CN104703628A - 合成萝卜硫烷的方法 - Google Patents

合成萝卜硫烷的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN104703628A
CN104703628A CN201380040262.4A CN201380040262A CN104703628A CN 104703628 A CN104703628 A CN 104703628A CN 201380040262 A CN201380040262 A CN 201380040262A CN 104703628 A CN104703628 A CN 104703628A
Authority
CN
China
Prior art keywords
cyclodextrin
sulforaphane
complex
catalyst
compound
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201380040262.4A
Other languages
English (en)
Other versions
CN104703628B (zh
Inventor
萨哈戴瓦·雷迪·达米莱迪
卡帕卡珀·安布鲁瓦兹·阿库尔
斯塔克·K·尼尔森
阿尔贝托·罗杰·弗里斯比
彼得·怀亚特·纽瑟姆
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Fa Magela Laboratories Inc
PharmAgra Labs Inc
Original Assignee
Fa Magela Laboratories Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Fa Magela Laboratories Inc filed Critical Fa Magela Laboratories Inc
Publication of CN104703628A publication Critical patent/CN104703628A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN104703628B publication Critical patent/CN104703628B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/26—Cyanate or isocyanate esters; Thiocyanate or isothiocyanate esters
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
    • A61K31/716—Glucans
    • A61K31/724—Cyclodextrins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/69—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit
    • A61K47/6949—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit inclusion complexes, e.g. clathrates, cavitates or fullerenes
    • A61K47/6951—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit inclusion complexes, e.g. clathrates, cavitates or fullerenes using cyclodextrin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B82—NANOTECHNOLOGY
    • B82Y—SPECIFIC USES OR APPLICATIONS OF NANOSTRUCTURES; MEASUREMENT OR ANALYSIS OF NANOSTRUCTURES; MANUFACTURE OR TREATMENT OF NANOSTRUCTURES
    • B82Y5/00—Nanobiotechnology or nanomedicine, e.g. protein engineering or drug delivery
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C315/00—Preparation of sulfones; Preparation of sulfoxides
    • C07C315/02—Preparation of sulfones; Preparation of sulfoxides by formation of sulfone or sulfoxide groups by oxidation of sulfides, or by formation of sulfone groups by oxidation of sulfoxides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C331/00—Derivatives of thiocyanic acid or of isothiocyanic acid
    • C07C331/16—Isothiocyanates
    • C07C331/18—Isothiocyanates having isothiocyanate groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C331/20—Isothiocyanates having isothiocyanate groups bound to acyclic carbon atoms of a saturated carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/0006—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid
    • C08B37/0009—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid alpha-D-Glucans, e.g. polydextrose, alternan, glycogen; (alpha-1,4)(alpha-1,6)-D-Glucans; (alpha-1,3)(alpha-1,4)-D-Glucans, e.g. isolichenan or nigeran; (alpha-1,4)-D-Glucans; (alpha-1,3)-D-Glucans, e.g. pseudonigeran; Derivatives thereof
    • C08B37/0012—Cyclodextrin [CD], e.g. cycle with 6 units (alpha), with 7 units (beta) and with 8 units (gamma), large-ring cyclodextrin or cycloamylose with 9 units or more; Derivatives thereof
    • C08B37/0015—Inclusion compounds, i.e. host-guest compounds, e.g. polyrotaxanes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08L—COMPOSITIONS OF MACROMOLECULAR COMPOUNDS
    • C08L5/00—Compositions of polysaccharides or of their derivatives not provided for in groups C08L1/00 or C08L3/00
    • C08L5/16—Cyclodextrin; Derivatives thereof

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Nanotechnology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
  • Catalysts (AREA)

