WO2008015315A1 - Compositions medicinales contenant une thiouree pour le traitement du cancer en association avec des agents chimiotherapeutiques ou des rayonnements ionisants ou non ionisants - Google Patents

Compositions medicinales contenant une thiouree pour le traitement du cancer en association avec des agents chimiotherapeutiques ou des rayonnements ionisants ou non ionisants Download PDF

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thiourea
agents
bis
ionizing
chemotherapeutic agents
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Alex Saunois
Philippe Le Coz
Chérif RABHI
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Lmd
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    • A61P35/00—Antineoplastic agents

Definitions

  • the mutated P53 protein inhibits the apoptosis process leading to the inability to destroy damaged cells, a fundamental step in the tumor process. In this case, the tumor process most often gives rise to a mass of undifferentiated cells. This body will then develop for itself by organizing a centralization of energy resources by stimulating angiogenesis to lead to an important blood network.
  • Anticancer approaches are varied since they can directly attack to the tumor, by mechanical ablation, under the action of antimitotic agents or by cell destruction.
  • Another approach is that relating to the attack of the mechanism of feeding tumors by the degradation of blood capillary networks specific to the tumor or the inhibition of angiogenesis during cancerous development.
  • chemical agents are used in these attacks such as cisplatin, taxol, taxotere and in the case of radiotherapy of physical agents such as X-ray or gamma.
  • Radiotherapy unlike brachytherapy, consists of exposing a part of the body to non-charged or charged ionizing radiation.
  • the alkylsulfone tested was found to protect and repair significantly and exclusively the healthy cells of the genotoxic attacks by the MMS unlike cancer cells where no protection or repair has been observed.
  • the protective and / or repair properties of a thiourea dibutyl sulfone are therefore exerted differentially between healthy and cancerous cells. This molecule thus makes it possible to protect and selectively repair the healthy cells of the body during heavy anticancer treatments.
  • the present invention therefore relates to the use of an alkylsulfone of general formula I below
  • n is an integer from 1 to 12
  • m is an integer from 1 to 12
  • R 1, R 2 , R 3 and R 4 represent, independently of one another, a hydrogen atom, a C 6 -C 6 alkyl group or an aryl group, or at least one of its mono or dioxidized derivatives of general formulas , Ub and III:
  • R 1, R 2 , R 3 , R 4 , m and n are as defined above or mixtures thereof, for the manufacture of a medicament for the treatment or protection against toxicities associated with ionizing radiation or non-ionizing or against toxicities associated with the administration of one or more chemotherapeutic agents, the protection or repair of healthy tissue in a cancer patient receiving radiation therapy and / or chemotherapy with one or more agents chemotherapeutics, treatment or protection against the toxicities associated with cancer therapy.
  • the present invention further relates to a pharmaceutical composition
  • a pharmaceutical composition comprising an alkylsulfone of general formula I
  • n is an integer from 1 to 12
  • m is an integer from 1 to 12
  • R 1, R 2 , R 3 and R 4 represent, independently of each other, a hydrogen atom, a C 1 -C 6 alkyl group or an aryl group, or at least one of its mono or dioxidized derivatives of formulas General Conditions IIa, Hb and III:
  • R 1, R 2 , R 3 , R 4 , m and n are as defined above or mixtures thereof, and one or more chemotherapeutic agents, as a combination product for simultaneous, separate or time-spread use .
  • this composition is useful as a medicament.
  • this drug is intended for the treatment of cancer.
  • the present invention further relates to the use of an alkylsulfone of the following general formula I
  • n is an integer from 1 to 12
  • m is an integer from 1 to 12
  • R 1, R 2 , R 3 and R 4 represent, independently of one another, a hydrogen atom, a C 6 -C 6 alkyl group or an aryl group, or at least one of its mono or dioxidized derivatives of general formulas , Ub and III:
  • R 1 , R 2 , R 3 , R 4 , m and n are as defined above. or mixtures thereof, in combination with ionizing or non-ionizing radiation for the manufacture of a medicament for the treatment of cancer.
  • non-ionizing radiation means any simultaneous, separate or time-spread use of the alkylsulfones according to the present invention with ionizing or non-ionizing radiation.
  • non-ionizing radiation comprises electromagnetic or particulate radiation.
  • Electromagnetic radiation includes X-ray photons from X-ray tubes or accelerators, and gamma photons (telecobaltotherapy), of nuclear origin, from the decay of, for example, cobalt rendered radioactive in a neutron beam. . These two types of radiation are used respectively, for the treatment of superficial tumors and medium depths (breast, head, neck) in radiotherapy.
  • Neutrons particulate radiations from cyclotrons, have an equal dose of biological efficiency three times higher than that of electromagnetic radiation.
  • ionizing radiation comprises ⁇ -radiation, accelerated electrons, ⁇ -radiation, protons and light ions.
  • the ⁇ radiation is emitted by certain radioactive nuclei and has an efficiency very close to that of X-rays and ⁇ in the treatment of cancer.
  • Accelerated electrons, produced by accelerators have the same physical characteristics as the electrons of the ⁇ radiation.
  • electrons are used for the treatment of superficial tumors.
  • the electrons can also produce a braking radiation which is a very high energy X-ray, and be used for the treatment of deep tumors.
  • ⁇ radiation consists of positively charged heavy particles, which are helium nuclei. Their biological efficacy is of the order of 5 to 10 times that of X-rays and ⁇ -photons, but their low penetration does not allow them to be used clinically.
  • Protons produced by cyclotrons, are suitable for the treatment of deep, small tumors. The biological effectiveness of the protons would be close to those of the neutrons. Finally, the light ions, would allow a tissue penetration close to that of the protons and would have a biological efficiency similar to that of the neutrons.
  • alkylsulfones according to the present invention are either commercially available or can be prepared, for example for 1,3-bis (5-methanesulfmylbutyl) thiourea, by thermal degradation of sulforaphane.
  • the mono or dioxidized derivatives can be obtained from the corresponding unoxidized alkylsulfone by the action of an oxidizing agent such as, for example, hydrogen peroxide.
  • the alkyl sulfones may be present in the form of optically pure isomers (of diastereoisomers or enantiomers) or of racemic mixtures, or else in the form of pharmaceutically acceptable addition salts.
  • isomers means compounds which have identical molecular formulas but which differ in the arrangement of their atoms in space. Isomers that differ in the arrangement of their atoms in space are referred to as “stereoisomers”. Stereoisomers that are not mirror images of each other are referred to as “diastereoisomers” and stereoisomers that are non-superimposable mirror images are referred to as “enantiomers”, or sometimes optical isomers.
  • a carbon atom bonded to four non-identical substituents is called a "center chiral ".
  • chiral isomer means a compound with a chiral center. It comprises two forms of enantiomers of opposite chirality and may exist either as an individual enantiomer or as mixtures of enantiomers. A mixture containing equal amounts of individual enantiomeric forms of opposite chirality is referred to as a "racemic mixture”.
  • the term "pharmaceutically acceptable” means that which is useful in the preparation of a pharmaceutical composition which is generally safe, non-toxic and neither biologically nor otherwise undesirable and which is acceptable for veterinary as well as pharmaceutical use. human.
