CN102660620A

CN102660620A - 一种斑鸠菊苷d的提取方法

Info

Publication number: CN102660620A
Application number: CN2012101159177A
Authority: CN
Inventors: 刘东锋; 吴艳波
Original assignee: Nanjing Zelang Medical Technology Co Ltd
Current assignee: Nanjing Zelang Medical Technology Co Ltd
Priority date: 2012-04-19
Filing date: 2012-04-19
Publication date: 2012-09-12

Abstract

本发明涉及了一种斑鸠菊苷D的提取方法，采用生物酶解、膜分离、氧化铝短柱纯化斑鸠菊苷D，产品收率高，含量高，具体步骤为：取扁桃斑鸠菊的叶粉碎，加入3‰生物酶自然酶解，得酶解原料，酶解原料加入5-10倍量乙醇溶液微波提取2-3次，提取液加入超滤膜过滤，滤液减压浓缩，浓缩液加入水饱和正丁醇萃取2-5次，收集正丁醇层浓缩回收试剂，浓缩液加少许乙醚沉淀，滤出上述沉淀物，加95%乙醇回流溶解，溶解液过氧化铝活性炭混合短柱，下柱液减压干燥得斑鸠菊苷D。本方法工艺操作简单，能耗低、污染小，适合工业化生产。

Description

一种斑鸠菊苷D的提取方法

技术领域

本发明天然产物分离领域，尤其是涉及一种采用酶解和膜分离提取斑鸠菊苷D方法。

背景技术

斑鸠菊苷D，白色无定形粉末，属于甾体皂苷类物质，CAS号：171485-65-7，分子式：C₃₅H₅₂O₁₂，分子量：664.79，分子结构式：

。

现代药理研究表明：斑鸠菊苷D具有减肥作用，采用斑鸠菊苷D掺食小鼠14天，能显著减少小鼠体重的增加，并增加小鼠的排泄，在尸检中发现其肝重和肝及血浆中胆固醇的水平均有明显降低。

扁桃斑鸠菊Vernonia amygdalina Del.为菊科斑鸠属植物，俗名苦叶，它是一种小灌木，广泛生长在非洲的热带地区，其叶可入药，且可以当作蔬菜食用。在该植物生长的地区，扁桃斑鸠菊还可治疗发烧和肠胃等疾病，新鲜的叶子可用作堕胎药及泻下药。因此，扁桃斑鸠菊有很大的药用开发潜力。目前关于扁桃斑鸠菊中斑鸠菊苷D的提取报道尚未见报道。本发明的目的旨在填补这项空白。

发明内容

本发明要解决技术问题是提供一种斑鸠菊苷D的提取方法。

为解决上述问题，本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

1）酶解：取扁桃斑鸠菊的叶粉碎，加入3‰生物酶自然酶解，制得酶解原料；

2）提取：把上述酶解原料加入5-10倍量乙醇溶液微波提取2-3次，提取液加入超滤膜过滤，得滤液；

3）萃取：滤液减压浓缩，浓缩液加入水饱和正丁醇萃取2-5次，收集正丁醇层浓缩回收正丁醇，浓缩液加少许乙醚沉淀；

4）柱分离：滤出上述沉淀物，加95%乙醇回流溶解，溶解液过氧化铝活性炭混合短柱，下柱液回收乙醇，减压干燥得斑鸠菊苷D。

所述步骤1）酶解条件：生物酶可选含纤维素酶、淀粉酶和果胶酶的混合酶，用pH3-5酸性水溶解和原料拌湿，常温酶解12-36h。

所述步骤2）中的超滤膜为截留分子量6000-10000的管式复合膜。

所述步骤4）中的氧化铝活性炭柱所用氧化铝为100-200目中性氧化铝，活性炭为针剂类药用活性炭，混合比例6:1。

本发明优势在于：

1)发明采用生物酶酶解，可以破坏植物纤维，切断皂苷和大分子多糖的键合，提高收率；

2)发明采用膜分离除杂，属于物理方法，周期短，产品损失小；

3)发明采用氧化铝活性炭混合短柱，过柱速度快，比单纯的活性炭吸附效果好；

4)整个工艺操作简单，易于放大，无大量废液产生，环保。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1：

取扁桃斑鸠菊叶片1kg，粉碎，另取3g混合酶溶于pH4的盐酸水溶液，加入原料中拌匀，室温酶解36小时，得酶解原料；将酶解原料投入微波提取罐，加入10L70%乙醇溶液提取2次，合并两次滤液，经80目滤网过滤，滤液加入截留分子量6000的管式复合膜超滤，收集透过液，滤液减压浓缩，加适量水分散得浓缩液；浓缩液加水饱和正丁醇搅拌均匀，倒入分液漏斗，分层后收集正丁醇层，萃取2次，萃取液浓缩回收正丁醇，浓缩液加少许乙醚沉淀，得沉淀物；沉淀物加95%乙醇回流溶解，完全溶解后，过氧化铝活性炭混合短柱（混合比6:1），收集下柱液，减压浓缩干燥得斑鸠菊苷D类白色粉末4.1g，含量87.1%。