Abstract

Description

合成萝卜硫烷的方法
发明领域
本发明涉及合成萝卜硫烷(sulforaphane)的方法。本发明还涉及合成稳定的萝卜硫烷-环糊精络合物的方法。
发明背景
根据美国国家癌症研究所，萝卜硫烷被认为是40种最有前景的抗癌剂之一(Kelloff G.J，Crowell J.A，Steele V.E，Lubet R.A，Malone W.A，BooneC.W，Kopelovich L，Hawk E.T，Lieberman R，Lawrence J.A，Ali I，Viner J.L，Sigman C.C，J.Nutr，2000，130，467)。还已知其具有抗微生物性质。因此，萝卜硫烷吸引了作为用于治疗和/或预防癌症和微生物感染的潜在药剂的兴趣。
萝卜硫烷被发现在十字花科蔬菜中，比如卷心菜、花椰菜、花椰菜芽、抱子甘蓝、菜花、菜花芽、白菜、甘蓝菜、羽衣甘蓝、芝麻菜、球茎甘蓝、芥末、萝卜、红萝卜和水田芥。在植物中，其以结合形式作为萝卜硫苷、芥子苷存在。事实上，萝卜硫烷常常通过酶促反应在植物细胞损伤之后从萝卜硫苷形成。
产生萝卜硫烷的各种合成方法在本领域中是已知的。萝卜硫烷早在1948年由Schmid和Karrer合成(Schmid H.和Karrer，P.；Helvetica ChimicaActa.1948；31；6：1497-1505)。Schmid合成导致外消旋混合物。
各种可选的合成程序已经由例如Vermeulen及同事(Vermeulen M，Zwanenburg B，Chittenden G.J.F，Verhagen H，Eur.J.Med.Chem，2003，38(78)，729-737)，Conaway及同事((Conaway C.C，Wang C.X，Pittman B，Yang Y.M，Schwartz J.E，Tian D，McIntee E.J，Hecht S.S，Chung F.L，Cancer Research，2005，65(18)，8548-8557)，Kuhnert及同事(Kuhnert N和Lu Y，Journal ofLabelled Compounds&Radiopharmaceuticals 2004，47(8)，501-507)，Rajski及同事(Mays J.R和Rajski，S.R.ChemBioChem，2008，9(5)，729-747和WO2008/008954)，Christopher及同事(Christopher A.D′Souza，Shantu Amin，Dhimant Desai，Journal of Labelled Compounds&Radiopharmaceuticals，2003，46(9)，851-859)，Takayuki及同事(Joon-Kwan M，Jun-Ran K，Young-Joon A和Takayuki S，Journal of Agricultural and Food Chemistry 2010，58(11)，6672-6677)，和Rabhi及同事(WO 2008015315和US 0135618A1)，Cao及他的同事(Tong Jian Ding，Ling zhou，Xiao Ping Cao，ChineseChemical Letters，2006，17(9)，1152-1154)，和Chen及同事(Xin Chen，Zhengyi Li，Xiaoqiang Sun，Hongzhao Ma，Xiaoxin Chen，Jie Ren，Kun Hu，Synthesis，2011，24，3991-3996和CN 102249968)报告。
尽管萝卜硫烷已经通过各种不同的方法来合成，但报告的方法的大多数经受一些缺点，比如，例如，低收率、有危险的并且潜在有害的试剂(比如剧毒的硫光气和具有令人不舒服的并且刺激气味的挥发性液体)的使用、级别I或II溶剂的使用、费力的处理/纯化程序以及不需要的副产物(比如萝卜硫烷的不可分离的二砜/磺酰基衍生物)。这些方法因此不适合于萝卜硫烷的高效的大规模合成。
因此，有对解决现有技术方法的上述缺点的一个或更多个的用于合成萝卜硫烷的可选方法的需要。特别地，有对可大规模实施的合成方法的需要。这种方法将理想地为：
(i)高效的，即其给出具有良好纯度水平的萝卜硫烷的商业可行的收率并且利用少量的合成步骤；
(ii)成本有效的，即利用低成本反应物和反应条件；
(iii)环境可接受的并且安全实施的，即其不使用太有毒的试剂或溶剂。
与萝卜硫烷有关的一个另外并且显著的问题是其固有的不稳定性。萝卜硫烷以不稳定的油的形式存在，其在正常条件下快速降解。这使得萝卜硫烷格外难以制造和分配。
因此，还有对容易经得起随后加工步骤以提供产生的萝卜硫烷的更加稳定形式的合成萝卜硫烷的方法的需要。
稳定萝卜硫烷的一种特别有效的方法包括萝卜硫烷-环糊精络合物的形成。在这点上，其全部内容特此通过引用并入的US 7,879,822B2描述具有良好稳定性的萝卜硫烷-环糊精络合物的制备。
因此，本发明的另外的目的是提供使萝卜硫烷能够被合成为通过萝卜硫烷-环糊精络合物的形成来容易稳定的容易方法。
发明概述
根据本发明的第一方面，提供合成萝卜硫烷的方法，方法包括：
在含水溶剂中，使式A的化合物：
与氧化剂在催化剂的存在下反应。
本发明的方法具有超过常规的产生萝卜硫烷的现有技术方法的许多优点。首先，该方法是高效的并且提供高收率的期望的萝卜硫烷最终产物，而不显著产生作为副产物的磺酰基衍生物(糖芥素)。其次，反应可在温和的水性条件下进行。含水溶剂比如水的使用特别有利，因为其避免昂贵的和/或潜在危险的溶剂的使用。其还能够实现较小危险的氧化剂比如过氧化氢的使用。此外，含水溶剂的使用使得反应理想地适合用于在原位快速以及高效地形成稳定的萝卜硫烷-环糊精络合物(通过简单混合萝卜硫烷最终产物与环糊精的水溶液以形成该络合物)。
本发明的方法还适合于大规模制造萝卜硫烷。
在另一方面中，本发明涉及通过如本文定义的方法形成的、可获得的、获得的或者直接获得的萝卜硫烷。
在又一方面中，本发明提供用于制备萝卜硫烷与环糊精的络合物的方法，所述方法包括：
(i)在含水溶剂中，使式A的化合物：
与氧化剂在催化剂的存在下反应，以形成萝卜硫烷；以及
(ii)使来自步骤(i)的萝卜硫烷与环糊精在含水溶剂中混合，以形成萝卜硫烷-环糊精络合物的沉淀物。
在又一方面中，本发明提供通过如本文定义的方法形成的、可获得的、获得的或者直接获得的萝卜硫烷-环糊精络合物。
在另一方面中，本发明涉及用于治疗和/或预防微生物感染和/或癌症的如本文定义的萝卜硫烷-环糊精络合物。
在另一方面中，本发明提供治疗和/或预防微生物感染和/或癌症的方法，所述方法包括对需要这种治疗的个体施用治疗有效量的如本文定义的萝卜硫烷-环糊精络合物。
在另一方面中，本发明涉及包含如本文定义的萝卜硫烷-环糊精络合物和一种或更多种另外的药物赋形剂的药物组合物。
发明详述
定义
除非另有说明，否则本说明书和权利要求中使用的下列术语具有以下陈述的下列含义。
“治疗有效量”意指当被施用至受试者以用于治疗本文提到的疾病或状况时足以实现对疾病或状况的这种治疗的化合物的量。“治疗有效量”将取决于化合物的形式(例如，盐形式)、涉及的疾病或状况及其严重性、以及要被治疗的受试者的年龄、体重等而改变。
本文使用术语“个体”来意指温血哺乳动物。因此，本发明的化合物可用于人和/或兽医应用。在特定实施方案中，受试者是人。
本文使用术语糖芥素来指具有以下显示的结构的化合物：
产生萝卜硫烷的方法