  • Such salts include: (1) acid addition salts formed with inorganic acids such as hydrochloric acid, hydrobromic acid, sulfuric acid, nitric acid, phosphoric acid and the like, or formed with organic acids such as acetic acid, benzenesulfonic acid, benzoic acid, camphorsulfonic acid, citric acid, ethanesulfonic acid, fumaric acid, glucoheptonic acid, gluconic acid, glutamic acid, glycolic acid, hydroxynaphthoic acid, 2 - hydroxyethanesulfonic acid, lactic acid, maleic acid, malic acid, mandelic acid, methanesulfonic acid, muconic acid, 2 - naphthalenesulfonic acid, propionic acid, salicylic acid
  • salts formed when an acidic proton present in the parent compound is replaced by a metal ion for example an alkali metal ion, an alkaline earth metal ion or an aluminum ion; either coordinates with an organic or inorganic base.
  • Acceptable organic bases include diethanolamine, ethanolamine, N-methylglucamine, triethanolamine, tromethamine and Similar.
  • Acceptable inorganic bases include aluminum hydroxide, calcium hydroxide, potassium hydroxide, sodium carbonate and sodium hydroxide.
  • Preferred pharmaceutically acceptable salts are salts formed from hydrochloric acid, trifluoroacetic acid, dibenzoyl-L-tartaric acid and phosphoric acid.
  • references to pharmaceutically acceptable salts include solvent addition forms (solvates) or crystalline forms (polymorphs) as defined above, of the same acid addition salt.
  • one or more chemotherapeutic agents are chosen from the group consisting of alkylating agents, platinum agents, anthracyclines, taxanes, steroid derivatives, Vinca alkaloids, antimetabolites, adriamycin and doxarubicin. , etoposide, arsenic derivatives, intercalating agents, and combinations thereof.
  • one or more chemotherapeutic agents are selected from the group consisting of cyclophosphamide, cisplatin, vinblastine, carboplatin, taxotere, taxol, vincristine and combinations thereof.
  • the drug or the pharmaceutical composition according to the present invention is in a form for oral, sublingual or topical use or in injectable form, in particular an intravenous, peritoneal, intramuscular, transdermal or subcutaneous form.
  • This composition or medicament may be formulated for administration to mammals, including humans. The dosage varies according to the treatment and the condition in question.
  • the active ingredient (s) may be administered in unit dosage forms, in admixture with conventional pharmaceutical carriers, to animals or humans.
  • Appropriate unitary forms of administration include forms by orally, such as tablets, capsules, powders, granules and oral solutions or suspensions, sublingual and oral forms of administration, subcutaneous, intramuscular or intravenous administration forms
  • the main active ingredient is mixed with a pharmaceutical carrier such as gelatin, starch, lactose, magnesium stearate, talc, gum arabic or the like.
  • a pharmaceutical carrier such as gelatin, starch, lactose, magnesium stearate, talc, gum arabic or the like.
  • the tablets can be coated with sucrose or other suitable materials or they can be treated in such a way that they have prolonged or delayed activity and they continuously release a predetermined quantity of active ingredient.
  • a preparation in capsules by mixing the active ingredient with a diluent and pouring the resulting mixture into soft or hard capsules.
  • a syrup or elixir preparation may contain the active ingredient together with a sweetener, an antiseptic, as well as a flavoring agent and a suitable colorant.
  • Water-dispersible powders or granules may contain the active ingredient in admixture with dispersing agents or wetting agents, or suspending agents, as well as with taste correctors or sweeteners.
  • aqueous suspensions, isotonic saline solutions or sterile and injectable solutions containing dispersing agents and / or pharmacologically compatible wetting agents are used.
  • the active ingredient may also be formulated in the form of microcapsules, nanocapsules or liposomes or other forms optionally vectorized with one or more additive carriers.
  • alkylsulfones according to the present invention possess the property of being amphiphilic, which confers on them the very important capacity of integrating and acting in the heart of the cell membrane, the nucleus membrane and the mitochondria. This will contribute to stabilize these membranes during attacks by genotoxic agents thus contributing thiourea to cellular homeostasis as is the case for molecules such as dextrans (cytoplasmic) or silymarin (membrane).
  • Figure 1 shows the curve of percent viability of normal cells versus MMS concentration in mM and the resulting linear regression.
  • Figure 2 shows the curve of the percentage of viability of cancer cells relative to the concentration of MMS in mM and the linear regression that results.
  • Figure 3 shows the curve of percent viability of normal cells versus MMS concentration in mM in the presence of 0.1 mM bis (MSoBT) and the resulting linear regression.
  • FIG. 4 represents the curve of the percentage of viability of the cancerous cells relative to the concentration of MMS in mM in the presence of 0.1 mM of bis (MSoBT) and the linear regression resulting therefrom.
  • FIG. 5 represents the comparison of the curves of FIGS. 1 and 3.
  • Figure 6 shows the comparison of the curves of Figures 2 and 4.
  • Example 5 Action of bis (MSoBT) on cancer cells and normal cells against MMS.
  • Concentration range in MMS 0.50 to 0.70 mM depending on the series. Measurement: cell viability (MTT test) measured in optical density in the visible. Number of series: reproducibility on 3 to 5 independent series.
  • Both cell types are grown on flasks in their respective culture medium. At confluence, the cells are then detached, centrifuged and counted to be seeded on 96 well plates at 6500 cells per well for the normal cell type CCL-110 and 12500 cells per well for the cancer cell type CRL-1974.
  • MMS methyl methanesulfonate
  • MSoBT bis
  • the plates are rinsed with phosphate buffered saline (phosphate buffer PBS) to eliminate the treatment and then are incubated for 3 hours with a solution of MTT (Thiazolyl Blue Tetrazolium bromide). ) at 5 mg / ml diluted 1/10 in the culture medium corresponding to each cell type.
  • phosphate buffer PBS phosphate buffer PBS
  • DMSO dimethylsulfoxide
  • the percentage of cell viability obtained after the MMS treatment is compared with that obtained with addition of bis (MSoBT) to demonstrate a possible action of the molecule bis (MSoBT).
  • the MMS induces a reduction in dose-dependent cell proliferation on normal cells by following a linear function between 0.50 and 0.65 mM ( Figure 1).
  • MMS induces a reduction in dose-dependent cell proliferation on cancer cells by following a linear function between 0.50 and 0.65 mM ( Figure 2).
  • the MMS further induces a reduction in dose-dependent cell proliferation in the presence of 0.1 mM bis (MSoBT) on normal cells following a linear function between 0.50 and 0.65 mM ( Figure 3).
  • MMS further induces a reduction in dose-dependent cell proliferation in the presence of 0.1 mM bis (MSoBT) on cancer cells following a linear function between 0.50 and 0.65 mM ( Figure 4).
  • MMS induces a reduction in dose-dependent cell proliferation on cancer cells as normal by following a linear function between 0.50 and 0.65 mM.
  • MMS further induces a reduction in dose-dependent cell proliferation in the presence of 0.1 mM bis (MSoBT) on cancer cells as normal following a linear function between 0.50 and 0.65 mM.
  • Normal cells are protected by bis (MSoBT) genotoxic and cytotoxic MMS attacks present between 0.50 and 0.65 mM, ie a% protection between 16% and 45%.
  • MSoBT bis genotoxic and cytotoxic MMS attacks present between 0.50 and 0.65 mM, ie a% protection between 16% and 45%.
  • the cancer cells are not protected by bis (MSoBT) genotoxic and cytotoxic MMS attacks present between 0.50 and 0.65 mM.