实施例2：

取扁桃斑鸠菊叶片1kg，粉碎，另取3g混合酶溶于pH3的盐酸水溶液，加入原料中拌匀，室温酶解12小时，得酶解原料；将酶解原料投入微波提取罐，加入5L70%乙醇溶液提取3次，合并三次滤液，经80目滤网过滤，滤液加入截留分子量6000的管式复合膜超滤，收集透过液，滤液减压浓缩，加适量水分散得浓缩液；浓缩液加水饱和正丁醇搅拌均匀，倒入分液漏斗，分层后收集正丁醇层，萃取2次，萃取液浓缩回收正丁醇，浓缩液加少许乙醚沉淀，得沉淀物；沉淀物加95%乙醇回流溶解，完全溶解后，过氧化铝活性炭混合短柱（混合比6:1），收集下柱液，减压浓缩干燥得斑鸠菊苷D类白色粉末3.8g，含量89.7%。

实施例3：

取扁桃斑鸠菊叶片5kg，粉碎，另取15g混合酶溶于pH5的盐酸水溶液，加入原料中拌匀，室温酶解24小时，得酶解原料；将酶解原料投入微波提取罐，加入40L70%乙醇溶液提取2次，合并两次滤液，经80目滤网过滤，滤液加入截留分子量10000的管式复合膜超滤，收集透过液，滤液减压浓缩，加适量水分散得浓缩液；浓缩液加水饱和正丁醇搅拌均匀，倒入分液漏斗，分层后收集正丁醇层，萃取4次，萃取液浓缩回收正丁醇，浓缩液加少许乙醚沉淀，得沉淀物；沉淀物加95%乙醇回流溶解，完全溶解后，过氧化铝活性炭混合短柱（混合比6:1），收集下柱液，减压浓缩干燥得斑鸠菊苷D类白色粉末18.3g，含量91.1%。

实施例4：

取扁桃斑鸠菊叶片5kg，粉碎，另取15g混合酶溶于pH4的盐酸水溶液，加入原料中拌匀，室温酶解30小时，得酶解原料；将酶解原料投入微波提取罐，加入35L70%乙醇溶液提取2次，合并两次滤液，经80目滤网过滤，滤液加入截留分子量8000的管式复合膜超滤，收集透过液，滤液减压浓缩，加适量水分散得浓缩液；浓缩液加水饱和正丁醇搅拌均匀，倒入分液漏斗，分层后收集正丁醇层，萃取3次，萃取液浓缩回收正丁醇，浓缩液加少许乙醚沉淀，得沉淀物；沉淀物加95%乙醇回流溶解，完全溶解后，过氧化铝活性炭混合短柱（混合比6:1），收集下柱液，减压浓缩干燥得斑鸠菊苷D类白色粉末20.4g，含量85.4%。

实施例5：

取扁桃斑鸠菊叶片10kg，粉碎，另取30g混合酶溶于pH5的盐酸水溶液，加入原料中拌匀，室温酶解25小时，得酶解原料；将酶解原料投入微波提取罐，加入60L70%乙醇溶液提取3次，合并三次滤液，经80目滤网过滤，滤液加入截留分子量6000的管式复合膜超滤，收集透过液，滤液减压浓缩，加适量水分散得浓缩液；浓缩液加水饱和正丁醇搅拌均匀，倒入分液漏斗，分层后收集正丁醇层，萃取5次，萃取液浓缩回收正丁醇，浓缩液加少许乙醚沉淀，得沉淀物；沉淀物加95%乙醇回流溶解，完全溶解后，过氧化铝活性炭混合短柱（混合比6:1），收集下柱液，减压浓缩干燥得斑鸠菊苷D类白色粉末28.6g，含量93.3%。

Claims

1.一种斑鸠菊苷D的提取方法，其特征在于包含以下步骤：

2.如权利要求1所述斑鸠菊苷D的提取方法，其特征在于所述步骤1）酶解条件：生物酶可选含纤维素酶、淀粉酶和果胶酶的混合酶，用pH3-5酸性水溶解和原料拌湿，常温酶解12-36h。

3.如权利要求1所述斑鸠菊苷D的提取方法，其特征在于所述步骤2）中的超滤膜为截留分子量6000-10000的管式复合膜。

4.如权利要求1所述斑鸠菊苷D的提取方法，其特征在于所述步骤4）中的氧化铝活性炭柱所用氧化铝为100-200目中性氧化铝，活性炭为针剂类药用活性炭，混合比例6:1。