将理解的是，在本文描述的合成方法的描述中，所有推荐的反应条件，包括含水溶剂的选择、反应气氛、反应温度、实验持续时间和采用的任何处理程序，可由本领域技术人员来选择。有机合成领域的技术人员还将理解的是，在分子的各个部分上存在的官能度必须与利用的试剂和反应条件相容。
如以上指示，本发明提供合成萝卜硫烷的方法，方法包括：
在含水溶剂中，使式A的化合物：
与氧化剂在催化剂的存在下反应。
所得的萝卜硫烷化合物具有以下显示的结构：
萝卜硫烷可被收集并且恰当地储存以用于随后使用，或更优选地，其可直接或在原位与环糊精混合以形成如本文另外定义的稳定的萝卜硫烷-环糊精络合物。这避免需要费力纯化萝卜硫烷最终产物。
任何合适的含水溶剂可被用于反应。在本发明的实施方案中，溶剂是水，但水和一种或更多种可与水混溶的溶剂的混合物也可在某些情况下被使用。
合适地，含水溶剂在反应之前被脱气。可使用本领域已知的用于使含水溶剂脱气的任何合适的程序。例如，溶剂可通过用惰性气体(比如氮气或氩气)喷射溶剂、使溶剂回流或者通过利用真空或超声脱气程序来脱气。
任何合适的氧化剂可用于反应，条件是其能够在水环境中使式A的化合物氧化为萝卜硫烷。例如，氧化剂可选自过氧化氢或水溶性的或可与水混溶的过酸，比如间氯过氧化苯甲酸(mCPBA)。在实施方案中，氧化剂是过氧化氢。过氧化氢特别合适，因为其以本发明的方法学反应以形成萝卜硫烷和水作为最终产物(即没有不需要的副产物形成)。
合适地，氧化剂以足以使全部式A的化合物氧化成萝卜硫烷的量存在。典型地，将需要约一摩尔当量(相对于式A的化合物)的氧化剂，尽管可能使用轻微过量的氧化剂，如果控制条件以防止或限制磺酰基副产物的形成的话。例如，在某些情况下，可使用1摩尔当量至2摩尔当量的氧化剂(相对于式A的化合物)，更合适地使用1摩尔当量至1.5摩尔当量的氧化剂，并且甚至更合适地使用1摩尔当量至1.1摩尔当量的氧化剂。
反应还在合适催化剂的存在下进行。可使用任何与含水溶剂相容的并且能够促进式A的化合物的氧化的催化剂。催化剂必须在水环境中有活性并且可为均相的或多相的。合适的催化剂的实例包括酸催化剂比如环糊精和/或漂白土(Fuller’s Earth)；以及有机酸或无机酸，比如，例如，抗坏血酸、甲酸、乙酸和/或硫酸。
在特定实施方案中，催化剂是环糊精。任何合适的环糊精可被用作催化剂。例如，环糊精可选自W6(α)环糊精(六个糖环分子)、W7(β)环糊精(七个糖环分子)、W8(γ)环糊精(八个糖环分子)、其衍生物(比如羟基烷基衍生物，例如羟丙基环糊精)及其混合物中的一种或更多种。本领域已知的其他环糊精也被考虑为在合成方法中有用，并且本发明不应限于列举的特定的环糊精。
在本发明的实施方案中，作为催化剂使用的环糊精是α-环糊精。
需要的催化剂的量将取决于氧化剂、催化剂的性质和使用的反应条件而改变。合适地，存在0.0001摩尔当量至1.0摩尔当量的催化剂(相对于式A的化合物)，以及更合适地，存在0.005摩尔当量至0.2摩尔当量的催化剂，以及甚至更合适地，存在0.005摩尔当量至0.05摩尔当量的催化剂。
在本发明的其中氧化剂是过氧化氢的实施方案中，过氧化氢被缓慢合适地添加至反应混合物并且反应混合物的温度维持在15℃或更低，或者更优选地10℃或更低。合适地，在过氧化氢的添加期间监测温度，并且调节添加速率以确保温度保持在期望的极限值内。
在本发明的实施方案中，氧化剂是过氧化氢，溶剂是水，并且催化剂选自环糊精、漂白土和酸，比如抗坏血酸、甲酸、乙酸和/或硫酸。在本发明的特定实施方案中，氧化剂是过氧化氢，溶剂是水，以及催化剂是环糊精、特别为α-环糊精。在这类实施方案中，式A的化合物和催化剂可溶解在水中并且冷却至小于15℃，或更优选地小于10℃(例如，在1℃和2℃之间)，并且然后过氧化氢水溶液可以控制方式被添加至冷却的溶液中，以便温度不超过15℃，或更优选地10℃。然后反应可被搅拌并且允许进行持续合适的时间，例如在1小时和48小时之间。然后萝卜硫烷产物可被收集或用于随后处理步骤。
原材料，即式A的化合物，可从商业上获得(其可作为天然产品或合成产品从各个供应商获得)和/或通过本领域已知的技术制备。例如，式A的化合物可从以下显示的式B的化合物
作为中间体通过Vermeulen及同事(Eur.J.Med.Chem，2003，38(78)，729-737)，D′Souza及同事(Journal of Labelled Compounds&Radiopharmaceuticals，2003，46(9)，851-859)，Cao及他的同事(ChineseChemical Letters，2006，17(9)，1152-1154)，和Chen及同事(Synthesis，2011，24，3991-3996和CN 102249968)描述的程序被制备。
在本发明的实施方案中，式A的化合物通过使式B的化合物
与二硫化碳在合适的溶剂(例如THF)中以及在合适的碱(比如Et3N)和合适的催化剂(比如过氧化氢)的存在下反应。
在特定实施方案中，溶剂是THF，碱是三乙胺，以及氧化剂是过氧化氢。
在另外的实施方案中，式B的化合物和碱(例如三乙胺)在低温(例如，低于25℃、更优选地低于0℃、并且甚至更优选地低于-10℃)下被溶解在溶剂(例如THF)中。然后将二硫化碳添加至反应混合物。合适地，在添加二硫化碳的同时控制温度(例如，使其保持低于25℃，或更优选地低于5℃，并且甚至更优选地低于0℃)。可以控制的速率添加二硫化碳，以便保持反应混合物的温度低(例如，其可在例如0.5小时至4小时的时期内逐滴添加)。然后反应混合物可被加热(例如，至5℃和25℃之间，并且优选地至5℃和20℃之间)，并且然后添加氧化剂(例如过氧化氢)。
所得的式A的化合物的粗产物可使用本领域众所周知的技术来收集、洗涤以及纯化(例如通过蒸馏)以给出纯的式A的化合物。
产生萝卜硫烷-环糊精络合物的方法
本发明还提供用于制备萝卜硫烷和环糊精的络合物的方法，所述方法包括：
(i)在含水溶剂中，使式A的化合物：
与氧化剂在催化剂的存在下反应，以形成萝卜硫烷；以及
(ii)使来自步骤(i)的萝卜硫烷的水溶液与环糊精的水溶液在含水溶剂中混合，以形成萝卜硫烷-环糊精络合物的沉淀物。
反应的步骤(i)是以上定义的合成萝卜硫烷的方法。在步骤(i)中使用含水溶剂的一个特定优点是一旦反应完成，其使环糊精的水溶液能够简单添加至反应混合物，以便形成稳定的萝卜硫烷-环糊精络合物。因此，本方法提供通过其可使萝卜硫烷稳定的简单、有效以及快速的手段。
萝卜硫烷-环糊精络合物在US 7,879,822B2中被描述，其全部内容特此通过引用并入。
本发明的方法合适地包括以下另外的步骤：收集萝卜硫烷-环糊精络合物的沉淀物并且然后任选地洗涤和干燥沉淀物。沉淀物可通过本领域众所周知的技术比如通过过滤来收集。
用于在水溶液中形成萝卜硫烷-环糊精络合物的合适的反应条件根据US 7,879,822B2在本领域中是已知的。
在某些实施方案中，所得的络合物的纯度可通过重结晶被进一步增加。
任何合适的环糊精可用于与萝卜硫烷形成络合物。在其中步骤(i)中的催化剂为环糊精的实施方案中，那么用于形成步骤(ii)中的络合物的环糊精可与作为步骤(i)中的催化剂使用的环糊精相同或不同。通过实例的方式，用于本发明的方法中的环糊精可选自W6(α)环糊精(六个糖环分子)、W7(β)环糊精(七个糖环分子)、W8(γ)环糊精(八个糖环分子)、其衍生物(比如羟基烷基衍生物，例如羟丙基环糊精)及其混合物中的一种或更多种。本领域已知的其他环糊精也被考虑为在本方法中有用，并且本发明不应限于列举的特定的环糊精。
在本发明的实施方案中，用于在步骤(ii)中与萝卜硫烷形成络合物的环糊精是α-环糊精。