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Abstract

La présente invention concerne l'utilisation d'une thiourée de formule générale suivante dans laquelle n est un nombre entier compris entre 1 et 12, m est un nombre entier compris entre 1 et 12, R1, R2, R3 et R4 représentent indépendamment l'un de l'autre un atome d'hydrogène, un groupe alkyle en C1-C6 ou un groupe aryle, ou au moins un de ses dérivés mono ou dioxydés de formules générales suivantes dans lesquels les R1, R2, R3, R4, m et n sont tels que définis ci-dessus ou leurs mélanges, pour la fabrication d'un médicament destiné au traitement ou à la protection contre des toxicités associées aux rayonnements ionisants ou non ionisants ou contre des toxicités associées à l'administration d'un ou plusieurs agents chimiothérapeutiques, à la protection ou à la réparation des tissus sains chez un patient atteint de cancer recevant une thérapie par rayonnement et/ou une chimiothérapie avec un ou plusieurs agents chimiothérapeutiques, au traitement ou à la protection contre les toxicités associées à une thérapie contre le cancer.

Description

Titre : Compositions médicinales contenant une alkylsulfone pour le traitement du cancer en association à des agents chimiothérapeutiques ou à des rayonnements ionisants ou non ionisants
Les organismes vivants subissent régulièrement des agressions par des agents physiques et chimiques externes représentés par les polluants (déchets chimiques, tabac, oxydants,...), les rayonnements naturels dont le rayonnement solaire ou expositions aux rayonnements ionisants accidentelles ou thérapeutiques. Une recrudescence notamment des cancers associés à ces effets est mise en évidence aujourd'hui par tous les observatoires médicaux.
Des expositions prolongées aux rayonnements solaires ultraviolets sont, par exemple, susceptibles de générer des effets délétères sur l'ADN des cellules de la peau soit des modifications chimiques de l'ADN, des ruptures simple ou double brin. L'épiderme subit les agressions par les UVA et les UVB alors que le derme, n'est atteint seulement que par l'action des UVA. L'action du rayonnement solaire sur l'ADN s'effectue par des mécanismes distincts selon la nature des ultraviolets. II en va de même des expositions aux rayons X ou gamma ou expositions chimiothérapeutiques en applications anticancéreuses. La cellule peut répondre à ces agressions en réparant les erreurs induites afin de restaurer l'intégrité de son ADN ou induire un mécanisme apoptotique si les dommages sont trop importants. L'apparition des cellules cancéreuses est ainsi potentiellement réduite. En l'absence de réparation rapide, certaines lésions peuvent donner naissance à des mutations pouvant affecter des gènes clefs impliqués dans l'initiation cancéreuse, tel que, par exemple, le gène p53. Après mutation, la protéine P53 mutée inhibe le processus d'apoptose conduisant à l'incapacité de détruire les cellules endommagées, étape fondamentale dans le processus tumoral. Dans ce cas, le processus tumoral donne naissance le plus souvent à une masse de cellules indifférenciées. Ce corps va alors se développer pour lui-même en organisant une centralisation des ressources énergétiques par la stimulation de l'angiogénèse pour conduire à un réseau sanguin important. Les approches anticancéreuses sont variées puisqu'elles peuvent s'attaquer directement à la tumeur, par ablation mécanique, sous l'action d'agents antimitotiques ou par la destruction cellulaire. Une autre approche est celle relative à l'attaque du mécanisme d'alimentation des tumeurs par la dégradation des réseaux capillaires sanguins propres à la tumeur ou l'inhibition de l'angiogénèse lors du développement cancéreux. Pour tout cela, des agents chimiques sont employés dans ces attaques comme le cisplatine, le taxol, le taxotère et dans le cas de la radiothérapie des agents physiques comme celui des rayons X ou gamma.
Toutefois, ces traitements ne sont pas spécifiques des cellules cancéreuses et peuvent endommager lourdement aussi les cellules saines en altérant leur ADN nucléaire ou mitochondrial et ARN. Effectivement, d'un point de vue chimique, aucune cellule de l'organisme traité n'est épargnée. En effet, bien que les cellules saines possèdent une meilleure résistance et une meilleure capacité de protection, la radiothérapie entraîne souvent des effets secondaires plus ou moins importants. Ces effets peuvent se déclencher sur la peau de façon précoce (après 10 à 15 jours de traitement) et se manifester par l'apparition d'une radiodermite ou d'une radionécrose cutanée, lorsque les doses sont comprises entre (6 et 12 Gy) et (25 à 30 Gy), respectivement. Il peut également se produire des réactions tardives (après 10 ans ou plus) telle que l'apparition de cancers secondaires, dans le cas notamment d'atteinte tumorale des trois revêtements de la peau, l'hypoderme, le derme et l' épidémie. La radiothérapie participe au traitement curatif primaire chez 30% des patients cancéreux. 50% de tous les malades cancéreux recevront une irradiation au cours de l'évolution de leur maladie. Cela signifie qu'en France plus de 100 000 malades seront irradiés chaque armée.
La radiothérapie externe, contrairement à la curiethérapie, consiste à exposer une partie du corps à des radiations ionisantes non chargées ou chargées.
L'ensemble de ces traitements par radiothérapie permet la création d'ions et de radicaux libres, OH et H très réactifs, agissant sur le cytoplasme, la membrane et surtout l'ADN des cellules cancéreuses. Ces dommages conduisent, au final, ainsi à la destruction des cellules. II existe cependant aujourd'hui une molécule appelée Ethyol® (Medlmmune Oncology Inc.), molécule phosphorylée, qui dispose de la propriété d'être un protecteur antimutagène. Cette molécule agît, entre autres en captant très rapidement et efficacement les radicaux générés par les traitements dits lourds (Fahey R.C., 1988,
Pharmac. Ther., 39 : 101 ; Purdie J. W. et al, 1983, Int. J. Radiai. Biol, 43(5) : 517). Cette molécule est administrée avant les traitements, et possède une autre propriété qui lui confère son originalité : elle est capable d'induire une protection sélective et favorisée principalement chez les cellules saines grâce à sa phosphorylation. En effet, l'Ethyol® est généralement non déphosphorylée par les cellules tumorales car ces dernières possèdent un faible taux membranaire d'alkaline phosphatase, requise pour la déphosphorylation de cette molécule, étape nécessaire à la formation de son métabolite actif. De plus, la capacité de pénétration de la molécule non phosphorylée est inférieure dans les cellules cancéreuses (Hensley MX. et al., 1999, Journal of Clinical Oncology,
17 :3333-3355). Cette molécule est ainsi moins représentée chez les cellules cancéreuses pendant le traitement. Ce traitement par l'Ethyol® est aujourd'hui bien employé mais uniquement dans les cas les plus problématiques. En effet, cette molécule possède des effets secondaires négatifs importants (vomissements, hypotension...) qui expliquent cet emploi limité. Plus récemment des thiourées ont été décrites comme possédant des propriétés antimutagènes et anticarcinogènes très significatives (WO 2004/032912). En effet, ces premiers travaux ont montré qu'une famille de molécules, dialkyl sulfone thiourée, était capable de protéger les dommages de l'ADN, induits chez un organisme procaryote (test Vitotox®), Salmonella Typhimurium, vis-à-vis des agressions génotoxiques des UVA, des UVC et d'un agent chimique le Méthyl Méthane Sulfonate (MMS). Des études ont été également conduites afin de mesurer les propriétés de protection et les propriétés de réparation des fibroblastes humains normaux et des cellules cancéreuses de morphologie fibroblastique soumises à un agent chimique génotoxique, le MMS. Cette molécule génotoxique a été employée comme un mimétique anticancéreux non spécifique d'une attaque de l'ADN.
