属植物扁桃斑鸠菊(Vernonia amygdalinaDel.)的叶。扁桃斑鸠菊别名桃叶斑鸠菊、杏叶斑鸠菊、尖尾凤、苦胆叶,神奇叶、肝连、苦树、苦叶、苦茶叶、南非树等,原产于热带非洲,在尼日利亚等地被用来作为蔬菜食用。从马来西亚、新加坡移植到我国,所以中医界无记载也没有研究过其真正的疗效。民间用南非叶的水煎剂治疗发热、疟疾、腹泻、痢疾、肝炎、疥疮、咳嗽、头痛和胃痛等疾病,具有抗氧化性、保肝、促胃酸分泌、降血脂、抗疟原虫和抗癌作用。东南亚民间长用南非叶治疗乳腺癌、鼻咽癌、前列腺癌、肺癌、结肠癌等多种癌症。
为达到上述目的,本发明提供了南非叶及其提取物在治疗糖尿病药物中的应用。
优选的,所述的南非叶提取物为乙醇提取物。
进一步的,所述的南非叶提取物的提取方法为:取南非叶,干燥后,粉碎成粉,加乙醇水溶液冷浸后加热回流,然后合并滤液,再经减压回收提取溶剂后既得南非叶提取物。
进一步,所述的乙醇水溶液中乙醇体积浓度为30-95%,更优选为30-80%。
优选的,乙醇水溶液与南非叶干叶的用量比例为50ml乙醇水溶液:1g南非叶干叶。
优选的,所述加热回流的温度为70-90℃,时间为60-120分钟。
优选的,所述冷浸的温度为10-30℃。
本发明还包括一种用于治疗糖尿病的药物,其特征在于:其有效成分中含有南非叶或其提取物。
进一步的,可以采用常规方法,将有效量的南非叶或其提取物与片剂、膏剂、滴丸、针剂等常用辅料混合制备各种形式的治疗糖尿病的药物。
本发明公开了南非叶及其提取物在治疗糖尿病药物中的新应用,经过试验表明,南非叶及其提取物具有降血糖的功效,是一种可以控制血糖和改善糖尿病果明显的中药提取物,具有实际应用价值,并具有天然、高效、安全无毒的特点。
附图说明
图1为南非叶提取物对正常小鼠糖耐量实验影响结果,其中:
A为25、50mg/kg剂量影响结果;
B为75、100mg/kg剂量影响结果;
C为150、300、500mg/kg剂量影响结果;
图2为南非叶提取物对糖尿病小鼠空腹血糖浓度影响实验结果;
图3为南非叶提取物对糖尿病小鼠糖耐量实验影响结果,其中:
A为造模成功后第0天糖耐量实验结果;
B为造模成功后第7天糖耐量实验结果;
C为造模成功后第14天糖耐量实验结果;
D为造模成功后第21天糖耐量实验结果;
图4为南非叶原液对糖尿病小鼠空腹血糖的影响;
图5为南非叶原液糖尿病小鼠糖耐量实验对影响结果。
具体实施方式
以下通过特定的具体实例说明本发明的技术方案。应该说明的是,本发明提到的一个或多个方法步骤并不排斥在所述组合步骤前后还存在其他方法步骤或在这些明确提到的步骤之间还可以插入其他方法步骤;还应理解,这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。而且,除非另有说明,各方法步骤的编号仅为鉴别各方法步骤的便利工具,而非为限制各方法步骤的排列次序或限定本发明可实施的范围,其相对关系的改变或调整,在无实质变更技术内容的情况下,当亦视为本发明可实施的范畴。
实施例1:南非叶不同浓度乙醇提取物对正常小鼠血糖浓度的影响
在糖尿病治疗领域中通常疗效性能的优劣除用血糖浓度衡量外还可以用糖耐量水平测试来表征,正常小鼠糖耐量实验是指在给糖后于不同时间点检查小鼠的血糖浓度,其原理如下:
血糖浓度是指血液中糖的浓度,食物中的糖是机体中糖的主要来源,被人体摄入经消化成单糖吸收后,经血液运输到各组织细胞进行合成代谢和分解代谢,所以血糖浓度的高低可以在一定程度上表现机体对糖的代谢能力。糖耐量实验即在空腹的情况下给予一定葡萄糖后,于不同时间测量血糖浓度绘制糖耐量曲线观察机体对糖的代谢能力。给予一定药物治疗后,可改善机体对糖的代谢能力,所以可以通过对正常小鼠的糖耐量实验的实验结果分析可以检测药物对机体糖代谢能力的影响,并可以选择最佳治疗浓度。
试验方法:
1)45只昆明(KM)小鼠,18-22g,随机分成9组,每组5只,分别为normal组、Glip组、25mg/kg组、50mg/kg组、75mg/kg组、100mg/kg组、150mg/kg组、300mg/kg组、500mg/kg组;
2)称取南非叶干燥粉末30g,室温下(10~30℃)以体积浓度为30%乙醇480ml冷浸、85℃回流提取120min,取滤液,减压回收溶剂至干,取提取物适量,配制成25、50、75、100、150、300、500mg/ml溶液备用;
3)各组小鼠禁食不禁水2h后,检测各组小鼠血糖浓度,经过统计学分析无明显差异后,分别给予生理盐水0.2ml/kg,格列吡嗪2.5mg/kg,南非叶30%醇提物25mg/kg、50mg/kg、75mg/kg、100mg/kg、150mg/kg、300mg/kg、500mg/kg灌胃处理;
4)2h后分别给予每只小鼠葡萄糖2.0g/kg灌胃,于给糖后第0h、1h、2h、4h,尾尖静脉取血,检测各组小鼠的血糖浓度,绘制糖耐量曲线,选取最适宜给药浓度;
结果:实验结果表明50mg/kg、100mg/kg、150mg/kg剂量组抑制血糖升高效果显著,可进行治疗实验。(见表1、图1)
表1南非叶对正常小鼠糖耐量实验影响结果
(a为与对照组比较p<0.05,aa P<0.01;/表示无药物干预)
实施例2:糖尿病小鼠造模实验
链脲佐菌素(STZ)是一种氨基葡萄糖-亚硝基脲,是一种DNA烷基化试剂,能通过GLUT2葡萄糖转运蛋白(GLUT2glucose trasportprotein)独自进入细胞。对胰腺胰岛胰岛素诱发的β-细胞具毒性,STZ对一定种属动物的胰岛β细胞有选择性破坏作用,能诱发许多动物产生糖尿病,一般采用大鼠和小鼠制造动物模型。I型糖尿病与II型糖尿病动物模型的制备与STZ注射的给药方式有关:采用小剂量分次给药的方法,则建立与人类II型糖尿病表现相似的大鼠模型,如采用较大剂量一次性注射的给药方法,则建立与人类I型糖尿病表现相似的大鼠模型;其原理可能与胰岛的损伤程度有关。
实验方法:
1)90只KM小鼠,18-22g,适应性喂养1w后禁食不禁水12h;
2)分别给予链尿佐菌素65mg/kg腹腔注射(临用前溶解于0.1mol/L、pH 4.2的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液,现配现用,置于冰上);
3)连续注射3d后,禁食12h后尾尖取血检测小鼠空腹血糖,血糖浓度≥11.1mmol/l即为造模成功,并根据血糖浓度进行分组,即血糖浓度为11.1-20.0mmol/l为sub组,≥20.0mmol/l为severely组;
4)每组随机选取5只断头取血检测血清胰岛素含量(INS),计算胰岛素抵抗指数;
结果:90只小鼠成膜率为100%,其中69只为sub组,21只为severely组,其空腹血糖和空腹胰岛素结果如下,(见表2)
表2模型组空腹血糖浓度、空腹胰岛素浓度、胰岛素抵抗指数
实施例3南非叶提取物对糖尿病小鼠的影响
糖尿病的典型临床表现为“三多一少”,即多饮多食多尿,体重下降,所以除对小鼠测量空腹血糖浓度外,也可根据小鼠的摄食量、排尿量、饮水量、体质量来判断药物的治疗状况;
实验方法:
1)将上述sub组小鼠随机分成5组,即对照组、Glip组、南非叶提取物低、中、高剂量组;
2)对照组给予生理盐水0.2ml/kg灌胃处理,Glip组给予格列吡嗪2.5mg/kg灌胃处理,南非叶低、中、高剂量组分别给予南非叶30%醇提物50mg/kg、100mg/kg、150mg/kg灌胃处理,每日一次;
3)给药期间每日更换垫料,对各组小鼠的摄食量、饮水量、尿量进行测量;
计算方法为:摄食量=当日饲料量—次日饲料量;
饮水量=当日水量—次日水量;
尿量=(次日垫料重量—当日垫料重量)*80%;
4)分别于给药后第7天、14天、21天检测空腹血糖、空腹胰岛素含量和糖耐量实验(2.0g/kg葡萄糖灌胃后0min,30min、60min、120min检测血糖含量);
5)对各个检测指标进行统计学分析。