在与从步骤(i)获得的萝卜硫烷混合之前，在本方法的步骤(ii)中利用的环糊精可溶解在含水溶剂中，比如水。环糊精在溶剂中的溶解/分散可通过本领域已知的任何方法来完成。例如，在某些实施方案中，环糊精可通过使环糊精放置在溶剂中并且加热混合物来完全或部分溶解在含水溶剂中。在另外的实施方案中，可利用超声来使环糊精完全或部分溶解在溶剂中。在另外的实施方案中，可利用多种溶解方法来达到由使用者期望的溶解水平，例如，通过利用超声结合加热溶剂。
一旦萝卜硫烷和环糊精已经在方法的步骤(ii)中一起添加并且准备被混合，可利用任何混合方法。例如，组分可通过搅拌、超声、搅动或本领域已知的其他方法来混合。在某些实施方案中，不止一种混合的方法可一起被使用。
混合的持续时间可基于利用的特定混合方法而改变。例如，如果利用搅拌或超声，则萝卜硫烷和环糊精可被混合持续从约2小时至约48小时。在其他实施方案中，萝卜硫烷和环糊精可通过搅拌器或超声混合持续约6小时至约15小时。
如以上讨论的，可利用多种混合方法来混合萝卜硫烷和环糊精。例如，在某些实施方案中，可利用超声结合搅拌。在这类实施方案中，在用搅拌器混合从约2小时至约48小时期间，可利用超声持续从约0.01小时至约1.5小时的时间段。
萝卜硫烷和环糊精的初始混合在环境温度下，例如在15℃和25℃之间。然而，在特定实施方案中，在萝卜硫烷和环糊精已经被混合之后，混合物被冷却以稳定形成的沉淀物。使用的特定萝卜硫烷和环糊精可决定冷却需要的持续时间和严重程度。例如，混合物可被冷却至约-10℃至约20℃的范围内、更合适地在约-8℃至约10℃之间、甚至更合适地在约-5℃至约4℃之间的温度。冷却的持续时间可改变并且可例如从约0.1小时至约24小时。
在特定实施方案中，混合物可被冷却至从约-5℃至约2℃的温度，任选地持续约0.5小时至约4小时的时间段。然后可过滤沉淀物，以获得增加的纯度的萝卜硫烷-环糊精络合物。
合适地，所得络合物中萝卜硫烷对环糊精的摩尔比在0.4∶1至1∶1、合适地0.8∶1至1∶1、以及更合适地0.9∶1至1∶1、0.95∶1至1∶1或0.98∶1至1∶1的范围内。
在另外的实施方案中，所得络合物可被重结晶以获得具有甚至更大纯度水平的萝卜硫烷的络合物。在这类实施方案中，可利用本领域中已知的重结晶的任何方法。例如，在某些实施方案中，重结晶可通过冷却所得混合物、通过在第二溶剂中溶解所得混合物、通过化学反应、通过改变混合物的pH或通过蒸发溶剂来完成。使用者的具体要求可决定利用的特定方法。
在某些实施方案中，重结晶的方法可包括在溶剂中溶解形成的固体颗粒。这种溶解可通过本领域已知的任何方法来完成。例如，在某些实施方案中，溶解可通过超声来完成。超声可在升高的温度(即从约50℃至约100℃)下来完成，并且可继续直到没有固体颗粒残余为止。此外，可利用本领域中已知的任何溶剂，包括可用于与溶解环糊精结合的以上指示的那些溶剂。
在溶解已经被基本上完成之后，混合物可被保持在室温下以允许固体自溶液沉淀出。取决于利用的材料，其中混合物保持在室温下的时间可改变。例如，如果利用萝卜硫烷，则大部分固体可在被保持在室温下的一个小时内自溶液沉淀出。在其他实施方案中，溶液可花费多于或少于一小时来充分允许络合物固体自溶液沉淀出。
如以上讨论的，固体然后可被冷却以帮助络合物的形成和稳定。使用的特定络合物可决定冷却必需的量。例如，在某些实施方案中，混合物可在冷却装置中被冷却任选地持续从约0.1小时至约2小时的时间，所述冷却装置为比如例如维持在从约-10℃至约20℃的温度下的冰箱。在其他实施方案中，混合物可在维持在从约2℃至约6℃的温度下的冷却装置中被冷却持续在约0.5小时至1小时之间的时间。在络合物已经充分结晶之后，其可然后被过滤以产生甚至更大纯度的萝卜硫烷-环糊精络合物。
药物组合物和治疗方法
在另一方面中，本发明涉及对需要这种治疗的受试者提供抗癌和/或抗微生物治疗的方法。方法包括对需要这种治疗的受试者施用治疗有效量的本文定义的纯度增加的萝卜硫烷-环糊精络合物。
治疗方法的第一组分为根据本文定义的方法制备的萝卜硫烷-环糊精络合物。在本发明中有用的组分可具有任何纯度或级别，只要制剂具有适合于药物使用的品质和稳定性并且不影响所得制剂的生理活性或安全性。
方法还可包括施用其他药学上可接受的组分。本文形容词般使用的术语“药学上可接受的”意指修饰名词适合用于药物产品。
当由本方法产生的萝卜硫烷-环糊精络合物连同药学上可接受的载体或药学上可接受的赋形剂(所述术语可在本文可互换地使用)被供应时，可形成药物组合物。本发明的药物组合物可通过药剂学任何众所周知的技术，例如通过混合组分来制备。
本发明的药物组合物涉及适合于预防或治疗本文描述的紊乱的组合物。
选择药学上可接受的载体和赋形剂，使得来自药物化合物的副作用最小化并且化合物的性能不被抵消或抑制至治疗无效的这种程度。药学上可接受的载体包括但不限于生理盐水、林格氏液(Ringer′s)、磷酸盐溶液或缓冲液、缓冲盐水和本领域已知的其他载体。药物组合物还可包括稳定剂、抗氧化剂、着色剂和稀释剂。
载体在与组合物的其他成分相容的意义上应为可接受的并且不对接受者有毒。载体可为固体或液体或两者，并且可与化合物一起被配制为单位剂量的组合物，例如片剂，其可包含从按重量计约0.01％至约95％的活性化合物。
药学上可接受的载体还可基于化合物的期望施用途径来选择。期望施用途径可为口服、肠内、肠胃外、可注射、口腔和局部中的一种或更多种。例如，在实施方案中，载体适合于口服施用。在某些实施方案中，组合物包括适合于促进化合物递送至胃肠道或肠道的载体或另外的剂。
特别地，本发明的药物组合物或它们被包括在其中的组合物可例如作为片剂、包衣片、糖衣丸、含片、锭剂、水性或油性悬浮液、可分散的粉末或颗粒、乳剂、硬或软胶囊、或糖浆剂或酏剂经口施用。意图口服使用的组合物可根据本领域已知的用于制造药物组合物的任何方法来制备，并且这类组合物可包含选自由甜味剂、调味剂、着色剂和防腐剂组成的组的一种或更多种剂，以便提供药学上可接受的且美味的制剂。片剂可包含与适合于制造片剂的无毒的药学上可接受的赋形剂混合的活性成分。例如，这些赋形剂可为惰性稀释剂，比如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；造粒剂和崩解剂，例如玉米淀粉或海藻酸；粘结剂，例如淀粉、明胶或阿拉伯树胶以及润滑剂，例如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石。片剂可为无涂层的或它们可通过已知技术涂布以延迟胃肠道中的崩解和吸收，并且从而提供较长时期内的持续作用。例如，可采用时间延迟材料，比如单硬脂酸甘油酯或双硬脂酸甘油酯。
用于口服使用的制剂还可作为其中活性成分与惰性固体稀释剂混合的硬明胶胶囊或作为其中存在活性成分或活性成分与水或油介质混合的软明胶胶囊存在，所述惰性固体稀释剂为比如例如碳酸钙、磷酸钙或高岭土，所述油介质为比如例如花生油、液体石蜡、多种药草提取物中的任一种、牛奶或橄榄油。
可产生包含与适合于制造水悬浮液的赋形剂混合的活性材料的水悬浮液。这类赋形剂包括悬浮剂，比如例如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、海藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮黄蓍胶和阿拉伯树胶；分散剂或润湿剂可为天然存在的磷脂，比如例如卵磷脂或环氧烷与脂肪酸的缩合产物，比如例如硬脂酸聚氧乙烯酯，或环氧乙烷与长链脂肪醇(比如例如十七乙氧基鲸蜡醇)的缩合产物，或环氧乙烷与源自脂肪酸和己糖醇的偏酯的缩合产物，比如例如聚氧乙烯山梨糖醇单油酸酯，或环氧乙烷与源自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的缩合产物，比如例如聚氧乙烯山梨糖醇酐单油酸酯。