De façon tout à fait surprenante, l'alkylsulfone testée s'est avérée protéger et réparer significativement et exclusivement les cellules saines des attaques génotoxiques par le MMS contrairement aux cellules cancéreuses où aucune protection ou réparation n'a été observée. Les propriétés de protection et/ou réparation d'une dibutyl sulfone thiourée, s'exercent donc de façon différentielle entre cellules saines et cancéreuses. Cette molécule permet donc de protéger et réparer sélectivement les cellules saines de l'organisme lors de traitements anticancéreux lourds.
De plus, la grande tolérance toxicologique associée à cette nouvelle propriété antitumorale rend cette famille de molécule exploitable aussi bien en injection, intraveineuse ou péritonéale, en absorption orale qu'en application topique. Parallèlement, tous les travaux de cytotoxicité, de tolérance cutanée et orale indiquent clairement l'absence d'effets secondaires identifiés de cette famille de molécule.
La présente invention concerne donc l'utilisation d'une alkylsulfone de formule générale I suivante
Figure imgf000005_0001
dans laquelle : n est un nombre entier compris entre 1 et 12, m est un nombre entier compris entre 1 et 12,
Ri, R2, R3 et R4 représentent indépendamment l'un de l'autre un atome d'hydrogène, un groupe alkyle en CpC6 ou un groupe aryle, ou au moins un de ses dérivés mono ou dioxydés de formules générales lia, Ub et III suivantes :
Figure imgf000006_0001
dans lesquels les Ri, R2, R3, R4, m et n sont tels que définis ci-dessus ou leurs mélanges, pour la fabrication d'un médicament destiné au traitement ou à la protection contre des toxicités associées aux rayonnements ionisants ou non ionisants ou contre des toxicités associées à l'administration d'un ou plusieurs agents chimiothérapeutiques, à la protection ou à la réparation des tissus sains chez un patient atteint de cancer recevant une thérapie par rayonnement et/ou une chimiothérapie avec un ou plusieurs agents chimiothérapeutiques, au traitement ou à la protection contre les toxicités associées à une thérapie contre le cancer.
La présente invention concerne en outre une composition pharmaceutique comprenant une alkylsulfone de formule générale I
Figure imgf000007_0001
dans laquelle : n est un nombre entier compris entre 1 et 12, m est un nombre entier compris entre 1 et 12,
Ri, R2, R3 et R4 représentent indépendamment l'un de l'autre un atome d'hydrogène, un groupe alkyle en Ci-C6 ou un groupe aryle, ou au moins un de ses dérivés mono ou dioxydés de formules générales lia, Hb et III suivantes :
Figure imgf000007_0002
dans lesquels les Ri, R2, R3, R4, m et n sont tels que définis ci-dessus ou leurs mélanges, et un ou plusieurs agents chimiothérapeutiques, comme produit de combinaison pour une utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps. Avantageusement cette composition est utile en tant que médicament.
De façon avantageuse, ce médicament est destiné au traitement du cancer.
La présente invention concerne en outre l'utilisation d'une alkylsulfone de formule générale I suivante
Figure imgf000008_0001
dans laquelle : n est un nombre entier compris entre 1 et 12, m est un nombre entier compris entre 1 et 12,
Ri, R2, R3 et R4 représentent indépendamment l'un de l'autre un atome d'hydrogène, un groupe alkyle en CpC6 ou un groupe aryle, ou au moins un de ses dérivés mono ou dioxydés de formules générales lia, Ub et III suivantes :
Figure imgf000008_0002
Figure imgf000009_0001
III dans lesquels les R1, R2, R3, R4, m et n sont tels que définis ci-dessus. ou leurs mélanges, en combinaison avec des rayonnements ionisants ou non ionisants pour la fabrication d'un médicament destiné au traitement du cancer.
Au sens de la présente invention on entend par « combinaison avec des rayonnements ionisants ou non ionisants », toute utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps des alkylsulfones selon la présente invention avec des rayonnements ionisants ou non ionisants. Avantageusement, les rayonnements non ionisants comprennent les radiations électromagnétiques ou particulaires. Parmi les radiations électromagnétiques sont représentés les photons X provenant de tubes à rayons X ou d'accélérateurs, et les photons gamma (télécobaltothérapie), d'origine nucléaire, provenant de la désintégration, par exemple, du cobalt rendu radioactif dans un faisceau de neutrons. Ces deux types de radiations sont utilisés respectivement, pour le traitement des tumeurs superficielles et de profondeurs moyennes (sein, tête, cou) en radiothérapie. Les neutrons, radiations particulaires provenant des cyclotrons, présentent à dose égale une efficacité biologique trois fois plus élevée que celle des radiations électromagnétiques. De façon avantageuse, les rayonnements ionisants comprennent le rayonnement β, les électrons accélérés, le rayonnement α, les protons et les ions légers. Le rayonnement β est émis par certains noyaux radioactifs et présente une efficacité très voisine de celle des rayons X et γ dans le traitement du cancer. Les électrons accélérés, produits par des accélérateurs, possèdent les mêmes caractéristiques physiques que les électrons du rayonnement β. Administrés sous forme d'un rayonnement particulaire, les électrons sont utilisés pour le traitement des tumeurs superficielles. En revanche, les électrons peuvent également produire un rayonnement de freinage qui est un rayon X de très haute énergie, et être utilisés pour le traitement des tumeurs profondes. Le rayonnement α est constitué de particules lourdes chargées positivement, qui sont des noyaux d'hélium. Leur efficacité biologique est de l'ordre de 5 à 10 fois celles des rayons X et des photons γ, mais leur pénétration faible ne permet pas de les utiliser en clinique. Les protons, produits par des cyclotrons, sont adaptés au traitement de tumeurs profondes, de petites tailles. L'efficacité biologique des protons serait proche de celles des neutrons. Enfin, les ions légers, permettraient une pénétration tissulaire proche de celle des protons et présenteraient une efficacité biologique similaire à celle des neutrons.
Avantageusement les alkylsulfones de formules générales I, lia, Hb et III, sont telles que les groupes R] et R2 sont identiques, R3 et R4 sont identiques et m = n. De façon encore plus avantageuse, Ri = R2 = CH3. Avantageusement m = n = 4. De façon avantageuse R3 = R4 = H.
De façon encore plus avantageuse, il s'agit de la l,3-bis-(5-méthanesulfmylbutyl) thiourée, de la l-(5-méthanesulfinylbutyl)-3-(5-méthanesulfonylbutyl) thiourée, ou de la l,3-bis-(5-méthanesulfonylbutyl) thiourée de formules suivantes :
Figure imgf000010_0001
Figure imgf000011_0001
ou de leurs mélanges.
De façon encore plus avantageuse, il s'agit de la l,3-bis-(5-méthanesulfonylbutyl)
Figure imgf000011_0002
Les alkylsulfones selon la présente invention sont soit disponibles commercialement, soit peuvent être préparés, par exemple pour la l,3-bis(5-méthanesulfmylbutyl)- thiourée, par dégradation thermique du sulforaphane. En particulier les dérivés mono ou dioxydés peuvent être obtenus à partir de l'alkylsulfone non oxydée correspondante par action d'un agent oxydant tel que par exemple le peroxyde d'hydrogène.
De façon avantageuse, les alkylsulfones peuvent être présentes sous la forme d'isomères optiquement pures (de diastéréoisomères ou énantiomères) ou de mélanges racémiques, ou encore sous la forme de sels d'addition pharmaceutiquement acceptables. Dans le cadre de la présente invention, on entend par « isomères » des composés qui ont des formules moléculaires identiques mais qui diffèrent par l'agencement de leurs atomes dans l'espace. Les isomères qui diffèrent dans l'agencement de leurs atomes dans l'espace sont désignés par « stéréoisomères ». Les stéréoisomères qui ne sont pas des images dans un miroir l'un de l'autre sont désignés par « diastéréoisomères » et les stéréoisomères qui sont des images dans un miroir non superposables sont désignés par « énantiomères », ou quelque fois isomères optiques.