结果:见表3、表4、表5
表3南非叶对糖尿病小鼠摄食量、饮水量、排尿量、体质量影响实验结果
(a为与对照组比较p<0.05,aa P<0.01;/表示无药物干预)
表4南非叶对糖尿病小鼠空腹血糖浓度影响实验结果
(a为与对照组比较p<0.05,aa P<0.01;/表示无药物干预)
表5南非叶对糖尿病小鼠糖耐量实验影响结果
(a为与对照组比较p<0.05,aa P<0.01;/表示无药物干预)
实施例4南非叶水煎剂对糖尿病小鼠的影响
实验方法:
1)60只KM小鼠,18-22g,适应性喂养1w后禁食不禁水12h;
2)分别给予链尿佐菌素65mg/kg腹腔注射(临用前溶解于0.1mol/L、pH 4.2的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液,现配现用,置于冰上);
3)连续注射3d后,禁食12h后尾尖取血检测小鼠空腹血糖,血糖浓度≥11.1mmol/l即为造模成功,并根据血糖浓度进行分组,即血糖浓度为11.1-20.0mmol/l为造模成功;
4)将上述小鼠随机分成5组,即对照组、Glip组、南非叶提取物低、中、高剂量组;
5)对照组给予生理盐水0.2ml/kg灌胃处理,Glip组给予格列吡嗪2.5mg/kg灌胃处理,南非叶低、中、高剂量组分别给予上述南非叶水煎剂低、中、高计量(折合生药量分别相当于30%乙醇提取量50mg/kg、100mg/kg、150mg/kg),灌胃处理,每日一次;
6)分别于给药后第7天、14天、21天检测空腹血糖、空腹胰岛素含量和糖耐量实验(2.0g/kg葡萄糖灌胃后0min,30min、60min、120min检测血糖含量)。
结果:见表6、图4、表7、图5:
表6南非叶原液对糖尿病小鼠空腹血糖的影响
(a为与对照组比较p<0.05,aa P<0.01;/表示无药物干预)
表7南非叶水煎剂对糖尿病小鼠糖耐量实验影响结果
(a为与对照组比较p<0.05,aa P<0.01;/表示无药物干预)
经上述试验表明,南非叶或其乙醇提取物能够显著降低糖尿病小鼠的血糖,是一种可以控制血糖和改善糖尿病果明显的中药提取物,具有实际应用价值,并具有天然、高效、安全无毒的特点。可将之与其他药用辅料与添加剂混合制成各种剂型的糖尿病治疗药物或保健食品,在糖尿病治疗领域有广泛的应用潜能。
尽管结合优选实施方案具体展示和介绍了本发明,但所属领域的技术人员应该明白,在不脱离所附权利要求书所限定的本发明的精神和范围内,在形式上和细节上对本发明做出各种变化,均为本发明的保护范围。
Claims (10)
1.南非叶及其提取物在治疗糖尿病药物中的应用。
2.根据权利要求 1 所述的应用,其特征在于:所述的南非叶提取物为乙醇提取物。
3.根据权利要求 2 所述的应用,其特征在于:所述的南非叶提取物的提取方法为:取南非叶,干燥后,粉碎成粉,加乙醇水溶液冷浸后加热回流,然后合并滤液,再经减压回收提取溶剂后既得南非叶提取物。
4.根据权利要求 3所述的应用,其特征在于:所述的乙醇水溶液中乙醇体积浓度为30-95%。
5.根据权利要求 3所述的应用,其特征在于:所述的乙醇水溶液中乙醇体积浓度为30-80%。
6.根据权利要求 3所述的应用,其特征在于:乙醇水溶液与南非叶干叶的用量比例为50ml乙醇水溶液:1g南非叶干叶。
7.根据权利要求 3所述的应用,其特征在于:所述加热回流的温度为70-90℃,时间为60-120分钟。
8.根据权利要求 3所述的应用,其特征在于:所述冷浸的温度为10-30℃。
9.一种用于治疗糖尿病的药物,其特征在于:其有效成分中含有南非叶或其提取物。
10.根据权利要求 9所述的用于治疗糖尿病的药物,其特征在于:采用常规方法,将有效量的南非叶或其提取物与片剂、膏剂、滴丸或针剂混合制备各种形式的治疗糖尿病的药物。
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