水悬浮液还可包含：一种或更多种防腐剂，比如例如对羟基苯甲酸乙酯或对羟基苯甲酸正丙酯；一种或更多种着色剂；一种或更多种调味剂；或一种或更多种甜味剂，比如蔗糖、甘油、山梨糖醇或糖精。
油性悬浮液可通过使活性成分在ω-3脂肪酸；植物油，比如例如花生油、橄榄油、芝麻油或椰子油中；或在矿物油比如液体石蜡中悬浮来配制。油性悬浮液可包含增稠剂，比如例如蜂蜡、硬石蜡或鲸蜡醇。
甜味剂比如以上陈述的那些甜味剂、和调味剂可被添加以提供美味的口服制剂。这些组合物可通过添加抗氧化剂比如抗坏血酸来保存。
适合于通过添加水制备水悬浮液的可分散的粉末和颗粒提供与分散剂或润湿剂、悬浮剂和一种或更多种防腐剂混合的活性成分。合适的分散剂或润湿剂和悬浮剂通过以上已经提到的那些来举例说明。另外的赋形剂例如甜味剂、调味剂和着色剂也可存在。
包含萝卜硫烷-环糊精络合物的糖浆剂和酏剂可与甜味剂比如例如，甘油、山梨糖醇或蔗糖一起配制。这类制剂还可包含缓和剂、防腐剂和/或调味剂和着色剂。用于口服施用的液体剂型可包括包含本领域通常使用的惰性稀释剂比如水的药学上可接受的乳剂、溶液、悬浮液、糖浆剂和/或酏剂。这类组合物还可包括佐剂，比如润湿剂、乳化剂和/或悬浮剂，和甜味剂、调味剂和/或芳香剂。
适合于口服施用的药物组合物可以离散单元(每个单元包含预先确定量的在本发明中有用的至少一种治疗化合物)；作为粉末或颗粒；作为水液体或非水液体中的溶液或悬浮液；或作为水包油乳剂或油包水乳剂存在。如指示的，这类组合物可通过药剂学的任何合适的方法来制备，其可包括使活性化合物与载体(其可构成一种或更多种辅助成分)开始结合的步骤。一般来说，组合物通过使活性化合物与液体载体或细碎的固体载体或两者混合并且然后必要时使产品成形来制备。
例如，片剂可通过使化合物的粉末或颗粒，任选地与一种或更多种辅助成分一起压制或模制来制备。压制片可通过在合适的机器中压制呈自由-流动形式的化合物，比如与粘结剂、润滑剂、惰性稀释剂和/或表面活性剂/分散剂任选地混合的粉末或颗粒来制备。模制片可通过在合适的机器中模制由惰性液体稀释剂湿润的粉末状化合物来制造。
本发明的组合的口服递送可包括通过许多机理提供将药物延长或持续传递至胃肠道和/或肠道的如本领域众所周知的制剂。这些包括但不限于：从基于小肠的改变pH的剂型的pH敏感释放，片剂或胶囊的缓慢溶蚀，基于制剂的物理特性在胃中的保留，剂型对肠道粘膜内表面的生物粘附，或活性药物从剂型中的酶促释放。对于用于本发明的方法、组合和组合物的某些治疗化合物来说，预期的效果是通过剂型的控制延长活性药物分子传递至作用部位的时间段。因此，肠衣制剂和肠衣控释制剂均在本发明范围内。合适的肠包衣包括邻苯二甲酸乙酸纤维素、聚乙烯基乙酸邻苯二甲酸酯、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯以及异丁烯酸和异丁烯酸甲酯的阴离子聚合物。
在某些实施方案中，药物组合物可包括可为无涂层的或其可通过已知技术涂布以延迟胃肠道中的崩解和吸收并且从而提供在较长时期内的延迟的作用的片剂。例如，可采用时间延迟材料比如单硬脂酸甘油酯或双硬脂酸甘油酯。
在另外的实施方案中，由主题方法产生的组合物可以无菌注射水悬浮液或油性悬浮液的形式经肠胃外，比如例如皮下、静脉内、肌内、膜内或通过注射技术施用。无菌注射制剂还可为非毒性的肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌注射溶液或悬浮液，比如例如1，3-丁二醇中的溶液。可采用的可接受的溶媒和溶剂中，有水、林格氏溶液和等渗氯化钠溶液。此外，无菌的固定油通常用作溶剂或悬浮介质。为此目的，可采用任何温和的固定油，包括合成的单酸甘油酯或甘油二酯。另外，n-3多不饱和脂肪酸可应用于注射剂的制备。
适合于肠胃外施用的药物组合物可包括本发明化合物的无菌含水制剂。这些制剂可经静脉内施用，虽然也可通过皮下、肌内或皮内注射或者通过输注来实施施用。这些制剂可通过将化合物与水混合，并且致使得到的溶液无菌以及与血液等渗来制备。根据本发明的注射组合物将通常包含从0.01％至10％w/w的本文公开的化合物。
活性成分也可作为组合物通过注射施用，其中，例如，盐水、右旋糖或水可被用作合适的载体。每种活性治疗化合物的合适的日剂量为达到如上所述通过口服施用所产生的相对而言相同血清水平的量。
本发明还包括的是口腔施用或“舌下”施用，其包括包含本文陈述的化合物的锭剂或咀嚼树胶。化合物可在调味基质和阿拉伯树胶或黄蓍胶中储存，或者化合物可在包括在惰性基质比如明胶和甘油或蔗糖和阿拉伯树胶中的化合物的糖锭剂中储存。
本发明的药物组合物还适合于局部应用于皮肤，并且可采取软膏、霜剂、洗剂、糊剂、凝胶剂、喷雾剂、粉末、胶冻剂、洗眼剂、溶液、悬浮剂、气溶胶或油的形式。载体可被使用并且包括凡士林(例如)、羊毛脂、聚乙二醇、醇及其两种或更多种的组合。一种或更多种活性化合物通常以组合物的从0.01％至50％(w/w)，比如例如从约0.01％至约2％的浓度存在。
本发明还可包括安全且有效量的等渗剂(包括盐，比如氯化钠)和/或非电解质等渗剂(比如山梨糖醇和甘露醇)。
本组合物的组分的溶解度可通过组合物中的表面活性剂或其他恰当的共溶剂来增强。这类共溶剂包括聚山梨醇酯20、60和80，聚氧化乙烯/聚氧化丙烯表面活性剂(例如，从购买的Pluronic F-68、F-84和P-103)，环糊精，或本领域技术人员已知的其他剂。可以从按重量计约0.01％至约2％的水平来使用这类共溶剂。
药学上可接受的赋形剂和载体包括所有前述赋形剂和载体以及类似物。有效的制剂和施用程序在本领域中是众所周知的并且在标准教科书中描述。参见例如Gennaro，A.R.，Remington：The Science and Practice of  Pharmacy，第20版，(Lippincott，Williams and Wilkins)，2000；Hoover，John E.，Remington’s Pharmaceutical Sciences，Mack Publishing Co.，Easton，Pennsylvania，1975；Liberman等人编辑，Pharmaceutical Dosage Forms，Marcel Decker，New York，N.Y.，1980；以及Kibbe等人编辑，Handbook of  Pharmaceutical Excipients(第三版)，American Pharmaceutical Association，Washington，1999。
在本方法中，需要本文描述的紊乱和/或相关状况的治疗和/或预防的受试者可用适量的目前发明的纯化的萝卜硫烷来治疗，其中个别组分的量提供足以构成治疗或预防有效量的剂量或量。
纯化的萝卜硫烷-环糊精络合物的有效量当然取决于许多因素，比如选择的特定化合物、其预期的用途、施用方式、待治疗的宿主以及接受者的临床状况。
如果实现任何益处，不管多么轻微，则认为致癌症状、致瘤症状、或抗菌症状被改善或改良。
本组合物的剂量和本文提供的方法可基于提供化学防护或化学预防结果中表明的功效来确定和调整。此外，本领域普通技术人员将了解如何测量和定量癌变症状或肿瘤症状的存在或不存在。
本组合物的剂量为对提供化学防护、化学预防和/或抗菌效果有效的那些剂量。