Un atome de carbone lié à quatre substituants non identiques est appelé «un centre chiral ».
On entend par « isomère chiral » un composé avec un centre chiral. Il comporte deux formes d'énantiomères de chiralité opposée et peut exister soit sous forme d'énantiomère individuelle, soit sous forme de mélanges d'énantiomères. Un mélange contenant des quantités égales de forme énantiomères individuelles de chiralité opposée est désigné par « mélange racémique ».
Dans la présente invention, on entend par « pharmaceutiquement acceptable » ce qui est utile dans la préparation d'une composition pharmaceutique qui est généralement sûr, non toxique et ni biologiquement ni autrement non souhaitable et qui est acceptable pour une utilisation vétérinaire de même que pharmaceutique humaine.
Au sens de la présente invention, on entend par « sels pharmaceutiquement acceptables » d'un composé signifie des sels qui sont pharmaceutiquement acceptables, comme définis ici, qui possèdent l'activité pharmacologique souhaitée du composé parent. De tels sels comprennent : (1) les sels d'addition d'acide formés avec des acides inorganiques tels que l'acide chlorhydrique, l'acide bromhydrique, l'acide sulfurique, l'acide nitrique, l'acide phosphorique et similaires, ou formés avec des acides organiques tels que l'acide acétique, l'acide benzènesulfonique, l'acide benzoïque, l'acide camphresulfonique, l'acide citrique, l'acide éthane-sulfonique, l'acide fumarique, l'acide glucoheptonique, l 'acide gluconique, l'acide glutamique, l'acide glycolique, l 'acide hydroxynaphtoïque, l'acide 2-hydroxyéthanesulfonique, l'acide lactique, l 'acide maléique, l'acide malique, l 'acide mandélique, l'acide méthanesulfonique, l'acide muconique, l 'acide 2- naphtalènesulfonique, l'acide propionique, l 'acide salicylique, l'acide succinique, l'acide dibenzoyl-L-tartrique, l'acide tartrique, l'acide p-toluènesulfonique, l 'acide triméthylacétique, l'acide trifluoroacétique et similaires ; ou
(2) les sels formés lorsqu'un proton acide présent dans le composé parent soit est remplacé par un ion métallique, par exemple un ion de métal alcalin, un ion de métal alcalino-terreux ou un ion d'aluminium ; soit se coordonne avec une base organique ou inorganique. Les bases organiques acceptables comprennent la diéthanolamine, l 'éthanolamine, la N-méthylglucamine, la triéthanolamine, la trométhamine et similaires. Les bases inorganiques acceptables comprennent l'hydroxyde d'aluminium, l'hydroxyde de calcium, l'hydroxyde de potassium, le carbonate de sodium et l'hydroxyde de sodium.
Les sels pharmaceutiquement acceptables préférés sont les sels formés à partir d'acide chlorhydrique, d'acide trifluoroacétique, d'acide dibenzoyl-L-tartrique et d'acide phosphorique.
Il devrait être compris que toutes les références aux sels pharmaceutiquement acceptables comprennent les formes d'addition de solvants (solvates) ou les formes cristallines (polymorphes) tels que définis ci-dessus, du même sel d'addition d'acide.
Avantageusement les un ou plusieurs agents chimiothérapeutiques sont choisis dans le groupe constitué par les agents d'alkylation, les agents à platine, les anthracyclines, les taxanes, les dérivés de stéroïde, les alcaloïdes de Vinca, les antimétabolites, l'adriamycine, la doxarubicine, l'étoposide, les dérivés d'arsenic, les agents intercalants, et les combinaisons de ceux-ci.
De façon avantageuse, les uns ou plusieurs agents chimiothérapeutiques sont choisis dans le groupe constitué par la cyclophosphamide, le cisplatine, la vinblastine, le carboplatine, le taxotère, le taxol, la vincristine et les combinaisons de ceux-ci.
De façon avantageuse, le médicament ou la composition pharmaceutique selon la présente invention se trouve sous une forme à usage orale, sublinguale ou topique ou sous forme injectable, en particulier intraveineuse, péritonéale, intramusculaire, transdermique ou sous-cutanée. Cette composition ou médicament peut être formulé pour l'administration aux mammifères, y compris l'homme. La posologie varie selon le traitement et selon l'affection en cause.
Dans ces compositions pharmaceutiques ou médicaments selon la présente invention le ou les ingrédients actifs peuvent être administrés sous formes unitaires d'administration, en mélange avec des supports pharmaceutiques classiques, aux animaux ou aux êtres humains. Les formes unitaires d'administration appropriées comprennent les formes par voie orale telles que les comprimés, les gélules, les poudres, les granules et les solutions ou suspensions orales, les formes d'administration sublinguale et buccale, les formes d'administration sous-cutanée, intramusculaire ou intraveineuse
Lorsque l'on prépare une composition solide sous forme de comprimés, on mélange l'ingrédient actif principal avec un véhicule pharmaceutique tel que la gélatine, l'amidon, le lactose, le stéarate de magnésium, le talc, la gomme arabique ou analogues. On peut enrober les comprimés de saccharose ou d'autres matières appropriées ou encore on peut les traiter de telle sorte qu'ils aient une activité prolongée ou retardée et qu'ils libèrent d'une façon continue une quantité prédéterminée de principe actif, On obtient une préparation en gélules en mélangeant l'ingrédient actif avec un diluant et en versant le mélange obtenu dans des gélules molles ou dures.
Une préparation sous forme de sirop ou d'élixir peut contenir l'ingrédient actif conjointement avec un édulcorant, un antiseptique, ainsi qu'un agent donnant du goût et un colorant approprié. Les poudres ou les granules dispersibles dans l'eau peuvent contenir l'ingrédient actif en mélange avec des agents de dispersion ou des agents mouillants, ou des agents de mise en suspension, de même qu'avec des correcteurs du goût ou des édulcorants. Pour une administration parentéral ou intraveineuse, on utilise des suspensions aqueuses, des solutions salines isotoniques ou des solutions stériles et injectables qui contiennent des agents de dispersion et/ou des agents mouillants pharmacologiquement compatibles.
Le principe actif peut être formulé également sous forme de microcapsules, nanocapsules ou de liposomes ou autres formes vectorisées éventuellement avec un ou plusieurs supports additifs.
Les alkylsulfones selon la présente invention possède la propriété d'être amphiphiles ce qui leur confère la capacité très importante de s'intégrer et d'agir au cœur de la membrane cellulaire, de celle du noyau et des mitochondries. Cela va concourir à stabiliser ces membranes lors des atteintes par les agents génotoxiques faisant contribuer ainsi ces thiourée à l'homéostasie cellulaire comme cela est le cas pour des molécules comme les dextrans (cytoplasmique) ou la silymarine (membranaire).
La présente invention sera mieux comprise en référence aux figures et aux exemples suivants donnés à titre indicatif non limitatif. La figure 1 représente la courbe du pourcentage de viabilité des cellules normales par rapport à la concentration en MMS en mM et la régression linéaire qui en résulte.
La figure 2 représente la courbe du pourcentage de viabilité des cellules cancéreuses par rapport à la concentration en MMS en mM et la régression linéaire qui en résulte.