本领域技术人员将理解剂量还可使用根据Goodman&Gilman′s The  Pharmacological Basis of Therapeutics，第九版(1996)，附录II，第1707-1711页的指导来确定。
实施例
本发明现在将在下面的实施例中来举例说明。
一般材料和方法
使用TMS作为内标物在Oxford 400MHz分光仪上记录1H和13C NMR光谱并且以ppm报告化学位移。
在与Waters 2695分离模块和Water 996光电二极管阵列检测器连接的Micromass Platform LCZ上进行电喷雾电离质谱法(ESI-MS)。在Agilent7820A/5975MSD系列上进行GC-MS光谱法。
在HP 1050模块，柱：Phenomenex Gemini C18，5μ，110A°，250x4.6mm上进行HPLC。总运行时间：40分钟。在H2O中的MeCN+0.1％TFA。流速：1.5mL/分钟。检测器：244nm(VWD)。
在装备有Ti架703的KF电量计831上进行Karl Fischer(H2O含量)分析。
所有反应在干氮的气氛下进行并且报告的收率是分离收率。所有化学试剂从商业来源购买并且按原样使用。
原材料的制备
1-异硫氰酸根-4-甲基硫代丁烷(式A)的制备
装备有顶置式搅拌器、温度探针和1L加料漏斗以及N2的正流的50L多颈圆底烧瓶在MeOH/冰浴中被冷却至-10℃并且装载有THF(EMD，试剂级，15.0L)。添加1-氨基-4-甲基硫代丁烷(式B；1.5Kg，12.6摩尔，10当量)和三乙胺(1.75L，1.0当量)，并且溶液被进一步搅拌直到其已经冷却到低于-10℃。在2小时内逐滴添加二硫化碳(755mL，1.0当量)，而保持内部温度低于-3℃(浴温度为-20℃)，在这之后，黄绿色溶液已经被加热至11℃。在2.5小时内缓慢添加过氧化氢(35％水溶液，1224mL，1.0当量)，同时保持内部温度在11℃至18℃之间(浴温度为0℃)，这产生具有旋动的黄色颗粒的暗橙红色悬浮液。
处理：在搅拌过夜之后，通过GC(75℃→200℃(以15°/分钟)，然后以40°/分钟至300℃，保持2分钟：7.73分钟)检查等分试样，并且然后混合物使用装备有过滤头的软管被转移到50L处理站中。混合物用4.5L的乙酸乙酯稀释，并且然后用10％HCl(6L)、水(6L)和盐水(7.5L)洗涤。收集的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并且在真空下浓缩，以产出～2kg的暗红色油。
蒸馏：红色油被转移到2L(3批)圆底烧瓶中并且连接至Kugelrohr。该装置被放置在高真空下(～0.3托-0.5托)，并且空气浴加热至85℃。丢弃初馏物(主要是乙酸乙酯和微量未知的副产物)。在改变接收器之后，浴温度被增加至115℃，淡黄色物质在100℃-110℃内馏出，并且在与干冰/丙酮浴接触时立即冻结。在蒸馏(三批)之后，产出HPLC纯度为98％并且GC纯度＞99％的1.7Kg(84％收率)物质。
1HNMR(CDCl3，400MHz)；δ1.7-1.85(m，4H)，2.2(s，3H)，2.55(t，2H)，3.56(t，2H)
实施例1-萝卜硫烷(1-异硫氰酸根-4-甲基亚磺酰基丁烷)的制备
装备有顶置式搅拌器、温度探针和500mL加料漏斗的5L多颈圆底烧瓶配置有N2的正流。α-环糊精(30g，0.03摩尔，0.01当量)被溶解在1L的蒸馏水中并且通过用氮气吹扫在30分钟内脱气。向以上溶液添加501g(3.1摩尔，1当量)的1-异硫氰酸根-4-甲基硫代丁烷(式A)并且在30分钟内在0℃下再次脱气。向此两相反应混合物缓慢添加305mL的H2O2(3.1摩尔，1当量，35％水溶液)，同时维持温度在0℃-2℃之间[注：以足够低以便温度不增加超过10℃的速率来滴加过氧化物]。一旦添加完成，反应混合物在冰浴温度下搅拌约8小时并且然后缓慢允许到达室温过夜。反应混合物被过滤以去除淡黄色不可溶固体，并且然后滤液保持在冰箱中持续～1h。基于分析型HPLC，粗萝卜硫烷为～95％纯度。
此物质被用于络合步骤(实施例2)，而不进一步处理/纯化。
三次重复的概括-
批次 反应大小 HPLC纯度(粗品) 观察结果
1 501g 95％ 在＜2℃下添加H2O2
2 500g 95.6％. 在＜4℃下添加H2O2
3 500g 95.4％ 在＜2℃下添加H2O2
所有这三批在相同的反应规模下进行，并且反应以在反应时间和产物纯度方面类似的方式进行。
1HNMR(CDCl3，400MHz)；δ1.90(m，4H)，2.58(s，3H)，2.75(m，2H)，3.60(t，2H).
13CNMR(CDCl3，100MHz)；δ130.2，53.4，44.5，38.5，29.5，20.1
实施例2-萝卜硫烷-环糊精络合物的制备
α-环糊精(Wacker CAVAMAX W6食品级，3015g，3.1摩尔，1当量)通过在氮气气氛下加热直到55℃而溶解在蒸馏水(8L)中。均质溶液使用冰水浴被冷却至～25℃并且然后通过吹扫氮气来脱气持续～20分钟。在脱气之后，其变成模糊溶液。萝卜硫烷的水溶液从冰箱去除(参见先前的步骤)，并且然后立即添加至以上模糊的α-环糊精溶液。在此阶段，反应温度为～18℃，并且继续在室温下搅拌过夜(～16h)。多相反应混合物使用冰-甲醇浴被冷却至1℃-2℃并且在该温度下搅拌3小时。沉淀的白色固体被过滤，并且在高真空下在室温通过用胶乳板覆盖过滤漏斗干燥过夜。白色滤饼被转移至10L旋转蒸发烧瓶并且在室温在高真空下进一步干燥以给予2.802g的络合物(HPLC纯度为98.7％，78.5％收率)。
三次重复的概括-
批次 反应大小＊＊ HPLC纯度 收率＊
1 550.8g 98.5％ 78.5％
2 549.7g 98.6％ 76.9％
3 549.7g 98.7％ 73.2％
*最后两步中的总收率，**基于先前步骤的100％转化率。
所有三批在几乎相同规模下进行，并且反应以在反应时间、收率、产物纯度和萝卜硫烷在α-环糊精上的装载百分比方面相似的方式进行。
1HNMR(D2O，400MHz)；δ1.99(br，4H)，2.73(s，3H)，2.98(br，2H)，3.60(m，12H)，3.70(br，2H)，3.92(m，24H)，5.11(d，6H).
13CNMR(D2O，100MHz)；δ130.05，101.82，81.40，74.05，71.98，71.84，60.34，52.02，44.94，37.03，29.29，20.08.
实施例3-使用不同催化剂和反应条件的萝卜硫烷(1-异硫氰酸根-4-甲基亚 磺酰基丁烷)的制备
一般程序：
装备有顶置式搅拌器、温度探针和加料漏斗的多颈圆底烧瓶配置有N2的正流。酸催化剂(0.001当量至0.01当量)被溶解在溶剂(水、乙腈、丙酮等)中并且通过用氮气吹扫在30分钟内脱气。向以上溶液添加1当量的硫醚原材料(2)并且在30分钟内在0℃-5℃下再次脱气。向此两相反应混合物缓慢添加1当量的氧化剂(H2O2，m-CBPA等)，同时维持温度在0℃-10℃之间。一旦添加完成，反应混合物在冰浴温度下搅拌约8-24小时并且然后缓慢允许到达室温过夜。反应混合物被过滤以去除不可溶固体，并且然后滤液保持在冰箱中或立即在以下步骤中使用。基于分析型HPLC，粗萝卜硫烷为≥95％纯度。此物质被用于络合步骤，而没有任何进一步处理。
下表示出在各种溶剂中和/或在不同催化剂/酸的存在下化合物2氧化为萝卜硫烷连同反应条件。
*分离收率
基于以上结果，全部列举的催化剂产生相似的结果，但环糊精是优选的，因为其用于下一个络合步骤以稳定萝卜硫烷。
通过HPLC检测到仅微量的磺酰基杂质(糖芥素)。

Claims (19)

1.一种用于制备萝卜硫烷与环糊精的络合物的方法，所述方法包括：
(i)使式A的化合物：
与氧化剂在含水溶剂中并且在催化剂的存在下反应，以形成萝卜硫烷；以及
(ii)使来自步骤(i)的所述萝卜硫烷与环糊精在含水溶剂中混合，以形成萝卜硫烷-环糊精络合物的沉淀物。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述溶剂是水。
3.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，其中所述氧化剂是过氧化氢或水溶性的或可与水混溶的有机过酸，或其混合物。
4.根据权利要求3所述的方法，其中所述氧化剂是过氧化氢。
5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述催化剂选自环糊精和有机酸或无机酸，比如抗坏血酸、甲酸、乙酸和/或硫酸。
6.根据权利要求5所述的方法，其中所述催化剂是环糊精。
7.根据权利要求6所述的方法，其中所述催化剂是α-环糊精。
8.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中存在0.0001摩尔当量至1.0摩尔当量的催化剂(相对于所述式A的化合物)。
9.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中在步骤(i)中，当所述氧化剂被添加至反应混合物时，反应温度维持在25℃或更低或者15℃或更低的温度下。
10.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中用于步骤(ii)的所述环糊精选自W6(α)环糊精(六个糖环分子)、W7(β)环糊精(七个糖环分子)、W8(γ)环糊精(八个糖环分子)、其衍生物及其混合物中的一种或更多种。
11.根据权利要求10所述的方法，其中用于步骤(ii)的所述环糊精是α-环糊精。
12.根据权利要求11所述的方法，其中所述混合物被冷却至在约-8℃至约10℃的范围内的温度。
13.根据权利要求11所述的方法，其中所述混合物被冷却至在约-5℃至约4℃的范围内的温度。
14.根据权利要求11所述的方法，其中在所得络合物中萝卜硫烷对环糊精的摩尔比在0.4∶1至1∶1的范围内。
15.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述方法包括重结晶所得络合物的另外的步骤。
16.一种萝卜硫烷-环糊精络合物，通过根据权利要求1至15中任一项中定义的方法可获得。
17.根据权利要求16所述的萝卜硫烷-环糊精络合物，用于治疗和/或预防微生物感染和/或癌症。
18.一种治疗和/或预防微生物感染和/或癌症的方法，所述方法包括对需要这种治疗的个体施用治疗有效量的根据权利要求16所述的萝卜硫烷-环糊精络合物。
19.一种药物组合物，所述药物组合物包含根据权利要求16所述的萝卜硫烷-环糊精络合物和一种或更多种另外的药物赋形剂。
CN201380040262.4A 2012-06-01 2013-05-31 合成萝卜硫烷的方法 Active CN104703628B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261654277P 2012-06-01 2012-06-01
US61/654,277 2012-06-01
PCT/GB2013/051458 WO2013179057A1 (en) 2012-06-01 2013-05-31 Method of synthesising sulforaphane