La figure 3 représente la courbe du pourcentage de viabilité des cellules normales par rapport à la concentration en MMS en mM en présence de 0,1 mM de bis (MSoBT) et la régression linéaire qui en résulte.
La figure 4 représente la courbe du pourcentage de viabilité des cellules cancéreuses par rapport à la concentration en MMS en mM en présence de 0,1 mM de bis (MSoBT) et la régression linéaire qui en résulte. La figure 5 représente la comparaison des courbes des figures 1 et 3.
La figure 6 représente la comparaison des courbes des figures 2 et 4.
Exemple 1 : Synthèse de Ia l,3-bis-(5-méthanesulfinyIbutyI)-thiourée à partir du sulforaphane
Synthèse du (D,L)-sulforaphane :
On dissout 40 g de 4-chlorobutyronitrile (réf. Aldrich C 3,000-0) dans 800 ml d'alcool éthylique absolu préalablement distillé sur sodium.
On ajoute ensuite 27 g de méthane thioate (réf. Fluka 71742) et on laisse sous agitation à 250C pendant 15 heures. La suspension est filtrée sur papier et évaporée sous pression réduite. On reprend par 400 ml d'éther éthylique. On filtre à nouveau sur papier. On obtient une solution éthérée contenant 32 g de 4-méthylthiobutyronitrile brut. On prépare une suspension de 25 g d'hydrure de lithium-aluminium dans 400 ml d'éther éthylique. On ajoute progressivement la solution de 4-méthylthiobutyronitrile à la suspension d'hydrure de lithium-aluminium, puis on porte à reflux pendant 2 h 30. • La suspension est ensuite neutralisée en ajoutant lentement et sous reflux 80 ml d'eau distillée. Quand l'ébullition cesse, on ajoute ensuite 120 ml d'eau distillée pour achever la neutralisation de Phydrure restant. On filtre sur verre fritte. L'insoluble est lavé sur le filtre par 200 ml d'éther éthylique. Les fractions éthérées sont réunies et évaporées à sec. On obtient 26,9 g de méthylthiobutylamine. On reprend le produit obtenu par 80 ml d'acétone à laquelle on ajoute petit à petit 23 ml de peroxyde d'hydrogène à 35 %. On place une nuit au bain-marie à 50°C. On ajoute ensuite un peu de charbon actif, on filtre et on ajoute lentement 200 ml de chloroforme contenant 20 ml de thiophosgène, puis 300 ml d'une solution aqueuse d'hydroxyde de sodium à 5 %. On laisse agir 30 min.
On extrait ensuite le mélange à contre-courant par 8 fois 200 ml de dichlorométhane. La phase organique est recueillie, séchées sur sulfate de sodium et évaporée. Le résidu est ensuite rectifié à 135 °C sous 7.10"2 Torr. On obtient 12,5 g de D,L- sulforaphane dont l'identité est vérifiée par spectrométrie de masse.
Synthèse de la l,3-bis-(5-méthanesulfmylbutyl)-thiourée : Les spectres infrarouges ont été obtenus sur un appareil Perkin-Elmer 1600 Fl IR (neat). Les spectres de RMN du proton et du carbone 13 ont été obtenus sur un appareil Brucker AM 200 SY à 200 MHz pour le proton, 50,3 MHz pour le carbone. Les déplacements chimiques sont indiqués en partie par million (ppm) par rapport au signal du chloroforme deutérié CDC13 à 7,25 ppm pour le proton et 76,9 ppm (raie centrale du deutériochloroforme) pour le carbone. Les spectres de masse ont été obtenus sur un appareil Normag/SIDAR V 2.3 par les techniques d'ionisation chimique (NH3) ou d'impact électronique. Chromatographie
Les réactions ont été suivies en chromatographie sur couche mince sur des plaques de type silice gel 60F 254 (Merck, Art. 7735). Réactifs et produits ont été visualisés en lumière UV puis par traitement avec une solution éthanolique à 10% d'acide phosphomolybdique suivi d'un chauffage.
Les Flash cliromatographies ont été effectuées sur gel de silice ICN 60, 230-400 mesh.
Distillation des solvants
L'éther éthylique et le THF ont été distillés sous azote sur sodium/benzophénone. Le cyclohexane, l'acétate d'éthyle et le méthanol utilisés pour les chiOmatographies ont été distillés avant emploi.
Méthode
Sous atmosphère inerte, 2g (11 mmol) de sulforaphane obtenu ci-dessus sont dilués dans 15 ml d'eau, puis la solution est portée à reflux pendant 24 heures, à l'abri de la lumière.
A température ambiante, la solution est concentrée sous pression réduite et le résidu est repris par du dichlorométhane pour être chromatographié sur une colonne de gel de silice (éluant : CH2Cl2/ CH3OH : 90 /10) pour conduire à 1,70 g (5 mmol) de l,3-bis-(5- méthanesulfinylbutyl)-thiourée (bis MSiBT) sous la forme d'une huile incolore, avec un rendement de 43%.
RMN 1H (300 MHz) : 6,45 (dl, 2H, NH), 3,53 (t. H, J = 6,0 Hz), 2.87 (m,- 4H), 2,65 (s,
6H), 1,78 (m, 8H).
RMN 13C (50,3 MHz) : 24,0 (CH2), 32,1 (CH2), 41,2 (CH2-CH2), 47,2 (CH3), 57,4
(CH2SO), C (IV) non observé. IR (v, cm-1) : 2176, 2096, 1140, 940 cm"1.
ICMS m/z : 312 (MH+).
Exemple 2 : Préparation de la l-(5-méthaaesulfinvIbutyi)-3-(5- méthanesulfonylbutvD-thiourée
L'oxydation d'un seul des deux atomes de soufre de la molécule de sulforaphane est obtenue en ne réalisant pas la réaction de l'exemple 1 de synthèse de la l,3-bis-(5- méthanesulfinylbutyl)-thiourée sous atmosphère inerte mais à l'air libre. Ig (5,5 mmol) de sulforaphane sont dilués dans 10 ml d'eau, puis la solution est portée aux reflux pendant 24 heures, à l'abri de la lumière.
A température ambiante, la solution est concentrée sous pression réduite et le résidu est repris par du dichlorométhane pour être chromatographié sur une colonne de gel de silice (éluant : CH2Cl2 / CH3OH : 90/10) pour conduire à 200mg de l-(5- méthanesulfmylbutyl)-3-(5-méthanesulfonylbutyl)-thiourée (MSBMSBT) sous la foπne d'une huile incolore, avec un rendement de 12%.
RMN 1H (300 MHz) : 6,55 (si, 2H, NH), 3,55 (t, 4H, CH2), 3,15 (t, 2H, SO2CH2), 2,80 (t, 2H, SOCH2), 2,60 (s, 3H, SOCH3), 2,90 (s, 3H, SO2CH3), 1,80-1,87 (m, 8H, CH2). RMN 13C (50,3 MHz) : 20,5 (CH2), 28,5 (CH2), 39,8 (CH3SO), 41,0 (CH3SO2), 43,5 (CH2-NH), 54,1 (CH2SO), 44,8 (CH2SO2), 183,35 (C-S). IR (v, cm-1) : 2176, 2096, 1140, 940 cm-1. ICMS m/z : 328 (MH+).
Exemple 3 : préparation de la l,3-bis-(5-méthanesuIfonyIbutvD thiourée à partir de l-isothiocyanato-4- méthylsulfonylbutane
1 g, (5 mmol) d'une solution de l-isothiocyanato-4-rnéthylsulfonylbutane dans 15 ml d'eau est porté à reflux pendant 3 heures. A température ambiante, la solution est concentrée sous pression réduite et le résidu purifié par recristallisation au méthanol pour conduire à 535 mg de la l,3-bis-(5-méthanesulfonylbutyl) thiourée (bis MSoBT) sous la forme d'un solide beige, soit un rendement de 40%.
RMN 1U (300 MHz) : 6,50 (si, H, NH), 3,55 (t, 4H, J = 6.0 Hz), 2,75 (t, 4H, SO2CH2),
2,60 (s. 6H, SO2CH3), 1,70-1,90 (m, 8H, CH2CH2).
RMN 13C (50,3 MHz) : 21,0 (CH2), 29,2 (CH2), 38,5 (CH3), 44,0 (CH2-NH), 53,9 (CH2SO), 182,6 (C=S).
IR (v, cm-1) : 2168, 2096, 1144, 930 cm"1.
ICMS m/z : 344 (MH+).
Point de fusion: 142 0C. Exemple 4 : préparation de la bis (MSoBT) à partir de la bis MSiBT
A une solution de bis MSiBT (1 g, 3 mmol) dans 10 ml d'acétone sont ajoutés lentement à O0C 0,70 ml (2,2 équiv., 6,6 mmol) de peroxyde d"hydrogène à 35%. Le milieu réactionnel est alors laissé évoluer à température ambiante pendant 40 heures. L'acétone est éliminée par évaporation sous vide. Le résidu aqueux est repris dans du chloroforme et la phase est directement piégée par du sulfate de sodium. La phase organique est concentrée sous vide et le résidu purifié par recristallisation au méthanol pour conduire à la bis MSoBT sous forme d'un solide beige avec un rendement de 30%.
Exemple 5 : Action de Ia bis (MSoBT) sur cellules cancéreuses et cellules normales contre le MMS.
Types cellulaires utilisés: Cellules saines : Détroit 551 réf ATCC: CCL-110
Cellules cancéreuses : COLO 829 réf ATCC : CRL-1974
Concentration en bis (MsoBT) : 0,1 mM
Gamme de concentration en MMS : 0,50 à 0,70 mM selon la série. Mesure : viabilité cellulaire (MTT test) mesurée en densité optique dans le visible. Nombre de séries : reproductibilité sur 3 à 5 séries indépendantes.
Protocole :
Les deux types cellulaires sont cultivés sur flasques dans leur milieu de culture respectif. A confluence, les cellules sont alors décollées, centrifugées et comptées pour être ensemencées sur plaques 96 puits à 6500 cellules par puit pour le type cellulaire normal CCL-110 et 12500 cellules par puit pour le type cellulaire cancéreux CRL-1974.
Le lendemain (J+ 1) et durant 24 heures, les deux types cellulaires sont mis en présence de MMS (Methyl methanesulfonate) à différentes concentrations avec ou sans ajout de bis (MSoBT) à 0,1 mM. Les concentrations en MMS ont été choisies parmi les concentrations ayant une cytotoxicité encadrant la DL50 sur les cellules. La cytotoxicité a été testée précédemment sur chaque type cellulaire avec le même principe que décrit ci-joint.
Après le traitement de 24 heures (J+3), les plaques sont rincées avec une solution saline tampon phosphate (Phosphate buffer saline PBS) pour éliminer le traitement et ensuite sont incubées pendant 3 heures avec une solution de MTT (bromure de Thiazolyl Blue Tetrazolium) à 5 mg/ml diluée au l/10'eme dans le milieu de culture correspondant à chaque type cellulaire.
Les plaques sont ensuite vidées et la coloration est révélée avec du diméthylsulfoxyde (DMSO). Après agitation, une lecture des densités optiques (DO) aux longueurs d'onde de 540 nm et de 690 nm est effectuée à l'aide d'un lecteur de plaques. La lecture de la DO à la longueur d'onde de 690 nm sert à mesurer le bruit de fond, elle est donc soustraite à la DO obtenue à 540 nm celle de la mesure de viabilité cellulaire.
Le pourcentage de viabilité cellulaire obtenu après le traitement par le MMS est comparé avec celui obtenu avec ajout de bis (MSoBT) pour mettre en évidence une possible action de la molécule bis (MSoBT).
Comportement sans induction des cellules normales Travail sur données brutes (DO) :
Figure imgf000020_0001
Toutes les études des effecteurs seront ramenées à 100% et indépendamment de chaque série. Comportement sans induction des cellules cancéreuses
Travail sur données brutes (DO) :
Figure imgf000021_0001
La variabilité de la viabilité cellulaire maximum des cellules cancéreuses est deux fois plus forte que celle des cellules normales. Toutes les études des effecteurs seront ramenées à 100% et indépendamment de chaque série. Nous pouvons noter que les valeurs des cellules cancéreuses sont minorées par rapport aux cellules normales. C'est l'expression de la caractéristique propre à chaque lignée.
Comportement avec la bis (MSoBT) des cellules normales
Travail sur données ramenées aux 100% des cellules sans inducteur (en %) :
Figure imgf000021_0002
D'après ces résultats, il n'y a pas de stimulation des cellules normales par la bis (MSoBT) à 0,I mM.
Comportement avec la bis (MSoBT) des cellules cancéreuses
Travail sur données ramenées aux 100% des cellules sans inducteur (en %) :
Figure imgf000021_0003
Comportement sous induction MMS des cellules normales
Travail sur données ramenées aux 100% des cellules sans inducteur (en % ; extraction des données principales sachant que d'autres mesures ont été réalisées) : Synthèse : 0,65 mM
Figure imgf000022_0001
Le MMS induit une réduction de la prolifération cellulaire dose dépendante sur cellules normales en suivant une fonction linéaire entre 0,50 et 0,65 mM (figure 1).
Comportement sous induction MMS des cellules cancéreuses Travail sur données ramenées aux 100% des cellules sans inducteur (en % ; extraction des données principales sachant que d'autres mesures ont été réalisées) : Synthèse : 0,65 raM
Moyenne 43,52
Ecart type 4,51 n=5
Synthèse : 0,60 niM
Moyenne 53,96
Ecart type 8,37 n=5
Synthèse : 0,50 mM
Moyenne 69,04
Ecart type 4,67 n==5
Le MMS induit une réduction de la prolifération cellulaire dose dépendante sur cellules cancéreuses en suivant une fonction linéaire entre 0,50 et 0,65 mM (figure 2).
Comportement en présence de la bis (MSoBT) sous induction MMS des cellules normales
Travail sur données ramenées aux 100% des cellules sans inducteur (en % ; extraction des données principales sachant que d'autres mesures ont été réalisées) :
Synthèse : 0,65 mM
Figure imgf000023_0001
Synthèse : 0,60 mM
Figure imgf000024_0001
Le MMS induit encore une réduction de la prolifération cellulaire dose dépendante en présence de la bis (MSoBT) à 0,1 mM sur cellules normales en suivant une fonction linéaire entre 0,50 et 0,65 mM (figure 3).
Comportement en présence de la bis (MSoBT) sous induction MMS des cellules cancéreuses
Travail sur données ramenées aux 100% des cellules sans inducteur (en % ; extraction des données principales sachant que d'autres mesures ont été réalisées) :
Synthèse : 0,65 mM
Figure imgf000024_0002
Synthèse : 0,50 mM
Figure imgf000025_0001
Le MMS induit encore une réduction de la prolifération cellulaire dose dépendante en présence de la bis (MSoBT) à 0,1 mM sur cellules cancéreuses en suivant une fonction linéaire entre 0,50 et 0,65 mM (figure 4).
Différence entre comportement avec la bis (MSoBT) sans induction MMS et sous induction MMS seule sur cellules normales.
Travail sur données ramenées aux 100% des cellules sans inducteur (en % ; extraction des données principales sachant que d'autres mesures ont été réalisées) : figure 5
Les cellules normales semblent être protégées par la molécule la bis (MSoBT) à 0,1 mM des attaques génotoxiques et cytotoxiques du MMS. Ce pourcentage de protection est estimé à : - +24% pour 0,50 mM de MMS ;
- +45% pour 0,60 mM de MMS ;
- +16% pour 0,65 mM de MMS ; soit une moyenne de 28% de protection.
Différence entre comportement avec la bis (MSoBT) sous induction MMS et sous induction MMS seule sur cellules cancéreuses
Travail sur données ramenées aux 100% des cellules sans inducteur (en % ; extraction des données principales sachant que d'autres mesures ont été réalisées) : figure 6
Les cellules cancéreuses ne semblent pas être protégées par la molécule la bis (MSoBT) à 0,1 mM des attaques génotoxiques et cytotoxiques du MMS. Le pourcentage de protection est estimé à :
- +1,4% pour 0,50 mM de MMS ;
- 0% pour 0,60 mM de MMS ;
- +9,3% pour 0,65 mM de MMS ; soit une moyenne de 3,6 % de protection.
En conclusion, la bis (MSoBT) ne stimule pas signifîcativement la prolifération des cellules étudiées.
Le MMS induit une réduction de la prolifération cellulaire dose dépendante sur cellules cancéreuses comme normales en suivant une fonction linéaire entre 0,50 et 0,65 mM.
Le MMS induit encore une réduction de la prolifération cellulaire dose dépendante en présence de bis (MSoBT) à 0,1 mM sur cellules cancéreuses comme normales en suivant une fonction linéaire entre 0,50 et 0,65 mM.
Les cellules normales sont protégées par la bis (MSoBT) des attaques génotoxiques et cytotoxiques du MMS présent entre 0,50 et 0,65 mM, soit un % de protection compris entre 16 % et 45 %.
Les cellules cancéreuses ne sont pas protégées par la bis (MSoBT) des attaques génotoxiques et cytotoxiques du MMS présent entre 0,50 et 0,65 mM.

Claims

REVENDICATIONS
1. Utilisation d'une alkylsulfone de formule générale I suivante
Figure imgf000027_0001
dans laquelle : n est un nombre entier compris entre 1 et 12, m est un nombre entier compris entre 1 et 12, Ri, R2, R3 et R4 représentent indépendamment l'un de l'autre un atome d'hydrogène, un groupe alkyle en Ci-C6 ou un groupe aryle, ou au moins un de ses dérivés mono ou dioxydés de formules générales lia, Hb et III suivantes :
Figure imgf000027_0002
Figure imgf000028_0001
III dans lesquels les Rj, R2, R3, R4, m et n sont tels que définis ci-dessus ou leurs mélanges, pour la fabrication d'un médicament destiné au traitement contre des toxicités associées aux rayonnements ionisants ou non ionisants, contre des toxicités associées à l'administration d'un ou plusieurs agents chimiothérapeutiques, à la protection ou à la réparation sélective des tissus sains chez un patient atteint de cancer recevant une thérapie par rayonnement et/ou une chimiothérapie avec un ou plusieurs agents chimiothérapeutiques, au traitement ou à la protection sélective des tissus sains contre les toxicités associées à une thérapie contre le cancer.
2. Utilisation d'une alkylsulfone de formule générale I suivante
Figure imgf000028_0002
dans laquelle : n est un nombre entier compris entre 1 et 12, m est un nombre entier compris entre 1 et 12,
Ri, R2, R3 et R4 représentent indépendamment l'un de l'autre un atome d'hydrogène, un groupe alkyle en C]-C6 ou un groupe aryle, ou au moins un de ses dérivés mono ou dioxydés de formules générales lia, Hb et III suivantes :
Figure imgf000029_0001
III dans lesquels les Ri, R2, R3, R4, m et n sont tels que définis ci-dessus ou leurs mélanges, en combinaison avec des rayonnements ionisants ou non ionisants pour la fabrication d'un médicament destiné au traitement du cancer.
3. Utilisation selon la revendication 1 ou 2 caractérisée en ce que les un ou plusieurs agents chimiothérapeutiques sont choisis dans le groupe constitué par les agents d'alkylation, les agents à platine, les anthracyclines, les taxanes, les dérivés de stéroïde, les alcaloïdes de Vinca, les antimétabolites, l'adriamycme, la doxarubicine, l'étoposide, les dérivés d'arsenic, les agents intercalants, et les combinaisons de ceux-ci.
4. Utilisation selon la revendication 2 caractérisée en ce que les uns ou plusieurs agents chimiothérapeutiques sont choisis dans le groupe constitué par la cyclophosphamide, le cisplatine, la vinblastine, le carboplatine, le taxotère, le taxol, la vincristine et les combinaisons de ceux-ci.
5. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 4 caractérisé en ce que les alkylsulfones sont choisis parmi la l,3-bis-(5-méthanesulfinylbutyl) thiourée, la l-(5- niéthanesulfinylbutyl)-3-(5-méthanesulfonylbutyl) thiourée, la l,3-bis-(5- méthanesulfonylbutyl) thiourée et leurs mélanges.
6. Composition pharmaceutique comprenant une alkylsulfone de formule générale I
Figure imgf000030_0001
dans laquelle : n est un nombre entier compris entre 1 et 12, m est un nombre entier compris entre 1 et 12,
Ri, R2, R3 et R4 représentent indépendamment l'un de l'autre un atome d'hydrogène, un groupe alkyle en Ci-C6 ou un groupe aryle, ou au moins un de ses dérivés mono ou dioxydés de formules générales lia, Hb et III suivantes :
Figure imgf000031_0001
III dans lesquels les R1, R2, R3, R4, m et n sont tels que définis ci-dessus ou leurs mélanges, et un ou plusieurs agents chimiothérapeutiques, comme produit de combinaison pour une utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps.
7. Composition selon la revendication 6 caractérisée en ce que les un ou plusieurs agents chimiothérapeutiques sont choisis dans le groupe constitué par les agents d'alkylation, les agents à platine, les anthracyclines, les taxanes, les dérivés de stéroïde, les alcaloïdes de Vinca, les antimétabolites, l'adriamycine, la doxarubicine, l'étoposide, les dérivés d'arsenic, les agents intercalants, et les combinaisons de ceux-ci.
8. Composition selon la revendication 7 caractérisée en ce que les uns ou plusieurs agents chimiothérapeutiques sont choisis dans le groupe constitué par la cyclophosphamide, le cisplatine, la vinblastine, le carboplatine, le taxol, le taxotère, la vincristine et les combinaisons de ceux-ci.
9. Composition selon l'une quelconque des revendications 6 à 8 utile en tant que médicament.
10. Composition selon la revendication 9 caractérisée en ce qu'elle est destinée au traitement du cancer.
11. Composition selon l'une quelconque des revendications 6 à 10 caractérisé en ce que les alkylsulfones sont choisis parmi la l,3-bis-(5-méthanesulfmylbutyl) thiourée, la 1- (5-méthanesulfînylbutyl)-3-(5-méthanesulfonylbutyl) thiourée, la l,3-bis-(5- méthanesulfonylbutyl) thiourée et leurs mélanges
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