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN104703628A true CN104703628A (zh) 2015-06-10
CN104703628B CN104703628B (zh) 2017-09-08

Family

ID=48576452

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201380040262.4A Active CN104703628B (zh) 2012-06-01 2013-05-31 合成萝卜硫烷的方法

Country Status (14)

Country Link
US (4) US9567405B2 (zh)
EP (1) EP2854861B1 (zh)
JP (2) JP6130910B2 (zh)
CN (1) CN104703628B (zh)
AU (1) AU2013269340B9 (zh)
BR (1) BR112014029841B1 (zh)
CA (1) CA2875063C (zh)
DK (1) DK2854861T3 (zh)
ES (1) ES2653248T3 (zh)
HU (1) HUE038055T2 (zh)
IN (1) IN2014DN10764A (zh)
NO (1) NO2882932T3 (zh)
PL (1) PL2854861T3 (zh)
WO (1) WO2013179057A1 (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105001135A (zh) * 2015-07-10 2015-10-28 北京化工大学 一种莱菔子素的化学合成方法

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108503568A (zh) * 2017-02-27 2018-09-07 无锡杰西医药股份有限公司 一种适用于工业化生产的高纯度异硫氰酸酯类化合物制备方法
CN107468666B (zh) * 2017-08-18 2021-01-01 赣州华汉生物科技有限公司 一种可稳定保存的萝卜硫素胶囊及其制备方法
MX2021003373A (es) 2018-09-24 2021-05-27 Chevron Phillips Chemical Co Lp Metodos para hacer catalizadores de cromo soportados con mayor actividad de polimerizacion.
GB202005238D0 (en) 2020-04-08 2020-05-20 Evgen Pharma Plc Crystalline complexes
US11801273B2 (en) 2020-12-23 2023-10-31 Church & Dwight Co., Inc. Compositions and methods to increase production of isothiocyanates

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2008091608A1 (en) * 2007-01-23 2008-07-31 Pharmagra Labs, Inc. Stabilized sulforaphane
CN102249968A (zh) * 2011-06-17 2011-11-23 常州大学 萝卜硫素的合成方法

Family Cites Families (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US135618A (en) 1873-02-11 Improvement in printing-presses
JP3604172B2 (ja) 1994-03-22 2004-12-22 株式会社白元 除菌組成物、及び除菌方法
FR2776666B1 (fr) 1998-03-31 2002-09-06 Commissariat Energie Atomique Complexes d'inclusion dans des cyclodextrines d'isothiocyanates organiques, en particulier bacteriostatiques, bactericides et/ou fongicides ou de leurs precurseurs naturels, et leur preparation
US6048736A (en) 1998-04-29 2000-04-11 Kosak; Kenneth M. Cyclodextrin polymers for carrying and releasing drugs
KR20020063914A (ko) 1999-12-20 2002-08-05 코니스 프랑스, 에스.에이. 화장용 및/또는 약학용 제제
JP5132865B2 (ja) 2000-08-21 2013-01-30 ジェド ダブリュ． ファーヒー イソチオシアネートを用いたヘリコバクターの治療方法
JP2002187842A (ja) 2000-12-19 2002-07-05 Toyo Shinyaku:Kk ケール加工品およびその加工方法
JP2003146803A (ja) 2001-11-13 2003-05-21 Carex Inc 抗菌性粉末組成物およびその製造方法
FR2845599B1 (fr) 2002-10-11 2005-01-07 Lmd Medicament comprenant une thiouree pour son utilisation en tant que depigmentant
CA2603235A1 (en) 2005-03-28 2006-10-05 Bioresponse, Llc Diindolylmethane-based compositions and methods of use thereof for promoting oral mucosal and bone health
FR2888235B1 (fr) 2005-07-07 2007-09-14 Nutrinov Sa Procede d'extraction de sulforaphane a partir de broyat de crucifere contenant de la glucoraphanine
US20080312164A1 (en) 2006-07-14 2008-12-18 Rajski Scott R Isothiocyanates and glucosinolate compounds and anti-tumor compositions containing same
WO2008015315A1 (fr) 2006-08-03 2008-02-07 Lmd Compositions medicinales contenant une thiouree pour le traitement du cancer en association avec des agents chimiotherapeutiques ou des rayonnements ionisants ou non ionisants
CN101120948A (zh) 2006-08-08 2008-02-13 普文英 一种具有化学保护、癌症预防和治疗用途的化合物组合物
CN102423492A (zh) * 2011-12-31 2012-04-25 肖广惠 一种莱菔硫烷的包合物及其制备方法
CN102688219A (zh) * 2012-02-03 2012-09-26 马建华 萝卜硫素的微胶囊包埋方法

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2008091608A1 (en) * 2007-01-23 2008-07-31 Pharmagra Labs, Inc. Stabilized sulforaphane
CN102249968A (zh) * 2011-06-17 2011-11-23 常州大学 萝卜硫素的合成方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
HERBERT L. HOLLAND,ET AL.: "Biotransformation of organic sulfides.Part 7.Formation of chiral isothiocyanato sulfoxides and related compounds by microbial biotransformation", 《TETRAHEDRON：ASYMMETRY》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105001135A (zh) * 2015-07-10 2015-10-28 北京化工大学 一种莱菔子素的化学合成方法
CN105001135B (zh) * 2015-07-10 2017-04-12 北京化工大学 一种莱菔子素的化学合成方法

Also Published As

Publication number Publication date
CA2875063C (en) 2021-01-12
US10864186B2 (en) 2020-12-15
EP2854861B1 (en) 2017-10-04
US20210212978A1 (en) 2021-07-15
ES2653248T3 (es) 2018-02-06
CN104703628B (zh) 2017-09-08
JP6130910B2 (ja) 2017-05-17
US20190282534A1 (en) 2019-09-19
US20150191551A1 (en) 2015-07-09
JP2017141288A (ja) 2017-08-17
NO2882932T3 (zh) 2018-08-04
BR112014029841B1 (pt) 2021-01-19
JP6385511B2 (ja) 2018-09-05
US11571406B2 (en) 2023-02-07
CA2875063A1 (en) 2013-12-05
US20170112796A1 (en) 2017-04-27
BR112014029841A2 (pt) 2017-06-27
JP2015518041A (ja) 2015-06-25
AU2013269340A1 (en) 2015-01-22
US10307390B2 (en) 2019-06-04
US9567405B2 (en) 2017-02-14
EP2854861A1 (en) 2015-04-08
AU2013269340A8 (en) 2015-03-12
WO2013179057A1 (en) 2013-12-05
AU2013269340B9 (en) 2017-08-17
HUE038055T2 (hu) 2018-10-29
AU2013269340B2 (en) 2017-02-16
PL2854861T3 (pl) 2018-02-28
DK2854861T3 (en) 2018-01-02
IN2014DN10764A (zh) 2015-09-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104703628A (zh) 合成萝卜硫烷的方法
JP6462045B2 (ja) スルフォラファンの単離及び精製
ES2674052T3 (es) Sulforafano estabilizado
CN1989098B (zh) 用作药学-医学应用的载体和有效形式以及用作化学应用的相转移剂的铵盐和铵盐/无机盐笼形化合物
CN107200838A (zh) 一种多臂聚乙二醇及其活性衍生物
KR102392893B1 (ko) 신규한 cyp-아이코사노이드 유도체
CN108727208A (zh) 一种连接子化合物、聚乙二醇-连接子结合物及其衍生物和聚乙二醇-连接子-药物结合物
ES2861268T3 (es) Moduladores de bajo peso molecular del receptor de mentol frío TRPM8 y su uso
KR101451401B1 (ko) 비타민 c와 비타민 e의 컨쥬게이트 및 그를 포함하는 항산화제
TWI353354B (en) C10 cyclopentyl ester substituted taxanes
EP3101025A1 (en) Pegylated 7-dehydrocholesterol derivative
KR101491728B1 (ko) 비타민 c와 비타민 b3의 컨쥬게이트 및 그를 포함하는 항산화제
CA2968483A1 (fr) Derives hydroxybisphosphoniques hydrosolubles de la doxorubicine

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant